一种灵芝提取物的制作方法及其应用与流程

1.本发明涉及植物提取技术领域，具体涉及一种灵芝提取物的制作方法及其应用。


背景技术：

2.灵芝中含有三蓓类、多糖类、核苷类、生物碱类、呋喃衍生物类、多种酶类、氨基酸多肽类、甾醇类、多种微量元素及有机锗、脂肪酸、烟酸等十几类近千种化合物。而灵芝子实体主要由纤维素、半纤维素和木素所组成。灵芝子实体中纤维素大分子通过折叠形成排列整齐紧密的束状结晶区域；纤维素又被半纤维素和木素包围着,木素和半纤维素之间除了醚键结合之外,还有5-6种较强的化学作用，形成木素与碳水化合物的复合体结合层。不论是结晶结构还是木素的结合层，都使得灵芝子实体内形成了一个紧密的储存结构，导致灵芝药效物质的提取物得率较低。
3.而且，目前常见的灵芝提取物在味道上具有苦涩味，并不利于灵芝提取物的食用。
4.因此，亟需提出一种灵芝提取物的制作方法，使得灵芝提取物的提取物得率变高，同时去除灵芝提取物的苦涩味。


技术实现要素：

5.本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种灵芝提取物的制作方法，使得灵芝水溶提取物的提取物得率大于等于20％、灵芝醇溶提取物的提取物得率大于等于90％，同时在提取的过程中去除灵芝提取物的苦涩味。
6.本发明的发明构思为：通过复合酶对灵芝进行降解提高提取物得率，在浓缩阶段通过添加甘油和丙二醇带走多余的杂质、提高灵芝中药效物质的含量(灵芝多糖、三萜类灵芝酸等)，同时去除灵芝提取物中的苦涩味。
7.本发明的第一方面提供一种灵芝提取物的制作方法，所述灵芝提取物包括灵芝醇溶提取物和/或灵芝水溶提取物，所述制作方法包括以下步骤：
8.(1)酶解：将灵芝、果胶酶和水混合、酶解，制得酶解物，所述酶解物包括酶解液体产物和酶解固体产物；
9.(2)浸提：将所述酶解固体产物用乙醇水溶液进行多次浸提，合并浸提液；
10.(3)浓缩：将所述浸提液和所述酶解液体产物进行合并，加入甘油和丙二醇，减压浓缩，制得浓缩产物；
11.(4)醇降；将所述浓缩产物加入到乙醇水溶液中溶解、沉降、过滤，制得沉降液a和沉降物a；
12.(5)收膏：将所述沉降液a进行减压浓缩至干重，制得所述灵芝醇溶提取物；
13.(6)调配：将所述沉降物a溶解于水中，加入单甘脂和丙二醇，混合，沉降，取液体制得沉降液b，浓缩至干重，制得所述灵芝水溶提取物。
14.相对于现有技术，本发明第一方面提供的一种灵芝提取物的制作方法的有益效果如下：目前的灵芝提取物的制作方法中提取物得率较低，而且灵芝提取物中会存在苦涩味。
而本发明通过果胶酶对灵芝进行降解，然后在浓缩过程中添加甘油和丙二醇带走多余的杂质、提高灵芝中药效物质的含量，能够使得灵芝水溶提取物的提取物得率大于等于20％、灵芝醇溶提取物的提取物得率大于等于90％，同时在提取的过程中去除灵芝提取物的苦涩味。另外，通过单甘脂和丙二醇对沉降物a进行沉降调配，能够去除灵芝提取物的土壤的气味。
15.优选的，所述灵芝在步骤(1)前，还包括前处理的粉碎步骤：将所述灵芝粉碎至无颗粒的绒状。
16.优选的，步骤(1)中，所述果胶酶包括菠萝果胶酶和红枣果胶酶。
17.优选的，步骤(1)中，所述果胶酶和所述红枣果胶酶之间的质量比为3：(0.5-1.5)。
18.优选的，步骤(1)中，所述果胶酶的加入量为所述灵芝的质量的0.25-1wt％；进一步优选的，所述果胶酶的加入量为所述灵芝的质量的0.25-0.75wt％。
19.优选的，步骤(1)中，所述水的加入量为所述灵芝的质量的5-25倍；进一步优选的，所述水的加入量为所述灵芝的质量的10-15倍。
