鉴定或表征受试者中的免疫应答的方法与流程

技术特征：
1.鉴定或表征受试者中的免疫应答的方法，其包括：(a)使来自所述受试者的含有免疫球蛋白的样品与至少一种固定在支持物上的抗原接触；(b)将未结合的非抗原特异性免疫球蛋白从所述支持物上洗去，以留下结合到所述支持物上的抗原的抗原特异性免疫球蛋白；(c)任选地从所述支持物上的抗原洗脱所述抗原特异性免疫球蛋白；和(d)对所述抗原特异性免疫球蛋白进行质谱分析以鉴定两种或更多种不同的抗原特异性免疫球蛋白类别、亚类和/或轻链类型。2.根据权利要求1所述的方法，其中将所述样品与至少两种不同的抗原接触，其中每种抗原在不同的支持物上或在相同支持物的不同部分上。3.根据权利要求2所述的方法，其中将所述样品分成至少两个等分试样，并且将每个等分试样与结合到不同支持物上的不同抗原接触。4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述支持物选自顺磁珠粒和maldi-tof靶。5.根据权利要求1-4所述的方法，其中对消化的抗原特异性免疫球蛋白进行质谱分析之前，对所述抗原特异性免疫球蛋白的至少一部分进行蛋白水解消化。6.根据权利要求1-4所述的方法，其中在对抗原特异性免疫球蛋白进行质谱分析之前，不对所述抗原特异性免疫球蛋白的至少一部分进行蛋白水解消化。7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中对分离的免疫球蛋白进行质谱分析之前，用至少一种还原剂和/或变性剂解离所述抗原特异性免疫球蛋白的至少一部分以分离与重链结合的轻链。8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中将所述不同抗原特异性免疫球蛋白类别、亚类和/或轻链类型中的两种或更多种的相对量彼此比较，或者测定样品中所述不同抗原特异性免疫球蛋白类别、亚类和/或轻链类型中的两种或更多种的每一种的量。9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中对样品中一种或多种不同的抗原特异性免疫球蛋白类别、亚类和/或轻链类型的量进行定量。10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述免疫球蛋白类别选自igg、iga、igm、igd和ige。11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述免疫球蛋白亚类选自igg1、igg2、igg3、igg4、iga1和iga2。12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述免疫球蛋白轻链选自λ轻链和κ轻链。13.根据权利要求11所述的方法，其中测定所述样品中λ:κ轻链的相对量的比率。14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法另外包括鉴定以下的一种或多种；a)与iga和/或igm结合的j链和/或b)与igm结合的cd5l。15.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述样品中的免疫球蛋白在与结合到所述支持物的抗原接触之前被纯化或富集。16.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中将剩余的免疫球蛋白与结合到所述支持物上的抗原接触之前，去除所述样品中的至少一部分igg。
17.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤(c)中，在那些具有较高抗原结合特异性的抗原特异性免疫球蛋白之前，将具有较低抗原结合特异性的抗原特异性免疫球蛋白从结合到所述支持物上的抗原上洗脱下来。18.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述抗原或每种抗原是来自以下的抗原：病毒、细菌、古细菌、真菌、原生动物、蠕虫、自身免疫抗原、癌症抗原或能够在受试者中诱导过敏反应的抗原。19.根据权利要求16所述的方法，其中所述病毒是冠状病毒，通常是sars-cov-2。20.根据权利要求16或17所述的方法，其中所述病毒抗原至少是病毒包膜蛋白、衣壳蛋白、酶或血凝素的抗原部分。21.根据权利要求16所述的方法，其中所述细菌抗原是细胞抗原、鞭毛抗原、体细胞抗原、毒力抗原、菌毛抗原或类毒素的至少一种抗原部分。22.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者是鱼、哺乳动物、鸟或爬行动物。23.根据权利要求22所述的方法，其中所述哺乳动物选自人、非人猿、猴、马、绵羊、骆驼科动物、山羊、牛、狗、猫或啮齿动物。24.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述样品是生物流体样品，所述生物流体通常是血液、血清、血浆、脑脊液、尿液、泪液、痰液、灌洗液或唾液。25.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中另外测定受试者中免疫应答的一种或多种另外的指标。26.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在进行质谱之前将电离对照加入到所述样品中。27.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述质谱是液相色谱质谱或maldi-tof质谱。28.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其包括将预先确定量的校准物加入到所述样品中。29.通过根据前述权利要求中任一项的方法，通过测量与两种或更多种不同的抗原相比，两种或更多种不同的抗原特异性免疫球蛋白类别、亚类和/或轻链类型的量，产生表征受试者中免疫应答的矩阵的方法。30.选择一种或多种疫苗靶标的方法，其包括使用前述权利要求中任一项所述的方法。31.选择或鉴定受试者目标的免疫状态的方法，其包括使用前述权利要求中任一项所述的方法。32.表征受试者中对病原体、过敏原或其它抗原的免疫应答的方法，其包括使用根据权利要求1至29所述的方法。33.根据权利要求30所述的方法，其中确定由所述病原体引起的病况的严重性或进展。34.表征受试者的自身免疫应答的方法，其包括使用根据权利要求1至18或22至29所述的方法。35.表征受试者中的过敏反应的方法，其包括使用根据权利要求1至18或22至29所述的方法。36.选择单克隆抗体类别或单克隆抗体特征的方法，其包括使用根据权利要求1至29所
述的方法来优化所述类别或特征。37.监测受试者的免疫应答或疾病进展的方法，其包括使用前述权利要求中任一项所述的方法。38.根据权利要求1至29所述的方法，其中通过测量样品缓冲液中指示对结合抗原的中和的分子来确定免疫球蛋白的中和能力。39.根据权利要求1至29所述的方法，其用于鉴定受体位点的激活和非激活抗体。40.用于鉴定或表征受试者中的免疫应答的计算机实施的方法，其包括将针对第一抗原特异性免疫球蛋白类别、亚类和/或轻链类型获得的质谱与针对第二抗原特异性免疫球蛋白类别、亚类和/或轻链类型获得的质谱进行比较，其中所述质谱通过根据前述权利要求中任一项所述的方法获得。41.根据权利要求40所述的方法，其中所述计算机包括计算机处理器和计算机存储器。42.通过根据权利要求1至39所述的方法鉴定或表征受试者中的免疫应答的设备，其包括使用根据权利要求40或41所述的计算机实施的方法。43.根据权利要求37所述的设备，包括质谱仪。44.用于根据权利要求1至34所述的方法中的测定试剂盒，其包含附着于一种或多种基底的多种抗原以及一种或多种免疫球蛋白校准物。

技术总结
本发明提供了一种鉴定或表征受试者中的免疫应答的方法，其包括：(a)使来自所述受试者的含有免疫球蛋白的样品与至少一种固定在支持物上的抗原接触；(b)将未结合的非抗原特异性免疫球蛋白从所述支持物上洗去，以留下结合到所述支持物上的抗原的抗原特异性免疫球蛋白；(c)任选地从所述支持物上的抗原洗脱所述抗原特异性免疫球蛋白；和(d)对所述抗原特异性免疫球蛋白进行质谱分析以鉴定两种或更多种不同的抗原特异性免疫球蛋白类别、亚类和/或轻链类型。或轻链类型。或轻链类型。


技术研发人员：斯蒂芬
受保护的技术使用者：结合点集团有限公司
技术研发日：2021.05.20
技术公布日：2023/2/3