缓解产后抑郁的益生菌组合物及其制备方法和应用

1.本发明涉及保健食品领域，具体涉及一种缓解产后抑郁的益生菌组合物及其制备方法和应用。


背景技术：

2.产后抑郁症(postpartum depression)是指产妇在分娩后出现抑郁、悲伤、沮丧、哭泣、易激怒、烦躁、甚至有自杀或杀婴倾向等一系列症状为特征的心理障碍，是产褥期精神综合征中最常见的一种类型。典型的产后抑郁症是产后6周内发生，可持续整个产褥期，有的甚至持续至幼儿上学前。产后抑郁症的发病率在15％-30％，再次妊娠则有20％-30％的复发率。
3.目前西药对产后抑郁症的治疗主要是服用一些有效的抗抑郁剂，而西药治疗的副作用大、价格昂贵且影响产后哺乳，致使患者依从性差。虽然中医药在治疗产后抑郁方面取得了一定的成效，但也存在疗效不显著、长时间服用药物影响产妇哺乳、产妇依从性差等问题，因此有待进一步完善。
4.近年来的科学研究发现，多数产后抑郁症患者存在至少一种的肠道功能疾病，如腹泻、便秘、肠道炎症、营养吸收功能差等，肠道功能不适会给患者带来情绪障碍，如易焦虑、发怒、脾气差、情绪压抑等。益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。益生菌在调节肠道菌群生态、缓解情绪异常方面具有重要的作用，目前市场上多使用单一益生菌或是益生菌与中草药组合物来调整肠道菌群，而对多种益生菌协同增效调节肠道菌群生态、缓解情绪异常的益生菌复配配方的研究还较少。


技术实现要素：

5.本发明的目的是为了克服现有技术存在的问题，提供一种缓解产后抑郁的益生菌组合物及其制备方法和应用，该益生菌组合物可以调节肠道菌群生态、缓解异常情绪，起到缓解产后抑郁的作用。
6.本发明第一方面提供一种缓解产后抑郁的益生菌组合物，所述益生菌组合物含有益生菌、益生元和活性成分；所述益生菌含有嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌；所述活性成分含有β-隐黄质和n-乙酰神经氨酸。
7.优选地，相对于10重量份的所述益生菌，所述益生元的含量为1.5-5重量份，所述活性成分的含量为0.2-0.5重量份。
8.优选地，所述嗜酸乳杆菌、所述保加利亚乳杆菌、所述罗伊氏乳杆菌与所述瑞士乳杆菌的重量比为1-5：1-5：1-2：1。
9.优选地，所述β-隐黄质与所述n-乙酰神经氨酸的重量比为1：1-4。
10.优选地，所述益生菌还含有长双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌和短双歧杆菌。
11.优选地，所述长双歧杆菌、所述鼠李糖乳杆菌、所述短双歧杆菌与所述瑞士乳杆菌
的重量比为0.2-1：0.5-2：0.2-1：1。
12.优选地，所述益生元选自低聚果糖、低聚半乳糖、水苏糖、菊粉、异麦芽低聚糖和海藻糖中的至少一种。
13.优选地，所述益生元为低聚果糖、低聚半乳糖、菊粉和异麦芽低聚糖。
14.优选地，所述低聚果糖、所述低聚半乳糖、所述菊粉与所述异麦芽低聚糖的重量比为1：0.5-2：1-4：1-4。
15.优选地，所述益生菌组合物还含有辅料。
16.优选地，相对于10重量份的所述益生菌，所述辅料的含量为1-2.5重量份。
17.优选地，所述辅料选自酵母粉、脱脂乳粉、麦芽糊精和糖醇中的至少一种。
18.本发明第二方面提供一种缓解产后抑郁的益生菌组合物的制备方法，包括以下步骤：将益生菌、益生元和活性成分混合，得到混合物；所述益生菌含有嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌；所述活性成分含有β-隐黄质和n-乙酰神经氨酸。
