一种负载亚麻籽环肽纳米微球乳液的制备方法

本发明属于化妆品，具体涉及一种通过超临界流体技术制备负载亚麻籽环肽的纳米微球的方法及应用。

背景技术：

1、亚麻籽环肽是亚麻籽特有的天然疏水性环肽，仅存在于亚麻籽及根茎中，为其脂质伴随物；该肽由8-9个α-氨基酸与部分稀有非蛋白氨基酸首尾连接成环，分子量约960～1100 da，目前已从亚麻籽油中分离鉴定出超20种亚型，其生物活性与氨基酸序列高度相关—— 环肽 a、b、j 可抑制皮肤炎症因子释放，修复受损皮肤屏障；环肽a、j、c、e 能清除活性氧自由基，减少氧化应激损伤，保护胶原蛋白、弹性蛋白不被降解，延缓皮肤老化；环肽a、b 还具备免疫调节作用，可增强皮肤对外界刺激的抵抗力，是极具开发价值的天然抗衰化合物。目前，高纯度亚麻籽环肽的高效制备与相关单一亚型分离已可通过现有制备与分离技术实现，为其化妆品应用提供了坚实的原料支撑，但该类环肽的自身结构特性仍使其面临两大核心技术瓶颈，需依赖高效载体开发与制备突破：

2、其一，透皮吸收效率受限。亚麻籽环肽为典型的疏水性均环结构，分子内部疏水基团密集排列，且分子量处于960～1100 da 的临界透皮区间，难以自主突破皮肤角质层的脂质双分子层屏障，导致人体皮肤细胞对其实际吸收量有限，大部分活性成分仅停留在皮肤表面，无法深入真皮层发挥深层抗衰功效；

3、其二，稳定性有待强化。已发现的亚麻籽环肽中，除环肽 a 外，多数含1-2个蛋氨酸残基，该残基是其抗氧化活性的核心位点，但对氧化反应高度敏感。在环肽的加工、运输储存及化妆品制剂、货架期内，蛋氨酸易被氧化生成蛋氨酸亚砜，若氧化持续加剧还会形成蛋氨酸砜，不仅导致环肽的抗氧化、抗炎活性显著衰减，还会改变其极性与疏水性，进一步降低透皮吸收效率。尽管亚麻籽油中天然提取的环肽极少出现深度氧化，按蛋氨酸氧化纯度可分为天然蛋氨酸型（抗氧化活性更优，为化妆品抗衰优选亚型）与蛋氨酸亚砜型，但单纯依赖原料提纯工艺难以从根本上规避氧化风险。

4、上述问题均源于亚麻籽环肽的固有结构特性，无法通过优化提取工艺彻底解决，载体技术成为释放其抗衰潜力的关键：通过载体对亚麻籽环肽进行靶向包裹与递送优化，一方面可构建物理防护屏障，隔绝外界氧气与氧化诱因，稳定蛋氨酸残基的天然结构，最大限度保留其抗衰活性；另一方面能精准改善环肽的疏水性与界面相容性，帮助其高效突破角质层屏障，显著提升皮肤细胞对环肽的吸收量，让活性成分深入皮肤深层发挥功效。

5、现有技术对亚麻籽环肽的包埋效率较低，且粒径偏大和分布较宽，不利于改善亚麻籽环肽的递送或生物活性提升。此外，亚麻籽环肽的溶解度较差也极大限制了包埋技术和壁材的选择。因此，针对以上缺点需要进一步进行相关研究和改进。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术的至少一个不足，提供一种负载亚麻籽环肽纳米微球乳液的制备方法

2、本发明所采取的技术方案是：

3、第一个方面，本发明提供一种负载亚麻籽环肽纳米微球乳液的制备方法，所述纳米微球呈核壳结构，包括由亚麻籽环肽颗粒聚集形成的内核，以及包覆在所述内核外部的聚合物外壳，包括以下步骤：

4、1）使用超临界二氧化碳流体作为溶剂，将亚麻籽环肽、壁材壳聚糖以及辅料聚甘油异硬脂酸酯溶解，所述亚麻籽环肽、所述壁材与所述辅料的质量比为（1-2）：（15-18）:（0.1-0.2），形成均匀的混合体系；

