一种积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法与流程

1.本技术属于生物提取技术领域，尤其涉及一种积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法。


背景技术：

2.积雪草为伞形科植物积雪草的干燥全草，又可叫连钱草、马蹄草，它属我国中医药材之一。其性寒，味苦、辛，对治疗跌扑损伤、中暑腹泻、痈肿疮毒等证均有很好的疗效，不仅具有药用价值，而且还可用于化妆品美容。
3.然而，积雪草的药理及其作用都与其活性成分是密不可分的。积雪草的化学成分复杂，其主要含活性成分为积雪草总苷，积雪草总苷是一种由三萜烷酸形成的糖苷组成的混合物，包括积雪草苷b、羟基积雪草苷和积雪草苷，具有舒敏抗衰的功效；积雪草化学成分还包括积雪草酸、羟基积雪草酸、积雪草糖苷、正二十七烷、2,4,6-三叔丁基苯、对羟基苯甲酸、万寿菊素、槲皮素、二十六醇辛酸酯、山奈酚、槲皮素、胡萝卜素、香草酸、丁二酸等。这些成分的结构复杂且近似，导致积雪草提取物的提取工作存在较大难度，且市面上参差不齐的提取也成为了行业乱象，现有针对积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法普遍存在萃取时间长、生产成本高以及积雪草总苷得率较低的问题。


技术实现要素：

4.本技术实施例提供一种积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法，旨在解决现有针对积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法普遍存在萃取时间长、生产成本高以及积雪草总苷得率较低的问题。
5.本技术实施例是这样实现的，一种积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法，包括：
6.将积雪草粉末用乙二醇二甲醚与乙醇溶液进行浸提处理，得提取液；
7.将所述提取液从常温快速升温至100℃-130℃，升温时间为0.1s-10s，保温1-3min后移置常温环境中，得积雪草浸膏；
8.将所述积雪草浸膏用水稀释后加入脱色剂进行保温脱色处理；
9.将脱色处理后的溶液进行过滤，并将所得滤液在真空度低于-0.09mpa的条件下进行减压浓缩至质量恒定为止，经干燥处理后即得积雪草提取物。
10.本技术实施例还提供一种积雪草提取物，所述积雪草提取物是所述的积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法制备得到。
11.本技术实施例还提供一种上述的积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法制备得到的积雪草提取物或上述的积雪草提取物在化妆品领域中的应用。
12.本技术实施例提供的积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法，通过将积雪草粉末通过乙二醇二甲醚与乙醇混合溶液进行浸提处理，将所得提取液从常温进行快速升温处理，使得影响积雪草总苷得率的杂质得以快速汽化除去，有利于大幅度提高积雪草总苷
得率，进而将所得积雪草浸膏经短时间的保温脱色以及减压浓度处理以进一步提高积雪草总苷的得率以及纯度稳定性；另外，本技术提取工艺简单、用时短、生产成本低且生物安全性高。
具体实施方式
13.为了使本技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本技术，并不用于限定本技术。
