屏障功能改善剂的制作方法

dermatol 1998:7:1-10.
14.非专利文献3：kayoko akimoto et al.,quantitative analysis of stratum corneum lipids in xerosis and asteatotic eczema.the journal of dermatology vol.20:1-6,1993.
15.非专利文献4：genji imokawa et al.,decreased level of ceramides in stratum corneum of atopic dermatitis:an etiologic factor in atopic dry skin？.j invest dermatol 96:523-526,1991.
16.非专利文献5：tokuji seguchi et al.,decreased expression of filaggrin in atopic skin.arch dermatol res 288,442-446,1996.
17.非专利文献6：藤田宏志等“乾燥
によるフィラグリンとアミノ
酸
の
減少
を
防
ぐ
palo azul”j.soc.cosmet.chem.jpn.37(2),84-91,2003.
18.非专利文献7：mariko hara-chikuma et al.,aquaporin-3functions as a glycerol transporter in mammalian skin.biol.cell(2005)97,479-486.
19.非专利文献8：takuo yuki et al.,tight junction proteins in keratinocytes:localization and contribution to barrier function.experimental dermatology 16,324-330,2007.


技术实现要素：

20.发明要解决的课题
21.如上所述，已知在肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、特应性皮炎等中皮肤的屏障功能降低，要求能够有效地改善屏障功能的药剂。然而，可以说现有已知的药剂其效果尚不充分。
22.因此，本发明的目的是提供能够有效地改善屏障功能的屏障功能改善剂、和含有所述屏障功能改善剂的屏障功能改善用组合物。
23.用于解决课题的手段
24.本发明包含以下方案。
25.[1]皮肤的屏障功能改善剂，含有甲基橙皮苷作为有效成分。
[0026]
[2]根据[1]所述的屏障功能改善剂，所述甲基橙皮苷是选自下述通式(1)所示的查耳酮体甲基橙皮苷、和下述通式(2)所示的黄烷酮体甲基橙皮苷中的1种以上。
[0027][0028]
[式(1)中，r1～r9各自独立地为甲基或氢原子。但是，r1～r9中至少1个为甲基。
[0029]
式(2)中，r
11
～r
18
各自独立地为甲基或氢原子。但是，r
11
～r
18
中至少1个为甲基。]
[0030]
[3]根据[2]所述的屏障功能改善剂，所述甲基橙皮苷是选自下述通式(3)所示的查耳酮体甲基橙皮苷、和下述通式(4)所示的黄烷酮体甲基橙皮苷中的1种以上。
[0031][0032]
[式(3)中，r
20
～r
23
各自独立地为甲基或氢原子。
[0033]
式(4)中，r
24
～r
25
各自独立地为甲基或氢原子。]
[0034]
[4]根据[3]所述的屏障功能改善剂，所述通式(3)所示的查耳酮体甲基橙皮苷是选自具有下述表1所示的r
20
～r
23
的组合的查耳酮体-1～3中的1种以上。
[0035]
表1
[0036] r
20r21r22r23
查耳酮体-1ch3ch3ch3ch3查耳酮体-2hch3ch3h查耳酮体-3hch3hh
[0037]
[5]根据[3]或[4]所述的屏障功能改善剂，所述通式(4)所示的黄烷酮体甲基橙皮苷是选自具有下述表2所示的r
24
～r
25
的组合的黄烷酮体-1～4中的1种以上。
[0038]
表2
[0039] r
24r25
黄烷酮体-1ch3ch3黄烷酮体-2ch3h黄烷酮体-3hh黄烷酮体-4hch3[0040]
[6]根据[1]～[5]的任一项所述的屏障功能改善剂，是聚丝蛋白的产生促进用的。
[0041]
