电泳和电转移装置、系统和方法与流程
本发明一般涉及可执行对生物分子的电泳和电转移两者的系统。本发明进一步涉及电泳系统、电泳装置、电转移系统和电转移装置。还描述了使用这些系统和装置进行电泳和电转移的方法。
背景技术:
1、电泳是一种常用的根据诸如核酸、dna、rna、多肽和蛋白质等生物分子(biological molecule/biomolecule) 的大小和电荷进行分离的方法。在凝胶电泳中,生物分子可通过电场分离成条带,电场使分子迁移通过过滤基质。典型的过滤基质包括凝胶。电泳盒包括过滤基质(诸如凝胶)板条,该板条夹在两个玻璃板或塑料板之间。凝胶具有开放的分子网络结构,其限定了用包含盐的导电缓冲溶液饱和的孔隙。这些孔足够大,使得生物分子能够响应于电场而迁移通过凝胶。对于电泳,可使用若干类型的凝胶,诸如但不限于聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶和淀粉凝胶。
2、在电泳期间,凝胶(在预铸或自铸电泳盒中)通常装载含有生物分子和示踪染料的样品,并被放置在具有阴极和阳极的腔室中,阴极和阳极与缓冲溶液接触,使得当连接到电源时,能够跨凝胶形成电场。由此生成的电场被跨凝胶施加,并由一端的负电荷和另一端的正电荷组成,导致样品生物分子和示踪染料彼此分离并向凝胶底部迁移。在相关生物分子到达凝胶末端之前,电泳停止。
3、电泳分离的生物分子通常从分离凝胶转移到另一种材料上,以便对生物分子进行另外的分析,诸如但不限于免疫学表征、化学反应、定量等。电转印或电转移是本领域已知的用于将解析的或分离的生物分子从凝胶转移到另一种材料上的方法
。
4、在电转移中,在生物分子电泳分离后,将含有分离的生物分子的电泳凝胶放置成与相对薄的材料或载体接触。该材料通常是多孔材料,诸如但不限于基于硝化纤维素的膜、基于 pvdf 的膜、活化纸、活化尼龙膜等。将缓冲液加入到电转移装置中,并使电流以大体垂直于转印膜表面的方向通过夹在中间的凝胶和印迹膜。这导致部分或大部分生物分子从凝胶电泳转移到多孔材料。
5、现有的电泳或电转移的系统、装置和方法要求每个程序有单独的系统和装置。例如,对于电泳而言,凝胶盒、保持凝胶盒和电泳缓冲液的凝胶罐以及支持电连接的电极是所需的多个独立装备中的一些。对于电转移,需要电转移叠堆件、电极、容纳叠堆件和电转移缓冲液的容器以及电连接。每个程序都有多个耗时的步骤,需要不同的装备组。此外,现有的电泳系统经常存在使用了大量缓冲液的问题,诸如缓冲液溢流和/或缓冲液从阳极缓冲液贮存器和阴极缓冲液贮存器溢出和/或泄漏。本领域的湿式电转移系统也存在类似的问题,包括缓冲液溢出、和/或组装和运行期间的缓冲液泄漏、叠堆件组装期间的大量缓冲液的使用和浪费等。湿式电转移系统也经常生成大量的危险废物,诸如通常含有甲醇或其他危险物质的废物转移缓冲液
。本领域需要更好的凝胶电泳和电转移装置、系统和方法。
技术实现思路
1、本文描述的系统、装置和方法解决了本领域中的几个问题。在一些实施例中,本文描述的系统、装置和方法通过提供可用于凝胶电泳和电转移两者的单个系统来解决本领域的问题。在一些实施例中,本文描述的系统、装置和方法通过提供无泄漏凝胶电泳和/或电转移装置和系统来解决本领域的问题。在一些实施例中,本文描述的系统、装置和方法通过提供用于电泳和/或电转移的增加的吞吐量、较低的缓冲体积要求和液体危险废物的减少的体积来解决本领域的问题。
2、在一个实施例中,一种用于凝胶电泳和电转移的系统包括至少一个腔室、一个隔室、一个容器或一个部件,其可以可拆卸地和可互换地接纳电泳盒或电转移盒,并且可为生物分子的电泳和电转移两者提供电接口。
3、在一个实施例中,该系统具有至少两个腔室以允许在两个或更多个凝胶或转移膜上并行处理生物分子的电泳和/或电转移。
4、在一些实施例中,本发明的系统可包括两个或更多个腔室,以使得多个凝胶/基质/膜/材料能够同时进行电泳分离和/或同时进行电转移。
