带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置及填充方法与流程

1.本发明涉及到纳升色谱柱制作技术领域，具体涉及到一种带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置及填充方法。


背景技术：

2.人类基因组精细图绘制完成的同年，人类蛋白质组计划就立刻开展起来了。科学界一致认为，蛋白质组学是后基因组时代研究的重点。质谱(或“液质联用系统”)是蛋白质或蛋白质组学研究的利器。“液质联用系统”中的“液”指的就是液相色谱。液相色谱的主要作用是样品的梯度分离，分离之后的样品被送到质谱中进行扫描和数据采集。蛋白质组学研究中最常用到的液相是纳升液相，流速低(比如300nl/min)、色谱柱的内径小(比如75μm)，可以达到上样量小、灵敏度高、检测深度高的需求。纳升液相的表现直接影响到质谱检测数据的效果。其中，纳升色谱柱又是液相表现好坏的最关键因素之一。
3.国内外各课题组做蛋白质组学研究时使用的纳升色谱柱有两种来源：商品化的纳升色谱柱和自制的纳升色谱柱。商品化的纳升色谱柱在出厂时会做严格的品控，一般分离效果和一致性都比较理想。纳升色谱柱是蛋白质组学研究中常用的耗材，在柱效下降、色谱柱污染、柱压异常等情况出现时，通常就需要更换。商品化纳升色谱柱的价格近年来一直在上涨，目前单根的价格已高达1.5万元左右。高昂的费用使得很多研究者开始自行灌制纳升色谱柱。
4.自制纳升色谱柱解决了费用问题，但是新的问题又会凸显出来。石英毛细管空柱、色谱柱填料、灌制装置、和灌制方法是自制纳升色谱柱的四个关键要素。石英毛细管空柱和色谱柱填料的问题好解决，选择公认的效果较好的品牌即可。目前灌制装置和灌制方法是主要的限制因素。目前行业内使用较多的是美国next advance公司提供的pressure injection cell解决方案，详情可参看网址
5.(https://www.nextadvance.com/pressure-injection-cells-lc-ms-capillary-column-packing-loader/)。
6.以next advance公司提供的pressure injection cell方案为例，虽然可以实现自制纳升色谱柱的目的，但是在使用过程中会发现有一些局限性或不足之处。比如，该装置一次只能灌制一根色谱柱，如果对色谱柱需求量比较多，制作色谱柱的效率显得有些不足。其次，装配色谱柱时需要用到扳手，力道控制不好可能会造成密封性不佳或者过紧造成接头损坏。另外，按照该装置附带说明书的方法，色谱柱灌制后的卸压阶段很难控制，要么时间非常久，要么卸压太快导致填料回流导致色谱柱作废。


技术实现要素：

7.本发明的目的是针对现有技术存在的问题，提供带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置及填充方法。
8.为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
9.带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，包括压力池，以及设置在所述压力池上方的密封盖，所述压力池内设有多个样品瓶底座，所述样品瓶底座上分别设有样品瓶，所述样品瓶内分别设有磁力搅拌转子；所述样品瓶内插设有石英毛细管，所述石英毛细管向上伸出所述密封盖并通过手拧接头与所述密封盖固定，所述石英毛细管与所述样品瓶的底部设有1～5mm的间隙；所述样品瓶的侧壁设有进出气通道，所述进出气通道连接有切换阀，所述切换阀的一个接头连接有进气管，所述进气管与氮气钢瓶连接，所述切换阀的另一个接头连接有出气管，所述出气管上设有卸压控制模块；所述压力池的下方还设有驱动所述磁力搅拌转子的磁力驱动器。
