一种用于水产动物保肝利胆的发酵中药制剂及制备方法与流程

本发明涉及水产动物疾病防治领域，具体涉及一种用于水产动物保肝利胆的发酵中药制剂及制备方法。

背景技术：

1、随着现代农业的发展和科技的进步，水产养殖业取得了迅猛发展。然而，高密度集约化养殖模式导致养殖水体环境日趋恶化，水产病害频繁发生，其中肝胆疾病已成为制约养殖效益的关键问题，主要表现为肝脂肪变性、胆囊肿大、代谢功能障碍等，严重损害水产动物健康生长。肝胆作为重要的代谢及造血器官，其状态直接影响到机体的免疫力及生长性能。目前，针对水产动物肝胆疾病的防治主要采用化学药物，长期使用会导致耐药性增强、药物残留污染水体、降低水产品营养价值甚至危害人类的健康。

2、中药因其天然、低毒、无残留等特点，在水产动物病害防治中展现出良好的应用前景。传统保肝利胆中药（如茵陈、柴胡、黄芩等）虽具有清热解毒、疏肝利胆的功效，但单一中药成分存在作用靶点有限、生物利用度较低等问题。而现有复方制剂通过复配多种中药组分提升疗效，但仍面临活性成分释放不足、调控靶点单一等问题，因此开发一种集中药活性成分高效释放、多靶点调控于一体的发酵中药制剂，对推动水产绿色养殖具有重要意义。

技术实现思路

1、（一）解决的技术问题

2、针对现有技术的不足，本发明提供了一种用于水产动物保肝利胆的发酵中药制剂及制备方法。

3、（二）技术方案

4、为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：

5、本发明提供一种用于水产动物保肝利胆的发酵中药制剂，所述发酵中药制剂由以下重量份数的中药原料制成：龙胆草15-35份，茵陈蒿12-32份，垂盆草10-30份，半边莲8-28份，当药5-25份，石斛3-22份，白芍3-20份，绞股蓝3-20份，枸杞子3-20份，黄精4-22份。

6、优选地，所述发酵中药制剂由以下重量份数的中药原料制成：龙胆草20-30份，茵陈蒿17-27份，垂盆草15-25份，半边莲13-23份，当药10-20份，石斛7-17份，白芍5-15份，绞股蓝3-13份，枸杞子5-15份，黄精7-17份。

7、优选地，所述发酵中药制剂由以下重量份数的中药原料制成：龙胆草25份，茵陈蒿22份，垂盆草20份，半边莲18份，当药15份，石斛12份，白芍10份，绞股蓝8份，枸杞子10份，黄精12份。

8、进一步地，所述发酵中药制剂还包括占中药原料重量比15%-25%的碱性蛋白酶，15%-30%的酿酒酵母菌液，3%-15%的地衣芽孢杆菌菌液。

9、进一步地，所述发酵中药制剂还包括占中药原料重量比20%的碱性蛋白酶，22%的酿酒酵母菌液，10%的地衣芽孢杆菌菌液。

10、本发明提供了所述发酵中药制剂的制备方法，包括以下步骤：

11、（1）按照上述重量份数称取各中药原料，经清洗、干燥后，粉碎过100目筛，将所得药粉与4-8质量倍去离子水混合，搅拌形成均质混悬液；

12、（2）向混悬液中加入碱性蛋白酶，调节ph值至6.5-7.5，在40-45℃下进行酶解反应4-6 h，反应结束后过滤，收集酶解液；

13、（3）菌种活化：将酿酒酵母在麦芽汁液体培养基中30℃震荡培养24 h，地衣芽孢杆菌在lb液体培养基中37℃震荡培养12 h，得到酿酒酵母菌液和地衣芽孢杆菌菌液，菌种浓度均≥1×108 cfu/ml；

14、（4）向酶解液中补充2wt%葡萄糖和1.5wt%蛋白胨作为发酵基质，按照上述重量比接种酿酒酵母菌液和地衣芽孢杆菌液进行发酵，控制发酵温度在30-35℃，ph值维持在5.5-6.5，进行5-7 d的厌氧/微氧发酵，将发酵液过滤、减压浓缩后进行喷雾干燥制粒即得本发明发酵中药制剂。

