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一种重组载体质粒、水杨酸生物传感器及构建方法和应用

2022-07-30 19:07:43 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种水杨酸生物传感器的重组载体质粒,其特征在于,包括改造的nahr蛋白的编码基因、pr启动子、报告标记蛋白的编码基因、改造的psal启动子及质粒骨架;所述pr启动子和所述改造的psal启动子方向相反;所述改造的nahr蛋白的氨基酸序列如seq id no.6所示;所述改造的psal启动子的核苷酸序列如seq id no.5所示。2.根据权利要求1所述一种水杨酸生物传感器的重组载体质粒,其特征在于,所述所述pr启动子和所述改造的psal启动子的-35区核苷酸序列重叠。3.根据权利要求1所述一种水杨酸生物传感器的重组载体质粒,其特征在于,所述报告标记蛋白为绿色荧光蛋白egfp,其氨基酸序列如seq id no.4所示。4.根据权利要求1所述一种水杨酸生物传感器的重组载体质粒,其特征在于,所述质粒骨架为大肠杆菌高拷贝载体puc57。5.一种水杨酸生物传感器,其特征在于,包括宿主细胞及位于所述宿主细胞内的如权利要求1~4任意一项所述的重组载体质粒;所述宿主细胞为大肠杆菌。6.根据权利要求5所述一种水杨酸生物传感器,其特征在于,所述大肠杆菌为e.coli dh5α。7.一种如权利要求5或6所述的水杨酸生物传感器的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:先构建含有野生型nahr蛋白的编码基因及野生型psal启动子的载体,再分别对所述野生型nahr蛋白的编码基因及所述野生型psal启动子进行改造,得到含有所述改造的nahr蛋白的编码基因和所述改造的psal启动子的重组质粒载体;最后将所述重组质粒载体转入宿主细胞,得到所述水杨酸生物传感器。8.根据权利要求7所述一种水杨酸生物传感器的构建方法,其特征在于,所述野生型psal启动子的核苷酸序列如seq id no.3所示,所述野生型nahr蛋白的氨基酸序列如seq id no.1。9.如权利要求5或6所述的水杨酸生物传感器在检测水杨酸中的应用。10.一种水杨酸的检测方法,其特征在于,采用如权利要求5或6所述的水杨酸生物传感器进行检测。

技术总结
本发明涉及基因工程技术领域,具体而言,涉及一种重组载体质粒、水杨酸生物传感器及构建方法和应用。该载体质粒包括改造的NahR蛋白的编码基因、Pr启动子、报告标记蛋白的编码基因、改造的Psal启动子及质粒骨架;Pr启动子和改造的Psal启动子方向相反;改造的NahR蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.6所示;改造的Psal启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示。改造的Psal启动子与野生型相比,具有更强的感应效果。改造的NahR蛋白进一步提高生物传感器对水杨酸的响应灵敏度。该生物传感器,对水杨酸的相应灵敏度更高,降低了对水杨酸的检出限。降低了对水杨酸的检出限。降低了对水杨酸的检出限。


技术研发人员:张桂敏 魏沁 贺妮莎 杨沫 卢争辉
受保护的技术使用者:湖北大学
技术研发日:2022.04.12
技术公布日:2022/7/29
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