10.本纳升色谱柱填充装置结构简单，易于使用，无需借助拧动工具即可完成石英毛细管的组装，每个压力池能够同时进行多个纳升色谱柱的灌制，可以扩展成三通道、四通道等，提升了批量灌制的效率和速度；而且在灌制后能够进行卸压操作，达到填料不回流的较好效果。
11.所述样品瓶底座的设置能够固定所述样品瓶，保持所述样品瓶稳定，有利于所述石英毛细管的平稳填充；所述石英毛细管常用内径规格有50μm/75μm/100μm/150μm，能够用作纳升色谱柱的空柱；所述磁力搅拌转子(微型)的设置，能够对填料悬液进行搅拌，保持填料悬液的混合性能，也能够加快填料悬液的流动，有利于灌制；所述石英毛细管与所述样品瓶之间设置的间隙，一方面能够为所述磁力搅拌转子提供旋转空间，另一方面能够形成合适的填料悬液压力和流动空间，以便压入所述填料悬液。
12.所述切换阀的设置能够切换进气状态和出气状态，两种状态不同时进行；所述氮气钢瓶能够为压力池提供压力气体，所述卸压控制模块能够精细控制卸压速度，能够缓慢均匀的将压力池内的气体卸出，能够避免因卸压不当导致的填料悬液回流，避免出现填充不均匀的纳升色谱柱。
13.进一步的，所述卸压控制模块包括卸压阀，以及与所述卸压阀连接的压力表，所述卸压阀在15min的时间内将压力从1000psi缓慢释放至0psi。
14.所述卸压阀为降压阀或者微量调节阀，能够在规定时间内将填充的压力气体缓慢均匀的释放出来，以保证不引起所述石英毛细管内已填充好的填料悬液的位置变化。
15.进一步的，所述密封盖上设有若干毛细管色谱柱通道，所述手拧接头安装在所述毛细管色谱柱通道上，所述毛细管色谱柱通道上还设有与所述手拧接头替换安装的密封堵头。
16.所述毛细管色谱柱通道与下方的所述样品瓶相对应，通过插入的方式就能够让所述石英毛细管进入所述样品瓶内；所述密封堵头的设置用来封堵不使用的毛细管色谱柱通道，以确保压力池的密封。
17.进一步的，所述密封盖通过多个固定螺丝与所述压力池连接，所述密封盖的端面上还设有若干圈橡胶密封圈，用以密封所述压力池。
18.进一步的，所述样品瓶为上方敞口的瓶子，所述样品瓶内填充有填料悬液，所述填料悬液为体积比1：5左右的填料和甲醇混合悬液。
19.进一步的，所述压力池为圆形、椭圆形、正方形或者长方形，所述压力池内中心对称的设有2～6个所述样品瓶，以使本装置能够支持多根纳升色谱柱同时灌制，在密封盖空间允许的情况下，可以支持数根的设置。
20.进一步的，所述压力池的下方设有卡合槽，所述卡合槽用于对接所述磁力驱动器；所述磁力驱动器上设有若干个驱动盘，所述驱动盘与所述样品瓶一一对应设置，相邻的驱动盘之间还设置有屏蔽隔板。
21.也就是对于多个样品瓶内磁力搅拌转子分别通过所述驱动盘进行驱动旋转，这样设置的好处是能够避免同一个驱动器驱动多个不同位置的磁力搅拌转子而造成搅拌不均匀、不充分的问题，也能够避免磁力搅拌转子向某一侧瓶体靠近而碰撞瓶体，各个所述磁力搅拌转子互不干扰。所述屏蔽隔板的设置，能够减少相邻的所述驱动盘的磁场干扰，有利于提升单个所述磁力搅拌转子的搅拌稳定性和可控性；同时所述屏蔽隔板也能够用于支撑所述压力池的底部。
22.进一步的，所述样品瓶底座包括底板，以及设置在所述底板上的安装框，所述安装框的内周设有弹性垫，所述安装框的上方设有弹性夹套，所述弹性夹套在非夹持状态下向内倾斜设置，所述弹性夹套内设有金属弹片；所述底板的外径大于所述安装框的外径，所述底板通过若干定位销与所述压力池内底部的销孔可拆卸连接。
23.所述安装框能够用于固定卡合所述样品瓶，所述弹性垫和所述弹性夹套的设置，既能够通过自身的形变来夹持固定所述样品瓶，也能够提升夹持的摩擦力，保持夹持稳定，还能够起到防护作用，避免破坏瓶体；所述弹性夹套自然状态下是向内翻的，当所述样品瓶插入时就能够贴紧样品瓶的外壁，内部设置的金属弹片能够增加强度，也能够反复变形使用。
24.所述样品瓶的插接和所述底板的定位连接，均无需借助外部工具，通过适当的卡合力或者自身重力即可完成连接和固定，简单方便。
