一种具有温阳固本功能的营养补充剂及其制备方法和应用与流程

1.本发明涉及食品技术领域，具体而言，涉及一种具有温阳固本功能的营养补充剂及其制备方法和应用。


背景技术：

2.随着当前人们生活水平的不断提升,人们的饮食越来越丰富,人们的膳食结构发生了一些变化,不合理的饮食导致富贵病的人数逐渐增多,人们开始出现亚健康,也越来越注重健康的饮食,开始注重保健。
3.我国在公众营养健康上面临着营养过剩和营养缺乏双重问题,特别是体重超标与肥胖症、糖尿病、高血压、高血脂等代谢综合症类问题突显。积极推进公众营养健康的全面改善,不断增强健康食品精准制造技术水平与开发能力,在营养均衡靶向设计与健康干预定向调控以及功能保健型营养健康食品与特殊营养食品开发等方面迫切需要科技引领。因此,不同类型的功能性食品开发市场前景十分广阔。
4.第三代功能性食品在市场上的发展十分可观,因此,分析功能因 子的构效、量效关系及作用机理具有重要意义。由于我国功能性食品 的市场相对比较滞后,因此结合国内外功能性食品的发展趋势,将功 能因子资源应用到功能性食品的开发中,是迫切的需要。
5.糖果作为一个较为传统的行业也需要不断的创新，以满足消费者日益追求健康与时尚的需要。糖果为生活中常见的食品，其品种繁多，口味各异，但是，大多数组分比较单一，缺少温阳固本，降脂软脉的功效。本发明的营养补充剂营养成分丰富，口感良好，且具有温阳固本，降脂软脉的保健功效。
6.本发明配方，具有温阳固本，降脂软脉作用。本发明公开了一种具有温阳固本，降脂软脉作用的糖果食品，由姜黄素、中链甘油三酯、生姜粉、菊粉、复合型益生菌菌粉制备而成。
7.中链甘油三酯，英文全称mediumchaintriglycerides，简称（mct)。脂肪酸根据碳链长度分为短链、中链和长链，一般把含有6～12个碳原子组成碳链的脂肪酸称为中链脂肪酸（mediumchainfattyacid,mcfa),它被甘油酯化就生成中链脂肪酸甘油三酯（或中链甘油三酯，mct）。典型的mct是指饱和辛酸甘油三酯或饱和癸酸甘油三酯或饱和辛酸-癸酸混合的甘油三酯。
8.中链甘油三酯仅由饱和脂肪酸构成，凝固点低，室温下为液体，粘度小。与大豆油比较，完全是无臭、无色的透明液体。与普通的油脂和氢化油脂相比，中链甘油三酯不饱和脂肪酸的含量极低，氧化稳定性非常好，其碘值不超过0.5。mct在高温和低温下特别稳定。
9.在食品添加剂工业中，中链甘油三酯可以作为食用香精和色素的溶剂和载体；在焙烤食品加工中，中链甘油三酯常和便宜的植物油搭配在一起，用作防粘剂，防止烘焙食品粘在锅上或模子上；纯的中链甘油三酯或同植物油的混合油也常用作香肠压模的润滑剂和脱模剂；中链甘油三酯还能用于处理各种脂溶性维生素、颜料和抗氧化剂，当加入少量的中链甘油三酯，高粘度脂肪物质的粘性就会大大减少；在食品加工工业中还用中链甘油三酯
来代替易氧化的乳脂，用来制作牛乳甜酒和奶酪仿制品；如果和水溶性胶体结合使用，中链甘油三酯还能作饮料的浑浊剂。另外，中链甘油三酯还能代替矿物油用作食品加工机械的润滑油。
10.中链甘油三酯（mct)通常可作为手术后、感染和皮肤烧伤病人的专用食品，还可用于那些患有脂肪吸收不良，艾滋病人和癌症病人、糖尿病人的食品，可用于治疗前列腺增生、消散胆石、降低胆固醇、防治高血脂症等。此外还可以帮助减肥，实践证明，食用中链脂肪酸酯mct对人体的体重、腹部脂肪面积的减少、腰围的减少，均有明显的效果。