5、虽然本发明中的大多数实施例以两个腔室的非限制性示例进行描述,但本教导可扩展到一个腔室,或者扩展到多于两个腔室,该两个腔室与彼此相邻地放置以增加吞吐量。在一些实施例中,本发明的系统中的至少两个腔室可背靠背、或并排、或彼此相邻布置,或可串联布置,或可彼此相邻,或者彼此相邻放置,或可叠堆,或者可一个在另一个上方竖直叠堆,或对角地接合,或一个腔室在另一腔室的上方,另一腔室在另一腔室后面竖直叠堆和交错,和/或一个或两个腔室以一定角度相对彼此倾斜。
6、一些实施例描述了可放置到本发明的系统中的凝胶电泳盒和夹持系统,其中该系统可执行凝胶电泳和电转移。一些实施例描述了可放置到本发明的系统中的各种电转移盒,其中该系统可执行凝胶电泳和电转移两者。
7、本发明的系统、装置、盒和方法有利地产生前述一项或多项:包括:一种用于电泳和电转移的系统;同时在两种或更多种凝胶或转移膜中进行高通量电泳和/或生物分子电转移的能力;与现有的用于电泳和电转移的系统和装置相比,设备或部件的数量的减少、成本的降低、配件的减少、所需装备的占地面积的减少、系统和装置的储存空间的减少、缓冲区溢出的减少、泄漏的减少、缓冲区溢出的减少或不溢出、缓冲区使用量的减少以及液体危险废物的减少。与一些现有的用于电泳或电转移的装置和系统相比,本发明的用于电泳和电转移的系统和装置通过不需要使用冷却缓冲液或冷冻冰袋来降低使用期间的温度而减少了准备工作。在一些实施例中,本发明的装置和系统使用较低的电压和功率。
8、在一个实施例中,本发明描述了一种系统,该系统包括至少一个腔室或一个隔室,该腔室或隔室构造成接纳电泳盒或电转移盒。该系统进一步包括电极和电连接件,该电极和电连接件可连接到电源以提供与腔室的电连接性,用于促进电泳盒或放置在腔室内的电转移盒中的电泳或电转移。
9、在一些实施例中,本发明的系统包括至少两个腔室,其中每个腔室独立地构造成接纳电泳盒或电转移盒、第一电极和第二电极。
10、在一些实施例中,本发明的系统包括:至少两个腔室,每个室独立地构造成接纳电泳盒或电转移盒;第一电极;以及第二电极,其中电极具有电接口,该电接口可连接到外部电源或内部电源。在一些实施例中,第一电极和第二电极在每个腔室中具有接口,使得每个腔室具有阳极和阴极。
11、在一些实施例中,第一电极跨越两个腔室或具有跨越两个腔室并且构造成电接触位于电转移盒上的电接口的接口。在一些实施例中,第一电极具有进入每个腔室的电延伸部,该电延伸部在电泳期间用作阳极。
12、在一些实施例中,第二电极具有构造成接触位于电转移盒上的第二电极接口的延伸部。在一些实施例中,第二电极跨越两个腔室或具有跨越两个腔室并且构造成电接触位于电转移盒上的电接口的接口。在一些实施例中,第二电极具有在电泳期间用作每个腔室中的阴极的延伸部。
13、在一些实施例中,第一电极为阳极并且第二电极为阴极。
14、在一些实施例中,第一电极跨越两个腔室或分成位于本发明的系统的每个腔室中的部件或电极接口。在一些实施例中,第二电极跨越两个腔室或分成位于本发明的系统的每个腔室中的部件或电极接口。
15、在本发明的系统的一些实施例中,第一电极(包括其接口和部件)连接到共同的第一电极节点并且第二电极(包括其接口和部件)连接到共同的第二电极节点。在一些实施例中,第一电极节点和第二电极节点位于腔室或系统的构造成与电源电连接的部分上。
16、在一些实施例中,第一电极节点和第二电极节点位于腔室或系统的与构造成覆盖系统的封盖接触的部分上。
17、在一些实施例中,本发明的系统可另外包括封盖,该封盖构造成覆盖至少一个或多个腔室或隔室。在一个实施例中,本发明的系统的封盖包括:电连接件,该电连接件可拆卸地连接到电源;以及一个或多个电接触件,该一个或多个电接触件构造成在封盖放置在装置上时,与腔室电极电连接,以使腔室或隔室中的电路完整,从而促进电泳和/或电转移。至少一个腔室中的电极还构造成与本发明的电转移盒的电接口电连接。