5、2）将步骤1）所述混合体系喷射雾化；

6、3）将雾化的液滴通入水相溶液中进行液相捕集，得到负载亚麻籽环肽纳米微球乳液。

7、可选的，所述壳聚糖的脱乙酰度为85%-95%；和/或所述壳聚糖是分子量为100-300kda的直链壳聚糖。

8、可选的，所述步骤1中的亚麻籽环肽为分子量介于960-1100 da之间的天然环状疏水性肽。

9、可选的，所述步骤1中形成均匀的混合体系的压力为20-40 mpa、温度为25-45 ℃。

10、可选的，所述聚甘油异硬脂酸酯的分子主链由8-14个甘油单元构成，且所述主链上分布有8-14条疏水酰基侧链。

11、可选的，所述疏水酰基侧链的c链长度为6～12。

12、可选的，所述聚甘油异硬脂酸酯选自聚甘油-8十异硬脂酸酯、聚甘油-10十异硬脂酸酯、聚甘油-12十二异硬脂酸酯和聚甘油-14十异硬脂酸酯中的至少一种。

13、可选的，所述步骤3中的水相溶液为质量分数0-60%乙醇/甲醇水溶液，或ph值5.4-7.4缓冲液，或者去离子水。

14、可选的，所述步骤3中雾化的液滴的始液滴直径≤5 μm。

15、第二个方面，本发明第一个方面提供的制备方法制备负载亚麻籽环肽纳米微球乳液的在制备化妆品添加剂中的应用。

16、本发明的有益效果是：

17、本发明一些实例亚麻籽环肽载药微球的制备方法，通过超临界流体可通过调控温度、压力精准改变溶质溶解性能的特性，针对性解决了现有亚麻籽环肽载药微球制备过程中存在的有机溶剂残留、微球成型差、载药率低、药物活性易流失、工艺稳定性差、难以规模化生产等技术短板，相较于传统制备工艺具备多方面突出优势。

18、本发明一些实例亚麻籽环肽载药微球的制备方法，巧妙利用聚甘油异硬脂肪酸酯作为两亲功能性助剂，分子骨架羟基可与壳聚糖形成分子间相互作用，疏水的异硬脂酰侧链能够吸附亚麻籽环肽并诱导其成核，降低两相界面张力，驱动微球自发组装，显著提升亚麻籽环肽包封率，有效抑制微球颗粒团聚。主体壁材与功能性辅料复配后可协同发挥载药作用，弥补单一材料性能短板，制得结构稳定、递送性能优异的复合载体体系。

19、本发明一些实例制备的亚麻籽环肽载药微球乳液，其中的微球平均粒径介于20～40 nm之间，稳定性好，可以在水相体系中均匀分散，透皮吸收率高，添加在化妆品中可以更好地发挥亚麻籽环肽的活性，显著提高亚麻籽的附加值。

1.一种负载亚麻籽环肽纳米微球乳液的制备方法，其特征在于，所述纳米微球呈核壳结构，包括由亚麻籽环肽颗粒聚集形成的内核，以及包覆在所述内核外部的聚合物外壳，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述壳聚糖的脱乙酰度为85%-95%；和/或所述壳聚糖是分子量为100-300 kda的直链壳聚糖。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1中的亚麻籽环肽为分子量介于960-1100 da之间的天然环状疏水性肽。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1中形成均匀的混合体系的压力为20-40 mpa、温度为25-45 ℃。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述聚甘油异硬脂酸酯的分子主链由8-14个甘油单元构成，且所述主链上分布有8-14条疏水酰基侧链。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在倍半萜类化合物在制备调控滑膜细胞药物中的应用于，所述疏水酰基侧链的c链长度为6～12。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述聚甘油异硬脂酸酯选自聚甘油-8十异硬脂酸酯、聚甘油-10十异硬脂酸酯、聚甘油-12十二异硬脂酸酯和聚甘油-14十异硬脂酸酯中的至少一种。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3中的水相溶液为质量分数0-60%乙醇/甲醇水溶液，或ph值5.4-7.4缓冲液，或者去离子水。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3中雾化的液滴的始液滴直径≤5 μm。

10.权利要求1～9任一项所述制备方法制备的负载亚麻籽环肽纳米微球乳液作为化妆品添加剂的应用。