11.姜黄素作为一种抗癫痫药，但是超大剂量的姜黄素会导致个别患者发生腹泻。腹泻每日超过5次或出现血性腹泻时，一般必须降低药物剂量或立即停止姜黄素并及时治疗。一般停用药物后，会使治疗难以顺利进行，从而影响治疗疗效。接受姜黄素的患者腹泻的主要原因是由于药物对肠黏膜细胞的直接抑制或破坏所致，腹泻并发症：1、水电解质紊乱。腹泻时会丢失大量的水分和电解质，如果不及时有效地补充，可出现不同程度的水和电解质紊乱，包括低钠、低钾、低钙和低镁。2、贫血和营养不良。胃肠道是人体吸收营养物质的唯一途径，摄入的食物和其他营养物质在胃肠道消化（消化食品）和分解后，有用的部分被吸收，无用的残渣由粪便排出。腹泻时，由于水电解质丢失、进食少等因素，可出现不同程度的贫血、营养不良。表现为消瘦、精神不振、无力。3、脱水。由于腹泻丢失体液和摄入量不足，使体液总量尤其是细胞外液量减少，导致不同程度（轻、中、重）脱水。可出现眼窝凹陷，尿少泪少，皮肤黏膜干燥、弹性下降，甚至血容量不足引起末梢循环的改变。严重者可出现面色苍白、出冷汗、烦躁不安等表现。4、酸中毒。腹泻严重时大便中丢失大量碱性物质可致酸中毒，主要表现为嗜睡、面色苍白、拒食、精神衰弱等。5、继发感染。腹泻后全身抵抗力低下可能继发各种感染，如尿路感染、上呼吸道感染、中耳炎等。6、心、脑血管意外。这是造成老年人急性腹泻致死的不容忽视的并发症。腹泻时体内大量水分和钠、钾、钙、镁等阳离子从大便中排出，水分丧失使人体处于脱水状态，血容量减少，血液黏稠度增加，血流缓慢，容易形成血栓并阻塞血管，使冠状动脉阻塞造成心绞痛和心肌梗死，脑血管阻塞引起缺血性卒中。钠、钾、钙、镁是体内重要的阳离子，除维持血液酸碱平衡外，对维持神经传导功能和心跳节律具有举足轻重的作用，缺乏时可造成严重心律不齐和猝死。
12.可见腹泻可使患者的生活质量下降，腹泻后全身抵抗力低下可能继发各种感染。长期腹泻可直接影响机体对营养物质的缺乏，引起贫血、营养不良、维生素缺乏。严重的腹泻导致脱水、电解质紊乱及酸中毒，对机体产生严重损害，如不及时抢救，可能危及生命。
13.随着益生菌的广泛使用，有效保护益生菌的生理活性成为当前益生菌研究的重点。益生菌在加工过程中，其活性还有可能受到温度、湿度和压力等外界环镜的影响，其活性便会大幅度损失。
14.对于一个益生菌产品而言，在使用及保存期间保持强效的活力，是评价产品好坏最有效的准则。就目前来说，多数益生菌产品在规定期限内活菌的活力降低，致使大多数情况下益生菌往往达不到要求。如何提高益生菌的活力，提高益生作用，一直是人们关注和研究的热点。益生菌对外界环境敏感，这阻碍了它在食品中的应用，微胶囊技术可以解决这一难题，使益生菌在胃肠道中生存并定殖。将益生菌微胶囊应用在食品中不仅提高的益生菌的存活率，提高了产品的货架期，而且对产品的感官接受度没有任何影响。近年来，益生菌微胶囊己出现在一些食品中。
15.将微胶囊技术应用于食品领域中为益生菌抵抗胃酸等恶劣环境以及延长产品的货架期开辟了一条新的途径。但是提高包埋益生菌微胶囊的耐胃酸性和肠溶性能力也是迫切需要解决的技术难点。
16.开发一款克服以上缺点，具有温阳固本、降脂软脉功能的新型压片糖果是本发明的主要目标。


技术实现要素：

17.本发明的第一目的，包括提供一种营养补充剂，具有温阳固本、降脂软脉功能。
18.为实现上述目的，本发明的实施例采用以下技术方案：提供一种营养补充剂，其组成包括姜黄素、中链甘油三酯、生姜粉、菊粉。
19.进一步地，该营养补充剂还包括复合型益生菌菌粉。
20.进一步地，该营养补充剂，按重量份数计，姜黄素为1-3份，中链甘油三酯为10-30份，生姜粉120-240份，菊粉800-1000份，复合型益生菌菌粉50-70份。
