一种视黄醇/脂质体复合材料及制备方法与流程

1.本发明属于脂质体技术领域，涉及一种视黄醇/脂质体复合材料及制备方法。


背景技术：

2.视黄醇又名a醇，通常溶于无水乙醇、甲醇、氯仿、醚、脂肪和油类，几乎不溶于水或甘油，且视黄醇在水中的溶解度仅为6.4*10-5
g/ml。视黄醇属于维生素a家族的一员，是促进细胞更新的重要营养元素之一，同时也是皮肤医学界公认的高活性抗老成分。
3.视黄醇在体内转化成a酸后，能够结合细胞上的6种a酸受体产生无数种生理作用，其中，该生理作用就包括防御炎症调节表皮细胞的生长分化，促进胶原蛋白的生成并调节细胞再生速度，细致毛孔、均匀肤色、抚平细纹还能提亮暗沉皮肤、使皮肤变得更加红润有光泽；促进真皮层的成纤维细胞增殖，生成更多的胶原蛋白和弹性纤维，减少胶原蛋白的分解和氧化，使得皮肤更加饱满、紧致。但视黄醇化学性质十分活泼，对光、热、氧气等因素十分敏感，在常规条件下容易被氧化分解变成其他无活性物质，这给储存和使用带来极大不便。另外，视黄醇是脂溶性维生素，分子量大，存在透皮吸收性差、生物利用度低等缺点，因此，在应用方面受到一定程度的限制。
4.脂质体是一种由磷脂和胆固醇等成分组成的类似细胞膜的双分子层结构，内外表面均为亲水性，双分子层之间为亲脂性。当单层脂分子铺在水面上时，其极性端头部插入水相而非极性尾部面向空气界面，搅动后形成双层脂分子的球形脂质体结构。脂质体具有生物相容性高、稳定性好、靶向性强等优点，起初是一种运用于医药学领域的载药手段，主要用于增强药物的透皮吸收能力。但随着不断的发展，脂质体也广泛应用于化妆品领域。
5.将视黄醇包裹于脂质体中可以促进透皮吸收、控制有效成分缓慢释放、降低视黄醇的刺激性、提高视黄醇的稳定性，这使得视黄醇可以更广泛的应用于化妆品、药品等领域。现有将视黄醇包裹于脂质体中的方法主要是将视黄醇、膜材、稳定剂等成分溶解在有机溶剂中，通过混合形成包裹有视黄醇的脂质体。然而，视黄醇在有机溶剂中的溶解浓度有限，制备得到的脂质体中的视黄醇的含量较低。另外，在视黄醇溶解过程中，有机溶剂容易挥发，对操作者危害较大。


技术实现要素：

6.本发明的目的是提供一种视黄醇/脂质体复合材料及制备方法，以解决现有脂质体中的视黄醇的含量较低的问题。
7.为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：本发明提供一种视黄醇/脂质体复合材料，该复合材料的制备原料包括：视黄醇、水溶性物质、膜材、稳定剂、抗氧化剂和有机溶剂，其中，所述水溶性物质包括β环糊精、羟丙基β环糊精和十二烷基三甲基氯化铵中的至少一种。
8.为克服视黄醇溶解性的问题，本技术将视黄醇增溶于水相中，通过与油相混合后，形成包裹视黄醇的脂质体，大大提高脂质体中视黄醇的浓度。本技术中采用的水溶性物质
包括β环糊精、羟丙基β环糊精和十二烷基三甲基氯化铵中的至少一种。β环糊精、羟丙基β环糊精或十二烷基三甲基氯化铵能够将视黄醇包合，使其增溶于水中。膜材为包裹视黄醇的物质，本技术中的膜材包括大豆卵磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇和胆固醇中的至少一种。稳定剂能够增加视黄醇/脂质体复合材料制备过程中溶液的稳定性，降低表面张力，使视黄醇更好的包裹在膜材中。本技术中的稳定剂包括胆固醇、琥珀酸胆固醇和吐温80中的至少一种。抗氧化剂能够增强视黄醇的抗氧化能力，防止视黄醇被氧化。本技术中的抗氧化剂包括水溶性维生素e、α生育酚和辅酶q10中的至少一种。有机溶剂用于溶解膜材、稳定剂和抗氧化剂，本技术中的有机溶剂包括乙醚、无水乙醇、氯仿和异丙醇中的至少一种。
9.进一步，本发明提供的视黄醇/脂质体复合材料的制备原料按照质量包括：视黄醇、水溶性物质、膜材、稳定剂、抗氧化剂、有机溶剂和注射用水。较为优选的，本发明提供的视黄醇/脂质体复合材料的制备原料按照质量和体积包括：1-10g视黄醇、5-80g水溶性物质、1-10g膜材、0.1-0.5g稳定剂、0.01-1.1g抗氧化剂、200-300ml有机溶剂和200-300ml注射用水。更为优选的，本发明提供的视黄醇/脂质体复合材料的制备原料按照质量和体积包括：10g视黄醇、80g水溶性物质、10g膜材、0.5g稳定剂、1.1g抗氧化剂、300ml有机溶剂和300ml注射用水。
