一种天然退化草地补播专用的微生物复合接种剂及制备方法

技术特征：
1.一种天然退化草地补播专用的微生物复合接种剂，其特征在于：所述的微生物复合接种剂包括：醋酸钙不动杆菌(acinetobacter calcoaceticus hmaj1)和假节杆菌(pseudarthrobacter sp.ncz1)的细菌培养液；所述的醋酸钙不动杆菌(acinetobacter calcoaceticus hmaj1)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2022年09月09日，保藏编号为：cctcc m20221406，所述假节杆菌(pseudarthrobacter sp.ncz1)保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2022年09月09日，保藏编号为cctcc m20221407。2.本发明还公开了一种微生物复合接种剂的制备方法，包括以下步骤：s1.选取菌株：对从高寒草甸获得的植物根际促生菌进行筛选，通过植酸钙有机磷培养基与nbrip无机磷培养基结合以及结合钼蓝比色法筛选优良溶磷菌，选出2株植物根际促生菌，随后通过培养基对选出的2株植物根际促生菌进行培养；s2.制备单一菌悬液：分别将优良溶磷菌进行培养，得到单一菌悬液；s3.制备微生物复合接种剂：根据不同比例进行试验，最终确定最佳菌剂配比，得到所述的微生物复合接种剂。3.根据权利要求2所述的一种微生物复合接种剂的制备方法，其特征在于：步骤s1中，选择出2的株植物根际促生菌，分别为醋酸钙不动杆菌(acinetobacter calcoaceticus hmaj1)和假节杆菌(pseudarthrobacter sp.ncz1)。4.根据权利要求2所述的一种微生物复合接种剂的制备方法，其特征在于：所述醋酸钙不动杆菌(acinetobacter calcoaceticus hmaj1)和假节杆菌(pseudarthrobacter sp.ncz1)的培养方法为：通过平板划线法将醋酸钙不动杆菌(acinetobacter calcoaceticus hmaj1)和假节杆菌(pseudarthrobacter sp.ncz1)接种于lb液体培养基中，并放置于15℃培养箱培养7d，即可长出新鲜菌落。5.根据权利要求4所述的一种微生物复合接种剂的制备方法，其特征在于：平板划线法是指把混杂在一起的不同种微生物的不同个体或同一种的不同细胞，通过接种环在培养基表面做多次划线，得到较多的独立分布的单个细胞，经培养后即成单菌落。其原理是将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的不同区域。6.根据权利要求2所述的一种微生物复合接种剂的制备方法，其特征在于：步骤s2中，所述单一菌悬液的制备方法为：挑取2株单菌落分别接种于装有100ml lb液体培养基的300ml三角瓶，于15℃、180r
·
min-1
摇床培养48h，使得所述液体菌剂活菌浓度大于109cfu/ml，用无菌水调节2株单一菌悬液od
600
值一致。7.根据权利要求2所述的一种微生物复合接种剂的制备方法，其特征在于：所述步骤s3中，将醋酸钙不动杆菌(acinetobacter calcoaceticus hmaj1)和假节杆菌(pseudarthrobacter sp.ncz1)单一菌悬液以体积比1:0、3:7、1:1、7:3、0:1的比例接种至新的300ml三角瓶中保存备用，得到5种微生物复合接种剂，确定最佳菌剂配比为3:7，得到所述的微生物复合接种剂。8.权利要求1所述的天然退化草地补播专用的微生物复合接种剂在高寒草甸天然退化草地植被生长与土壤改良方面的应用。9.权利要求1所述的天然退化草地补播专用的微生物复合接种剂的应用方法为：直接喷洒使用，使用量为5.0kg-6.0kg/亩。

技术总结
本发明公开了一种天然退化草地补播专用的微生物复合接种剂及其制备方法，属于微生物技术领域。该微生物复合接种剂活性菌株包括醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus HMAJ1)和假节杆菌(Pseudarthrobacter sp.NCZ1)。其制备方法为，将2株单一菌株分别接种于LB液体培养基，于15℃、180r


技术研发人员：姚拓 柴加丽 李昌宁 刘晓婷 李建宏
受保护的技术使用者：甘肃农业大学
技术研发日：2022.09.30
技术公布日：2022/12/16