21.进一步地，该营养补充剂，按重量份数计，姜黄素为2份，中链甘油三酯为20份，生姜粉180份，菊粉900份，复合型益生菌菌粉60份。
22.进一步地，该营养补充剂复合型益生菌菌粉为植物乳杆菌lp90、长双歧杆菌bl21、鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、乳双歧杆菌、青春歧杆菌、两歧双歧杆菌等重量比混合菌粉的肠溶微粒。
23.为提高活性成分利用率并减少不良反应等缺点，本发明的第二目的是提供一种姜黄素和中链甘油三酯混合物的β-环糊精包合物及其制备方法。
24.姜黄素和中链甘油三酯混合物的β-环糊精包合物通过以下步骤制得：取3-5份β-环糊精加入15-25份蒸馏水，置胶体磨中，研磨6-10min，缓慢加入经1-3份乙醇溶液稀释后的1份姜黄素、中链甘油三酯混合物，再研磨20-30min，冷藏24h，抽滤后在超低温冰箱预冷到-40℃以下，将样品置于冻干机冷冻舱中冷冻至温度低于-40℃，抽真空，干燥24～48小时，即得β-环糊精包合物。
25.优选地，取4份β-环糊精加入20份蒸馏水，置胶体磨中，研磨8min，缓慢加入经2份乙醇溶液稀释后的1份姜黄素、中链甘油三酯混合物，再研磨25min，冷藏24h，抽滤后在超低温冰箱预冷到－45℃以下，将样品置于冻干机冷冻舱中冷冻至温度低于－45℃，抽真空，干燥36小时，即得β-环糊精包合物。
26.为提高益生菌在肠道中存活率，增强产品功能，本发明的第三目的是提供一种复合型益生菌肠溶微粒及其制备方法。
27.该肠溶微粒通过以下步骤制得：将复合型益生菌菌粉重悬于生理盐水中，使此菌悬液为10
10
cfu/ml，配制含2%-3%海藻酸钠、1%-2%的k-卡拉胶和0.3%-0.7�cl2的混合液，溶胀18-30h;将菌悬液与配制的混合溶液按照体积比1:（4-6）混合均匀后，加入到含有0.8%-1.2%的peg-100硬脂酸酯的植物油中，机械搅拌形成油包水液滴后，用0.8%-1.2%的吐温80水溶液洗涤，然后置于真空冷冻干燥机内，干燥36-72小时，得到冻干一级微胶囊；将冻干一级微胶囊置于2%-3%的海藻酸钠、0.8%-1.2%的瓜尔胶溶液中，混合均匀，然后将混合液以高压喷入1.8%-2.2�co3、0.01%-0.03%吐温-80混合溶液中，然后置于真空冷冻干燥机内，干燥36-72小时，制得冻干二级微胶囊；称取28-32份单硬脂酸甘油酯加热熔化分散到
500-700份水中，加入110-130份柠檬酸三乙酯，剪切搅拌使分散均匀，再称取1800-2200份尤特奇l30d-55水分散体与前面配制的液体搅拌混合均匀，作为肠溶包衣液，采用流化床底喷包衣装置，以600-1000份冻干二级微胶囊为包衣底料，进风温度33-37℃、物料温度23-27℃、出风温度20-30℃进行包衣，制备出肠溶微粒。
28.优选地，将复合型益生菌菌粉重悬于生理盐水中，使此菌悬液为10
10
cfu/ml，配制含2.5%海藻酸钠、1.5%的k-卡拉胶和0.5�cl2的混合液，溶胀24h;将菌悬液与配制的混合溶液按照体积比1:5混合均匀后，加入到含有1.0%的peg-100硬脂酸酯的植物油中，机械搅拌形成油包水液滴后，用1.0%的吐温80水溶液洗涤，然后置于真空冷冻干燥机内，干燥54小时，得到冻干一级微胶囊；将冻干一级微胶囊置于2.5%的海藻酸钠、1.0%的瓜尔胶溶液中，混合均匀，然后将混合液以高压喷入2.0�co3、0.02%吐温-80混合溶液中，然后置于真空冷冻干燥机内，干燥54小时，制得冻干二级微胶囊；称取30份单硬脂酸甘油酯加热熔化分散到600份水中，加入120份柠檬酸三乙酯，剪切搅拌使分散均匀，再称取2000份尤特奇l30d-55水分散体与前面配制的液体搅拌混合均匀，作为肠溶包衣液，采用流化床底喷包衣装置，以冻干二级微胶囊为包衣底料，进风温度35℃、物料温度25℃、出风温度25℃进行包衣，制备出肠溶微粒。
