罗勒烯在制备蜂巢小甲虫引诱剂中的应用

1.本发明属于害虫防治领域，具体涉及罗勒烯在制备蜂巢小甲虫引诱剂中的应用。


背景技术：

2.蜜蜂是世界范围内重要的有益昆虫之一，具有重要的农业价值、生态价值和经济价值。在现代农业中，蜜蜂产业被誉为“农业之翼”，蜜蜂产业可以为人类提供蜂蜜、蜂王浆、蜂花粉和蜂胶等一系列绿色健康食品，为蜂农提供可观的经济效益。同时，蜜蜂授粉在植物开花和果实结果中发挥着重要的作用，证据表明，人类三分之二的食物都与之相关。蜜蜂产业受到包括栖息地减少、病虫害和杀虫剂作用等的影响。其中，病虫害是蜜蜂数量减少的重要因素，因此，蜜蜂病虫害防控是蜜蜂产业健康发展的重要前提。
3.蜂巢小甲虫是一种原产于非洲撒哈拉以南地区的蜂巢寄生虫，通过蜂产品贸易的扩展目前已经成为养蜂业及野生蜂群的一个重要问题。蜂巢小甲虫以蜂蜜、花粉和蜜蜂幼虫为食，甚至能诱骗蜜蜂工蜂对其进行交哺喂养；它会穿透蜂巢，破坏蜡梳，导致花粉和蜂蜜发酵，进而导致蜂巢结构破坏，可致蜂群崩溃，蜜蜂发生逃群现象。2017年，我国于广东省汕尾市首次发现蜂巢小甲虫，至今，已经入侵了我国广东、广西、云南和海南四省。对四省当地的养蜂业和农业都造成了严重的损失。目前，我国并没有形成很好的蜂巢小甲虫防控策略。主要还是靠使用杀虫剂来进行防治，但是，使用农药容易对蜜蜂及蜂产品产生负面影响。
4.因此，发掘对害虫具有引诱作用的引诱剂，是一种有效控制害虫，减少农药使用的防控手段。对丰富我国蜂巢小甲虫防控技术具有重要的参考意义。对蜜蜂产品绿色生产，实现蜜蜂丰富的经济价值与生态价值起关键作用。


