一种山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料及其制备方法和应用

本发明属于纳米医学与生物医药材料，尤其涉及一种山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料及其制备方法和应用。

背景技术：

1、顺铂是临床广泛使用的一线化疗药物，但其严重的肾毒性反应极大地限制了其临床应用。顺铂诱导的肾损伤机制复杂，其中氧化应激与炎症反应在其发生发展中起核心作用——顺铂在肾小管上皮细胞中蓄积后诱发过量活性氧产生，进而激活炎症通路，导致肾小管上皮细胞损伤与凋亡。因此，开发能够同时清除活性氧并抑制炎症反应的防治策略，对于减轻顺铂肾毒性具有重要意义。

2、目前，铂基纳米材料因其优异的类酶活性和活性氧清除能力，已被研究用于急性肾损伤的治疗。然而，现有铂基纳米材料缺乏天然的肾脏靶向能力，难以高效富集于损伤部位，且单纯依靠铂纳米颗粒的活性氧清除作用，难以协同调控损伤肾脏的免疫微环境。另一方面，植物来源的纳米囊泡富含多种天然活性成分，具有抗炎和组织修复等生物活性，在肾脏保护领域展现出潜力，但单用时的抗氧化效力有限，难以有效对抗顺铂所致严重氧化损伤。

3、目前，尚未见将铂纳米簇与植物源纳米囊泡联合用于顺铂诱导急性肾损伤治疗以及其构成的复合材料的相关报道。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料及其制备方法和应用，以解决上述问题。

2、为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

3、一种山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料，包括山药源纳米囊泡以及包覆于所述山药源纳米囊泡内部的介孔铂纳米簇。

4、优选的，所述山药源纳米囊泡由包括以下步骤的方法提取得到：

5、取去皮新鲜铁棍山药切块后低温破碎榨汁，过滤去除固体残渣后收集滤液；

6、将所述滤液依次进行4000×g、5000×g、10000×g的差速离心，收集终末上清液；

7、将所述终末上清液经200000×g超速离心，收集沉淀；

8、将所述沉淀以蔗糖密度梯度超速离心，收集富含囊泡的中间层组分，经稀释和再次超速离心，即得所述山药源纳米囊泡。

9、优选的，所述介孔铂纳米簇由铂初级颗粒有序组装而成，所述铂初级颗粒的粒径为3~4 nm。

10、优选的，所述介孔铂纳米簇由包括以下步骤的方法制备得到：

11、以四氯化铂为铂源、抗坏血酸为还原剂、pluronic f127为模板剂，在避光、惰性气体保护条件下于36.5-37.5℃静置反应12-18小时，得到铂初级颗粒有序组装的介孔铂纳米簇；

12、所述介孔铂纳米簇经无水乙醇和超纯水离心洗涤后，分散于超纯水中。

13、优选的，所述介孔铂纳米簇的流体力学平均粒径为200~280 nm，所述山药源纳米囊泡的流体力学平均粒径为100~150 nm，所述复合纳米材料的流体力学平均粒径大于所述介孔铂纳米簇的流体力学平均粒径。

14、优选的，所述山药源纳米囊泡的zeta电位为-26.93±0.45 mv，所述复合纳米材料的zeta电位介于介孔铂纳米簇的zeta电位与山药源纳米囊泡的zeta电位之间。

15、一种所述山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料的制备方法，包括：将介孔铂纳米簇与山药源纳米囊泡按照质量比100-140:1的比例混合均匀，于2-8℃条件下避光孵育过夜，使所述介孔铂纳米簇自组装包覆于所述山药源纳米囊泡内部，即得所述复合纳米材料。

16、一种所述的山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料在制备用于清除活性氧的药物中的应用。

17、一种所述的山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料在制备用于抑制促炎因子表达的药物中的应用。

18、一种所述的山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料在制备用于缓解顺铂诱导的急性肾损伤的药物中的应用。

19、与现有技术相比，本发明具有如下优点和技术效果：

20、本发明将介孔铂纳米簇负载于山药源纳米囊泡内部，所得复合纳米材料兼具高效活性氧清除能力、抗炎活性及免疫微环境调控功能，能够通过逆转巨噬细胞m1/m2极化、抑制促炎因子表达和清除胞内过量活性氧的多层次协同机制，有效缓解顺铂诱导的急性肾损伤。同时，本发明制备工艺温和，无需引入有毒交联剂，生物安全性高，为铂基纳米材料的肾脏靶向递送提供了新型天然载体平台。

21、综上，本发明提供了一种结构明确、制备工艺温和、兼具抗氧化与免疫调控功能的山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料及其制备方法和应用。

1.一种山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料，其特征在于，包括山药源纳米囊泡以及包覆于所述山药源纳米囊泡内部的介孔铂纳米簇。

2.根据权利要求1所述的一种山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料，其特征在于，所述山药源纳米囊泡由包括以下步骤的方法提取得到：

3.根据权利要求1所述的一种山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料，其特征在于：所述介孔铂纳米簇由铂初级颗粒有序组装而成，所述铂初级颗粒的粒径为3~4 nm。

4.根据权利要求1所述的一种山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料，其特征在于：所述介孔铂纳米簇由包括以下步骤的方法制备得到：

5.根据权利要求1所述的一种山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料，其特征在于：所述介孔铂纳米簇的流体力学平均粒径为200~280 nm，所述山药源纳米囊泡的流体力学平均粒径为100~150 nm，所述复合纳米材料的流体力学平均粒径大于所述介孔铂纳米簇的流体力学平均粒径。

6.根据权利要求1所述的一种山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料，其特征在于：所述山药源纳米囊泡的zeta电位为-26.93±0.45 mv，所述复合纳米材料的zeta电位介于介孔铂纳米簇的zeta电位与山药源纳米囊泡的zeta电位之间。

7.一种如权利要求1-6中任一项所述的山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料的制备方法，其特征在于，包括：将介孔铂纳米簇与山药源纳米囊泡按照质量比100-140:1的比例混合均匀，于2-8℃条件下避光孵育过夜，使所述介孔铂纳米簇自组装包覆于所述山药源纳米囊泡内部，即得所述复合纳米材料。

8.一种如权利要求1-6任一项所述的山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料在制备用于清除活性氧的药物中的应用。

9.一种如权利要求1-6任一项所述的山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料在制备用于抑制促炎因子表达的药物中的应用。

10.一种如权利要求1-6任一项所述的山药外泌体-铂纳米簇复合纳米材料在制备用于缓解顺铂诱导的急性肾损伤的药物中的应用。