一种中药组合物在治疗肺损伤或其相关病征中的用途的制作方法

1.本发明属于中药技术领域，涉及一种中药组合物及其用途，具体涉及一种中药组合物及其在制备治疗肺损伤及/或其相关病征的药物中的用途。


背景技术：

2.肺损伤，尤其是急性肺损伤，是一类急性呼吸窘迫综合征,是临床常见的急危重症。急性肺损伤的病理改变主要包括肺部广泛的炎症反应、中性粒细胞招募、肺间隙水肿、上皮细胞完整性破坏、微血管渗透性增加及气体交换障碍等方面。
3.急性肺损伤及急性呼吸窘迫综合症的发病机理错综复杂，目前仍未完全阐明。现认为其病理改变的中心环节是急性肺泡毛细血管膜损伤。创伤、感染使中性粒细胞和单核巨噬细胞等激活，释放出大量炎症介质诱发肺部的炎症反应。同时体内还产生抗炎物质，损伤机体免疫功能，两方面共同作用使炎症反应失控。
4.据统计，急性肺损伤致死率可占医院死亡总人数的34.9％。因此，研发针对治疗急性肺损伤的药物，从而降低急性肺损伤的临床死亡率，具有迫切的必要性和广大的市场需求。
5.中医认为肺损伤归属于中医学的“肺热证”“喘证”“结胸病”的范畴。中医通常以通腑泻热法、清热解毒法、活血化瘀法、益气养阴法、护津、护脑、护肠法治疗肺损伤。
6.王非等研究发现，清瘟败毒饮可抑制肺组织nf-κb p65、il-1β等促炎因子的释放，增加il-13等抗炎因子的含量，发挥保护肺组织的作用(王非,骆仙芳,赵玮,等.清瘟败毒饮影响急性肺损伤大鼠肺组织nf-κbp65表达的实验研究[j].中华中医药学刊,2011,29(6):1290-1295.)。何神地等也证实，清瘟败毒饮可调节促炎与抗炎平衡，减轻肺损伤程度(何神地,骆仙芳,赵玮,等.清瘟败毒饮对内毒素性急性肺损伤大鼠血清细胞因子tnf-α、il-8、il-10表达的影响[j].中华中医药学刊,2011,29(9):2067-2070,2154.)。


技术实现要素：

[0007]
本发明中药组合物是依托荆防败毒散方剂进一步研究的，荆防败毒散，出自《摄生众妙方》，具有疏风解表、败毒消肿，祛痰止咳之功效。目的在于以清热解毒之法治疗肺损伤。申请人对荆防制剂在治疗肺损伤及/或其相关病征的用途进行研究。
[0008]
本发明的第一个目的在于提供一种可用于治疗肺损伤及/或其相关病征的中药组合物，所述的中药组合物包括羌活、独活、茯苓、防风、荆芥、川芎、桔梗、柴胡、前胡、枳壳、甘草。
[0009]
上述中药组合物中各味药材的具体配比为：
[0010][0011]
优选为，
[0012][0013]
本发明的第二个目的是提供一种中药组合物在制备治疗肺损伤及/或其相关病征的药物中的用途。
[0014]
所述的肺损伤包括但不限于急性肺损伤、慢性肺损伤。
[0015]
进一步的，所述的肺损伤可以是由放射、休克、创伤、感染、中毒、药物过量、及并发症中一种或多种原因引起的。
[0016]
进一步的，所述的肺损伤相关病征包括但不限于肺炎、肺泡塌陷、呼吸困难、肺纤维化、肺水肿中的一种或多种。
[0017]
本发明目的第三个目的在于提供由上述中药组合物与药学上可接受的辅料制备而成的制剂，主要为中药制剂；优选的，所述的中药制剂为临床上可接受的口服制剂；进一步的，所述临床上可接受的口服制剂为颗粒剂、口服液、糖浆剂、片剂、胶囊剂、丸剂、粉剂、散剂、微囊剂、膏剂、汤剂。
[0018]
本发明还提供了由上述中药组合物制备而成的荆防制剂在制备治疗肺损伤及/或其相关病征的药物中的用途。
[0019]
所述的荆防制剂可以是荆防颗粒、荆防合剂、荆防败毒散汤剂等。
[0020]
与现有技术相比，本发明取得了显著的技术效果：
[0021]
(1)本发明中药组合物可明显改善或/和修复lps诱导的急性肺损伤小鼠肺组织，使得小鼠肺泡结构恢复完整，炎症浸润显著减少；
