带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置及填充方法与流程

技术特征：
1.带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，包括压力池，以及设置在所述压力池上方的密封盖，其特征在于，所述压力池内设有多个样品瓶底座，所述样品瓶底座上分别设有样品瓶，所述样品瓶内分别设有磁力搅拌转子；所述样品瓶内插设有石英毛细管，所述石英毛细管向上伸出所述密封盖并通过手拧接头与所述密封盖固定，所述石英毛细管与所述样品瓶的底部设有1～5mm的间隙；所述样品瓶的侧壁设有进出气通道，所述进出气通道连接有切换阀，所述切换阀的一个接头连接有进气管，所述进气管与氮气钢瓶连接，所述切换阀的另一个接头连接有出气管，所述出气管上设有卸压控制模块；所述压力池的下方还设有驱动所述磁力搅拌转子的磁力驱动器。2.根据权利要求1所述的带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，其特征在于，所述卸压控制模块包括卸压阀，以及与所述卸压阀连接的压力表，所述卸压阀在15min的时间内将压力从1000psi缓慢释放至0psi。3.根据权利要求1所述的带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，其特征在于，所述密封盖上设有若干毛细管色谱柱通道，所述手拧接头安装在所述毛细管色谱柱通道上，所述毛细管色谱柱通道上还设有与所述手拧接头替换安装的密封堵头。4.根据权利要求1所述的带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，其特征在于，所述密封盖通过多个固定螺丝与所述压力池连接，所述密封盖的端面上还设有若干圈橡胶密封圈，用以密封所述压力池。5.根据权利要求1所述的带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，其特征在于，所述样品瓶为上方敞口的瓶子，所述样品瓶内填充有填料悬液，所述填料悬液为体积比1：5的填料和甲醇混合悬液。6.根据权利要求1所述的带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，其特征在于，所述压力池为圆形、椭圆形、正方形或者长方形，所述压力池内中心对称的设有2～6个所述样品瓶。7.根据权利要求1所述的带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，其特征在于，所述压力池的下方设有卡合槽，所述卡合槽用于对接所述磁力驱动器；所述磁力驱动器上设有若干个驱动盘，所述驱动盘与所述样品瓶一一对应设置，相邻的驱动盘之间还设置有屏蔽隔板。8.根据权利要求1所述的带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，其特征在于，所述样品瓶底座包括底板，以及设置在所述底板上的安装框，所述安装框的内周设有弹性垫，所述安装框的上方设有弹性夹套，所述弹性夹套在非夹持状态下向内倾斜设置，所述弹性夹套内设有金属弹片；所述底板的外径大于所述安装框的外径，所述底板通过若干定位销与所述压力池内底部的销孔可拆卸连接。9.根据权利要求8所述的带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，其特征在于，所述底板的下方还设有滑块，所述压力池的内底部设有滑槽系统，所述滑槽系统包括环形滑槽，以及与所述环形滑槽连通的径向滑槽，所述径向滑槽的端部设有滑入口，所述滑槽系统的两侧间隔的设有多组所述销孔；所述滑块从所述滑入口插入所述径向滑槽后，沿所述径向滑槽和所述环形滑槽移动至预设位置。10.一种带卸压控制模块的纳升色谱柱填充方法，其特征在于，包含如权利要求1～9任一项所述的带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置，所述填充方法包括如下步骤：
(1)准备石英毛细管空柱：用甲醇冲洗石英毛细管，将管路中的杂质冲掉，再用氮气将管路中的甲醇吹干，用激光拉制仪拉制纳升色谱柱针尖，或者使用试剂在毛细管一端制作筛板，用来挡住填料悬液；(2)准备填料悬液：取100μl填料，加入500μl甲醇，短暂涡旋混匀后，超声水浴1分钟，得到填料悬液；(3)组装石英毛细管和填充组装：将氮气钢瓶、进气管、出气管、卸压控制模块和所述压力池按照权利要求1中的连接关系进行装配；将多个装有填料悬液的样品瓶分别放置在多个样品瓶底座上，并在所述样品瓶中分别放入一个磁力搅拌转子；在所述石英毛细管上装好所述手拧接头，插入密封盖的毛细管色谱柱通道中，触到所述样品瓶底部后，再向上拔出3mm，拧紧所述手拧接头；若有多根所述石英毛细管需要同时填充，按照相同的方式装配，若只有一根，则在其它毛细管色谱柱通道上装入密封堵头，拧紧即可；将所述密封盖上的固定螺丝拧紧，最后把装配完成的压力池放在磁力驱动器上，开启搅拌；(4)填充石英毛细管：将所述切换阀转到进气口，打开氮气钢瓶的氮气供应，慢慢提升压力至1000psi，填料悬液被慢慢压进所述石英毛细管的空柱中，并在石英毛细管的出口端逐渐聚集，等待至填料悬液填至所需位置；(5)卸压：关闭氮气供应，确认所述卸压控制模块呈关闭状态，将所述切换阀转到出气口后，慢慢打开所述卸压控制模块，开始卸压至内外压力一致；(6)确认卸压完成，压力表显示为零，取下柱子，完成所述石英毛细管的填充，即得到纳升色谱柱；(7)纳升色谱柱填充评估，包括如下两个环节：评估环节一：观察石英毛细管填料是否均匀，用显微镜观察经上述步骤填充完成的纳升色谱柱；评估环节二：评估质谱做样效果，将纳升色谱柱安装到液相，分别使用高有机相、水相各冲洗色谱柱至少1小时，用以活化和平衡色谱柱，由自动进样器吸入500ng的hela细胞酶解肽段，经过纳升色谱柱进行梯度分离，进入质谱仪进行检测；纳升色谱柱评估合格后方可正常使用。

技术总结
本发明公开带卸压控制模块的纳升色谱柱填充装置及填充方法，包括压力池、密封盖、样品瓶底座、样品瓶、磁力搅拌转子、石英毛细管、手拧接头、进出气通道、切换阀、进气管、氮气钢瓶、出气管和卸压控制模块；所述压力池的下方还设有驱动所述磁力搅拌转子的磁力驱动器。本纳升色谱柱填充装置结构简单，易于使用，无需借助拧动工具即可完成石英毛细管的组装，每个压力池能够同时进行多个纳升色谱柱的灌制，可以扩展成三通道、四通道等，提升了批量灌制的效率和速度；而且在灌制后能够进行精准卸压操作，达到填料不回流的理想效果。达到填料不回流的理想效果。达到填料不回流的理想效果。


技术研发人员：韩强强 陈希 刘宜子 尚骏 陈继锋
受保护的技术使用者：谱度众合（武汉）生命科技有限公司
技术研发日：2022.09.02
技术公布日：2023/1/13