一种改善糖尿病心肌病的黄精发酵物及其制备方法和应用

本发明属于中药发酵，具体涉及一种黄精发酵物的制备方法及应用。

背景技术：

1、糖尿病心肌病（dcm）是由糖尿病引起心肌结构破坏和功能衰竭的疾病，以心肌纤维化、心室舒张功能障碍及心肌细胞代谢紊乱为主要病理特征。随着糖尿病患病率持续升高，dcm病死率也随之逐年升高。然而，单纯强化血糖控制并不能完全降低心血管事件的发生风险，现代医学尚缺乏针对dcm的特异性靶向治疗策略。因此，开发安全有效且适于长期应用的dcm防治策略，已成为糖尿病并发症研究领域的重要方向。

2、黄精为百合科植物滇黄精、黄精或多花黄精的干燥根茎，味甘、性平，归脾、肺、肾经，具有补气养阴、健脾润肺益肾之功效，2002年被纳入我国首批药食同源目录。现代药理学研究表明，黄精富含多糖、皂苷、黄酮等活性成分，具有抗氧化、抗炎、调节免疫、降血糖、降血脂及心血管保护等多重药理作用，并且黄精多糖（psp）能显著改善糖尿病大鼠的糖脂代谢、保护心功能、延缓心肌纤维化，其作用机制与抑制nlrp3/caspase-1/gsdmd信号通路介导的心肌细胞焦亡密切相关，表明黄精在dcm防治方面具有明确的药效基础和良好的开发前景。

3、发酵技术作为中药炮制现代化的重要途径，近年来在药食同源中药材的深度开发中受到广泛关注。微生物发酵可通过生物转化改变中药的化学成分组成，提高活性成分的溶出率和生物利用度，同时降低毒性、改善口感。已有研究探索了植物乳杆菌等益生菌发酵对黄精抗氧化、降血糖等活性的影响，但在发酵黄精改善dcm作用方面的研究还较少。因此，开发一种改善糖尿病心肌病的黄精发酵物，对发酵黄精在dcm防治中的应用具有重要意义。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种黄精发酵物的制备方法及应用。本发明通过筛选适宜的发酵菌种及发酵工艺，制备得到具有心肌细胞保护作用的黄精发酵物，可用于防治糖尿病心肌病。

2、为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、第一方面，本发明提供一种黄精发酵物的制备方法。

4、所述黄精发酵物的制备方法，包括如下步骤：

5、（1）将黄精洗净干燥粉碎后加入蒸馏水，高压灭菌，得到药材培养基；

6、（2）将鼠李糖乳杆菌种子液接种至上述药材培养基中；

7、（3）发酵结束后，将发酵液离心，收集上清液，即得黄精发酵物。

8、优选的，所述步骤(1)中黄精药材为滇黄精、黄精或多花黄精的干燥根，所述药材培养基中黄精与蒸馏水比质量为1:1～1:20，高压灭菌条件为121℃灭菌20～30分钟。

9、优选的，所述步骤(2)中鼠李糖乳杆菌种子液的制备方法为：将鼠李糖乳杆菌接种于mrs培养基中，35～37℃震荡培养，使活菌数达到1.0×109 cfu/ml以上。

10、优选的，所述鼠李糖乳杆菌种子液的接种量为所述提取液体积的3%～5%，发酵温度为35～38℃，摇床转速为140～180 r/min，发酵时间为3～4天。

11、优选的，所述步骤(3)离心条件为12000 r/min离心15～20分钟。

12、优选的，所述mrs培养基配方为：蛋白胨10.0 g/l、牛肉膏5.0 g/l、酵母浸膏4.0g/l、葡萄糖20.0 g/l、磷酸氢二钾2.0 g/l、柠檬酸三铵2.0 g/l、乙酸钠5.0 g/l、硫酸镁0.2 g/l、硫酸锰0.05 g/l、吐温80 1.0 g/l。

13、第二方面，本发明提供一种黄精发酵物，所述发酵物由本发明第一方面所述的方法制备得到。

14、第三方面，本发明提供上述黄精发酵物在制备治疗糖尿病心肌病药物中的应用。

15、优选的，将含黄精发酵物作为活性成分，加入药学上可接受的辅料，制备成口服制剂，用于治疗糖尿病心肌病；所述口服制剂包括散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液。

16、第四方面，本发明提供上述黄精发酵物在制备改善糖尿病心肌病功能性产品中的应用。

17、优选的，将黄精发酵物作为主要成分，加入食品上可接受的辅料，制备成功能性食品，用于改善糖尿病心肌病；所述功能性食品包括固体饮料、液体饮料、压片糖果、软胶囊、硬胶囊、颗粒剂、口服液。

18、与现有技术相比，本发明的优点和有益效果为：

19、(1) 本发明通过比较鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌、戊糖片球菌及发酵粘液乳杆菌五种菌的发酵效果，筛选发现鼠李糖乳杆菌发酵黄精提取物对高糖损伤ac16细胞的保护作用最优。

20、(2) 本发明通过单因素试验考察发酵时间、料液比对发酵产物心肌细胞保护作用的影响，确定发酵时间4天、料液比为1:5时，发酵物对高糖损伤ac16细胞的保护效果最优。

21、(3) 本发明制备的黄精发酵物富含薯蓣皂苷元，对高糖诱导的心肌细胞损伤具有显著的保护作用，可应用于制备防治糖尿病心肌病的药物或功能性食品，具有广阔的应用前景。

1.一种黄精发酵物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述药材培养基中料液比为1:1～1:20。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌种子液的接种量为所述药材培养基体积的3%～5%，发酵温度为35～38℃，摇床转速为140～180 r/min，发酵时间为3～4天。

4.根据权利要求1所述的黄精发酵物的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中鼠李糖乳杆菌种子液的制备方法为：将鼠李糖乳杆菌接种于mrs培养基中，37℃摇床培养，使活菌数达到1.0×109 cfu/ml以上。

5.权利要求1所述的黄精发酵物在制备预防或治疗糖尿病心肌病的药物或功能食品。