18、在一些实施例中,系统的封盖可包括电连接件,该电连接件可拆卸地连接到电源,该电源包括一个或多个电缆和/或可插入电源的一个或多个插头。外部电源通常与本发明的系统一起使用。然而,本发明的系统也可包括内部电源。
19、在一些实施例中,该系统的封盖包括机械特征部,该机械特征部与腔室的顶部上的互补机械特征部相互作用,使得封盖上的电接触件与第一电极节点和第二电极节点以一定取向连接,该取向在系统使用时防止电极发生反转。在一些实施例中,封盖包括机械特征部,诸如可与用户手指接合以允许容易地移除封盖的凹槽。
20、在一些实施例中,该系统的封盖包括颜色编码的特征部,该颜色编码的特征部可被操作为以允许封盖电接触件与相应的第一电极节点和第二电极节点连接的取向覆盖腔室,该取向在使用期间防止电极发生反转。
21、在一些实施例中,系统的封盖可包括至少一个特征诸如一个或多个电缆钩,该一个或多个电缆钩允许电缆卷绕封盖并在贮存期间保持牢固。在一些实施例中,系统的封盖具有一个或多个排气口,该一个或多个排气口允许在电泳或电转移期间排出缓冲蒸汽。在一些实施例中,封盖由透明或半透明材料制成,这允许在使用期间具有可见性以查看设置是否正确并查看性能。
22、在一些实施例中,当封盖与电泳系统一起使用时,仅当凸轮手柄(用于将电泳凝胶盒固定到系统)锁定时,封盖下侧的机械特征部(诸如脊或凹槽)允许封盖配合在腔室上。
23、在一个实施例中,本发明描述了一种系统,该系统包括:至少两个腔室,每个腔室独立地构造成接纳电泳盒或电转移盒;三个电极;以及封盖,该封盖构造成覆盖腔室,该封盖包括电连接件,该电连接件可拆卸地连接到电源;以及一个或多个电接触件,该一个或多个电接触件构造成在封盖放置在两个腔室上时与电极电连接,以针对两个腔室中的每一个,使电路完整。在系统的一些实施例中,三个电极包括跨越两个腔室的第一电极和位于每个腔室中的第二电极。在一些实施例中,封盖包括至少两个电接触件,该至少两个电接触件构造成在封盖放置在两个腔室上时,与第一电极和第二电极电连接,以针对两个腔室中的每一个,使电路完整。
24、在一些实施例中,本发明的系统的至少两个腔室通过它们之间的至少一个共同的表面分开。腔室之间的共同的表面的非限制性示例包括两个腔室的至少一部分之间的壁、两个腔室的至少一部分之间的隔板、公共连接器等。在一些实施例中,至少两个腔室被两个腔室之间的空间分开。在一些实施例中,至少两个腔室被共同的表面和至少两个腔室之间的空间分开。
25、每个腔室至少具有第一内表面和第二内表面。可存在另外的内表面。在一些实施例中,本发明的系统可进一步包括垫圈,该垫圈与腔室的内表面中的一个内表面的部分相邻或定位于该部分上。在一些实施例中,本发明的系统可进一步包括垫圈,该垫圈与第一内表面的部分相邻或定位于该部分上。通常,使用三面垫圈,其在非限制性示例中可为 c 形垫圈或 u 形垫圈。替代地,也可使用双面垫圈或四面垫圈。
26、在本发明的系统或其至少一个腔室用于电泳的实施例中,可将一个或两个电泳盒放置到系统的腔室或隔室中。在一些实施例中,在本发明的系统中使用的电泳盒包括两个平行板,在该两个板之间封闭有凝胶。本发明的系统的每个腔室或隔室构造成独立地接纳电泳盒并且被进一步构造成独立地接纳可被操作为将电泳盒夹持在一个或多个腔室/隔室中的夹持或固定机构。在一些实施例中,本发明的夹持机构可被操作为将电泳盒夹持到腔室/隔室的内表面。在一些实施例中,本发明的夹持机构可被操作为将电泳盒夹持到密封机构(诸如垫圈),或腔室/隔间内部的夹持或固定机构。在一些实施例中,垫圈放置在本发明的系统的腔室/隔间的内表面的至少一部分上。通常,使用三面垫圈,其在非限制性示例中可为 c 形垫圈或 u 形垫圈。替代地,也可使用双面垫圈或四面垫圈。