[7]根据[1]～[5]的任一项所述的屏障功能改善剂，是内披蛋白的产生促进用的。
[0042]
[8]根据[1]～[5]的任一项所述的屏障功能改善剂，是兜甲蛋白的产生促进用的。
[0043]
[9]根据[1]～[5]的任一项所述的屏障功能改善剂，是转谷氨酰胺酶1的产生促进用的。
[0044]
[10]根据[1]～[5]的任一项所述的屏障功能改善剂，是水孔蛋白3的产生促进用的。
[0045]
[11]根据[1]～[5]的任一项所述的屏障功能改善剂，是密封蛋白1的产生促进用的。
[0046]
[12]屏障功能改善用组合物，含有[1]～[11]的任一项所述的屏障功能改善剂和药学上可接受的载体。
[0047]
[13]根据[12]所述的屏障功能改善用组合物，所述甲基橙皮苷的合计含量为0.01～2质量％。
[0048]
发明的效果
[0049]
根据本发明，可以提供能够有效地改善屏障功能的屏障功能改善剂、和含有所述屏障功能改善剂的屏障功能改善用组合物。
附图说明
[0050]
图1是试验例1的进行了免疫抗体染色的皮肤组织的照片。
具体实施方式
[0051]
(屏障功能改善剂)
[0052]
在一个实施方式中，本发明提供含有甲基橙皮苷作为有效成分的皮肤的屏障功能改善剂。
[0053]
这里，所谓“屏障功能”是指皮肤中的、防止由来自外界的干燥、紫外线、其他物理、化学刺激造成的内侧的水分的散失、对来自外界的异物的侵入进行防御的功能。
[0054]
本实施方式的屏障功能改善剂能够通过促进作为分化标志物的聚丝蛋白、内披蛋白、兜甲蛋白、转谷氨酰胺酶1、以及作为细胞膜的水通道的水孔蛋白3、以及作为紧密连接的结构体的密封蛋白1的产生，从而有效地改善屏障功能。
[0055]
＜甲基橙皮苷＞
[0056]
本实施方式的屏障功能改善剂只要包含甲基橙皮苷作为有效成分就不特别限定。作为在本实施方式的屏障功能改善剂中使用的甲基橙皮苷，优选为将橙皮苷甲基化、在水中可溶化后的产物。
[0057]
已知甲基橙皮苷中主要有下述通式(1)所示的查耳酮型化合物(查耳酮体甲基橙皮苷)、和下述通式(2)所示的黄烷酮型化合物(黄烷酮体甲基橙皮苷)。
[0058][0059]
[式(1)中，r1～r9各自独立地为甲基或氢原子。但是，r1～r9中至少1个为甲基。
[0060]
式(2)中，r
11
～r
18
各自独立地为甲基或氢原子。但是，r
11
～r
18
中至少1个为甲基。]
[0061]
在本实施方式的屏障功能改善剂中使用的甲基橙皮苷优选为选自所述通式(1)所示的查耳酮体甲基橙皮苷、和所述通式(2)所示的黄烷酮体甲基橙皮苷中的1种以上。
[0062]
所述通式(1)中，r1～r9各自独立地为甲基或氢原子，r1～r9中至少1个为甲基。优选r1～r9中的任意1～6个为甲基，更优选任意2～5个为甲基。
[0063]
所述通式(2)中，r
11
～r
18
各自独立地为甲基或氢原子，r
11
～r
18
中至少1个为甲基。优选r
11
～r
18
中的任意1～4个为甲基，更优选任意1～3个为甲基。
[0064]
在所述通式(1)所示的化合物中，作为查耳酮体甲基橙皮苷，优选为下述通式(3)所示的化合物。在所述通式(2)所示的化合物中，作为黄烷酮体甲基橙皮苷优选为下述通式(4)所示的化合物。
[0065][0066]
[式(3)中，r
20
～r
23
各自独立地为甲基或氢原子。
[0067]
式(4)中，r
24
～r
25
各自独立地为甲基或氢原子。]
[0068]
所述通式(3)中，r
20
～r
23
各自独立地为甲基或氢原子。所述通式(3)所示的查耳酮体甲基橙皮苷优选为选自具有下述表3所示的r
20
～r
23
的组合的查耳酮体-1～3中的1种以上。
[0069]
表3
[0070] r
20r21r22r23
查耳酮体-1ch3ch3ch3ch3查耳酮体-2hch3ch3h查耳酮体-3hch3hh
[0071]
所述通式(4)中，r
24
～r
25
各自独立地为甲基或氢原子。作为所述通式(4)所示的黄烷酮体甲基橙皮苷，优选为选自具有下述表4所示的r
24
～r
25
的组合的黄烷酮体-1～4中的1种以上。
[0072]
表4
[0073] r
24r25
黄烷酮体-1ch3ch3黄烷酮体-2ch3h黄烷酮体-3hh黄烷酮体-4hch3[0074]