10.本发明提供一种视黄醇/脂质体复合材料的制备方法，该方法包括：s01：将视黄醇加入水性溶液中，超声、搅拌，得到视黄醇水溶液；其中，所述水性溶液包括β环糊精、羟丙基β环糊精和十二烷基三甲基氯化铵中的至少一种溶解于注射用水形成。
11.将β环糊精、羟丙基β环糊精和/或十二烷基三甲基氯化铵采用注射用水分别配制成水性溶液。将视黄醇加入到水性溶液中。在超声作用下，搅拌视黄醇完全溶解在水性溶液中，形成视黄醇水溶液。
12.s02：将膜材、稳定剂、抗氧化剂和有机溶剂混合，超声溶解，得到有机混合液。
13.将膜材、稳定剂、抗氧化剂加入到有机溶剂中，在超声作用下，完全溶解在有机溶剂中，形成有机混合液。其中，膜材选自大豆卵磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇和胆固醇中的至少一种。稳定剂选自胆固醇、琥珀酸胆固醇和吐温80中的至少一种。抗氧化剂选自水溶性维生素e、α生育酚和辅酶q10中的至少一种。有机溶剂选自乙醚、无水乙醇、氯仿和异丙醇中的至少一种。
14.s03：所述视黄醇水溶液和所述有机混合液混合后搅拌，得到一级脂质体溶液。
15.将视黄醇水溶液和有机混合液使用蠕动泵进行混合，混合后使用搅拌器按照搅拌速度200-500rpm搅拌，得到包裹视黄醇的一级脂质体溶液。
16.s04：所述一级脂质体溶液稀释后，不断循环经过中空纤维柱进行浓缩，得到视黄醇/脂质体复合材料。
17.将包裹视黄醇的一级脂质体溶液采用注射用水稀释。稀释后的一级脂质体溶液经过中空纤维柱，以便于将小于中空纤维柱孔径的游离分子滤除。中空纤维柱内部流出的溶液继续进行过中空纤维柱，中空纤维柱外部的溶液直接排放掉，如此不断往复循环，实现一级脂质体溶液的浓缩，最终得到脂质体内部包裹视黄醇的视黄醇/脂质体复合材料。较为优选的，本技术中的中空纤维柱的孔径为5-30nm。
18.本发明具有以下有益效果：本发明提供了一种视黄醇/脂质体复合材料及制备方法，该制备方法中将视黄醇增溶于水相中，通过与有机混合液中的油相混合后，形成脂质体内部包裹视黄醇的一级脂质体溶液。一级脂质体溶液经过中空纤维柱不断浓缩，形成脂质体内部包裹视黄醇的视黄醇/脂质体复合材料。该方法能有效提高脂质体中视黄醇的浓度，且制备得到的视黄醇/脂质体复合材料中无有毒溶剂残留，且复合材料的稳定性好、包封率高、粒径均匀、能与水互溶、可稳定连续化生产。
具体实施方式
19.下面通过具体的实施例对本发明的技术方案作进一步的解释和说明。
20.实施例1本技术实施例提供一种视黄醇/脂质体复合材料，该复合材料的制备原料按照质量包括10g视黄醇、80g羟丙基β环糊精、10g大豆卵磷脂、0.5g胆固醇、1g水溶性维生素e、0.1gα生育酚、300ml无水乙醇和300ml注射用水。
21.本技术实施例提供一种视黄醇/脂质体复合材料的制备方法，该方法包括：s101：将80g羟丙基β环糊精加入300ml注射用水中，超声搅拌溶解，形成水性溶液。将10g视黄醇加入到水性溶液中。在超声作用下，搅拌视黄醇完全溶解在水性溶液中，形成视黄醇水溶液。
22.s102：将10g大豆卵磷脂、0.5g胆固醇、1g水溶性维生素e、0.1gα生育酚，加入到300ml无水乙醇中，超声溶解，得到有机混合液。
23.s103：将视黄醇水溶液和有机混合液使用转速为100rpm的蠕动泵进行混合，混合后使用搅拌器按照搅拌速度200rpm搅拌10min，得到包裹视黄醇的一级脂质体溶液。
24.s104：将包裹视黄醇的一级脂质体溶液采用3倍体积的注射用水稀释。稀释后的一级脂质体溶液通过蠕动泵连续泵入孔径为20nm的中空纤维柱中。中空纤维柱内部流出的溶液继续进行过中空纤维柱，中空纤维柱外部的溶液直接排放掉，如此不断往复循环，实现一级脂质体溶液的浓缩，最终得到300ml脂质体内部包裹视黄醇的视黄醇/脂质体复合材料。
