一种艾纳香油纳米乳剂在制备抗肿瘤药物及创伤修复药物中的应用

1.本发明属于医药制剂制备技术领域，具体涉及一种艾纳香油纳米乳剂在制备抗肿瘤药物及创伤修复药物中的应用。


背景技术：

2.纳米乳又称微乳，是由水相、油相、表面活性剂以及助表面活性剂按比例所形成的热力学稳定体系，作为平均粒径为10-100nm的乳状液，具有高透明度，常被应用于医药化工领域。
3.艾纳香油具有很好的杀菌消炎作用，但差的水溶性和易挥发性限制其广泛应用，利用纳米药物载体对其进行包裹，在提高药物稳定性的基础之上还能掩盖艾纳香油的强刺激性味道，另外，在皮肤创伤修复过程中(包括止血期、炎症期、增值期和重塑期四个阶段)，炎症期是皮肤创伤修复的必须阶段，结合艾纳香油的杀菌消炎功效，已有将艾纳香油应用至促进皮肤创面修复等方面的研究，如公布号为cn108524570a的专利文件公开了一种具有促进皮肤溃疡创面修复的复方艾纳香生肌凝胶剂及其制备方法，其是由a胶和b胶组成，a胶包括亚硝酸钠和辅料ⅰ，b胶包括艾纳香、抗坏血酸和辅料ⅱ。具体用于治疗糖尿病皮肤溃疡，亦可用于治疗烧伤、创面修复、硬皮病、其他类别的皮肤溃疡等症。公布号为cn110974861a的专利文件公开了一种艾纳香油脂质体，由艾纳香油、卵磷脂、胆固醇和pbs溶液组成，可与药物、日化领域可接受的辅料搭配，进一步制成凝胶剂、软膏剂、眼膏剂、搽剂、气雾剂、溶液剂、溶胶剂、乳剂、混悬剂等产品，具有良好的透皮吸收效果和抗炎、镇痛、皮肤修复活性作用。但目前对于艾纳香的功效研究主要是集中于抗炎、镇痛等方面，对于艾纳香的抗肿瘤活性还只停留于浅层，未见深入研究的详细报道。


技术实现要素：

4.本发明为解决上述问题，提供了一种艾纳香油纳米乳剂在制备抗肿瘤药物及创伤修复药物中的应用。
5.具体是通过以下技术方案来实现的：
6.1、一种艾纳香油纳米乳剂在制备抗肿瘤药物中的应用，所述的肿瘤具体是指人非小细胞肺癌、人恶性胚胎横纹肌瘤细胞和人舌鳞癌细胞。
7.进一步，所述制备抗肿瘤药物为口服制剂，是将艾纳香油纳米乳剂与药学中可接受的辅料相结合，制成所需制剂。
8.2、一种艾纳香油纳米乳剂在制备创伤修复药物中的应用。
9.进一步，所述的一种艾纳香油纳米乳剂在制备创伤修复药物中的应用，其特征在于，所述制备创伤修复药物为外用擦剂，是将艾纳香油纳米乳剂与药学中可接受的辅料相结合，制成所需制剂。
10.3、上述艾纳香油纳米乳剂的制备方法，其特征在于，所述艾纳香油纳米乳剂按质
量百分比计是由艾纳香油1-10％、肉豆蔻酸异丙酯1-5％、表面活性剂1-10％、助表面活性剂1-7％和水组成，总量为100％。
11.进一步，所述的表面活性剂为pco40，助表面活性剂为无水乙醇。
12.进一步，具体的制备方法包括以下步骤：
13.(1)按照配方比例精密称取艾纳香和肉豆蔻酸异丙酯，于室温下磁力搅拌混合均匀得到混合油相；
14.(2)称取无水乙醇，加入步骤(1)得到的混合油相中，以2000r/min的速度搅拌均匀得到混合溶液；
15.(3)按照配方比例取pco40，加入步骤(2)得到的混合溶液中，以2000-2100r/min的转速搅拌2-4min，得到粗乳液；
16.(4)将步骤(3)得到的粗乳液置于超声波粉碎机中选用2mm超声变幅杆，400w功率，在冰水浴中超声乳化1h，即得到艾纳香油纳米乳剂，平均粒径大小为62.8nm,包封率为98％以上。
17.艾纳香油纳米乳剂和空白纳米乳剂的外观性状如图3所示；透射电镜下艾纳香油纳米乳剂的形态特征如图4所示；艾纳香油纳米乳剂的粒径分布如图5所示。
18.一、艾纳香油纳米乳剂配方筛选
19.1.油相的确定
20.通过观察艾纳香油在ipm、橄榄油、玉米油的溶解性，筛选出适合本次纳米乳体系的最佳油相。详细结果如表1所示。
