一种香蜂草中迷迭香酸的提取纯化方法与流程

1.本发明属于植物提取技术领域，特别涉及一种香蜂草中迷迭香酸的提取纯化方法。


背景技术：

2.香蜂草叶片提取物包含黄酮类(flavonoids)、萜酸类(terpene acids)、挥发油类、醇和酚类化合物的苷和咖啡酸衍生物。特别地，香蜂草叶片中大量包含的黄酮类包括木犀草苷、秋英甙(cosmosin)、鼠李柠檬素(rhamnocitrin)和异槲皮苷；并且包括乌苏酸作为萜酸。这些非挥发的成分中，包括迷迭香酸，并且以约4.7％的量包括咖啡酸衍生物。挥发油中包括香叶醇、橙花醛、香茅醛和丁子香酚。除此之外，香蜂草叶片提取物中包含香豆酸、多酚类和具有弱芳香性的肉桂酸等。香蜂草叶片提取物中的主要的药理学成分的作用如以下描述：迷迭香酸具有强烈的抗炎性和退热作用，并且包括在叶中的精油已经用于治疗疾病，特别是抑郁症、神经性头痛、记忆丧失、神经痛、发热等。除此之外，还已知迷迭香酸具有镇静、抗菌、抗病毒和抗激素作用。当前，已经将已知包含大量迷迭香酸的干燥的香蜂草叶片提取物用作血液循环增强剂组分。咖啡酸包含在咖啡和诸如水果、蔬菜、草本植物等植物中。已知它是作为癌症抑制剂和作为体内和体外的优异的抗氧化剂起作用。
3.cn200880103608.x涉及香蜂草提取物的制备工艺，其特征是：用50-100％c1-c6醇提取香蜂草，浓缩，随后将浓缩的醇提物悬浮在水中，用乙酸乙酯萃取，干燥，得到香蜂草的乙酸乙酯提取物。但其提取溶剂为50-100％c1-c6醇，相对于水提，其提取成本较高；提取、浓缩后采用乙酸乙酯萃取，气味大、易乳化、操作步骤较繁琐，乙酸乙酯残留控制成本比乙醇高。同时，其强调通过醇提、乙酸乙酯萃取得到相应的香蜂草提取物，并未涉及迷迭香酸这一成分的说明以及含量指标的变化。
4.cn201380037668.7涉及香蜂草提取物的制备工艺，其特征是：通过用50％至100％的乙醇回流提取香蜂草叶片，随后过滤并浓缩；收集将用乙酸乙酯和水分馏获得的浓缩物的步骤重复两次产生的乙酸乙酯层；并且随后，浓缩、干燥并粉碎所述乙酸乙酯层。所述香蜂草叶片提取物包含按重量计5％至10％的所述迷迭香酸、按重量计0.5％至1％的所述咖啡酸以及按重量计1％至2％的所述芸香苷。所述香蜂草叶片提取物包含重量比为1:0.1至1:0.2的所述迷迭香酸和所述咖啡酸。但其提取溶剂为50％至100％乙醇，相对于水提，其提取成本较高；提取、浓缩后采用乙酸乙酯萃取，气味大、易乳化、操作步骤较繁琐，乙酸乙酯残留控制成本比乙醇高。同时，其通过醇提、乙酸乙酯萃取得到相应的香蜂草提取物，其迷迭香酸的含量在5％～10％，不能稳定得到10％以上高含量的迷迭香酸，和水提醇沉比其转移率较低，溶剂成本高，经济效益较低。


