通过微生物方法产生NMN及其衍生物与流程

技术特征：
1.一种能够从烟酰胺产生烟酰胺单核苷酸和/或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的经遗传修饰的微生物细胞，所述细胞包含选自由cgl1364、cgl1977、cgl2835、iunh1、iunh2和iunh3组成的组的一种或多种内源基因中的突变，其中所述一种或多种基因中的每一者均编码酶核苷酶。2.如权利要求1所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中所述突变是降低或消除核苷酶活性的缺失、移码或点突变。3.如权利要求1或权利要求2所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中所述微生物细胞是谷氨酸棒状杆菌。4.如权利要求1或权利要求2所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中所述微生物细胞是谷氨酸棒状杆菌atcc 13034。5.如权利要求1至4中任一项所述的经遗传修饰的微生物细胞，所述经遗传修饰的微生物细胞还包含pnca基因中的突变，其中所述突变导致能够将烟酰胺脱酰胺成烟酸的酶的失活或活性降低。6.如权利要求5所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中所述突变是所述pnca基因的缺失、移码或点突变，从而降低或消除脱酰胺活性。7.如权利要求1至4中任一项所述的经遗传修饰的微生物细胞，所述经遗传修饰的微生物细胞还包含编码能够将烟酰胺转化为烟酰胺单核苷酸的烟酰胺磷酸核糖基转移酶的外源基因nadv。8.如权利要求7所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中所述外源基因nadv来自嗜麦芽寡养单胞菌。9.如权利要求8所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中对来自嗜麦芽寡养单胞菌的所述基因nadv进行密码子优化以在谷氨酸棒状杆菌中表达。10.如权利要求7所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中所述外源基因nadv来自紫色色杆菌。11.如权利要求10所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中对来自紫色色杆菌的所述基因nadv进行密码子优化以在谷氨酸棒状杆菌中表达。12.如权利要求7所述的经遗传修饰的微生物细胞，所述经遗传修饰的微生物细胞还包含编码磷酸核糖基焦磷酸合成酶的prsa基因变体或突变体。13.如权利要求12所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中所述prsa基因变体或突变体是来自谷氨酸棒状杆菌atcc 13032的prsa基因的密码子优化的变体。14.如权利要求12所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中所述prsa基因变体或突变体编码磷酸核糖基焦磷酸合成酶的抗反馈突变体。15.如权利要求7所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中所述微生物细胞还包含对内源pyre基因的遗传修饰，从而导致磷酸核糖基转移酶的表达降低或消除。16.如权利要求7所述的经遗传修饰的微生物细胞，所述经遗传修饰的微生物细胞还包含内源usha基因中的突变，从而导致能够将烟酰胺单核苷酸转化为烟酰胺核苷的嘌呤核苷酶的失活或活性降低。17.如权利要求7所述的经遗传修饰的微生物细胞，所述经遗传修饰的微生物细胞还包含编码能够将烟酰胺单核苷酸转化为烟酸单核苷酸的酶烟酰胺核苷酸酰胺酶的内源pncc
基因的遗传修饰，从而导致失活或活性降低。18.如权利要求7所述的经遗传修饰的微生物细胞，所述经遗传修饰的微生物细胞还包含内源nadd基因中的遗传修饰，从而导致能够将烟酰胺单核苷酸转化为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的酶烟酸-核苷酸腺苷酰基转移酶的上调。19.如权利要求7所述的经遗传修饰的微生物细胞，所述经遗传修饰的微生物细胞还包含编码能够将烟酰胺单核苷酸转化为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的酶烟酸-核苷酸腺苷酰基转移酶的异源基因的表达。20.如权利要求19所述的经遗传修饰的微生物细胞，所述经遗传修饰的微生物细胞还包含内源nudc基因中的遗传修饰，从而导致能够将nad( )转化为烟酰胺单核苷酸的nadh焦磷酸酶的表达降低或消除。21.如权利要求9所述的经遗传修饰的微生物细胞，所述经遗传修饰的微生物细胞还包含由nrdhiej操纵子编码的条件活性核糖核苷酸还原酶。22.如权利要求1至4中任一项所述的经遗传修饰的微生物细胞，所述经遗传修饰的微生物细胞还包含pgi基因中的突变，其中所述突变导致能够将d-葡萄糖-6-磷酸转化为d-核酮糖-5-磷酸的酶的失活或活性降低。23.如权利要求22所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中所述突变是所述pgi基因的缺失、移码或点突变，从而降低或消除d-葡萄糖-6-磷酸转化为d-核酮糖-5-磷酸。24.如权利要求22所述的经遗传修饰的微生物细胞，所述经遗传修饰的微生物细胞还包含编码可溶性转氢酶的外源基因。25.如权利要求24所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中所述外源基因是来自大肠埃希氏菌的udha基因。26.如权利要求25所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中对所述来自大肠埃希氏菌的基因udha进行密码子优化以在谷氨酸棒状杆菌中表达。27.如权利要求22所述的经遗传修饰的微生物细胞，所述经遗传修饰的微生物细胞还包含编码膜结合转氢酶的外源基因。28.如权利要求27所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中所述外源基因是来自大肠埃希氏菌的pntab基因。29.如权利要求28所述的经遗传修饰的微生物细胞，其中对所述来自大肠埃希氏菌的基因pntab进行密码子优化以在谷氨酸棒状杆菌中表达。30.一种用于产生烟酰胺单核苷酸的方法，所述方法包括：在烟酰胺存在下培养如权利要求1-29中任一项所述的经遗传修饰的微生物细胞持续足够的时间段以允许烟酰胺转化为烟酰胺单核苷酸。31.一种用于产生烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法，所述方法包括：在烟酰胺存在下培养如权利要求18或权利要求20所述的经遗传修饰的微生物细胞持续足够的时间段以允许烟酰胺转化为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。

技术总结
本发明涉及使用经遗传修饰的细菌进行的烟酰胺单核苷酸(NMN)、烟酰胺核苷(NR)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的微生物产生。胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的微生物产生。胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的微生物产生。


技术研发人员：D
受保护的技术使用者：康纳根有限公司
技术研发日：2021.05.04
技术公布日：2022/11/15