一种细胞外囊泡循环分离纯化平台的制作方法

1.本实用新型涉及分离纯化装置技术领域，具体而言，涉及一种细胞外囊泡循环分离纯化平台。


背景技术：

2.细胞外囊泡是具有双层膜结构的纳米级膜囊泡，来源于细胞分泌或细胞膜脱落，直径约为30-2000nm。细胞外囊泡也广泛存在于各种体液中，如唾液、尿液、血液、乳汁、腹水和脑脊液等。
3.细胞外囊泡携带有丰富的细胞来源的生物标志物，如蛋白质、脂类、核酸(dna、rna)等，是预后循环生物标志物的重要载体；并参与众多细胞关键过程，如细胞间通讯、细胞迁移、血管新生和免疫调节等，此外，细胞外囊泡来源于细胞，具有生物相容性好、低免疫原性及易于生物标记优势，有望作为新型药物载体。因此，细胞外囊泡相关研究具有重要科学价值。
4.传统分离和纯化细胞外囊泡的方法有超速离心法、超滤法、尺寸排阻色谱法、免疫磁珠法、以及聚乙二醇(peg)沉淀法。上述方法虽然各有优点，但存在耗时长，产量低以及纯度低等缺点，大大限制了其在临床上的进一步应用。前述可知，细胞外囊泡尺寸在30-1000nm范围，采用对应孔径的纳米膜可以对其进行有效分离和纯化。
5.现有细胞外囊泡分离纯化装置要么使用手动进行分离纯化，比如现有授权公告号为cn210856130u的实用新型专利，其公开了一种手动细胞外囊泡分离系统，其通过手动控制抽吸组件的设置，使得纯化柱的两端产生的压力差，从而实现快速分离细胞外囊泡的目的。要么使用电动进行分离纯化，比如现有申请公布号为cn111304049a的发明专利，其公开了一种细胞外囊泡循环分离纯化平台及方法，其主要是通过循环泵进行电动控制。现有缺乏可以电动和手动控制的细胞外囊泡分离纯化装置，不能给使用者进行多种选择，具有一定的局限性。


