一种白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒及检测方法与流程

1.本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及一种白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒及检测方法。


背景技术：

2.il-6是炎症免疫反应中重要的细胞因子之一，能够产生促进b细胞分泌抗体、促进t细胞生长和il-2的产生等；此外，可以调节多种细胞的生长与分化，具有调节免疫应答、急性期反应及造血功能，并在机体的抗感染免疫反应中起重要作用；il-6在多种疾病时均有明显改变，其水平与疾病的活动期的发展变化、排斥反应程度以及治疗效果都密切相关。通过对il-6水平的检测了解患者的病情和疗效：术后、烧伤、急性感染、器官移植排斥反应等疾病时，患者体液（血清、尿液、囊液、培养上清）中也可观察到il-6明显升高。
3.目前，国内白介素6的检测主要采用进口试剂和免疫组化试剂，国内开发的试剂盒多采用化学发光方法和酶联免疫法，这些方法检测步骤多，引进的影响因素较多，检测结果易造成偏差。
4.因此，一种白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒及检测方法亟待提出。


技术实现要素：

5.为解决现有技术存在的缺陷，本发明提供一种白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒及检测方法。
6.为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：本发明提供一种白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒，包括试剂卡、样本稀释液和id卡，所述试剂卡包括试纸条和塑料卡壳，所述试纸条包括硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜和吸水垫由下至上依次设置于塑料卡壳上。
7.作为本发明的一种优选技术方案，所述硝酸纤维素膜内含有t/c线包被抗体。
8.作为本发明的一种优选技术方案，所述玻璃纤维膜内含有荧光标记抗体。
9.作为本发明的一种优选技术方案，所述样本稀释液为0.03 m磷酸盐缓冲液。
10.作为本发明的一种优选技术方案，所述id卡内存储有试剂的标准曲线信息。
11.作为本发明的一种优选技术方案，本发明还提供一种白介素6荧光免疫层析检测方法，包括以下步骤：s1、将上述白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒和样品置于室温下放置15～30 min，待恢复到室温后使用；s2、取出试剂盒中的id卡插入到检测仪中，将试剂的标准曲线信息导入仪器；s3、将试剂卡放置到平整的桌面上；s4、量取100 μl待测样品加入到样本稀释液中，漩涡震荡混合5～10 s；s5、量取混合好的待测样品80 μl加入试剂卡加样孔，室温下反应15 min；s6、将试剂卡插入仪器检测槽，操作仪器对试剂卡进行测量，测量完成后仪器自动
将浓度值显示在屏幕上，从检测仪上读取或打印检测结果。
12.本发明相较于现有技术，具有以下有益效果：本发明将样本和样本稀释液混匀后加入试剂卡加样孔，液体在毛细管效应下向上层析移动，样本中的il-6先与荧光微球标记的il-6抗体结合形成二元复合物，然后继续向上层析，随后被检测线上的另一il-6抗体捕获，通过双抗体夹心原理形成“三明治”式夹心免疫复合物。免疫复合物荧光信号的强弱与样本中il-6的含量成正比，经干式荧光免疫分析仪判读，得出样本中il-6的浓度。本发明根据荧光强度，对物质进行定性或定量分析，具有高灵敏度、选择性强、需样量少和操作简便等优点。
具体实施方式
13.以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。
14.实施例1本实施例提供一种白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒，包括试剂卡、样本稀释液和id卡，所述试剂卡包括试纸条和塑料卡壳，所述试纸条包括硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜和吸水垫由下至上依次设置于塑料卡壳上。所述硝酸纤维素膜内含有t/c线包被抗体，所述玻璃纤维膜内含有荧光标记抗体，所述样本稀释液为0.03 m磷酸盐缓冲液，所述id卡内存储有试剂的标准曲线信息。
15.实施例2本实施例提供一种白介素6荧光免疫层析检测方法，包括以下步骤：s1、将白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒和样品置于室温下放置15～30 min，待恢复到室温后使用；s2、取出试剂盒中的id卡插入到检测仪中，将试剂的标准曲线信息导入仪器；s3、将试剂卡放置到平整的桌面上；s4、量取100 μl待测样品加入到样本稀释液中，漩涡震荡混合5～10 s；s5、量取混合好的待测样品80 μl加入试剂卡加样孔，室温下反应15 min；s6、将试剂卡插入仪器检测槽，操作仪器对试剂卡进行测量，测量完成后仪器自动将浓度值显示在屏幕上，从检测仪上读取或打印检测结果。
16.hook效应：当样品的浓度达到2000 pg/ml时，未出现hook效应，但浓度过高时会出现抗原过剩的情况，此时测定值可能会很低，从而会给出误导的结果。样本中：胆红素≤0.2 g/l，血红蛋白≤5 g/l，甘油三脂≤10 g/l，不会对试验产生干扰。
17.另外，通过本实施例试剂盒及检测方法获得以下性能指标：检出限：≤5 pg/ml；线性范围：（5-1000）pg/ml，相关系数r≥0.990；重复性：变异系数（cv）≤15%；批间差：批间极差（r）≤5%；准确度：相对偏差≤
±
15%。
18.本实施例将样本和样本稀释液混匀后加入试剂卡加样孔，液体在毛细管效应下向上层析移动，样本中的il-6先与荧光微球标记的il-6抗体结合形成二元复合物，然后继续
向上层析，随后被检测线上的另一il-6抗体捕获，通过双抗体夹心原理形成“三明治”式夹心免疫复合物。免疫复合物荧光信号的强弱与样本中il-6的含量成正比，经干式荧光免疫分析仪判读，得出样本中il-6的浓度。
19.最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。


