钙离子荧光指示剂的制备方法

技术特征：
1.钙离子荧光指示剂的制备方法，其特征在于，包括：步骤一、将882mg 1,2-双(2-氨基苯氧基)乙烷-n,n,n’,n
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四乙酸乙酯和150μl吡啶溶于3ml无水dmf，在低于0℃下缓慢滴加1.2ml pocl3，反应后溶液变为红色，取出，于室温下放置30min后，加热至60℃，反应1h，反应结束后恢复至室温，冷凝回流20h，溶液逐渐变为黄色，将反应后的混合物倒入浓度为0.5m冰的naoh溶液中，用二氯甲烷萃取三次，分离有机层，用水和饱和盐水交替冲洗合并后的有机层三次，除水，在正相硅胶柱上进行分离，得到cal ester；步骤二、将130mg的cal ester溶于1ml二氯甲烷后，加入3ml 1m的koh无水乙醇溶液进行水解，于37℃恒温搅拌24h，用hcl调节ph，使ph在4～5范围内，静置沉淀后过滤，取滤液，用二氯甲烷萃取后，除水，得产物cal；步骤三、称取100mg对苯二胺溶于30ml无水乙醇中，之后置于高压反应釜装置中200℃反应3h，反应结束后冷却至室温，得到暗红色的产物溶液，采用分子截流量为100-500的透析袋，透析24h，得粒度均匀的产物cds；步骤四、取一定量cal溶解于2ml的二氯甲烷中，之后缓慢加入2ml浓度为0.5mg/ml的cds分散液，在室温条件下混合搅拌6h，反应结束后，旋蒸除去溶剂ch2cl2，得到的固形物用石油醚进行多次重结晶处理，得cal@cds。2.如权利要求1所述的钙离子荧光指示剂的制备方法，其特征在于，所述步骤一中在低于0℃下采用恒压滴液漏斗滴加1.2ml pocl3。3.如权利要求1所述的钙离子荧光指示剂的制备方法，其特征在于，所述步骤一中用体积比为2:1的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂在正相硅胶柱上进行分离，得到cal ester。4.如权利要求1所述的钙离子荧光指示剂的制备方法，其特征在于，所述步骤一和步骤二中均加入na2so4除水。5.如权利要求1所述的钙离子荧光指示剂的制备方法，其特征在于，所述步骤四中利用旋转蒸发仪除去溶剂二氯甲烷。6.如权利要求1所述的钙离子荧光指示剂的制备方法，其特征在于，所述步骤四中cal和cds的质量比为4:1。

技术总结
本发明公开了一种钙离子荧光指示剂的制备方法，包括：


技术研发人员：李新春 陈丽敏 莫倩 李鳗亭 杨帆 刘伟 高伟雯 莫春红
受保护的技术使用者：广西医科大学
技术研发日：2022.08.22
技术公布日：2022/11/11