一种具有抑制AGE生成活性的樱花粉的制备方法与流程

一种具有抑制age生成活性的樱花粉的制备方法
技术领域
1.本发明属于植物提取生产技术领域，具体涉及一种具有抑制age生成活性的樱花粉的制备方法。


背景技术：

2.樱花原产北半球温带环喜马拉雅山地区，在世界各地都有生长，花每枝3到5朵，成伞状花序，花瓣先端缺刻，花色多为白色、粉红色。常于3月与叶同放或叶后开花，随季节变化，樱花花色幽香艳丽，常用于园林观赏。樱花可分单瓣和复瓣两类，单瓣类能开花结果，复瓣类多半不结果。
3.据文献资料考证，两千多年前的秦汉时期，樱花已在中国宫苑内栽培。唐朝时樱花已普遍出现在私家庭院。当时万国来朝，日本朝拜者将樱花带回了东瀛，其在日本已有1000多年的历史。樱花象征热烈、纯洁、高尚。被尊为日本国花，每年四、五月间樱花盛开，繁花似锦，游人如织，万家空巷，为日本人民重大节日之一。
4.樱花中的主要活性成分为樱花素、紫云英苷，异槲皮苷、矢车菊素-3-葡萄糖苷，矢车菊素-3-芸香糖甙，樱黄素，染料木黄酮，槲皮素，樱黄素-4'-0-3-吡喃葡糖苷，山柰酚-3-o-阿拉伯呋喃糖苷、山柰酚-3-o-β-木糖苷，染料木苷，山柰酚-3-o-葡萄糖苷等黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎、抗癌、美白等功效，可作为潜在的化妆品功效成分。另外樱花还含有多糖和有机酸，富含天然维生素a、b、e，具有很好的收缩毛孔、强化黏膜、促进糖分代谢和平衡油脂的功效。其中，咖啡酰葡萄糖(1-o-咖啡酰-β-d-吡喃葡萄糖苷)和槲皮素葡萄糖苷(槲皮素-3-o-β-d-吡喃葡萄糖苷)为主要功能成分。
5.2021年8月17日，国家食品安全风险评估中心发布了“新食品原料关山樱花的公开征求意见”，规定其来源为蔷薇科樱属关山樱的花。在此之前，国内陆续出现过以樱花作为普通食品的违法使用，市场上关于樱花的违规使用报道也陆续出现，亦有提案将樱花收录作为新食品原料但始终未通过。因此，目前国内市场上的樱花均以“香精香料”的形式用于各类产品，以普通食品为视角的樱花粉的相关报道不多，对其功效及物质基础的研究更是不足。随着未来关山樱花作为普通食品的使用越来越多，关于樱花的功能性食品开发势必会成为热门，绿色、安全、优质、有效的樱花粉的制备与产业化生产日趋迫切。
6.晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products，ages)是过量的糖和蛋白质结合的产物，能够和身体的组织细胞相组合并破坏它们。研究证明：ages会加速人体的衰老和导致很多慢性退化型疾病的发生，比如糖尿病、阿尔茨海默病、动脉粥样硬化等疾病。抑制ages的生成可以起到抗衰老和预防各种慢性退化性疾病的作用。所以ages的研究成为了全球医学界最为热门的领域之一，有众多的科研机构、大学、医院以及制药公司纷纷加入研究ages的行列。而樱花及其黄酮类化合物具有明显的抑制ages生成活性，但国内的相关功效产品仍处空白。因此制备具有抑制age生成活性的樱花粉具有广阔的应用前景。
7.关于樱花的开发已有报道，但其中绝大部分研究的是其栽培、原料加工方面，关于樱花提取物的提取工艺和功效报道并不多：
8.公开号为cn102883733b的发明专利公开了age生成抑制剂，该抑制剂采用醇提、多孔性合成树脂纯化的方法获得富含黄酮类成分的樱的花和/或叶的提取物，并对其age生成的抑制活性、细胞凋亡的抑制活性、成纤维细胞胶原网格的促进活性、改善皮肤老化活性方面进行了研究阐述。该制备方法所得的黄酮类含量虽高，但运用了有机溶剂乙醇以及多孔性合成树脂，存在安全性风险，在食品领域并不被认可，同时制备过程还会产生大量废液，进一步增加了制备成本。
9.公开号为cn113633589a的发明专利公开了一种樱花滋润护发素用樱花提取物提取工艺，工艺采用清洗、破碎、压榨、醇沉、超滤的方法制备樱花提取物。该方法虽然较为简便，但也使用了有机溶剂乙醇，而且未对产品的功效成分或活性进行创新方面的分析和研究。
10.公开号为cn112206191a的发明专利公开了一种樱花花提取物及其提取方法和应用，该提取方法中，提取剂包括c3～c6小分子多元醇、乙醇和水的组合物；并对该提取物的乌发功效进行了阐述。由于该工艺中引入了多元醇，有助于保持樱花花提取物中有效成分的活性和稳定性，而且c3～c6小分子多元醇本身具有良好的锁水和保湿功能，适用于护发素中，但是，使用了c3～c6小分子多元醇和乙醇，不适宜用于食品的生产。
11.公开号为cn113813203a的发明专利公开了一种樱花酶解发酵物及其制备方法和应用，该制备方法以米曲霉和黑曲霉的酶液对樱花/茉莉花酶解预处理，然后以特定的乳酸菌和酵母菌对其发酵的方式制备樱花提取物，专利中公开了该提取物用于化妆品上的应用，并未有说明其可以用于食用。
