一种生物蛋白硒植物营养菌剂的方法与流程

1.本发明涉及植物营养菌剂技术领域，尤其涉及一种生物蛋白硒植物营养菌剂的方法。


背景技术：

2.猪尿沼液是植物营养菌剂主要原材料之一，猪尿沼液与莹光菌、酵母菌枯草芽孢杆菌等多种有益菌群及多种氨基酸和多种微量元素作用下发酵而成生物植物营养菌剂。菌剂中含有和植物必需的氮、磷、钾蛋白等多种对植物有益成份，但是缺少硒元素。现在市场缺少富硒蔬菜和水果，如果能从植物菌剂中获得到硒来增加水果蔬菜的含硒量，用来补充人体所需要的硒，将是一项不错的选择。
3.现在市场也有纳米硒，但是纳米硒毒性较重，会使植物菌剂在发酵过程中益生菌大量死亡，菌液活计数达不到菌剂的要求，影响菌剂的质量，所以我们用脱毒生物蛋白硒代替纳米硒。


技术实现要素：

4.基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种生物蛋白硒植物营养菌剂的方法。
5.本发明提出的一种生物蛋白硒植物营养菌剂的方法，包括以下步骤：
6.s1:将原料组分如下，均为重量纳米硒4～10份，复合微量元素10～30份，酵母粉15～30，蛋白胨15～30份，葡萄糖40～80份，氯化钠15～20份，纯净水3000～6000份。
7.s2:用容器将原料搅拌混合，混合液ph5.0-6.0溶解后将原料打入一级罐，采用湿热法对液体培养基进行灭菌，温度121℃，保温20－30分钟，降温冷却，温度34-37℃。
8.s3:将枯草芽孢菌悬液按1-5％接入降温的种子液体培养基中。
9.s4：原材料组分如下，均为重量份纳米硒8～15份，复合微量元素20～40份，葡萄糖60～80份，氯化钠20～30份，蛋白胨20～40份，酵母粉20～40份，纯净水6000～8000份。
10.s5：用容器将原料搅拌混合，溶解后ph值5.0－6.0，将原浆打入繁殖罐中，高温灭菌121℃，20－30分钟，之后冷却，将温度降至34－37℃。
11.s6：将种子罐的种子液接入降温的繁殖罐液体培养基中。
12.s7：原材料组分如下，均为重量份中药:土茯苓10～20份，板蓝根8～15份，金银花8～15份，清水5000-9000份。
13.s8：筛选好的中药，弃去杂草，杂物。
14.s9：将选好的中药用清水洗净，浸泡24小时。
15.s10：将浸泡中药煮沸4小时，冷却。
16.s11：将冷却好的中药过滤，制成脱毒剂。
17.s12：原材料组分如下，均为重量份纳米硒20～40份，复合微量元素40～80份，酵母粉30～60份，蛋白胨30～60份葡萄糖60～90份，氯化钠30～60，中药浸液6000～8000份，清
水30000-50000份。
18.s13：将原材料依次倒入搅拌罐中，将原料搅拌混合，溶解后将脱毒中药浸液倒入搅拌罐中与原料混合搅拌，ph5.0－6.0原浆和脱毒液混合打入三级发酵罐中。
19.s14：高温灭菌121℃，保温20-30分钟，降温冷却温度至34－37℃。
20.s15：将繁殖罐的种子液接入降温的发酵液体培养基中。
21.s16：原料组分如下，均为重量份白砂糖50～90份，，酵母粉30—50份，蛋白胨30～50份，复合微量元素15～20份，氯化钠15～20份，纯净水6000～10000份。
22.s17：用容器将原料搅拌混合，混合液ph5.0-6.0溶解后将原料打入一级种子罐，高温121℃，保温20～30分钟，降温冷却，温度34-37℃。
23.s18：将多种混合菌悬浮液按1～5％接入降温的种子液体培养基中。
24.s19：原材料组分如下，均为重量份液体蛋白硒40～60份，复合微量元素40～80份，酵母粉50～90份，蛋白胨40～80份葡萄糖80～120份，氯化钠30～60，中药浸液6000～10000份，清水40000-70000份。
25.s20：将原材料依次倒入搅拌罐中，将原料搅拌混合溶解。
26.s21：高温灭菌20-30分钟，降温冷却温度至34－37℃。
27.s22：将的种子罐的种子液接入降温的发酵液体培养基中。
28.s23：原料组分如下，均为重量份酵母粉15～30份，蛋白胨15～30份，葡萄糖40～80份，微量元素10～20份，氯化钠15～20份，纯净水3000～6000份。
29.s24；用容器将原料搅拌混合，混合液ph5.0～6.0溶解后将原料打入补种罐中。
30.s25：高温灭菌121℃，保温20～30分钟，降温冷却，温度34-37℃。
31.s26：将乳酸菌，醋酸菌的种子悬浮液液接入到补种罐中。