14.本技术实施例为了解决现有针对积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法普遍存在萃取时间长、生产成本高以及积雪草总苷得率较低的问题，提供了一种积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法，其通过将积雪草粉末通过乙二醇二甲醚与乙醇混合溶液进行浸提处理，将所得提取液从常温进行快速升温处理，使得影响积雪草总苷得率的杂质得以快速汽化除去，有利于大幅度提高积雪草总苷得率，进而将所得积雪草浸膏经短时间的保温脱色以及减压浓度处理以进一步提高积雪草总苷的得率以及纯度稳定性；另外，本技术提取工艺简单、用时短、生产成本低且生物安全性高。
15.具体地，本技术实施例提供的积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法，包括以下步骤：
16.步骤s1：将积雪草粉末用乙二醇二甲醚与乙醇溶液进行浸提处理，得提取液。
17.在本技术实施例中，取积雪草全草破碎成粉末后过10目筛，将过筛后的积雪草粉末用乙二醇二甲醚与乙醇的混合溶液进行浸提处理，其中，关于提取溶液，本技术在前期实践过程中，分别选用了乙酸乙酯、乙醇、乙二醇二甲醚、甜菜碱、三乙醇胺中的一种或任意两种混合作为积雪草粉末的提取溶液，其中，乙二醇二甲醚与乙醇的混合溶液对应后续积雪草总苷得率最高，经进一步实验确定，所述乙二醇二甲醚与乙醇溶液的体积比优选为0.1:(2-4)。
18.在本技术实施例中，所述乙醇溶液的质量分数优选为80-95％，本技术对于质量分数要求越高越好，更优选为95％。
19.步骤s2：将所述提取液从常温快速升温至100℃-130℃，升温时间为0.1s-10s，保温1-3min后移置常温环境中，得积雪草浸膏。
20.在本技术实施例中，通过将提取液快速升温至高于乙醇以及乙二醇二甲醚的常规沸点，有利于将影响积雪草总苷得率的杂质得以快速汽化除去，从而大幅度提高积雪草总苷得率与纯度。
21.步骤s3：将所述积雪草浸膏用水稀释后加入脱色剂进行保温脱色处理。
22.在本技术实施例中，所述脱色剂为活性炭、活性白土、活性硅胶的一种或几种混合而成。经本技术实验确定，更优先地，所述脱色剂是由质量比为1:1:1的活性炭、活性白土、活性硅胶混合而成。
23.在本技术实施例中，所述保温脱色处理条件为：保温脱色温度为45～55℃，脱色时间为15～25min。更优选地，保温脱色温度为50℃，脱色时间为20min。其中，经本技术研究确定，保温脱色温度不宜超过55℃、且脱色时间不宜超过25min，否则将导致积雪草总苷损耗大，得率降低；另外，保温脱色温度也不宜低于45℃、或脱色时间不宜少于15min，否则脱色
效果不佳且将影响积雪草总苷纯度。
24.步骤s4：将脱色处理后的溶液进行过滤，并将所得滤液在真空度低于-0.05mpa的条件下进行减压浓缩至质量恒定为止，经干燥处理后即得积雪草提取物。
25.在本技术实施例中，真空度对所得积雪草总苷的收率影响不大，但对于积雪草总苷的纯度有一定影响，当真空度高于-0.07mpa时纯度呈降低的趋势，因此，所述真空度优选不高于-0.07mpa；更优选地，真空度为-0.06mpa。
26.本技术实施例还提供了一种积雪草提取物，所述积雪草提取物是由所述的积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法制备得到。
27.本技术实施例还提供一种上述的积雪草中纯天然性舒敏抗衰成分的提取方法制备得到的积雪草提取物或上述的积雪草提取物在化妆品领域中的应用。本技术所提供的积雪草提取物在化妆品的添加用量仅为0.1-0.5％即可，即低量就能起效。
28.以下给出本技术某些实施方式的实施例，其目的不在于对本技术的范围进行限定。
29.另外，需要说明的是，以下实施例中所给出的数值是尽可能精确，但是本领域技术人员理解由于不可能避免的测量误差和实验操作问题，每一个数字都应该被理解为约数，而不是绝对准确的数值。
30.实施例1