25.进一步的，所述底板的下方还设有滑块，所述压力池的内底部设有滑槽系统，所述滑槽系统包括环形滑槽，以及与所述环形滑槽连通的径向滑槽，所述径向滑槽的端部设有滑入口，所述滑槽系统的两侧间隔的设有多组所述销孔；所述滑块从所述滑入口插入所述径向滑槽后，沿所述径向滑槽和所述环形滑槽移动至预设位置。
26.通过所述滑块与所述滑槽系统的配合，一方面便于灵活调节所述样品瓶底座的位置，能够根据实际数量依次插入多个所述样品瓶底座，并分别移动至相应位置，另一方面所述滑槽对所述滑块有上下和左右限位的作用，配合所述定位销的使用就能够稳定的固定所述样品瓶底座，避免其晃动或者偏移。所述滑入口的尺寸比所述滑块的尺寸略大，所述滑块从所述滑入口滑入后就能够沿所述滑槽系统移动，操作简单方便，也无需借助辅助工具进行连接固定。
27.采用这种方式安装样品瓶底座，能够充分利用单个的所述压力池，避免使用多通道时设置多个压力池的浪费，降低了压力池的设置数量和成本。
28.进一步的，一种带卸压控制模块的纳升色谱柱填充方法，包含上述的带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，所述填充方法包括如下步骤：
29.(1)准备石英毛细管空柱：用甲醇冲洗石英毛细管，将管路中的杂质冲掉，再用氮气将管路中的甲醇吹干，用激光拉制仪拉制纳升色谱柱针尖，或者使用试剂在毛细管一端制作筛板，用来挡住填料悬液；
30.(2)准备填料悬液：取100μl填料，加入500μl甲醇，短暂涡旋混匀后，超声水浴1分钟，得到填料悬液；
31.(3)组装石英毛细管和填充组装：将氮气钢瓶、进气管、出气管、卸压控制模块和所述压力池安装上述连接关系进行装配；将多个装有填料悬液的样品瓶分别放置在多个样品瓶底座上，并在所述样品瓶中分别放入一个磁力搅拌转子；在所述石英毛细管上装好所述手拧接头，插入密封盖的毛细管色谱柱通道中，触到所述样品瓶底部后，再向上拔出3mm，拧紧所述手拧接头；若有多根所述石英毛细管需要同时填充，按照相同的方式装配，若只有一根，则在其它毛细管色谱柱通道上装入密封堵头，拧紧即可；将所述密封盖上的固定螺丝拧紧，最后把装配完成的压力池放在磁力驱动器上，开启搅拌；
32.(4)填充石英毛细管：将所述切换阀转到进气口，打开氮气钢瓶的氮气供应，慢慢提升压力至1000psi，填料悬液被慢慢压进所述石英毛细管的空柱中，并在石英毛细管的出口端逐渐聚集，等待至填料悬液填至所需位置；
33.(5)卸压：关闭氮气供应，确认所述卸压控制模块呈关闭状态，将所述切换阀转到出气口后，慢慢打开所述卸压控制模块，开始卸压至内外压力一致；
34.(6)确认卸压完成，压力表显示为零，取下柱子，完成所述石英毛细管的填充，即得到纳升色谱柱；
35.(7)纳升色谱柱填充评估，包括如下两个环节：
36.评估环节一：观察石英毛细管填料是否均匀，用显微镜观察经上述步骤填充完成的纳升色谱柱；
37.评估环节二：评估质谱做样效果，将纳升色谱柱安装到液相，分别使用高有机相、水相各冲洗色谱柱至少1小时，用以活化和平衡色谱柱，由自动进样器吸入500ng的hela细胞酶解肽段，经过纳升色谱柱进行梯度分离，进入q exactive hf质谱仪进行检测；
38.纳升色谱柱评估合格后方可正常使用。
39.与现有技术相比，本发明的有益效果是：1、本纳升色谱柱填充装置结构简单，易于使用，无需借助拧动工具即可完成石英毛细管的组装，每个压力池能够同时进行多个纳升色谱柱的灌制，可以扩展成三通道、四通道等，提升了批量灌制的效率和速度；而且在灌制后能够进行卸压操作，达到填料不回流的较好效果；2、所述卸压控制模块能够精细控制卸压速度，能够缓慢均匀的将压力池内的气体卸出，能够避免因卸压不当导致的填料悬液回流，避免出现填充不均匀的纳升色谱柱；3、所述石英毛细管的装配、所述样品瓶底座和样品瓶的安装均不需要借助扳手螺丝刀等工具，安装操作简单方便；4、采用本纳升色谱柱填充装置和填充方法制作的纳升色谱柱，填料悬液填充的非常均匀，通过质谱仪检测，同时制作的多根色谱柱的分离效果均非常理想。
附图说明