12.由于樱花中化学成分类型复杂，因此加工方法多样，除上述方法外，还包括超临界溶剂萃取、分子蒸馏、硅胶柱层析、有机溶剂萃取、离子交换纯化等。这些方法或存在安全性风险，在食品领域并不被认可；或工业成本高，工业化生产不适宜；或产品特征风味丢失、稳定性不佳；或功效成分含量不高、转移率不足；或缺少功效验证。
13.食品樱花粉的产业化生产仍处空白，相关需求日趋迫切，制备具有抑制age生成活性的樱花粉具有广阔的应用前景，另一方面，为适应食品安全标准要求、年轻化消费市场需求以及现代工业化生产需求，需要开发一种更安全、更绿色、更优质、更简便的工业化生产方法，并且使所得产品可用于功能性食品如饮料(包括软饮)、固体饮料、常规片剂、胶囊等。


技术实现要素：

14.针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种具有抑制age生成活性的成本低、风味保持良好、生产过程简便、功效成分得率高的安全绿色樱花粉的制备方法，从而克服目前樱花提取物分离纯化多采用柱层析和萃取法，存在的工业生产成本高、本身风味特征丢失、工业化生产复杂不适、活性成分含量得率较低等诸多问题。
15.为了解决上述技术问题，本发明提供了这样一种具有抑制age生成活性的樱花粉的制备方法，包含如下步骤：
16.s1：清洗，将樱花花瓣清洗干净，获得樱花原料；
17.优选清洗后对花瓣进行粉碎，以便后续提取更加充分，优选采用筛网孔径20mm的中药破碎机进行粉碎。
18.清洗时优选采用中药清洗机。
19.s2：逆流提取，将樱花原料投入连续逆流提取器中进行提取，获得提取液；
20.逆流提取的工艺条件为：投料速度180～220kg/h，注入提取溶剂软化水的流速1.0～1.4m3/h，提取器转轴转动速度10～15r/h，溶剂添加总量为樱花重量的5～10倍，使溶剂充分浸没物料，控制提取温度10～50℃；
21.优选提取温度为38～42℃，提取效果好、得率高，不破坏有效成分的结构；
22.工艺中采用的逆流提取器优选管道式逆流提取器，提取效果最佳，该设备包含药材定量物料输送及控制系统、提取溶媒流量及温度控制系统、药渣分离及隧道式烘干处理系统、提取药液渣液分离系统、提取管段搅拌系统、提取管段加热保温系统、在线清洗(wip)系统、集中电气操作控制等系统，在保持传统高温煎煮、热回流、常低温渗滤等传统提取功能的基础上，实现了连续化全封闭作业、动态逆流提取，提高生产效率，减轻劳动强度，减少溶剂用量，降低生产成本，保证生产过程的安全性，避免了药渣对环境的污染问题。
23.s3：过滤，将提取液依次采用38～180um第一滤袋、1～10μm第二滤袋、100～200nm的过滤膜、2～5wda的第一超滤膜、1～5kda的第二超滤膜进行过滤，形成截留液；
24.其中，第一超滤膜优选4～5wda，活性成分损耗更少；第二超滤膜优选2～4kda，活性成分保留更多；
25.过滤膜优选使用陶瓷膜，并使用陶瓷膜设备；第一滤袋和第二滤袋设置在管道过滤器中进行过滤。
26.s4：浓缩，将截留液用反渗透膜或纳滤膜浓缩，浓缩至相对密度1.04～1.10后，形成浓缩液；
27.优选浓缩至相对密度1.06～1.08，在此范围时，浓缩速度快，效率更高，同时浓缩液更利于后续干燥。
28.s5：灭菌，将浓缩液进行灭菌处理；
29.优选采用uht超高温瞬时灭菌器灭菌，灭菌温度115～135℃，灭菌时间5～50s，灭菌后料液迅速冷却至室温，从而保证活性成分不热解；
30.优选灭菌温度为120～125℃，优选灭菌时间为35s，灭菌效果好，冷却快。
31.s6：冷冻干燥，灭菌后料液经分盘器装入托盘，置于冷冻干燥机中冷冻干燥，获得干膏；
32.其中，冷冻干燥工艺过程为：
33.s61：预冻，在常压下，-55～-30℃保温2～6h；
34.s62：升华干燥，在0～45pa真空下，用30～180min将温度匀速由-55～-30℃升至-25～-15℃，并保温2～7h；再在0～45pa真空下，用30～180min将温度匀速由-25～-15℃升至-15～-5℃，并保温5～12h；
35.s63：解析干燥，在5～50pa真空下，用30～240min将温度匀速由-15～-5℃升至30～55℃，并保温3～9h。
36.s7：过筛，将干膏用摇摆整粒机整粒过筛，收集过筛后颗粒及细粉即为樱花粉；
37.摇摆整粒机中采用180～550μm的筛网，优选采用250μm筛网。
38.优选地，以上各工序所使用的连续逆流提取器、管道过滤器、陶瓷膜设备、超滤膜设备、反渗透膜设备、uht杀菌设备、冷冻干燥机均由密闭管道连接，实行全密闭集约化连续生产，最大程度保证产品的质量和安全。
39.与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