21.表1
[0022][0023]
故选择ipm作为艾纳香油的混合油相。
[0024]
2、助表面活性剂的确定
[0025]
艾纳香油不溶于水，易溶于无水乙醇、氯仿、乙醚，室温下确定艾纳香油与有机溶剂的溶解度。从绿色环保角度出发，以无水乙醇作为表面活性剂。
[0026]
3、表面活性剂的确定
[0027]
表面活性剂在纳米乳剂的制备过程中发挥关键的作用，分别选择毒性较小的非离子表面活性剂tw80、tw20、pco40、el40作为备选的表面活性剂，无水乙醇作为助表面活性剂，ipm作为艾纳香油混合油相制备纳米乳剂，并在4℃低温以及45℃高温各放置24h，比较温度循环前后纳米粒经大小(n＝3)来考察纳米乳剂的稳定性。各组分组成以质量百分比进行记录。实验详细结果如表2所示。
[0028]
表2
[0029][0030]
数据显示，使用表面活性剂tw20、tw80、el40制备得到的纳米乳剂经过温循环，前后平均粒径大小变化很大，稳定性差，然而使用表面活性剂pco40制备的纳米乳剂温循环前后平均粒径大小波动不大，故选择pco40作为最佳表面活性剂。
[0031]
4、km值(表面活性剂与助表面活性剂的质量比)的确定
[0032]
以pco40作为表面活性剂，无水乙醇作为助表面活性剂、ipm作为混合油相，在室温条件下，将表面活性剂和助表面活性剂按3：1、2：1、1：1的比例混匀，然后将混合的表面活性剂与确定的油相ipm分别按质量比1：1、1：2、3：5、5：3、7：2、8：11的比例混合，逐渐滴加蒸馏水并不断搅拌，直至形成澄清透明的纳米乳液，记录体系发生临界变化时的加水量，计算体系中各组分的质量分数，分别以表面活性剂/助表面活性剂、油相、水相作为三个顶点，利用origin软件绘制伪三元相图如图1所示，其中阴影部分面积代表乳化率。
[0033]
由图可以发现，当表面活性剂与助表面活性剂的质量比为2：1时，纳米乳剂的乳化率最高，故将km值确定为2。
[0034]
5、表面活性剂用量的考察
[0035]
表面活性剂的用量会影响纳米乳剂粒径大小，以pco40作为表面活性剂，固定km值为2，考察表面活性剂的用量对艾纳香油纳米乳剂的影响，实验结果如表3所示。各组分组成以质量百分比进行记录。
[0036]
表3
[0037][0038]
由表3结果可知，随着表面活性剂用量的增加，艾纳香油纳米乳剂粒径大小随之增大，当表面活性剂的量占2.5％和5％时，所制备得到的艾纳香油纳米乳剂呈现乳白色外观，但当表面活性剂用量分别增加到7.5％和10％时，所制备得到的艾纳香油纳米乳剂表现出更高的透明度，稳定性更好，从节约成本的角度考虑，表面活性剂的用量以7.5％作为标准。
[0039]
6、油负载量对纳米乳剂粒径大小的影响
[0040]
固定表面活性剂pco40的用量为7.5％，km值为2，油用量分别以3％、5％、10％、15％、20％展开艾纳香油纳米乳剂的制备实验，数据结果如表4所示。
[0041]
表4
[0042][0043][0044]
当油用量为3％、5％时，所制备得到的纳米乳剂稳定性较差，分别呈现微乳黄色、乳黄色外观，当油用量为10％、15％、20％时，艾纳香油纳米乳剂均呈现澄清、透明的外观，但当油用量达到15％和20％时，纳米乳剂的粘稠度过高，综合节约实验成本、纳米乳剂最大载药量以及纳米乳剂最佳外观性状三个方面，油用量以10％作为后续纳米乳剂制备的标准。
[0045]
7、混合油比例的确定
[0046]
以pco40作为表面活性剂，无水乙醇作为助表面活性剂、ipm作为油相，固定km值为2:1,艾纳香油：ipm分别以10：0、9：1、8：2、7：3、6：4、5：5展开制备实验，并考察其稳定性，结果如表5所示。