40.图1为本发明带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置的整体结构示意图；
41.图2为本发明带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置设置在磁力驱动器上的结构示意图；
42.图3为本发明带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置的端面结构示意图；
43.图4为本发明带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置的样品瓶安装结构示意图；
44.图5为本发明带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置的压力池内底部结构示意图；
45.图6为本发明带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置的四通道结构示意图；
46.图7为本发明带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置的椭圆形结构示意图；
47.图8为本发明灌制的纳升色谱柱对比示意图；
48.图9为本发明灌制的纳升色谱柱质谱测试色谱柱分离效果示意图；
49.图中：1、压力池；2、密封盖；3、样品瓶底座；301、底板；302、安装框；303、弹性垫；304、弹性夹套；305、金属弹片；306、定位销；307、滑块；4、样品瓶；5、磁力搅拌转子；6、石英毛细管；7、手拧接头；8、切换阀；9、进气管；10、出气管；11、氮气钢瓶；12、卸压控制模块；13、固定螺丝；14、卡合槽；15、磁力驱动器；16、驱动盘；17、屏蔽隔板；18、环形滑槽；19、径向滑槽；20、滑入口；21、销孔。
具体实施方式
50.下面将结合本发明中的附图，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动条件下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
51.在本发明的描述中，需要说明的是，术语“中间”、“上”、“下”、“左”、“右”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。
52.如图1和图3所示，一种带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，包括压力池1，以及设置在所述压力池1上方的密封盖2，所述压力池1内设有多个样品瓶底座3，所述样品瓶底座3上分别设有样品瓶4，所述样品瓶4内分别设有磁力搅拌转子5；所述样品瓶4内插设有石英毛细管6，所述石英毛细管6向上伸出所述密封盖2并通过手拧接头7与所述密封盖2固定，所述石英毛细管6与所述样品瓶4的底部设有1～5mm的间隙；所述样品瓶4的侧壁设有进出气通道，所述进出气通道连接有切换阀8，所述切换阀8的一个接头连接有进气管9，所述进气管9与氮气钢瓶11连接，所述切换阀8的另一个接头连接有出气管10，所述出气管10上设有卸压控制模块12；所述压力池1的下方还设有驱动所述磁力搅拌转子5的磁力驱动器。
53.本纳升色谱柱填充装置结构简单，易于使用，无需借助拧动工具即可完成石英毛细管的组装，每个压力池能够同时进行多个纳升色谱柱的灌制，可以扩展成三通道、四通道等，提升了批量灌制的效率和速度；而且在灌制后能够进行卸压操作，达到填料不回流的较好效果。
54.所述样品瓶底座3的设置能够固定所述样品瓶4，保持所述样品瓶4稳定，有利于所述石英毛细管6的平稳填充；所述石英毛细管6常用内径规格有50μm/75μm/100μm/150μm，能够用作纳升色谱柱的空柱；所述磁力搅拌转子5(微型)的设置，能够对填料悬液进行搅拌，保持填料悬液的混合性能，也能够加快填料悬液的流动，有利于灌制；所述石英毛细管6与所述样品瓶4之间设置的间隙，一方面能够为所述磁力搅拌转子5提供旋转空间，另一方面能够形成合适的填料悬液压力和流动空间，以便压入所述填料悬液。
