官能化杂环化合物作为干扰素基因刺激物(sting)的调节剂
发明领域
1.本发明涉及可用作sting(干扰素基因刺激物)的调节剂的化合物-连接基构建体和缀合物(conjugates)形式的官能化式(i)化合物。本发明还涉及用作药物的式(i)的官能化化合物和包含所述化合物的药物组合物。
背景技术：
2.细胞先天免疫系统对于识别病原体感染和建立有效的宿主防御至关重要。衔接蛋白sting(干扰素基因刺激物)，也称为tmem 173、mpys、mita和eris，已被确定为在先天免疫反应中对细胞溶质核酸的中心信号分子(h.ishikawa,g.n.barber,nature,2008年，第455卷，第674-678页)。当细胞被病毒、分枝杆菌和细胞内寄生虫等细胞内病原体感染时，sting尤其会诱导i型干扰素(ifn)的产生。
3.sting的激活促进irf3和nfkb依赖性信号传导，从而导致促炎细胞因子和干扰素的产生，包括在癌症免疫治疗中特别重要的i型和iii型干扰素和tnfα。sting负责检测皆来自病原体或宿主的细胞质核酸及其衍生物(称为环状二核苷酸(cdn))(例如来自细菌或病毒的双链dna和细胞质自身dna)。
4.内源性sting直接激动剂2’,3
’‑
cgamp(2’,3
’‑
环状鸟苷一磷酸-腺苷一磷酸)在哺乳动物细胞中通过酶cgas(环状gmp-amp合酶，mb21d1或c6orfl50)产生(p.gao等人,cell,2013,153,第1094-1107页,wu等人,science,2013,339,第786-791页)并已证明其及其衍生物在调节sting依赖性途径方面具有活性(l.corrales等人,j immunother cancer,2013,1(suppl 1)：o15、l.corrales等人,cell rep.,2015,may 19；11(7),第1018-30页、s-r.woo等人,trends immunol.,2015,36(4),250、j.fu等人,sci.trans.med.,第7卷,第283期,第283ra52页)。
5.最近的证据支持发现，一旦sting在肿瘤微环境中被cdn激活，优选在肿瘤驻留树突状细胞中，sting会促进i型ifn和tnfα释放，从而导致免疫介导的抗肿瘤反应。抗原呈递细胞(apc)的sting依赖性激活有效地驱动针对新抗原的高度特异性t细胞启动(l.corrales和tf.gajewski,clin cancer res,2015,21(21),第4774-9页)。sting激活不仅提供了直接根除肿瘤的肿瘤特异性杀伤性t细胞的生成，而且还产生了疫苗样的长效免疫，防止癌症复发。
6.因此，合成的sting激动剂作为潜在的抗癌剂具有特殊的意义。激活或抑制i型干扰素的产生是治疗或预防人类疾病包括病毒感染和自身免疫性疾病的重要策略。已发现激活或抑制i型干扰素产生的化合物不仅可用于传染病先天免疫，还可用于癌症(l.zitvogel等人，nature reviews immunology,2015,第15(7)卷,第405-414页)、过敏性疾病(j.moisan等人，am.j.physiol.lung cell mol.physiol.,2006,第290卷,l987-995)、神经退行性疾病如肌萎缩性脊髓侧索硬化症和多发性硬化症(h.lemos等人,j.immunol,2014,第192(12)卷,第5571-8页；e.cirulli等人,science,2015,第347(6229)卷,1436-41；a.freischmidt等人,nat.neurosci.,第18(5)卷,631-6)，其他炎性病症，例如肠易激病
(s.rakoff-nahoum,cell,2004,23,118(2),第229-41页)，以及作为疫苗佐剂(persing等人,trends microbiol.2002,10(10suppl),s32-7；dubensky等人,therapeutic advances in vac-cines,在线发表2013年9月5日)。
7.sting对于抗微生物宿主防御至关重要，包括保护抗一系列dna和rna病毒和细菌(barber等人，nat.rev.immunol.,2015,vol.15(2),pp.87-103,ma and damania,cell host&microbe,2016,vol.19(2),pp.150-158中综述)。疱疹病毒科，黄病毒科，冠状病毒科，乳头瘤病毒科，腺病毒科，噬肝dna病毒科，邻-和副粘病毒科和弹状病毒科已经进化出机制来抑制sting介导的i型干扰素的产生和逃避宿主的免疫控制(holm等人，nat comm.,2016,vol.7,p.10680；ma等人，pnas2015,vol.112(31)e4306-e4315；wu等人，cell host microbe,2015,vol.18(3),pp.333-44；liu等人，j virol,2016,vol.90(20),pp.9406-19；chen等人，protein cell 2014,vol.5(5),pp.369-81；lau等人，science,2013,vol.350(6260),pp.568-71；ding等人，j hepatol,2013,vol.59(1),pp.52-8；nitta等人，hepatology,2013,vol.57(1),pp.46-58；sun等人，plos one,2012,vol.7(2),e30802；aguirre等人，plos pathog,2012,vol.8(10),el002934；ishikawa等人，nature,2009,vol.461(7265),pp.788-92)。因此，sting的药物活化被认为有益于治疗这些传染病。
8.相反，增加和延长的i型ifn产生与各种慢性感染相关，包括分枝杆菌(collins等人，cell host microbe,2015,vol.17(6),pp.820-8)；wassermann等人，cell host microbe,2015,vol.17(6),pp.799-810；watson等人，cell host microbe,2015,vol.17(6),pp.811-9)、弗朗西斯氏菌(storek等人，jimmunol.,2015,vol.194(7),pp.3236-45；jin等人，j immunol.,2011,vol.187(5),pp.2595-601)、衣原体(prantner等人，j immunol,2010,vol.184(5),pp.2551-60)、疟原虫(sharma等人，immunity,2011,vol.35(2),pp.194-207)和hiv(herzner等人，nat immunol,2015,vol.16(10),pp.1025-33；gao等人，science,2013,vol.341(6148),pp.903-6)。类似地，在具有复杂形式的自身免疫性疾病的患者中发现过量的i型干扰素产生。人类中的遗传学证据和来自动物模型研究的支持证明了抑制sting导致驱动自身免疫性疾病的i型干扰素减少的假设(y.j.crow等人，nat.genet.,2006,vol.38(8),pp.38917-920,d.b.stetson等人，cell,2008,pp.134587-598)。因此，sting抑制剂为患有慢性i型干扰素和与感染或复杂自身免疫疾病相关的促炎性细胞因子生成的患者提供治疗。过敏性疾病与基于th2的对过敏原的免疫反应有关。th2应答与ige水平升高有关，ige通过其对肥大细胞的作用促进对过敏原的超敏反应，导致例如过敏性鼻炎和哮喘中出现的症状。在健康个体中，对过敏原的免疫应答与混合的th2/th1和调节性t细胞应答更加平衡。已显示，1型干扰素的诱导导致局部环境中th2型细胞因子的减少并促进th1/treg应答。在这种情况下，通过例如sting的激活诱导1型干扰素可以有益于治疗过敏性疾病，例如哮喘和过敏性鼻炎(j.p.huber等人，jimmunol,2010,vol.185,pp.813-817)。
9.小分子化合物与连接基的共价连接并任选另外与靶向部分的共价连接可以从宿主免疫系统(降低免疫原性和抗原性)中掩蔽化合物，并增加其流体动力学尺寸(溶液中的尺寸)，从而通过降低肾清除率延长其循环时间。此外，化合物的水溶性可以通过使用具有亲水基团的合适的连接基而受到积极影响。
10.具有靶向部分的小分子化合物的缀合物，特别是抗体-药物缀合物(adc)，将例如
单克隆抗体的靶向能力与所附化合物(也称为有效载荷)的药理活性相结合。特别是，靶向部分可以特异性靶向某种肿瘤抗原(例如，理想情况下仅在肿瘤细胞中或肿瘤细胞上发现的蛋白质)或免疫细胞抗原，并将其自身附着在癌细胞或免疫细胞表面的抗原上。靶向部分(优选抗体)与靶蛋白(抗原)之间的生化反应可以在肿瘤细胞或免疫细胞中触发信号，然后将抗体与连接的化合物(有效载荷)一起吸收或内化。在adc被内化(内吞作用)后，连接的化合物将在细胞内表现出其药理活性。这种靶向限制了副作用，并提供了比其他化疗药物更广泛的治疗窗口。在某些情况下，有效载荷可能具有足够的膜渗透性以扩散出细胞并在旁观者细胞中起作用。在另一种方法中，非内化作用机制也是可能的。在这种情况下，连接基裂解和有效载荷释放发生在细胞外肿瘤微环境中。因此，不需要adc内吞作用，并且可以选择非内化抗原作为靶标。
11.总体而言，adc因此旨在将小分子量活性化合物的全身施用的有利方面与通过例如单克隆抗体疗法的靶向递送相结合，从而创造出具有长血浆半衰期的高活性和选择性疗法。
12.与adc相关的连接基将小分子化合物(有效载荷)与靶向部分(例如抗体)连接起来。adc连接基可分为“可裂解”或“不可裂解”，可裂解连接基是优选(j.d.bargh等人，chem.soc.rev.,2019，doi：10.1039/c8cs00676h)。
13.鉴于上述情况，调节sting的药物可用于治疗一种或多种选自以下的疾病：炎症、过敏和自身免疫疾病、传染病、癌症、癌前综合征，和/或作为免疫原性组合物或疫苗佐剂。特别相关的是癌症和病毒感染的免疫疗法，特别是前列腺癌、肾癌、黑色素瘤、胰腺癌、宫颈癌、卵巢癌、结肠癌、头颈癌、肺癌、纤维肉瘤和乳腺癌。此外，对病灶的局部免疫反应的激活被认为是优选的肠胃外或非肠胃外治疗方法。
14.因此，需要调节sting活性的药物，从而在疾病的治疗中提供治疗效果，其中sting的调节是有益的。
15.在这方面，本发明的另一个目的是提供，例如，以化合物-连接基构建体或具有靶向部分(例如抗体)的缀合物的形式的官能化的化合物。
16.发明目的和概述
17.因此，本发明的一个目的是提供调节sting的官能化化合物，特别是充当sting激动剂从而激活sting的官能化化合物。特别是，对提供作为sting激动剂的具有高活性的官能化化合物感兴趣。
18.本发明的另一个目的是提供适合用作药物的官能化化合物。本发明的另一个目的是提供适用于治疗一种或多种与sting调节有关的疾病的官能化化合物。另一个目的是提供官能化化合物，其适用于治疗一种或多种选自以下的疾病：炎性疾病、过敏性疾病、自身免疫性疾病、传染病、癌症和癌前综合征。特别是，一个目的是提供适用于治疗癌症，特别是前列腺癌、肺癌、乳腺癌、头颈癌、膀胱癌和/或黑色素瘤的官能化化合物。再另一个目的是提供适用于免疫原性组合物和作为疫苗佐剂的官能化化合物。
19.本发明的另一个目的是提供官能化的化合物，其有益之处在于它们含有将化合物从宿主免疫系统掩蔽和/或增加其流体动力学尺寸和/或改善水溶性的基团，或提供官能化的化合物，其有益之处在于它们含有具有靶向能力的部分，从而可以特异性靶向肿瘤抗原或免疫细胞，从而使官能化的化合物被肿瘤细胞或免疫细胞吸收或内化以提供它们的药理
学活性。
20.上述目的可以通过本文定义的化合物-连接基构建体和缀合物以及包含它们的药物组合物以及通过它们的医学用途来实现。
21.本发明的发明人尤其出人意料地发现本文定义的式(i)化合物调节sting，特别是充当sting激动剂，并且可以连接至连接基以形成化合物-连接基构建体。然后所述构建体可以原样使用或进一步修饰以提供缀合物，其中所述化合物与靶向部分共价连接。本发明的官能化化合物，即本文所述的化合物-连接基构建体和缀合物，可用作药物，特别是用于治疗一种或多种选自以下的疾病：炎性疾病、过敏性疾病、自身免疫性疾病、传染病、癌症和癌前综合征。特别是，本发明的官能化化合物适用于治疗癌症，特别是前列腺癌、肺癌、乳腺癌、头颈癌、膀胱癌和/或黑色素瘤。此外，官能化化合物适用于免疫原性组合物和作为疫苗佐剂。
22.因此，在第一方面，本发明涉及一种化合物-连接基构建体，其包含
23.(i)式(i)化合物；和
24.(ii)连接基l125.其中所述式(i)化合物是下式的化合物
[0026][0027]
或其盐、立体异构体、互变异构体或n-氧化物，
[0028]
其中
[0029]
x1为ch或n；
[0030]
x2为cr3或n；
[0031]
r1、r2和r3独立地为h、oh、nrcrd、cn、卤素、c
1-c
4-烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、c
1-c
4-烷氧基、芳氧基、苄氧基、c(＝o)re、nrfc(＝o)re、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-c(＝o)re、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或4至6元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基、杂环氧基或杂环基-c
1-c
2-烷基，或8至10元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳双环基或杂双环基，其中前述杂环或杂双环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0032]
r4为5或6元芳族碳环或杂环，或9或10元芳族碳双环或杂双环，其中所述杂环或杂双环包含至少一个氮原子和任选地一个或多个相同或不同的选自o、n或s的另外的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0033]
r5为5元或6元饱和杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中每个可取代的碳或
杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代；
[0034]
并且其中
[0035]rn
为h、c
1-c
4-烷基、ho(c＝o)-c
1-c
4-烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
4-烷基，或3或4元饱和碳环基或杂环基，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0036]
rc和rd独立为h，或c
1-c
2-烷基；或
[0037]
rc和rd与它们所结合的氮原子一起形成5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中所述杂环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0038]
re为h、c
1-c
2-烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、苯基、苄基、org或nrhri；或5元或6元饱和、部分或完全不饱和的杂环基，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基rf取代；
[0039]
rf为h、c
1-c
2-烷基、c
3-c
6-环烷基、苯基、苄基或c(＝o)nrhri；
[0040]
rg为h、c
1-c
2-烷基，或5或6元芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基或杂环基-c
1-c
2-烷基，其中上述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化；
[0041]
rh和ri独立地为h、c
1-c
2-烷基，或5或6元芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基或杂环基-c
1-c
2-烷基，其中前述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化；或
[0042]
rh和ri与它们所结合的氮原子一起形成5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中所述杂环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0043]rx
为oh、nrcrd、卤素、cn、no2、c
1-c
2-烷基、c
1-c
2-卤代烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、rco-c
1-c
4-烷基、c
1-c
2-烷氧基、c(＝o)re，或两个r
x
形成＝o，或两个r
x
与它们所结合的碳原子一起形成3至5元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环；
[0044]ry
为卤素、cn、oh、c
1-c
2-烷基、ho-c
1-c
2-烷基、c
3-c
6-环烷基、c
1-c
2-烷氧基、nrcrd、s(＝o)2nrcrd、c(＝o)re，或5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基和杂环基-c
1-c
2-烷基，其中上述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；或两个ry形成＝o；或与相同或相邻碳原子相连的两个ry可形成3元碳环；
[0045]
附带条件是
[0046]
或者
[0047]
r1、r2或r3中的任何一个为nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或8至10元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳双环基或杂双环基，其
中上述杂双环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0048]
或者
[0049]
r1、r2或r3中的任何一个为nrfc(＝o)re，其中re为nrcr
d-c
1-c
4-烷基；
[0050]
或者
[0051]rn
为nrcr
d-c
1-c
4-烷基或c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
4-烷基；
[0052]
或者
[0053]
取代基r1、r2、r3、r4、r5、rn中的任何一个带有取代基r
x
，其中
[0054]rx
为oh、nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基或rco-c
1-c
4-烷基。
[0055]
优选地，式(i)化合物与连接基l1共价结合，其中连接基l1可以是可裂解的或不可裂解的。上述关于式(i)化合物的限定的附带条件限定了优选形成与连接基l1的共价键的官能团。与附带条件有关，应当理解，尽管满足给定备选方案之一就足够了，但这不排除多于一个给定备选方案由式(i)化合物满足。因此，术语“任何一个”也包括选项“至少一个”。换言之，如果例如根据附带条件选择r2，这不排除根据附带条件选择r1或r3。类似地，如果例如根据附带条件选择r2，这不排除根据附带条件选择rn，和/或取代基r1、r2、r3、r4、r5、rn中的任一个根据附带条件带有取代基r
x
。如与附带条件有关，术语“带有取代基r
x”是指所述取代基可以在任何位置带有取代基r
x
，这也包括选项r
x
连接到ry，其中ry连接到所述取代基。这与取代基r5特别相关。关于r5，术语“带有取代基r
x”优选是指r5表示如本文所定义的5或6元饱和杂环，其被ry取代，其中ry(优选为吡啶)进一步被r
x
取代。另一方面，关于其余取代基，例如r4，术语“带有取代基r
x”优选是指r4表示5或6元芳族碳环或杂环，或9或10元芳香族碳双环或杂双环，其中前述环中的可取代的碳或杂原子被取代基r
x
取代。
[0056]
