一种检测黄瓜绿斑驳花叶病毒和小西葫芦黄花叶病毒的引物组、试剂盒

技术特征：
1.一种检测黄瓜绿斑驳花叶病毒和小西葫芦黄花叶病毒的引物组，其特征在于，包括：c8f和c8r、z10f和z10r’，探针c8p、z10p’；核苷酸序列如下：c8f：5
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tccctgtctgcgttaccct-3’，如seq id no.1所示；c8r：5
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[biotin]agaagcgaaacgaagataggc-3’如seq id no.2所示；探针c8p：5
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[fam]ctagattcccagatgcgggtttttacgcttt[thf]cctcaacggtcctgt[c3-spacer]-3’如seq id no.3所示；z10f：5
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ttcaaatacaataaacccgtca-3’，如seq id no.4所示；z10r’：5
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[tamra]aaatcatctagcccttcaaaat-3’，如seq id n o.5所示；探针z10p’：5
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[digoxin]cggttcattacagatcccgaggaaatctaca[thf]actctttgaatatga[c3-spacer]-3’如seq id no.6所示。2.基于上述引物组的试剂盒。3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，还包括阳性标准品。4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性标准品的制备方法：利用引物扩增cgmmv全长，纯化回收扩增片段，与pce-zerovector进行同源重组，转化，提取质粒为pce-cgmmv；利用引物分2段扩增zymv全长，将两个片段纯化后同时与pce-zerovector进行同源重组，转化，提取质粒为pce-zymv。5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，还包括反应试剂、双标试纸条。6.权利要求1所述引物组，或权利要求2～5任一所述试剂盒在农业生产中的应用。

技术总结
本发明公开了一种检测黄瓜绿斑驳花叶病毒和小西葫芦黄花叶病毒的引物组、试剂盒。涉及植物病毒病害检测诊断技术领域。包括：C8F和C8R、Z10F和Z10R’，探针C8P、Z10P’。本发明与其他等温扩增技术相比较，更加简单方便、反应更加快速、准确、能更好的与检测平台结合等优点。与现有常用的的ELISA检测技术相比，具有更高的特异性和灵敏性。与传统RT-PCR检测相比，操作步骤简单，不需要单独进行反转录步骤，与普通PCR相比，实验时间只有短短十几分钟，且不需要使用PCR仪这样的精密昂贵仪器。在同一条件体系下可以同时检测出是否感染CGMMV和/或ZYMV病毒。ZYMV病毒。ZYMV病毒。


技术研发人员：杨柳 任春梅 缪倩 陆芳 程兆榜 季英华
受保护的技术使用者：江苏省农业科学院
技术研发日：2022.12.28
技术公布日：2023/8/3