19.优选地，相对于10重量份的所述益生菌，所述益生元的含量为1.5-5重量份，所述活性成分的含量为0.2-0.5重量份。
20.优选地，所述嗜酸乳杆菌、所述保加利亚乳杆菌、所述罗伊氏乳杆菌与所述瑞士乳杆菌的重量比为1-5：1-5：1-2：1。
21.优选地，所述β-隐黄质与所述n-乙酰神经氨酸的重量比为1：1-4。
22.优选地，所述益生菌还含有长双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌和短双歧杆菌。
23.优选地，所述长双歧杆菌、所述鼠李糖乳杆菌、所述短双歧杆菌与所述瑞士乳杆菌的重量比为0.2-1：0.5-2：0.2-1：1。
24.优选地，所述益生元选自低聚果糖、低聚半乳糖、水苏糖、菊粉、异麦芽低聚糖和海藻糖中的至少一种。
25.优选地，所述益生元为低聚果糖、低聚半乳糖、菊粉和异麦芽低聚糖。
26.优选地，所述低聚果糖、所述低聚半乳糖、所述菊粉与所述异麦芽低聚糖的重量比为1：0.5-2：1-4：1-4。
27.优选地，所述制备方法还包括：将所述混合物与辅料混合，得到所述益生菌组合物。
28.优选地，所述辅料与所述益生菌的重量比为0.1-0.25：1。
29.优选地，所述辅料选自酵母粉、脱脂乳粉、麦芽糊精和糖醇中的至少一种。
30.本发明第三方面提供上述第一方面所述的益生菌组合物和/或上述第二方面所述的制备方法得到的益生菌组合物在制备缓解产后抑郁的药物和/或食品中的应用。
31.通过上述技术方案，本发明的有益效果为：
32.(1)本发明提供的缓解产后抑郁的益生菌组合物，含有益生菌、益生元和活性成分，通过益生菌、益生元和活性成分的共同作用，能够有效调节肠道菌群、缓解异常情绪，起到改善睡眠质量并缓解产后抑郁的作用。嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌之间具有协同作用，共同作用下达到良好的缓解产后抑郁的效果；而且，β-隐黄质、n-乙酰神经氨酸均可以改善睡眠效果，起到缓解产后抑郁的作用，并且β-隐黄质和n-乙酰神经氨酸具有协同作用，共同作用下进一步起到缓解产后抑郁的作用。
33.(2)本发明提供的缓解产后抑郁的益生菌组合物，长双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌和短
双歧杆菌的添加，可以协同嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌，能够进一步调节肠道菌群、缓解异常情绪，更好地起到改善睡眠质量并缓解产后抑郁的作用。
具体实施方式
34.在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
35.本发明提供一种缓解产后抑郁的益生菌组合物，所述益生菌组合物含有益生菌、益生元和活性成分；所述益生菌含有嗜酸乳杆菌(lactobacillus acidophilus)、保加利亚乳杆菌(lactobacillus bulgaricus)、罗伊氏乳杆菌(lactobacillus reuteri)和瑞士乳杆菌(lactobacillus helvertiucs)；所述活性成分含有β-隐黄质和n-乙酰神经氨酸。
36.本发明的发明人在研究的过程中发现，益生菌组合物含有益生菌、益生元和活性成分，通过益生菌、益生元和活性成分的共同作用，能够有效调节肠道菌群、缓解异常情绪，起到改善睡眠质量并缓解产后抑郁的作用。嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌之间具有协同作用，共同作用下达到良好的缓解产后抑郁的效果。