在一个实施方案中，本发明涉及如上定义的化合物-连接基构建体，其中式(i)化合物和连接基l1之间的共价键通过式(i)化合物的官能团与连接基l1的官能团柄的反应建立；并且其中优选地，式(i)化合物的官能团连接至取代基r2、r4、r5或rn或连接至取代基r2、r4、r5或rn的一部分，使得连接基l1根据以下结构之一共价结合至式(i)化合物：
[0057][0058]
在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的化合物-连接基构建体，其中连接基
l1包含
[0059]
(i)具有2至100个选自碳、氮、氧和硫原子的原子的链lc，其可以被5至10元芳基和杂芳基和/或3至8元饱和碳环基或杂环基中断，其中上述杂芳基和杂环基包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中链中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[0060]
并且优选地为
[0061]
选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的链lc单元，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[0062]
(ii)官能团柄h
1a
，其与式(i)化合物共价结合；
[0063]
(iii)官能团柄h
1b
，其适合与靶向部分t形成共价键。
[0064]
在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的化合物-连接基构建体，其中连接基l1具有结构h
1a-l
c-h
1b
并且选自：
[0065][0066][0067]
其中
[0068]
lc为选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的链lc单元，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；和
[0069]
§
标记与式(i)化合物的连接；和
[0070]
x表示离去基团，其选自
[0071]
[0072]
并且其中优选地，lc选自：
[0073][0074][0075]
其中n为0、1、2、3、4、5、6、7或8。
[0076]
在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的化合物-连接基构建体，其中连接基l1具有结构h
1a-l
c-h
1b
并且选自：
[0077][0078]
其中
[0079]
lc为选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的链lc单元，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；和
[0080]
§
标记与式(i)化合物的连接；和
[0081]
x表示离去基团，其选自
[0082][0083]
并且其中优选地，lc选自：
[0084][0085]
其中n为0、1、2、3、4、5、6、7或8。
[0086]
在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的化合物-连接基构建体，其中所述连接基l1选自：
[0087]
[0088]
烷基，或3或4元饱和碳环基或杂环基，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0108]
rc和rd独立为h，或c
1-c
2-烷基；或
[0109]
rc和rd与它们所结合的氮原子一起形成5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中所述杂环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0110]
re为h、c
1-c
2-烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、苯基、苄基、org或nrhri；或5元或6元饱和、部分或完全不饱和的杂环基，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基rf取代；
[0111]
rf为h、c
1-c
2-烷基、c
3-c
6-环烷基、苯基、苄基或c(＝o)nrhri；
[0112]
rg为h、c
1-c
2-烷基，或5或6元芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基或杂环基-c
1-c
2-烷基，其中上述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化；
[0113]
rh和ri独立地为h、c
1-c
2-烷基，或5或6元芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基或杂环基-c
1-c
2-烷基，其中前述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化；或
[0114]
rh和ri与它们所结合的氮原子一起形成5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中所述杂环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0115]rx
为oh、nrcrd、卤素、cn、no2、c
1-c
2-烷基、c
1-c
2-卤代烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、rco-c
1-c
4-烷基、c
1-c
2-烷氧基、c(＝o)re，或两个r
x
形成＝o，或两个r
x
与它们所结合的碳原子一起形成3至5元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环；
[0116]ry
为卤素、cn、oh、c
1-c
2-烷基、ho-c
1-c
2-烷基、c
3-c
6-环烷基、c
1-c
2-烷氧基、nrcrd、s(＝o)2nrcrd、c(＝o)re，或5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基和杂环基-c
1-c
2-烷基，其中上述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；或两个ry形成＝o；或与相同或相邻碳原子相连的两个ry可形成3元碳环；
[0117]
附带条件是
[0118]
或者
[0119]
r1、r2或r3中的任何一个为nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或8至10元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳双环基或杂双环基，其中上述杂双环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0120]
或者
[0121]
r1、r2或r3中的任何一个为nrfc(＝o)re，其中re为nrcr
d-c
1-c
4-烷基；
[0122]
或者
[0123]rn
为nrcr
d-c
1-c
4-烷基或c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
4-烷基；
[0124]
或者
[0125]
取代基r1、r2、r3、r4、r5、rn中的任何一个带有取代基r
x
，其中
[0126]rx
为oh、nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基或rco-c
1-c
4-烷基。
[0127]
优选地，式(i)化合物和靶向部分t共价结合至连接基l2，使得连接基l2将式(i)化合物连接至靶向部分t。任选地，靶向部分可以通过连接基l2与一个或多个，优选1至30个式(i)化合物连接。因此，缀合物可以由以下公式表示：
[0128]
[(i)-l2]
a-t
[0129]
其中
[0130]
(i)指式(i)化合物，
[0131]
l2为连接基l2，
[0132]
t为靶向部分t，并且
[0133]
a为1到30的整数。
[0134]
连接基l2可以与式(i)化合物和靶向部分结合，使得它是可裂解的或不可裂解的。
[0135]
上述关于式(i)化合物的限定的附带条件限定了优选形成与连接基l2的共价键的官能团。与附带条件有关，应当理解，尽管满足给定备选方案之一就足够了，但这不排除多于一个给定备选方案由式(i)化合物满足。因此，术语“任何一个”也包括选项“至少一个”。换言之，如果例如根据附带条件选择r2，这不排除根据附带条件选择r1或r3。类似地，如果例如根据附带条件选择r2，这不排除根据附带条件选择rn，和/或取代基r1、r2、r3、r4、r5、rn中的任一个根据附带条件带有取代基r
x
。如与附带条件有关，术语“带有取代基r
x”是指所述取代基可以在任何位置带有取代基r
x
，这也包括r
x
连接到ry的选项，其中ry连接到所述取代基。这与取代基r5特别相关。关于r5，术语“带有取代基r
x”优选是指r5表示如本文所定义的5或6元饱和杂环，其被ry取代，其中ry(优选为吡啶)进一步被r
x
取代。另一方面，关于其余取代基，例如r4，术语“带有取代基r
x”优选是指r4表示5或6元芳族碳环或杂环，或9或10元芳香族碳双环或杂双环，其中前述环中的可取代的碳或杂原子被取代基r
x
取代。
[0136]
在一个实施方案中，本发明涉及如上定义的缀合物，其中式(i)化合物和连接基l2之间的共价键通过式(i)化合物的官能团与连接基l2的官能团柄的反应建立，并且其中靶向部分t和连接基l2之间的共价键通过靶向部分t的官能团与连接基l2的官能团柄的反应建立；并且其中优选地，式(i)化合物的官能团连接至取代基r2、r4、r5或rn或连接至取代基r2、r4、r5或rn的一部分，使得与靶向部分在一端共价结合的连接基l2在另一端根据以下任一结构与式(i)化合物共价结合：
[0137][0138]
在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的缀合物，其中连接基l2包含
[0139]
(i)具有2至100个选自碳、氮、氧和硫原子的原子的链lc，其可以被5至10元芳基和杂芳基和/或3至8元饱和碳环基或杂环基中断，其中上述杂芳基和杂环基包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中链中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[0140]
并且优选地为
[0141]
选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的链lc单元，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[0142]
(ii)官能团柄h
1a
，其与式(i)化合物共价结合；
[0143]
(iii)官能团柄h
2b
，其与靶向部分t共价结合。
[0144]
在缀合物的一个实施方案中，连接基l2具有结构h
1a-l
c-h
2b
并且选自：
[0145][0146]
其中
[0147]
lc为选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的链lc单元，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；和
[0148]
§
标记与式(i)化合物的连接；和
[0149]
$标记与靶向部分t的连接；和
[0150]
并且其中优选lc选自：
[0151]
[0152][0153]
其中n为0、1、2、3、4、5、6、7或8。
[0154]
在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的缀合物，其中连接基l2具有结构h
1a-l
c-h
2b
并且选自：
[0155][0156]
[0157]
其中
[0158]
lc为选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的链lc单元，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[0159]
§
标记与式(i)化合物的连接；和
[0160]
$标记与靶向部分t的连接。
[0161]
并且其中优选lc选自：
[0162][0163]
其中n为0、1、2、3、4、5、6、7或8。
[0164]
在另一个实施方案中，本发明涉及如上定义的缀合物，其中靶向部分t包含抗体、抗体片段、基于核酸的分子、碳水化合物、肽或修饰肽，特别是抗体或抗原结合片段，其旨在靶向人表皮生长因子受体(egfr)、纤溶酶原激活剂、细胞毒性t淋巴细胞相关抗原(ctla)，例如ctla-4、pd-1、pd-l1、kir、tim3、vista、tigit、lag3、ox40、ror1、ror2、血管内皮生长因子(vegf)、成纤维细胞生长因子受体(fgfr)、血小板衍生的生长因子(pdgf)、转化生长因子(tgf)、神经营养因子、神经生长因子、血小板衍生的生长因子(pdgf)、白细胞介素受体、转化生长因子(tgf)、雌激素受体、孕激素受体、c-kit、cmet、erbb2/her2、erbb3/her3、erbb4/
her4、cd3、cd20、cd22、cd30、cd33、cd40、cd47、cd79、cd123、cd133、cd166、cd137、间皮素蛋白、epcam、flt3、psma、psca、steap、cea、叶酸受体、cd39/cd73受体、腺苷受体、slc34a2基因产物、epha2酪氨酸激酶、muc1/muc16细胞表面抗原、alk、afp、bcr-abl、pap。
[0165]
在另一个实施方案中，本发明涉及如本文定义的化合物-连接基构建体或缀合物，其中连接至取代基r2、r4、r5或rn，或连接至取代基r2、r4、r5或rn的一部分并与连接基l1或l2的官能团柄h
1a
形成共价键的式(i)化合物的官能团选自以下选项：
[0166]
或者
[0167]
r2为nhrd、nhr
d-c
1-c
4-烷基、nh-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nhrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nhrd，或8至10元饱和杂双环基，其中前述杂双环包含至少一个氮原子和任选地一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0168]
或者
[0169]
r2为nrfc(＝o)re，其中re为nhr
d-c
1-c
4-烷基；
[0170]
或者
[0171]rn
为nhr
d-c
1-c
4-烷基；
[0172]
或者
[0173]
取代基r2、r4、r5、rn中的任一个带有取代基r
x
，其中
[0174]rx
为oh、nhrd、nhr
d-c
1-c
4-烷基或ho-c
1-c
4-烷基；
[0175]
并且优选地
[0176]
或者
[0177]
r2为nh2、nh
2-c
1-c
2-烷基、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-n(ch3)2、o-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2或o-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3；
[0178]
或者
[0179]
r2为nhc(＝o)re，其中re为nh
2-c
1-c
4-烷基；
[0180]
或者
[0181]rn
为nh
2-c
1-c
3-烷基；
[0182]
或者
[0183]
取代基r2、r4或r5中的任一个带有取代基r
x
，其中
[0184]rx
为oh、nh2、nhch3、nh
2-c
1-c
2-烷基或ho-c
1-c
2-烷基。
[0185]
在另一个实施方案中，本发明涉及如本文定义的化合物-连接基构建体或缀合物，其中在式(i)化合物中
[0186]
x1为ch；
[0187]
x2为cr3，其中r3为h；
[0188]
r1为h或f；
[0189]
r2为h、oh、nrcrd、cn、卤素、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、nrfc(＝o)re、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-c(＝o)re、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或4至6元饱和杂环基，或8至10元饱和杂双环基，其中上述杂环或杂双环包含氮原子和任选的一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基
团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0190]
r4为吡啶基，其中环中每个可取代的碳原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0191]
r5为哌啶，其中哌啶环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代；和
[0192]rn
为h、c
1-c
4-烷基、ho(c＝o)-c
1-c
3-烷基、nhr
d-c
1-c
3-烷基、c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
3-烷基或环丙基；
[0193]
其中优选地
[0194]
rc为h或c
1-c
2-烷基；
[0195]
rd为h或c
1-c
2-烷基；
[0196]
re为nh
2-c
1-c
4-烷基；
[0197]
rf为h；
[0198]rx
为卤素、oh、nh2、nhch3、c
1-c
2-烷基、c
1-c
2-烷氧基、nh
2-c
1-c
2-烷基、ho-c
1-c
2-烷基，或两个r
x
与它们所结合的碳原子一起形成3元饱和碳环；
[0199]ry
为卤素、oh、nh2，或5元或6元芳族杂环基，其中前述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0200]
附带条件是
[0201]
或者
[0202]
r2为nh2、nh
2-c
1-c
2-烷基、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-n(ch3)2、o-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2或o-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3；
[0203]
或者
[0204]
r2为nhc(＝o)re，其中re为nh
2-c
1-c
4-烷基；
[0205]
或者
[0206]rn
为nh
2-c
1-c
3-烷基；
[0207]
或者
[0208]
取代基r2、r4或r5中的任一个带有取代基r
x
，其中
[0209]rx
为oh、nh2、nhch3、nh
2-c
1-c
2-烷基或ho-c
1-c
2-烷基。
[0210]
在另一方面，本发明涉及药物组合物，其包含药学有效量的本文定义的化合物-连接基构建体或本文定义的缀合物，以及任选的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
[0211]
在又一方面，本发明涉及如本文定义的化合物-连接基构建体或如本文定义的缀合物，或包含本文定义的化合物-连接基构建体或缀合物的药物组合物，其用于医学。特别地，本发明涉及本文定义的化合物-连接基构建体或本文定义的缀合物，或包含本文定义的化合物-连接基构建体或缀合物的药物组合物，其用于调节sting，特别是激活sting。
[0212]
在又一方面，本发明涉及本文定义的化合物-连接基构建体或本文定义的缀合物，或包含本文定义的化合物-连接基构建体或缀合物的药物组合物，其用于治疗疾病的方法中，其中sting的调节，特别是sting的激活是有益的。
[0213]