[0047]
表5
[0048][0049]
由上表可知，当艾纳香油：ipm比例为9：1和8：2时，所制备得到的纳米乳剂稳定性最好，考虑到最大的载药量，在制备纳米乳及过程中，以艾纳香油：ipm＝9：1作为标准。
[0050]
艾纳香油和ipm的比例会影响纳米乳剂的粒径大小及稳定性，稳定性评估主要是将纳米乳剂放置4℃冰箱和45℃烘箱各24h,对比温度循环前后纳米乳剂粒径变化大小和外观变化情况，配方筛选过程如图2所示。艾纳香油：ipm＝9：1时，艾纳香油纳米乳剂稳定性最好。
[0051]
经配方筛选，纳米乳剂的原料组分由艾纳香油、ipm、表面活性剂、助表面活性剂和水组成，各组分组成以质量百分比记为：艾纳香油9％，ipm 1％,表面活性剂pco40 7.5％，助表面活性剂无水乙醇3.75％，余量为水，总量为100％。采用超声乳化法制备得到纳米乳剂。
[0052]
综上所述，本发明的有益效果在于：本发明通过对艾纳香油纳米乳剂的配方进行筛选，并对其抗肿瘤和创伤修复作用效果进行研究，对普遍认为具有抗炎杀菌功效的艾纳
香油还具有很好的抗肿瘤作用这一观点进行了证实，并且发现艾纳香油纳米乳剂的抗肿瘤作用略高于普通的艾纳香油。结合艾纳香油纳米乳剂制作成本低、操作过程简易及创口愈合和抗肿瘤作用。使得艾纳香油纳米乳剂具有较好的发展前景。
[0053]
艾纳香油作为纳米乳剂的主药，奥斯瓦尔德熟化(或奥氏熟化)是一种可在固溶体或液溶胶中观察到的现象，它描述了一种非均匀结构随时间流逝所发生的变化，溶质中的较小型的结晶或溶胶颗粒溶解并再次沉积到较大型的结晶或溶胶颗粒上。最终导致乳滴在储存过程中形成大液滴甚至发生相分离。一般通过向精油中掺入熟化抑制剂来延缓液滴生长，从而提高艾纳香油纳米乳剂的储存稳定性。本技术采用肉豆蔻酸异丙酯(ipm)作为奥斯瓦尔德拮抗剂，得到的纳米乳剂稳定性好，具有透明的外观性状，另外，基于此配方所制备得到艾纳香油纳米乳剂具有很好的皮肤创口愈合功效以及抗肿瘤作用，本发明制作成本低，操作简单，可提高药物稳定性以及拓宽了艾纳香油的应用范围，实用性很强。符合目前市场需要。所制得的艾纳香纳米乳剂平均粒径大小为62.8nm,包封率为98％以上。
附图说明
[0054]
图1为km值筛选的伪三元相图。
[0055]
图2为艾纳香油和ipm比例的筛选。
[0056]
图3为艾纳香油纳米乳剂和空白纳米乳剂的外观性状。
[0057]
图4为透射电镜下艾纳香油纳米乳剂的形态特征。
[0058]
图5为艾纳香油纳米乳剂的粒径分布。
[0059]
图6为艾纳香油纳米乳剂的皮肤创伤修复效果图(图中标尺表示50mm)。
[0060]
图7为艾纳香油纳米乳剂的皮肤创伤修复率和小鼠体重变化情况。
[0061]
图8为艾纳香油对肿瘤细胞(tca、rd、a549)的毒性作用。
[0062]
图9为艾纳香油和艾纳香油纳米乳剂对a549肿瘤细胞的毒性作用比较。
[0063]
图10为pco40和etoh对a549肿瘤细胞的毒性作用。
[0064]
图11为艾纳香油及艾纳香油纳米乳剂对皮肤创伤修复对比效果图(图中标尺表示50mm)。
[0065]
图12为艾纳香油的皮肤创伤修复率和小鼠体重变化情况。
[0066]
图13为艾纳香油及艾纳香油纳米乳剂的累积透过量对比图。
[0067]
图14为艾纳香油及艾纳香油纳米乳剂的累积透过率对比图。
具体实施方式
[0068]
下面对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明，但本发明并不局限于这些实施方式，任何在本实施例基本精神上的改进或代替，仍属于本发明权利要求所要求保护的范围。
[0069]
实施例1
[0070]