27、在一些实施例中,本发明提供了一种用于执行凝胶电泳的系统,该系统包括:基部,该基部包括至少两个腔室,每个腔室构造成独立地接纳电泳盒,该电泳盒包括封闭凝胶的两个平行板,每个腔室构造成独立地接纳用于将电泳盒固定到每个腔室的表面的夹具;单个第一电极,该单个第一电极跨越两个腔室,每个腔室具有连接在共同的电极节点处的单独的第二电极;可拆卸的封盖,该可拆卸的封盖提供与电源的电连接;以及封盖,该封盖具有电连接器,以在放置在基部上方时,使腔室电极之间的电路完整。在一个实施例中,本发明的用于电泳的系统包括一个电泳盒。在一个实施例中,本发明的用于电泳的系统包括两个电泳盒。
28、在一些实施例中,腔室的第一电极进一步包括导线,该导线沿着每个腔室的底部延伸,以使电流能够流过腔室以进行电泳。在一些实施例中,当电泳盒被放置在一个或两个腔室中时,沿着每个室的底部延伸的线在电泳期间用作阳极。导线由任何导电材料制成,诸如但不限于铂、金、银、铜、钯、钢、不锈钢、铱、导电塑料或任何涂覆的导电材料。
29、本发明的实施例涉及一种用于将电泳盒固定到表面的夹具。在一个实施例中,本发明的夹具包括:凸轮板,该凸轮板具有平坦表面和两个突出脊,两个突出脊和两个突出边缘两者均位于平坦表面的第一侧上,凸轮板的突出脊构造成与电泳盒的第一板的边缘相邻地放置并与该边缘接触;两个可独立移动的凸轮手柄,该凸轮手柄可被操作为朝向凸轮板向前移动或远离凸轮板向后移动,两个凸轮手柄经由位于凸轮板上的栓附接到凸轮板,其中将凸轮手柄朝向凸轮板向前移动将电泳盒固定到表面,并且其中将凸轮手柄远离凸轮板向后移动将电泳盒从表面释放。垂直于面向电泳盒的凸轮板的平坦表面定位的两个突出边缘邻近凸轮手柄定位并且为电泳盒的放置提供引导。任选地,凸轮板还可具有位于凸轮板的平坦表面的第二侧上的两个附加突起,该两个附加突起在凸轮板的边缘处在垂直于背向电泳盒的凸轮板的平坦表面的平面中突出。
30、在另一实施例中,本发明的夹具包括:凸轮板,该凸轮板具有平坦表面和两个突出脊,凸轮板的突出脊构造成与电泳盒的第一板的边缘相邻地放置并与第一板的边缘接触;两个可独立移动的凸轮手柄,该凸轮手柄可被操作为朝向凸轮板向前移动或远离凸轮板向后移动,两个凸轮手柄经由位于凸轮板上的栓附接到凸轮板,其中将凸轮手柄朝向凸轮板向前移动将电泳盒固定到表面,并且其中将凸轮手柄远离凸轮板向后移动将电泳盒从表面释放。
31、在一些实施例中,本发明的夹具的凸轮手柄可在 0 度到 180 度的运动范围内移动。在一些实施例中,本发明的夹具的凸轮手柄可在 0 度到 45 度的运动范围内移动。
32、在一些实施例中,本发明的夹具在凸轮板的平坦表面的底部侧面上包括多个凸块。在一些实施例中,本发明的夹具在面向凝胶盒的凸轮板的平坦表面的底部侧面上包括多个凸块。凸块的数量可变化。在一些非限制性示例性实施例中,1
个凸块、2 个凸块、3 个凸块、4 个凸块、5 个凸块、6 个凸块、7 个凸块、8 个凸块、9 个凸块、10 个凸块等位于面向凝胶盒的凸轮板的平坦表面的底部侧面上。凸块设计的形状和尺寸可变化。在一些实施例中,凸块构造成在底部在凝胶盒板的所有部分上分配压力以防止在电泳期间和/或在凝胶盒被固定用于电泳时凝胶盒的翘曲或弯曲。在一些实施例中,凸块允许在盒底部的缓冲离子的自由循环。
33、在一些实施例中,本发明的夹具将电泳盒夹持或固定到其上的表面是电泳槽的一部分或部分上的表面。在一些实施例中,本发明的夹具将电泳盒夹持或固定到其上的表面是本发明的系统的一部分或部分上的可执行电泳和/或电转移两者的表面。
34、在一些实施例中,本发明的夹具将电泳盒夹持或固定到其上的表面是位于电泳槽的一部分或部分或者壁或表面上的垫圈,或位于可执行电泳和/或电转移两者的本发明的系统的一部分或部分或者壁或表面上的垫圈。