在一个实施方案中，本文定义的化合物-连接基构建体或本文定义的缀合物，或包含本文定义的化合物-连接基构建体或缀合物的药物组合物用于治疗选自以下的疾病：癌症、癌前综合征和传染病；或用于免疫原性组合物中或作为疫苗佐剂。
[0214]
在另一个实施方案中，本文定义的化合物-连接基构建体或本文定义的缀合物，或包含本文定义的化合物-连接基构建体或缀合物的药物组合物用于治疗选自以下的疾病：炎性疾病、过敏性疾病和自身免疫性疾病。
[0215]
在另一方面，本发明涉及治疗方法，包括将本文定义的化合物-连接基构建体或本文定义的缀合物，或包含本文定义的化合物-连接基构建体或缀合物的药物组合物施用于人或动物体。
[0216]
附图简述
[0217]
图1a-图1c显示了实施例4在balb/c雌性小鼠的ct26鼠结肠癌同种异体移植物中的功效。
[0218]
图2a-图2c显示了实施例31在balb/c雌性小鼠的ct26鼠结肠癌同种异体移植物中的功效。
[0219]
图3a-图3c显示了实施例57在balb/c雌性小鼠的ct26鼠结肠癌同种异体移植物中的功效。
[0220]
发明详述
[0221]
在下文中，更详细地描述了本文定义的化合物-连接基构建体和本文定义的缀合物的优选实施方案以及在这方面式(i)化合物中的取代基的优选实施方案、连接基l1和l2的优选实施方案和靶向部分的优选实施方案。应当理解，每个优选实施方案单独相关以及与其他优选实施方案组合相关。
[0222]
如上所述，本发明涉及包含式(i)化合物的化合物-连接基构建体和缀合物。下文将更详细地描述式(i)化合物。
[0223]
如下文进一步详细解释的，应理解在本发明的化合物-连接基构建体或缀合物中，式(i)化合物与连接基l1或l2之间的共价键通过以下反应建立：式(i)化合物的官能团与连接基l1或l2的官能团柄的反应。形成与连接基l1和l2的共价键的优选的官能团将在下文进一步定义。这些基团优选包含氨基或羟基。应当理解，在与连接基l1或l2反应时，这些基团的氢原子将被l1或l2取代，因此例如将形成o-l1、o-l2、n-l1或n-l2键。因此，当在下文定义式(i)化合物时，应理解在所定义的取代基之一处，尤其是在羟基或氨基处，氢原子将被包含式(i)化合物的化合物-连接基构建体和缀合物中的l1或l2取代。为了便于参考，在式(i)化合物的后续定义中不考虑该被取代的氢原子，但技术人员将理解在要求保护的化合物-连接基构建体和缀合物中，仍然缺少一个氢原子并被连接基l1取代。
[0224]
作为本发明的化合物-连接基构建体和缀合物的一部分的式(i)化合物具有下式：
[0225]
[0226]
其中
[0227]
x1为ch或n；且
[0228]
x2为cr3或n。
[0229]
因此，式(i)化合物可以是如下所示的式(ia)、(ib)、(ic)或(id)的化合物：
[0230][0231][0232]
在优选的实施方案中，式(i)化合物(i)是式(ia)或(ib)的化合物，特别是式(ia)的化合物。
[0233]
在式(i)化合物的另一个优选实施方案中，
[0234]
x2为cr3，其中r3为h。
[0235]
因此，式(i)化合物优选是式(ia)或(ib)化合物，其中r3为h。
[0236]
在本发明的一个实施方案中，式(i)化合物是式(ia)，其中r3为h。这些化合物称为式(ia*)化合物，如下所示：
[0237][0238]
在根据式(ia)、(ib)、(ic)和(id)以及(ia*)的化合物方面，应理解取代基r1、r2、r3、r4、r5和rn如上文式(i)中所定义。下面进一步提供了关于这些取代基的进一步优选的实施方案。
[0239]
如上所述，取代基r1、r2、r3、r4、r5或rn中的任何一个都表示或带有适合进一步官能化的官能团，其中该官能化包括形成根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物。特别地，
[0240]
或者
[0241]
r1、r2或r3中的任何一个为nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或8至10元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳双环基或杂双环基，其
中上述杂双环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0242]
或者
[0243]
r1、r2或r3中的任何一个为nrfc(＝o)re，其中re为nrcr
d-c
1-c
4-烷基；
[0244]
或者
[0245]rn
为nrcr
d-c
1-c
4-烷基或c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
4-烷基；
[0246]
或者
[0247]
取代基r1、r2、r3、r4、r5、rn中的任何一个带有取代基r
x
，其中
[0248]rx
为oh、nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基或rco-c
1-c
4-烷基。
[0249]
优选地，r1、r2或r3中的任何一个为nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或8至10元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳双环基或杂双环基，其中上述杂双环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0250]
或者
[0251]
r1、r2或r3中的任何一个为nrfc(＝o)re，其中re为nrcr
d-c
1-c
4-烷基；
[0252]
或者
[0253]rn
为nrcr
d-c
1-c
4-烷基；
[0254]
或者
[0255]
取代基r1、r2、r3、r4、r5、rn中的任何一个带有取代基r
x
，其中
[0256]rx
为oh、nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基或rco-c
1-c
4-烷基。
[0257]
优选地，r1、r2或r3中的任何一个为nhrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或8至10元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳双环基或杂双环基，其中上述杂双环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0258]
或者
[0259]
r1、r2或r3中的任何一个为nrfc(＝o)re，其中re为nrcr
d-c
1-c
4-烷基；
[0260]
或者
[0261]rn
为nrcr
d-c
1-c
4-烷基；
[0262]
或者
[0263]
取代基r1、r2、r3、r4、r5、rn中的任何一个带有取代基r
x
，其中
[0264]rx
为oh、nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基或rco-c
1-c
4-烷基。
[0265]
优选地，r2、r4、r5或rn中的任何一个都表示或带有适合进一步官能化的官能团。特别地，
[0266]
或者
[0267]
r2为nhrd、nhr
d-c
1-c
4-烷基、nh-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nhrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nhrd，或8至10元饱和杂双环基，其中前述杂双环包含至少一个氮原子和
任选地一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0268]
或者
[0269]
r2为nrfc(＝o)re，其中re为nhr
d-c
1-c
4-烷基；
[0270]
或者
[0271]rn
为nhr
d-c
1-c
4-烷基；
[0272]
或者
[0273]
取代基r2、r4、r5、rn中的任一个带有取代基r
x
，其中
[0274]rx
为oh、nhrd、nhr
d-c
1-c
4-烷基或ho-c
1-c
4-烷基。
[0275]
更优选地，r2、r4或r5中的任何一个都表示或带有适合进一步官能化的官能团。特别地，
[0276]
或者
[0277]
r2为nh2、nh
2-c
1-c
2-烷基、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-n(ch3)2、o-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2或o-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3；
[0278]
或者
[0279]
r2为nhc(＝o)re，其中re为nh
2-c
1-c
4-烷基；
[0280]
或者
[0281]rn
为nh
2-c
1-c
3-烷基；
[0282]
或者
[0283]
取代基r2、r4或r5中的任一个带有取代基r
x
，其中
[0284]rx
为oh、nh2、nhch3、nh
2-c
1-c
2-烷基或ho-c
1-c
2-烷基。
[0285]
最优选地，r2表示或带有适合进一步官能化的官能团。特别地，
[0286]
或者
[0287]
r2为nh2、nh
2-c
1-c
2-烷基、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-n(ch3)2、o-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2或o-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3；
[0288]
或者
[0289]
r2为nhc(＝o)re，其中re为nh
2-c
1-c
4-烷基；
[0290]
或者
[0291]
任何r2带有取代基r
x
，其中
[0292]rx
为oh、nh2、nhch3、nh
2-c
1-c
2-烷基或ho-c
1-c
2-烷基。
[0293]
关于官能团的上述选项，应理解，尽管满足给定替代方案之一就足够了，但这不排除式(i)化合物满足多于一种给定替代方案。与上述选项结合使用时，术语“带有取代基r
x”是指所述取代基可以在任何位置带有取代基r
x
，这还包括r
x
连接到ry的选项，其中ry连接到所述取代基。这与取代基r5尤其相关。关于r5，术语“带有取代基r
x”优选是指r5表示如本文定义的5或6元饱和杂环，其被ry取代，其中ry(优选为吡啶)进一步被r
x
取代。另一方面，对于其余的取代基，例如r4，术语“带有取代基r
x”优选是指r4表示5或6元芳族碳环或杂环，或9或10元芳族碳双环或杂双环，其中上述环中的可取代碳或杂原子被取代基r
x
取代。
[0294]
以下取代基优选与式(i)化合物有关，以及与式(ia)、(ib)、(ic)和(id)化合物有c4-亚烷基)-nrcrd，或4至6元饱和杂环基，或9至10元饱和杂双环基，其中前述杂环或杂双环包含一个或两个氮原子，其中所述n原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代。
[0309]
如果r
x
基团存在于r2，则优选
[0310]rx
为卤素、oh、nh2、nhch3、c
1-c
2-烷基、c
1-c
2-烷氧基、nh
2-c
1-c
2-烷基、ho-c
1-c
2-烷基或两个r
x
与它们所结合的碳原子一起形成3元饱和碳环。
[0311]
特别地，如果r
x
基团存在于r2，则优选至少一个r
x
为oh、nh2、nhch3、nh
2-c
1-c
2-烷基、ho-c
1-c
2-烷基。此类基团特别适合作为官能团以促进式(i)化合物与合适的载体或与连接基共价连接，该连接基与合适的载体建立键。
[0312]
此外，以下取代基定义优选与上述r2的定义有关：
[0313]
rc为h或c
1-c
2-烷基；
[0314]
rd为h或c
1-c
2-烷基；
[0315]
re为nh
2-c
1-c
4-烷基；
[0316]
rf为h。
[0317]
优选的r2基团选自h、br、f、cl、nh2、
[0318]
[0319][0320]
特别优选的r2基团选自h、br、f、nh2、
[0321]
[0322]
在一个优选的实施方案中，
[0323]rn
为h、c
1-c
4-烷基、ho(c＝o)-c
1-c
3-烷基、nhr
d-c
1-c
3-烷基、c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
3-烷基、环丙基或4元饱和杂环基，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代。
[0324]
如果r
x
基团存在于rn，则优选r
x
为oh或两个r
x
形成＝o。
[0325]
结合上述关于rn的实施方案，优选rd为h。
[0326]
在一个优选的实施方案中，
[0327]rn
为h、c
1-c
4-烷基、ho(c＝o)-c
1-c
3-烷基、nhr
d-c
1-c
3-烷基、c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
3-烷基或环丙基。
[0328]
在更优选的实施方案中，
[0329]rn
为h、c
1-c
3-烷基、ho(c＝o)-c
1-烷基或环丙基。
[0330]
在更优选的实施方案中，
[0331]rn
为h、ch3、异丙基或环丙基。
[0332]
在另一个更优选的实施方案中，
[0333]rn
为h、c
1-c
2-烷基、ho(c＝o)-c
1-烷基或环丙基。
[0334]
在更优选的实施方案中，
[0335]rn
为h、ch3或环丙基。
[0336]
在一个特别优选的实施方案中，
[0337]rn
为ch3。
[0338]
在另一个特别优选的实施方案中，
[0339]rn
为环丙基。
[0340]
在一个优选的实施方案中，
[0341]
r4为吡啶基，其中环中的每个可取代的碳原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代。
[0342]
如果至少一个r
x
基团存在于r4，优选
[0343]rx
为nh2、nhch3、nh
2-c
1-c
2-烷基、c
1-c
2-烷基或c
1-c
2-烷氧基。
[0344]
优选的是，吡啶基被如上定义的一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代。
[0345]
因此，在更优选的实施方案中，
[0346]
r4为甲基吡啶基、氨基吡啶基或甲氧基吡啶基。
[0347]
优选地，r4是以下取代的吡啶基环中的任何一个：
[0348][0349]
在特别优选的实施方案中，
[0350]
r4为甲基吡啶基。
[0351]
特别优选地，
[0352]
r4为：
[0353][0354]
在一个实施方案中，
[0355]
r5为5元或6元饱和杂环，其中所述杂环包含一个或多个氮原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代。
[0356]
在更优选的实施方案中，
[0357]
r5为6元饱和杂环，其中所述杂环包含一个或多个氮原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代。
[0358]
在又一个更优选的实施方案中，
[0359]
r5为哌啶，其中哌啶环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代。
[0360]
如果至少一个ry基团存在于r5，则优选
[0361]ry
为卤素、oh、nh2，或5元或6元芳族杂环基，其中前述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代。
[0362]
优选地，哌啶基的氮原子被取代基ry取代，其中
[0363]ry
为5或6元芳族杂环基，其中前述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代。
[0364]
如果至少一个r
x
基团存在于ry，则优选
[0365]rx
为f、cl、nh2、nhch3、n(ch3)2、nh
2-c
1-c
2-烷基、ho-c
1-c
4-烷基、c
1-c
2-烷基、c
1-c
2-卤代烷基或c
1-c
2-烷氧基。
[0366]
在一个特别优选的实施方案中，
[0367]
r5为哌啶，其中哌啶环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代；并且其中哌啶基的氮原子被ry取代，ry为5或6元芳族杂环基，其中前述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述杂环中的每个可取代碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代，其中优选r
x
为f、cl、nh2、nhch3、n(ch3)2、nh
2-c
1-c
2-烷基、ho-c
1-c
4-烷基、c
1-c
2-烷基、c
1-c
2-卤代烷基或c
1-c
2-烷氧基。
[0368]
因此，特别优选的r5基团选自
[0369][0370]
[0371]
在一个优选的实施方案中，
[0372]
r5为5元或6元饱和杂环，其中所述杂环包含一个或多个氮原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代。
[0373]
在更优选的实施方案中，
[0374]
r5为6元饱和杂环，其中所述杂环包含一个或多个氮原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代。
[0375]
在又一个更优选的实施方案中，
[0376]
r5为哌啶，其中哌啶环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代。
[0377]
如果至少一个ry基团存在于r5，则优选
[0378]ry
为卤素、oh、nh2，或5元或6元芳族杂环基，其中前述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代。
[0379]
优选地，哌啶基的氮原子被取代基ry取代，其中
[0380]ry
为6元芳族杂环基，其中前述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代。
[0381]
更优选哌啶基的氮原子被取代基ry取代，其中
[0382]ry
为吡啶基，其中每个可取代的碳原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代。
[0383]
如果至少一个r
x
基团存在于ry，则优选
[0384]rx
为nh2、nhch3、nh
2-c
1-c
2-烷基、c
1-c
2-烷基或c
1-c
2-烷氧基。
[0385]
在一个特别优选的实施方案中，
[0386]
r5为哌啶，其中哌啶环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代；并且其中哌啶基的氮原子被取代基ry取代，ry为吡啶基，其未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代，其中优选r
x
为nh2、nhch3、nh
2-c
1-烷基或c
1-烷基。
[0387]
在另一个特别优选的实施方案中，
[0388]
r5为哌啶，其中哌啶基的氮原子被取代基ry取代，ry是吡啶基，其未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代，其中优选r
x
为nh2、nhch3、nh
2-c
1-烷基或c
1-烷基。
[0389]
尤其优选r5为
[0390][0391]
其中$标记与取代基ry的连接。如上所述，ry优选为吡啶基，其未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代，其中r
x
为nh2、nhch3、nh
2-c
1-烷基或c
1-烷基。特别地，ry为
[0392][0393]
其中r
y-1和r
y-2可以未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代，其中r
x
为nh2、nhch3、nh
2-c
1-烷基或c
1-烷基，特别是ch3.
