一种工程菌及其构建方法和应用与流程

技术特征：
1.一种工程菌，其特征在于，所述工程菌为能够过表达甲基化酶的大肠杆菌，所述甲基化酶用于对外源基因进行甲基化修饰；所述甲基化酶的氨基酸序列如seq id no.1或seq id no.3所示。2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述甲基化酶的氨基酸序列如seq id no.1所示。3.根据权利要求1或2所述的工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌为et12567。4.权利要求1-3任一项所述工程菌的构建方法，其特征在于，包括：将编码所述甲基化酶的基因整合到大肠杆菌的基因组上，实现所述甲基化酶的过表达，得到所述工程菌；所述甲基化酶的氨基酸序列如seq id no.1或seq id no.3所示。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，将编码所述甲基化酶的基因、启动子j23119和核糖体结合位点b0034连接，构建得到甲基化酶的表达盒，并将所述表达盒转入大肠杆菌，筛选阳性转化子，得到所述工程菌。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，编码所述甲基化酶的基因的核苷酸序列如seq id no.2或seq id no.4所示。7.权利要求1-3任一项所述的工程菌在对外源基因进行甲基化修饰并提高所述外源基因在须糖多孢菌转化效率中的应用。8.一种提高外源基因在须糖多孢菌中转化效率的方法，其特征在于，包括：将外源基因导入权利要求1-3任一项所述的工程菌中进行甲基化修饰，得到甲基化修饰的外源基因；将所述甲基化修饰的外源基因导入所述须糖多孢菌中。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，将外源基因导入权利要求1-3任一项所述的工程菌中进行预甲基化，得到甲基化修饰的外源基因，具体包括如下步骤：构建包括所述外源基因的重组载体，将所述重组载体导入所述工程菌中，进行甲基化修饰；提取所述工程菌的dna，得到甲基化修饰的重组载体。10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，采用原生质体转化的方法，将所述甲基化修饰的重组载体导入所述须糖多孢菌中。

技术总结
本发明提供一种工程菌及其构建方法和应用。本发明第一方面提供一种工程菌，所述工程菌为过表达甲基化酶的大肠杆菌，所述甲基化酶用于对外源基因进行甲基化修饰；所述甲基化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示。本发明提供的工程菌能够对外源基因进行甲基化修饰，提高外源基因在须糖多孢菌内的转化效率，为须糖多孢菌的基因工程改造提供重要基础。础。础。


技术研发人员：李春 庞建 王超 郭超
受保护的技术使用者：国家粮食和物资储备局科学研究院
技术研发日：2022.12.07
技术公布日：2023/3/10