40.(1)将逆流提取和低温膜处理相结合用于樱花的提取，全程低温工艺(低温提取、低温分离纯化、低温浓缩、低温干燥)，对樱花中含有的总黄酮、咖啡酰葡萄糖(1-o-咖啡酰-β-d-吡喃葡萄糖苷)和槲皮素葡萄糖苷(槲皮素-3-o-β-d-吡喃葡萄糖苷)含量进行了充分保留并分离富集，充分提取活性成分，转移率高，制备出的樱花粉活性成分得率高，并采用绿色的膜材料，安全性高，有效富集活性成分，使其总黄酮含量超过15％，转移率超过80％，咖啡酰葡萄糖(1-o-咖啡酰-β-d-吡喃葡萄糖苷)含量超过8％，转移率超过82％，槲皮素葡萄糖苷(槲皮素-3-o-β-d-吡喃葡萄糖苷)含量超过0.6％，转移率超过85％。使得本发明制备的樱花粉具有显著的抑制age生成活性功效，ages生成抑制率达到58％(浓度100μg/ml时)，ic50达到了67μg/ml，活性优于盐酸氨基胍(阳性)及市场同类产品。
41.(2)工艺过程适用于工业生产，生产集约化和自动化程度高，密闭管道专线连续生产，产品安全性高，同时工艺简单，一体化程度高，易于操作，生产成本低。
42.(3)制备出的樱花粉质量符合并远高于国家食品安全标准gb/t29602，产品速溶，水溶液澄清透明，风味保持优异，溶解速度和风味明显优于普通同类产品；并且其水溶液的稳定性高，明显优于同类产品，可用于功能性食品，如用于饮料(包括软饮)、固体饮料、常规片剂、胶囊等多种剂型。
43.(4)采用uht超高温瞬时灭菌，然后迅速冷却，有效控制微生物量的同时降低了活性成分的氧化降解。
44.为了更方便地对专利技术进行全面了解，现将工艺中出现的部分技术用语的解释抄录如下：
45.软化水，是只含有少量的可溶性镁盐和钙盐的天然水，也可以说经软化处理过的硬水，软水：0-60ppm。软化水的适用领域：浴室、厨房、洗衣、暖气、锅炉、中央空调设备供水等广大领域。
46.逆流提取，是指在提取的过程中，物料和溶剂同时连续运动，但运动方向相反。
47.da，全称道尔顿(dalton)，是分子量常用单位，就是将分子中所有原子按个数求原子量的代数和，是用来衡量原子或分子质量的单位，它被定义为碳12原子质量的1/12，蛋白质是大分子，所以常用kda(千道尔顿)来表示。
48.纳滤膜，孔径在1nm以上，一般1-2nm。是允许溶剂分子或某些低分子量溶质或低价离子透过的一种功能性的半透膜。它是一种特殊而又很有前途的分离膜品种，它因能截留物质的大小约为纳米而得名。被用于去除地表水的有机物和色度，脱除地下水的硬度，部分去除溶解性盐，浓缩果汁以及分离药品中的有用物质等。
附图说明
49.为了更清楚的说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术中描述所需要使用的附图作简单地介绍。
50.图1为本发明实施例与对比例制备的樱花粉的ages生成抑制率柱状图。
具体实施方式
51.为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面对本
发明具体实施方式中的技术方案进行清楚、完整的描述，以进一步阐述本发明，显然，所描述的具体实施方式仅仅是本发明的一部分实施方式，而不是全部的样式。
52.实施例1
53.s1：清洗，取樱花花瓣1000kg，置于中药清洗机(设备型号xy-500)中清洗后，将清洗后樱花原料置于中药破碎机进行粗碎，筛网孔径20mm，收集粗碎后原料备用。
54.s2：逆流提取，将粗碎后樱花原料立即投入连续逆流提取器中，控制投料速度为200kg/h，开启注入软化水，控制软化水流速为1.2m3/h，提取器转轴转动速度12r/h，使软化水充分浸没物料且初始投料的原料提取液近无色，软化水总加入量约7000l，期间开启加热器，控制料液温度为40℃，收集获得提取液。
55.s3：过滤，上述提取液先经150μm第一滤袋过滤，滤液经密闭管道流入内置5μm第二滤袋的管道过滤器过滤后，再经内置200nm陶瓷过滤膜的陶瓷膜设备(设备型号km1030-cm-122)过滤，而后再经内置5wda第一超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，最后经内置3kda第二超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，获得截留液。
56.s4：浓缩，将上述截留液，用反渗透膜设备(设备型号km8040-nf-g16)浓缩，浓缩至相对密度1.07，获得浓缩液。
57.s5：灭菌，将上述浓缩液经uht超高温瞬时灭菌器灭菌，灭菌温度125℃，灭菌时间35s，灭菌后料液迅速冷却至室温。
58.s6：冷冻干燥，灭菌后料液经分盘器装入托盘，置于冷冻干燥机中冷冻干燥，获得干膏。冷冻干燥工艺过程为：