[0394]
因此，特别优选的r5基团选自
[0395][0396]
因此，与根据本发明的化合物-连接基构建体和缀合物有关的特别优选的化合物是下表中汇编的式(ia*)化合物。
[0397]
表1
[0398]
式(ia*.1)化合物，其中rn为ch3，r4为r
4-1，并且r2和r5在每种情况下对应于表a的一行
[0399]
表2
[0400]
式(ia*.1)化合物，其中rn为ch3，r4为r
4-2，并且r2和r5在每种情况下对应于表a的一行.
[0401]
表3
[0402]
式(ia*.1)化合物，其中rn为环丙基，r4为r
4-1，并且r2和r5在每种情况下对应于表a的一行.
[0403]
表4
[0404]
式(ia*.1)化合物，其中rn为环丙基，r4为r
4-2，并且r2和r5在每种情况下对应于表a的一行.
[0405]
表5
[0406]
式(ia*.2)化合物，其中rn为ch3，r4为r
4-1，并且r2和r5在每种情况下对应于表a的一行
[0407]
表6
[0408]
式(ia*.2)化合物，其中rn为ch3，r4为r
4-2，并且r2和r5在每种情况下对应于表a的一行.
[0409]
表7
[0410]
式(ia*.2)化合物，其中rn为环丙基，r4为r
4-1，并且r2和r5在每种情况下对应于表a的一行.
[0411]
表8
[0412]
式(ia*.2)化合物，其中rn为环丙基，r4为r
4-2，并且r2和r5在每种情况下对应于表a的一行.
[0413]
表a
[0414]
[0415]
[0416][0417]
已发现如上表中定义的化合物作为sting激动剂与本发明的化合物-连接基构建体和缀合物以及药物组合物有关的使用及其医疗用途是特别有利的。因此，根据本发明的化合物-连接基构建体和缀合物优选包含根据表1-8中任一项的化合物。
[0418]
根据本发明的特别优选的化合物-连接基构建体和缀合物包含式(i)化合物，其选自
[0419]
3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0420]
3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基]氨基}
甲基)-1-环丙基-6,7-二氟-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0421]
7-[(3r)-3-氨基吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0422]
7-[(3s)-3-氨基吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0423]
1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0424]
7-[(3r)-3-(氨基甲基)吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0425]
7-[(3s)-3-氨基哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0426]
7-[(3r)-3-氨基哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0427]
3-({[(2-氨基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-环丙基-6,7-二氟-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0428]
7-氨基-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0429]
1-环丙基-7-{[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0430]
7-[(3s)-3-(氨基甲基)吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0431]
7-{7-氨基-5-氮杂螺[2.4]庚-5-基}-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0432]
3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-6,7-二氟-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0433]
7-(4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基)-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0434]
1-环丙基-6-氟-7-[3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0435]
1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0436]
3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-溴-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0437]
7-[3-(氨基甲基)-3-氟吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0438]
1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0439]
1-环丙基-6-氟-7-(4-羟基哌啶-1-基)-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0440]
1-环丙基-6-氟-7-[3-(甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0441]
3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0442]
7-氨基-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮；
[0443]
1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮；
[0444]
1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0445]
6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮；
[0446]
1-环丙基-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0447]
1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0448]
7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0449]
1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-(甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0450]
7-[(4r)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0451]
7-[(4s)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0452]
1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-(甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0453]
1-环丙基-6-氟-7-[1-(2-羟基乙基)-1h-吡唑-4-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0454]
1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0455]
1-环丙基-6-氟-7-[2-(羟基甲基)吗啉-4-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0456]
1-环丙基-6-氟-7-[(2s)-2-(羟基甲基)吗啉-4-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0457]
1-环丙基-6-氟-7-[(2r)-2-(羟基甲基)吗啉-4-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0458]
1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0459]
1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]
[(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0460]
1-环丙基-6-氟-7-[3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0461]
1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(3s)-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0462]
1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0463]
1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0464]
1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0465]
1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0466]
1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0467]
1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0468]
1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0469]
1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0470]
1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0471]
1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0472]
1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮。
[0473]
根据本发明的进一步特别优选的化合物-连接基构建体和缀合物包含式(i)化合物，其选自：
[0474]
3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0475]
3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-环丙基-6,7-二氟-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0476]
7-[(3r)-3-氨基吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0477]
7-[(3s)-3-氨基吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0478]
1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0479]
7-[(3r)-3-(氨基甲基)吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0480]
7-[(3s)-3-氨基哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮；
[0481]
7-[(3r)-3-氨基哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮。
[0482]
根据本发明的优选化合物-连接基构建体和缀合物包含式(i)化合物，其在r5取代基处包含s-构型的立体中心。当通过选择具有相应构型的前体引入取代基r5时，可以在制备化合物时预定义该立体中心的构型(参见例如实施例1)。
[0483]
在某些情况下，另一个立体中心可能存在于分子的另一个位置。
[0484]
如果还可以通过在化合物制备中使用合适的前体来预定义进一步的立体中心的构型，那么也可以预定义所得分子的确切结构，这意味着可以为分子中的两种立体中心提供清晰的r/s命名法。
[0485]
但是，如果基于外消旋形式(即非对映异构体纯)的前体引入进一步的立体中心，则会形成两种非对映异构体，其可以随后被分离。在这种情况下，另外的立体中心的命名法在本文中任意提供。换言之，例如在非对映异构体对7-[(4r)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮和7-[(4s)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(参见实施例56和57)的情况下，显然得到并分离了两种化合物，但尚不清楚哪种化合物具有哪种结构，因为需要进一步的实验工作(例如x射线晶体学)来确定这一点。因此，如果在本文中提及7-[(4r)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮，这也可能是7-[(4s)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮，反之亦然。
[0486]
在另一个实施方案中，根据本发明的化合物-连接基构建体和缀合物包含式(i)化合物，
[0487][0488]
或其盐、立体异构体、互变异构体或n-氧化物，
[0489]
其中
[0490]
x1为ch或n；
[0491]
x2为cr3或n；
[0492]
r1、r2和r3独立地为h、oh、nrcrd、cn、卤素、c
1-c
4-烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、c
1-c
4-烷
氧基、芳氧基、苄氧基、c(＝o)re、nrfc(＝o)re、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-c(＝o)re、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或4至6元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基、杂环氧基或杂环基-c
1-c
2-烷基，或8至10元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳双环基或杂双环基，其中前述杂环或杂双环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0493]
r4为5或6元芳族碳环或杂环，或9或10元芳族碳双环或杂双环，其中所述杂环或杂双环包含至少一个氮原子和任选地一个或多个相同或不同的选自o、n或s的另外的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0494]
r5为5元或6元饱和杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代；
[0495]
并且其中
[0496]rn
为h、c
1-c
4-烷基、ho(c＝o)-c
1-c
4-烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
4-烷基，或3或4元饱和碳环基或杂环基，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0497]
rc和rd独立地为h、c
1-c
2-烷基或c(＝o)re；或
[0498]
