聚乙二醇化蛋白药物中N-羟基琥珀酰亚胺的检测方法与流程

技术特征：
1.一种聚乙二醇化蛋白药物中n-羟基琥珀酰亚胺的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：s1样品制备：取聚乙二醇化蛋白药物反应液或各步骤纯化液作为样品溶液；s2标准品制备：取100mgn-羟基琥珀酰亚胺，溶于10ml超纯水中，得10mg/ml的标准贮备液，将标准贮备液用磷酸盐缓冲液进行稀释，得标准品溶液；s3取步骤s1得到的样品溶液和步骤s2得到的标准品溶液各10ul，分别注入高效液相色谱仪进行n-羟基琥珀酰亚胺残留量检测；所述色谱条件为：所述色谱柱为极性基团修饰的反相色谱柱，以磷酸盐缓冲液为流动相进行等度洗脱。2.如权利要求1所述的聚乙二醇化蛋白药物中n-羟基琥珀酰亚胺的检测方法，其特征在于，所述步骤s2中标准贮备液的稀释浓度为：将标准贮备液用磷酸盐缓冲液稀释到160μg/ml，80μg/ml，40μg/ml，20μg/ml，10μg/ml和5μg/ml。3.如权利要求1所述的聚乙二醇化蛋白药物中n-羟基琥珀酰亚胺的检测方法，其特征在于，所述步骤s3中的高效液相色谱仪为：品牌为thermo，型号为u3000的高效液相色谱仪，所述色谱柱为：品牌为welch，型号为ultimate polar-rp，规格为4.6*300mm的色谱柱，流动相为：磷酸二氢钾溶液。4.如权利要求3所述的聚乙二醇化蛋白药物中n-羟基琥珀酰亚胺的检测方法，其特征在于，所述色谱条件为：流速0.9～1.1ml/min，柱温为38～42℃，上样量10ul，采集时间30min，检测器为dad检测器或紫外检测器，检测波长为255～265nm。5.如权利要求4所述的聚乙二醇化蛋白药物中n-羟基琥珀酰亚胺的检测方法，其特征在于，所述色谱条件为：流速1.0ml/min，柱温为40℃，上样量10ul，采集时间30min，检测器为dad检测器，检测波长为260nm。6.如权利要求1所述的聚乙二醇化蛋白药物中n-羟基琥珀酰亚胺的检测方法，其特征在于，所述步骤s2和步骤s3中的磷酸盐缓冲液为20mmol/l磷酸二氢钾溶液，ph 6.5
±
0.1。7.如权利要求6所述的聚乙二醇化蛋白药物中n-羟基琥珀酰亚胺的检测方法，其特征在于，所述磷酸二氢钾溶液的制备方法为：称取磷酸二氢钾2.72g，加注射用水800ml溶解，并用氢氧化钠溶液调节至ph 6.5
±
0.1，加注射用水定容至1000ml，用0.22um膜过滤，即得。

技术总结
本发明属于药物杂质分析技术领域，具体涉及一种聚乙二醇化蛋白药物中N-羟基琥珀酰亚胺的检测方法。本发明提供的聚乙二醇化蛋白药物中N-羟基琥珀酰亚胺的检测方法采用高效液相色谱法进行检测，色谱条件包括：色谱柱为极性基团修饰的反相色谱柱，流动相为磷酸盐缓冲液，进行等度洗脱。本发明提供的聚乙二醇化蛋白药物中N-羟基琥珀酰亚胺的检测方法具有专属性强，线性关系优良且稳定，准确度和精密度高，耐用性好的优点，是一种较为理想的聚乙二醇化蛋白药物中N-羟基琥珀酰亚胺的检测方法，可以有效的对PEG化蛋白药物中N-羟基琥珀酰亚胺残留量进行监控，提高产品安全性。提高产品安全性。提高产品安全性。


技术研发人员：王康 吴园园 黄俊龙 王梦格 廖冬 蔡雨蒙
受保护的技术使用者：深圳赛保尔生物药业有限公司
技术研发日：2022.05.17
技术公布日：2022/8/30