[0059][0060]
s7：过筛，取干燥后干膏，至摇摆整粒机中整粒过筛，筛网孔径为250μm，收集过筛后颗粒及细粉，即为樱花粉。
[0061]
上述各过程中，均采用密闭管道专线连续生产，易于操作，产品安全性高。
[0062]
对制备得到的樱花粉进行实验检测，其活性成分中各有效成分含量情况如表1所示，ages生成抑制率对比如表2所示，感官与溶解情况如表3所示：
[0063]
a)平均干粉收率：28.3％；
[0064]
b)平均总黄酮含量：16.8％，有效成分转移率84.3％；
[0065]
c)平均咖啡酰葡萄糖含量：8.1％，有效成分转移率78.2％；
[0066]
d)平均槲皮素葡萄糖苷含量：0.83％，有效成分转移率90.0％；
[0067]
成品色香味纯正，能快速溶于水溶液中，澄清透明且稳定性好。
[0068]
实施例2
[0069]
s1：清洗，取樱花花瓣1000kg，置于中药清洗机(设备型号xy-500)中清洗后，收集
樱花原料备用。
[0070]
s2：逆流提取，将清洗后樱花原料立即投入连续逆流提取器中，控制投料速度为190kg/h，开启注入软化水，控制软化水流速为1.3m3/h，提取器转轴转动速度14r/h，使软化水充分浸没物料且初始投料的原料提取液近无色，软化水总加入量约6000l，期间开启加热器控制料液温度为45℃，收集获得提取液。
[0071]
s3：过滤，上述提取液先经75μm第一滤袋过滤，滤液经密闭管道流入内置1μm第二滤袋的管道过滤器过滤后，再经内置100nm陶瓷过滤膜的陶瓷膜设备(设备型号km1030-cm-122)过滤，而后再经内置3wda第一超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，最后经内置3kda第二超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，获得截留液。
[0072]
s4：浓缩，将上述截留液，用反渗透膜设备(设备型号km8040-nf-g16)浓缩，浓缩至相对密度1.05，获得浓缩液。
[0073]
s5：灭菌，将上述浓缩液经uht超高温瞬时灭菌器灭菌，灭菌温度130℃，灭菌时间20s，灭菌后料液迅速冷却至室温。
[0074]
s6：冷冻干燥，灭菌后料液经分盘器装入托盘，置于冷冻干燥机中冷冻干燥，获得干膏。冷冻干燥工艺过程为：
[0075][0076]
s7：过筛，取干燥后干膏，至摇摆整粒机中整粒过筛，筛网选用孔径为380μm的，收集过筛后颗粒及细粉，即为樱花粉。
[0077]
上述各过程中，均采用密闭管道专线连续生产，易于操作，产品安全性高。
[0078]
对制备得到的樱花粉进行实验检测，其活性成分中各有效成分含量情况如表1所示，ages生成抑制率对比如表2所示，感官与溶解情况如表3所示：
[0079]
a)平均干粉收率：29.6％；
[0080]
b)平均总黄酮含量：16.3％，有效成分转移率85.5％；
[0081]
c)平均咖啡酰葡萄糖含量：7.9％，有效成分转移率79.8％；
[0082]
d)平均槲皮素葡萄糖苷含量：0.80％，有效成分转移率90.7％；
[0083]
成品色香味纯正，能快速溶于水溶液中，澄清透明且稳定性好。
[0084]
实施例3
[0085]
s1：清洗，取樱花花瓣1000kg，置于中药清洗机(设备型号xy-500)中清洗后，收集樱花原料备用。
[0086]
s2：逆流提取，将清洗后樱花原料立即投入连续逆流提取器中，控制投料速度为210kg/h，开启注入软化水，控制软化水流速为1.1m3/h，提取器转轴转动速度11r/h，使软化水充分浸没物料且初始投料的原料提取液近无色，软化水总加入量约9000l，期间开启加热
器控制料液温度为30℃，收集获得提取液。
[0087]
s3：过滤，上述提取液先经48μm第一滤袋过滤，滤液经密闭管道流入内置5μm第二滤袋的管道过滤器过滤后，再经内置200nm陶瓷过滤膜的陶瓷膜设备(设备型号km1030-cm-122)过滤，而后再经内置2wda第一超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，最后经内置2kda第二超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，获得截留液。
[0088]
s4：浓缩，将上述截留液，用反渗透膜设备(设备型号km8040-nf-g16)浓缩，浓缩至相对密度1.09，获得浓缩液。
[0089]
s5：灭菌，将上述浓缩液经uht超高温瞬时灭菌器灭菌，灭菌温度120℃，灭菌时间10s，灭菌后料液迅速冷却至室温。
[0090]