rc和rd与它们所结合的氮原子一起形成5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中所述杂环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0499]
re为h、c
1-c
2-烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、苯基、苄基、org或nrhri；或5元或6元饱和、部分或完全不饱和的杂环基，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基rf取代；
[0500]
rf为h、c
1-c
2-烷基、c
3-c
6-环烷基、苯基、苄基或c(＝o)nrhri；
[0501]
rg为h、c
1-c
2-烷基，或5或6元芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基或杂环基-c
1-c
2-烷基，其中上述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化；
[0502]
rh和ri独立地为h、c
1-c
2-烷基，或5或6元芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基或杂环基-c
1-c
2-烷基，其中前述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化；或
[0503]
rh和ri与它们所结合的氮原子一起形成5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中所述杂环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0504]rx
为oh、nrcrd,卤素,cn,no2,c
1-c
2-烷基,环丙基,c
1-c
2-卤代烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基,rco-c
1-c
4-烷基、c
1-c
2-烷氧基,rco-c
1-c
4-烷氧基,c(＝o)re，或两个r
x
形成＝o，或两个r
x
与它们所结合的碳原子一起形成3至5元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环；
[0505]ry
为卤素、cn、oh、c
1-c
2-烷基、ho-c
1-c
2-烷基、c
3-c
6-环烷基、c
1-c
2-烷氧基、nrcrd、s(＝o)2nrcrd、c(＝o)re，或5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基和杂环基-c
1-c
2-烷基，其中上述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；或两个ry形成＝o；或与相同或相邻碳原子相连的两个ry可形成3元碳环；
[0506]
附带条件是
[0507]
或者
[0508]
r1、r2或r3中的任何一个为nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或8至10元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳双环基或杂双环基，其中上述杂双环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0509]
或者
[0510]
r1、r2或r3中的任何一个为nrfc(＝o)re，其中re为nrcr
d-c
1-c
4-烷基；
[0511]
或者
[0512]rn
为nrcr
d-c
1-c
4-烷基或c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
4-烷基；
[0513]
或者
[0514]
取代基r1、r2、r3、r4、r5、rn中的任何一个带有取代基r
x
，其中
[0515]rx
为oh、nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、rco-c
1-c
4-烷基，或rco-c
1-c
4-烷氧基。
[0516]
如上所述，根据本发明的化合物-连接基构建体和缀合物包含与连接基l1或l2共价结合的式(i)化合物。在本发明的缀合物的情况下，连接基l2进一步与靶向部分t共价结合。下文描述了如何建立共价键以及连接基l1和l2优选地看起来如何。
[0517]
通常，优选基于形成连接基的分子的官能团如碳酸酯、氨基甲酸酯、酯、酰胺、脲和/或内酰胺官能团获得共价键(beck,a.等人，nat.revs.drug disc.,2017,16,315-337和j.d.bargh等人，chem.soc.rev.,2019,doi：10.1039/c8cs00676h)。本领域技术人员将已知所述连接基为“稳定的”，即不可裂解的连接基，其在细胞和体循环中抗降解，或“条件不稳定的”连接基，即被设计以在限定的触发事件(其可能是ph值或代谢过程的变化，如酯或酰胺水解)后在细胞和/或体循环中降解的可裂解连接基。已经描述了具体的水解过程，例如二肽的肽酶裂解，例如临床先例的adc本妥昔单抗(brentuximab vedotin)中包含的缬氨酸-瓜氨酸二肽部分或吉妥珠单抗(gemtuzumab ozogamicin)中不稳定的腙部分的水解。不可裂解的连接基包括临床先例的adc ado曲妥珠单抗(trastuzumab emtansine)中所含的连接基。
[0518]
在本发明的化合物-连接基构建体的一个实施方案中，式(i)化合物和连接基l1之间的共价键通过式(i)化合物的官能团与连接基l1的官能团柄的反应建立；其中优选地，式(i)化合物的官能团连接至取代基r2、r4、r5或rn或连接至取代基r2、r4、r5或rn的部分，使得连
接基l1根据任一以下结构与式(i)化合物共价结合：
[0519][0520]
连接到取代基r2、r4、r5或rn或其部分的官能团优选包含氨基或羟基。该官能团通过在合适的条件与连接基l1的前体的官能团，优选苯甲醇基团、碳酸酯基团、氨基甲酸酯基团、羧酸基团、羧酸酯基团、羧酰胺基团、脲基团或内酰胺基团反应建立结合至连接基l1的共价键。因此，共价键优选为式(i)化合物的氧原子或氮原子与连接基l1的碳原子之间的键。换言之，式(i)化合物的羟基或氨基处的氢原子被连接基l1的碳原子取代。结果，获得式(i)-l1的化合物-连接基构建体，其中式(i)化合物的氮或氧原子形成与l1的连接。连接基l1优选具有结构h
1a-l
c-h
1b
，其中h
1a
为官能柄，其与式(i)化合物，优选与其氮或氧原子共价结合，其中h
1b
为适合于与靶向部分t形成共价键的官能团柄。在这方面，“适合于与靶向部分t形成共价键”是指官能部分可以原样使用或进一步衍生化以与靶向部分t形成共价键。这将在下面更详细地解释。
[0521]
在一个实施方案中，连接至取代基r2、r4、r5或rn或其部分并且与连接基l1的官能团柄h
1a
形成共价键的式(i)化合物的官能团选自以下选项：
[0522]
或者
[0523]
r2为nhrd、nhr
d-c
1-c
4-烷基、nh-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nhrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nhrd，或8至10元饱和杂双环基，其中前述杂双环包含至少一个氮原子和任选地一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0524]
或者
[0525]
r2为nrfc(＝o)re，其中re为nhr
d-c
1-c
4-烷基；
[0526]
或者
[0527]rn
为nhr
d-c
1-c
4-烷基；
[0528]
或者
[0529]
取代基r2、r4、r5、rn中的任一个带有取代基r
x
，其中
[0530]rx
为oh、nhrd、nhr
d-c
1-c
4-烷基或ho-c
1-c
4-烷基；
[0531]
并且优选地
[0532]
或者
[0533]
r2为nh2、nh
2-c
1-c
2-烷基、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-n(ch3)2、o-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2或o-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3；
[0534]
或者
[0535]
r2为nhc(＝o)re，其中re为nh
2-c
1-c
4-烷基；
[0536]
或者
[0537]rn
为nh
2-c
1-c
3-烷基；
[0538]
或者
[0539]
取代基r2、r4或r5中的任一个带有取代基r
x
，其中
[0540]rx
为oh、nh2、nhch3、nh
2-c
1-c
2-烷基或ho-c
1-c
2-烷基。
[0541]
在本发明的化合物-连接基构建体的一个实施方案中，连接基l1包含
[0542]
(i)具有2至100个选自碳、氮、氧和硫原子的原子的链lc，其可以被5至10元芳基和杂芳基和/或3至8元饱和碳环基或杂环基中断，其中上述杂芳基和杂环基包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中链中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[0543]
并且优选地
[0544]
选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的链lc单元，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[0545]
(ii)官能团柄h
1a
，其与式(i)化合物共价结合；
[0546]
(iii)官能团柄h
1b
，其适合与靶向部分t形成共价键。
[0547]
优选的连接基l1的官能团柄h
1a
基于选自以下的官能团：苯甲醇基团、碳酸酯基团、氨基甲酸酯基团、羧酸基团、羧酸酯基团、羧酰胺基团、脲基团和内酰胺基团，它们通过与式(i)化合物的合适官能团，特别是式(i)化合物的羟基或氨基反应建立与式(i)化合物的共价键。
[0548]
优选的连接基l1的官能团柄h
1b
选自赖氨酸反应性基团，包括琥珀酸酯、五氟苯基酯、β-内酰胺酰胺、异氰酸酯和异硫氰酸酯；叠氮化物反应性基团，包括炔烃和应变炔烃(strained alkynes)；半胱氨酸反应性基团，包括马来酰亚胺基团、α-卤代乙酰胺、吡啶基二硫化物和乙烯基亚砜；和酮反应性基团，包括羟胺、肼和酰肼。特别优选的官能团柄h
1b
包括琥珀酸酯、五氟苯基酯和马来酰亚胺基团。然后这些基团可以与靶向部分的所述官能团反应以产生如本文所定义的缀合物。或者，官能团柄可以是nh2、oh、c(＝o)oh或c(＝o)nh2基团，它们可以任选地进一步衍生以产生选自以下的官能团柄：赖氨酸反应性基团，包括琥珀酸酯、五氟苯基酯、β-内酰胺酰胺、异氰酸酯和异硫氰酸酯；叠氮化物反应性基团，包括炔烃和应变炔烃；半胱氨酸反应性基团，包括马来酰亚胺基团、α-卤代乙酰胺、吡啶基二硫化物和乙烯基亚砜；和酮反应性基团，包括羟胺、肼和酰肼。然后这些基团可以与所述靶向部分的官能团反应以产生如本文所定义的缀合物。
[0549]
优选的连接基l1的链lc包括：
[0550][0551][0552]
优选地，n是0、1、2、3、4、5、6、7或8。
[0553]
应当理解，具有立体中心的lc的上述定义优选还涵盖立体异构体，即所示结构的对映异构体和非对映异构体。
[0554]
优选地，连接基l1具有结构h
1a-l
c-h
1b
，其中h
1a
、lc和h
1b
如上定义，并且其中lc的定义优选还包括可能的立体异构体。
[0555]
进一步优选的连接基l1的链lc包括：
[0556][0557]
优选地，n是0、1、2、3、4、5、6、7或8。
[0558]
应当理解，具有立体中心的lc的上述定义优选还涵盖立体异构体，即所示结构的对映异构体和非对映异构体。
[0559]
优选地，连接基l1具有结构h
1a-l
c-h
1b
，其中h
1a
、lc和h
1b
如上定义，并且其中lc的定义优选地还包括可能的立体异构体。
[0560]
在化合物-连接基构建体的一个实施方案中，连接基l1具有结构h
1a-l
c-h
1b
并选自
[0561][0562]
其中
[0563]
lc选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的链lc单元，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；和
[0564]
§
标记与式(i)化合物的连接；和
[0565]
x表示离去基团，其选自
[0566]
[0567]
并且其中优选lc选自：
[0568][0569][0570]
优选地，n是0、1、2、3、4、5、6、7或8。
[0571]
应当理解，具有立体中心的lc的上述定义优选还涵盖立体异构体，即所示结构的对映异构体和非对映异构体。
[0572]
在化合物-连接基构建体的一个实施方案中，连接基l1具有结构h
1a-l
c-h
1b
并选自
[0573][0574]
其中
[0575]
lc为选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的链lc单元，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；和
[0576]
§
标记与式(i)化合物的连接；和
[0577]
x表示离去基团，其选自
[0578][0579]
并且其中优选lc选自：
[0580]
[0581][0582]
优选地，n是0、1、2、3、4、5、6、7或8。
[0583]
应当理解，具有立体中心的lc的上述定义优选还涵盖立体异构体，即所示结构的对映异构体和非对映异构体。
[0584]
在化合物-连接基构建体的优选实施方案中，连接基l1选自
[0585]
[0586][0587]
其中
[0588]
§
标记与式(i)化合物的连接。
[0589]
优选地，n是0、1、2、3、4、5、6、7或8。
[0590]
优选地，l1的上述定义还涵盖立体异构体，即所示结构的对映异构体和非对映异构体。
[0591]
如上所解释的，连接基l1与式(i)化合物的连接优选通过式i化合物的前羟基或氨基的氧或氮原子建立，其特别优选连接至式(i)化合物的取代基r2、r4、r5或rn或其部分。连
接基l1可以是可裂解的或不可裂解的。可裂解的连接基可能对酶敏感并且可以被酶如蛋白酶裂解。
[0592]
在本发明缀合物的一个实施方案中，式(i)化合物和连接基l2之间的共价键通过式(i)化合物的官能团与连接基l2的官能团柄的反应建立，并且靶向部分t和连接基l2之间的共价键通过靶向部分t的官能团与连接基l2的官能团柄的反应建立；并且优选地，式(i)化合物的官能团连接至取代基r2、r4、r5或rn或其部分，使得在一端共价结合靶向部分的连接基l2在另一端将根据以下结构中的任一种共价结合到式(i)化合物上：
[0593][0594]
连接至取代基r2、r4、r5或rn或其部分的官能团优选包含氨基或羟基。该官能团通过与连接基l2的前体的官能团，优选苯甲醇基团、碳酸酯基团、氨基甲酸酯基团、羧酸基团、羧酸酯基团、羧酰胺基团、脲基团或内酰胺基团在合适的条件下反应建立与连接基l2的共价键。因此，共价键优选为式(i)化合物的氧原子或氮原子与连接基l2的碳原子之间的键。换言之，式(i)化合物的羟基或氨基处的氢原子被连接基l2的碳原子取代。连接基l2进一步建立与靶向部分t的连接。靶向部分t的官能团，优选赖氨酸基、叠氮基、半胱氨酸基或酮基，通过与连接基l2的前体的官能团，优选选自赖氨酸反应性基团，包括琥珀酸酯、五氟苯基酯、β-内酰胺酰胺、异氰酸酯和异硫氰酸酯；叠氮化物反应性基团，包括炔烃和应变炔烃；半胱氨酸反应性基团，包括马来酰亚胺基团、α-卤代乙酰胺、吡啶基二硫化物和乙烯基亚砜；和酮反应性基团，包括羟胺、肼和酰肼，在合适的条件下反应建立与连接基l2的共价键。因此，连接基l2和靶向部分t之间的共价键优选是靶向部分t的氮、硫或碳原子与连接基l2的碳原子之间的键。
[0595]
结果，获得了式(i)-l
2-t的缀合物，并且如果几个式(i)化合物连接到靶向部分，则获得式[(i)-l2]
a-t的缀合物，其中a是1至30的整数，并且其中式(i)化合物的氮或氧原子形成与l2的连接，并且其中靶向部分t的氮、硫或碳原子形成与l2的连接，使得连接基l2在式(i)化合物与靶向部分t之间形成共价连接。连接基l2优选具有结构h
1a-l
c-h
2b
，其中h
1a
是官能团柄，其与式(i)化合物，优选其氮或氧原子共价结合，并且其中h
2b
是官能团柄，其与靶向
部分t，优选其氮、硫或碳原子共价结合。
[0596]