35、本发明的夹持机构或本发明的夹具在系统的腔室/隔室中在电泳盒和垫圈之间产生或形成不透液体的密封。在一些实施例中,将电泳盒夹持到本发明的系统的腔室或隔室中,导致在腔室或隔室中形成两个流体地隔开的子腔室/子隔室。在一些实施例中,在腔室/隔室的第一内表面的一部分、垫圈的一部分和面向电泳盒和夹具被放置到其中的系统的腔室的第一内表面的电泳盒的板之间形成第一子腔室/子隔室。在一些实施例中,形成第一子腔室的垫圈的一部分包括垫圈的三个侧面,并且可包括垫圈的左侧面和右侧面以及底部侧面。在一些实施例中,在凝胶盒的左侧面和右侧面、面向第二内表面的凝胶盒的侧面和电泳盒和夹具被放置到其中的系统的腔室的其余部分之间形成第二子腔室/子隔室。
36、在系统使用期间如此形成的子腔室或子隔室可填充有用于电泳的缓冲液并且可用作第一缓冲液贮存器和第二缓冲液贮存器。
37、在一些实施例中,在腔室/隔室的第一内表面的一部分、垫圈的一部分和面向电泳盒和夹具被放置到其中的系统的腔室的第一内表面的电泳盒的板之间形成第一缓冲液贮存器。在一些实施例中,在凝胶盒的左侧面和右侧面、面向第二内表面的凝胶盒板/侧面和电泳盒和夹具被放置到其中的腔室的其余部分之间形成第二缓冲液贮存器。
38、本发明的系统不限于任何尺寸,并且可放大或缩小以容纳任何尺寸的电泳盒或电转移盒。例如,可使用的电泳盒可包括一个或多个微型凝胶盒、中型凝胶盒、大型凝胶盒。在其他非限制性示例中,本发明的系统的每个腔室可容纳约 30 ml 至 5 升的电泳缓冲液体积。
39、在本发明的系统的一些实施例中,系统的一个或两个腔室具有电泳盒和夹具。在本发明的系统的一些实施例中,系统的一个或两个腔室具有电转移盒。
40、在本发明的系统的一些实施例中,系统的一个腔室具有电泳盒和夹具,并且系统的另一腔室具有电转移盒。
41、本发明的实施例涉及电转移盒。在一个实施例中,本发明的电转移盒包括:两个板(或壳),该两个板可通过至少一个接合机构可逆地或永久地接合,以允许两个板在打开位置和闭合位置之间移动;锁定机构,该锁定机构用于将两个板锁定在闭合位置;密封机构,该密封机构可被操作为将两个板密封在闭合位置,以在至少三个侧面上形成不透液体的密封;第二板,该第二板构造成在其内部侧面接纳转移叠堆件的部件,并且第一板和第二板的外部侧面包括至少一个电接口,该至少一个电接口各自连接到位于每个板的内侧上的电极。
42、在其中在电转移盒的三个侧面上形成不透液体的密封的实施例中,三个侧面是盒的底部侧面、左侧面和右侧面。在一些实施例中,在电转移盒的所有四个侧面上形成不透液体的密封。
43、在一些实施例中,电转移盒的接合机构包括以下一者或多者:铰链;多个铰链;断开连接的铰链;夹具;一个或多个钩;一个或多个夹具;两个板(或壳)上的机械部件,这些机械部件可滑动和联锁,从而将两个板粘合、胶粘、粘结或焊接在一起;连杆设计,两个板用柔性材料连接;或外部元件,该外部元件用于接合两个板。在一些实施例中,接合机构是可逆接合机构或永久接合机构。永久接合机构允许两板作为一个部件保持在一起。这对于用户来说是有利的,因为他们提供较少的部件和/或允许更轻松地闭合板,因为在闭合之前不需要对齐板。可逆接合机构允许具有两个单独壳。
44、在一些实施例中,位于本发明的电转移盒的两个板内部的电极是嵌入每个板的内表面中或放置在每个板的内表面上的板电极。在替代实施例中,位于电转移盒的两个板内部的电极可以是线电极、线网电极或棒电极。这些电极可由导电材料制成,诸如但不限于钢、不锈钢、铜、铂、钯、铱、钛、导电涂层材料、导电塑料等
。
45、在一些实施例中,板电极的外部电接口可以是弹簧、电极节点、支架、引脚、插头、允许电接触的任何设计,诸如电极的电镀接口。外部电接口构造成与电极或电极延伸部物理地或电地连接,该电极或电极延伸部具有与电源的电连接。电极或电极延伸部可包含在本发明的可执行电泳和/或电转移两者的系统中。电极或电极延伸部可包含在任何可执行电转移的系统中。
46、在一个实施例中,在本发明的系统中,跨越两个腔室的第一电极构造成接触可放置到一个或多个腔室中的电转移盒上的第一电极接口。在一些实施例中,电转移盒的第一电极接口为阳极接口。