20.优选的，步骤(1)中，所述酶解的温度为15-60℃；进一步优选的，所述酶解的温度为40-60℃；更进一步优选的，所述酶解的温度为53-57℃。
21.优选的，步骤(1)中，所述酶解的时间为5-20小时；进一步优选的，所述酶解的时间为10-15小时。
22.优选的，步骤(1)中，所述酶解还具有停止反应过程，所述停止反应过程包括：将反应体系加热至100-110℃灭活、降温。
23.优选的，步骤(2)中，所述乙醇水溶液为70-80％乙醇水溶液；进一步优选的，所述乙醇水溶液为73-77％乙醇水溶液。
24.优选的，步骤(2)中，所述乙醇水溶液的用量为所述酶解固体产物的质量的1-20倍；进一步优选的，所述乙醇水溶液的用量为所述酶解固体产物的质量的10-15倍。
25.优选的，步骤(2)中，所述浸提的时间为1-5小时；进一步优选的，所述浸提的时间为1.5-2.5小时。
26.优选的，步骤(2)中，所述浸提的温度为70-90℃；进一步优选的，所述浸提的温度为75-85℃。
27.优选的，步骤(2)中，所述浸提的次数为1-5次；进一步优选的，所述浸提的次数为2-4次。
28.优选的，步骤(3)中，所述甘油和所述丙二醇之间的质量比为1：(0.5-5)；进一步优选的，所述甘油和所述丙二醇之间的质量比为1：(0.5-1.5)。
29.优选的，步骤(3)中，所述甘油和所述丙二醇的质量之和为所述灵芝的质量的5-50wt％；进一步优选的，所述甘油和所述丙二醇的质量之和为所述灵芝的质量的5-15wt％；更进一步优选的，所述甘油和所述丙二醇的质量之和为所述灵芝的质量的8-12wt％。
30.优选的，步骤(3)中，所述浓缩产物的质量为所述灵芝的质量的1-3倍；进一步优选的，所述浓缩产物的质量为所述灵芝的质量的1.5-2.5倍。
31.优选的，步骤(4)中，所述乙醇水溶液为85-100％乙醇水溶液；进一步优选的，所述乙醇水溶液为93-97％乙醇水溶液。
32.优选的，步骤(4)中，所述乙醇水溶液的加入量为所述浓缩产物质量的1-5倍；进一
步优选的，所述乙醇水溶液的加入量为所述浓缩产物质量的2.5-3.5倍。
33.优选的，步骤(4)中，所述沉降的时间为5-10小时；进一步优选的，所述沉降的时间为7-9小时。
34.优选的，步骤(6)中，所述水的用量为所述沉降物a的质量的5-20倍；进一步优选的，所述水的用量为所述沉降物a的质量的8-12倍。
35.优选的，步骤(6)中，所述单甘脂的加入量为所述沉降物a的质量的5-15wt％；进一步优选的，所述单甘脂的加入量为所述沉降物a的质量的8-12wt％。
36.优选的，步骤(6)中，所述丙二醇的加入量为所述沉降物a的质量的2-10wt％；进一步优选的，所述丙二醇的加入量为所述沉降物a的质量的4-6wt％。
37.优选的，步骤(6)中，所述沉降的时间为5-50小时；进一步优选的，所述沉降的时间为20-30小时。
38.优选的，步骤(6)中，所述浓缩为烘干。
39.本发明的第二方面提供一种灵芝提取物，所述灵芝提取物由所述制作方法制得。
40.本发明的第三方面提供一种烟草，所述烟草包括所述灵芝提取物。
41.本发明的第四方面提供一种香烟，所述香烟包括所述灵芝提取物。
42.相对于现有技术，本发明的有益效果如下：