在一个实施方案中，连接至取代基r2、r4、r5或rn的或其部分，并且形成与连接基l2的官能团柄h
1a
的共价键的式(i)化合物的官能团选自以下选项：
[0597]
或者
[0598]
r2为nhrd、nhr
d-c
1-c
4-烷基、nh-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nhrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nhrd，或8至10元饱和杂双环基，其中前述杂双环包含至少一个氮原子和任选地一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[0599]
或者
[0600]
r2为nrfc(＝o)re，其中re为nhr
d-c
1-c
4-烷基；
[0601]
或者
[0602]rn
为nhr
d-c
1-c
4-烷基；
[0603]
或者
[0604]
取代基r2、r4、r5、rn中的任一个带有取代基r
x
，其中
[0605]rx
为oh、nhrd、nhr
d-c
1-c
4-烷基或ho-c
1-c
4-烷基；
[0606]
并且优选地
[0607]
或者
[0608]
r2为nh2、nh
2-c
1-c
2-烷基、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-n(ch3)2、o-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2或o-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3；
[0609]
或者
[0610]
r2为nhc(＝o)re，其中re为nh
2-c
1-c
4-烷基；
[0611]
或者
[0612]rn
为nh
2-c
1-c
3-烷基；
[0613]
或者
[0614]
取代基r2、r4或r5中的任一个带有取代基r
x
，其中
[0615]rx
为oh、nh2、nhch3、nh
2-c
1-c
2-烷基或ho-c
1-c
2-烷基。
[0616]
在本发明的缀合物的一个实施方案中，连接基l2包含
[0617]
(i)具有2至100个选自碳、氮、氧和硫原子的原子的链lc，其可以被5至10元芳基和杂芳基和/或3至8元饱和碳环基或杂环基中断，其中上述杂芳基和杂环基包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中链中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[0618]
并且优选地
[0619]
选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的单元的链lc，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[0620]
(ii)官能团柄h
1a
，其与式(i)化合物共价结合；
[0621]
(iii)官能团柄h
2b
，其与靶向部分t共价结合。
[0622]
优选的连接基l2的官能团柄h
1a
基于选自苯甲醇基团、碳酸酯基团、氨基甲酸酯基团、氨基甲酸酯基团、羧酸基团、羧酸酯基团、羧酰胺基团、脲基团和内酰胺基团的官能团，通过与式(i)化合物的合适官能团，特别是式(i)化合物的羟基或氨基反应建立与式(i)化合物的共价键。
[0623]
优选的连接基l2的官能团柄h
2b
基于选自赖氨酸反应性基团，包括琥珀酸酯、五氟苯基酯、β-内酰胺酰胺、异氰酸酯和异硫氰酸酯；叠氮化物反应性基团，包括炔烃和应变炔烃；半胱氨酸反应性基团，包括马来酰亚胺基团、α-卤代乙酰胺、吡啶基二硫化物和乙烯基亚砜；和酮反应性基团，包括羟胺、肼和酰肼的官能团通过与靶向部分t的合适官能团，特别是赖氨酸基、叠氮基、半胱氨酸基或酮基反应，建立与靶向部分t的共价键。
[0624]
优选的连接基l2的链lc包括：
[0625]
[0626][0627]
优选地，n是0、1、2、3、4、5、6、7或8。
[0628]
应当理解，具有立体中心的lc的上述定义优选还涵盖立体异构体，即所示结构的对映异构体和非对映异构体。
[0629]
优选地，连接基l2具有结构h
1a-l
c-h
2b
，其中h
1a
、lc和h
2b
如上定义，并且其中lc的定义优选还涵盖可能的立体异构体。
[0630]
进一步优选的连接基l2的链lc包括：
[0631][0632]
优选地，n是0、1、2、3、4、5、6、7或8。
[0633]
应当理解，具有立体中心的lc的上述定义优选还涵盖立体异构体，即所示结构的
对映异构体和非对映异构体。
[0634]
优选地，连接基l2具有结构h
1a-l
c-h
2b
，其中h
1a
、lc和h
2b
如上定义，并且其中lc的定义优选还涵盖可能的立体异构体。
[0635]
在缀合物的一个实施方案中，连接基l2具有结构h
1a-l
c-h
2b
并且选自：
[0636]
其中
[0637]
lc选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的单元的链lc，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；和
[0638]
§
标记与式(i)化合物的连接；和
[0639]
$标记与靶向部分t的连接；和
[0640]
并且其中优选lc选自：
[0641][0642]
优选地，n是0、1、2、3、4、5、6、7或8。
[0643]
应当理解，具有立体中心的lc的上述定义优选还涵盖立体异构体，即所示结构的对映异构体和非对映异构体。
[0644]
在缀合物的一个实施方案中，连接基l2具有结构h
1a-l
c-h
2b
并且选自：
[0645][0646]
其中
[0647]
lc选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的单元的链lc，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[0648]
§
标记与式(i)化合物的连接；和
[0649]
$标记与靶向部分t的连接。
[0650]
并且其中优选lc选自：
[0651][0652]
[0653]
优选地，n是0、1、2、3、4、5、6、7或8。
[0654]
应当理解，具有立体中心的lc的上述定义优选还涵盖立体异构体，即所示结构的对映异构体和非对映异构体。
[0655]
如上所解释的，连接基l2与式(i)化合物的连接优选通过式i化合物的前羟基或氨基的氧或氮原子建立，其特别优选连接至式(i)化合物的取代基r2、r4、r5或rn或其部分。另一方面，连接基l2与靶向部分t的连接优选通过靶向部分t的前赖氨酸基、半胱氨酸基、叠氮基或酮基的氮、硫或碳原子建立。连接基l2可以是可裂解的或不可裂解的。可裂解的连接基可能对酶敏感并且可以被酶如蛋白酶裂解。
[0656]
如上所述，本发明的缀合物尤其包含靶向部分t。这方面的优选实施方案在下文中定义。
[0657]
在本发明缀合物的一个实施方案中，靶向部分t包含抗体、抗体片段、基于核酸的分子、碳水化合物、肽或修饰肽，特别是抗体或抗原结合片段，其旨在靶向人表皮生长因子受体(egfr)、纤溶酶原激活剂、细胞毒性t淋巴细胞相关抗原(ctla)，例如ctla-4、pd-1、pd-l1、kir、tim3、vista、tigit、lag3、ox40、ror1、ror2、血管内皮生长因子(vegf)、成纤维细胞生长因子受体(fgfr)、血小板衍生的生长因子(pdgf)、转化生长因子(tgf)、神经营养因子、神经生长因子、血小板衍生的生长因子(pdgf)、白细胞介素受体、转化生长因子(tgf)、雌激素受体、孕激素受体、c-kit、cmet、erbb2/her2、erbb3/her3、erbb4/her4、cd3、cd20、cd22、cd30、cd33、cd40、cd47、cd79、cd123、cd133、cd166、cd137、间皮素蛋白、epcam、flt3、psma、psca、steap、cea、叶酸受体、cd39/cd73受体、腺苷受体、slc34a2基因产物、epha2酪氨酸激酶、muc1/muc16细胞表面抗原、alk、afp、bcr-abl、pap。
[0658]
在另一个实施方案中，靶向部分t包含单价、二价或多价的抗体或其抗原结合片段，或包含单克隆或多克隆抗体或其抗原结合片段的抗体或其抗原结合片段。
[0659]
单价抗体是包含由二硫桥与轻链(l)缔合的重(h)链的二聚体(hl)。二价抗体是包含由至少一个二硫桥缔合的两个二聚体的四聚体(h2l2)。多价抗体也可以例如通过连接多个二聚体来产生。抗体分子的基础结构由两条一致的轻链和两条一致的重链组成，轻链和重链非共价缔合并且可以由二硫键连接。每个重链和轻链含有约110个氨基酸的氨基端可变区，和链剩余部分中的恒定序列。可变区包括若干高变区或互补决定区(cdr)，高变区或互补决定区形成抗体分子的抗原结合位点并决定其对抗原或其变体或片段(例如表位)的特异性。在重链和轻链的cdr的两侧上是构架区，构架区是锚定cdr和cdr取向的氨基酸的相对保守序列。抗体片段可以包括双特异性抗体(bsab)或嵌合抗原受体(car)。
[0660]
恒定区由五个重链序列(μ、γ、ζ、α或ε)之一和两个轻链序列(κ或λ)之一组成。重链恒定区序列决定抗体的同型和分子的效应子功能。
[0661]
优选地，抗体或其抗原结合片段是分离或纯化的。
[0662]
在一个优选的实施方案中，抗体或其抗原结合片段包括多克隆抗体或其抗原结合片段。抗体或其抗原结合片段可以在兔、小鼠或大鼠中产生。
[0663]
在另一个优选的实施方案中，抗体或其抗原结合片段包括单克隆抗体或其抗原结合片段。优选地，抗体是人类抗体。如本文所用，术语“人类抗体”可以意指包含基本上与在展现免疫特异性的特定人类抗体中所发现相同的重链和轻链cdr氨基酸序列的抗体，例如单克隆抗体。基本上与重链或轻链cdr相同的氨基酸序列在与参考序列相比较时展现相当
大量的序列同一性。此类同一性已确定性地已知为或可识别为表示特定人类抗体的氨基酸序列。基本上，相同的重链和轻链cdr氨基酸序列可以具有例如氨基酸的少量修饰或保守取代。
[0664]
术语“人类单克隆抗体”可以包括例如通过重组方法产生(例如通过噬菌体库、淋巴细胞或融合瘤细胞产生)的具有基本上或全部人类cdr氨基酸序列的单克隆抗体。
[0665]
术语“人源化抗体”可以意指蛋白质序列已经修饰以增加其与人类中天然产生的抗体的相似性的来自非人类物种(例如小鼠或兔)的抗体。
[0666]
抗体可以是重组抗体。术语“重组人类抗体”可以包括使用重组dna技术产生的人类抗体。
[0667]
术语“抗原结合区”可以意指对其标靶抗原或其变体或片段具有特异性结合亲和力的抗体区域。优选地，所述片段是表位。结合区可以是高变cdr或其功能性部分。术语cdr的“功能性部分”可以意指cdr内对标靶抗原展示特异性亲和力的序列。cdr的功能性部分可以包含特异性结合于标靶抗原或其片段的配体。
[0668]
术语“cdr”可以意指可变重链和轻链中的高变区。抗体的每个重链和轻链中可存在一个、两个、三个或更多个cdr。通常，每个链上存在至少三个cdr，所述cdr在配置在一起时形成抗原结合位点，即抗原结合或特异性反应的三维组合位点。然而，假定一些抗体的重链中可存在四个cdr。
[0669]
cdr的定义还包括当彼此比较时重叠的氨基酸残基或氨基酸残基子集。涵盖特定cdr或其功能性部分的精确残基数目将取决于cdr的序列和尺寸而变化。在给出抗体的可变区氨基酸序列下，本领域的技术人员可以常规确定哪些残基包含特定cdr。
[0670]
术语抗体的“功能片段”可以意指保持功能活性的抗体部分。功能活性可以是例如抗原结合活性或特异性。功能活性还可以是例如由抗体恒定区提供的效应子功能。术语“功能片段”还意图包括例如通过人类单克隆抗体的蛋白酶消化或还原和通过本领域的技术人员已知的重组dna方法产生的片段。人类单克隆抗体功能片段包括例如单独的重链或轻链和其片段，例如vl、vh和fd；单价片段，例如fv、fab和fab
′
；二价片段，例如f(ab
′
)2；单链fv(scfv)；以及fe片段。
[0671]
术语“vl片段”可以意指包括轻链可变区(包括cdr)的全部或部分的人类单克隆抗体的轻链片段。vl片段可以进一步包括轻链恒定区序列。
[0672]
术语“vh片段”可以意指包括重链可变区(包括cdr)的全部或部分的人类单克隆抗体的重链的片段。
[0673]
术语“fd片段”可以指与第一重链恒定区偶联的重链可变区，即vh和ch-1。“fd片段”不包括轻链，或重链的第二和第三恒定区。
[0674]
术语“fv片段”可以意指包括重链和轻链可变区的全部或部分并缺乏重链和轻链恒定区的人类单克隆抗体的单价抗原结合片段。重链和轻链的可变区包括例如cdr。举例来说，fv片段包括重链和轻链二者的约110个氨基酸的氨基端可变区的全部或部分。
[0675]
术语“fab片段”可以意指大于fv片段的人类单克隆抗体的单价抗原结合片段。举例来说，fab片段包括重链和轻链的可变区以及第一恒定结构域的全部或部分。因此，fab片段另外包括例如重链和轻链的约110个到约220个氨基酸残基。
[0676]
术语“fab’片段”可以意指大于fab片段的人类单克隆抗体的单价抗原结合片段。
举例来说，fab’片段包括轻链全部、重链可变区全部和重链的第一恒定结构域和第二恒定结构域的全部或部分。举例来说，fab’片段可以另外包括重链的氨基酸残基220到330中的一些或全部。
[0677]
术语“f(ab’)2片段”可以意指人类单克隆抗体的二价抗原结合片段。f(ab’)2片段包括例如两个重链和两个轻链的可变区的全部或部分，并且可以进一步包括两个重链和两个轻链的第一恒定结构域的全部或部分。
[0678]
术语“单链fv(scfv)”可以意指重链(vh)和轻链(vl)的可变区通过短连接肽连接的融合物。
[0679]
术语“双特异性抗体(bsab)”可以意指包含两个通过短连接肽相互连接的scfv的双特异性抗体。
[0680]
本领域的技术人员知道抗体的片段的精确边界是不重要的，只要片段维持功能活性即可。使用众所周知的重组方法，本领域的技术人员可以将多核苷酸序列工程化以表达具有特定应用所需的任何终点的功能片段。抗体的功能片段可以包含以下片段或由以下片段构成：具有与人类抗体基本上相同的重链和轻链可变区的片段。
[0681]
其抗原结合片段可以包含以下片段或由选自以下的片段构成：vh、vl、fd、fv、fab、fab
′
、scfv、f(ab
′
)2和fc片段。
[0682]
其抗原结合片段可以包含以下或由以下构成：vl的任一抗原结合区序列、vh的任一抗原结合区序列或者人类抗体的vl和vh抗原结合区的组合。vh和vl抗原结合区序列的适当数目和组合可以通过本领域的技术人员，根据抗原结合片段的所需亲和力和特异性以及预期用途来确定。抗体的功能片段或抗原结合片段容易使用本领域的技术人员众所周知的方法产生和分离。此类方法包括例如蛋白水解方法、重组方法和化学合成。用于分离功能片段的蛋白水解方法包括使用人类抗体作为起始物质。适合于人类免疫球蛋白的蛋白分解的酶可以包括例如木瓜蛋白酶和胃蛋白酶。本领域的技术人员容易根据例如需要单价还是二价片段来选择适当酶。举例而言，木瓜蛋白酶裂解产生结合抗原的两个单价fab’片段和fc片段。胃蛋白酶裂解例如产生二价f(ab’)片段。本发明的f(ab’)2片段可以使用例如dtt或2-巯基乙醇进一步还原以产生两个单价fab’片段。
[0683]
蛋白水解产生的抗体的功能或抗原结合片段可以通过亲和力和柱色谱方法来纯化。举例来说，未消化的抗体和fe片段可以通过结合于蛋白a来去除。另外，功能片段可以根据其电荷和尺寸，使用例如离子交换和凝胶过滤色谱法来纯化。此类方法是本领域的技术人员众所周知的。
[0684]
抗体或其抗原结合片段可以通过重组方法产生。优选地，最初分离编码抗体重链和轻链的所需区域的多核苷酸。此类区域可以包括例如重链和轻链的可变区的全部或部分。优选地，此类区域可以尤其包括重链和轻链的抗原结合区，优选抗原结合位点，最优选cdr。
[0685]
如本文所用，术语“免疫特异性”可以意指结合区通过与标靶抗原或其可变区或片段特异性结合而能够与其免疫反应。抗体或其抗原结合片段可以选择性地与抗原相互作用，亲和力常数是约10-5
至10-13
m-1
、优选10-6
至10-9
m-1
、甚至更优选10-10
至10-12
m-1
。
[0686]
术语“表位”可以指抗原的任何区域，其能够引发抗体或其抗原结合片段的结合区域并与其结合。
[0687]
在优选的实施方案中，t是抗体或其片段，优选选自已经应用于免疫肿瘤学领域的抗体。示例性抗pd1抗体包括lambrolizumab(mk-3475,merck)、纳武利尤单抗(bms-936558,bristol-myers squibb)、amp-224(merck)和pidilizumab(ct-011,curetech ltd.)。已知的抗pdl1抗体还包括mdx-1105(medarex)、medi4736(medimmune)、mpdl4280a(genentech)和bms-936559(bristol-myers squibb)。示例性的抗ctla4抗体包括易普利姆玛(yervoy,bristol-myers squibb)和tremelimumab(pfizer)。示例性抗erbb2/her2抗体包括曲妥珠单抗(roche)、帕妥珠单抗(genentech)、margetuximab(macrogenics)和ht-19(mersana therapeutics)。在优选的实施方案中，t是曲妥珠单抗或其片段或衍生物。