32.s27：将培养成熟的补种罐的乳酸菌醋酸菌混菌液补接到发酵罐中，搅拌24h停止运转将发酵罐的菌剂直接倒入储罐中，低温后熟，温度5～15℃，时间20天～60天。
33.s28：蛋白硒植物营养菌剂培养好后可以分装到10公斤的小桶里，拧好盖，入库存放。
34.优选地，在步骤s1-11中，为蛋白硒工艺流程，所述原材料组包括纳米硒，酵母粉，蛋白胨，白砂糖，微量元素，中草药。
35.优选地，在步骤s1-3中，所述原材料组包括纳米硒，酵母粉，蛋白胨，白砂糖，微量元素，中草药，且为一级发酵罐(种子罐)，在步骤s1-3中，工艺条件为罐温37℃.罐压0.02mpa搅拌180转/分.周期48h，因为一级种子罐的枯草芽孢杆菌在纳米硒的环境中大量中毒死亡，这也是一个诱变过程，只有少数耐受毒性较好的菌生存下来，这些诱变菌适应了这种硒的环境，把这些对硒耐受性较好的枯草芽孢杆菌接至二级繁殖中扩大培养。
36.优选地，在步骤s7-11中，为脱毒剂的制备，工艺条件为罐温37℃.罐压0.02mpa.搅拌180转/分.周期10～20天，发酵十天左右时发现有60％
‑‑
80％的硒与蛋白质结合，发酵终端时90％硒与蛋白质结合，并在中药的作用下排除大量毒素.经过十至二十天的脱毒发酵，生产出稳定的液体有机蛋白硒。
37.优选地，在步骤步骤s12-15中，为发酵罐的制作的制作方法，工艺条件为罐温37℃.罐压0.02mpa.搅拌180转/分.周期10～20天，发酵十天左右时发现有60％
‑‑
80％的硒与蛋白质结合，，发酵终端时90％硒与蛋白质结合，并在中药的作用下排除大量毒素.经过十
至二十天的脱毒发酵，生产出稳定的液体有机蛋白硒。
38.优选地，在步骤s15-28中，为蛋白硒植物营养菌剂的制作方法，所述原材料组包括蛋白硒，酵母粉，蛋白胨，白砂糖。
39.优选地，所述al-mofs和pa的质量比为1:0.2～0.8。
40.优选地，在步骤s16-18中，为一级发酵罐(种子罐)，工艺条件为罐温34－37℃.罐压0.02mpa搅拌180转/分.周期48－56h。
41.优选地，在步骤s19-22中，为二级发酵罐(发酵罐)，工艺条件为罐温34－37℃.罐压0.02mpa搅拌180转/分.周期48h。
42.优选地，在步骤s22-28中，为补种罐，工艺条件为罐温34－37℃.罐压0.02mpa搅拌180转/分，培养周期48－54小时。
43.本发明中，
44.1、蛋白硒植物营养菌剂由于含有定量硒和大量生物菌，通过微量元素和生物菌的活动，不但可以改善土壤的理化性状，提高土壤有机质的含量，而且具可使土壤疏松的作用。生物蛋白硒生物菌剂施入土壤后，生物菌很快增殖，形成群体优势分解土壤中被固定的且植物不能吸收利用的氮、磷、钾，并固定空气中游离的氮，供植物吸收利用；
45.2、蛋白硒植物营养菌剂不会对作物产生副作用，蛋白硒植物菌剂里的抗生菌在土壤中的增殖代谢过程中能杀死果蝇，不生虫，不生白斑病，菌剂是其它活性物质等内源激素，可自身调节生理过程，不会对作物产生副作用；
46.3、蛋白硒植物营养菌剂可以促进作物生长，使其根系发达、出苗快，枝粗叶绿、提早成熟，提高作物的抗逆性，表现出抗病、抗旱、抗倒伏的作用；
47.4、蛋白硒植物营养菌剂本身无毒、无残留，且能分解土壤中因长期施用化肥、农药的残留，溶解污水灌溉后的重金属残留，净化环境，是绿色农产品生产中的首选肥料；
48.5、本发明蛋白硒植物营养菌剂以沼液为载体，其中沼液含有大量的植物必须的微量元素和氮磷钾及有机蛋白。这是其它化学肥料所不具备的。
附图说明
49.图1为本发明提出的一种生物蛋白硒植物营养菌剂的方法的蛋白硒工艺流程过程示意图；
50.图2为本发明提出的一种生物蛋白硒植物营养菌剂的方法的蛋白硒液体营养菌剂的发酵工艺流程示意图。
具体实施方式
51.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
52.实施例1
53.参照图1-2，一种生物蛋白硒植物营养菌剂的方法，包括以下步骤：
54.s1:将原料组分如下，均为重量纳米硒4～10份，复合微量元素10～30份，酵母粉15～30，蛋白胨15～30份，葡萄糖40～80份，氯化钠15～20份，纯净水3000～6000份。
55.s2:用容器将原料搅拌混合，混合液ph5.0-6.0溶解后将原料打入一级罐，采用湿
热法对液体培养基进行灭菌，温度121℃，保温20－30分钟，降温冷却，温度34-37℃。
56.s3:将枯草芽孢菌悬液按1-5％接入降温的种子液体培养基中.
