一种硝唑尼特药物中残留基因毒性杂质氯乙醛的检测方法与流程

技术特征：
1.一种硝唑尼特药物中残留基因毒性杂质氯乙醛的检测方法，所述的检测方法采用高效液相色谱法，并按照如下检测条件和操作进行检测：检测条件包括：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，如inertsil ods-3，(4.6
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250mm
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5.0μm)、或ymc-pack ods-aq(4.6
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250mm
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5.0μm)流速：0.5ml/min～1.5ml/min；优选地，1.0ml/min检测波长：350nm～370nm；优选地，360nm柱温：15℃～35℃；优选地，25℃进样体积：50μl～100μl；优选地，75μl进样盘温度：0℃-室温，优选地，4℃控温流动相按线性梯度洗脱：供试品溶液的制备：取硝唑尼特药物，置15ml锥形瓶中，加入5.0ml纯化水，封口，置调速振荡器上振荡(200rpm)10分钟，用0.45μm聚四氟乙烯滤膜过滤，取续滤液2.0ml置10ml量瓶中，加入2.0ml 70％乙腈-水溶液，混匀，加入0.2ml衍生剂，迅速混匀，用封口膜及保鲜膜封口，1min内放入60℃水浴40分钟，放冷后再用0.45μm聚四氟乙烯滤膜过滤，取续滤液，作为供试品溶液；对照品溶液的制备：取氯乙醛，用水定量稀释至每1ml中约含氯乙醛0.36ug的溶液，作为储备液，移取储备液2.0ml置10ml量瓶中，加入2.0ml 70％乙腈-水溶液，混匀，加入0.2ml衍生剂，迅速混匀，用封口膜及保鲜膜封口，1min内放入60℃水浴40min，放冷后再用0.45μm聚四氟乙烯滤膜过滤，取续滤液，作为对照品溶液；取对照品溶液进样，记录色谱图；再取供试品溶液和对照品溶液进样，记录色谱图。2.如权利要求1所述的检测方法，其中，所述的衍生剂为：称取2,4-二硝基苯肼2.4g，用30％高氯酸水溶液溶解并稀释至100ml。3.如权利要求2所述的检测方法，其中，所述检测条件包括：色谱柱：inertsil ods-3(4.6
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5.0μm)流速：每分钟1.0ml检测波长：360nm柱温：25℃进样体积：75μl进样盘：4℃控温。4.如权利要求2所述的检测方法，其中，所述流动相按下表进行线性梯度洗脱：
5.如权利要求4所述的检测方法，其中，所述流动相按下表进行线性梯度洗脱：所述流动相按下表进行线性梯度洗脱：6.如权利要求1-5中任一项所述的检测方法，其中，所述检测条件和操作为：所述检测条件包括：色谱柱：inertsil ods-3，(4.6
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5.0μm)流速：每分钟1.0ml检测波长：360nm柱温：25℃
进样体积：75μl进样盘：4℃控温流动相按下表进行线性梯度洗脱：流动相按下表进行线性梯度洗脱：(1)供试品溶液配制：取硝唑尼特药物约50mg，精密称定，置15ml锥形瓶中，加入5.0ml纯化水，封口，置调速振荡器上振荡(200rpm)10min，用0.45μm聚四氟乙烯滤膜过滤，取续滤液2.0ml置10ml量瓶中，加入2.0ml70％乙腈-水溶液，混匀，加入0.2ml衍生剂，迅速混匀，用封口膜及保鲜膜封口，1min内放入60℃水浴40min，放冷后再用0.45μm聚四氟乙烯滤膜过滤，取续滤液，作为供试品溶液；所述的衍生剂为：称取2,4-二硝基苯肼2.4g，用30％高氯酸水溶液溶解并稀释至100ml；(2)对照品溶液的配制：用水定量稀释至每1ml中约含氯乙醛0.36ug的溶液，作为储备液，移取储备液2.0ml置10ml量瓶中，加入2.0ml 70％乙腈-水溶液，混匀，加入0.2ml衍生剂，迅速混匀，用封口膜及保鲜膜封口，1min内放入60℃水浴40min，放冷后再用0.45μm聚四氟乙烯滤膜过滤，取续滤液，作为对照品溶液；所述的衍生剂为：称取2,4-二硝基苯肼2.4g，用30％高氯酸水溶液溶解并稀释至100ml；(3)取对照品溶液进样，记录色谱图；再取供试品溶液进样，记录色谱图；记录色谱图，按外标法以峰面积计算，氯乙醛不得过0.0036％。7.如权利要求1-5中任一项所述的检测方法，其中，所述的硝唑尼特药物为硝唑尼特制剂或原料药。8.如权利要求7所述的检测方法，其中，所述的硝唑尼特药物为硝唑尼特原料药。

技术总结
本发明公开了一种硝唑尼特药物中杂质氯乙醛的检测方式，所述的检测方法采用梯度洗脱的衍生法的高效液相色谱法，药物的分散剂为水。采用该检测方法可以有效地检测硝唑尼特药物中可能存在氯乙醛的残留情况。物中可能存在氯乙醛的残留情况。


技术研发人员：许永翔 景晓宁
受保护的技术使用者：南京卡文迪许生物工程技术有限公司
技术研发日：2021.06.07
技术公布日：2022/12/22