47、在一些实施例中,本发明的腔室/隔室的第二电极具有延伸部,这些延伸部构造成接触可放置到一个或多个腔室中的电转移盒上的第二电极接口。在一些实施例中,电转移盒的第二电极接口为阴极接口。
48、本发明的系统、盒、装置和其他部件中的电极接口的非限制性示例可以是弹簧、节点、适配器、插头、连接器、插头和插脚。
49、在一些实施例中,本发明的电转移盒的锁定机构包括滑块。在一些实施例中,滑块包括:带,该带卷绕第一板的外部侧面的宽度的部分;带的侧延伸部,该侧延伸部进一步卷绕第一板的外部侧面的深度的部分;以及元件,该元件可被操作为与第二板的外部侧面上的部分可逆地啮合以在啮合时在第一板和第二板之间形成锁定。在一些实施例中,当两个板闭合时,本发明的电转移盒的滑块与第二板上的相应元件对齐,这些元件可被操作为滑动以形成锁定。
50、在一些实施例中,锁定机构可以是滑块,其可经由一个或多个安装特征部附接到板中的一个。在一些实施例中,滑块可具有配合安装特征部,该配合安装特征部是可被操作的并且将滑块永久地或可逆地附接到板。在一些实施例中,锁定机构可以是位于一个板上的滑块,其中该滑块上的机械配合特征部可与位于另一板上的相应机械特征部配合。匹配特征部通常位于每个板的两侧上。
51、在一些实施例中,锁定机构可以是一个板上的夹具和位于另一板上的夹具闭合件。夹持机构通常经由安装特征附接到一个板。夹具通常具有配合安装特征部,这些配合安装特征部允许夹具附接到另一板。可使用若干安装特征部,例如,栓孔机构等。
52、在一些实施例中,本发明的电转移盒的密封机构包括至少一个滑块。在一个示例性实施例中,当两个板闭合时,滑块(如上所述)在朝向板的顶端的方向上移动,以在电转移盒的至少三个侧面上形成锁定和不透液体的密封。在一个示例性实施例中,当两个板闭合时,滑块在朝向板底端的方向上移动,以在电转移盒的至少三个侧面上形成锁定和不透液体的密封。在一个示例实施例中,当两个板闭合时,位于闭合板的侧面中的一个侧面上的滑块向上或向下移动以在电转移盒的至少三个侧面上形成锁定和不透液体的密封。在一些实施例中,可在电转移盒的所有四个侧面上形成不透液体的密封。不透液体的密封(或液密的密封)的形成在电转移盒内部产生或形成液体贮存器。在一些实施例中,本发明的电转移盒的密封机构可另外包括垫圈,该垫圈被放置在电转移盒的两个板中的一个板上。
53、在一些实施例中,唇缘或突起可位于第一板或第二板上。唇缘或开口允许将液体轻松分配到电转移盒中或从电转移盒分配出来。唇缘或突起还可为盒提供附加的结构支撑。在一些实施例中,第二板在顶部侧面上具有唇缘或突起或开口,该唇缘或突起或开口可被操作为在其他三个侧面上密封电转移盒之后将液体(诸如转移缓冲液)分配到电转移盒中,或在电转移完成之后将液体从盒中倒出。电转移盒可在液体贮存器内部具有可视标记,诸如填充线或其他指示,以指示用户要填充的液体(诸如电转移缓冲液)的量。
54、在一些实施例中,本发明的电转移盒进一步包括提供位于第一板或第二板的外侧或内侧的支撑结构的元件。在一些实施例中,本发明的电转移盒的支撑结构可位于盒的外部。在非限制性示例中,支撑结构可减少或防止第一板的翘曲或弯曲。在非限制性示例性实施例中,支撑结构可包括一个或多个肋、一个或多个脊、一个或多个凹槽、一个或多个突出结构、凹表面凸结构、可在外部添加或与位于电转移系统中的为电转移盒的电极板提供支撑和/或刚性的板、凸块、插入件、支撑件组合的一个或多个加强元件。在一些实施例中,一个或多个支撑结构允许两个电极板彼此平行,这允许对于在电转移期间生物分子的有效转移具有均匀的电场。
55、在一些实施例中,支撑结构允许第二板以一定角度抵靠。在一些实施例中,由支撑结构引起的角度使得组装和/或查看转移叠堆件具有人体工程学优势。在一些实施例中,支撑结构的角度允许第二板含有一定体积的转移缓冲液,这有助于使转移叠堆件在整个组装过程中保持含水。在一些实施例中,在转移叠堆件组装在第二板上期间,支撑结构的角度减少了缓冲液溢出。