在本实施方式的屏障功能改善剂中使用的甲基橙皮苷可以是单独1种，也可以是2种以上的混合物。甲基橙皮苷既可以包含所述通式(1)所示的查耳酮体甲基橙皮苷或所述通式(3)所示的查耳酮体甲基橙皮苷、与所述通式(2)所示的黄烷酮体甲基橙皮苷或所述通式(4)所示的黄烷酮体甲基橙皮苷双方，也可以仅包含单方。甲基橙皮苷可以包含所述通式(3)所示的查耳酮体甲基橙皮苷、和所述通式(4)所示的黄烷酮体甲基橙皮苷。另外，甲基橙
皮苷既可以包含所述查耳酮体-1～3的任意1种以上，也可以包含所述黄烷酮体-1～4的任意1种以上。
[0075]
另外，本实施方式的屏障功能改善剂作为甲基橙皮苷，可以包含查耳酮体-1～3和黄烷酮体-1～3的混合物。
[0076]
甲基橙皮苷可以通过公知的方法制造。作为公知的方法，可列举例如，通过将由柑橘类的果皮等制造的橙皮苷溶解到氢氧化钠水溶液中，对该碱性溶液使对应量的硫酸二甲酯作用，将反应液用硫酸中和，用正丁醇提取，蒸馏除去溶剂，然后用异丙醇重结晶，从而制造的方法(崎浴，日本化学杂志，(1958)vol.79，pp.733-736；日本专利6312333号公报)，其制造法不限于此。
[0077]
另外，也可以购买市售品(例如，作为药品添加物、食品添加物、和化妆品原料流通的，或“甲基橙皮苷”(昭和电工株式会社)、“甲基橙皮苷”(东京化成工业社)、“橙皮苷甲基查耳酮”(sigma社)等)而使用。
[0078]
本实施方式的屏障功能改善剂可以以治疗肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、特应性皮肤炎等为目的，将其自身对患者施与而使用。另外，本实施方式的屏障功能改善剂也可以以改善屏障功能为目的，混配到药品、化妆品中而使用。另外，本实施方式的屏障功能改善剂可以混配到后述的屏障功能改善用组合物中而使用。
[0079]
本实施方式的屏障功能改善剂能够通过促进聚丝蛋白的产生而有效地改善屏障功能。
[0080]
本实施方式的屏障功能改善剂能够通过促进内披蛋白的产生而有效地改善屏障功能。
[0081]
本实施方式的屏障功能改善剂能够通过促进兜甲蛋白的产生而有效地改善屏障功能。
[0082]
本实施方式的屏障功能改善剂能够通过促进转谷氨酰胺酶1的产生而有效地改善屏障功能。
[0083]
本实施方式的屏障功能改善剂能够通过促进水孔蛋白3的产生而有效地改善屏障功能。
[0084]
本实施方式的屏障功能改善剂能够通过促进密封蛋白1的产生而有效地改善屏障功能。
[0085]
因为本实施方式的屏障功能改善剂能够有效地改善屏障功能，所以能够在肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、特应性皮肤炎的预防或治疗中使用。
[0086]
(聚丝蛋白)
[0087]
聚丝蛋白是在表皮的颗粒细胞中产生的碱性蛋白质的一种，具有促进在角质层细胞内进行的角蛋白纤维的纤维形成反应的作用。聚丝蛋白在角质层细胞从下层向上层移动的过程中，进一步在蛋白酶的作用下被分解为氨基酸，在角质层中游离氨基酸作为天然保湿因子(nmf)发挥功能。通过聚丝蛋白的产生被促进，从而nmf量增加、角质层的保湿力提高，因此皮肤的屏障功能提高。
[0088]
(内披蛋白)
[0089]
内披蛋白是构成角质层细胞的角质包膜的主要蛋白质之一，被作为角质形成细胞(表皮角质形成细胞)的分化的初始阶段的指标使用。通过内披蛋白的产生被促进，从而作
为承担角质层的保湿力的结构体的角质包膜的形成被促进，因此皮肤的屏障功能提高。
[0090]
(兜甲蛋白)
[0091]
兜甲蛋白是包含大量甘氨酸、丝氨酸、半胱氨酸等的疏水性蛋白质，是角质包膜的主要构成成分。通过内披蛋白的产生被促进，从而角质包膜的形成被促进，因此皮肤的屏障功能提高。
[0092]
(转谷氨酰胺酶1)
[0093]
转谷氨酰胺酶1是在蛋白质中的谷氨酰胺与赖氨酸之间形成异肽键的酶，参与角质包膜的形成反应。通过转谷氨酰胺酶1的产生被促进，从而角质包膜的形成被促进，因此皮肤的屏障功能提高。
[0094]
(水孔蛋白3)
[0095]
水孔蛋白3是细胞膜中存在的具有细孔的蛋白质，作为调节细胞内的水分量的水通道发挥功能。通过水孔蛋白3的产生被促进，从而表皮细胞内的水分量增加，因此表皮的屏障功能提高。
[0096]
(密封蛋白1)
[0097]
密封蛋白1是细胞间结合中的紧密连接(密闭结合)的主要蛋白质，构建细胞间屏障。通过密封蛋白1的产生被促进，从而紧密连接的形成被促进，因此表皮的屏障功能提高。
[0098]