取艾纳香油2g,ipm 0g均匀混合得到混合油相，向混合油相中加入0.75g无水乙醇充分溶解，接着再加入1.5g pco40,用磁力搅拌器混合直至pco40完全分散，取15.75g蒸馏水用胶头滴管边滴加边搅拌，得到艾纳香油粗纳米乳剂后，利用超声波细胞粉碎机超声1h,得到艾纳香油纳米乳剂
①
。温度循环前后纳米乳剂平均粒径大小分别为61.1nm和103.9nm。
[0071]
实施例2
[0072]
取艾纳香油1.8g,ipm 0.2g均匀混合得到混合油相，向混合油相中加入0.75g无水乙醇充分溶解，接着再加入1.5g pco40,用磁力搅拌器混合直至pco40完全分散，取15.75g蒸馏水用胶头滴管边滴加边搅拌，得到艾纳香油粗纳米乳剂后，利用超声波细胞粉碎机超声1h,得到艾纳香油纳米乳剂
②
。温度循环前后纳米乳剂平均粒径大小分别为62.8nm和62.2nm。
[0073]
实施例3
[0074]
取艾纳香油1.6g,ipm 0.4g均匀混合得到混合油相，向混合油相中加入0.75g无水乙醇充分溶解，接着再加入1.5g pco40,用磁力搅拌器混合直至pco40完全分散，取15.75g蒸馏水用胶头滴管边滴加边搅拌，得到艾纳香油粗纳米乳剂后，利用超声波细胞粉碎机超声1h,得到艾纳香油纳米乳剂
③
。温度循环前后纳米乳剂平均粒径大小分别为87.2nm和83.4nm。
[0075]
实施例4
[0076]
取艾纳香油1.4g,ipm 0.6g均匀混合得到混合油相，向混合油相中加入0.75g无水乙醇充分溶解，接着再加入1.5g pco40,用磁力搅拌器混合直至pco40完全分散，取15.75g蒸馏水用胶头滴管边滴加边搅拌，得到艾纳香油粗纳米乳剂后，利用超声波细胞粉碎机超声1h,得到艾纳香油纳米乳剂
④
。温度循环前后纳米乳剂平均粒径大小分别为116.6nm和88.4nm。
[0077]
实施例5
[0078]
取艾纳香油1.2g,ipm 0.8g均匀混合得到混合油相，向混合油相中加入0.75g无水乙醇充分溶解，接着再加入1.5g pco40,用磁力搅拌器混合直至pco40完全分散，取15.75g蒸馏水用胶头滴管边滴加边搅拌，得到艾纳香油粗纳米乳剂后，利用超声波细胞粉碎机超声1h,得到艾纳香油纳米乳剂
⑤
。温度循环前后纳米乳剂平均粒径大小分别为135.4nm和100.1nm。
[0079]
实施例6
[0080]
取艾纳香油1g,ipm 1g均匀混合得到混合油相，向混合油相中加入0.75g无水乙醇充分溶解，接着再加入1.5g pco40,用磁力搅拌器混合直至pco40完全分散，取15.75g蒸馏水用胶头滴管边滴加边搅拌，得到艾纳香油粗纳米乳剂后，利用超声波细胞粉碎机超声1h,得到艾纳香油纳米乳剂
⑥
。温度循环前后纳米乳剂平均粒径大小分别为197.8nm和197.1nm。
[0081]
通过比较，发现艾纳香油纳米乳剂
②
和艾纳香油纳米乳剂
⑥
具有较高的稳定性，其中艾纳香油纳米乳剂
②
具有更大的载药量，故选择艾纳香油纳米乳剂
②
作为最终配方并用其开展动物实验
[0082]
一、皮肤创伤修复评价实验
[0083]
创伤修复是一个复杂而有序的过程,每一阶段均受机体精细的调节。创伤修复一般分为4个阶段：
①
止血阶段；
②
炎症反应阶段；
③
细胞增殖分化阶段；
④
组织重建、瘢痕形成阶段。它是组织在损伤发生后多种生长因子、细胞外基质和修复细胞之间相互作用而进行自我修复的复杂动态过程。本实验利用发明得到的艾纳香油纳米乳剂，对比阳性组莫匹罗星和空白组的皮肤创口愈合效果。
[0084]
1实验方法
[0085]
1.1.动物分组
[0086]
km小鼠，雌雄各半，随机分组，每组8只，分组情况为：空白组(不给任何处理)、阳性组(莫匹罗星软膏)、艾纳香油纳米药物组。