[0688]
在一个实施方案中，t包括基于核酸的分子。核酸碱基分子可以是适体。基于核酸的分子可以靶向cd33/cd34或psma肿瘤抗原，或本领域技术人员已知的任何其他肿瘤抗原，例如orava,e.,biochem.biophys.acta,2010,1798,2190-2200中描述的。
[0689]
适体是核酸或肽分子，其推定具有特定的、序列依赖性的形状，并基于适体和配体之间的锁匙配合(lock-and-key fit)与特定的靶向配体结合。通常，适体可包含单链或双链dna分子(ssdna或dsdna)或单链rna分子(ssrna)。肽适体由短的可变肽结构域组成，两端连接到蛋白质骨架上。适体可用于结合核酸和非核酸靶标。
[0690]
可以从随机序列库中选择合适的适体，从中可以鉴定出以高亲和力与所选抗原结合的特定适体。具有所需特异性的适体的产生和选择的方法对于本领域技术人员来说是众所周知的，并且包括selex(配体通过指数富集的系统性进化)过程。简而言之，大量的寡核苷酸库产生，其允许通过体外选择的迭代过程分离大量功能性核酸，随后通过聚合酶链反应进行扩增。优选的用于产生适体的方法包括在wo 2004/042083中公开的那些。
[0691]
在替代实施方案中，靶向部分t包含肽或经修饰的肽。肽或经修饰的肽可包含rgd序列基序，如mousavizadeh,a.,colloids surfaces b.,2017,158,507-517中所述。
[0692]
本发明的化合物-连接基构建体和缀合物可以通过应用下文概述的标准合成方案获得。
[0693]
本发明的化合物-连接基构建体可以根据以下方案基于酰胺键的形成和随后的衍生反应来合成：
[0694][0695]
将被活化的用于酰胺键形成的聚乙二醇化羧酸，即如上述方案中描述的包含聚乙二醇链的羧酸(如“x”所示，其可以是如上定义的离去基团x-1或x-2)与式(i)化合物的氨基反应形成中间体酰胺。活化酯(r)的形成可以通过以下实现：在偶联剂例如二异丙基碳二亚胺(dic)的存在下，中间体含酰胺的羧酸使用试剂例如n-羟基琥珀酰亚胺或五氟苯酚反应实现以提供化合物-连接基构建体，其可以然后进一步与例如与靶向部分t的赖氨酸基团反应以提供根据本发明的缀合物。
[0696]
或者，本发明的化合物-连接基构建体可以根据以下方案基于酰胺键的形成来合成：
[0697][0698]
活化的羧酸酯，例如上述方案中描述的羧酸酯，可以与式(i)化合物的氨基基团反应，得到化合物-连接基构建体形式的酰胺。马来酰亚胺基团允许通过与靶向部分t的半胱氨酸基团反应而与靶向部分t共价结合，从而提供根据本发明的缀合物。
[0699]
或者，羧酸可在酰胺键形成剂如二环己基碳二亚胺(dcc)的存在下与式(i)化合物的氨基偶联，以提供化合物-连接基构建体：
[0700][0701]
同样，马来酰亚胺基团通过与靶向部分t的半胱氨酸基团反应而实现与靶向部分t的共价结合，从而提供根据本发明的缀合物。
[0702]
或者，本发明的化合物-连接基构建体可以根据以下方案基于酰胺键的形成来合成：
[0703][0704]
可以使上述方案中描述的活化碳酸酯与式(i)化合物的氨基反应提供氨基甲酸酯(ii)作为化合物-连接基构建体。马来酰亚胺基团允许通过与靶向部分t的半胱氨酸基团反应而与靶向部分t共价结合，从而提供根据本发明的缀合物。
[0705]
通常，本发明的连接基和靶向部分t之间的共价键可以例如通过靶向部分的半胱氨酸或赖氨酸基团与来自连接基的马来酰亚胺或nhs酯衍生基团的反应形成，而另一个共价键是式(i)化合物的合适官能团与来自连接基的羟基、氨基、碳酸酯基、氨基甲酸酯基、酯基、酰胺基、脲基或内酰胺基团反应的结果。
[0706]
本领域技术人员能够通过类似方法或通过组合本领域技术人员已知的其他方法来制备各种化合物-连接基构建体和缀合物。还应理解，本领域技术人员将能够以与本文所述类似的方式，通过使用合适的起始材料并根据需要修改合成路线来制备化合物-连接基构建体和缀合物。起始材料和试剂可以从市售材料获得或根据本领域技术人员已知的来源合成。
[0707]
定义
[0708]
如本文所用，术语“化合物-连接基构建体”是指包含如本文定义的式(i)化合物和如本文定义的连接基l1的构建体，它们如上文详细解释地彼此共价结合。
[0709]
如本文所用，术语缀合物是指包含式(i)化合物、连接基l2和靶向部分t的缀合物，其中连接基l2通过共价键将式(i)化合物连接至靶向部分t。靶向部分可以具有通过连接基l2连接的1至30个式(i)化合物，其中连接基l2在每种情况下可以是相同的，或者可以存在不同的连接基l2。
[0710]
如本文所用，术语“连接基”可以指将式(i)化合物与靶向部分t共价连接的短的、柔性的、刚性的、可裂解的、不可裂解的、亲水的或疏水的链。可裂解的连接基可以被蛋白酶
等酶裂解。可裂解连接基可以是缬氨酸-瓜氨酸连接基或缬氨酸-丙氨酸连接基。
[0711]
如本文所用，术语“靶向部分”是指具有靶向能力以使其可以特异性靶向特定抗原，特别是肿瘤抗原的部分。靶向在该背景中意指该部分特异性结合特定抗原或对特定抗原具有免疫反应性。优选的抗原包括蛋白质，优选只能在肿瘤细胞中或肿瘤细胞上发现的蛋白质。合适的靶向部分包括抗体、抗体片段、基于核酸的分子、碳水化合物、肽或修饰肽。根据本发明的优选靶向部分是抗体或抗体片段。因此，根据本发明的优选缀合物是所谓的抗体-药物缀合物(adc)。靶向部分可以将缀合物的式(i)化合物特异性引导至肿瘤细胞，以便以细胞特异性方式递送式(i)化合物。该原理在polakis,p.,pharmacol.revs.,2016,68,3-19中有所描述。如果靶向部分和式(i)化合物之间的连接基被设计为可裂解的，则式(i)化合物将扩散到细胞中并接触sting蛋白。
[0712]
如本文所用，术语“抗体药物缀合物”(“adc”)是指如本文定义的缀合物，其中靶向部分t是抗体或抗体片段。
[0713]
如本文所用，术语“抗体”可以指特异性结合特定抗原或对特定抗原具有免疫反应性的免疫球蛋白分子。抗体可以包括例如多克隆、单克隆、基因工程抗体及其抗原结合片段。抗体可以是例如鼠抗体、嵌合抗体、人源化抗体、异源偶联抗体、双特异性抗体、双抗体、三抗体或四抗体。抗原结合片段可以包括，例如，fab'、f(ab')2、fab、fv、rigg和scfv。
[0714]
如本文所用，“肿瘤抗原”可以是与肿瘤或癌症呼叫相关的抗原物质，并且可以在宿主中触发免疫反应。
[0715]
抗原可以引发免疫反应。抗原可以是蛋白质、多糖、脂质或糖脂，它们可以被免疫细胞识别，例如t细胞或b细胞。免疫细胞暴露于这些抗原中的一种或多种可引发快速的细胞分裂和分化反应，从而形成暴露的t细胞和b细胞的克隆物。b细胞可以分化成浆细胞，浆细胞随之可以产生选择性结合抗原的抗体。
[0716]
在癌症中，一般有四组肿瘤抗原：(i)病毒性肿瘤抗原，其对于任何此类病毒性肿瘤都是相同的，(ii)致癌性肿瘤抗原，其对患者和肿瘤而言可以具有特异性，(iii)移植类型的同种抗原或肿瘤特异性移植抗原，它们在所有个体类型的肿瘤中可能不同，但在由相同病毒引起的不同肿瘤中可能相同；和(iv)胚胎抗原。
[0717]
由于肿瘤抗原的发现，肿瘤抗原在开发可以特异性靶向癌症的新癌症治疗方法中变得重要。这导致了针对这些肿瘤抗原的抗体的开发。
[0718]
除了开发用于癌症治疗的针对肿瘤抗原的抗体外，还开发了靶向免疫细胞以增强免疫反应的抗体。例如，作为cd40激动剂的抗cd40抗体可用于激活树突状细胞以增强免疫反应。
[0719]
术语“式(i)化合物”还涵盖其盐、立体异构体、互变异构体或n-氧化物。式(i)化合物是根据本发明的化合物-连接基构建体和缀合物的基本部分。关于术语adc，式(i)化合物代表抗体-药物缀合物的药物部分。
[0720]
式(i)化合物可以是无定形的或可以以一种或多种不同的晶态(多晶型物)存在，其可以具有不同的宏观性质例如稳定性或显示不同的生物学性质例如活性。本发明涵盖式(i)化合物的无定形和结晶形式、式(i)化合物的不同晶态的混合物以及它们的无定形或结晶盐。
[0721]
式(i)化合物的盐优选为药学上可接受的盐，例如包含在美国fda橙皮书数据库中
列出的药物产品中存在的抗衡离子的盐。它们可以以常规方式形成，例如，如果根据本发明的化合物具有碱性官能团，则通过使化合物与所讨论的阴离子的酸反应，或通过使根据本发明的酸性化合物与合适的碱反应来形成。
[0722]
合适的阳离子抗衡离子特别是碱金属离子，优选锂、钠和钾，碱土金属离子，优选钙、镁和钡，以及过渡金属离子，优选锰、铜、银、锌和铁，以及铵(nh
4
)和取代铵，其中1到4个氢原子被c
1-c
4-烷基、c
1-c
4-羟基烷基、c
1-c
4-烷氧基、c
1-c
4-烷氧基-c
1-c
4-烷基、羟基-c
1-c
4-烷氧基-c
1-c
4-烷基、苯基或苄基取代。取代的铵离子的实例包括甲基铵、异丙基铵、二甲基铵、二异丙基铵、三甲基铵、四甲基铵、四乙基铵、四丁基铵、2-羟基-乙基铵、2-(2-羟基乙氧基)乙基-铵、双(2-羟基乙基)铵、苄基三甲基铵和苄基三乙基铵，此外还有1,4-哌嗪、葡甲胺、苄星和赖氨酸的阳离子。
[0723]
合适的阴离子抗衡离子特别是氯离子、溴离子、硫酸氢根、硫酸根、磷酸二氢根、磷酸氢根、磷酸根、硝酸根、碳酸氢根、碳酸根、六氟硅酸根、六氟磷酸根、苯甲酸根和c
1-c
4-链烷酸，优选为甲酸、乙酸、丙酸和丁酸，还有乳酸、葡萄糖酸的阴离子，以及琥珀酸、草酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸和柠檬酸等多元酸的阴离子，以及苯磺酸(besylate)、甲苯磺酸(对甲苯磺酸)、萘磺酸(萘-2-磺酸)、甲磺酸(mesylate)、乙磺酸(乙磺酸)和乙二磺酸等磺酸根阴离子。它们可以通过根据本发明的具有碱性官能团的化合物与相应阴离子的酸反应来形成。
[0724]
取决于取代模式，式(i)化合物可具有一个或多个手性中心，包括轴向手性。本发明提供式(i)化合物的纯对映异构体或纯非对映异构体及其混合物，包括外消旋混合物。合适的式(i)化合物还包括所有可能的几何立体异构体(顺式/反式异构体或e/z异构体)及其混合物。e/z-异构体可以存在于例如烯烃、碳-氮双键或酰胺基团。
[0725]
如果式(i)化合物中存在取代基，则可以形成互变异构体，这允许形成互变异构体，例如酮-烯醇互变异构体、亚胺-烯胺互变异构体、酰胺-亚胺酸互变异构体等。此外，包含含有＝o取代基的6元环的核结构主要允许酮-烯醇互变异构化。
[0726]
术语“n-氧化物”包括本发明的任何化合物，其具有至少一个被氧化成n-氧化物部分的叔氮原子。
[0727]
如本文所用，术语“取代的”是指与指定原子结合的氢原子被特定的取代基取代，条件是该取代产生稳定的或化学上可行的化合物。除非另有说明，被取代的原子可以具有一个或多个取代基并且每个取代基是独立选择的。
[0728]
术语“可取代的”，当用于指定原子时，是指连接到该原子上的是氢，它可以被合适的取代基替换。
[0729]
关于上述术语“可取代的”，特别是关于“其中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基取代”的表述，应理解该术语涵盖所有可能的选项，例如碳和杂原子独立地未被取代或被取代或其中例如仅碳或仅杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基取代。
[0730]
当提到某些原子或部分被“一个或多个”取代基取代时，术语“一个或多个”旨在涵盖至少一个取代基，例如1至10个取代基，优选1、2、3、4或5个取代基，更优选1、2或3个取代基，最优选1或2个取代基。当关于某一部分没有明确提及术语“未取代的”或“取代的”时，所述部分被认为是未取代的。
[0731]
上述变量定义中提到的有机部分-如术语卤素-用于各个组成员的各个列举项的集体术语。前缀c
n-cm在每种情况下表示基团中可能的碳原子数。
[0732]
术语“卤素”在每种情况下表示氟、溴、氯或碘，特别是氟、氯或溴。
[0733]
如本文所用的术语“烷基”在每种情况下表示通常具有1至6个碳原子、优选1至5个或1至4个碳原子、更优选1至3个或1至2个或1个碳原子的直链或支链烷基。烷基的实例是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、2-丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、正己基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、1,1,2-三甲基丙基、1,2,2-三甲基丙基、1-乙基-1-甲基丙基和1-乙基-2-甲基丙基。
[0734]
如本文所用的术语“卤代烷基”在每种情况下表示通常具有1至6个碳原子，通常1至5或1至4个碳原子、优选1至3或1或2个碳原子的直链或支链烷基，其中该基团的氢原子部分或全部被卤素原子取代。优选的卤代烷基部分选自c
1-c
4-卤代烷基，更优选地选自c
1-c3卤代烷基或c
1-c2卤代烷基，特别地选自c
1-c2氟代烷基，如氟代甲基、二氟甲基、三氟甲基、1-氟乙基、2-氟乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、五氟乙基等。
[0735]
如本文所用的术语“烯基”在每种情况下表示通常具有2至6个、优选2至4个碳原子的不饱和烃基，其在任何位置包含至少一个碳-碳双键，例如，乙烯基(ethenyl，vinyl)、烯丙基(2-丙烯-1-基)、1-丙烯-1-基、2-丙烯-2-基、甲基烯丙基(2-甲基丙-2-烯-1-基)、2-丁烯基1-基、3-丁烯-1-基、2-戊烯-1-基、3-戊烯-1-基、4-戊烯-1-基、1-甲基丁-2-烯-1-基、2-乙基丙-2-烯-1-基等。如果关于双键的几何异构体是可能的，则本发明涉及e-和z-异构体。根据本发明的优选的烯基是末端烯基。乙烯基的键示例如下：
[0736][0737]
如本文所用的术语“卤代烯基”是指如上文定义的烯基，其中氢原子部分或全部被卤素原子替换。
[0738]
本文所用的术语“炔基”在每种情况下表示通常具有2至6个，优选2至5个或2至4个碳原子，更优选2至3个碳原子的不饱和烃基，其在任何位置包含至少一个碳-碳叁键。例如，乙炔基、炔丙基(2-丙炔-1-基)、1-丙炔-1-基、1-甲基丙-2-炔-1-基、2-丁炔-1-基、3-丁炔-1-基、1-戊炔-1-基、3-戊炔-1-基、4-戊炔-1-基、1-甲基丁-2-炔-1-基、1-乙基丙-2-炔-1-基等。
[0739]
本文所用的术语“卤代炔基”是指如上文定义的炔基，其中氢原子部分或全部被卤素原子替换。
[0740]
本文所用的术语“烷氧基”在每种情况下表示通过氧原子键合并通常具有1至6个碳原子，优选1至2个碳原子，更优选1个碳原子的直链或支链烷基。烷氧基的实例是甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、2-丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基等。
[0741]
如本文所用的术语“卤代烷氧基”在每种情况下表示具有1至6个碳原子、优选1至2个碳原子、更优选1个碳原子的直链或支链烷氧基，其中该基团的氢原子部分或完全被卤素原子，特别是氟原子替换。优选的卤代烷氧基部分包括c
1-卤代烷氧基，特别是c
1-氟烷氧基，如三氟甲氧基等。
[0742]
如本文所用，术语“烷氧基烷基”是指烷氧基，优选c
1-c
4-烷氧基，更优选c
1-c
2-烷
氧基，其通过烷基优选c
1-c
4-烷基，更优选c
1-c
2-烷基与分子的其余部分结合。优选的实例包括甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲氧基乙基和乙氧基乙基。
[0743]
如本文所用，术语“rco-烷基”是指rco基团，其通过烷基优选c
1-c
4-烷基，更优选c
1-c
2-烷基与分子的其余部分结合。如果rc是h，优选的实例包括羟甲基和羟乙基。其他实例包括如上定义的烷氧基烷基。
[0744]
如本文所用，术语“ho-烷基”是指oh基团，其通过烷基优选c
1-c
4-烷基，更优选c
1-c
2-烷基与分子的其余部分结合。优选的实例包括羟甲基和羟乙基。
[0745]
如本文所用，术语“nrcr
d-烷基”是指氨基烷基，即氨基nrcrd，其通过烷基，优选c
1-c
4-烷基，更优选c
1-c
2-烷基结合到分子的其余部分。如果rc和rd是h，则优选的实例包括氨基甲基和氨基乙基。
[0746]
如本文所用，术语“ho(c＝o)-c
1-c
4-烷基”是指羧基烷基，即羧基c(＝o)oh，其通过烷基，优选c