本实施方式的屏障功能改善剂可以施与肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、特应性皮肤炎等的发病风险高的患者，为了预防肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、特应性皮肤炎等而使用。另外，本实施方式的屏障功能改善剂可以施与发病了肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、特应性皮肤炎等的患者，为了抑制肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、特应性皮肤炎等进行、恶化而使用。
[0099]
本实施方式的屏障功能改善剂可以通过与后述的屏障功能改善用组合物同样的方法施与患者，既可以经口地施与，也可以非经口地施与，也可以施与静脉内、动脉内、肌肉内、皮内、皮下、腹腔内等，也可以制成栓剂进行直肠内施与，也可以制成皮肤外用剂施与皮肤。
[0100]
(屏障功能改善用组合物)
[0101]
本实施方式的屏障功能改善用组合物含有：上述的含有甲基橙皮苷的屏障功能改善剂、和药学上可接受的载体。
[0102]
本实施方式的屏障功能改善用组合物可以按照常规方法(例如，日本药局方记载的方法)，通过将上述的屏障功能改善剂、药学上可接受的载体、和根据情况的其他成分混合而制剂化，从而制造。
[0103]
本说明书中，所谓“药学上可接受的载体”，是指不阻碍有效成分的生理活性、且对其施与对象不显示实质的毒性的载体。
[0104]
其中，所谓“不显示实质的毒性”是指该成分在通常使用的施与量下，对施与对象不显示毒性。
[0105]
作为药学上可接受的载体，不特别限制，可以列举赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、稳定剂、稀释剂、注射剂用溶剂、保湿剂、触感提高剂、表面活性剂、高分子/增稠/胶凝剂、溶剂、喷射剂、抗氧化剂、还原剂、氧化剂、螯合剂、酸、碱、粉体、无机盐、水、含金属化合物、不饱和单体、多元醇、高分子添加剂、湿润剂、增稠剂、胶黏物质、油性原料、液态基质、脂
溶性物质、高分子羧酸盐等。
[0106]
作为这些成分的具体例，可列举例如，国际公开公报第2016/076310号所记载的成分等。进而，作为高分子/增稠/胶凝剂的具体例，可列举甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱、甲基丙烯酸丁酯或它们的聚合物等。
[0107]
本实施方式的屏障功能改善用组合物中的药学上可接受的载体可以单独使用1种，也可以2种以上联合使用。
[0108]
另外，作为其他成分，不特别限制，可列举防腐剂、抗菌剂、紫外线吸收剂、美白剂、甲基橙皮苷以外的维生素类及其衍生物类、消炎剂、抗炎症剂、育发用药剂、血液循环促进剂、刺激剂、激素类、抗皱剂、抗衰老剂、绷紧剂、冷感剂、温感剂、创伤治愈促进剂、刺激缓和剂、镇痛剂、细胞赋活剂、植物/动物/微生物提取物、种子油、镇痒剂、角质剥离/溶解剂、止汗剂、清凉剂、收敛剂、酶、核酸、香料、色素、着色剂、染料、颜料、消炎镇痛剂、抗真菌剂、抗组胺剂、催眠镇静剂、精神稳定剂、抗高血压剂、降压利尿剂、抗生素、麻醉剂、抗菌性物质、抗癫痫剂、冠状动脉扩张剂、生药、止痒剂、角质软化剥离剂、紫外线阻挡剂、杀菌剂、抗氧化物质、ph调节剂、添加剂、金属皂等。作为这些成分的具体例，可列举例如，国际公开公报第2016/076310号所记载的成分等。进而，作为植物/动物/微生物提取物的具体例，可列举多肋稻槎菜花/叶/茎、茶叶等。作为种子油的具体例，可列举辣木种子油。作为香料的具体例，可列举紫苏醛。
[0109]
其他成分可以单独使用1种，也可以2种以上联合使用。
[0110]
本实施方式的屏障功能改善用组合物可以含有治疗有效量的所述屏障功能改善剂。所谓“治疗有效量”是指为了患者的疾病的治疗或预防而有效的药剂的量。治疗有效量可以根据施与对象的疾病的状态、年龄、性别、和体重等而变动。
[0111]
在本实施方式的屏障功能改善用组合物中，上述屏障功能改善剂的治疗有效量可以是甲基橙皮苷能够改善屏障功能的量。另外，上述屏障功能改善剂的治疗有效量可以是甲基橙皮苷能够促进选自聚丝蛋白、内披蛋白、兜甲蛋白、转谷氨酰胺酶1、水孔蛋白3、和密封蛋白1中的至少1种的产生的量。
[0112]
本实施方式的屏障功能改善用组合物中的所述屏障功能改善剂的治疗有效量(甲基橙皮苷的合计含量)相对于屏障功能改善用组合物总量可以为例如0.01～2质量％，也可以为例如0.05～1.5质量％，也可以为例如0.1～1.0质量％。