29.为提高产品活性成分利用率、增强产品功能以及方便服用与贮存，本发明的第四目的是提供一种营养补充剂片剂及其制备方法。
30.该营养补充剂片剂由复合型益生菌肠溶微粒、姜黄素和中链甘油三酯混合物的β-环糊精包合物、菊粉、生姜粉与山梨糖醇、硬脂酸镁混合均匀后压片所得。
31.本发明的第五目的还包括提供一种营养补充剂或者营养补充剂片剂在制备保健食品或特医食品中的应用。
32.本发明实施例的有益效果例如包括：1、增强了温阳固本及降脂软脉功能，免疫力与抗疲劳功能得到了改善；2、口感良好，掩盖了苦涩味；3、不仅提高了益生菌在胃液中的存活率，还增强了益生菌在肠道中繁殖能力，从而排便顺畅；4、提高了活性成分利用率并减少了体内不良反应；5、方便服用与贮存。
具体实施方式
33.下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
34.实施例1姜黄素为20g，中链甘油三酯为200g，生姜粉1800g，菊粉9000g。
35.取880gβ-环糊精加入4400ml蒸馏水，置胶体磨中，研磨8min，缓慢加入经440ml乙醇溶液稀释后的姜黄素、中链甘油三酯混合物，再研磨25min，冷藏24h，抽滤后在超低温冰箱预冷到-45℃，将样品置于冻干机冷冻舱中冷冻至-45℃，抽真空，干燥36小时，即得β-环
糊精包合物。
36.β-环糊精包合物、菊粉、生姜粉、40g硬脂酸镁以及山梨糖醇共20000g，混合均匀后压片即得。
37.实施例2姜黄素为10g，中链甘油三酯为300g，生姜粉1200g，菊粉10000g，复合型益生菌菌粉500g。
38.取930gβ-环糊精加入4650ml蒸馏水，置胶体磨中，研磨6min，缓慢加入经310ml乙醇溶液稀释后的姜黄素、中链甘油三酯混合物，再研磨30min，冷藏24h，抽滤后在超低温冰箱预冷到-50℃，将样品置于冻干机冷冻舱中冷冻至-40℃，抽真空，干燥48小时，即得β-环糊精包合物。
39.将复合型益生菌菌粉重悬于生理盐水中，使此菌悬液为10
10
cfu/ml，配制含2%海藻酸钠、2%的k-卡拉胶和0.3�cl2的混合液，溶胀30h;将菌悬液与配制的混合溶液按照体积比1:4混合均匀后，加入到含有1.2%的peg-100硬脂酸酯的植物油中，机械搅拌形成油包水液滴后，用0.8%的吐温80水溶液洗涤，然后置于真空冷冻干燥机内，干燥72小时，得到冻干一级微胶囊；将冻干一级微胶囊置于3%的海藻酸钠、0.8%的瓜尔胶溶液中，混合均匀，然后将混合液以高压喷入2.2�co3、0.01%吐温-80混合溶液中，然后置于真空冷冻干燥机内，干燥72小时，制得冻干二级微胶囊；称取32g单硬脂酸甘油酯加热熔化分散到500ml水中，加入110g柠檬酸三乙酯，剪切搅拌使分散均匀，再称取2200g尤特奇l30d-55水分散体与前面配制的液体搅拌混合均匀，作为肠溶包衣液，采用流化床底喷包衣装置，以冻干二级微胶囊为包衣底料，进风温度37℃、物料温度23℃、出风温度30℃进行包衣，制备出肠溶微粒。
40.β-环糊精包合物、复合型益生菌肠溶微粒、菊粉、生姜粉、40g硬脂酸镁以及山梨糖醇共20000g，混合均匀后压片即得。
