一种香樟灵芝菌株L7402及其栽培方法

本发明属于生物，具体涉及一种香樟灵芝菌株l7402及其栽培方法。

背景技术：

1、灵芝在中医药领域已有两千多年的历史，被誉为“仙草”，并被正式收录于《中华人民共和国药典》。其含有丰富的生物活性成分，主要为三萜类化合物与多糖，这些成分具备显著的免疫调节、抗肿瘤、安神促睡眠以及抗炎活性。

2、karsten于1881年正式建立灵芝属（ganoderma p. karst.），该属是karsten依据形态特征划定的。donk于1948年建立灵芝科（ganodermataceae donk），该科的核心鉴别特征是具有带壁间支柱的双壁担孢子。当时该科仅包含两个属：灵芝属，菌盖表面具漆样光泽、担孢子顶端平截；以及假芝属（amauroderma murrill），担孢子球形至椭圆形，顶端无平截结构。在上述基础分类的前提下，steyaert检视了世界各地标本馆的标本，并整合亚洲、非洲、美洲等地区的分布数据，对灵芝属及其近缘类群开展了全面的分类修订工作。他发现传统归置于灵芝属的物种间存在显著的解剖学差异，据此建立了三个新属，即汉菲芝属（humphreya steyaert）、哈多芝属（haddowia steyaert）与马戈芝属（magodermasteyaert）。

3、尽管取得了这些进展，灵芝科（ganodermataceae）内部的分类学歧义仍因历史上的命名不一致以及对模式标本研究不足而持续存在。为解决这些问题并建立一个更具权威性的分类系统，moncalvo与ryvarden提出了一个以可靠且稳定的形态特征为核心的框架。该框架的基石是担孢子独特的双壁结构，即具有带色素的、表面饰以柱状或脊状纹饰的内孢壁，以及光滑、无色透明的外孢壁--这一特征被确立为该科的界定性特征。此外，菌盖皮层结构和菌丝系统也被用作其他重要的形态学特征。基于这一框架，灵芝科包含十四个被接受的属：假芝属（amauroderma）、小假芝属（amaurodermellus costa-rezende，drechsler-santos & góes-neto）、冠孢芝属（cristataspora robledo & costa-rezende）、孔孢芝属（foraminispora robledo，costa-rezende & drechsler-santos）、弗塔多芝属（furtadomyces leonardo-silva，cotrim & xavier-santos）、灵芝属（ganoderma）、哈多芝属（haddowia）、亨氏芝属（humphreya）、马戈芝属（magoderma）、新灵芝属（neoganoderma b.k. cui & y.f. sun）、血芝属（sanguinoderma y.f. sun，d.h. costa& b.k. cui）、华芝属（sinoganoderma b.k. cui，j.h. xing & y.f. sun）、汤姆灵芝属（tomophagus murrill）以及小糙皮芝属（trachydermella b.k. cui & y.f. sun）。

4、在这些属中，灵芝属（ganoderma）的特征为具柄或无柄的担子果，菌盖有漆光或无漆光；具三体型菌丝系统，由生殖菌丝、骨架菌丝和缠绕菌丝组成；担孢子椭圆形、顶端平截、褐色、非淀粉质。历史上，灵芝属的分类建立在形态特征基础之上，将该属划分为两个主要类群：以灵芝复合种（ganoderma lucidum (curtis) p. karst. complex）为代表的有漆光类群，以及以树舌复合种（ganoderma applanatum (pers.) pat. complex）为代表的无漆光类群。这两个划分分别相当于灵芝亚属（ganoderma）和树舌亚属（elfvingia p.karst.）。截至目前，index fungorum中有501条记录，mycobank中有573条记录。然而，这些记录中有相当数量后来被重新归类为异名，这一分类问题在灵芝属（ganoderma）和假芝属（amauroderma）中尤为突出。为解决这些分类歧义，可靠的分子与系统发育分析已确认存在191个有效的灵芝物种。目前在中国已认知的灵芝物种超过40种。

5、灵芝属（ganoderma）为喜中高温真菌，广泛分布于世界各大洲，在非洲、美洲、亚洲、欧洲和大洋洲的热带及温带地区均有野生种群。中国气候适宜、植被类型多样、物种丰富，垂直气候分异明显、生境多样，为野生灵芝的生长提供了优越条件，因此野生灵芝资源十分丰富。云南地处中国西南内陆，兼具低纬与高海拔的特点，生物多样性极高，野生灵芝资源尤为富集。基于此，研究者对云南灵芝属的多样性开展了深入调查，陆续报道了多个新种，包括高山灵芝（ganoderma alpinum b.k. cui，j.h. xing & y.f. sun）、楚雄灵芝（g.chuxiongense b.k. cui，j.h. xing & y.f. sun）、滇中灵芝（g. dianzhongense j. he，hong y. su & shu h. li）、普洱灵芝（g. puerense b.k. cui，j.h. xing & y.f. sun）、近狭孢灵芝（g. subangustisporum b.k. cui，j.h. xing & y.f. sun）和维西灵芝（g.weixiense karun. & j.c. xu）。