[0113]
所谓甲基橙皮苷的合计含量，在单独使用1种甲基橙皮苷的情况下是指该化合物的含量，在组合使用2种以上甲基橙皮苷的情况下是指这些化合物的合计含量。
[0114]
作为本实施方式的屏障功能改善用组合物的优选的具体例，可列举具有以下的组成的例子。
[0115]
(例1)含有甲基橙皮苷0.01～2质量％、甘草次酸二钾0.04～1质量％、透明质酸na 0.01～10质量％的屏障功能改善用组合物。
[0116]
(例2)含有甲基橙皮苷0.01～2质量％、异壬酸异壬酯0.05～10质量％、肉豆蔻酸辛基十二烷基酯0.05～10质量％、生育酚0.001～5质量％的屏障功能改善用组合物。
[0117]
本实施方式的屏障功能改善用组合物既可以是药物组合物，也可以是化妆料。
[0118]
(药物组合物)
[0119]
在一个实施方式中，本发明提供含有上述的屏障功能改善剂和药学上可接受的载
体的屏障功能改善用医药组合物。
[0120]
在本实施方式的药物组合物中，作为药学上可接受的载体，没有特别限制，除了上述举出的以外还可以使用一般使用于药品的载体。例如，可以使用日本药局方、日本药局方外医药品规格、医药品添加物规格2013(药事日报社，2013年)、医药品添加物辞典2016(日本医药品添加剂协会编，药事日报社，2016年)、handbook of pharmaceutical excipients第7版(pharmaceutical press，2012年)等所记载的一般原料。
[0121]
药学上可接受的载体可以单独使用1种，也可以2种以上联合使用。
[0122]
本实施方式的药物组合物除了所述屏障功能改善剂和药学上可接受的载体以外，还可以含有其他成分。作为其他成分，没有特别限制，可以使用一般的药品添加物。另外，作为其他成分，也可以使用除上述的屏障功能改善剂以外的活性成分。作为其他成分即药品添加物和活性成分，除了上述举出的成分以外，还可以使用例如，日本药局方、日本药局方外医药品规格、医药品添加物规格2013(药事日报社，2013年)、医药品添加物辞典2016(日本医药品添加剂协会编，药事日报社，2016年)、handbook of pharmaceutical excipients第7版(pharmaceutical press，2012年)等所记载的一般原料。其他成分可以单独使用1种，也可以2种以上联合使用。
[0123]
作为本实施方式的药物组合物的剂型，没有特别限制，可以为作为药品制剂而一般使用的剂型。可举出例如，片剂、包衣片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、水溶剂、悬浮剂、乳剂等经口施与的剂型；和注射剂、栓剂、皮肤外用剂等非经口施与的剂型等。这些剂型的药物组合物可以按照通用方法(例如，日本药局方记载的方法)进行制剂化。
[0124]
本实施方式的药物组合物的施与方法没有特别限制，可以通过作为药品的施与方法而一般使用的方法施与。例如，可以作为片剂、包衣片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、水溶剂、悬浮剂、乳剂等而经口施与，也可以作为注射剂、输液制剂等单独或与葡萄糖液、林格液等一般的输液混合向静脉内、动脉内、肌肉内、皮内、皮下、腹腔内等施与，可以作为栓剂进行直肠内施与，也可以作为皮肤外用剂向皮肤施与。
[0125]
本实施方式的药物组合物的施与量可以为治疗有效量。治疗有效量只要根据患者的症状、体重、年龄、和性别等、以及药物组合物的剂型、和施与方法等而适当确定即可。
[0126]
例如，关于本实施方式的药物组合物的施与量，在经口施与的情况下，可以例示作为甲基橙皮苷的合计含量每施与单位形态为0.01～500mg，在注射剂的情况下，可以例示作为甲基橙皮苷的合计含量每施与单位形态为0.02～250mg，在栓剂的情况下，可以例示作为甲基橙皮苷的合计含量每施与单位形态为0.01～500mg，在皮肤外用剂的情况下，可以例示作为甲基橙皮苷的合计含量每施与单位形态为0.01～500mg等。
[0127]
本实施方式的药物组合物的施与间隔只要根据患者的症状、体重、年龄、和性别等、以及药物组合物的剂型、和施与方法等而适当确定即可。例如，可以为1天1次或2～3次左右等。
[0128]