s6：冷冻干燥，灭菌后料液经分盘器装入托盘，置于冷冻干燥机中冷冻干燥，获得干膏；其中，冷冻干燥工艺过程为：
[0091][0092]
s7：过筛，取干燥后干膏，至摇摆整粒机中整粒过筛，筛网选用孔径为325μm，收集过筛后颗粒及细粉，即为樱花粉。
[0093]
上述各过程中，均采用密闭管道专线连续生产，易于操作，产品安全性高。
[0094]
对制备得到的樱花粉进行实验检测，其活性成分中各有效成分含量情况如表1所示，ages生成抑制率对比如表2所示，感官与溶解情况如表3所示：
[0095]
a)平均干粉收率：27.7％；
[0096]
b)平均总黄酮含量：16.7％，有效成分转移率82.0％；
[0097]
c)平均咖啡酰葡萄糖含量：8.2％，有效成分转移率77.5％；
[0098]
d)平均槲皮素葡萄糖苷含量：0.84％，有效成分转移率89.1％；
[0099]
成品色香味纯正，能快速溶于水溶液中，澄清透明且稳定性好。
[0100]
实施例4
[0101]
s1：清洗，取樱花花瓣1000kg，置于中药清洗机(设备型号xy-500)中清洗后，收集樱花原料备用。
[0102]
s2：逆流提取，将清洗后樱花原料立即投入连续逆流提取器中，控制投料速度为220kg/h，开启注入软化水，控制软化水流速为1.0m3/h，提取器转轴转动速度15r/h，使软化水充分浸没物料且初始投料的原料提取液近无色，软化水总加入量约5000l，期间开启加热器控制料液温度为10℃，收集获得提取液。
[0103]
s3：过滤，上述提取液先经180μm第一滤袋过滤，滤液经密闭管道流入内置10μm第二滤袋的管道过滤器过滤后，再经内置200nm陶瓷过滤膜的陶瓷膜设备(设备型号km1030-cm-122)过滤，而后再经内置5wda第一超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，
最后经内置5kda第二超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，获得截留液。
[0104]
s4：浓缩，将上述截留液，用反渗透膜设备(设备型号km8040-nf-g16)浓缩，浓缩至相对密度1.10，获得浓缩液。
[0105]
s5：灭菌，将上述浓缩液经uht超高温瞬时灭菌器灭菌，灭菌温度135℃，灭菌时间50s，灭菌后料液迅速冷却至室温。
[0106]
s6：冷冻干燥，灭菌后料液经分盘器装入托盘，置于冷冻干燥机中冷冻干燥，获得干膏；其中，冷冻干燥工艺过程为：
[0107][0108]
s7：过筛，取干燥后干膏，至摇摆整粒机中整粒过筛，筛网选用孔径为550μm，收集过筛后颗粒及细粉，即为樱花粉。
[0109]
上述各过程中，均采用密闭管道专线连续生产，易于操作，产品安全性高。
[0110]
对制备得到的樱花粉进行实验检测，其活性成分中各有效成分含量情况如表1所示，ages生成抑制率对比如表2所示，感官与溶解情况如表3所示：
[0111]
a)平均干粉收率：25.4％；
[0112]
b)平均总黄酮含量：16.5％，有效成分转移率74.3％；
[0113]
c)平均咖啡酰葡萄糖含量：8.0％，有效成分转移率69.4％；
[0114]
d)平均槲皮素葡萄糖苷含量：0.78％，有效成分转移率75.9％；
[0115]
成品色香味纯正，能快速溶于水溶液中，澄清透明且稳定性好。
[0116]
实施例5
[0117]
s1：清洗，取樱花花瓣1000kg，置于中药清洗机(设备型号xy-500)中清洗后，收集樱花原料备用。
[0118]
s2：逆流提取，将清洗后樱花原料立即投入连续逆流提取器中，控制投料速度为180kg/h，开启注入软化水，控制软化水流速为1.4m3/h，提取器转轴转动速度10r/h，使软化水充分浸没物料且初始投料的原料提取液近无色，软化水总加入量约10000l，期间开启加热器控制料液温度为50℃，收集获得提取液。
[0119]
s3：过滤，上述提取液先经38μm第一滤袋过滤，滤液经密闭管道流入内置1μm第二滤袋的管道过滤器过滤后，再经内置100nm陶瓷过滤膜的陶瓷膜设备(设备型号km1030-cm-122)过滤，而后再经内置2wda第一超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，最后经内置1kda第二超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，获得截留液。
[0120]
s4：浓缩，将上述截留液，用反渗透膜设备(设备型号km8040-nf-g16)浓缩，浓缩至相对密度1.04，获得浓缩液。
[0121]
s5：灭菌，将上述浓缩液经uht超高温瞬时灭菌器灭菌，灭菌温度115℃，灭菌时间
5s，灭菌后料液迅速冷却至室温。
[0122]