57.s4：原材料组分如下，均为重量份纳米硒8～15份，复合微量元素20～40份，葡萄糖60～80份，氯化钠20～30份，蛋白胨20～40份，酵母粉20～40份，纯净水6000～8000份。
58.s5：用容器将原料搅拌混合，溶解后ph值5.0－6.0，将原浆打入繁殖罐中，高温灭菌121℃，20－30分钟，之后冷却，将温度降至34－37℃。
59.s6：将种子罐的种子液接入降温的繁殖罐液体培养基中。
60.s7：原材料组分如下，均为重量份中药:土茯苓10～20份，板蓝根8～15份，金银花8～15份，清水5000-9000份。
61.s8：筛选好的中药，弃去杂草，杂物。
62.s9：将选好的中药用清水洗净，浸泡24小时。
63.s10：将浸泡中药煮沸4小时，冷却。
64.s11：将冷却好的中药过滤，制成脱毒剂。
65.s12：原材料组分如下，均为重量份纳米硒20～40份，复合微量元素40～80份，酵母粉30～60份，蛋白胨30～60份葡萄糖60～90份，氯化钠30～60，中药浸液6000～8000份，清水30000-50000份。
66.s13：将原材料依次倒入搅拌罐中，将原料搅拌混合，溶解后将脱毒中药浸液倒入搅拌罐中与原料混合搅拌，ph5.0－6.0原浆和脱毒液混合打入三级发酵罐中。
67.s14：高温灭菌121℃，保温20-30分钟，降温冷却温度至34－37℃。
68.s15：将繁殖罐的种子液接入降温的发酵液体培养基中。
69.s16：原料组分如下，均为重量份白砂糖50～90份，，酵母粉30—50份，蛋白胨30～50份，复合微量元素15～20份，氯化钠15～20份，纯净水6000～10000份。
70.s17：用容器将原料搅拌混合，混合液ph5.0-6.0溶解后将原料打入一级种子罐，高温121℃，保温20～30分钟，降温冷却，温度34-37℃。
71.s18：将多种混合菌悬浮液按1～5％接入降温的种子液体培养基中。
72.s19：原材料组分如下，均为重量份液体蛋白硒40～60份，复合微量元素40～80份，酵母粉50～90份，蛋白胨40～80份葡萄糖80～120份，氯化钠30～60，中药浸液6000～10000份，清水40000-70000份。
73.s20：将原材料依次倒入搅拌罐中，将原料搅拌混合溶解。
74.s21：高温灭菌20-30分钟，降温冷却温度至34－37℃。
75.s22：将的种子罐的种子液接入降温的发酵液体培养基中。
76.s23：原料组分如下，均为重量份酵母粉15～30份，蛋白胨15～30份，葡萄糖40～80份，微量元素10～20份，氯化钠15～20份，纯净水3000～6000份。
77.s24；用容器将原料搅拌混合，混合液ph5.0～6.0溶解后将原料打入补种罐中。
78.s25：高温灭菌121℃，保温20～30分钟，降温冷却，温度34-37℃。
79.s26：将乳酸菌，醋酸菌的种子悬浮液液接入到补种罐中。
80.s27：将培养成熟的补种罐的乳酸菌醋酸菌混菌液补接到发酵罐中，搅拌24h停止运转将发酵罐的菌剂直接倒入储罐中，低温后熟，温度5～15℃，时间20天～60天。
81.s28：蛋白硒植物营养菌剂培养好后可以分装到10公斤的小桶里，拧好盖，入库存
放。
82.本发明中，
83.在步骤s1-11中，为蛋白硒工艺流程，原材料组包括纳米硒，酵母粉，蛋白胨，白砂糖，微量元素，中草药；
84.在步骤s1-3中，原材料组包括纳米硒，酵母粉，蛋白胨，白砂糖，微量元素，中草药，且为一级发酵罐(种子罐)，在步骤s1-3中，工艺条件为罐温37℃.罐压0.02mpa搅拌180转/分.周期48h，因为一级种子罐的枯草芽孢杆菌在纳米硒的环境中大量中毒死亡，这也是一个诱变过程，只有少数耐受毒性较好的菌生存下来，这些诱变菌适应了这种硒的环境，把这些对硒耐受性较好的枯草芽孢杆菌接至二级繁殖中扩大培养；