[0022]
(2)本发明中药组合物可以明显调节lps诱导急性肺损伤小鼠肺组织中tnf-α和il-1β的水平含量；
[0023]
(3)本发明中药组合物可以明显调节lps诱导急性肺损伤小鼠肺组织中sod和mda的含量。
附图说明
[0024]
图1：荆防制剂对lps诱导急性肺损伤小鼠肺组织病理学影响(he染色，i:
×
100，ii:
×
200)。a.空白组；b.模型组；c.低剂量组；d.中剂量组；e.高剂量组(bii图中：三角标示区域为炎性浸润；方形标示区域为出血；圆形标示区域为肺间质增厚)
[0025]
图2：荆防制剂对lps诱导急性肺损伤小鼠肺组织中tnf-α和il-1β的影响(a：tnf-α水平；b：il-1β水平)
[0026]
图3：荆防制剂对lps诱导急性肺损伤小鼠肺组织中sod和mda的影响(a：sod活力；b：mda含量)
具体实施方式
[0027]
为使本发明的目的、技术方案更加清楚明白，通过实施例方式对本发明的内容做进一步详细说明，但不应就此理解为本发明上述主题范围内仅限于以下实施例。在不脱离本发明上述技术前提下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的相应替换或变更的修改，均包括在本发明内。
[0028]
实施例1荆防颗粒剂
[0029]
处方：
[0030][0031]
制备方法：
[0032]
步骤a：将荆芥、防风、羌活、独活、前胡、川芎、枳壳，分别蒸馏提取挥发油备用，蒸馏后的药渣、蒸馏后的川芎、枳壳水溶液备用；
[0033]
步骤b：将步骤a所得蒸馏后的川芎、枳壳水溶液配制成25％的乙醇溶液，备用；
[0034]
步骤c：将茯苓、步骤a所得蒸馏后的川芎、枳壳药渣混合，以步骤b所得乙醇溶液渗漉提取，渗漉液备用；
[0035]
步骤d：将柴胡、桔梗、甘草、步骤a所得蒸馏后的荆芥、防风、羌活、独活、前胡药渣，加水煎煮两次，每次1.5小时，合并两次的煎煮液，过滤后浓缩成稠膏，备用；
[0036]
步骤e：将步骤c所得渗漉液、步骤d所得稠膏混合，静置，过滤后浓缩成清膏，加蔗糖适量，混匀，制成颗粒，干燥，加入步骤a所得挥发油，混匀，即得。
[0037]
实施例2荆防颗粒剂
[0038]
处方：
[0039][0040]
制备方法同实施例1。
[0041]
实施例3荆防颗粒剂
[0042][0043]
制备方法同实施例1。
[0044]
实施例4荆防合剂
[0045]
处方：
[0046][0047]
制备方法：
[0048]
荆芥、防风、羌活、独活、枳壳、川芎和前胡分别蒸馏提取挥发油，蒸馏后的水溶液
另器收集；川芎、枳壳药渣与茯苓照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用蒸馏后的水溶液配成25％乙醇作溶剂，进行渗漉，收集漉液，减压回收乙醇。其余五味药渣与柴胡、桔梗、甘草加水煎煮三次，滤过，合并滤液，浓缩至约1300ml，与漉液合并，静置，滤过，浓缩至约1000ml，加入苯甲酸钠3g和上述挥发油，搅匀，加水使成1000ml，即得。
[0049]
实施例5荆防胶囊剂
[0050]
处方：
[0051][0052]
制备方法：
[0053]
步骤a：将荆芥、防风、羌活、独活、前胡、川芎、枳壳，分别蒸馏提取挥发油备用，蒸馏后的药渣、蒸馏后的川芎、枳壳水溶液备用；
[0054]
步骤b：将步骤a所得蒸馏后的川芎、枳壳水溶液配制成30％的乙醇溶液，备用；
[0055]
步骤c：将茯苓、步骤a所得蒸馏后的川芎、枳壳药渣混合，以步骤b所得乙醇溶液渗漉提取，渗漉液备用；
[0056]