s6：冷冻干燥，灭菌后料液经分盘器装入托盘，置于冷冻干燥机中冷冻干燥，获得干膏；
[0123]
其中，冷冻干燥工艺过程为：
[0124][0125]
s7：过筛，取干燥后干膏，至摇摆整粒机中整粒过筛，筛网选用孔径为180μm，收集过筛后颗粒及细粉，即为樱花粉。
[0126]
上述各过程中，均采用密闭管道专线连续生产，易于操作，产品安全性高。
[0127]
对制备得到的樱花粉进行实验检测，其活性成分中各有效成分含量情况如表1所示，ages生成抑制率对比如表2所示，感官与溶解情况如表3所示：
[0128]
a)平均干粉收率：30.3％；
[0129]
b)平均总黄酮含量：16.2％，有效成分转移率87.0％；
[0130]
c)平均咖啡酰葡萄糖含量：7.8％，有效成分转移率80.7％；
[0131]
d)平均槲皮素葡萄糖苷含量：0.81％，有效成分转移率94.0％；
[0132]
成品色香味纯正，能快速溶于水溶液中，澄清透明且稳定性好。
[0133]
对比例1
[0134]
本对比例中采用常规提取罐对樱花瓣进行提取，其它工序的工艺条件保持与实施例1一致，其过程及制备获得的樱花粉性能如下：
[0135]
s1：清洗，取樱花花瓣1000kg，置于中药清洗机(设备型号xy-500)中清洗后，将清洗后樱花原料置于中药破碎机进行粗碎，筛网孔径20mm，收集粗碎后原料备用。
[0136]
s2：提取，将粗碎后樱花原料立即投入多功能提取罐中，加入7000l软化水，开启加热至40℃保温提取6h，收集获得提取液。
[0137]
s3：过滤，上述提取液先经150μm第一滤袋过滤，滤液经密闭管道流入内置5μm第二滤袋的管道过滤器过滤后，再经内置200nm陶瓷过滤膜的陶瓷膜设备(设备型号km1030-cm-122)过滤，而后再经内置5wda第一超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，最后经内置3kda第二超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，获得截留液。
[0138]
s4：浓缩，将上述截留液，用反渗透膜设备(设备型号km8040-nf-g16)浓缩，浓缩至相对密度1.07，获得浓缩液。
[0139]
s5：灭菌，将上述浓缩液经uht超高温瞬时灭菌器灭菌，灭菌温度125℃，灭菌时间35s，灭菌后料液迅速冷却至室温。
[0140]
s6：冷冻干燥，灭菌后料液经分盘器装入托盘，置于冷冻干燥机中冷冻干燥，获得干膏。冷冻干燥工艺过程为：
[0141][0142]
s7：过筛，取干燥后干膏，至摇摆整粒机中整粒过筛，筛网孔径为250μm，收集过筛后颗粒及细粉，即为樱花粉。
[0143]
上述各过程中，均采用密闭管道专线连续生产，易于操作，产品安全性高。
[0144]
对制备得到的樱花粉进行实验检测，其活性成分中各有效成分含量情况如表1所示，ages生成抑制率对比如表2所示，感官与溶解情况如表3所示：
[0145]
a)干粉收率：22.8％，
[0146]
b)总黄酮含量：14.3％，有效成分转移率57.8％；
[0147]
c)咖啡酰葡萄糖含量：7.2％，有效成分转移率56.0％；
[0148]
d)槲皮素葡萄糖苷含量：0.71％，有效成分转移率62.0％；
[0149]
成品色香味纯正，能快速溶于水溶液中，澄清透明且稳定性好。
[0150]
其中，干粉收率、各有效成分转移率明显低于实施例1，分析原因是常规提取罐提取需要的溶剂量和次数较多，本实施例中的樱花原料未能充分提取。
[0151]
对比例2
[0152]
本对比例中不采用第一超滤膜和第二超滤膜过滤，其它工序及其工艺条件保持与实施例1一致，其过程及制备获得的樱花粉性能如下：
[0153]
s1：清洗，取樱花花瓣1000kg，置于中药清洗机(设备型号xy-500)中清洗后，将清洗后樱花原料置于中药破碎机进行粗碎，筛网孔径20mm，收集粗碎后原料备用。
[0154]
s2：逆流提取，将粗碎后樱花原料立即投入连续逆流提取器中，控制投料速度为200kg/h，开启注入软化水，控制软化水流速为1.2m3/h，提取器转轴转动速度12r/h，使软化水充分浸没物料且初始投料的原料提取液近无色，软化水总加入量约7000l，期间开启加热器，控制料液温度为40℃，收集获得提取液。
[0155]
s3：过滤，上述提取液先经150μm第一滤袋过滤，滤液经密闭管道流入内置5μm第二滤袋的管道过滤器过滤后，再经内置200nm陶瓷过滤膜的陶瓷膜设备(设备型号km1030-cm-122)过滤，获得滤液。
[0156]
s4：浓缩，将上述滤液，用反渗透膜设备(设备型号km8040-nf-g16)浓缩，浓缩至相对密度1.07，获得浓缩液。
[0157]