37.根据本发明，为了进一步发挥益生菌组合物的缓解产后抑郁的作用，优选地，相对于10重量份的所述益生菌，所述益生元的含量为1.5-5重量份，具体可以为1.5重量份、2重量份、2.5重量份、3重量份、3.5重量份、4重量份、4.5重量份、5重量份，或上述两个值之间的任意值；所述活性成分的含量为0.2-0.5重量份，具体可以为0.2重量份、0.3重量份、0.4重量份、0.5重量份，或上述两个值之间的任意值。
38.根据本发明，优选地，所述嗜酸乳杆菌、所述保加利亚乳杆菌、所述罗伊氏乳杆菌与所述瑞士乳杆菌的重量比为1-5：1-5：1-2：1。发明人发现，在该优选地具体实施方式下，将嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、罗伊氏乳杆菌与瑞士乳杆菌进行合理配伍，形成相对稳定的组合，各个益生菌之间相互作用，在共同作用下可以有效缓解异常情绪，起到改善睡眠质量和缓解产后抑郁的作用。
39.根据本发明，优选地，所述β-隐黄质与所述n-乙酰神经氨酸的重量比为1：1-4，具体可以为1：1、1：2、1：3、1：4，或上述两个值之间的任意值。发明人发现，在该优选地具体实施方式下，β-隐黄质、n-乙酰神经氨酸均可以改善睡眠效果，起到缓解产后抑郁的作用；而且，β-隐黄质和n-乙酰神经氨酸具有协同作用，共同作用下进一步起到缓解产后抑郁的作用。
40.根据本发明，优选地，所述益生菌还含有长双歧杆菌(bifidobacterium longum)、鼠李糖乳杆菌(lactobacillus rhamnosus)和短双歧杆菌(bifidobacterium breve)。发明人发现，在该优选地具体实施方式下，长双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌、短双歧杆菌可以进一步协同嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌，更好地调节肠道菌群、缓解异常情绪，改善睡眠质量并起到缓解产后抑郁的作用。
41.根据本发明，为了能够更进一步调节肠道菌群、缓解异常情绪，优选地，所述长双歧杆菌、所述鼠李糖乳杆菌、所述短双歧杆菌与所述瑞士乳杆菌的重量比为0.2-1：0.5-2：0.2-1：1。
42.本发明中，对于上述益生菌的来源没有特别的限制，可以根据本领域已知的任意合适方法培养选择的益生菌菌株，并通过例如冷冻干燥或喷雾干燥制备选择的益生菌菌粉用于加入本发明的益生菌组合物；也可以直接通过商购获得上述益生菌菌粉。
43.根据本发明，优选地，所述益生元选自低聚果糖、低聚半乳糖、水苏糖、菊粉、异麦芽低聚糖和海藻糖中的至少一种。发明人发现，在该优选地具体实施方式下，将益生元和益生菌进行合理搭配，能够最大限度地发挥益生菌和益生元的作用，可以促进益生菌的生长繁殖，能够有效调节肠道菌群、缓解异常情绪。
44.根据本发明，为了能够进一步调节肠道菌群、缓解异常情绪，优选地，所述益生元为低聚果糖、低聚半乳糖、菊粉和异麦芽低聚糖。
45.根据本发明，为了能够更进一步调节肠道菌群、缓解异常情绪，优选地，所述低聚果糖、所述低聚半乳糖、所述菊粉与所述异麦芽低聚糖的重量比为1：0.5-2：1-4：1-4。
46.根据本发明，优选地，所述益生菌组合物还包括辅料。在该优选地具体实施方式下，可以将益生菌组合物制备成不同需求品，如粉剂、颗粒剂、胶囊剂等。
