双硫仑在制备治疗神经元蜡样脂褐质沉积症药物中的应用

本发明属于医药领域，具体涉及双硫仑在制备治疗神经元蜡样脂褐质沉积症药物中的应用。

背景技术：

1、双硫仑（disulfiram，化学名称：二硫化四乙基秋兰姆，分子式：c10h20n2s4，分子量：296.54），是经美国食品药品监督管理局（fda）批准上市的戒酒药物，其已知作用机制主要为抑制体内酒精代谢过程中的乙醛脱氢酶，使饮酒后体内乙醛大量蓄积，产生恶心、呕吐、心悸等不适反应，从而达到戒酒效果；该产品现有剂型主要为口服片剂，常见规格为250mg/片，已广泛应用于酒精依赖症的临床治疗，安全性已得到长期临床验证，可通过常规商业渠道获取（也被称为antabuse，常见生产厂家如odyssey pharmaceuticals andnorwich pharmaceuticals等；fda approval no. nda 007883等）。

2、神经元蜡样脂褐质沉积症（neuronal ceroid lipofuscinosis，ncl），具体包括cln14型、cln2型等亚型；其中cln14型由kctd7基因缺失引起，属于致死性溶酶体沉积症，同时伴随进行性肌阵挛癫痫（pme3亚型）症状；cln2型则由tpp1基因缺陷导致，同样表现为进行性肌阵挛癫痫及神经系统进行性损伤。目前，针对cln14型、cln2型等神经元蜡样脂褐质沉积症尚无特效治疗药物，临床现有治疗方法仅为对症治疗（如使用抗癫痫药物缓解癫痫发作、或酶替代疗法，价格昂贵），无法阻断疾病进展，且长期使用传统抗癫痫药物易产生耐药性及毒副作用。

技术实现思路

1、目前针对神经元蜡样脂褐质沉积症，尤其是kctd7缺失或cln2缺陷导致的该症，尚无临床获批治疗药物，亟需发现其核心发病机制并开发安全有效的治疗手段。

2、本发明所提供的技术方案如下：

3、双硫仑（disulfiram）在制备治疗神经元蜡样脂褐质沉积症（neuronal ceroidlipofuscinosis, ncl）药物中的应用。具体的，所述的神经元蜡样脂褐质沉积症包括cln14型和/或cln2型。更具体的，所述的cln14型是由

kctd7基因缺失引起的；所述的cln2型是由

tpp1基因缺陷导致的。我们原创性的发现双硫仑具有的新性质，其可特异性抑制神经元焦亡通路，具体通过抑制gsdmd蛋白n端剪切体在细胞膜表面聚集形成孔洞，阻断焦亡，保护了神经元，最终改善cln14型、cln2型等的临床症状（如肌阵挛发作频率、持续时间等）；该新性质区别于其已知的“抑制酒精代谢”的药理作用，且该新性质已通过脑类器官、小鼠模型验证，证实其可有效改善该类疾病的神经系统损伤及神经异常放电等症状。

4、本发明还提供了双硫仑用于制备用于治疗cln14型、cln2型等ncl的药物组合物。具体的：

5、关于剂型：结合神经系统疾病的给药特点及双硫仑的理化性质，本技术所述药剂的剂型优选为口服剂型（如片剂、胶囊剂、混悬剂）、注射剂型（如静脉注射剂、鞘内注射剂）或鼻腔给药剂型（如鼻喷雾剂）；其中口服片剂规格优选为100mg/片、250mg/片，鞘内注射剂规格优选为5mg/支、10mg/支，可根据使用对象的年龄、体重及病情严重程度调整剂型及规格。

6、关于使用方法、使用对象及使用条件：

7、①使用对象：确诊为cln14型（kctd7基因缺失所致）、cln2型（tpp1基因缺陷所致）ncl的患者，包括儿童、青少年及成人；优先适用于伴随神经元焦亡（gsdmd蛋白及其剪切体异常升高）的患者。