15、本发明提供了所述发酵中药制剂在制备用于水产动物保肝利胆药物中的应用。

16、本发明发酵中药制剂中各中药原料的药理作用如下：

17、龙胆草：味苦，性寒，归肺、肝经；具有清热化痰、止咳平喘、解毒利湿、凉血止血的功效；用于肺热咳嗽，痰多气喘，咽痛，口疮，湿热黄疸，衄血，便血，崩漏，外伤出血。

18、茵陈蒿：味苦、辛，性微寒，归脾、胃、肝、胆经；具有清热利湿、退黄的功效；用于湿热黄疸，小便不利，传染性黄疸型肝炎，风痒疮疥。

19、垂盆草：味甘、淡，性凉，归肝、胆、小肠经；具有利湿退黄、清热解毒的功效；用于湿热黄疸，小便不利，痈肿疮疡。

20、半边莲：味辛，性平，归心、小肠、肺经；具有清热解毒、利尿消肿的功效；用于痈肿疔疮，蛇虫咬伤，臌胀水肿，湿热黄疸，湿疹湿疮。

21、当药：味苦，性寒，归肝、胃、大肠经；具有清湿热、健胃的功效；用于湿热黄疸，胁痛，痢疾腹痛，食欲不振。

22、石斛：味甘，性微寒，归胃、肾经；具有益胃生津、滋阴清热的功效；用于热病津伤，口干烦渴，胃阴不足，食少干呕，病后虚热不退，阴虚火旺，骨蒸劳热，目暗不明，筋骨痿软。

23、白芍：味苦、酸，性微寒，归肝、脾经；具有养血调经、敛阴止汗、柔肝止痛、平抑肝阳的功效；用于血虚萎黄，月经不调，自汗，盗汗，胁痛，腹痛，四肢挛痛，头痛眩晕。

24、绞股蓝：味苦、微甘，性凉，归肺、脾、肾经；具有清热解毒、补虚的功效；用于体虚乏力，虚劳失精，白细胞减少症，高脂血症，病毒性肝炎，慢性胃肠炎，慢性气管炎。

25、枸杞子：味甘，性平，归肝、肾经；具有滋补肝肾、益精明目的功效；用于虚劳精亏，腰膝酸痛，眩晕耳鸣，阳痿遗精，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明。

26、黄精：味甘，性平，归脾、肺、肾经；具有补气养阴、健脾、润肺、益肾的功效；用于脾胃气虚，体倦乏力，胃阴不足，口干食少，肺虚燥咳，劳嗽咳血，精血不足，腰膝酸软，须发早白，内热消渴。

27、（三）有益效果

28、本发明提供了一种用于水产动物保肝利胆的发酵中药制剂及制备方法，所述发酵中药制剂由龙胆草、茵陈蒿、垂盆草、半边莲、当药、石斛、白芍、绞股蓝、枸杞子、黄精十味中药制成，通过科学配伍发挥协同效应；同时添加碱性蛋白酶以促进消化吸收，减轻肝脏负担，并配以酿酒酵母、地衣芽孢杆菌改善肠道微生态环境。

29、体外肝细胞保护试验结果表明，本发明发酵中药制剂中的中药原料可降低hepg2细胞上清液中alt、ast含量以及细胞裂解液中mda含量，升高sod活性和t-aoc水平，从而抑制tgf-β诱导的氧化应激反应，有效恢复肝细胞抗氧化防御系统功能，发挥肝保护作用。

30、本发明通过菌酶协同发酵技术对中药原料进行优化处理，显著提升中药活性成分的生物利用度，促进机体有效吸收，同时维护肠道微生态平衡，进一步增强其保肝利胆的综合效果。花鲈鱼体内试验结果表明，本发明发酵中药制剂可显著降低花鲈鱼血清中alt、ast、tba、tbil含量，同时提升肝脏组织匀浆中sod活性并增加cat、gsh-px、t-aoc含量，降低mda含量，从而更有效缓解由d-galn/lps诱导的肝脏脂质过氧化，此外，本发明发酵中药制剂还可促进胆汁分泌，减轻胆汁淤积，为水产养殖业提供了一种兼具保肝和利胆双重功效的发酵中药制剂。