55.所述切换阀8的设置能够切换进气状态和出气状态，两种状态不同时进行；所述氮气钢瓶11能够为压力池提供压力气体，所述卸压控制模块12能够精细控制卸压速度，能够
缓慢均匀的将压力池内的气体卸出，能够避免因卸压不当导致的填料悬液回流，避免出现填充不均匀的纳升色谱柱。
56.进一步的，所述卸压控制模块12包括卸压阀，以及与所述卸压阀连接的压力表，所述卸压阀在15min的时间内将压力从1000psi缓慢释放至0psi。
57.所述卸压阀为微量调节阀，能够在规定时间内将填充的压力气体缓慢均匀的释放出来，以保证不引起所述石英毛细管内已填充好的填料悬液的位置变化。
58.进一步的，所述密封盖2上设有若干毛细管色谱柱通道，所述手拧接头7安装在所述毛细管色谱柱通道上，所述毛细管色谱柱通道上还设有与所述手拧接头7替换安装的密封堵头。
59.所述毛细管色谱柱通道与下方的所述样品瓶4相对应，通过插入的方式就能够让所述石英毛细管6进入所述样品瓶4内；所述密封堵头的设置用来封堵不使用的毛细管色谱柱通道，以确保压力池的密封。
60.进一步的，所述密封盖2通过四个固定螺丝13与所述压力池1连接，所述密封盖2的端面上还设有橡胶密封圈，用以密封所述压力池。
61.进一步的，所述样品瓶4为上方敞口的瓶子，所述样品瓶4内填充有填料悬液，所述填料悬液为体积比1：5左右的填料和甲醇混合悬液。
62.进一步的，所述压力池1为圆形，所述压力池1内中心对称的设有2个所述样品瓶4，以使本装置能够支持多根纳升色谱柱同时灌制，在密封盖空间允许的情况下，可以支持数根的设置。
63.实施例一：
64.结合图2、图4和图5所示，所述密封盖2上设置的固定螺丝13为蝶形螺丝，能够通过手拧的方式快速装卸。
65.进一步的，所述压力池1的下方设有卡合槽14，所述卡合槽14用于对接所述磁力驱动器15；所述磁力驱动器15上设有若干个驱动盘16，所述驱动盘16与所述样品瓶4一一对应设置，相邻的驱动盘16之间还设置有屏蔽隔板17。
66.也就是对于多个样品瓶内的磁力搅拌转子5分别通过所述驱动盘16进行驱动旋转，这样设置的好处是能够避免同一个驱动器驱动多个不同位置的磁力搅拌转子5而造成搅拌不均匀、不充分的问题，也能够避免磁力搅拌转子5向某一侧瓶体靠近而碰撞瓶体，独立旋转驱动的设置使各个所述磁力搅拌转子5互不干扰。所述屏蔽隔板17的设置，能够减少相邻的所述驱动盘16的磁场干扰，有利于提升单个所述磁力搅拌转子5的搅拌稳定性和可控性；同时所述屏蔽隔板17也能够用于支撑所述压力池1的底部。
67.进一步的，所述样品瓶底座3包括底板301，以及设置在所述底板301上的安装框302，所述安装框302的内周设有弹性垫303，所述安装框302的上方设有弹性夹套304，所述弹性夹套304在非夹持状态下向内倾斜设置，所述弹性夹套304内设有金属弹片305；所述底板301的外径大于所述安装框302的外径，以使所述底板301的周边能够通过若干定位销306与所述压力池1内底部的销孔可拆卸连接。
68.所述安装框302能够用于固定卡合所述样品瓶4，所述弹性垫303和所述弹性夹套304的设置，既能够通过自身的形变来夹持固定所述样品瓶4，也能够提升夹持的摩擦力，保持夹持稳定，还能够起到防护作用，避免破坏瓶体；所述弹性夹套304自然状态下是向内翻
的，当所述样品瓶4插入时就能够贴紧样品瓶4的外壁，内部设置的金属弹片305能够增加强度，也能够反复变形使用。所述样品瓶4的底部四周设有倒角结构，便于其插入所述弹性夹套304中。
69.所述样品瓶4的插接和所述底板301的定位连接，均无需借助外部工具，通过适当的卡合力或者自身重力即可完成连接和固定，简单方便。