步骤d：将柴胡、桔梗、甘草、步骤a所得蒸馏后的荆芥、防风、羌活、独活、前胡药渣，加水煎煮两次，每次1.5小时，合并两次的煎煮液，过滤后浓缩成稠膏，备用；
[0057]
步骤e：将步骤c所得渗漉液、步骤d所得稠膏混合，静置，过滤后浓缩成清膏，加蔗糖适量，混匀，制成颗粒，干燥，加入步骤a所得挥发油，混匀，制成颗粒，干燥，粉碎，装入胶囊，即得。
[0058]
实施例6荆防片剂
[0059]
处方：
[0060][0061]
制备方法：
[0062]
步骤a：将荆芥、防风、羌活、独活、前胡、川芎、枳壳，分别蒸馏提取挥发油备用，蒸馏后的药渣、蒸馏后的川芎、枳壳水溶液备用；
[0063]
步骤b：将步骤a所得蒸馏后的川芎、枳壳水溶液配制成15％的乙醇溶液，备用；
[0064]
步骤c：将茯苓、步骤a所得蒸馏后的川芎、枳壳药渣混合，以步骤b所得乙醇溶液渗漉提取，渗漉液备用；
[0065]
步骤d：将柴胡、桔梗、甘草、步骤a所得蒸馏后的荆芥、防风、羌活、独活、前胡药渣，加水煎煮两次，每次1.5小时，合并两次的煎煮液，过滤后浓缩成稠膏，备用；
[0066]
步骤e：将步骤c所得渗漉液、步骤d所得稠膏混合，静置，过滤后浓缩成清膏，加蔗糖适量，混匀，制成颗粒，干燥，加入步骤a所得挥发油，混匀，制成颗粒，加入辅料适量，混匀，压片，即得。
[0067]
实施例7丸剂制备
[0068]
处方：
[0069][0070]
制备方法：
[0071]
步骤a：将荆芥、防风、羌活、独活、前胡、川芎、枳壳，分别蒸馏提取挥发油备用，蒸馏后的药渣、蒸馏后的川芎、枳壳水溶液备用；
[0072]
步骤b：将步骤a所得蒸馏后的川芎、枳壳水溶液配制成25％的乙醇溶液，备用；
[0073]
步骤c：将茯苓、步骤a所得蒸馏后的川芎、枳壳药渣混合，以步骤b所得乙醇溶液渗漉提取，渗漉液备用；
[0074]
步骤d：将柴胡、桔梗、甘草、步骤a所得蒸馏后的荆芥、防风、羌活、独活、前胡药渣，加水煎煮两次，每次1.5小时，合并两次的煎煮液，过滤后浓缩成稠膏，备用；
[0075]
步骤e：将步骤c所得渗漉液、步骤d所得稠膏混合，静置，过滤后浓缩成清膏，加蔗糖适量，混匀，制成颗粒，干燥，加入步骤a所得挥发油，混匀，干燥，粉碎，过筛，加炼蜜40～60g，适量的水泛丸，干燥，即得。
[0076]
实施例8荆防败毒散(汤剂)
[0077]
处方：
[0078][0079]
制备方法：水煎，日1剂，分2次服。
[0080]
药理学实验
[0081]
发明人开展相关药效学试验研究以证明本发明中药组合物治疗急性肺损伤的功效。需要说明的是，下述药效学试验所选取的药品为本发明具有代表性的配方、剂型及其制备方法所得的药品；本发明所包含的其它配方、剂型及制备方法所得药品，发明人同样进行了药效学实验，实验结果显示其他配方、剂型及制备方法所得药品具有相同或类似的效果，但由于篇幅限制，在此不一一列举。
[0082]
发明人要说明的是，以下实验研究均是在急性毒性试验、长期毒性试验证明药物安全性基础之上开展，实验研究中的给药剂量均在安全剂量范围之内。
[0083]
1.材料与方法
[0084]
1.1材料
[0085]
1.1.1药材和试剂
[0086]
脂多糖(lps)，sod试剂盒，mda试剂盒，tnf-α试剂盒，il-1β试剂盒，
[0087]
1.1.2仪器
[0088]
恒温箱，酶标仪，
[0089]
1.2.方法
[0090]
1.2.1药物制备
[0091]
实验组：实施例1颗粒剂。
[0092]
1.2.2给药及造模方法
[0093]
给药方法：c57bl/6小鼠(spf级，北京斯贝福生物技术有限公司)，8周龄，雄性，体重23-25g，共50只。所有动物实验均符合北京中医药大学伦理委员会的规定。小鼠随机分为