47.根据本发明，为了提高益生菌组合物的口感，优选地，相对于10重量份的所述益生菌，所述辅料的含量为1-2.5重量份，具体可以为1重量份、1.5重量份、2重量份、2.5重量份，或上述两个值之间的任意值。
48.根据本发明，对辅料的种类没有特别的限定，可以采用本领域内的常规选择。优选地，所述辅料选自酵母粉、脱脂乳粉、麦芽糊精和糖醇中的至少一种，进一步优选为酵母粉和脱脂乳粉。发明人发现，在该优选地具体实施方式下，酵母粉中含有抗氧化物，可以保护肝脏，有一定的解毒作用，而且酵母粉中的硒、铬等矿物质能抗衰老、抗肿瘤、预防动脉硬化，并能提高人体的免疫力；脱脂乳粉中脂肪含量较少，易保存，不易发生氧化作用。
49.根据本发明，对所述酵母粉与所述脱脂乳粉的用量没有特别的限定，可以为本领域内的常规选择，为了进一步提高益生菌组合物的口感，优选情况下，所述酵母粉与所述脱脂乳粉的重量比为1：48-52。
50.上述物质均可以通过商购获得。
51.本发明第二方面提供一种缓解产后抑郁的益生菌组合物的制备方法，包括以下步骤：将益生菌、益生元和活性成分混合，得到混合物；所述益生菌含有嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和瑞士乳杆菌；所述活性成分含有β-隐黄质和n-乙酰神经氨酸。
52.根据本发明，优选地，相对于10重量份的所述益生菌，所述益生元的含量为1.5-5重量份，所述活性成分的含量为0.2-0.5重量份。
53.根据本发明，优选地，所述嗜酸乳杆菌、所述保加利亚乳杆菌、所述罗伊氏乳杆菌与所述瑞士乳杆菌的重量比为1-5：1-5：1-2：1。
54.根据本发明，优选地，所述β-隐黄质与所述n-乙酰神经氨酸的重量比为1：1-4。
55.根据本发明，优选地，所述益生菌还含有长双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌和短双歧杆菌。
56.根据本发明，优选地，所述长双歧杆菌、所述鼠李糖乳杆菌、所述短双歧杆菌与所述瑞士乳杆菌的重量比为0.2-1：0.5-2：0.2-1：1。
57.根据本发明，优选地，所述益生元选自低聚果糖、低聚半乳糖、水苏糖、菊粉、异麦芽低聚糖和海藻糖中的至少一种。
58.根据本发明，优选地，所述益生元为低聚果糖、低聚半乳糖、菊粉和异麦芽低聚糖。
59.根据本发明，优选地，所述低聚果糖、所述低聚半乳糖、所述菊粉与所述异麦芽低聚糖的重量比为1：0.5-2：1-4：1-4。
60.根据本发明，优选地，所述制备方法还包括：将所述混合物与辅料混合，得到所述益生菌组合物。
61.根据本发明，优选地，所述辅料与所述益生菌的重量比为0.1-0.25：1，具体可以为0.1：1、0.15：1、0.2：1、0.25：1，或上述两个值之间的任意值。
62.根据本发明，优选地，所述辅料选自酵母粉、脱脂乳粉、麦芽糊精和糖醇中的至少一种。
63.根据本发明，益生元和辅料在混合之前可以分别进行干燥。干燥可以采用任意一种常规的干燥方式，例如热风干燥、冷冻干燥等。优选情况下，干燥的条件包括：温度为35-45℃，具体可以为35℃、40℃、45℃，或者上述两个值之间的任意值；时间为30-60min，具体可以为30min、40min、50min、60min，或者上述两个值之间的任意值。
64.根据本发明，对混合的方法没有特别的限定，可以采用本领域内的常规选择，优选情况下，转速为50-100rpm，具体可以为50rpm、60rpm、70rpm、80rpm、90rpm、100rpm，或者上述两个值之间的任意值；时间为5-10min，具体可以为5min、6min、7min、8min、9min、10min，或者上述两个值之间的任意值。