56、在一些实施例中,本发明的电转移盒构造成放置在本发明的可执行电泳和/或电转移两者的系统中。在一些实施例中,本发明的电转移盒构造成放置在可执行电转移的任何系统中。在一些实施例中,电转移盒在被锁定和密封之后位于电转移系统中。
57、在非限制性示例中,可使用的电转移盒可包括可用于将生物分子从一个或多个微型凝胶盒、一个或多个中型凝胶盒、一个或多个大型凝胶盒同时转移到一个或多个电转移膜的盒。
58、在一些实施例中,在使用中,本发明的封闭和密封的电转移盒的液体贮存器填充有缓冲液并放置在本发明的可执行电泳和/或电转移两者的系统的腔室中,并且该系统的封盖被放置在腔室上并连接到电源以使电转移盒系统的电路完整。在一些实施例中,在使用中,在电转移之前,缓冲液不填充在液体贮存器中。
59、在一些实施例中,本发明提供了一种用于执行电转移的系统,该系统包括:至少两个腔室;单个第一电极,该单个第一电极跨越基部的两个腔室,连接到位于基部顶部侧面的第一电极节点;第二电极,该第二电极位于每个腔室中,两个第二电极连接在位于基部顶部侧面的共同的第二电极节点处,每个腔室构造成独立地接纳电转移盒,该电转移盒包括:两个板,该两个板由接合机构接合,该接合机构构造成允许两个板从打开位置和闭合位置移动;锁定机构,该锁定机构可被操作为锁定两个板;以及密封机构,该密封机构可被操作为在电转移盒的至少三个侧面上实现不透液体的密封;第二板,该第二板构造成在其内部侧面接纳转移叠堆件的部件,并且其中第一板和第二板的外部侧面各自包括至少一个电连接件,该至少一个电连接件连接到位于每个板内侧的电极,第一板和第二板上的电连接件与腔室的第一电极和第二电极电接触;以及可拆卸的封盖,该可拆卸的封盖覆盖腔室,该封盖提供与电源的电连接,并且封盖具有电连接器,当电转移盒被放置在基部中并且封盖覆盖基部时,电连接器与电转移盒的电连接件电连接以使电路完整。在一些实施例中,锁定机构包括滑块,该滑块可被操作为将两个板锁定(或夹持或偏置)在闭合位置。在一些实施例中,密封机构包括滑块,该滑块可将两个板密封在闭合位置以在至少三个侧面形成不透液体的密封。在一些实施例中,密封机构进一步包括位于两个板中的至少一个的至少一个垫圈。在一个实施例中,本发明的用于电转移的系统包括一个电转移盒。在一个实施例中,本发明的用于电转移的系统包括两个电转移盒。
60、本发明的实施例涉及使用本文所述的装置和系统执行凝胶电泳或电转移的方法。
61、在一些实施例中,一种执行凝胶电泳的方法包括:获得具有凝胶的电泳盒;从电泳盒中取出凝胶梳;任选地用水或运行缓冲液冲洗孔;将电泳盒放置到本发明的系统的至少一个腔室中;将本发明的夹具放置到腔室中并将凝胶盒夹持到腔室的表面的一部分上;将电泳缓冲液倒入第一缓冲液贮存器中;将电泳缓冲液倒入通第二缓冲液贮存器中;将样品和对照品装载到孔中;将系统的电极节点/接口/连接件(其电连接到腔室的电极)连接到电源;选择供电单元上的电压和时间;对样品和对照品执行电泳。
62、在该方法的一些实施例中,凝胶盒与存在于至少一个腔室的壁上的垫圈相邻地放置。在一些实施例中,夹持步骤包括将本发明的夹具的凸轮手柄朝向凝胶盒移动以将它们锁定在适当位置。
63、在一些实施例中,其中本发明的系统具有封盖,将系统中的电极节点/接口/连接件连接到电源的步骤包括:将封盖放置到系统上,使得封盖电连接件以正确的极性连接到系统电极接口/节点/连接件;以及将封盖中的插头连接到电源。
64、本发明还提供电转移盒和电转移系统。在一些实施例中,生物分子从凝胶到转移膜上的电转移所使用的凝胶是在任何电泳系统中运行的凝胶。在其他实施例中,本发明的电转移方法所使用的凝胶可以是在电泳系统中运行的凝胶,如上所述。