本实施方式的药物组合物可以用于由屏障功能的降低引起的症状或疾病的治疗或预防。作为这样的症状或疾病，可列举例如，肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、特应性皮肤炎等。
[0129]
本实施方式的医药组合物例如，可以施与肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、或特应性皮肤炎的患者，为了抑制肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、或特应性皮肤炎的发展而使用。另
外，本实施方式的医药组合物可以施与肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、或特应性皮肤炎的患者，为了治疗肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、或特应性皮肤炎而使用。另外，本实施方式的医药组合物可以用于治疗由聚丝蛋白、内披蛋白、兜甲蛋白、转谷氨酰胺酶1、水孔蛋白3、或密封蛋白1的产生降低引起的症状或疾病。
[0130]
本实施方式的医药组合物可以施与肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、或特应性皮肤炎的发病风险高的患者，用于预防肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、或特应性皮肤炎。
[0131]
(化妆料)
[0132]
在一个实施方式中，本发明提供含有上述的屏障功能改善剂和药学上可接受的载体的用于屏障功能改善的化妆料。
[0133]
在本实施方式的化妆料中，作为药学上可接受的载体，没有特别限制，除了上述举出的以外，还可以使用一般使用于化妆料的载体。可以使用例如，化妆品原料基准第二版注解(日本公定书协会编，药事日报社，1984年)、化妆品原料基准外成分规格(厚生省药务局审查课监修，药事日报社，1993年)、化妆品原料基准外成分规格追补(厚生省药务局审查课监修，药事日报社，1993年)、化妆品种别许可基准(厚生省药务局审查课监修，药事日报社，1993年)、化妆品原料辞典(日光
ケミカルズ
社，平成3年)、ctfa的international cosmetic ingredient dictionary and handbook 2002第9版vol.1～4等所记载的一般原料。
[0134]
药学上可接受的载体可以单独使用1种，也可以2种以上联合使用。
[0135]
本实施方式的化妆料除了屏障功能改善剂和药学上可接受的载体以外，还可以含有其他成分。作为其他成分，没有特别限制，可以使用一般的化妆品添加物。另外，作为其他成分，也可以使用除上述的屏障功能改善剂以外的活性成分。作为其他成分即化妆品添加物和活性成分，除了上述举出的以外，还可以使用例如，化妆品原料基准第二版注解(日本公定书协会编，药事日报社，1984年)、化妆品原料基准外成分规格(厚生省药务局审查课监修，药事日报社，1993年)、化妆品原料基准外成分规格追补(厚生省药务局审查课监修，药事日报社，1993年)、化妆品种别许可基准(厚生省药务局审查课监修，药事日报社，1993年)、化妆品原料辞典(日光
ケミカルズ
社，平成3年)、ctfa的international cosmetic ingredient dictionary and handbook 2002第9版vol.1～4等所记载的一般原料。其他成分可以单独使用1种，也可以2种以上联合使用。
[0136]
作为本实施方式的化妆料的形态，没有特别限制，可以为作为化妆料而一般使用的形态。可举出例如，香波、护发素、整发剂等毛发用化妆料；洗面奶、清洁剂、化妆水、乳液、洗剂、霜、凝胶、防晒剂、面膜(pack)、面膜(mask)、美容液等基础化妆料；粉底类、隔离霜、口红类、唇蜜、腮红类等彩妆化妆料；身体洗涤料、爽身粉、防臭化妆料等身体化妆料等。这些化妆料可以按照通用方法制造。
[0137]
另外，作为本实施方式的化妆料的剂型，没有特别限制，可举出例如，水包油(o/w)型、油包水(w/o)型、w/o/w型、o/w/o型等乳化型、乳化高分子型、油性、固体、液状、膏状、棒状、挥发性油型、粉状、冻状、凝胶状、糊状、乳霜状、片状、膜状、雾状、喷射型、气溶胶状、多层状、泡状、薄片(flake)状等。
[0138]
本实施方式的化妆料的使用量不特别限制，可以为为了改善屏障功能而有效的量。