65.本发明中，在获得所述益生菌组合物后，优选地对所述益生菌组合物进行分装和密封。对分装和密封的方法没有特殊限定，可以采用本领域常规的分装和密封的方法。
66.本发明第三方面提供上述第一方面所述的益生菌组合物和/或上述第二方面所述的制备方法得到的益生菌组合物在制备缓解产后抑郁的药物和/或食品中的应用。
67.根据本发明一种特别优选的实施方式，提供一种缓解产后抑郁的益生菌组合物的制备方法，包括以下步骤：
68.(1)将益生元和辅料在温度为35-45℃的条件下分别干燥30-60min；
69.(2)将益生菌、益生元、活性成分和辅料混合，在转速为50-100rpm的条件下搅拌5-10min，得到所述益生菌组合物；
70.所述益生菌含有嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、长双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌和短双歧杆菌；所述活性成分含有β-隐黄质和n-乙酰神经氨酸；
71.相对于10重量份的所述益生菌，所述益生元的含量为1.5-5重量份，所述活性成分的含量为0.2-0.5重量份，所述辅料的含量为1-2.5重量份；所述嗜酸乳杆菌、所述保加利亚乳杆菌、所述罗伊氏乳杆菌、所述长双歧杆菌、所述鼠李糖乳杆菌、所述短双歧杆菌与所述瑞士乳杆菌的重量比为1-5：1-5：1-2：0.2-1：0.5-2：0.2-1：1；所述β-隐黄质与所述n-乙酰神经氨酸的重量比为1：1-4；所述益生元为低聚果糖、低聚半乳糖、菊粉和异麦芽低聚糖；所述低聚果糖、所述低聚半乳糖、所述菊粉与所述异麦芽低聚糖的重量比为1：0.5-2：1-4：1-4；所述辅料为酵母粉和脱脂乳粉。
72.上述特别优选的实施方式中，将益生菌、益生元与活性成分进行合理搭配，共同作用下可以调节肠道菌群生态、缓解异常情绪，起到缓解产后抑郁的作用；而且该益生菌组合物的生产工艺简单、操作方便，生产成本低。
73.以下将通过实施例对本发明进行详细描述。
74.以下实施例和对比例中，嗜酸乳杆菌购自善恩康生物科技(苏州)有限公司，型号为al12；保加利亚乳杆菌购自善恩康生物科技(苏州)有限公司，型号为lb10；罗伊氏乳杆菌购自善恩康生物科技(苏州)有限公司，型号为rl17；瑞士乳杆菌购自善恩康生物科技(苏州)有限公司，型号为hl32；长双歧杆菌购自善恩康生物科技(苏州)有限公司，型号为lb32；鼠李糖乳杆菌购自善恩康生物科技(苏州)有限公司，型号为nj551；短双歧杆菌购自善恩康生物科技(苏州)有限公司，型号为bb28；β-隐黄质购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司，型号为c339418；n-乙酰神经氨酸购自上海麦克林生化科技有限公司，型号为n801293；如无特殊说明，其他原料均为商购。
75.实施例1
76.(1)将低聚果糖、低聚半乳糖、菊粉、异麦芽低聚糖、酵母粉和脱脂乳粉分别放入烘箱，40℃下干燥40min；
77.(2)称取步骤(1)干燥后得到的1g低聚果糖、1g低聚半乳糖、1.5g菊粉、1.5g异麦芽低聚糖、0.06g酵母粉、3g脱脂乳粉放入容器中，在转速为80rpm的条件下搅拌5min，得到混合物；
78.(3)在步骤(2)得到的混合物中加入4g嗜酸乳杆菌、4g保加利亚乳杆菌、3g罗伊氏乳杆菌、2g瑞士乳杆菌、1g长双歧杆菌、2g鼠李糖乳杆菌、1g短双歧杆菌、0.2gβ-隐黄质和0.4g n-乙酰神经氨酸，在转速为80rpm的条件下搅拌5min，得到益生菌组合物。