s5：灭菌，将上述浓缩液经uht超高温瞬时灭菌器灭菌，灭菌温度125℃，灭菌时间35s，灭菌后料液迅速冷却至室温。
[0158]
s6：冷冻干燥，灭菌后料液经分盘器装入托盘，置于冷冻干燥机中冷冻干燥，获得干膏。冷冻干燥工艺过程为：
[0159][0160]
s7：过筛，取干燥后干膏，至摇摆整粒机中整粒过筛，筛网孔径为250μm，收集过筛后颗粒及细粉，即为樱花粉。
[0161]
上述各过程中，均采用密闭管道专线连续生产，易于操作，产品安全性高。
[0162]
对制备得到的樱花粉进行实验检测，其活性成分中各有效成分含量情况如表1所示，ages生成抑制率对比如表2所示，感官与溶解情况如表3所示：
[0163]
a)干粉收率：41.5％；
[0164]
b)总黄酮含量：11.3％，有效成分转移率83.1％；
[0165]
c)咖啡酰葡萄糖含量：5.6％，有效成分转移率79.3％；
[0166]
d)槲皮素葡萄糖苷含量：0.58％，有效成分转移率92.2％；
[0167]
成品色香味纯正，能快速溶于水溶液中，澄清透明，但溶液稳定性不佳，有较多沉淀产生；
[0168]
干粉收率明显高于实施例1，原因是本实施例未采用超滤膜进行分离纯化，这也导致了各有效成分含量明显低于实施例1，没有去除提取物中的大分子蛋白、多糖及小分子糖、有机酸等杂质。
[0169]
对比例3
[0170]
本对比例中采用常规外循环浓缩器浓缩，其它工序及其工艺条件保持与实施例1一致，其过程及制备获得的樱花粉性能如下：
[0171]
s1：清洗，取樱花花瓣1000kg，置于中药清洗机(设备型号xy-500)中清洗后，将清洗后樱花原料置于中药破碎机进行粗碎，筛网孔径20mm，收集粗碎后原料备用。
[0172]
s2：逆流提取，将粗碎后樱花原料立即投入连续逆流提取器中，控制投料速度为200kg/h，开启注入软化水，控制软化水流速为1.2m3/h，提取器转轴转动速度12r/h，使软化水充分浸没物料且初始投料的原料提取液近无色，软化水总加入量约7000l，期间开启加热器，控制料液温度为40℃，收集获得提取液。
[0173]
s3：过滤，上述提取液先经150μm第一滤袋过滤，滤液经密闭管道流入内置5μm第二滤袋的管道过滤器过滤后，再经内置200nm陶瓷过滤膜的陶瓷膜设备(设备型号km1030-cm-122)过滤，而后再经内置5wda第一超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，最后经内置3kda第二超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，获得截留液。
[0174]
s4：浓缩，将上述截留液抽入外循环浓缩器中浓缩，真空度控制为-0.08mpa，温度控制为68℃，浓缩至相对密度1.07，获得浓缩液。
[0175]
s5：灭菌，将上述浓缩液经uht超高温瞬时灭菌器灭菌，灭菌温度125℃，灭菌时间35s，灭菌后料液迅速冷却至室温。
[0176]
s6：冷冻干燥，灭菌后料液经分盘器装入托盘，置于冷冻干燥机中冷冻干燥，获得干膏。冷冻干燥工艺过程为：
[0177][0178][0179]
s7：过筛，取干燥后干膏，至摇摆整粒机中整粒过筛，筛网孔径为250μm，收集过筛后颗粒及细粉，即为樱花粉。
[0180]
上述各过程中，均采用密闭管道专线连续生产，易于操作，产品安全性高。
[0181]
对制备得到的樱花粉进行实验检测，其活性成分中各有效成分含量情况如表1所示，ages生成抑制率对比如表2所示，感官与溶解情况如表3所示：
[0182]
a)干粉收率：28.8％；
[0183]
b)总黄酮含量：13.5％，有效成分转移率68.9％；
[0184]
c)咖啡酰葡萄糖含量：6.3％，有效成分转移率61.9％；
[0185]
d)槲皮素葡萄糖苷含量：0.73％，有效成分转移率80.6％；
[0186]
虽能快速溶于水溶液中，澄清透明，但成品已无明显的樱花特征性香味，且溶液稳定性不佳，有少量沉淀产生，原因是本案例采用的是真空减压浓缩，此过程会大量损耗香味成分，同时需要加热致使料液中酚酸类成分部分聚合，形成不稳定的超分子不溶物。
[0187]
对比例4
[0188]
本对比例中采用喷雾干燥进行干燥，其它工序及其工艺条件保持与实施例1一致，其过程及制备获得的樱花粉性能如下：
[0189]
s1：清洗，取樱花花瓣1000kg，置于中药清洗机(设备型号xy-500)中清洗后，将清洗后樱花原料置于中药破碎机进行粗碎，筛网孔径20mm，收集粗碎后原料备用。
[0190]
s2：逆流提取，将粗碎后樱花原料立即投入连续逆流提取器中，控制投料速度为200kg/h，开启注入软化水，控制软化水流速为1.2m3/h，提取器转轴转动速度12r/h，使软化水充分浸没物料且初始投料的原料提取液近无色，软化水总加入量约7000l，期间开启加热器，控制料液温度为40℃，收集获得提取液。
