一种诃子提取物在制备多子水霉抑制剂中的应用的制作方法

1.本发明属于医药技术领域，特别涉及一种诃子提取物在制备多子水霉抑制剂中的应用。


背景技术：

2.水霉病(saprolegniasis)作为淡水鱼类冬春季节主要疾病，几乎每年都会流行或局部暴发。该病是一种腐生性疾病，发病鱼常常在体表和鳍条形成一层类似棉絮的灰白色覆盖物，因此，水霉病又称为“肤霉病”或者“白毛病”；而鱼卵感染水霉后则出现大量“太阳籽”，孵化率显著降低，死卵大幅增多。由于水霉菌适应力强，能够以游动孢子形式迅速扩散，而且常常与淡水鱼细菌性病原并发，暴发“赤皮病”，因此，水霉病具有高传染性、高发病率及高死亡率特点，对淡水鱼的健康养殖构成很大威胁。另外，商品鱼在低温运输过程中也会因为鱼体创伤而暴发水霉病，导致活鱼大量死亡或商品价值丧失，经济损失巨大。前期研究及相关调查结果均表明，多子水霉(saprolegnia ferax)和维氏气单胞菌(aeromonas veronii)是当前威胁我国淡水养殖动物健康的主要致病种类。
3.多项研究结果显示，中药材诃子(terminalia chebula)提取物对淡水鱼重要病原——嗜水气单胞菌具有良好的体外抑制效果，其最小抑菌浓度甚至低于常用药材五倍子提取物，显示出良好的开发应用前景。


技术实现要素：

4.本发明所要解决的技术问题是提供一种诃子提取物及其在制备多子水霉抑制剂中的应用。
5.本发明的一种诃子提取物在制备多子水霉抑制剂中的应用。
6.本发明的一种诃子提取物在制备治疗或预防多子水霉感染相关疾病药物中的应用。
7.所述诃子提取物为乙醇提取物。
8.所述诃子提取物为稀释1-16倍后使用。
9.所述诃子提取物的制备方法：诃子药材粉碎过筛，加入9～11倍量75％乙醇浸泡11～13h，加热至88～92
°
回流提取1.5～2.5h，提取2-5次，合并提取液，过滤，减压浓缩至稠浸膏，保存。
10.本发明的一种多子水霉抑制剂，所述抑制剂为诃子提取物。
11.本发明的一种治疗或预防多子水霉感染相关疾病的药物，所述药物包含诃子提取物。
12.有益效果
13.本发明的诃子提取物在距离水霉琼脂块0.5cm处，稀释4倍后的水霉菌丝抑制率可以达到100％，稀释16倍的时候仍然达到60％，而且在距离药敏纸片2cm处，即使稀释4倍，其水霉菌丝抑制率仍然达到50％；而同期同样药材量的香茅提取物，即使不稀释且距离只有
0.5cm，对多子水霉菌丝的生长抑制率也没有超过50％，而且稀释后抑制率大幅下降。显而易见，诃子提取物除了已知对气单胞菌等细菌具有很好的抑杀作用，对我国主要水霉种类——多子水霉也有很强的抑制效果。
附图说明
14.图1不同稀释度诃子提取物体外抑制多子水霉：板1阴性对照，板2～4：诃子提取物分别稀释4倍、8倍和16倍后对多子水霉的抑制情况；板1a～d：多子水霉琼脂块与药敏纸片的距离分别为0.5cm、1cm、1.5cm和2cm，2～4顺序同板1。
15.图2不同稀释度香茅提取物体外抑制多子水霉：板1阴性对照，板2～4：香茅提取物分别稀释4倍、8倍和16倍后对多子水霉的抑制情况；板1a～d：多子水霉琼脂块与药敏纸片的距离分别为0.5cm、1cm、1.5cm和2cm，2～4顺序同板1。
具体实施方式
16.下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
17.实施例1
18.药材提取物的制备方法
19.诃子药材3公斤，粉碎过20目筛，加入10倍量75％乙醇浸泡12h，加热至90
°
回流提取2h，提取3次，合并提取液，过滤，60
°
减压浓缩至稠浸膏，转移至瓶中，-20
°
保存。
20.香茅草药材3公斤，加入15倍量75％乙醇浸泡12h，加热至90
°
回流提取2h，提取3次，合并提取液，过滤，60
°
减压浓缩至稠浸膏，转移至瓶中，-20
°
保存。
21.实施例2
22.提取物对多子水霉的抑制
23.抗多子水霉活性的测定采用琼脂纸片扩散法：精确称取一定量的实施例1制备的诃子提取物，用75％乙醇进行倍比稀释，配置成不同浓度的工作液，于4℃冰箱中保存备用。吸取不同稀释度的诃子提取物稀释液加入空白药敏纸片中，并在无菌条件下贴在pda平板中心。在距离药敏纸片0.5cm、1cm、1.5cm和2cm处放置多子水霉琼脂块，20℃培养24h后，分别测量阴性对照板和抑制板上水霉菌丝的长度，分别计算菌丝生长抑制率。
24.结果如表1以及图1和2所示，诃子提取物在0.5cm处，稀释4倍后的水霉菌丝抑制率可以达到100％，稀释16倍的时候仍然达到60％，而且在距离药敏纸片2cm处，即使稀释4倍，其水霉菌丝抑制率仍然达到50％；而同期同样药材量的香茅提取物，即使不稀释且距离只有0.5cm，对多子水霉菌丝的生长抑制率也没有超过50％，而且稀释后抑制率大幅下降。显而易见，诃子提取物除了已知对气单胞菌等细菌具有很好的抑杀作用，对我国主要水霉种类——多子水霉也有很强的抑制效果。本研究结果也表明，本发明获得的诃子提取物中抗水霉活性成分较高。
25.表1不同稀释度诃子提取物和香茅提取物对多子水霉的抑制率
[0026][0027]
对比例1
[0028]
诃子提取物的制备同实施例1，区别仅在于将乙醇替换为水。
[0029]
水提法诃子提取物在0.5cm处，稀释4倍后的水霉菌丝抑制率只有75％。