79.实施例2
80.(1)将低聚果糖、低聚半乳糖、菊粉、异麦芽低聚糖、酵母粉和脱脂乳粉分别放入烘箱，35℃下干燥60min；
81.(2)称取步骤(1)干燥后得到的1g低聚果糖、0.5g低聚半乳糖、1g菊粉、1g异麦芽低聚糖、0.1g酵母粉、5g脱脂乳粉放入容器中，在转速为50rpm的条件下搅拌5min，得到混合物；
82.(3)在步骤(2)得到的混合物中加入10g嗜酸乳杆菌、2g保加利亚乳杆菌、4g罗伊氏乳杆菌、2g瑞士乳杆菌、2g长双歧杆菌、1g鼠李糖乳杆菌、0.4g短双歧杆菌、0.1gβ-隐黄质和0.4g n-乙酰神经氨酸，在转速为50rpm的条件下搅拌5min，得到益生菌组合物。
83.实施例3
84.(1)将低聚果糖、低聚半乳糖、菊粉、异麦芽低聚糖、酵母粉和脱脂乳粉分别放入烘箱，45℃下干燥30min；
85.(2)称取步骤(1)干燥后得到的1g低聚果糖、2g低聚半乳糖、4g菊粉、4g异麦芽低聚糖、0.05g酵母粉、2.5g脱脂乳粉放入容器中，在转速为100rpm的条件下搅拌5min，得到混合物；
86.(3)在步骤(2)得到的混合物中加入2g嗜酸乳杆菌、10g保加利亚乳杆菌、2g罗伊氏乳杆菌、2g瑞士乳杆菌、0.4g长双歧杆菌、4g鼠李糖乳杆菌、2g短双歧杆菌、0.5gβ-隐黄质和0.5g n-乙酰神经氨酸，在转速为100rpm的条件下搅拌5min，得到益生菌组合物。
87.实施例4
88.按照实施例1的方法制备益生菌组合物，不同的是，将n-乙酰神经氨酸的用量替换为2g。
89.实施例5
90.按照实施例1的方法制备益生菌组合物，不同的是，将嗜酸乳杆菌的用量替换为1g，保加利亚乳杆菌的用量替换为1g，罗伊氏乳杆菌的用量替换为9g。
91.实施例6
92.(1)将低聚半乳糖放入烘箱，40℃下干燥40min；
93.(2)将步骤(1)干燥后得到的5g低聚半乳糖与4g嗜酸乳杆菌、4g保加利亚乳杆菌、3g罗伊氏乳杆菌、2g瑞士乳杆菌、1g长双歧杆菌、2g鼠李糖乳杆菌、1g短双歧杆菌、0.2gβ-隐黄质、0.4g n-乙酰神经氨酸进行混合，在转速为50rpm的条件下搅拌5min，得到益生菌组合物。
94.实施例7
95.按照实施例1的方法制备益生菌组合物，不同的是，步骤(3)替换为：
96.(3)在步骤(2)得到的混合物中加入4g嗜酸乳杆菌、4g保加利亚乳杆菌、3g罗伊氏乳杆菌、2g瑞士乳杆菌、0.2gβ-隐黄质和0.4g n-乙酰神经氨酸，在转速为50rpm的条件下搅拌5min，得到益生菌组合物。
97.实施例8
98.按照实施例1的方法制备益生菌组合物，不同的是，步骤(2)替换为：
99.(2)称取步骤(1)干燥后得到的1g低聚果糖、1g低聚半乳糖、1.5g菊粉、1.5g异麦芽低聚糖放入容器中，在转速为50rpm的条件下搅拌5min，得到混合物。
100.实施例9
101.按照实施例1的方法制备益生菌组合物，不同的是，β-隐黄质的用量替换为0.05g，n-乙酰神经氨酸的用量替换为0.1g。
102.对比例1
103.按照实施例1的方法制备益生菌组合物，不同的是，步骤(3)替换为：
104.(3)在步骤(2)得到的混合物中加入4g嗜酸乳杆菌、4g保加利亚乳杆菌、3g罗伊氏乳杆菌、2g瑞士乳杆菌、1g长双歧杆菌、2g鼠李糖乳杆菌、1g短双歧杆菌，在转速为50rpm的条件下搅拌5min，得到益生菌组合物。
105.对比例2
106.按照实施例1的方法制备益生菌组合物，不同的是，步骤(3)替换为：