70.进一步的，所述底板301的下方还设有滑块307，所述压力池1的内底部设有滑槽系统，所述滑槽系统包括环形滑槽18，以及与所述环形滑槽18连通的径向滑槽19，所述径向滑槽19在圆心端部设有滑入口20，所述滑槽系统的两侧间隔的设有多组所述销孔21，根据要设置样品瓶的位置确定；所述滑块307从所述滑入口20插入所述径向滑槽19后，沿所述径向滑槽19和所述环形滑槽18移动至预设位置。
71.通过所述滑块307与所述滑槽系统的配合，一方面便于灵活调节所述样品瓶底座3的位置，能够根据实际数量依次插入多个所述样品瓶底座3，并分别移动至相应位置，另一方面所述滑槽系统对所述滑块307有上下和左右限位的作用，配合所述定位销306的使用就能够稳定的固定所述样品瓶底座3，避免其晃动或者偏移。所述滑入口20的尺寸比所述滑块307的尺寸略大，使所述滑块307从所述滑入口20滑入后就能够沿所述滑槽系统移动，操作简单方便，也无需借助辅助工具进行连接固定。
72.采用这种方式安装样品瓶底座3，能够充分利用单个的所述压力池1，避免使用多通道时设置多个压力池的浪费，降低了压力池的设置数量和成本。
73.实施例二：
74.本实施例提供了多种形状的压力池。如图6所示，所述压力池的外形为圆形，其内设有四个纳升毛细管色谱柱通道，也就是中心对称的插设有四根所述石英毛细管6。
75.如图7所述，所述压力池1的形状为椭圆形，这样在设置较少石英毛细管6的时候，能够减小压力池的体积。所述压力池还可以时正方形或者长方形结构。
76.实施例三：
77.一种带卸压控制模块的纳升色谱柱填充方法，包含上述的带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，所述填充方法包括如下步骤：
78.(1)准备石英毛细管空柱：用甲醇冲洗石英毛细管，将管路中的杂质冲掉，再用氮气将管路中的甲醇吹干，用激光拉制仪拉制纳升色谱柱针尖，或者使用试剂在毛细管一端制作筛板，用来挡住填料悬液；
79.(2)准备填料悬液：取100μl填料，加入500μl甲醇，短暂涡旋混匀后，超声水浴1分钟左右，得到填料悬液；
80.(3)组装石英毛细管和填充组装：将氮气钢瓶、进气管、出气管、卸压控制模块和所述压力池安装实施例一中的连接关系进行装配；将多个装有填料悬液的样品瓶分别放置在多个样品瓶底座上，并在所述样品瓶中分别放入一个磁力搅拌转子；在所述石英毛细管上装好所述手拧接头，插入密封盖的毛细管色谱柱通道中，触到所述样品瓶底部后，再向上拔出3mm，拧紧所述手拧接头；若有多根所述石英毛细管需要同时填充，按照相同的方式装配，若只有一根，则在其它毛细管色谱柱通道上装入密封堵头，拧紧即可；将所述密封盖上的固定螺丝拧紧，最后把装配完成的压力池放在磁力驱动器上，开启搅拌；
81.(4)填充石英毛细管：将所述切换阀转到进气口，打开氮气钢瓶的氮气供应，慢慢
提升压力至1000psi，填料悬液被慢慢压进所述石英毛细管的空柱中，并在石英毛细管的出口端逐渐聚集，等待至填料悬液填至所需位置；
82.(5)卸压：关闭氮气供应，确认所述卸压控制模块呈关闭状态，将所述切换阀转到出气口后，慢慢打开所述卸压控制模块，开始卸压至内外压力一致；
83.(6)确认卸压完成，压力表显示为零，取下柱子，完成所述石英毛细管的填充，即得到纳升色谱柱；
84.(7)纳升色谱柱填充评估，包括如下两个环节：
85.评估环节一：观察石英毛细管填料是否均匀，用显微镜观察经上述步骤填充完成的纳升色谱柱；如图8所示，中间展示的效果是填料比较均匀的状态，而右边展示的效果就是填料不均匀的状态，在上述卸压环节卸压过快时会出现该情形。
86.评估环节二：评估质谱做样效果，将纳升色谱柱安装到液相，分别使用高有机相(80％乙腈,0.1％甲酸)、水相(0.1％甲酸)各冲洗色谱柱至少1小时，用以活化和平衡色谱柱，由自动进样器吸入500ng的hela细胞酶解肽段，经过纳升色谱柱进行梯度分离，进入q exactive hf质谱仪进行检测；如图9所示，表明本方法制作的色谱柱的分离效果非常理想。纳升色谱柱评估合格后方可正常使用。
87.尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。