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一种人体肠道专性厌氧菌拟杆菌的厌氧培养方法

2023-02-04 13:27:47 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种人体肠道专性厌氧菌拟杆菌的厌氧培养方法,其特征在于:包括以下依次进行的步骤:s1:配制固体培养基,将人体肠道专性厌氧菌拟杆菌接种于固体培养基中,再经厌氧培养,获得单菌落;所述固体培养基为含有兔血的胰酶大豆肉汤固体培养基;s2:配制液体培养基,挑取单菌落接种于液体培养基中,再经厌氧培养,获得菌液;所述液体培养基为含有胎牛血清的施耐德昆虫细胞液体培养基。2.根据权利要求1所述的一种人体肠道专性厌氧菌拟杆菌的厌氧培养方法,其特征在于:在s1中,所述固体培养基中含有5%的兔血、3%的胰酶大豆肉汤预制粉和1.5%琼脂。3.根据权利要求1所述的一种人体肠道专性厌氧菌拟杆菌的厌氧培养方法,其特征在于:在s2中,所述液体培养基中含有20%的热灭活胎牛血清。4.根据权利要求3所述的一种人体肠道专性厌氧菌拟杆菌的厌氧培养方法,其特征在于:在s1中,厌氧培养在放置有厌氧产气袋的密闭的厌氧培养罐中进行,温度为37℃,时长为36小时。5.根据权利要求4所述的一种人体肠道专性厌氧菌拟杆菌的厌氧培养方法,其特征在于:在s2中,厌氧培养在放置有厌氧产气袋的密闭的厌氧培养罐中进行,温度为37℃,时长为24小时,并且维持70rpm转速;获得菌液的od值≥0.6。6.根据权利要求5所述的一种人体肠道专性厌氧菌拟杆菌的厌氧培养方法,其特征在于:在s1和s2中,固体培养基和液体培养基均经过厌氧处理。7.根据权利要求6所述的一种人体肠道专性厌氧菌拟杆菌的厌氧培养方法,其特征在于:厌氧处理的固体培养基或者液体培养基的方法为:将固体培养基或者液体培养基置于放置有厌氧产气袋的密闭的厌氧培养罐中,在37℃条件下持续至少4h。8.根据权利要求7所述的一种人体肠道专性厌氧菌拟杆菌的厌氧培养方法,其特征在于:厌氧产气袋每24小时更换一次。9.根据权利要求8中所述的一种人体肠道专性厌氧菌拟杆菌的厌氧培养方法,其特征在于:人体肠道专性厌氧菌拟杆菌为bacteroides vulgatus,保藏号为atcc 8482。10.用于人体肠道专性厌氧菌拟杆菌的厌氧培养的培养基,其特征在于:包括用于活化菌种的固体培养基和用于扩增培养的液体培养基;所述固体培养基中含有5%的兔血、3%的胰酶大豆肉汤预制粉和1.5%的琼脂;所述液体培养基为含有20%热灭活胎牛血清的施耐德昆虫细胞培养基。

技术总结
本发明涉及细菌培养技术领域,具体涉及一种人体肠道专性厌氧菌拟杆菌的厌氧培养方法,包括以下依次进行的步骤:配制固体培养基,将人体肠道专性厌氧菌拟杆菌接种于固体培养基中,再经厌氧培养,获得单菌落;所述固体培养基为含有兔血的胰酶大豆肉汤固体培养基;配制液体培养基,挑取单菌落接种于液体培养基中,再经厌氧培养,获得菌液;所述液体培养基为含有胎牛血清的施耐德昆虫细胞液体培养基。本技术方案可以解决现有技术中缺少专门针对人体肠道专性厌氧菌拟杆菌的厌氧培养方法的技术问题。本方案的培养基不仅可以培养拟杆菌,同时可用于培养其他的人体肠道细菌。培养方法操作简单,降低了实验难度的同时,提高了成活率,具有理想的应用前景。有理想的应用前景。有理想的应用前景。


技术研发人员:李娇娇
受保护的技术使用者:云南大学
技术研发日:2022.10.28
技术公布日:2023/2/3
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