[0087]
1.2实验方法
[0088]
用脱毛器去小鼠背部毛发，温水清洗擦干，用1％水合氯醛按0.007ml/g麻醉。而后用5％碘酒和75％酒精局部消毒，于小鼠后背脊柱两侧对称位置10mm处剪开直径为10mm的圆形伤口，不伤及筋膜及脂肪组织。肌层伤口厚度约3mm，用生理盐水冲洗伤口、消毒。开放创面，充分止血，待清醒后单笼饲养观察24h，期间自由饮水与进食。以伤口无淤血、肿胀、化脓，小鼠取食正常、活动能力好为判断标准，并将其作为实验对象入组实验。各组每日用碘酒和生理盐水消毒，每日换药一次(空白组不做任何处理，阳性药物组和艾纳香油纳米乳剂药物组均给药100mg),并分别在伤口处理的第1天、第3天、第5天、第7天拍照记录观察伤口愈合情况，并计算伤口愈合率和体重变化。实验结果见图6。可以发现与空白组相比，阳性组和艾纳香油纳米乳剂药物组创口愈合远高于空白组。在伤口处理后第7天，艾纳香油纳米乳剂药物组的创口愈合高于阳性药物组。
[0089]
愈合率＝(原始创面面积-未愈合创面面积)/原始创面面积
ⅹ
100％
[0090]
艾纳香油纳米乳剂的皮肤创伤修复率和小鼠体重变化情况如图7所示。
[0091]
二、急性皮肤毒性实验
[0092]
2实验方法
[0093]
2.1实验动物
[0094]
km小鼠雌雄各半，体重18-22g，分为a、b两组，每组4只，样品分别为蒸馏水(对照)和艾纳香油纳米乳剂，各设完整皮肤组和破损皮肤组。
[0095]
2.2实验方法
[0096]
用电推剪背部脱毛，面积约2cm
×
2cm，并于实验前检查皮肤有无损伤，受伤的皮肤不用于后续实验。实验时取受试物100mg均匀涂布于脱毛区，其中a组涂布蒸馏水作为对照，b组涂布艾纳香油纳米乳剂。涂抹24h后，用温水洗去涂抹的药物，之后逐日观察至第7日，观察内容包括受试动物的皮肤、毛发、眼睛和粘膜的变化及呼吸、中枢神经系统、四肢活动等全身中毒表现和死亡情况。
[0097]
另取8只小鼠，同上面方法脱毛分组后，用细砂纸在脱毛部位造成擦伤，使皮肤出现密集出血点，立即在擦伤部位同上述方式涂布受试物给药，观察指标同上。
[0098]
2.3实验结果
[0099]
如表6所示，km小鼠分别实施蒸馏水和艾纳香油纳米乳剂样品，均未见全身中毒和死亡情况，动物体重增加，对呼吸循环、中枢神经系统、四肢活动等无影响。表明艾纳香纳米乳剂对正常皮肤和破损皮肤都无刺激性。
[0100]
表6
[0101][0102]
综上，可知本发明提供的艾纳香油纳米乳剂稳定性好，并具有明显的皮肤创伤修复作用，且对皮肤、粘膜无毒性作用。
[0103]
三、细胞毒性实验
[0104]
3实验方法
[0105]
3.1实验细胞株
[0106]
a549(人非小细胞肺癌)、rd(人恶性胚胎横纹肌瘤细胞)、tca(人舌鳞癌细胞)
[0107]
3.2实验方法
[0108]
采用mtt法对艾纳香油纳米乳剂进行抗癌活性筛选。测试肿瘤细胞为rd、tca、a549。在96孔板中配制100μl的细胞悬液，将培养板在温度37℃、5％co2条件下培养24h；接着向培养板中加入10μl不同浓度纳米乳剂后，将培养板放在培养箱中孵育48h；接着向每个孔中加入20μl mtt溶剂，培养板放在培养箱中孵育1-4h；最后用酶标仪测定在490nm处吸光度，计算细胞抑制率。
[0109]
3.4实验结果
[0110]