[0191]
s3：过滤，上述提取液先经150μm第一滤袋过滤，滤液经密闭管道流入内置5μm第二滤袋的管道过滤器过滤后，再经内置200nm陶瓷过滤膜的陶瓷膜设备(设备型号km1030-cm-122)过滤，而后再经内置5wda第一超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，最后经内置3kda第二超滤膜的超滤膜设备(设备型号km8040-nf-g6)过滤，获得截留液。
[0192]
s4：浓缩，将上述截留液，用反渗透膜设备(设备型号km8040-nf-g16)浓缩，浓缩至相对密度1.07，获得浓缩液。
[0193]
s5：灭菌，将上述浓缩液经uht超高温瞬时灭菌器灭菌，灭菌温度125℃，灭菌时间
35s，灭菌后料液迅速冷却至室温。
[0194]
s6：干燥，灭菌后料液至喷雾干燥机中干燥，进风温度控制为180℃，出风温度控制为85℃。
[0195]
s7：过筛，取干燥后干膏，至摇摆整粒机中整粒过筛，筛网孔径为250μm，收集过筛后颗粒及细粉，即为樱花粉。
[0196]
上述各过程中，均采用密闭管道专线连续生产，易于操作，产品安全性高。
[0197]
对制备得到的樱花粉进行实验检测，其活性成分中各有效成分含量情况如表1所示，ages生成抑制率对比如表2所示，感官与溶解情况如表3所示：
[0198]
a)干粉收率：27.7％；
[0199]
b)总黄酮含量：14.7％，有效成分转移率72.2％；
[0200]
c)咖啡酰葡萄糖含量：6.7％，有效成分转移率63.3％；
[0201]
d)槲皮素葡萄糖苷含量：0.77％，有效成分转移率81.7％；
[0202]
虽能溶于水溶液中，澄清透明，但成品已无明显的樱花特征性香味，且溶液稳定性不佳，有少量沉淀产生，原因是本案例采用的是喷雾干燥，此过程会损耗香味成分，同时需要加热致使料液中酚酸类成分部分聚合，形成不稳定的超分子不溶物。
[0203]
为了充分说明本发明工艺方法生产出来的樱花粉的性能，特从市场分别购买了槲皮素葡萄糖苷、盐酸氨基胍(阳性)、玫瑰花粉等进行试验测试。
[0204]
ages生成抑制率测试方法为：
[0205]
在含有d-葡萄糖(10％)和牛血清白蛋白(1％)的磷酸缓冲液(ph7.4，900ml)中分别添加3μg/ml、10μg/ml、30μg/ml、100μg/ml、300μg/ml浓度的含有樱花提取物(实施例1～5、对比例1～4)及其含有成分(槲皮素葡萄糖苷)的样品溶液100ml，在60℃静置2天。将液用纯水稀释，从而使其荧光光度为500左右后，测定荧光光度(测定波长：370nm，激发波长：440nm)。
[0206]
并且，提取物用纯水稀释，成分溶解于dmso中后，用磷酸缓冲液进行稀释，从而使最终dmso浓度为1％后进行使用。
[0207]
表1不同工艺条件下樱花粉的含量情况
[0208][0209]
表2不同工艺条件下樱花粉的ages生成抑制率对比(n＝3)
[0210][0211]
注：各数值用3次实验的平均值和标准误差进行表示，与空白(未用药物处理的组别)相比，*：p＜0.05，**：p＜0.01。
[0212]
为了更加直观地对以上数据进行对比，现将如上数据制作成柱状图，如图1所示。
[0213]
表3不同工艺条件下樱花粉的感官与溶解情况
[0214][0215][0216]
由表1～表3及图1可以看出，采用普通提取罐提取(对比例1)、加热浓缩(对比例2)
和喷雾干燥(对比例4)的方法，有效成分含量有所损耗，同时，未使用超滤膜(对比例2)对有效成分进行纯化，功效含量较低，致使ages生成抑制率较低，水溶液的溶解性以及稳定性方面，由于未采用膜处理去掉不稳定的容易聚合的杂质，更是远不及本发明具有抑制age生成活性的樱花粉的制备方法制备出的樱花粉。
[0217]
以上描述了本发明的主要技术特征和基本原理及相关优点，对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性具体实施方式的细节，而且在不背离本发明的构思或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将上述具体实施方式看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
[0218]
此外，应当理解，虽然本说明书按照各实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施方式中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。