技术实现要素：

5.本发明的目的是提供罗勒烯在制备蜂巢小甲虫引诱剂中的应用，罗勒烯能有效吸引蜂巢小甲虫成虫，控制害虫数量，减少化学农药的使用，保证蜜蜂的健康和蜂产品的安全性。
6.为实现以上目的，本发明提供了罗勒烯在制备蜂巢小甲虫引诱剂中的应用。
7.优选地，所述蜂巢小甲虫引诱剂的效力组分为罗勒烯单一组分。
8.优选地，所述蜂巢小甲虫引诱剂为含有所述效力组分的溶液，该溶液的溶剂为挥发性溶剂。
9.优选地，所述溶液中罗勒烯的浓度为10～100mg/ml。
10.更优选地，所述溶液中罗勒烯的浓度为50～100mg/ml。
11.另一优选地，所述蜂巢小甲虫引诱剂的效力组分由罗勒烯和亚油酸甲酯组成。
12.更优选地，所述蜂巢小甲虫引诱剂为含罗勒烯50～100mg/ml和亚油酸甲酯100mg/ml。
13.本发明还提供了一种引诱蜂巢小甲虫的方法，其是将罗勒烯或含有罗勒烯的蜂巢
小甲虫引诱剂装载于载体上，利用罗勒烯引诱蜂巢小甲虫。
14.优选地，所述载体为容器或者吸附物。
15.优选地，是将装载罗勒烯或含有罗勒烯的蜂巢小甲虫引诱剂的载体置于蜂箱入口或者蜂箱内部，设置陷阱诱捕或者诱杀蜂巢小甲虫。
16.本发明提供的罗勒烯作为蜂巢小甲虫引诱剂组分，具有操作简单、方便、有效浓度区间宽、容错率和引诱效率高等特点，本发明的推广应用能显著降低化学农药在蜜蜂害虫防治上的使用，解决蜂产品农药残留问题。本发明在蜂巢小甲虫生物防治中有重要价值，具有广阔的经济、社会和生态价值。
附图说明
17.图1为蜂巢小甲虫行为生测的y型嗅觉仪示意图。
18.图2为蜂巢小甲虫对蜜蜂幼虫信息素(棕榈酸甲酯)的eag测定结果，横坐标中s代表的是正己烷对照，数字代表的是被测化合物的浓度(mg/ml)。
19.图3为蜂巢小甲虫对蜜蜂幼虫信息素(油酸乙酯)的eag测定结果，横坐标中s代表的是正己烷对照，数字代表的是被测化合物的浓度(mg/ml)。
20.图4为蜂巢小甲虫对蜜蜂幼虫信息素(罗勒烯)的eag测定结果，横坐标中s代表的是正己烷对照，数字代表的是被测化合物的浓度(mg/ml)。
21.图5为蜂巢小甲虫对蜜蜂幼虫信息素(亚油酸甲酯)的eag测定结果，横坐标中s代表的是正己烷对照，数字代表的是被测化合物的浓度(mg/ml)。
22.图6为蜂巢小甲虫对蜜蜂幼虫信息素(罗勒烯100mg/ml)的行为反应结果统计图。
23.图7为蜂巢小甲虫对蜜蜂幼虫信息素(亚油酸甲酯100mg/ml)的行为反应结果统计图。
具体实施方式
24.以下实例是对本发明的进一步限制，而不是对本发明的限制。
25.以下实施例用到的受试信息化合物信息如表1所示：
26.表1.受试信息化合物信息
27.编号中文名称英文名称厂商cas1棕榈酸甲酯methyl palmitatealaddin112-39-02油酸乙酯ethyl oleatealaddin111-62-63罗勒烯oocimenealaddin13877-91-34亚油酸甲酯methyl linoleatealaddin112-63-0
28.实施例1：对蜜蜂幼虫信息素的触角电位(eag)反应
29.(1)将5～7日龄蜂巢小甲虫雌，雄触角用解剖刀沿基部剪下，尖端剪去0.2mm，用导电胶将触角与eag的两个银电极连接，然后将电极插入eag探头中。
30.(2)将巴斯德管尖端插入通有连续气流的钢管(直径8mm，长14cm)上一小孔内(小孔直径2.5mm，距离钢管气流出口处11cm)。
31.(3)钢管内连续气流速度为4ml/s，刺激管的阔端与软管相连，软管中间隔气流速度同样为4ml/s。刺激时间为500ms，刺激间隔30s。
32.(4)eag信号稳定后，对触角电位反应值进行记录。所有待测信息化合物均以正己烷为溶剂，以滴加10μl正己烷的滤纸条为对照，每根触角先接触对照，然后按待测信息化合物浓度从低到高依次进行测试，最后再测试一次对照。刺激时间为0.5s，两次刺激之间的间隔时间≥30s，蜂巢小甲虫雌、雄成虫各有≥15个重复。
33.(5)触角电位相对值＝(待测样品的反应值)/(两次对照差值的绝对值/2)
×
100％
34.(6)蜜蜂幼虫信息素的触角电位测定。
35.统计结果分析如图2、3、4、5所示，雌性和雄性蜂巢小甲虫对罗勒烯和亚油酸甲酯有较强的电生理反应活性，均高于棕榈酸甲酯和油酸乙酯的反应。
36.实施例2：特定浓度的单组分信息化合物溶液对蜂巢小甲虫的吸引作用测定。
37.实验方法：将某种信息化合物溶于正己烷，配制特定浓度的单组分信息化合物溶液，测定装置采用y型嗅觉仪。如图1所示，y型管直径5mm，主臂和分支臂长均为5cm，两侧分别用橡胶软管与巴斯德管相连，巴斯德管用橡胶软管依次与流量计、蒸馏水加湿瓶、活性炭空气净化瓶和气泵相连。以1cm2定性滤纸作为试剂载体，滴加10μl待测信息化合物溶液；以溶剂正己烷作为对照，将正己烷滤纸和含信息化合物的滤纸分别置于两个巴斯德管中，空气流速调节为0.8l/min。用y型管上方30cm处放置的卤素灯激活蜂巢小甲虫。实验时将蜂巢小甲虫由y型管主臂管口引入，并开始计时，在y型管分叉处做出选择，去向不同的分支臂，每头虫记录2min，爬向某一分支臂2.5cm并在其停留30s以上记为做出选择，否则视为无选择。每测试5头成虫更换新的y型管并调换y型管的位置，以消除管臂位置以及残留气味对行为可能产生的影响，更换的y型管用甲醇清洗晾干备用。每组测试20头成虫，重复3次。
38.将受试信息化合物(罗勒烯和亚油酸甲酯)配制成浓度为100mg化合物/ml正己烷、50mg化合物/ml正己烷、10mg化合物/ml正己烷的单组分化合物溶液，然后分别按照上述方法进行操作，测定小甲虫对受试信息化合物的行为反应。
39.统计分析结果如图6和7所示，各图中，右边为正己烷对照，左边为受试信息化合物，横坐标表示的为选择该气味的小甲虫头数。
40.试验结果显示：相比于对照(正己烷)，浓度为100mg/ml的罗勒烯对雌性和雄性的蜂巢小甲虫都具有极显著的吸引性。浓度为100mg/ml的亚油酸甲酯仅对雄性蜂巢小甲虫有极显著吸引作用。浓度为100mg/ml的罗勒烯对雌雄蜂巢小甲虫均有极显著的吸引作用。浓度为50mg/ml的罗勒烯对蜂巢小甲虫有显著吸引作用。浓度为50mg/ml的亚油酸乙酯对雌雄均没有吸引作用。