[0139]
例如，本实施方式的化妆料的使用量作为甲基橙皮苷的合计含量每1次使用为
0.01～500mg，例如可以为0.15～300mg，例如可以为0.15～200mg，例如可以为0.2～100mg。
[0140]
本实施方式的化妆料的使用间隔不特别限制，例如可以为1天1次或2～3次左右等。
[0141]
本实施方式的化妆料可以用于缓和由屏障功能的降低引起的症状。或者，可以为了预防由屏障功能的降低引起的症状的发病，而对这些症状的发病风险高的受检者在更加日常的护肤、化妆中使用。
[0142]
(其他实施方式)
[0143]
在一个实施方式中，本发明提供改善屏障功能的方法，包括将甲基橙皮苷施与对象的工序。
[0144]
在一个实施方式中，本发明提供促进聚丝蛋白、内披蛋白、兜甲蛋白、或转谷氨酰胺酶1的产生的方法，包括将甲基橙皮苷施与对象的工序。
[0145]
在一个实施方式中，本发明提供促进水孔蛋白3的产生的方法，包括将甲基橙皮苷施与对象的工序。
[0146]
在一个实施方式中，本发明提供促进密封蛋白1的产生的方法，包括将甲基橙皮苷施与对象的工序。
[0147]
在一个实施方式中，本发明提供用于改善屏障功能的甲基橙皮苷。
[0148]
在一个实施方式中，本发明提供用于促进聚丝蛋白、内披蛋白、兜甲蛋白、或转谷氨酰胺酶1的产生的甲基橙皮苷。
[0149]
在一个实施方式中，本发明提供用于促进水孔蛋白3的产生的甲基橙皮苷。
[0150]
在一个实施方式中，本发明提供用于促进密封蛋白1的产生的甲基橙皮苷。
[0151]
在一个实施方式中，本发明提供用于预防或治疗肌肤粗糙、干燥肌肤、银屑病、或特应性皮肤炎的甲基橙皮苷。
[0152]
在一个实施方式中，本发明提供甲基橙皮苷用于制造屏障功能改善剂的用途。
[0153]
在一个实施方式中，本发明提供甲基橙皮苷用于制造聚丝蛋白、内披蛋白、兜甲蛋白、或转谷氨酰胺酶1的产生促进剂的用途。
[0154]
在一个实施方式中，本发明提供甲基橙皮苷用于制造水孔蛋白3的产生促进剂的用途。
[0155]
在一个实施方式中，本发明提供甲基橙皮苷用于制造密封蛋白1的产生促进剂的用途。
[0156]
在一个实施方式中，本发明提供甲基橙皮苷用于制造屏障功能改善用组合物的用途。
[0157]
在一个实施方式中，本发明提供甲基橙皮苷用于制造聚丝蛋白、内披蛋白、兜甲蛋白、或转谷氨酰胺酶1的产生促进用组合物的用途。
[0158]
在一个实施方式中，本发明提供甲基橙皮苷用于制造水孔蛋白3的产生促进用组合物的用途。
[0159]
在一个实施方式中，本发明提供甲基橙皮苷用于制造密封蛋白1的产生促进用组合物的用途。
[0160]
实施例
[0161]
以下，通过实施例更详细地说明本发明，但本发明不受这些例子限定。
[0162]
[甲基橙皮苷]
[0163]
在以下的试验例中，昭和电工株式会制的甲基橙皮苷(制品名：甲基橙皮苷)。该制品是所述查耳酮体-1～3和所述黄烷酮体-1～3的合计含量在组合物总量中为97.5质量％以上的混合物。在试验例1和试验例2中，使用将甲基橙皮苷溶解在dmso水溶液中而得的“甲基橙皮苷dmso水溶液”。
[0164]
[橙皮苷]
[0165]
在以下的试验例中，使用了东京化成工业株式会社制的橙皮苷。在试验例1和试验例2中，使用了将橙皮苷溶解于dmso水溶液而得的“橙皮苷dmso水溶液”。
[0166]
[试验例1]分化标志物、水孔蛋白3、和密封蛋白1的表达促进效果
[0167]
通过以下的方法，检验了人3维模型皮肤中的分化标志物(聚丝蛋白、内披蛋白、兜甲蛋白、转谷氨酰胺酶1)、水孔蛋白3、和密封蛋白1的表达促进效果。
[0168]
将人3维模型皮肤(
クラボウ
社制)移植到epi-100培养基(
クラボウ
社制)中，培养30分钟。接着，在实施例1中，将在0.1％(v/v)dmso水溶液中溶解甲基橙皮苷0.2％(v/v)而得的甲基橙皮苷dmso水溶液在皮肤的表面添加30μl，培养6小时。在比较例1中，将在0.1％(v/v)dmso水溶液中溶解橙皮苷0.2％(v/v)而得的橙皮苷dmso水溶液在皮肤的表面添加30μl，培养6小时。在参考例1中，将0.1％(v/v)dmso水溶液在皮肤的表面添加，培养6小时。然后，将皮肤用生理盐水洗涤，用altfix(注册商标)(株式会社
ファルマ
制)固定后，包埋在石蜡中而制作皮肤组织切片。
[0169]