43.(1)目前的灵芝提取物的制作方法中提取物得率较低，而且灵芝提取物中会存在苦涩味。而本发明通过果胶酶对灵芝进行降解，然后在浓缩过程中添加甘油和丙二醇带走多余的杂质、提高灵芝中药效物质的含量，能够使得灵芝水溶提取物的提取物得率大于等于20％、灵芝醇溶提取物的提取物得率大于等于90％，同时在提取的过程中去除灵芝醇溶提取物的苦涩味。另外，通过单甘脂和丙二醇对沉降物a进行沉降调配，易于将不溶物质进行分离，能够去除灵灵芝水溶提取物的土壤的气味。
具体实施方式
44.为了让本领域技术人员更加清楚明白本发明所述技术方案，现列举以下实施例进行说明。需要指出的是，以下实施例对本发明要求的保护范围不构成限制作用。
45.以下实施例中所用的原料、试剂或装置如无特殊说明，均可从常规商业途径得到，或者可以通过现有已知方法得到。
46.本发明中提取物得率＝所提取到的目标物质含量/原料中目标物质含量；原料中目标物质含量为依据气质色谱检测确定目标物质含量数据。
47.本发明中的复合果胶酶为菠萝果胶酶和红枣果胶酶质量比为3:1，购自佛山中国科学院产业技术研究院、型号为ym-0081、ym-2037。
48.实施例1
49.灵芝提取物ⅰ包括独立的灵芝醇溶提取物ⅰ、灵芝水溶提取物ⅰ及其对应的风味烟草，其制作方法如下步骤：
50.(1)粉碎：将10kg灵芝粉碎至无颗粒的绒状；
51.(2)酶解：粉碎后的灵芝加入其12倍质量的蒸馏水，搅拌均匀，再加相当于灵芝质量的0.5wt％复合果胶酶进行50℃酶解12小时，100℃灭活后冷却至室温，制得酶解物，酶解物包括酶解液体产物和酶解固体产物；
52.(3)浸提：过滤分别收集酶解液体产物和酶解固体产物，酶解固体产物用75％酒精水溶液80℃浸提3次，每次2小时，酶解固体产物和75％酒精水溶液之间的质量比为1：15，合并浸提液；
53.(4)浓缩：浸提液和酶解液体产物进行合并，加入相当于灵芝质量的10wt％甘油和丙二醇1:1的混合物，减压浓缩至相当于灵芝质量的2倍，制得浓缩产物；
54.(5)醇降：浓缩产物加入到相当于浓缩产物3倍量的95％酒精水溶液中，搅拌溶解，静置沉降8小时，过滤分离制得沉降液a和沉降物a；
55.(6)收膏：沉降液a减压浓缩至干重，得灵芝醇溶提取物ⅰ。
56.(7)调配；将沉降物a加入到相当于沉降物a的10倍水中，搅拌溶解，再加入相当于灵芝质量的10wt％的单甘脂和5wt％的丙二醇，搅拌均匀，静置沉降24小时，过滤去渣，烘干得灵芝水溶提取物ⅰ。
57.实施例1的灵芝醇溶提取物ⅰ的提取物得率为92.6％、灵芝水溶提取物ⅰ的提取物得率为20.3％。
58.将实施例1所制得的灵芝醇溶提取物ⅰ、灵芝水溶提取物ⅰ按照1：10(烟丝为10)的比例分别与烟丝混合制得风味烟草，再将风味烟草制成香烟，测试香烟评吸效果。
59.实施例1灵芝醇溶提取物ⅰ的外观颜色状态、及其所制得的香烟的评吸效果见表1；
60.步骤(7)的过滤去渣的质量百分比(相对于灵芝)、灵芝醇溶提取物ⅰ所制得的香烟的评吸效果见表2。
61.对比例1
62.灵芝提取物ⅱ包括独立的灵芝醇溶提取物ⅱ、灵芝水溶提取物ⅱ及其对应的风味烟草，其制作方法如下步骤(浓缩步骤不添加甘油和丙二醇)：
63.(1)粉碎：将10kg灵芝粉碎至无颗粒的绒状；
64.(2)酶解：粉碎后的灵芝加入其12倍质量的蒸馏水，搅拌均匀，再加相当于灵芝质量的0.5wt％复合果胶酶进行50℃酶解12小时，100℃灭活后冷却至室温，制得酶解物，酶解物包括酶解液体产物和酶解固体产物；
65.(3)浸提：过滤分别收集酶解液体产物和酶解固体产物，酶解固体产物用75％酒精水溶液80℃浸提3次，每次2小时，酶解固体产物和75％酒精水溶液之间的质量比为1：15，合并浸提液；
66.(4)浓缩：浸提液和酶解液体产物进行合并，减压浓缩至相当于灵芝质量的2倍，制得浓缩产物；
