一种荧光免疫层析试剂盒的制作方法

1.本发明涉及医学检测技术领域，具体的，涉及一种荧光免疫层析试剂盒。


背景技术：

2.目前，临床上常用的lp-pla2检测免疫方法有很多，其中时间分辨率荧光法的检测不需要大型设备，操作过程也不复杂，但是该方法的荧光发射波长通常在300nm左右，血液样本里有大量的蛋白质分子，而蛋白质分子在紫外有很强的吸收，造成该方法的检测灵敏度较低。


技术实现要素：

3.为了解决上述常用的分辨率荧光法检测灵敏度较低的技术问题，本发明提供一种荧光免疫层析试剂盒，采用荧光免疫侧向层析技术，快速定量地检测脂蛋白相关磷脂酶a2；所述的检测试剂盒采用红色纳米荧光微球标记抗体，其发光强度高、发射光谱窄、荧光寿命长，检测结果灵敏度高、准确性强、能够快速诊断血管内炎症，适用于各级医院及家庭医疗，从而更加适于实用。
4.本发明提供了一种荧光免疫层析试剂盒，包括：卡壳；荧光免疫层析试纸条，其包括检测线和质控线；所述荧光免疫层析试纸条卡接于所述卡壳内；样品混合单元，连接于所述卡壳的一端，其包括第一底座；所述样品混合单元还包括卡接于所述第一底座上的第一容器；所述第一容器的开口端用铝箔封口形成密封结构；缓冲液单元，与所述样品混合单元相邻设置，其包括第二底座；所述缓冲液单元还包括卡接于所述第二底座上的第二容器；所述第二容器的开口端用铝箔封口形成密封结构；所述第一容器内封装有红色纳米荧光微球标记的第一脂蛋白相关磷脂酶a2特异性抗体；所述第二容器内封装有脂蛋白相关磷脂酶a2样本缓冲液；所述检测线上固定有红色纳米荧光微球标记的第二脂蛋白相关磷脂酶a2特异性抗体；所述质控线上固定有鼠源性抗体。
5.在本发明提供的荧光免疫层析试剂盒的一种较佳实施例中，所述荧光免疫层析试纸条设置有包含近样品端和远样品端的底板，所述底板上由近样品端到远样品端依次搭接设置有样品垫，硝酸纤维素膜和吸水垫；所述检测线和质控线设置于所述硝酸纤维素膜上；所述质控线设置在所述检测线与吸水垫之间。
6.在本发明提供的荧光免疫层析试剂盒的一种较佳实施例中，所述卡壳包括卡底和盖在其上的卡盖；所述荧光免疫层析试纸条放置于所述卡底内；所述卡盖的内部设置有若
干用于压紧所述荧光免疫层析试纸条的卡点；所述卡盖上还设置有加样孔和观察窗；所述样品垫位于所述加样孔的下方；所述检测线和质控线位于所述观察窗的下方。
7.在本发明提供的荧光免疫层析试剂盒的一种较佳实施例中，所述红色纳米荧光微球的激发发射波长对为570~590nm和610~620nm。
8.在本发明提供的荧光免疫层析试剂盒的一种较佳实施例中，所述第二脂蛋白相关磷脂酶a2特异性抗体为鼠抗人脂蛋白相关磷脂酶a2单克隆抗体。
9.在本发明提供的荧光免疫层析试剂盒的一种较佳实施例中，所述鼠源性抗体为抗鼠igg多克隆抗体。
10.在本发明提供的荧光免疫层析试剂盒的一种较佳实施例中，所述第二容器内的脂蛋白相关磷脂酶a2样本缓冲液包括若干人份的缓冲液；所述缓冲液的单人份体积为100~400ul。
11.相较于现有技术，本发明提供的荧光免疫层析试剂盒具有以下有益效果：采用荧光免疫侧向层析技术，快速定量地检测脂蛋白相关磷脂酶a2；所述的检测试剂盒采用红色纳米荧光微球标记抗体，其发光强度高、发射光谱窄、荧光寿命长，检测结果灵敏度高、准确性强、能够快速诊断血管内炎症，适用于各级医院及家庭医疗，从而更加适于实用。
附图说明
12.为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图，其中：图1是本发明提供的荧光免疫层析试剂盒的俯视图；图2是图1所示a-a的剖视图；图3是本发明提供的荧光免疫层析试剂盒的结构示意图。
具体实施方式
13.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
14.请一并参阅图1、图2及图3，其中，图1是本发明提供的荧光免疫层析试剂盒的俯视图；图2是图1所示a-a的剖视图；图3是本发明提供的荧光免疫层析试剂盒的结构示意图。。所述荧光免疫层析试剂盒包括：卡壳1；荧光免疫层析试纸条2,其包括检测线231和质控线232；所述荧光免疫层析试纸条2卡接于所述卡壳1内；样品混合单元3，连接于所述卡壳1的一端，其包括第一底座；所述样品混合单元3还包括卡接于所述第一底座上的第一容器；所述第一容器的开口端用铝箔封口形成密封结构；缓冲液单元4，与所述样品混合单元3相邻设置，其包括第二底座；所述缓冲液单元4还包括卡接于所述第二底座上的第二容器；所述第二容器的开口端用铝箔封口形成密封结构；所述第一容器内封装有红色纳米荧光微球标记的第一脂蛋白相关磷脂酶a2特异性抗体；所述第二容器内封装有脂蛋白相关磷脂酶a2样
本缓冲液；所述检测线231上固定有红色纳米荧光微球标记的第二脂蛋白相关磷脂酶a2特异性抗体；所述质控线232上固定有鼠源性抗体。
15.所述卡壳1为所述的荧光免疫层析试纸条2的外部壳结构。
16.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述荧光免疫层析试纸条2设置有包含近样品端和远样品端的底板21，所述底板21上由近样品端到远样品端依次搭接设置有样品垫22，硝酸纤维素膜23和吸水垫24；所述检测线231和质控线232设置于所述硝酸纤维素膜23上；所述质控线232设置在所述检测线231与吸水垫24之间。