41.实施例3姜黄素为30g，中链甘油三酯为100g，生姜粉2400g，菊粉8000g，复合型益生菌菌粉700g。
42.取650gβ-环糊精加入3250ml蒸馏水，置胶体磨中，研磨10min，缓慢加入经390ml乙醇溶液稀释后的姜黄素、中链甘油三酯混合物，再研磨20min，冷藏24h，抽滤后在超低温冰箱预冷到-40℃，将样品置于冻干机冷冻舱中冷冻至-50℃，抽真空，干燥24小时，即得β-环糊精包合物。
43.将复合型益生菌菌粉重悬于生理盐水中，使此菌悬液为10
10
cfu/ml，配制含3%海藻酸钠、1%的k-卡拉胶和0.7�cl2的混合液，溶胀18h;将菌悬液与配制的混合溶液按照体积比1:6混合均匀后，加入到含有0.8%的peg-100硬脂酸酯的植物油中，机械搅拌形成油包水液滴后，用1.2%的吐温80水溶液洗涤，然后置于真空冷冻干燥机内，干燥36小时，得到冻干一级微胶囊；将冻干一级微胶囊置于2%的海藻酸钠、1.2%的瓜尔胶溶液中，混合均匀，然后将混合液以高压喷入1.8�co3、0.03%吐温-80混合溶液中，然后置于真空冷冻干燥机内，干燥36小时，制得冻干二级微胶囊；称取32g单硬脂酸甘油酯加热熔化分散到500ml水中，加入130g柠檬酸三乙酯，剪切搅拌使分散均匀，再称取1800g尤特奇l30d-55水分散体与前面配制的液体搅拌混合均匀，作为肠溶包衣液，采用流化床底喷包衣装置，以冻干二级微胶囊为包衣底料，进风温度33℃、物料温度27℃、出风温度20℃进行包衣，制备出肠溶微粒。
44.β-环糊精包合物、复合型益生菌肠溶微粒、菊粉、生姜粉、40g硬脂酸镁以及山梨糖醇共20000g，混合均匀后压片即得。
45.实施例4姜黄素为20g，中链甘油三酯为200g，生姜粉1800g，菊粉9000g，复合型益生菌菌粉600g。
46.取880gβ-环糊精加入4400ml蒸馏水，置胶体磨中，研磨8min，缓慢加入经440ml乙醇溶液稀释后的姜黄素、中链甘油三酯混合物，再研磨25min，冷藏24h，抽滤后在超低温冰箱预冷到-45℃，将样品置于冻干机冷冻舱中冷冻至-45℃，抽真空，干燥36小时，即得β-环糊精包合物。
47.将复合型益生菌菌粉重悬于生理盐水中，使此菌悬液为10
10
cfu/ml，配制含2.5%海藻酸钠、1.5%的k-卡拉胶和0.5�cl2的混合液，溶胀24h;将菌悬液与配制的混合溶液按照体积比1:5混合均匀后，加入到含有1.0%的peg-100硬脂酸酯的植物油中，机械搅拌形成油包水液滴后，用1.0%的吐温80水溶液洗涤，然后置于真空冷冻干燥机内，干燥54小时，得到冻干一级微胶囊；将冻干一级微胶囊置于2.5%的海藻酸钠、1.0%的瓜尔胶溶液中，混合均匀，然后将混合液以高压喷入2.0�co3、0.02%吐温-80混合溶液中，然后置于真空冷冻干燥机内，干燥54小时，制得冻干二级微胶囊；称取30g单硬脂酸甘油酯加热熔化分散到600ml水中，加入120g柠檬酸三乙酯，剪切搅拌使分散均匀，再称取2000g尤特奇l30d-55水分散体与前面配制的液体搅拌混合均匀，作为肠溶包衣液，采用流化床底喷包衣装置，以冻干二级微胶囊为包衣底料，进风温度35℃、物料温度25℃、出风温度25℃进行包衣，制备出肠溶微粒。
48.β-环糊精包合物、复合型益生菌肠溶微粒、菊粉、生姜粉、40g硬脂酸镁以及山梨糖醇共20000g，混合均匀后压片即得。
49.对比例1无姜黄素，其余与实施例1相同。
50.对比例2无中链甘油三酯，其余与实施例1相同。