技术实现要素：

6.本实用新型的目的在于提供一种细胞外囊泡循环分离纯化平台，其能够单独通过电动控制和手动控制进行细胞外囊泡的分离纯化，给用户更多的选择，有电和无电情况下均能使用，使用范围更广。
7.本实用新型的实施例是这样实现的：
8.本技术实施例提供一种细胞外囊泡循环分离纯化平台，包括样品桶、分离组件、第一输送管和第二输送管，分离组件设有样品进口和样品出口；第一输送管的一端和第二输送管的一端均与样品桶连通，第一输送管的另一端和第二输送管的另一端均与样品进口连通；第一输送管设有手动加压组件，第二输送管设有蠕动泵；样品出口与样品桶之间通过回流管连通。
9.进一步的，在本实用新型的一些实施例中，上述手动加压组件包括与第一输送管
样品腔；15-滤液腔；16-滤液出口；17-滤液收集管；18-滤液收集桶；19-盒盖；20-盒体；21-底座；22-锁紧螺栓；23-压板；24-单向阀。
具体实施方式
26.为使本实用新型实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。通常在此处附图中描述和示出的本实用新型实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。
27.因此，以下对在附图中提供的本实用新型的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本实用新型的范围，而是仅仅表示本实用新型的选定实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通的技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。
28.应注意到：相似的标号和字母在下面的附图中表示类似项，因此，一旦某一项在一个附图中被定义，则在随后的附图中不需要对其进行进一步定义和解释。
29.在本实用新型实施例的描述中，需要说明的是，若出现术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，或者是该实用新型产品使用时惯常摆放的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。此外，若出现术语“第一”、“第二”等仅用于区分描述，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
30.此外，若出现“水平”、“竖直”等术语并不表示要求部件绝对水平或者竖直，而是可以稍微的倾斜。如“水平”仅仅是指其方向相对于“竖直”而言更加水平，并不是表示该结构一定要完全水平，而是可以稍微倾斜。
31.在本实用新型实施例的描述中，还需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，若出现术语“设置”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本实用新型中的具体含义。
32.实施例
33.请参照图1-图3，本实施例提供一种细胞外囊泡循环分离纯化平台，包括样品桶1、分离组件、第一输送管3和第二输送管4，分离组件设有样品进口5和样品出口6；第一输送管3的一端和第二输送管4的一端均与样品桶1连通，第一输送管3的另一端和第二输送管4的另一端均与样品进口5连通；第一输送管3设有手动加压组件，第二输送管4设有蠕动泵2；样品出口6与样品桶1之间通过回流管7连通。
34.实际使用时，将含有细胞外囊泡的混合样品注入样品桶1中，当需要使用手动控制进行细胞外囊泡的分离纯化时，混合样品流入第一输送管3中，通过手动加压组件将第一输送管3中的混合样品从样品进口5压入分离组件中，通过分离组件对混合样品进行分离纯化，分离纯化后的混合样品从样品出口6流入回流管7中，并经过回流管7流入样品桶1中完成循环即可，如此可以对样品桶1中的混合样品进行循环分离纯化。
35.当需要使用电动控制进行细胞外囊泡的分离纯化时，混合样品流入第二输送管4中，通过蠕动泵2将第二输送管4中的混合样品从样品进口5泵入分离组件中，通过分离组件对混合样品进行分离纯化，分离纯化后的混合样品从样品出口6流入回流管7中，并经过回流管7流入样品桶1中完成循环即可，如此可以对样品桶1中的混合样品进行循环分离纯化。如此本技术提供的细胞外囊泡循环分离纯化平台能够单独通过电动控制和手动控制进行细胞外囊泡的分离纯化，给用户更多的选择，有电和无电情况下均能使用，使用范围更广。
36.如图1-图3所示，在本实用新型的一些实施例中，上述手动加压组件包括与第一输送管3连通的外筒体8以及滑动设于外筒体8内部的密封活塞9，密封活塞9设有活塞杆10。上述第一输送管3内间隔设有两个单向阀24，外筒体8与第一输送管3的连通处位于两个单向阀24之间。
37.上述第一输送管3设有第一阀门11，第一阀门11位于手动加压组件与样品桶1之间。上述第二输送管4间隔设有两个第二阀门12，蠕动泵2位于两个第二阀门12之间。