25.实施例2本技术实施例提供一种视黄醇/脂质体复合材料，该复合材料的制备原料按照质量包括5g视黄醇、30gβ环糊精、2g十二烷基三甲基氯化铵、5g磷脂酰胆碱、0.5g琥珀酸胆固醇、0.2gα生育酚、200ml乙醚和200ml注射用水。
26.本技术实施例提供一种视黄醇/脂质体复合材料的制备方法，该方法包括：s201：将30gβ环糊精、2g十二烷基三甲基氯化铵加入200ml注射用水中，超声搅拌溶解，形成水性溶液。将5g视黄醇加入到水性溶液中。在超声作用下，搅拌视黄醇完全溶解在水性溶液中，形成视黄醇水溶液。
27.s202：将5g磷脂酰胆碱、0.5g琥珀酸胆固醇、0.2gα生育酚，加入到200ml乙醚中，超声溶解，得到有机混合液。
28.s203：将视黄醇水溶液和有机混合液使用转速为100rpm的蠕动泵进行混合，混合后使用搅拌器按照搅拌速度500rpm搅拌10min，得到包裹视黄醇的一级脂质体溶液。
29.s204：将包裹视黄醇的一级脂质体溶液采用3倍体积的注射用水稀释。稀释后的一
级脂质体溶液通过蠕动泵连续泵入孔径为5nm的中空纤维柱中。中空纤维柱内部流出的溶液继续进行过中空纤维柱，中空纤维柱外部的溶液直接排放掉，如此不断往复循环，实现一级脂质体溶液的浓缩，最终得到200ml脂质体内部包裹视黄醇的视黄醇/脂质体复合材料。
30.实施例3本技术实施例提供一种视黄醇/脂质体复合材料，该复合材料的制备原料按照质量包括1g视黄醇、80g羟丙基β环糊精、8g磷脂酰乙醇胺、0.5g吐温80、0.2g辅酶q10、200ml氯仿和300ml注射用水。
31.本技术实施例提供一种视黄醇/脂质体复合材料的制备方法，该方法包括：s301：将80g羟丙基β环糊精加入300ml注射用水中，超声搅拌溶解，形成水性溶液。将1g视黄醇加入到水性溶液中。在超声作用下，搅拌视黄醇完全溶解在水性溶液中，形成视黄醇水溶液。
32.s302：将8g磷脂酰乙醇胺、0.5g吐温80、0.2g辅酶q10，加入到200ml氯仿中，超声溶解，得到有机混合液。
33.s303：将视黄醇水溶液和有机混合液使用转速为100rpm的蠕动泵进行混合，混合后使用搅拌器按照搅拌速度300rpm搅拌10min，得到包裹视黄醇的一级脂质体溶液。
34.s304：将包裹视黄醇的一级脂质体溶液采用3倍体积的注射用水稀释。稀释后的一级脂质体溶液通过蠕动泵连续泵入孔径为30nm的中空纤维柱中。中空纤维柱内部流出的溶液继续进行过中空纤维柱，中空纤维柱外部的溶液直接排放掉，如此不断往复循环，实现一级脂质体溶液的浓缩，最终得到300ml脂质体内部包裹视黄醇的视黄醇/脂质体复合材料。
35.实施例4本技术实施例提供一种视黄醇/脂质体复合材料，该复合材料的制备原料按照质量包括5g视黄醇、30g十二烷基三甲基氯化铵、5g磷脂酰肌醇、0.5g胆固醇、0.2gα生育酚、200ml异丙醇和200ml注射用水。
36.本技术实施例提供一种视黄醇/脂质体复合材料的制备方法，该方法包括：s401：将30g十二烷基三甲基氯化铵加入200ml注射用水中，超声搅拌溶解，形成水性溶液。将5g视黄醇加入到水性溶液中。在超声作用下，搅拌视黄醇完全溶解在水性溶液中，形成视黄醇水溶液。
37.s402：将5g磷脂酰肌醇、0.5g胆固醇、0.2gα生育酚，加入到200ml异丙醇中，超声溶解，得到有机混合液。
38.s403：将视黄醇水溶液和有机混合液使用转速为100rpm的蠕动泵进行混合，混合后使用搅拌器按照搅拌速度300rpm搅拌10min，得到包裹视黄醇的一级脂质体溶液。
39.s404：将包裹视黄醇的一级脂质体溶液采用3倍体积的注射用水稀释。稀释后的一级脂质体溶液通过蠕动泵连续泵入孔径为20nm的中空纤维柱中。中空纤维柱内部流出的溶液继续进行过中空纤维柱，中空纤维柱外部的溶液直接排放掉，如此不断往复循环，实现一级脂质体溶液的浓缩，最终得到200ml脂质体内部包裹视黄醇的视黄醇/脂质体复合材料。