31.将质量分数为95％乙醇与乙二醇二甲醚按照体积比为2:0.1进行混合得提取溶液，用该提取溶液浸取积雪草粉末，得到提取液；将提取液中取出每份为1ml的样品，并分别放入不锈钢皿中，进而放入已事先升温至100℃的油浴锅中，使提取液快速升温至100℃，此时在0.1s-10s时间范围内肉眼可见提取液内组分快速挥发，保温2min后移置常温环境中，即可得积雪草浸膏；将所述积雪草浸膏用水稀释后加入由质量比为1:1:1的活性炭、活性白土、活性硅胶混合而成的脱色剂进行保温脱色处理，所述脱色剂的用量为积雪草浸膏质量的0.5％倍，保温脱色温度为50℃，脱色时间为20min；将脱色处理后的溶液进行过滤，并将所得滤液在-0.06mpa的条件下进行减压浓缩至质量恒定为止，经干燥处理后即得积雪草提取物。
32.经hplc分析，积雪草总苷的得率为91.32％，纯度为90.12％。
33.实施例2
34.将质量分数为95％乙醇与乙二醇二甲醚按照体积比为2.5:0.1进行混合得提取溶液，用该提取溶液浸取积雪草粉末，得到提取液；将提取液中取出每份为1ml的样品，并分别放入不锈钢皿中，进而放入已事先升温至105℃的油浴锅中，使提取液快速升温至105℃，此时在0.1s-10s时间范围内肉眼可见提取液内组分快速挥发，保温2min后移置常温环境中，即可得积雪草浸膏；将所述积雪草浸膏用水稀释后加入由质量比为1:1:1的活性炭、活性白土、活性硅胶混合而成的脱色剂进行保温脱色处理，所述脱色剂的用量为积雪草浸膏质量的0.5％倍，保温脱色温度为50℃，脱色时间为20min；将脱色处理后的溶液进行过滤，并将所得滤液在-0.06mpa的条件下进行减压浓缩至质量恒定为止，经干燥处理后即得积雪草提取物。
35.经hplc分析，积雪草总苷的得率为90.71％，纯度为91.27％。
36.实施例3
37.将质量分数为95％乙醇与乙二醇二甲醚按照体积比为2.5:0.1进行混合得提取溶液，用该提取溶液浸取积雪草粉末，得到提取液；将提取液中取出每份为1ml的样品，并分别放入不锈钢皿中，进而放入已事先升温至100℃的油浴锅中，使提取液快速升温至100℃，此时在0.1s-10s时间范围内肉眼可见提取液内组分快速挥发，保温2min后移置常温环境中，即可得积雪草浸膏；将所述积雪草浸膏用水稀释后加入由质量比为1:1:1的活性炭、活性白土、活性硅胶混合而成的脱色剂进行保温脱色处理，所述脱色剂的用量为积雪草浸膏质量的0.5％倍，保温脱色温度为50℃，脱色时间为20min；将脱色处理后的溶液进行过滤，并将所得滤液在-0.06mpa的条件下进行减压浓缩至质量恒定为止，经干燥处理后即得积雪草提取物。
38.经hplc分析，积雪草总苷的得率为90.19％，纯度为90.78％。
39.实施例4
40.将质量分数为95％乙醇与乙二醇二甲醚按照体积比为4:0.1进行混合得提取溶液，用该提取溶液浸取积雪草粉末，得到提取液；将提取液中取出每份为1ml的样品，并分别放入不锈钢皿中，进而放入已事先升温至130℃的油浴锅中，使提取液快速升温至130℃，此时在0.1s-10s时间范围内肉眼可见提取液内组分快速挥发，保温2min后移置常温环境中，即可得积雪草浸膏；将所述积雪草浸膏用水稀释后加入由质量比为1:1:1的活性炭、活性白土、活性硅胶混合而成的脱色剂进行保温脱色处理，所述脱色剂的用量为积雪草浸膏质量的0.5％倍，保温脱色温度为50℃，脱色时间为20min；将脱色处理后的溶液进行过滤，并将所得滤液在-0.06mpa的条件下进行减压浓缩至质量恒定为止，经干燥处理后即得积雪草提取物。
41.经hplc分析，积雪草总苷的得率为92.42％，纯度为93.27％。
42.实施例5