技术特征：
1.一种白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒，其特征在于，包括试剂卡、样本稀释液和id卡，所述试剂卡包括试纸条和塑料卡壳，所述试纸条包括硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜和吸水垫由下至上依次设置于塑料卡壳上。2.根据权利要求1所述的白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒，其特征在于，所述硝酸纤维素膜内含有t/c线包被抗体。3.根据权利要求1所述的白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒，其特征在于，所述玻璃纤维膜内含有荧光标记抗体。4.根据权利要求1所述的白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒，其特征在于，所述样本稀释液为0.03 m磷酸盐缓冲液。5.根据权利要求1所述的白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒，其特征在于，所述id卡内存储有试剂的标准曲线信息。6.一种白介素6荧光免疫层析检测方法，其特征在于，包括以下步骤：s1、将如权利要求1-5任一所述的权利要求1所述的白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒和样品置于室温下放置15～30 min，待恢复到室温后使用；s2、取出试剂盒中的id卡插入到检测仪中，将试剂的标准曲线信息导入仪器；s3、将试剂卡放置到平整的桌面上；s4、量取100 μl待测样品加入到样本稀释液中，漩涡震荡混合5～10 s；s5、量取混合好的待测样品80 μl加入试剂卡加样孔，室温下反应15 min；s6、将试剂卡插入仪器检测槽，操作仪器对试剂卡进行测量，测量完成后仪器自动将浓度值显示在屏幕上，从检测仪上读取或打印检测结果。

技术总结
本发明公开了一种白介素6荧光免疫层析检测的试剂盒及检测方法，该试剂盒包括试剂卡、样本稀释液和ID卡，试剂卡包括试纸条和塑料卡壳，试纸条包括硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜和吸水垫，硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜和吸水垫由下至上依次设置于塑料卡壳上。本发明将样本和样本稀释液混匀后加入试剂卡加样孔，液体在毛细管效应下向上层析移动，样本中的IL-6先与荧光微球标记的IL-6抗体结合形成二元复合物，然后继续向上层析，随后被检测线上的另一IL-6抗体捕获，通过双抗体夹心原理形成“三明治”式夹心免疫复合物。免疫复合物荧光信号的强弱与样本中IL-6的含量成正比，经干式荧光免疫分析仪判读，得出样本中IL-6的浓度。6的浓度。


技术研发人员：顾金华 梁佳然
受保护的技术使用者：苏州芯基维康医疗科技有限公司
技术研发日：2022.09.29
技术公布日：2023/1/31