40.实施例5本技术实施例提供一种视黄醇/脂质体复合材料，该复合材料的制备原料按照质量包括5g视黄醇、30g十二烷基三甲基氯化铵、5g磷脂酰胆碱、0.5g胆固醇、0.5g琥珀酸胆固醇、0.2g水溶性维生素e、200ml无水乙醇和200ml注射用水。
41.本技术实施例提供一种视黄醇/脂质体复合材料的制备方法，该方法包括：s501：将30g十二烷基三甲基氯化铵加入200ml注射用水中，超声搅拌溶解，形成水性溶液。将5g视黄醇加入到水性溶液中。在超声作用下，搅拌视黄醇完全溶解在水性溶液中，形成视黄醇水溶液。
42.s502：将5g磷脂酰胆碱、0.5g胆固醇、0.5g琥珀酸胆固醇、0.2g水溶性维生素e，加入到200ml无水乙醇中，超声溶解，得到有机混合液。
43.s503：将视黄醇水溶液和有机混合液使用转速为100rpm的蠕动泵进行混合，混合后使用搅拌器按照搅拌速度300rpm搅拌10min，得到包裹视黄醇的一级脂质体溶液。
44.s504：将包裹视黄醇的一级脂质体溶液采用3倍体积的注射用水稀释。稀释后的一级脂质体溶液通过蠕动泵连续泵入孔径为20nm的中空纤维柱中。中空纤维柱内部流出的溶液继续进行过中空纤维柱，中空纤维柱外部的溶液直接排放掉，如此不断往复循环，实现一级脂质体溶液的浓缩，最终得到200ml脂质体内部包裹视黄醇的视黄醇/脂质体复合材料。
45.实施例6本技术实施例提供一种视黄醇/脂质体复合材料，该复合材料的制备原料按照质量包括5g视黄醇、10g羟丙基β环糊精、3g大豆卵磷脂、0.3g胆固醇、0.1g琥珀酸胆固醇、0.01g水溶性维生素e、200ml无水乙醇和200ml注射用水。
46.本技术实施例提供一种视黄醇/脂质体复合材料的制备方法，该方法包括：s601：将10g羟丙基β环糊精加入200ml注射用水中，超声搅拌溶解，形成水性溶液。将5g视黄醇加入到水性溶液中。在超声作用下，搅拌视黄醇完全溶解在水性溶液中，形成视黄醇水溶液。
47.s602：将3g大豆卵磷脂、0.3g胆固醇、0.1g琥珀酸胆固醇、0.01g水溶性维生素e，加入到200ml无水乙醇中，超声溶解，得到有机混合液。
48.s603：将视黄醇水溶液和有机混合液使用转速为100rpm的蠕动泵进行混合，混合后使用搅拌器按照搅拌速度300rpm搅拌10min，得到包裹视黄醇的一级脂质体溶液。
49.s604：将包裹视黄醇的一级脂质体溶液采用3倍体积的注射用水稀释。稀释后的一级脂质体溶液通过蠕动泵连续泵入孔径为20nm的中空纤维柱中。中空纤维柱内部流出的溶液继续进行过中空纤维柱，中空纤维柱外部的溶液直接排放掉，如此不断往复循环，实现一级脂质体溶液的浓缩，最终得到200ml脂质体内部包裹视黄醇的视黄醇/脂质体复合材料。
50.本技术实施例对制备的视黄醇/脂质体复合材料进行包封率检测。具体的，将视黄醇/脂质体复合材料加入到适量甲醇溶液中，破乳后，使用高效液相色谱检测包封在脂质体中的视黄醇浓度，根据离心前后视黄醇浓度来计算包裹视黄醇的脂质体的包封率。经过检测，视黄醇/脂质体复合材料的包封率为（85.26
±
1.13）%，包封率较高。这说明本技术实施例提供的视黄醇/脂质体复合材料中，脂质体能够很大限度的包裹视黄醇，对视黄醇具有良好的保护作用。
51.本技术实施例还对制备的视黄醇/脂质体复合材料进行粒径以及zeta电位检测。具体的，采用纳米粒度仪和zeta电位分析仪分别测定视黄醇/脂质体复合材料的粒径、zeta电位。经过检测，视黄醇/脂质体复合材料的粒径为63.72
±
1.26nm，zeta电位为-35.68
±
0.56mv。zeta电位的检测说明本技术实施例制备的视黄醇/脂质体复合材料微粒间的排斥力大小适中，且能够有效抵抗粒子间的聚集，整个体系具有较高的稳定性。
52.以上所述仅为本技术的优选实施例而已，并不用于限制本技术，对于本领域的技术人员来说，本技术可以有各种更改和变化。凡在本技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本技术的保护范围之内。