67.(5)醇降：浓缩产物加入到相当于浓缩产物3倍量的95％酒精水溶液中，搅拌溶解，静置沉降8小时，过滤分离制得沉降液a和沉降物a；
68.(6)收膏：沉降液a减压浓缩至干重，得灵芝醇溶提取物ⅱ。
69.(7)调配；将沉降物a加入到相当于沉降物a的10倍水中，搅拌溶解，再加入相当于灵芝质量的10wt％单甘脂和5wt％丙二醇，搅拌均匀，静置沉降24小时，过滤去渣，烘干得灵芝水溶提取物ⅱ。
70.对比例1的灵芝醇溶提取物ⅱ的提取物得率为91.8％、灵芝醇溶提取物ⅱ的提取物得率为20.1％。
71.将对比例1所制得的灵芝醇溶提取物ⅱ、灵芝水溶提取物ⅱ按照1：10(烟丝为10)
的比例分别与烟丝混合制得风味烟草，再将风味烟草制成香烟，测试香烟评吸效果。
72.对比例1灵芝醇溶提取物ⅱ的外观颜色状态、及其所制得的香烟的评吸效果见表1。
73.表1实施例1、对比例1的产品测评
74.样品名称外观颜色状态香烟评吸效果灵芝醇溶提取物ⅰ红色油状液体，澄清透明甜润，香气优雅丰满灵芝醇溶提取物ⅱ红色油状液体，混浊有沉淀甜润，余味微苦带涩
75.在浓缩步骤加入的甘油和丙二醇，可以提高灵芝中特定药效物质(灵芝多糖、三萜类灵芝酸等)含量，得到的灵芝醇溶提取物加入烟草中的评吸效果明显，可去除香烟中的苦涩味。当浓缩步骤中只加入相当于灵芝质量的10wt％甘油时，得率会有加大的下降，当浓缩步骤中只加入相当于灵芝质量的10wt％丙二醇时苦涩味无法除去。
76.对比例2
77.灵芝提取物ⅲ包括独立的灵芝醇溶提取物ⅲ、灵芝水溶提取物ⅲ及其对应的风味烟草，其制作方法如下步骤(调配步骤不添加单甘脂和丙二醇)：
78.(1)粉碎：将10kg灵芝粉碎至无颗粒的绒状；
79.(2)酶解：粉碎后的灵芝加入其12倍质量的蒸馏水，搅拌均匀，再加相当于灵芝质量的0.5wt％复合果胶酶进行50℃酶解12小时，100℃灭活后冷却至室温，制得酶解物，酶解物包括酶解液体产物和酶解固体产物；
80.(3)浸提：过滤分别收集酶解液体产物和酶解固体产物，酶解固体产物用75％酒精水溶液80℃浸提3次，每次2小时，酶解固体产物和75％酒精水溶液之间的质量比为1：15，合并浸提液；
81.(4)浓缩：浸提液和酶解液体产物进行合并，加入相当于灵芝质量的10wt％甘油和丙二醇1:1的混合物，减压浓缩至相当于灵芝质量的2倍，制得浓缩产物；
82.(5)醇降：浓缩产物加入到相当于浓缩产物3倍量的95％酒精水溶液中，搅拌溶解，静置沉降8小时，过滤分离制得沉降液a和沉降物a；
83.(6)收膏：沉降液a减压浓缩至干重，得灵芝醇溶提取物ⅲ。
84.(7)调配；将沉降物a加入到相当于沉降物a的10倍水中，搅拌溶解，静置沉降24小时，过滤去渣，烘干得灵芝水溶提取物ⅲ。
85.对比例2的灵芝醇溶提取物ⅲ的提取物得率为90.2％、灵芝水溶提取物ⅲ的提取物得率为19.2％。
86.将对比例2所制得的灵芝醇溶提取物ⅲ、灵芝水溶提取物ⅲ按照1：10(烟丝为10)的比例分别与烟丝混合制得风味烟草，再将风味烟草制成香烟，测试香烟评吸效果。
87.步骤(7)的过滤去渣的质量百分比(相对于灵芝)、对比例2灵芝水溶提取物ⅲ所制得的香烟的评吸效果见表2。
88.表2实施例1、对比例2的产品测评
89.样品名称过滤残渣香烟评吸效果灵芝水溶提取物ⅰ2.1％润感明显，协调醇厚灵芝水溶提取物ⅲ5.6％增加润感，略带壤香
90.单甘脂和丙二醇，可以促进灵芝中水溶性物质(多种氨基酸和多糖类)溶解并分散
均匀，易于将不溶物质进行分离，得到的水溶提取物加入到烟草中进行评吸，效果明显，可去香烟中除土壤的味道。