43.将质量分数为95％乙醇与乙二醇二甲醚按照体积比为3.5:0.1进行混合得提取溶液，用该提取溶液浸取积雪草粉末，得到提取液；将提取液中取出每份为1ml的样品，并分别放入不锈钢皿中，进而放入已事先升温至125℃的油浴锅中，使提取液快速升温至125℃，此时在0.1s-10s时间范围内肉眼可见提取液内组分快速挥发，保温2min后移置常温环境中，即可得积雪草浸膏；将所述积雪草浸膏用水稀释后加入由质量比为1:1:1的活性炭、活性白土、活性硅胶混合而成的脱色剂进行保温脱色处理，所述脱色剂的用量为积雪草浸膏质量的0.5％倍，保温脱色温度为50℃，脱色时间为20min；将脱色处理后的溶液进行过滤，并将所得滤液在-0.06mpa的条件下进行减压浓缩至质量恒定为止，经干燥处理后即得积雪草提取物。
44.经hplc分析，积雪草总苷的得率为93.51％，纯度为94.11％。
45.实施例6
46.将质量分数为95％乙醇与乙二醇二甲醚按照体积比为4:0.1进行混合得提取溶液，用该提取溶液浸取积雪草粉末，得到提取液；将提取液中取出每份为1ml的样品，并分别放入不锈钢皿中，进而放入已事先升温至125℃的油浴锅中，使提取液快速升温至125℃，此时在0.1s-10s时间范围内肉眼可见提取液内组分快速挥发，保温2min后移置常温环境中，即可得积雪草浸膏；将所述积雪草浸膏用水稀释后加入由质量比为1:1:1的活性炭、活性白土、活性硅胶混合而成的脱色剂进行保温脱色处理，所述脱色剂的用量为积雪草浸膏质量
的0.5％倍，保温脱色温度为50℃，脱色时间为20min；将脱色处理后的溶液进行过滤，并将所得滤液在-0.06mpa的条件下进行减压浓缩至质量恒定为止，经干燥处理后即得积雪草提取物。
47.经hplc分析，积雪草总苷的得率为92.98％，纯度为93.11％。
48.实施例7
49.将质量分数为95％乙醇与乙二醇二甲醚按照体积比为3:0.1进行混合得提取溶液，用该提取溶液浸取积雪草粉末，得到提取液；将提取液中取出每份为1ml的样品，并分别放入不锈钢皿中，进而放入已事先升温至120℃的油浴锅中，使提取液快速升温至120℃，此时在0.1s-10s时间范围内肉眼可见提取液内组分快速挥发，保温2min后移置常温环境中，即可得积雪草浸膏；将所述积雪草浸膏用水稀释后加入由质量比为1:1:1的活性炭、活性白土、活性硅胶混合而成的脱色剂进行保温脱色处理，所述脱色剂的用量为积雪草浸膏质量的0.5％倍，保温脱色温度为50℃，脱色时间为20min；将脱色处理后的溶液进行过滤，并将所得滤液在-0.06mpa的条件下进行减压浓缩至质量恒定为止，经干燥处理后即得积雪草提取物。
50.经hplc分析，积雪草总苷的得率为97.24％，纯度为98.19％。
51.实施例8
52.将质量分数为95％乙醇与乙二醇二甲醚按照体积比为3:0.1进行混合得提取溶液，用该提取溶液浸取积雪草粉末，得到提取液；将提取液中取出每份为1ml的样品，并分别放入不锈钢皿中，进而放入已事先升温至120℃的油浴锅中，使提取液快速升温至120℃，此时在0.1s-10s时间范围内肉眼可见提取液内组分快速挥发，保温2min后移置常温环境中，即可得积雪草浸膏；将所述积雪草浸膏用水稀释后加入由质量比为1:1:1的活性炭、活性白土、活性硅胶混合而成的脱色剂进行保温脱色处理，所述脱色剂的用量为积雪草浸膏质量的0.5％倍，保温脱色温度为50℃，脱色时间为20min；将脱色处理后的溶液进行过滤，并将所得滤液在-0.06mpa的条件下进行减压浓缩至质量恒定为止，经干燥处理后即得积雪草提取物。
53.经hplc分析，积雪草总苷的得率为97.59％，纯度为98.22％。
54.对比例1
55.将质量分数为95％乙醇与乙二醇二甲醚按照体积比为3:0.1进行混合得提取溶液，用该提取溶液对积雪草粉末进行回流提取，并将提取液过滤后浓缩得到浓缩液，将浓缩液经树脂柱进行乙醇洗脱处理，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，得到积雪草浸膏；将所述积雪草浸膏用水稀释后加入由质量比为1:1:1的活性炭、活性白土、活性硅胶混合而成的脱色剂进行保温脱色处理，所述脱色剂的用量为积雪草浸膏质量的0.5％倍，保温脱色温度为50℃，脱色时间为20min；将脱色处理后的溶液进行过滤，并将所得滤液在-0.06mpa的条件下进行减压浓缩至质量恒定为止，经干燥处理后即得积雪草提取物。