将切片进行脱石蜡处理、脱水处理之后，对皮肤组织实施免疫抗体染色。作为1抗使用聚丝蛋白、内披蛋白、兜甲蛋白、水孔蛋白3、密封蛋白1(均为
アブカム
社制)和转谷氨酰胺酶1(novus biologicals社制)。各抗体以聚丝蛋白(1:200)、内披蛋白(1:150)、兜甲蛋白(1:150)、转谷氨酰胺酶1(1:500)、水孔蛋白3(1:500)、密封蛋白1(1:100)的稀释比使用含0.05％吐温20的磷酸缓冲液进行稀释。作为2抗，将辣根来源的过氧化物酶结合抗兔igg抗体(
アブカム
社制)用含0.05％吐温20的磷酸缓冲液稀释到1:200而使用。在抗体反应后、洗涤后，使用过氧化物酶显色底物3,3
’‑
二氨基联苯胺四盐酸盐(和光纯药株式会社制)进行显色反应。
[0170]
将各组织用nikon ts1观察，进行照片拍摄。对于所得的3个独立图像分别使用imagej软件(nih)进行与蛋白质表达量相关的亮度值的定量分析。实施例1和比较例1的各分析结果用以参考例1的平均分析值作为1.00时的相对值表示。将所拍摄的照片的全响应例示于图1，将定量分析结果示于表5。
[0171]
表5
[0172][0173]
根据图1和表5所示的结果，在添加了甲基橙皮苷dmso水溶液的实施例1中，与添加了dmso水溶液的参考例1、和添加了橙皮苷dmso水溶液的比较例1相比，对于作为分化标志物的聚丝蛋白、内披蛋白、兜甲蛋白、和转谷氨酰胺酶1、以及水孔蛋白3、作为紧密连接的结构体的密封蛋白1的全部确认了表达促进效果。
[0174]
[试验例2]皮肤的经表皮水分散失量(tewl)的改善效果
[0175]
通过以下的方法检验了人3维模型皮肤中的经表皮水分散失量(tewl)的改善效果。
[0176]
将人3维模型皮肤(
クラボウ
社制)移植到epi-100培养基(
クラボウ
社制)，培养30分钟。接着，在实施例2中，将在0.1％(v/v)dmso水溶液中溶解甲基橙皮苷0.2％(v/v)而得的甲基橙皮苷dmso水溶液在皮肤的表面添加30μl，培养6小时。在比较例2中，将在0.1％(v/v)dmso水溶液中溶解橙皮苷0.2％(v/v)而得的橙皮苷dmso水溶液在皮肤的表面添加30μl，培养6小时。在参考例2中，将0.1％(v/v)dmso水溶液在皮肤的表面添加，培养6小时。然后，将皮肤用磷酸缓冲液洗涤，进一步培养，将添加上述的各试样后72小时的经表皮水分散失量(tewl)用vaposcan(日本
アッシュ
株式会社制)进行测定。实施例2和比较例2的测定值用以参考例2的测定值作为1.00时的相对值表示。将结果示于表6
[0177]
表6
[0178][0179]
根据表6所示的结果，在添加了甲基橙皮苷dmso水溶液的实施例2中，与添加了dmso水溶液的参考例2、和添加了橙皮苷dmso水溶液的比较例2相比，确认了经表皮水分散失量(tewl)降低、屏障功能提高。
[0180]
[试验例3]通过屏障功能改善用组合物的使用试验进行的感官评价
[0181]
制作表8～10所示的屏障功能改善用组合物。表8(比较例3～5、实施例3～4)表示化妆水的处方。表9(比较例6～8、实施例5～6)表示乳膏的处方。表10(比较例9～11、实施例7～8)表示凝胶美容液的处方。
[0182]
将实施例3～8、比较例3～11的各处方的试样以3名女性作为对象，在下臂内侧每1天在晚间涂布1次，连续涂布3天。基于表7所示的分数判定使用开始前和使用结束后的试验
部位的“干燥”、“发硬感”、和肌肤粗糙所伴随的“发痒
·
针刺感”而进行感官评价。试验期间和试验后受检者均没有被发现试验部位中的皮肤刺激反应等异常。
[0183]
将感官评价的分数平均值示于表8～10。分数平均值越低，则表示作为屏障功能改善用组合物的使用感越优异。
[0184]
表7
[0185][0186]
表8
[0187][0188]
表9
[0189][0190]
表10
[0191][0192]
根据表8～10所示的结果，实施例3～8的处方与比较例3～11的处方相比，确认了干燥、发硬感、发痒
·
针刺感的各分数平均较低，作为屏障功能改善用组合物的有用性高。
[0193]
产业可利用性
[0194]
根据本发明，提供能够有效地改善屏障功能的屏障功能改善剂、和含有所述屏障功能改善剂的屏障功能改善用组合物。
[0195]
以上说明了本发明的优选实施例，但本发明不限于这些实施例。在不脱离本发明的宗旨的范围内，可以进行构成的添加、省略、替换、和其他变更。本发明不受前述的说明限
定，仅受权利要求的范围限定。