6、然而，在灵芝种质资源开发利用与人工栽培技术领域，现有技术仍存在以下显著不足：

7、（1）主栽品种单一且退化严重，缺乏突破性特异新种质资源：

8、目前我国实现规模化商业栽培的灵芝物种极为有限，绝大多数集中于赤芝和紫芝等少数传统物种。由于长期无性繁殖与连作栽培，现有主栽菌株普遍存在种性退化、遗传背景狭窄、抗逆抗杂菌能力减弱以及发菌活力衰退等问题。虽然云南等西南地区蕴藏着丰富的野生灵芝资源，但绝大多数野生特异性新物种仍处于野生未开发状态，亟待通过现代分类学鉴定、纯化复壮及系统驯化，发掘具有优良农艺性状与高药用价值的新物种菌株。

9、（2）传统品种活性物质含量趋于瓶颈，深加工与功能化开发受限：

10、随着现代医药及大健康产业对灵芝药效品质要求的不断提高，传统主栽灵芝品种在多糖、总三萜等核心药效活性成分积累上已难以实现大幅突破，且缺乏独特的次生代谢产物特征与风味品质，难以满足高附加值药物研发、特色保健品及功能性化妆品深度开发的需求。发掘并鉴定富含高活性药效成分、具备特异性代谢产物的灵芝属新种质，是突破当前灵芝产业同质化竞争的关键。

11、（3）野生新种驯化出菇难度大，缺乏适配的专用高产栽培工艺：

12、野生灵芝新物种往往具有特殊的生态适应性与生理营养偏好，直接采用传统赤芝的通用培养料配方（如常规阔叶树木屑或常规温光条件）进行代料栽培时，普遍存在菌丝萌发缓慢、长势稀疏、原基分化困难、子实体出菇不齐甚至畸形、生物转化率极低等技术瓶颈。目前针对野生香樟灵芝新物种，尚无系统明晰其营养需求、菌丝生物学特性及专属出菇管理参数的规模化人工栽培方法，严重阻碍了该特异新物种的产业化人工栽培与规模化推广应用。

13、因此，分离筛选出具有独立遗传背景、高活性成分的香樟灵芝新种菌株，并攻克其配套的专用培养基配方与人工高效栽培方法，对于丰富我国灵芝品种多样性、提高灵芝药用价值及推动特色食用菌产业高质量发展具有重大的现实意义与产业价值。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了解决现有技术的不足，提供一种香樟灵芝菌株l7402及其栽培方法。

2、为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

3、一种香樟灵芝菌株l7402，所述的香樟灵芝菌株l7402的分类命名为ganodermacamphorae，已于2026年8月11日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号gdmcc no：68815。

4、本发明同时提供上述香樟灵芝菌株l7402的栽培方法，包括如下步骤：

5、步骤（1），母种扩繁：无菌条件下，取香樟灵芝菌株l7402的组织块接种到母种pda培养基上，置于24℃-26℃培养箱恒温培养7-10d；

6、所述的母种pda培养基包括按照重量份数计的如下原料：琼脂15-17份、葡萄糖19-21份、马铃薯淀粉4.5-5.5份、酵母粉1.9-2.1份、硫酸铵1.9-2.1份、磷酸二氢钾0.19-0.21份、氯化钙0.19-0.21份，蒸馏水990-1010份；

7、步骤（2），原种制备：取步骤（1）培养好的母种接种至原种培养瓶中，置于22℃-25℃培养室恒温暗培养25-30d，得到原种；

8、所述的原种培养瓶中的原种培养基包括按照重量份数计的如下原料：杂木屑19-21份，荞麦粒68-72份，麸皮7.5-8.5份，蔗糖0.9-1.1份，石膏粉0.9-1.1份；ph值7-8，含水量55-60%；

9、步骤（3），栽培种制备：将步骤（2）培养好的原种接种到栽培种容器中，置于22℃-25℃培养室恒温暗培养35-40d，待菌丝体长满栽培种容器后，得到栽培种；

10、所述的栽培种容器中的栽培种培养料包括按照重量份数计的如下原料：木屑76-78份，麦麸14.5-15.5份，豆粕4.8-5.2份，石膏0.9-1.1份，白糖0.9-1.1份，石灰0.9-1.1份；ph值7-8，含水量55-60%；

11、步骤（4），栽培袋接种：将栽培种转接入栽培袋中，置于22℃-25℃、空气相对湿度60%-70%的培养室恒温培养40-45d，培养至菌丝体长满料袋；

12、所述的栽培袋中的栽培料包括按照重量份数计的如下原料：阔叶树木屑76-80份，麦麸19-21份，石膏粉0.9-1.1份，石灰粉0.9-1.1份；ph值8-9，含水量55-60%；