艾纳香油对rd、tca、a549三株肿瘤细胞均表现出很好的抑制作用(浓度梯度分别为300μg/ml、250μg/ml、200μg/ml、150μg/ml、100μg/ml)，艾纳香油纳米乳剂的浓度梯度为(196μg/ml、157μg/ml、141μg/ml、125μg/ml、110μg/ml)，详细数据结果见图8，发现艾纳香油纳米乳剂对肿瘤细胞也表现出明显的抑制作用，为比较普通艾纳香油和艾纳香油纳米乳剂的细胞毒性作用，设置相同的药物浓度梯度(分别为196μg/ml、188μg/ml、180μg/ml、172μg/ml、164μg/ml)，以a549作为典型的肿瘤细胞，数据显示艾纳香油纳米乳剂的抗肿瘤活性略高于普通的艾纳香油，另外，设置pco4和etoh两个溶剂组(浓度梯度与前边保持一致)来排除溶剂成分对肿瘤细胞生长的影响，结果发现制备艾纳香油纳米乳剂过程中，所用到的pco4和etoh两个溶剂对肿瘤细胞的生长不构成影响，详细结果如图9、图10所示。
[0111]
四、艾纳香油及艾纳香油纳米乳剂对皮肤创伤修复对比实验
[0112]
4.1动物分组
[0113]
km小鼠，雌雄各半，随机分组，每组8只，分组情况为：空白组(不给任何处理)、阳性组(莫匹罗星软膏)、艾纳香油纳米药物组和艾纳香油药物组。
[0114]
4.2实验方法
[0115]
用脱毛器去小鼠背部毛发，温水清洗擦干，用1％水合氯醛按0.007ml/g麻醉。而后用5％碘酒和75％酒精局部消毒，于小鼠后背脊柱两侧对称位置10mm处剪开直径为10mm的圆形伤口，不伤及筋膜及脂肪组织。肌层伤口厚度约3mm，用生理盐水冲洗伤口、消毒。开放创面，充分止血，待清醒后单笼饲养观察24h，期间自由饮水与进食。以伤口无淤血、肿胀、化脓，小鼠取食正常、活动能力好为判断标准，并将其作为实验对象入组实验。各组每日用碘
酒和生理盐水消毒，每日换药一次(空白组不做任何处理，阳性药物组、艾纳香油和艾纳香油纳米乳剂药物组均给药100mg),并分别在伤口处理的第1天、第3天、第5天、第7天拍照记录观察伤口愈合情况，并计算伤口愈合率和体重变化。
[0116]
在本实验中使用的艾纳香油是本实验室采用艾纳香(购买于贵州罗甸)以水蒸气蒸馏法提取得到。
[0117]
实验结果如图11所示。可以发现与空白组相比，艾纳香油和艾纳香油纳米乳剂药物组创口愈合远高于空白组。且艾纳香油纳米乳剂的创口愈合率高于普通的艾纳香油。
[0118]
愈合率＝(原始创面面积-未愈合创面面积)/原始创面面积
ⅹ
100％
[0119]
皮肤创伤修复率(a)和小鼠体重变化情况(b)如图12所示。
[0120]
五、透皮吸收实验
[0121]
5.1实验方法
[0122]
获取小鼠离体皮肤，构建皮肤扩散池，内径为1.8cm,接收池为100ml,扩散池由上到下依次为供给池、小鼠皮肤、接收池。其中艾纳香油的加入量为0.2g，艾纳香油纳米乳剂的加入量为2ml,在37℃条件下，分别在第2、4、6、8、10、12、24h取出各组1ml接收液(ph＝5.8pbs缓冲溶液)，同时补加等体积新的接收液。使用gc法测定l-龙脑的含量，计算累积透过量(qn，ug/cm2)和累积透过率。实验结果如图13、图14所示。
[0123]
在本实验中使用的艾纳香油是本实验室采用艾纳香(购买于贵州罗甸)以水蒸气蒸馏法提取得到。
[0124][0125]
累积透过率＝qn/q
总
[0126]
其中ve代表取样体积，ci代表第i次取样时的药物浓度，v0为释放媒介的总体积，cn为第n次取样的药物浓度，a代表接收池面积。
[0127]
累积透过率(％)＝qn/(m总/a)
[0128]
其中qn代表累积透过量，m总代表原始总药量，a代表接收池面积。
[0129]
5.2实验结果
[0130]
艾纳香油纳米乳剂的透皮效果明显高于普通的艾纳香油，在给药后的24h之内，艾纳香油纳米乳剂平均最大累积透过率约为22％，而艾纳香油仅约为3.35％。这样的结果或许与艾纳香油纳米乳剂皮肤创口愈合效果高于普通艾纳香油有关。