38.当需要使用手动控制进行细胞外囊泡的分离纯化时，第一阀门11打开，两个第二阀门12关闭，此时样品桶1与第一输送管3导通，两个单向阀24均控制液体从样品桶1一侧朝着分离组件一侧流动。此时往上拉动活塞杆10，活塞杆10带动密封活塞9往上移动，此时样品桶1中的混合样品经过右侧的单向阀24流入外筒体8内，左侧的单向阀24闭合。
39.然后往下按压活塞杆10，活塞杆10带动密封活塞9往下移动将外筒体8内的混合样品经过左侧的单向阀24压入分离组件中，此时右侧的单向阀24闭合。如此可通过多次上下往复移动活塞杆10将样品桶1中的混合样品逐渐压入分离组件中进行分离纯化。
40.当需要使用电动控制进行细胞外囊泡的分离纯化时，第一阀门11关闭，两个第二阀门12打开，此时样品桶1与第二输送管4导通，启动蠕动泵2将样品桶1中的混合样品泵入分离组件中进行分离纯化。
41.如图1-图3所示，在本实用新型的一些实施例中，上述分离组件包括过滤盒，过滤盒内设有滤膜13，滤膜13将过滤盒内部分隔成样品腔14和滤液腔15；样品进口5和样品出口6均设于过滤盒且与样品腔14连通。
42.上述过滤盒设有与滤液腔15连通的滤液出口16，还包括滤液收集管17和滤液收集桶18，滤液收集管17的一端与滤液出口16连通，滤液收集管17的另一端与滤液收集桶18连通。
43.本实施例的滤膜13可采用亲水聚碳酸酯膜，滤膜13的孔径根据实际情况进行选择即可，比如需要分离纯化得到粒径大于30nm细胞外囊泡，此时滤膜13可采用孔径为30nm的亲水聚碳酸酯膜。混合样品从样品进口5流入样品腔14中并位于滤膜13顶部，本实施例的样品出口6直径小于样品进口5的直径，如此从样品进口5进入过滤盒内的混合样品流量大，从样品出口6流出过滤盒的混合样品流量小，便于在样品腔14内形成一定的压力，如此便于将混合样品中粒径小于30nm的杂质及小分子通过滤膜13流到滤液腔15中，分离纯化后的混合样品从样品出口6通过回流管7回流进入样品桶1中完成循环。滤液腔15中得到的液体可通过滤液出口16和滤液收集管17流入滤液收集桶18中进行收集。
44.如图1-图3所示，在本实用新型的一些实施例中，上述过滤盒包括可拆卸连接的盒盖19和盒体20，样品进口5和样品出口6均设于盒盖19，滤膜13设于盒体20。上述盒盖19设有外螺纹，盒体20设有内螺纹，盒盖19与盒体20螺纹连接。
45.上述盒体20为圆柱形，盒体20内侧壁沿其周侧设有环形的底座21，还包括锁紧螺栓22和环形的压板23，压板23设于底座21上方，滤膜13为圆形，滤膜13周侧嵌入底座21与压板23之间；锁紧螺栓22的一端穿过压板23并与底座21螺纹连接。
46.如此便于对滤膜13进行更换，更换滤膜13时，从盒体20旋转拆卸掉盒盖19，旋转取下锁紧螺栓22，拿出压板23，如此可以取出滤膜13并安装新的滤膜13放置于底座21顶部，然后将压板23压在滤膜13上，通过锁紧螺栓22锁紧，旋转安装上盒盖19即可，操作方便。
47.综上，本实用新型的实施例提供一种细胞外囊泡循环分离纯化平台，包括样品桶1、分离组件、第一输送管3和第二输送管4，分离组件设有样品进口5和样品出口6；第一输送管3的一端和第二输送管4的一端均与样品桶1连通，第一输送管3的另一端和第二输送管4的另一端均与样品进口5连通；第一输送管3设有手动加压组件，第二输送管4设有蠕动泵2；样品出口6与样品桶1之间通过回流管7连通。
48.实际使用时，将含有细胞外囊泡的混合样品注入样品桶1中，当需要使用手动控制进行细胞外囊泡的分离纯化时，混合样品流入第一输送管3中，通过手动加压组件将第一输送管3中的混合样品从样品进口5压入分离组件中，通过分离组件对混合样品进行分离纯化，分离纯化后的混合样品从样品出口6流入回流管7中，并经过回流管7流入样品桶1中完成循环即可，如此可以对样品桶1中的混合样品进行循环分离纯化。
49.当需要使用电动控制进行细胞外囊泡的分离纯化时，混合样品流入第二输送管4中，通过蠕动泵2将第二输送管4中的混合样品从样品进口5泵入分离组件中，通过分离组件对混合样品进行分离纯化，分离纯化后的混合样品从样品出口6流入回流管7中，并经过回流管7流入样品桶1中完成循环即可，如此可以对样品桶1中的混合样品进行循环分离纯化。如此本技术提供的细胞外囊泡循环分离纯化平台能够单独通过电动控制和手动控制进行细胞外囊泡的分离纯化，给用户更多的选择，有电和无电情况下均能使用，使用范围更广。
50.以上仅为本实用新型的优选实施例而已，并不用于限制本实用新型，对于本领域技术人员而言，显然本技术不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本技术的精神或基本特征的情况下，能够以其它的具体形式实现本技术。
51.因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本技术的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本技术内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。对于本领域的技术人员来说，本实用新型可以有各种更改和变化。凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。