51.对比例3无生姜粉，其余与实施例1相同。
52.对比例4复合型益生菌未经包埋，其余与实施例4相同。
53.对比例5姜黄素、中链甘油三酯未经包合，其余与实施例4相同。
54.对比例6冻干一级微胶囊未制备成冻干二级微胶囊，直接压片，其余与实施例4相同。
55.对比例7冻干二级微胶囊未制备成肠溶微粒，直接压片，其余与实施例4相同。对比例8无姜黄素，其余与实施例4相同。
56.对比例9
无中链甘油三酯，其余与实施例4相同。
57.对比例10无生姜粉，其余与实施例4相同。
58.对比例11未制备冻干一级微胶囊、冻干二级微胶囊，直接制备成肠溶微粒，其余与实施例4相同。
59.对比例12冻干一级微胶囊未制备成冻干二级微胶囊，直接制备成肠溶微粒，其余与实施例4相同。
60.一、动物实验1、对免疫力的影响1.1实验动物：spf级昆明种雌性小鼠，体重18g～22g。
61.1.2实验分组：cona诱导的小鼠淋巴细胞转化实验、nk细胞活性的测定均分为对照组、实施例1-4组、对比例1-12组，每组10只。实施例1-4组、对比例1-12组的给药剂量按照标准动物等效剂量折算系数法计算（以成人每日50g计），每日分2次摄入，共30天。对照组摄入等量的淀粉。
62.1.3 cona诱导的小鼠淋巴细胞转化实验(mtt法)无菌取脾，置于盛有适量无菌hank液的小平皿中，制成细胞悬液，经200目筛网过滤。用hank液洗2次，每次离心10分钟(1000r/min)。然后将细胞悬浮于1ml完全培养液中，计数活细胞数，用rpmi1640培养液调整细胞浓度为3
×
106个/ml。再将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1ml，在其中一孔加cona液75μl(相当于7.5μg/ml)，另一孔作为对照，置5％二氧化碳，37℃培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0.7ml，加入0.7ml不含小牛血清的rpmi1640培养液，同时加入mtt(5mg/ml)50μl/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解。然后分装到96孔培养板中，每个孔作3个平行孔，用酶标仪，测570nm波长处的光密度值。淋巴细胞的增殖能力用加cona孔的光密度值减去不加cona孔的光密度值表示。片剂对四组小鼠淋巴细胞转化能力的影响如表1所示。
63.表1
1.4 nk细胞活性的测定(乳酸脱氢酶测定法)受试小鼠颈椎脱臼处死，无菌取脾，制成脾细胞悬液，用hank液洗2次，每次离心10min(1000r/min)，弃上清将细胞浆弹起，加入0.5ml灭菌水20秒裂解红细胞后，再加入0.5ml 2倍hank液及8ml hank液，1000rpm转速下，离心10min，用1ml含10％小牛血清的rpmi1640完全培养液重悬，用台酚兰染色计数(活细胞数应在95％以上)，调整细胞浓度为2
×
107个/ml做为效应细胞，取传代后24h生长良好的yac—1细胞，用rpmi1640完全培养液调整细胞浓度为4
×
105个/ml做为靶细胞；取靶细胞和效应细胞各100μl(效、靶比50:1)，加入μ型96孔培养板中；靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100μl，靶细胞最大释放孔加靶细胞和2.5％triton各100μl；上述各项均设三个平行孔，于37℃，5％二氧化碳培养箱中培养4h，然后将96孔培养板以1500r/min的转速离心5min，每孔吸取上清液100μl置平底96孔培养板中，同时加入ldh基质液100μl/孔，根据室温反应3-10min，每孔加入30μl 1mol/l的hcl，在酶标仪490nm波长处测定光密度(od)。