13、步骤（5），覆土栽培：待步骤（4）栽培袋菌丝长满后，将其运输至栽培基地，在遮荫条件下继续后熟7-10d，然后小孔开袋斜45°覆土种植；待菌盖边缘白色生长圈消失时，进行子实体采收。

14、进一步，步骤（4）中，栽培袋的规格为17cm×35cm×0.05mm。

15、进一步，步骤（5）中，栽培基地为设施大棚（温度可控、相对密闭）、遮阴棚（遮光率70%-80%、通风度高）或林下。

16、进一步，步骤（5）中，栽培袋摆袋时袋间距保持10-15cm，覆土厚度为3-5cm。

17、进一步，步骤（5）中，覆土后种植68-72d，即能进行采收。

18、进一步，步骤（5）中，出芝管理包括催蕾阶段、子实体生长阶段和子实体成熟阶段；

19、催蕾阶段，温度控制在22℃-26℃；空气相对湿度85%-90%；光照强度1000-2000lx；

20、子实体生长阶段，温度22℃-26℃，空气相对湿度80%-95%，光照强度1000-2000lx；

21、子实体成熟阶段，温度24℃-28℃，空气相对湿度75%-85%，光照强度1000-2000lx。

22、本发明基于采自中国云南省的一份野生灵芝标本及其分离纯化获得的菌株l7402，确证并发表灵芝属的一个新种--香樟灵芝。结合宏观与微观形态学特征证据，以及基于内转录间隔区（its）、细胞核核糖体大亚基基因（nrlsu）、翻译延伸因子1-α（tef1-α）和rna聚合酶ii第二大亚基（rpb2）序列数据开展的多位点系统发育分析，证实该菌株所代表的标本为灵芝属一个未被描述的独立新分类群，本发明对其进行系统描述。系统发育分析结果显示，该菌株与灵芝属已知种形成独立的分支支系，分支支持度极高（最大似然法自举支持率99%/贝叶斯后验概率0.99）。形态学层面香樟灵芝菌株l7402子实体的核心鉴别特征如下：担子果无柄、呈扇形；菌盖具漆样光泽，颜色为褐色至红棕色，表面具同心环带与放射状皱褶；菌肉呈木栓质，内部分布有黑色类黑色素线；菌盖皮层为壳状子实层型。担子呈卵圆形至近球形，无色、薄壁，具2-4个小梗，大小为17-21×11-16µm；幼担子形态与担子相近，同样为无色薄壁结构，大小范围为11-20×7-15µm；担孢子呈卵圆形至倒卵圆形，顶端平截，大小为9.1-12.4×6.5-8.8μm。

23、本发明获以下项目资助：“兴滇英才计划”产业创新人才李树红培养项目、林下特色食药用菌种植关键技术研究及应用（jtst-hbs-kyxm-2026-01）以及农业联合专项（编号：202301bd070001-021）。

24、本发明与现有技术相比，其有益效果为：

25、（1）突破了传统主栽灵芝种质同质化与退化瓶颈，发掘并确立了具有自主知识产权的灵芝新物种优质种质资源：本发明从云南野生资源中分离纯化获得香樟灵芝新物种菌株l7402，通过形态学特征与its、nrlsu、tef1-α、rpb2 4个基因联合的多位点分子系统发育分析，证实其属于灵芝属一个未被报道的独立新分类群。该菌株遗传背景独立、发菌活力旺盛且不易退化，极大地丰富了我国珍稀野生灵芝种质资源库，为灵芝优良品种选育提供了极具突破性的亲本材料与核心战略种质；

26、（2）克服了野生新种驯化出菇难、转化率低的缺陷，建立了香樟灵芝专属的高效规模化人工栽培技术体系：针对野生香樟灵芝菌丝生理营养需求及原基分化特性，本发明优化筛选出专属培养基配方与温湿度、光照、通风及覆土出菇管理规程，显著提高了菌丝生长速率与原基诱导率，有效解决了野生灵芝直接人工驯化时发菌慢、出菇不齐、畸形率高及生物学转化率低的技术瓶颈，实现了香樟灵芝的高整齐度出菇与高产稳产，为该新物种的产业化规模栽培与示范推广提供了标准化工艺保障；

27、（3）赋予了产品特异的生物活性与次生代谢产物特征，拓展了高品质灵芝产品的药用与深加工应用价值：采用本发明方法栽培获得的香樟灵芝子实体不仅形态规整、肉质厚实、漆样光泽饱满，且富含高浓度的多糖、特异性三萜类化合物，在体外抗氧化、免疫调节或抗炎等生物活性方面表现出突出优势，显著优于普通市售常规灵芝，具有极高的药用、功能性保健食品及大健康深加工开发与利用价值。