65、在一些实施例中,首先从电泳盒中移除已在其上执行电泳以解析生物分子的凝胶。这通常涉及用凝胶刀撬开或破开电泳盒并移除凝胶,然后再组装转移叠堆件。转移叠堆件通常包括海绵和一个或多个滤纸层(和/或浸泡在电转移缓冲液中的其他多孔/凝胶状材料)、之后是通过电泳解析的生物分子被放置到其上的凝胶、之后是转移膜(通常是硝化纤维素、pvdf 或任何多孔材料)、浸泡在电转移缓冲液中的一个或多个滤纸层和另一海绵的另一叠堆件。该叠堆可组装到电转移盒的一个板上。通常,具有阴极的电转移盒中的板是叠堆组装在其顶部的板。在本发明的一些实施例中,本发明的托盘被设计成将电转移盒置于打开位置并组装转移叠堆件。本发明的托盘被设计成容纳过量的缓冲液,并避免在实验室工作台和桌子上溢出和弄脏,并提供容器以在转移前将耗材浸泡在缓冲液中。
66、在一个实施例中,一种执行生物分子的电转移的方法包括:获得生物分子通过电泳分离到其上的凝胶;将转移叠堆件组装到本发明的电转移盒的第二板上,包括将转印材料放置在凝胶顶部以及将滤纸和海绵进一步放置在转印材料和凝胶叠堆件的上方和下方;将电转移盒的第一板闭合到第二板上);通过电转移盒上的锁定和密封机构在至少三个侧面上锁定和密封电转移盒;将电转移盒放置到本发明的系统的至少一个腔室中,该系统可执行电转移和电泳;将系统上的电连接件/节点/接口连接到电源;在电源上选择转移电压和运行时间;执行生物分子从凝胶到转印材料上的电转移。
67、在一个实施例中,锁定和密封是通过在电转移盒上滑动滑块以锁定和密封电转移盒来实现的。在一个实施例中,锁定和密封是通过将夹具夹持在电转移盒上以锁定和密封电转移盒来实现的。在一个实施例中,密封是通过位于电转移盒的两个板中的至少一个板上的垫圈来实现的。垫圈可为三面垫圈或四面垫圈。
68、在一些实施例中,密封形成不透液体的密封。在一些实施例中,在电转移盒的至少三个侧面上形成不透液体的密封。在一个实施例中,将电转移盒放置到本发明的系统的腔室中包括:使电转移盒直立,使得接合侧(铰链/钩侧)位于系统的底部,而未密封的第四侧位于顶部。在此阶段,该方法可包括任选地将电转移缓冲液倒入电转移盒顶部的开口中。在一些实施例中,不需要将附加的电转移缓冲液倒入电转移盒中,因为转移叠堆件具有足够的缓冲液。在其中本发明的系统具有封盖的实施例中,将系统的电连接件连接到电源的步骤包括:将封盖放置到腔室上,使得封盖电连接件与腔室电极连接件连接;以及将封盖上的电连接件连接到电源。
69、在一些实施例中,在电转移盒的所有侧面上形成不透液体的密封。
70、在一些实施例中,通过将打开的电转移盒放置到托盘中来完成转移叠堆件在第二板中的组装,以避免缓冲液溢出在表面上。在一些实施例中,叠堆件组装包括:将滤纸和海绵浸泡在转移缓冲液中;将转移缓冲液倒入第一板中;将海绵层、之后将滤纸放置在第二板上;将凝胶以孔朝向电转移盒的底部侧面取向,并将该凝胶放置在滤纸上方;将转印材料(诸如但不限于膜、pvdf
膜、尼龙膜或生物分子可被转移到其上的任何多孔材料等)放置在凝胶顶部;使用辊来去除叠堆的每一层的任何气泡;将另一张滤纸放置在转印材料(膜)的顶部;将另一海绵放置在滤纸的顶部。
71、在一些实施例中,本发明提供了一种用于同时执行电转移和电泳两者的方法,该方法包括:将电泳盒利用夹具固定在本发明的系统的第一腔室中;将待电泳的包含生物分子的样品装载到电泳盒中;将具有转移叠堆件的电转移盒放置到本发明的系统的第二腔室中,该转移叠堆件具有带生物分子的凝胶和生物分子期望电转移到其上的转印材料;使用电源装置选择电压和任选地选择期望电压运行的时间;在电泳盒中执行电泳并执行生物分子从凝胶到转印材料上的电转移。在一些实施例中,由于使用公共电压,电泳和电转移在不同时间进行。
72、本传授内容的这些实施例和其他特征部将从以下部分中的详细描述变得更清楚。
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