一种靶向视网膜的基因递送系统及其应用的制作方法

技术特征：
1.一种靶向视网膜的基因递送系统，其特征在于，包括腺相关病毒载体raav11，所述腺相关病毒载体raav11包括编码标记蛋白的基因和启动子，所述腺相关病毒载体raav11靶向视网膜细胞。2.如权利要求1所述的靶向视网膜的基因递送系统，其特征在于，所述编码标记蛋白的基因中的标记蛋白选自荧光蛋白和/或酶反应显色蛋白，所述荧光蛋白选自bfp、cfp、gfp、yfp、rfp、irfp、cerulean、venus、egfp、ecfp、eyfp、ebfp、dsred、dtomato、tdtomato、mcherry、mkate、mapple、mbanana、mcitrine、morange、mplum、tagrfp和tagbfp中的一种或多种，所述酶反应显色蛋白选自hrp、firefly luciferase和renilla luciferase中的一种或多种。3.如权利要求1所述的靶向视网膜的基因递送系统，其特征在于，所述启动子选自cag、cmv、hubc、ef1α、nef、hsyn、camkiiα、vgat、thy1、tre、uas、gfap、gfaabc1d、th、rpe65、tre、cba、pgk、e-sare、c-fos、ram、sst、pv、mdlx、npy、cr、tcap、sfrp2、chat、tph2、mth、gad67、gfap104、cd68、nestin、mbp、trpv1、l7/pcp2、moxt、rk、hgrk1、car、grm6、roh、nrl、mck、dmck和tmck中的一种或多种。4.如权利要求1所述的靶向视网膜的基因递送系统，其特征在于，所述视网膜细胞选自神经元和/或神经胶质细胞，所述神经元选自双极细胞和感光细胞中的一种或两种，所述神经胶质细胞选自神经节细胞。5.一种视网膜神经网络的标记方法，其特征在于，包括以下步骤：s1：将腺相关病毒载体注射至眼睛的玻璃体腔中；s2：观察视网膜中标记蛋白的分布情况；其中，所述腺相关病毒载体为raav11，所述关病毒载体包括编码标记蛋白的基因和启动子。6.如权利要求5所述的视网膜神经网络的标记方法，其特征在于，所述编码标记蛋白的基因中的标记蛋白选自荧光蛋白和/或酶反应显色蛋白，所述荧光蛋白选自bfp、cfp、gfp、yfp、rfp、irfp、cerulean、venus、egfp、ecfp、eyfp、ebfp、dsred、dtomato、tdtomato、mcherry、mkate、mapple、mbanana、mcitrine、morange、mplum、tagrfp和tagbfp中的一种或多种，所述酶反应显色蛋白选自hrp、firefly luciferase和renilla luciferase中的一种或多种。7.如权利要求5所述的视网膜神经网络的标记方法，其特征在于，所述启动子选自cag、cmv、hubc、ef1α、nef、hsyn、camkiiα、vgat、thy1、tre、uas、gfap、gfaabc1d、th、rpe65、tre、cba、pgk、e-sare、c-fos、ram、sst、pv、mdlx、npy、cr、tcap、sfrp2、chat、tph2、mth、gad67、gfap104、cd68、nestin、mbp、trpv1、l7/pcp2、moxt、rk、hgrk1、car、grm6、roh、nrl、mck、dmck和tmck中的一种或多种。8.腺相关病毒载体的在视网膜神经元中表达目的蛋白或功能性rna的应用，或者在制备在视网膜神经元中表达目的蛋白或功能性rna的试剂中的应用，其特征在于，所述腺相关病毒载体为raav11，所述腺相关病毒载体中包括编码目的蛋白或功能性rna的基因和启动子，所述目的蛋白选自标记蛋白和/或活性蛋白，所述活性蛋白选自激活神经元蛋白、抑制神经元蛋白、钙离子信号探针蛋白、小分子信号探针蛋白、介导凋亡蛋白、疾病相关突变蛋白、生理条件下的正常蛋白、细胞因子、抗病毒因子、病毒感染辅助受体、重组酶和基因编辑
工具蛋白中的一种或多种，所述功能性rna选自小rna、小干扰rna、小发卡rna、小向导rna、细胞器定位rna和用于rna测序或原位杂交分析的barcode rna中的一种或多种。9.在视网膜神经元中表达目的蛋白或功能性rna的方法，其特征在于，包括将腺相关病毒载体注射至眼睛的玻璃体腔中，所述腺相关病毒载体为raav11，所述腺相关病毒载体中还包含编码目的蛋白或功能性rna的基因和启动子，其中，所述目的蛋白选自标记蛋白和/或活性蛋白，所述活性蛋白选自激活神经元蛋白、抑制神经元蛋白、钙离子信号探针蛋白、小分子信号探针蛋白、介导凋亡蛋白、疾病相关突变蛋白、生理条件下的正常蛋白、细胞因子、抗病毒因子、病毒感染辅助受体、重组酶和基因编辑工具蛋白中的一种或多种，所述功能性rna选自小rna、小干扰rna、小发卡rna、小向导rna、细胞器定位rna和用于rna测序或原位杂交分析的barcode rna中的一种或多种。10.腺相关病毒载体在制备治疗视网膜神经元异常导致的疾病的药物中的应用，其特征在于，所述腺相关病毒载体为raav11，所述腺相关病毒载体中还包含编码治疗用蛋白或功能性rna的基因和启动子，其中，所述目的蛋白选自标记蛋白和/或活性蛋白，所述活性蛋白选自激活神经元蛋白、抑制神经元蛋白、生理条件下的正常蛋白、细胞因子、抗病毒因子和基因编辑工具蛋白中的一种或多种，所述功能性rna选自小rna、小干扰rna、小发卡rna和小向导rna中的一种或多种。

技术总结
本发明属于生物技术领域，具体涉及靶向视网膜的基因递送系统及其应用。该靶向视网膜的基因递送系统包括腺相关病毒载体rAAV11，所述腺相关病毒载体rAAV11包括编码标记蛋白的基因和启动子，所述腺相关病毒载体rAAV11靶向视网膜细胞。相比于其他载体，rAAV11载体可以高效且特异地将基因递送到视网膜双极细胞。效且特异地将基因递送到视网膜双极细胞。效且特异地将基因递送到视网膜双极细胞。


技术研发人员：林坤章 韩增鹏 骆能松 徐富强
受保护的技术使用者：深圳先进技术研究院
技术研发日：2022.07.28
技术公布日：2022/11/11