一种实体肿瘤细胞药物敏感性检测方法与流程

1.本发明属于细胞检测技术领域，特别是涉及一种实体肿瘤细胞药物敏感性检测方法。


背景技术：

2.肿瘤细胞药物敏感性的检测其特点是直接从患者体内获取新鲜的肿瘤细胞进行化疗前培养(初诊病人)，由于肿瘤细胞未接触化疗药物，其耐药性和抗药性等生物学性状尚处于体内环境的原始状态，能较真实地反映整个肿瘤细胞群体的特性及不同供体的个体差异，能够比较确切地代表体内状态，为不同的病人准确筛选敏感的化疗药物，并确定其剂量，真正实现临床的个体化用药。目前药敏检测中普遍存在操作不标准、随意性大、不便检测的问题。因此，试验操作的高效便捷是肿瘤细胞药敏检测的关键技术要求。


技术实现要素：

3.本发明主要解决的技术问题是提供一种实体肿瘤细胞药物敏感性检测方法，采用cck-8法检测肿瘤细胞对某种或多种药物的敏感性，使药敏检测标准化、商品化，非常便于检测人员的操作，真正实现临床的个体化用药。
4.为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种实体肿瘤细胞药物敏感性检测方法，包括以下步骤：
5.s1、采集外周血液；
6.s2、分离外周血液中的肿瘤血小板、循环肿瘤细胞、肿瘤干细胞；
7.s3、将分离出的肿瘤血小板、循环肿瘤细胞、肿瘤干细胞加入胶原蛋白进行三维立体培养；
8.s4、加入待测药物，在细胞培养箱中孵育；
9.s5、采用药敏检测技术对细胞进行形态及生长情况的鉴定，获得肿瘤对抗肿瘤药的药敏信息。
10.进一步地说，所述三维立体培养的条件为：o2含量为5％～7％，co2含量为4％～6％，压力为1～2psi，温度为28～30℃，湿度为40％～70％。
11.进一步地说，所述步骤s4中的细胞培养箱中孵育的条件为：co2含量为7％，压力为3psi，温度为35℃，湿度为85％，培养4天。
12.进一步地说，所述步骤s3得到的细胞悬液的细胞密度为2.5
×
105细胞/ml。
13.进一步地说，所述步骤s5中的药敏检测技术为cck-8法。
14.本发明的有益效果是：本发明采用cck-8法检测肿瘤细胞对某种或多种药物的敏感性，使药敏检测标准化、商品化，非常便于检测人员的操作，真正实现临床的个体化用药。
具体实施方式
15.下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被
本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。
16.实施例：一种实体肿瘤细胞药物敏感性检测方法，本发明包括以下步骤：
17.s1、采集外周血液；
18.s2、分离外周血液中的肿瘤血小板、循环肿瘤细胞、肿瘤干细胞；
19.s3、将分离出的肿瘤血小板、循环肿瘤细胞、肿瘤干细胞加入胶原蛋白进行三维立体培养；
20.s4、加入待测药物，在细胞培养箱中孵育；
21.s5、采用药敏检测技术对细胞进行形态及生长情况的鉴定，获得肿瘤对抗肿瘤药的药敏信息。
22.所述三维立体培养的条件为：o2含量为5％～7％，co2含量为4％～6％，压力为1～2psi，温度为28～30℃，湿度为40％～70％。
23.所述步骤s4中的细胞培养箱中孵育的条件为：co2含量为7％，压力为3psi，温度为35℃，湿度为85％，培养4天。
24.所述步骤s3得到的细胞悬液的细胞密度为2.5
×
105细胞/ml。
25.所述步骤s5中的药敏检测技术为cck-8法。
26.本发明的工作原理如下：本发明采用cck-8法检测肿瘤细胞对某种或多种药物的敏感性，使药敏检测标准化、商品化，非常便于检测人员的操作，真正实现临床的个体化用药。
27.以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书所作的等效结构变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。


技术特征：
1.一种实体肿瘤细胞药物敏感性检测方法，其特征在于：包括以下步骤：s1、采集外周血液；s2、分离外周血液中的肿瘤血小板、循环肿瘤细胞、肿瘤干细胞；s3、将分离出的肿瘤血小板、循环肿瘤细胞、肿瘤干细胞加入胶原蛋白进行三维立体培养；s4、加入待测药物，在细胞培养箱中孵育；s5、采用药敏检测技术对细胞进行形态及生长情况的鉴定，获得肿瘤对抗肿瘤药的药敏信息。2.根据权利要求1所述的一种实体肿瘤细胞药物敏感性检测方法，其特征在于：所述三维立体培养的条件为：o2含量为5％～7％，co2含量为4％～6％，压力为1～2psi，温度为28～30℃，湿度为40％～70％。3.根据权利要求1所述的一种实体肿瘤细胞药物敏感性检测方法，其特征在于：所述步骤s4中的细胞培养箱中孵育的条件为：co2含量为7％，压力为3psi，温度为35℃，湿度为85％，培养4天。4.根据权利要求1所述的一种实体肿瘤细胞药物敏感性检测方法，其特征在于：所述步骤s3得到的细胞悬液的细胞密度为2.5
×
105细胞/ml。5.根据权利要求1所述的一种实体肿瘤细胞药物敏感性检测方法，其特征在于：所述步骤s5中的药敏检测技术为cck-8法。

技术总结
本发明公开了一种实体肿瘤细胞药物敏感性检测方法，包括以下步骤：S1、采集外周血液；S2、分离外周血液中的肿瘤血小板、循环肿瘤细胞、肿瘤干细胞；S3、将分离出的肿瘤血小板、循环肿瘤细胞、肿瘤干细胞加入胶原蛋白进行三维立体培养；S4、加入待测药物，在细胞培养箱中孵育；S5、采用药敏检测技术对细胞进行形态及生长情况的鉴定，获得肿瘤对抗肿瘤药的药敏信息。通过上述方式，本发明采用CCK-8法检测肿瘤细胞对某种或多种药物的敏感性，使药敏检测标准化、商品化，非常便于检测人员的操作，真正实现临床的个体化用药。现临床的个体化用药。


技术研发人员：朱润芝 王海波 梁聚芳 潘燕 杨宏伟
受保护的技术使用者：昆山美卡生物医药科技有限公司
技术研发日：2021.04.29
技术公布日：2022/10/31