17.当所述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒用于检测脂蛋白相关磷脂酶a2时，待测样品为血清、血浆或全血。所述的待测样品在所述的第一容器内与红色纳米荧光微球标记的第一脂蛋白相关磷脂酶a2特异性抗体结合，制得待层析的样品；所述的待层析的样品经所述的加样孔111加入到样品垫22中，沿硝酸纤维素膜23向吸水垫24方向层析运动，所述的层析时间优选15分钟。此时所述的荧光免疫层析试纸条2的样品垫22同时具有样品收集、释放及过滤的作用。
18.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述卡壳1包括卡底12和盖在其上的卡盖11；所述荧光免疫层析试纸条2放置于所述卡底12内；所述卡盖11的内部设置有若干用于压紧所述荧光免疫层析试纸条2的卡点；所述卡盖11上还设置有加样孔111和观察窗112；所述样品垫22位于所述加样孔111的下方；所述检测线231和质控线232位于所述观察窗112的下方。
19.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述红色纳米荧光微球的激发波长为570-590nm，发射波长为610-620nm。
20.所述的红色纳米荧光微球可以是单一化合物的荧光微球或者由几种化合物组成的复合荧光微球；所述的荧光微球优选单一化合物荧光微球、且优选具有较强的光稳定性的荧光微球。
21.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述第二脂蛋白相关磷脂酶a2特异性抗体为鼠抗人脂蛋白相关磷脂酶a2单克隆抗体。
22.所述第二脂蛋白相关磷脂酶a2特异性抗体包被于所述检测线231上。
23.所述的第一容器内表面固定的红色纳米荧光微球标记的第一脂蛋白相关磷脂酶a2(lp-pla2)特异性抗体与所述的检测线231上包被的红色纳米荧光微球标记的第二脂蛋白相关磷脂酶a2特异性抗体识别的抗原决定簇不同。
24.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述鼠源性抗体为抗鼠igg多克隆抗体。
25.所述的鼠源性抗体包被于所述质控线232上，用以捕获多余的荧光微球。
26.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述第二容器内的脂蛋白相关磷脂酶a2样本缓冲液包括若干人份的缓冲液；所述缓冲液的单人份体积为100-400ul。
27.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述的底板21为白色，且表面附有不干胶；所述样品垫22，硝酸纤维素膜23和吸水垫24通过不干胶粘结于所述的底板21上；所述卡壳1、硝酸纤维素膜23、底板21及不干胶均不含有荧光
剂。
28.为了降低试剂盒对荧光微球荧光信号的影响，本实用新型采用不含荧光的硝酸纤维素膜23、底板21以及卡壳1，从而保证获得高荧光信背比，能良好区分信号与背景，进而提高检测灵敏度。
29.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述试剂盒的待测样本的体积为15-100ul。
30.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述底板21采用pvc胶板，其尺寸为长度6-8cm，宽度4-6mm，厚度0.25-0.5mm。
31.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述的样品垫22采用玻璃纤维过滤膜，其尺寸为长度15-30mm，宽度4-6mm，厚度0.5-1mm。
32.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述硝酸纤维素膜23的尺寸为长度20-35mm，宽度4-6mm，厚度0.2-0.3mm。
33.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述的吸水垫24的尺寸为长度10-30mm，宽度4-6mm，厚度0.9-1.8mm。
34.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述检测线231和加样孔111正投影位置之间的距离为15-25mm。
35.优选的，前述的定量检测脂蛋白相关磷脂酶a2的荧光免疫层析的试剂盒，其中，所述质控线232与所述检测线231之间的距离3-6mm。
36.以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其它相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。