雌激素受体α抑制剂在制备治疗犬乳腺肿瘤的药物中的应用

本发明属于生物医药，具体地，本发明涉及雌激素受体α抑制剂在制备治疗犬乳腺肿瘤的药物中的应用。

背景技术：

1、雌激素是影响乳腺肿瘤发生发展的一个重要因素，雌二醇(e2)作为一种重要的内源性雌激素，能够激活雌激素受体(er)并调节多种生理过程，研究表明持续暴露于雌二醇会增加患乳腺癌、子宫内膜癌和卵巢癌的风险，雌二醇能够诱导乳腺上皮细胞的转化为肿瘤细胞，并促进其迁移和侵袭。e2作用的雌激素受体包括erα和erβ，其中erα主要在乳腺肿瘤细胞中表达。e2可以通过核受体er与雌激素响应元件(ere)区域结合，从而促进erα基因的转录和表达。过往对人的各类癌症的研究表明，即使是同一分子分型，不同癌细胞在其主要受体被激动后也可能有相反的调控作用。

2、乳腺肿瘤是犬最常发的肿瘤性疾病之一，在犬中，erα对犬乳腺癌细胞的调控机制及作用还未有体外研究。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述缺陷和不足，提供一种雌激素受体α抑制剂在制备治疗犬乳腺肿瘤的药物中的应用。

2、本发明的第二个目的在于提供雌激素受体α促进剂在制备犬乳腺肿瘤的模型中的应用。

3、本发明的上述目的是通过以下技术方案给予实现的：

4、雌激素受体α(erα)作为细胞存活、增殖和肿瘤生长相关基因的转录因子，对于恶性乳腺肿瘤细胞的生长具有重要作用。在乳腺肿瘤患犬中，erα基因和蛋白表达也均高于正常乳腺组织。在乳腺肿瘤中，目前研究的主流观点认为erα抑制细胞自噬流。有研究发现雌激素受体降解剂可以促进乳腺癌细胞的自噬－溶酶体途径并导致erα的降解，自噬诱导剂可促进erα的降解，但在氯喹(cq)及3－甲基腺嘌呤(3-ma)存在的情况下，自噬被抑制，erα表达水平则得以保持稳定，这些结果表明，促进自噬可促进erα蛋白的降解，从而抑制乳腺肿瘤细胞发展。因此，erα的表达调控具有重要的潜在药物及临床治疗指导价值。

5、本发明采用chmp犬乳腺肿瘤细胞(er过表达型犬乳腺肿瘤细胞系)作为细胞模型，不同浓度、不同时间雌二醇处理chmp，通过cck-8实验检测细胞增殖能力，通过细胞划痕检测细胞迁移能力，通过qpcr检测验证雌二醇对犬乳腺肿瘤细胞的上皮-间质转化的影响，结果表明雌二醇可以促进chmp犬乳腺肿瘤细胞的增殖、迁移、上皮-间质转化的能力；随后通过自噬调节剂处理chmp细胞系，发现促进细胞自噬可以促进erα降解；最后对erα进行敲低，发现在添加雌二醇处理的敲低雌激素受体αchmp细胞系中，细胞的增殖、迁移和未添加雌二醇的处理相一致，即erα敲除可以抑制雌二醇对chmp犬乳腺肿瘤细胞的促进作用。因此，本发明针对犬乳腺肿瘤中雌激素受体α与自噬调节剂之间的调控机制探索雌激素受体α在调控犬乳腺癌中的潜在应用具有重要意义。

6、因此，本发明提供雌激素受体α抑制剂在制备治疗犬乳腺肿瘤的药物中的应用。

7、进一步地，所述雌激素受体α抑制剂为抗雌激素药物、雌激素受体降解剂、自噬诱导剂、干扰rna中的一种或多种。

8、抗雌激素药物可显著减少体内雌激素的水平，抑制雌激素的分泌，阻断雌激素与受体的正常结合，抑制下游基因表达，因此，可对犬乳腺肿瘤起到一定的治疗作用；雌激素受体降解剂可下调雌激素受体α的表达，抑制犬乳腺肿瘤细胞的增殖、迁移；自噬诱导剂可通过促进细胞自噬，下调雌激素受体α的水平；干扰rna可直接下调雌激素受体α的水平。

9、进一步地，所述药物为通过降低肿瘤细胞的增殖、迁移或上皮-间质转化来实现的。

10、进一步地，所述抗雌激素药物为芳香酶抑制剂、促性腺激素释放激素类似物。

11、进一步地，所述自噬诱导剂为雷帕霉素、依维莫司、f-12(ham)nutrient mixture或mg132。

12、进一步地，所述干扰rna为sirna2或sirna3；所述sirna2、sirna3的核苷酸序列如seq id no.2～3所示。

13、进一步地，所述药物还包括药物学上可接受的载体。

14、本发明还提供雌激素受体α促进剂在制备犬乳腺肿瘤的模型中的应用。

15、进一步地，所述雌激素受体α促进剂为自噬抑制剂或包含编码雌激素受体α的核苷酸序列载体、细胞系中的一种或多种。

16、更进一步地，所述自噬抑制剂为前期抑制剂ly294002(蛋白激酶抑制剂)和后期抑制剂氯喹(chloroquine)。

17、进一步地，所述乳腺肿瘤为雌激素受体阳性乳腺癌。

18、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

19、本发明提供了雌激素受体α抑制剂在制备治疗犬乳腺肿瘤的药物中的应用。本发明研究发现，雌二醇可以促进chmp犬乳腺肿瘤细胞的增殖、迁移或上皮-间质转化的能力；随后通过自噬调节剂处理chmp细胞系，发现促进细胞自噬可以促进erα降解；最后对erα进行敲低，发现在添加雌二醇处理的敲低雌激素受体αchmp细胞系中，细胞的增殖、迁移和未添加雌二醇的处理相一致，即erα敲除可以抑制雌二醇对chmp犬乳腺肿瘤细胞的促进作用。因此，本发明提供了雌激素受体α抑制剂在制备治疗犬乳腺肿瘤的药物中的应用，为利用雌激素受体α与自噬调节剂之间的调控机制研发新的治疗犬乳腺肿瘤的药物具有重要意义。

1.雌激素受体α抑制剂在制备治疗犬乳腺肿瘤的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述雌激素受体α抑制剂为抗雌激素药物、雌激素受体降解剂、自噬诱导剂、干扰rna中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述药物为通过降低肿瘤细胞的增殖、迁移或上皮-间质转化来实现的。

4.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述抗雌激素药物为芳香酶抑制剂、促性腺激素释放激素类似物。

5.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述自噬诱导剂为雷帕霉素、依维莫司、f-12(ham)nutrient mixture或mg132。

6.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述干扰rna为sirna2或sirna3；所述sirna2、sirna3的核苷酸序列如seq id no.2～3所示。

7.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述药物还包括药物学上可接受的载体。

8.雌激素受体α促进剂在制备犬乳腺肿瘤模型中的应用。

9.根据权利要求8所述应用，其特征在于，所述雌激素受体α促进剂为自噬抑制剂或包含编码雌激素受体α的核苷酸序列载体、细胞系中的一种或多种。

10.根据权利要求1或8任一所述应用，其特征在于，所述乳腺肿瘤为雌激素受体阳性乳腺癌。