空白组、模型组、实验组(低、中和高剂量组)，每组10只。动物适应性饲养3天后，实验组(低、中和高剂量组)分别灌胃实施例1颗粒剂溶液(100、200、400mg/kg)；空白组和模型组灌胃给同体积的水溶液，每天1次，连续灌胃6天。
[0094]
造模方法：在第6天时，称重，给药1小时后，模型组和给药组进行lps气管滴注(5mg/kg)制备出急性肺损伤模型，空白组动物气管滴入同体积得水溶液。12小时后，在取材前1小时，再灌胃1次药物，眼球取血，解剖取小鼠肺组织，一部分使用多聚甲醛固定，一部分放置在-80℃保存。
[0095]
1.2.3病理组织学检测
[0096]
肺组织使用4％多聚甲醛固定后，再对肺组织进行脱水，经常规石蜡包埋，切片厚6微米，行苏木精-伊红染色，中性树胶封片，显微镜下观察肺组织病理学变化。
[0097]
1.2.4 elisa法检测肺组织中tnf-α和il-1β水平
[0098]
将肺组织置于4ml离心管中，按重量(g)：体积(ml)加入9倍体积生理盐水匀浆，3500r/m离心10min，取上清为待测样品。采用elisa法检测tnf-α和il-1β水平，所有操作步骤严格根据试剂盒的说明书进行。
[0099]
1.2.5肺组织中sod活力和mda含量的测定
[0100]
取肺匀浆作为样品，检测sod活力和mda含量，所有操作根据试剂盒说明书进行，计算公式如下：
[0101][0102][0103][0104]
1.2.6统计学方法
[0105]
采用spss20.0软件对数据进行统计分析,符合正态分布的计量资料以均数
±
标准差表示,采用方差分析比较多组间数据,p《0.05为差异有统计学意义。
[0106]
3.结果
[0107]
3.1肺组织病理学检测
[0108]
如图1所示，空白组可以观察肺组织中肺泡结构正常，无炎性浸润；模型组(lps处理)发现部分肺泡结构消失，有炎症浸润，肺间质增厚，出血；与模型组比较，实验组低剂量组肺泡壁和肺间质增厚，但可以看出肺泡结构，出血量和炎性浸润减少；荆防败毒散中和高剂量中肺泡结构较完整，炎症浸润有显著减少。
[0109]
3.2肺组织中tnf-α和il-1β水平的检测
[0110]
如图2所示，荆防制剂对lps诱导的tnf-α和il-1β水平的影响。与空白组tnf-α(117.04
±
13.60)和il-1β(62.30
±
3.29)水平比较，lps处理的模型组的tnf-α(167.82
±
26.86)和il-1β(147.77
±
20.14)显著增高(p＜0.01)。与模型组比较，实验组(100、200、400mg/kg)在lps处理后可以显著降低tnf-α(147.99
±
32.84、120.24
±
22.73、131.88
±
9.21)和il-1β含量(89.37
±
6.94、64.22
±
3.72、70.77
±
7.53)(p＜0.05)。
[0111]
3.3 sod活力和mda含量的检测
[0112]
如图3所示，荆防制剂对lps诱导的sod活力和mda含量的影响。与空白组的sod活力(123.64
±
30.36)和mda含量(3.73
±
0.10)比较，lps处理的模型组的sod活力降低(63.38
±
28.51)，mda含量(8.74
±
2.05)显著增高，且有统计学差异(p＜0.05)。与模型组比较，实验组(100、200、400mg/kg)在lps处理后可以显著增加sod活力(78.06
±
17.34、98.76
±
33.47、92.80
±
16.71)，降低mda含量(5.61
±
2.37、3.82
±
0.75、5，28
±
0.47)，且有统计学差异(p＜0.05)。