107.(3)在步骤(2)得到的混合物中加入4g嗜酸乳杆菌、4g保加利亚乳杆菌、3g罗伊氏乳杆菌、2g瑞士乳杆菌、1g长双歧杆菌、2g鼠李糖乳杆菌、1g短双歧杆菌、0.2gβ-隐黄质，在转速为50rpm的条件下搅拌5min，得到益生菌组合物。
108.对比例3
109.按照实施例1的方法制备益生菌组合物，不同的是，步骤(3)替换为：
110.(3)在步骤(2)得到的混合物中加入4g保加利亚乳杆菌、3g罗伊氏乳杆菌、2g瑞士乳杆菌、1g长双歧杆菌、2g鼠李糖乳杆菌、1g短双歧杆菌、0.2gβ-隐黄质和0.4g n-乙酰神经氨酸，在转速为50rpm的条件下搅拌5min，得到益生菌组合物。
111.测试例
112.小鼠悬尾试验、强迫游泳试验是验证给药后是否具有明显缓解焦虑、抑郁症的常规动物实验。icr小鼠，雌雄各半，18-22g，适应性喂养1周以后，随机分成13组，每组6只，分别喂给本实施例1-实施例9和对比例1-对比例3所制备的益生菌组合物，用量为0.1g/kg，药
物用生理盐水配成混悬液灌胃给药，空白对照组在给药期间给与等体积生理盐水。每日1次，连续灌胃给药7天，末次给药1h后开展小鼠悬尾实验和强迫游泳实验。
113.(1)小鼠悬尾试验：主要是通过固定小鼠尾部使其头向下悬挂，小鼠在该环境中处于恐慌而拼命挣扎逃跑，又无法逃脱的状态，给小鼠提供一个无法回避的压迫环境，一段时间后，记录处于该环境下的小鼠产生绝望的不动状态过程的不动时间，以观察给药后的治疗效果。将小鼠尾端粘在悬尾箱上部的支架上，将其成为倒吊状态进行悬尾实验，倒挂小鼠的头部距离箱底10cm，一次悬挂6只小鼠，中间用隔板隔开以免碰撞，小鼠在倒挂后由于恐慌会进行挣扎活动，当挣扎疲劳后会处于失望状态而出现间断性不动，悬挂小鼠10分钟，统计后5分钟内悬尾倒挂小鼠累计不动时间，结果见表1；
114.(2)强迫游泳实验：主要通过将实验小鼠置于一个局限的水中，小鼠在该环境中拼命挣扎试图逃跑又无法逃脱，提供了一个无可回避的压迫环境，一段时间的实验后，小鼠即表现出典型的行为绝望状态的不动状态，记录小鼠产生绝望的不动状态时的不动时间，以观察用药后的治疗效果，将小鼠放入长50cm，宽30cm，高20cm的塑料游泳箱中做强迫性游泳试验，从小鼠放入水中后计时10分钟，记录后5分钟内小鼠的不动时间(指小鼠在水中停止挣扎或显示漂浮状态，仅有微小的肢体运动以保持头部浮在水面)，结果见表1。
115.表1
116.实施例编号悬尾静止时间(s)游泳不动时间(s)实施例163.8
±
1.285.5
±
1.8实施例264.1
±
2.285.9
±
2.1实施例363.9
±
3.186.3
±
1.6实施例466.5
±
2.488.1
±
2.6实施例568.4
±
1.688.9
±
1.2实施例666.8
±
1.789.5
±
2.4实施例768.7
±
3.391.2
±
1.8实施例865.2
±
2.187.1
±
3.4实施例970.6
±
1.692.5
±
1.8对比例175.1
±
1.595.1
±
1.5对比例272.3
±
1.893.6
±
2.3对比例373.6
±
2.494.7
±
1.8空白对照组90.4
±
1.7101.9
±
2.3
117.从表1的结果可以看出，本发明实施例1-实施例9制备的益生菌组合物相较于对比例1-对比例3，能够明显减少行为绝望动物模型小鼠中的不动时间，可以说明本发明制备的益生菌组合物具有明显的抗抑郁作用。
118.以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。