一种火把花根片体内外成分的检测方法与流程

技术特征：
1.一种火把花根片体内外成分的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤s10：准确称取火把花根片粉末，溶于适量甲醇中；步骤s20：超声提取后，滤过，挥干溶液；步骤s30：用60％的甲醇溶解残留物，用0.22μm微孔滤膜过滤，去续滤液，即得供试品溶液；步骤s40：使用超高压液相色谱飞行时间质谱仪对供试品溶液分别采用正离子模式和负离子模式进行检测分析，其中，质谱扫描范围为m/z 100-1600da；色谱条件为：zorbax eclipse plus c18色谱柱(1.8μm，100mm
×
2.1mm)；按照梯度系统条件为：0～15min时，采用95％～0％a和5％～100％b的流动相；15～19min，采用95％a和5％b的流动相，其中a为0.1％甲酸水溶液，b为乙腈；对得出的化学成分谱进行分析和鉴定，得到火把花根片的体外成分；步骤s50：对实验鼠灌胃给药15g/kg的火把花根片浸膏；步骤s60：2h后通过眼眶静脉丛采血，置于带有肝素钠的离心管内4000rpm离心20min，取上清液于-80℃冻存，得到血清液；步骤s70：使用超高压液相色谱飞行时间质谱仪对血清液分别采用正离子模式和负离子模式进行检测分析，其中，质谱扫描范围为m/z 100-1600da；色谱条件为：zorbax eclipse plus c18色谱柱(1.8μm，100mm
×
2.1mm)；按照梯度系统条件为：0～15min时，采用95％～0％a和5％～100％b的流动相；15～19min，采用95％a和5％b的流动相，其中a为0.1％甲酸水溶液，b为乙腈；步骤s80：对得出的化学成分谱进行分析和鉴定，得到火把花根片的体内成分。2.根据权利要求1所述的一种火把花根片体内外成分的检测方法，其特征在于：还包括步骤s90：取检测出的体内成分和体外成分的标准品，并放置于容量瓶中，用甲醇进行定容，即得对照品溶液，将对照品溶液分别与得出的体内成分和体外成分进行比对，判断结果是否正确。3.根据权利要求2所述的一种火把花根片体内外成分的检测方法，其特征在于：还包括步骤s65：吸取血清液100μl于1.5ml离心管中，加入5倍预冷甲醇沉淀蛋白质，涡旋1min使其充分混匀后12000rpm离心10min；离心后，使用氮吹仪完全干燥并加入100μl甲醇进行复溶，超声10min充分溶解后12000rpm离心10min，取上清液，得到待测试的血清液。

技术总结
本发明属于中药领域，具体涉及一种火把花根片体内外成分的检测方法，采用UPLC-Q-TOF-MS检测火把花根片体外的主要化学成分；色谱条件：C18色谱柱；流动相A：0.1％甲酸水溶液，流动相B：乙腈；采用梯度洗脱；检测分析得到14种体外化学成分。体内入血成分的测定采用通过设置空白组和实验组大鼠，实验组给予火把花根片后采集大鼠眼眶静脉丛血液样本，同样采用UPLC-Q-TOF-MS检测火把花根片体外的主要化学成分；色谱条件：C18色谱柱；流动相A：0.1％甲酸水溶液，流动相B：乙腈；采用梯度洗脱，检测分析出6种火把花根片给予大鼠后血清中原型化合物。本发明的方法能够对火把花根片体内外多成分进行分析鉴定，具有准确度好、分析速度快、灵敏度高等特点。高等特点。高等特点。


技术研发人员：王江瑞 赵建权 王学政 柳雨影 曾钦
受保护的技术使用者：重庆市药研院制药有限公司
技术研发日：2022.09.30
技术公布日：2022/11/29