8、②使用方法：口服剂型：成人常规剂量为每日1-2次，每次250mg，儿童根据体重调整为每日5-10mg/kg，分2次服用，空腹或饭后服用均可；鞘内注射剂：每周1次，每次5-10mg，根据患者神经功能及ncl症状改善情况调整剂量；鼻喷雾剂：每日3次，每次1-2喷（每喷含双硫仑5mg），直接鼻腔给药。

9、更具体的药剂制备：取双硫仑原料100g，加入淀粉50g、乳糖30g、硬脂酸镁2g，混合均匀后，采用常规压片工艺，压制成100mg/片的口服片剂，每片含双硫仑100mg。

10、③使用条件：用药期间需监测患者的肝肾功能、血常规及神经异常发作情况，避免与酒精同服（防止出现乙醛蓄积反应）；对于肝肾功能轻度不全的患者，需减半剂量，严重肝肾功能不全者禁用；孕妇及哺乳期妇女慎用，如确需使用，需评估用药获益大于风险后使用。

11、关于纯度：双硫仑在该药剂中的纯度≥98%（药用级纯度），无明显杂质干扰，符合《美国药典-国家处方集》（usp 45-nf 40）或《中国药典》（2020年版）中双硫仑的质量标准，确保其药理活性及用药安全性。

12、本发明还提供了：

13、非磷酸化stat1抑制剂或gsdmd抑制剂在制备用于治疗神经元蜡样脂褐质沉积症药物中的用途。

14、一种筛选用于治疗神经元蜡样脂褐质沉积症候选药物的方法，其特征在于，包括将候选物质与表达 stat1蛋白或gsdmd蛋白的生物模型接触，并检测所述候选物质对非磷酸化stat1表达或gsdmd蛋白剪切的抑制作用 。

15、一种辅助诊断神经元蜡样脂褐质沉积症的试剂盒，其特征在于，包含检测生物样本中stat1蛋白水平或gsdmd蛋白n端剪切体水平的检测试剂 。

16、本发明原创发现神经元蜡样脂褐质沉积症的核心发病机制与神经元焦亡密切相关，具体为kctd7缺失或cln2缺陷导致stat1蛋白异常升高（非磷酸化形式介导的非经典通路），进而上调gsdmd蛋白及其剪切体表达，引发神经元焦亡，最终导致神经系统损伤，在此基础上，开发出双硫仑这一安全有效的治疗手段。

17、本发明具备诸多有益效果：

18、1. 老药新用，安全性有保障：双硫仑为fda批准上市的戒酒药，已通过长期临床验证，其药理特性、毒副作用及安全剂量明确，相较于全新研发的药物，可大幅降低研发风险及安全性验证成本，患者用药依从性更高，不易出现严重不良反应。

19、2. 治疗效果显著，针对性强：该药剂可特异性作用于ncl的核心发病机制（神经元焦亡），通过抑制kctd7-stat1-gsdmd调控轴，从根源上阻断神经元损伤，不仅能改善ncl相关神经异常表现等症状，还能改善患者认知及运动功能，延缓疾病进展，且适用于cln14型、cln2型等多种亚型，适用范围广。

20、3. 成本低，便于产业化生产：双硫仑的合成工艺成熟，原料易得，生产技术难度低，相较于全新药物，其生产成本大幅降低；同时，其剂型（口服、注射、鼻腔给药）均可采用常规制药工艺制备，无需特殊设备，便于大规模产业化生产，可满足临床大规模应用需求。

21、4. 给药方式灵活，适用人群广：提供多种剂型及规格，可根据患者的年龄（儿童、青少年、成人）、体重、病情严重程度及给药便利性，选择口服、注射或鼻腔给药，尤其适用于吞咽困难或无法配合口服给药的患者（如重度认知障碍的ncl患者）。

22、5. 无明显毒副作用，耐受性好：通过脑类器官、小鼠等模型验证，双硫仑在治疗剂量范围内，对肝功能、血常规无明显影响，无明显毒副作用，患者可长期使用，耐受性良好；同时，其与临床常用药物无明显相互作用，便于联合用药（如与其他神经保护类药物协同治疗）。