56.经hplc分析，积雪草总苷的得率为81.27％，纯度为73.43％。
57.综上，本技术实施例通过将积雪草粉末通过乙二醇二甲醚与乙醇混合溶液进行浸提处理，将所得提取液从常温进行快速升温处理，使得影响积雪草总苷得率的杂质得以快速汽化除去，有利于大幅度提高积雪草总苷得率，进而将所得积雪草浸膏经短时间的保温脱色以及减压浓度处理以进一步提高积雪草总苷的得率以及纯度稳定性。
58.另外，对比例1通过采用单独乙醇回流提取、树脂柱洗脱处理手段进行积雪草提取物的提取，对应积雪草总苷的得率以及纯度均不如实施例，从中说明本技术实施例通过将提取液快速升温至高于乙醇以及乙二醇二甲醚的常规沸点，有利于将影响积雪草总苷得率的杂质得以快速汽化除去，从而大幅度提高积雪草总苷的得率与纯度。
59.另外，经生物安全性测试表明，本技术实施例1-8所制备得到的积雪草提取物的生物刺激性低，安全性优；将其以0.1-0.5wt％的添加用量加入护肤品中，可以起到缓解皮肤瘙痒、消退皮肤敏感反应的作用，进一步改善护肤品的抗衰舒敏护肤效果。
60.将实施例8所得到的积雪草提取物以0.3wt％的添加用量加入某市售护肤品中(该市售护肤品主要成分有水、环五聚二甲基硅氧烷、丁二醇、甘油、丙烯酰二甲基牛磺酸铵、海藻糖、蔗糖、苯氧乙醇、聚二甲基硅氧烷、山梨醇)，得试验品。选择自愿受试者40例(均为敏感肤质，皮肤临床表现为瘙痒不适，肌肤敏感)，随机分为两组，每组20例，每日晚上洁面后，一组在肌肤上和易发部位涂抹上述试验品，另一组涂抹该市售护肤品。一个月后观察并统计疗效，见表1。
61.疗效评判标准：治愈(皮肤临床表现消失，且一个月内无肌肤敏感反应)，有效(皮肤临床表现减轻，肌肤敏感反应减轻)，无效(皮肤临床表现未好转)。
62.表1
[0063] 治愈有效无效试验品1820市售护肤品1073
[0064]
此外，本技术在前期研发过程中，针对该积雪草提取物的提取工艺进行相关实验研究，其中，影响较为显著的实验方案具体见以下示例。
[0065]
(1)除所用真空度变化(-0.05mpa；-0.06mpa；-0.07mpa；-0.08mpa)外，其余组分以及工艺条件均不变，同实施例8，hplc分析结果见表2所示。
[0066]
表2
[0067] 真空度(mpa)积雪草总苷的得率(％)积雪草总苷的纯度(％)实验1-0.0597.4690.98实验2-0.0697.5998.22实验3-0.0797.5195.43实验4-0.0897.5689.29
[0068]
(2)除所用脱色时间变化(10min；20min；30min)外，其余组分以及工艺条件均不变，同实施例8，hplc分析结果见表3所示。
[0069]
表3
[0070] 脱色时间(min)积雪草总苷的得率(％)积雪草总苷的纯度(％)实验11090.4384.75实验22097.5998.22实验33088.1492.36
[0071]
综上，从表1-2可知，真空度对所得积雪草总苷的收率影响不大，但对于积雪草总苷的纯度有一定影响，当真空度高于-0.07mpa时纯度呈降低的趋势；而脱色时间过长过短
都会对所得积雪草总苷的收率与纯度存在直接影响，可能原因在于脱色时间过短，脱色效果不足，以及脱色时间过长，积雪草总苷损耗大，导致得率、纯度呈降低趋势。
[0072]
以上所述仅为本技术的较佳实施例而已，并不用以限制本技术，凡在本技术的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本技术的保护范围之内。