85.在步骤s7-11中，为脱毒剂的制备，工艺条件为罐温37℃.罐压0.02mpa.搅拌180转/分.周期10～20天，发酵十天左右时发现有60％
‑‑
80％的硒与蛋白质结合，发酵终端时90％硒与蛋白质结合，并在中药的作用下排除大量毒素.经过十至二十天的脱毒发酵，生产出稳定的液体有机蛋白硒；
86.在步骤步骤s12-15中，为发酵罐的制作的制作方法，工艺条件为罐温37℃.罐压0.02mpa.搅拌180转/分.周期10～20天，发酵十天左右时发现有60％
‑‑
80％的硒与蛋白质结合，，发酵终端时90％硒与蛋白质结合，并在中药的作用下排除大量毒素.经过十至二十天的脱毒发酵，生产出稳定的液体有机蛋白硒；
87.在步骤s15-28中，为蛋白硒植物营养菌剂的制作方法，原材料组包括蛋白硒，酵母粉，蛋白胨，白砂糖；
88.在步骤s16-18中，为一级发酵罐(种子罐)，工艺条件为罐温34－37℃.罐压0.02mpa搅拌180转/分.周期48－56h；
89.在步骤s19-22中，为二级发酵罐(发酵罐)，工艺条件为罐温34－37℃.罐压0.02mpa搅拌180转/分.周期48h；
90.在步骤s22-28中，为补种罐，工艺条件为罐温34－37℃.罐压0.02mpa搅拌180转/分，培养周期48－54小时。
91.纳米硒与普通菌剂活计数对照表
[0092][0093]
从列表中可以看出本发明中采用蛋白硒植物营养菌剂的活计数，高于普通的纳米硒，达到农业部微生物菌肥益生菌大于2亿/ml的标准，而纳米硒确远远低于国家标准。这是由于蛋白硒经过脱毒而成，生物蛋白硒优于纳米硒，纳米硒菌剂达不到国家标准，所以我们优选脱毒蛋白硒用于生产蛋白硒植物营养菌剂，本发明就在于此。而纳米硒没有经过脱毒，毒性太大影响益生菌的生长，所以我们选择放弃。
[0094]
实施例2
[0095]
蛋白硒的制作：
[0096]
a、工艺流程如下：枯草芽孢杆菌菌落
→
斜面
→
种子悬浮液
→
种子罐
→
繁殖罐
→
发酵罐
→
分装
→
入库。
[0097]
b、种子罐原料配比：
[0098]
纳米硒3～7g/l，复合微量元素0.5～1g/l份，酵母粉2～5g/l，蛋白胨2～5g/l份，葡萄糖10～50g/l份，氯化钠0.5～1g/l，纯净水3000～6000公斤。
[0099]
c、用容器将原料搅拌混合，混合液ph5.0-6.0溶解后将原料打入一级罐种子罐，采用湿热法对液体培养基进行灭菌，温度121℃，保温20－30分钟，降温冷却，温度34-37℃。
[0100]
d、将枯草芽孢菌悬液按1-5％接入降温的种子液体培养基中。
[0101]
e、罐温37℃.罐压0.02mpa搅拌180转/分.周期48h。
[0102]
二级发酵罐(繁殖罐)
[0103]
a、繁殖罐原料配比：；
[0104]
纳米硒3～7g/l，复合微量元素0.5～1g/l，葡萄糖10～50g/l，氯化钠0.5～1g/l蛋白胨2～5g/l，酵母粉2～5g/l，纯净水6000～8000份。
[0105]
b、用容器将原料搅拌混合，溶解后ph值5.0－6.0，将原浆打入二级繁[00殖罐中，高温灭菌20－30分钟，之后冷却，将温度降至34－37℃。
[0106]
c、将种子罐的种子液接入降温的繁殖罐液体培养基中。
[0107]
d、罐温37℃.罐压0.02mpa.搅拌180转/分.周期48h.三级发酵罐生物蛋白硒菌剂的制作(发酵罐)。
[0108]
1、脱毒剂的制备：
[0109]
原料配比a、中药:土茯苓10～20份，板蓝根8～15份，金银花.8～15份清水，清水5000-9000公斤。
[0110]
b、筛选好的中药，弃去杂草，杂物。
[0111]
c、将选好的中药用清水浸泡24小时。
[0112]