技术特征：
1.一种诃子提取物在制备多子水霉抑制剂中的应用。2.一种诃子提取物在制备防治多子水霉感染相关疾病药物中的应用。3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述诃子提取物为乙醇提取物。4.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述乙醇提取物的制备包括：诃子药材粉碎过筛，加入9～11倍量75％乙醇浸泡11～13h，加热至88～92
°
回流提取1.5～2.5h，提取2-5次，合并提取液，过滤，减压浓缩至稠浸膏。5.一种多子水霉抑制剂，其特征在于，所述抑制剂为诃子提取物。6.根据权利要求5所述多子水霉抑制剂，其特征在于，所述诃子提取物为乙醇提取物。7.一种防治多子水霉感染相关疾病的药物，其特征在于，所述药物包括诃子提取物。

技术总结
本发明涉及一种诃子提取物在制备多子水霉抑制剂中的应用。研究表明，诃子提取物在距离水霉琼脂块0.5cm处，稀释4倍后的水霉菌丝抑制率可以达到100％，稀释16倍的时候仍然达到60％，而且在距离药敏纸片2cm处，即使稀释4倍，其水霉菌丝抑制率仍然达到50％；而同期同样药材量的香茅提取物，即使不稀释且距离只有0.5cm，对多子水霉菌丝的生长抑制率也没有超过50％，而且稀释后抑制率大幅下降。显而易见，诃子提取物除了已知对气单胞菌等细菌具有很好的抑杀作用，对我国主要水霉种类——多子水霉也有很强的抑制效果。霉也有很强的抑制效果。霉也有很强的抑制效果。


技术研发人员：周俊芳 陈寿旭 房文红 李新苍 田晓清 王元 赵姝 匡俊宇
受保护的技术使用者：中国水产科学研究院东海水产研究所
技术研发日：2022.10.13
技术公布日：2022/12/30