技术实现要素：

5.本发明所要解决的技术问题是提供一种香蜂草中迷迭香酸的提取纯化方法，该方法通过水提和醇沉两步工艺，能够稳定得到10％以上的含量的迷迭香酸，工艺成本低，效率
高，具有良好的市场应用前景。
6.本发明提供了一种香蜂草中迷迭香酸的提取纯化方法，包括如下步骤：
7.(1)取香蜂草原料加入粉碎机中粉碎至20-40目；将粉碎后的原料加入6-10倍重量体积的水回流提取，过滤；
8.(2)取步骤(1)得到的滤液加入浓缩器中浓缩，加入5-6倍体积的乙醇进行醇沉，固液分离得到滤液；
9.(3)取步骤(2)得到的滤液加入浓缩器中再次浓缩，最后进行干燥，得到迷迭香酸。
10.所述步骤(1)中的回流提取温度为50-100℃，回流提取时间为1-3小时，提取次数为1-3次。
11.所述步骤(2)中的浓缩比重控制为1.10-1.20。
12.所述步骤(2)中的乙醇原始浓度为95％。
13.所述步骤(2)中的醇沉过程中控制乙醇浓度在80-85％，搅拌1-2小时，自然沉降2-12小时。
14.所述步骤(3)中的浓缩比重控制为1.05-1.15。
15.所述步骤(3)中的干燥为真空或喷雾干燥。
16.有益效果
17.本发明通过水提和醇沉两步工艺，能够稳定得到10％以上的含量的迷迭香酸，工艺成本低，效率高，具有良好的市场应用前景。
具体实施方式
18.下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本技术所附权利要求书所限定的范围。
19.实施例1
20.取香蜂草原料加入粉碎机中40目粉碎；称取粉碎后的原料100g加入10倍重量体积的水，80℃回流提取2小时，提取液过滤；料渣8倍重量体积的水，80℃回流提取1小时提取液过滤；料渣6倍重量体积的水，80℃回流提取1小时，提取液过滤。滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.11。浓缩液加入5.2倍体积的95％乙醇，搅拌1小时，自然沉降4h。醇沉料液过滤，滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.15，浓缩液真空或喷雾干燥。
21.实施例2
22.取香蜂草原料加入粉碎机中40目粉碎；称取粉碎后的原料100g加入10倍重量体积的水，100℃回流提取2小时，提取液过滤；料渣8倍重量体积的水，100℃回流提取1小时提取液过滤；料渣6倍重量体积的水，100℃回流提取1小时，提取液过滤。滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.15。浓缩液加入5.5倍体积的95％乙醇，搅拌2小时，自然沉降2h。醇沉料液过滤，滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.10，浓缩液真空或喷雾干燥。
23.实施例3
24.取香蜂草原料加入粉碎机中20目粉碎；称取粉碎后的原料100g加入10倍重量体积的水，80℃回流提取2小时，提取液过滤；料渣8倍重量体积的水，80℃回流提取1小时，提取
液过滤；滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.20。浓缩液加入6倍体积的95％乙醇，搅拌2小时，自然沉降12h。醇沉料液过滤，滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.05，浓缩液真空或喷雾干燥。
25.实施例4
26.取香蜂草原料加入粉碎机中20目粉碎；称取粉碎后的原料100g加入10倍重量体积的水，100℃回流提取2小时，提取液过滤；料渣8倍重量体积的水，100℃回流提取1小时，提取液过滤；滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.18。浓缩液加入5.8倍体积的95％乙醇，搅拌1小时，自然沉降8h。醇沉料液过滤，滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.08，浓缩液真空或喷雾干燥。
27.实施例5
28.取香蜂草原料加入粉碎机中30目粉碎；称取粉碎后的原料100g加入10倍重量体积的水，60℃回流提取2小时，提取液过滤；料渣8倍重量体积的水，60℃回流提取1小时，提取液过滤；料渣6倍重量体积的水，60℃回流提取1小时，提取液过滤。滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.10。浓缩液加入5.5倍体积的95％乙醇，搅拌1.5小时，自然沉降2h。醇沉料液过滤，滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.15，浓缩液真空或喷雾干燥。
29.实施例6
30.取香蜂草原料加入粉碎机中30目粉碎；称取粉碎后的原料100g加入10倍重量体积的水，100℃回流提取2小时，提取液过滤；滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.14。浓缩液加入5.9倍体积的95％乙醇，搅拌1小时，自然沉降4h。醇沉料液过滤，滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.11，浓缩液真空或喷雾干燥。
31.表1为实施例1～6得到的香蜂草提取物中迷迭香酸的含量和转移率数据
[0032][0033]
*迷迭香酸的转移率％＝产品收率％*产品迷迭香酸的含量％/原料迷迭香酸的含量％
[0034]
由以上的实验数据可知，通过水提醇沉的工艺可以把香蜂草提取物中迷迭香酸的含量稳定到10％以上，提取温度越高越得到的样品含量和转移率相应提高，水提3次和水提2次的效果差异不大，综合来看选择20目粉碎，10倍/8倍水100℃提2次，5.8倍乙醇醇沉的工艺生产成本较小。
[0035]
对比例1
[0036]
取原料加入粉碎机中20目粉碎；称取粉碎后的原料100g加入10倍重量体积的水，100℃回流提取2小时，提取液过滤；料渣8倍重量体积的水，100℃回流提取1小时，提取液过滤；滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.14，浓缩液真空或喷雾干燥。
[0037]
对比例2
[0038]
取原料加入粉碎机中20目粉碎；称取粉碎后的原料100g加入10倍重量体积的水，100℃回流提取2小时，提取液过滤；料渣8倍重量体积的水，100℃回流提取1小时，提取液过滤；滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.18，加入等体积的乙酸乙酯，搅拌10分钟，静止，分层；下层再加入等体积的乙酸乙酯，搅拌10分钟，静止，分层，如此重复萃取3次，萃取层补水浓缩，最后比重控制为1.15，浓缩液真空或喷雾干燥。
[0039]
对比例3
[0040]
取原料加入粉碎机中20目粉碎；称取粉碎后的原料100g加入10倍重量体积的80％乙醇，加热回流提取2小时，提取液过滤；料渣8倍重量体积80％乙醇，加热回流提取1小时，提取液过滤；滤液加入浓缩器中浓缩，最终比重控制为1.18，浓缩液真空或喷雾干燥。
[0041]
对比例4
[0042]
取原料加入粉碎机中20目粉碎；称取粉碎后的原料100g加入10倍重量体积的80％乙醇，加热回流提取2小时，提取液过滤；料渣8倍重量体积80％乙醇，加热回流提取1小时，提取液过滤；滤液加入浓缩器中浓缩，比重控制为1.18，加入等体积的乙酸乙酯，搅拌10分钟，静止，分层；下层再加入等体积的乙酸乙酯，搅拌10分钟，静止，分层，如此重复萃取3次，萃取层补水浓缩，最后比重控制为1.15，浓缩液真空或喷雾干燥。
[0043]
表2为对比例1～4和实施例4迷迭香酸含量和转移率的数据对比
[0044][0045][0046]
*迷迭香酸的转移率％＝产品收率％*产品迷迭香酸的含量％/原料迷迭香酸的含量％
[0047]
由数据对比可知，水提和醇提工艺对迷迭香酸的转移率差异较小，在1.5％左右，但醇提时迷迭香酸的含量明显高于水提工艺。不管是水提、还是醇提工艺，要想制备10％迷迭香酸的香蜂草提取物还需进一步纯化。水提醇沉、醇提后乙酸乙酯萃取都可以制备10％迷迭香酸的香蜂草提取物，从生产成本来看，水提醇沉工艺最理想，其使用的乙醇不到醇提工艺的十分之一，还没有乙酸乙酯残留的问题，生产周期较醇提后萃取更短，综合来看采用水提后醇沉工艺生产含量高于10％迷迭香酸的香蜂草提取物经济效益较好。