d、将中药煮沸4小时，冷却。
[0113]
e、将冷却好的中药过滤，制成脱毒剂。
[0114]
2、发酵罐的制作
[0115]
a、发酵培养基的原材料配比：纳米硒7～9g/l，复合微量元素0.5～1g/l，酵母粉2～5g/l，蛋白胨2～5g/l葡萄糖10～50g/l，氯化钠1～5g/l，中药浸液6000～8000公斤清水30000-50000公斤。
[0116]
b、将原材料依次倒入搅拌罐中，将原料搅拌混合，溶解后将脱毒中药浸液倒入搅拌罐中搅拌，ph5.0－6.0原浆和脱毒液打入三级发酵罐中。
[0117]
c、高温灭菌121℃,保温20-30分钟，之后降温冷却温度至37℃。
[0118]
d、将繁殖罐的种子液接入降温的发酵液体培养基中。
[0119]
e、罐温37℃.罐压0.02mpa.搅拌180转/分.周期10～20天
[0120]
f、发酵好的蛋白硒分装入库。
[0121]
实施例3
[0122]
蛋白硒植物营养菌剂的制作方法
[0123]
a、蛋白硒发酵工艺流程：枯草芽孢杆等多种菌
→
斜面
→
种子混菌悬浮液
→
种子罐
→
发酵罐
→
补种
→
储罐
→
分装
→
入库。
[0124]
一级发酵罐(种子罐)：
[0125]
b、原料配比：
[0126]
白砂糖50—90g/l，，酵母粉3—5g/l，蛋白胨3～5g/l，复合微量元素0.5－1g/l，氯化钠1～2g/l，纯净水600～1000公斤。
[0127]
c、用容器将原料搅拌混合，混合液ph5.0-6.0溶解后将原料打入一级种子罐，高温121℃，保温20－30分钟，降温冷却，温度34-37℃。
[0128]
d、将多种混合菌悬浮液按1-5％接入降温的种子液体培养基中。
[0129]
e、工艺条件：
[0130]
罐温34－37℃.罐压0.02mpa搅拌180转/分.周期48－56h。
[0131]
二级发酵罐(发酵罐)
[0132]
a、发酵原料配比
[0133]
液体蛋白硒3～5g]/l，复合微量元素0.5～1g/l，酵母粉2～5g/l，蛋白胨2～5g/l葡萄糖20～80g/l，氯化钠1～3g/l中药浸液6000－8000公斤，清水50000-90000公斤。
[0134]
b、将中药浸液和原材料依次倒入搅拌罐中，将原料搅拌混合溶解，ph5.0－6.0。
[0135]
c、高温灭菌121℃，20-30分钟，降温冷却温度至34－37℃。
[0136]
d、将的种子罐的种子液接入降温的发酵液体培养基中。
[0137]
e、罐温34－37℃.罐压0.02mpa搅拌180转/分.周期20d。
[0138]
实施例4
[0139]
补料罐
[0140]
a、酵母粉2～5g/l，蛋白胨2～5g/l，葡萄糖20～50g/l，微量元素0.5－1g/l，氯化钠0.5～1g/l，纯净水3000～6000公斤。
[0141]
b、用容器将原料搅拌混合，混合液ph5.0-6.0溶解后将原料打入补种罐中。
[0142]
c、高温灭菌121℃，保温20－30分钟，降温冷却，温度34-37℃。
[0143]
d、接种：将乳酸菌，醋酸菌的种子悬浮液液接入到补种罐。
[0144]
e、工艺条件：罐温34－37℃.罐压0.02mpa搅拌180转/分.周期48h培养周期48－54小时f将培养成熟的补种罐的乳酸菌醋酸菌混菌液补接到发酵罐中，搅拌24h停止运转。
[0145]
生物蛋白硒植物营养剂检测报告
[0146][0147]
蛋白硒植物营养菌剂含有脱毒硒，这是其他菌肥所没有的，我们做过实验，种植的茼蒿小白菜都含有一定量的脱毒硒，并请相关部门检测，结果如下：
[0148]
检测报告
[0149][0150]
以上，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。