64.nk细胞活性＝[(反应孔od值-自然释放孔od值)/(最大释放孔od值-自然释放孔od
值)]
×
100％。
[0065]
片剂对四组小鼠nk细胞活性的影响如表2所示。
[0066]
表22、对便秘小鼠排便的影响2.1动物分组及给药将昆明种小鼠按体重随机分成19组，每组10只，雌雄各半，分别为阴性对照组、模型组、阳性对照麻仁丸组、实施例1-4组、对比例1-12组，给药剂量按照标准动物等效剂量折算系数法计算（以成人每日50g计）。阴性对照组给予等量淀粉，阳性对照麻仁丸组给予6g
·
kg-1
麻仁丸。连续给药7d，期间正常饮食。
[0067]
2.2复方地芬诺酷(dc)便秘模型的建立末次给药结束，各实验组小鼠禁食不禁水16 h,阴性对照组给予蒸馏水和淀粉的混悬液10 mg
·
kg-1
，其余每组给予复方地芬诺酯片10 mg
·
kg-1
灌胃。30 min后造成便秘模型。
[0068]
2.3对便秘小鼠排便的影响造模30 min后，各实验组给予含相应受试物的墨汁灌胃，模型组和阴性对照组给予相应体积的墨汁灌胃，灌胃体积为20 ml
·
kg-1
体重。给药后立即将小鼠单独放入干净的鼠笼内，并正常提供饲料和饮水，同时开始准确计时。观察记录每只小鼠首次排出黑便的时间，并连续观察6h，记录6h内小鼠排黑便粒数、干重及性状。见表3：表3.对便秘小鼠排便的影响情
3、对寒凝血瘀证小鼠的影响3.1 方法大鼠随机分组，每组6只，雌雄各半，分别为正常对照组、模型组、实施例1-4组、对比例1-12组。除正常对照组外，其他组均采用冰水冷冻法造模，每天于上午10: 00-11: 00将大鼠全身置于0℃冰水中10 min,持续刺激30 d。期间每天实施例1-4组、对比例1-12组给药剂量按照标准动物等效剂量折算系数法计算（以成人每日50g计）。正常对照组、模型组给予等量淀粉，期间正常饮食。
[0069]
3.2 结果表4 对各组大鼠血清中tnf-ɑ
的影响
二、产品质量情况1、活菌计数称取粗研的片剂粉末1.0 g置于装有9.0 ml无菌生理盐水的试管内，充分振摇，然后做10倍系列稀释，选取2-3个适宜稀释梯度，吸取100
ų
l于无菌平板内，每个稀释度做3个平皿，将冷却至48℃的mrs培养基或mc培养基倾注入平皿15ml，转动平皿使混合均匀。待平板凝固后，倒置于厌氧袋内，36℃厌氧培养72 h后，进行第1次活菌计数实验。将同批次产品放置于室温下进行储藏实验，6个月后取样按此方法进行第2次活菌计数实验。表5：2、益生菌在模拟胃液中存活情况称取粗研的片剂粉末1.0 g置于无菌离心管中，分别在0、90min加入ph 1.5的人工胃液。并立即将之置于37℃水浴摇床中，100 r/min，于180 min时将上述离心管同时取出，于4℃ , 4 000 r/min的条件下离心收集微胶囊，并按照“1、活菌计数”的方法进行计数。表
6：本发明中未详细说明的环节均为本领域普通技术人员可自行选择的公知常识。虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域普通技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。