1-c
4-烷基，更优选c
1-c
2-烷基与分子的其余部分结合。优选的实例包括羧基甲基和羧基乙基。
[0747]
如本文所用，术语“环烷基”在每种情况下表示通常具有3至10或3至6个碳原子的单环脂环族基团，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基和环癸基或环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
[0748]
除非另有说明，术语“碳环”或“碳环基”通常包括包含3至9、优选4至8或3至6或5至7、更优选5或6个碳原子的3至9元，优选4至8元或3至6元或5至7元，更优选5或6元单环。碳环可以是饱和的、部分或完全不饱和的或芳族的，其中饱和是指仅存在单键，部分或完全不饱和是指一个或多个双键可以存在于合适的位置，同时不满足芳族的h
ü
ckel规则，而芳族意味着满足h
ü
ckel(4n 2)规则。因此，除非另有说明，否则术语“碳环”或“碳环基”可以特别包括环烷基、环烯基以及苯基。优选地，术语“碳环”涵盖环烷基和环烯基，例如环丙烷、环丁烷、环戊烷和环己烷环。
[0749]
术语“碳双环”或“碳双环基”通常包括包含6至14，优选7至12或8至10，更优选9或10个碳原子的6至14元、优选7至12元或8至10元、更优选9或10元的双环。碳双环可以是饱和的、部分或完全不饱和的或芳族的，其中饱和是指仅存在单键，部分或完全不饱和是指一个或多个双键可以存在于合适的位置，同时不满足芳族的h
ü
ckel规则，而芳族意味着满足h
ü
ckel(4n 2)规则。优选地，与碳双环相关的术语“芳族”是指双环部分的两个环都是芳族的，因此例如在10元芳族碳双环的情况下存在8个π电子。除非另有说明，术语“碳双环”或“碳双环基”因此可以特别涵盖双环烷基、双环烯基以及双环芳族基团，例如双环己烷(萘烷)、双环庚烷(如降冰片烷)、双环辛烷(如双环[2.2.2]辛烷、双环[3.2.1]辛烷或双环[4.2.0]辛烷)、双环壬烷(如双环[3.3.1]壬烷或双环[4.3.0]壬烷)、双环癸烷(如双环[4.4.0]癸烷)、双环十一烷(如双环[3.3.3]十一烷)、降冰片烯、萘等。优选地，碳双环是稠合碳双环，其优选是芳族的，例如萘。
[0750]
术语“碳环氧基”包括通过氧原子与分子的其余部分结合的碳环或碳环基。
[0751]
除非另有说明，术语“杂环”或“杂环基”通常包括3至9元、优选4至8元或5至7元、更优选5或6元，特别是6元单环。杂环可以是饱和的、部分或完全不饱和的或芳族的，其中饱和是指仅存在单键，部分或完全不饱和是指一个或多个双键可以存在于合适的位置，同时不满足芳族的h
ü
ckel规则，而芳族意味着满足h
ü
ckel(4n 2)规则。杂环通常包含一个或多个，
例如1、2、3或4个，优选1、2或3个选自n、o和s的杂原子作为环成员，其中作为环成员的s原子可以作为s、so或so2存在。其余的环成员是碳原子。在优选的实施方案中，杂环是芳族杂环，优选包含一个或多个，例如1、2、3或4个，优选1、2或3个选自n、o和s杂原子作为环成员的5或6元芳族杂环，其中作为环成员的s原子可能作为s、so或so2存在。下文结合“杂芳基”的定义提供了芳族杂环的实例。“杂芳基”(“hetaryls”或“heteroaryls”)由术语“杂环”涵盖。饱和或部分或完全不饱和的杂环通常包含1、2、3、4或5个，优选1、2或3个选自n、o和s的杂原子作为环成员，其中作为环成员的s原子可能作为s、so或so2存在。技术人员知道s、so或so2应理解如下：
[0752][0753]
此外，技术人员知道氧化形式的共振结构可是可能的。除非另有说明，饱和杂环通常包括包含3至9、优选4至8或5至7，更优选包括至少一个杂原子的5或6个原子的3至9元、优选4至8元或5至7元、更优选5或6元单环，例如吡咯烷、四氢噻吩、四氢呋喃、哌啶、四氢吡喃、二噁烷、吗啉或哌嗪。
[0754]
术语“杂环氧基”包括杂环或杂环基，其通过氧原子与分子的其余部分结合。
[0755]
除非另有说明，否则术语“杂双环”或“杂双环基”通常包括6至14元、优选7至12元或8至10元、更优选9或10元双环。杂双环可以是饱和的、部分或完全不饱和的或芳族的，其中饱和是指仅存在单键，部分或完全不饱和是指一个或多个双键可以存在于合适的位置，同时不满足芳族的h
ü
ckel规则，而芳族意味着满足h
ü
ckel(4n 2)规则。原则上，对于“芳族”而言，如果双环部分的两个环之一是芳族的而另一个是非芳族的就足够了。然而，就术语“芳族”而言，优选双环部分的两个环都是芳族的，因此，例如，在9或10元芳族杂双环的情况下存在8个π电子。杂双环通常包含一个或多个，例如1、2、3或4个，优选1、2或3个选自n、o和s杂原子作为环成员，其中作为环成员的s原子可能作为s、so或so2存在。其余的环成员是碳原子。杂双环的实例包括苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噁噻唑基、苯并噁二唑基、苯并噻二唑基、苯并噁嗪基、喹啉基、异喹啉基、嘌呤基、1,8-萘啶基、蝶啶基、吡啶并[3,2-d]嘧啶基，吡啶并咪唑基、三亚乙基二胺或奎宁环等。根据本发明优选的杂双环是芳族杂双环，例如苯并二唑、苯并噻唑、喹啉和异喹啉。
[0756]
术语“杂芳基”或“芳族杂环(aromatic heterocycle)”或“芳族杂环(aromatic heterocyclic ring)”包括包含1、2、3或4个选自n、o和s的杂原子作为环成员的单环5或6元芳族杂环，其中作为环成员的s原子可能作为s、so或so2存在。5或6元芳族杂环的实例包括吡啶基(pyridyl)(也称为吡啶基(pyridinyl))，即2-、3-或4-吡啶基，嘧啶基，即2-、4-或5-嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基，即3-或4-哒嗪基，噻吩基，即2-或3-噻吩基，呋喃基，即2-或3-呋喃基，吡咯基，即2-或3-吡咯基，噁唑基，即2-、3-或5-噁唑基，异噁唑基，即3-、4-或5-异噁唑基，噻唑基，即2-、3-或5-噻唑基，异噻唑基，即3-、4-或5-异噻唑基、吡唑基，即1-、3-、4-或5-吡唑基，即1-、2-、4-或5-咪唑基、噁二唑基，例如2-或5-[1,3,4]噁二唑基、4-或5-(1,2,3-噁二唑)基、3-或5-(1,2,4-噁二唑)基、2-或5-(1,3,4-噻二唑)基、噻二唑基,例如2-或5-(1,3,4-噻二唑)基、4-或5-(1,2,3-噻二唑)基、3-或5-(1,2,4-噻二唑基、三唑基，例如1h-、2h-或3h-1,2,3-三唑-4-基、2h-三唑-3-基、1h-、2h-或4h-1,2,4-三唑基和四唑基，即1h-或2h-四唑基。除非另有说明，否则术语“杂芳基”进一步涵盖如上定义的“芳族杂双环”。
[0757]
术语“芳基”或“芳族碳环”优选包括基于碳原子作为环成员的6元芳族碳环。优选的实例是苯基。除非另有说明，否则术语“芳基”进一步涵盖如上定义的“芳族碳双环”。
[0758]
如本文所用，术语“碳环基烷基”和“杂环基烷基”以及术语“芳基烷基”、“环烷基烷基”、“杂芳基烷基”等是指通过烷基，优选通过c
1-c
2-烷基与分子的其余部分结合的相应基团。优选的实例包括苄基(即苯甲基)、环己基甲基、吡啶基甲基和哌啶基甲基。
[0759]
如本文所用，术语“芳氧基”和“苄氧基”是指通过氧原子与分子的其余部分结合的相应基团。优选的实例包括苯氧基和苯甲氧基(即苄氧基)。
[0760]
如本文所用，术语“亚烷基”是指通常具有1至4个碳原子，例如1、2、3或4个碳原子的连接直链或支链亚烷基。亚烷基将某个基团桥接到分子的其余部分。优选的亚烷基包括亚甲基(ch2)、亚乙基(ch2ch2)、亚丙基(ch2ch2ch2)等。技术人员理解，如果提到例如ch2，四价碳原子有两个化合价用于形成桥(-ch
2-)。类似地，当提到例如ch2ch2时，每个碳原子都有一个剩余的化合价用于形成桥(-ch2ch
2-)。此外，当提到例如ch2ch2ch2时，每个末端碳原子都有一个剩余的化合价用于形成桥(-ch2ch2ch
2-)。
[0761]
如果术语“亚烷基”用于与例如nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd或o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd相关，应理解亚烷基链将nrcrd基团桥接到与分子的其余部分结合的nrf基团或氧原子。类似地，如果术语“亚烷基”用于与例如nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-c(＝o)re相关，应理解亚烷基链将c(＝o)re基团桥接到与分子的其余部分结合的nrf基团。
[0762]
术语
““
环状”部分可以指存在于式(i)化合物中并且如上定义的任何环状基团，例如环烷基、环烯基、碳环。
[0763]
如在说明书和权利要求书中使用的，除非上下文另有明确规定，“一”和“一个”的单数形式也包括相应的复数形式。这同样适用于本文使用的复数形式，除非上下文另有明确规定，否则复数形式也包括单数形式。
[0764]
本发明上下文中的术语“约”和“大约”表示本领域技术人员将理解以仍确保讨论的特征的技术效果的准确度区间。该术语通常表示与所示数值的偏差为
±
10％，优选为
±
5％。
[0765]
需要理解，术语“包括”不是限制性的。为了本发明的目的，术语“由
……
组成”被认为是术语“包括
……”
的优选实施方案。如果在下文中一个组被定义为包括至少一定数量的实施方案，这也意味着包括一个组，该组优选地仅由这些实施方案组成。
[0766]
如本文所用，术语“药学上可接受的赋形剂”是指通常包含在药物组合物中的化合物，其是技术人员已知的。合适的赋形剂的实例示例性的列出如下。通常，药学上可接受的赋形剂可以定义为药学上无活性的。
[0767]
术语“治疗”应理解为还包括“预防”选项。因此，无论何时在本文中提及“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”，这应理解为“治疗和/或预防(treatment and/or prophylaxis)”或“治疗和/或预防(treating and/or preventing)”。
[0768]
对本发明药物组合物的描述
[0769]
根据本发明的药物组合物可以被配制用于口服、经颊、鼻腔、直肠、局部、透皮或肠胃外应用。优选的非胃肠道途径包括粘膜(例如，口服、阴道、鼻腔、宫颈等)途径，其中口服应用可能是优选的。优选的肠胃外途径包括但不限于皮下、静脉内、肌肉内、动脉内、皮内、鞘内和硬膜外施用中的一种或多种。优选通过皮下、瘤内或瘤周途径施用。特别优选的是瘤
内施用。根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物应当以药学有效量应用，例如以如下文所述的量应用。
[0770]
本发明的药物组合物也可以指定为制剂或剂型。根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物在下文中还可指定为(药学)活性剂或活性化合物。
[0771]
药物组合物可以是固体或液体剂型，或者可以具有中间体，例如凝胶状特征，其尤其取决于施用途径。
[0772]
一般而言，本发明的剂型可以包含各种药学上可接受的赋形剂，这些赋形剂将根据剂型要实现的功能性进行选择。本发明含义中的“药学上可接受的赋形剂”可以是用于制备药物剂型的任何物质，包括包衣材料、成膜材料、填充剂、崩解剂、释放调节材料、载体材料、稀释剂、粘合剂和其他佐剂。典型的药学上可接受的赋形剂包括蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、淀粉和淀粉衍生物、乳糖等物质，以及硬脂酸镁等润滑剂、崩解剂和缓冲剂。
[0773]
术语“载体”表示药学上可接受的有机或无机载体物质，其与活性成分结合以促进应用。合适的药学上可接受的载体包括例如水、盐水溶液、醇、油，优选植物油、丙二醇、聚氧乙烯脱水山梨糖醇、聚乙烯-聚丙烯嵌段共聚物如泊洛沙姆188或泊洛沙姆407、聚乙二醇如聚乙二醇200、300、400、600等、明胶、乳糖、直链淀粉、硬脂酸镁、表面活性剂、香料油、脂肪酸单甘油酯、甘油二酯和甘油三酯、聚氧乙基化中链或长链脂肪酸如蓖麻油酸和聚氧乙烯化的脂肪酸单、二和三甘油酯如癸酸或辛酸，石油醚(petroethral)脂肪酸酯、羟甲基纤维素如羟甲基、羟乙基、羟丙基、乙酸琥珀酸羟丙酯、聚乙烯吡咯烷酮、交联聚维酮等。优选地，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物在包含脂质、双层间交联的多层囊泡、可生物降解的基于聚(d，l-乳酸-共-乙醇酸)[plga]或基于聚酸酐纳米颗粒或微粒、纳米多孔颗粒支持的脂质双层的药物组合物中施用以及作为与抗体的缀合物施用。
[0774]
药物组合物可以是无菌的，并且如果需要，可以与不与根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物发生有害反应的助剂混合，如润滑剂、防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、用于影响渗透压的盐、缓冲剂、着色剂、调味剂和/或芳香物质等。
[0775]
如果本发明考虑液体剂型，这些可以包括含有本领域常用的惰性稀释剂如水的药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液和糖浆。这些剂型可能含有例如微晶纤维素用于增稠，海藻酸或海藻酸钠作为悬浮剂，甲基纤维素作为粘度增强剂和甜味剂/调味剂。
[0776]
对于肠胃外应用，特别合适的载体由溶液，优选油性或水溶液，以及悬浮液、乳液或植入物组成。用于肠胃外施用的药物制剂是特别优选的并且包括水溶性形式的根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物的水溶液。此外，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物的悬浮液可以制备为合适的油性注射悬浮液。合适的亲脂性溶剂或载体包括脂肪油，例如芝麻油，或合成脂肪酸酯，例如油酸乙酯或甘油三酯，或脂质体。水性注射悬浮液可能含有增加悬浮液粘度的物质，例如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇或葡聚糖。
[0777]
特别优选的剂型是根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物的可注射制剂。因此，可以例如根据已知技术使用合适的分散剂、润湿剂和/或悬浮剂来配制无菌可注射的水性或油性悬浮液。无菌可注射制剂也可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液。可以使用的可接受的媒介物和溶剂包括水和等渗氯化钠溶液。无菌油也通常用作溶剂或悬浮介质。包含根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物的可注射制剂的优选应用是静脉内、瘤内和瘤周施用。
[0778]
根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物可以作为推注重复注射或通过连续输注给予。特别优选的是连续输注。
[0779]
用于根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物的直肠施用的栓剂可以通过例如将化合物-连接基构建体或缀合物与合适的非刺激性赋形剂，例如可可脂、合成甘油三酯和聚乙二醇混合来制备，它们在室温为固体但在直肠温度为液体，使得它们将在直肠中熔化并从所述栓剂释放根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物。
[0780]
对于通过吸入施用，本发明的化合物-连接基构建体或缀合物可以使用合适的推进剂，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合适的气体从加压包装或喷雾器中以气溶胶喷雾形式方便地递送。在加压气溶胶的情况下，剂量单位可以通过提供阀门以递送计量的量来确定。胶囊和药筒，例如用于吸入器或吹入器的明胶可以配制成含有化合物-连接基构建体或缀合物和合适的粉末基质(例如乳糖或淀粉)的粉末混合物。
[0781]
口服剂型可以是液体或固体，包括例如片剂、锭剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、泡腾剂、糖衣丸和颗粒剂。口服使用的药物制剂可以作为固体赋形剂获得，如果需要，在添加合适的助剂后，任选地研磨所得混合物，并加工颗粒混合物，以获得片剂或糖衣丸芯。特别的，合适的赋形剂为填充剂，例如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇；纤维素制剂，例如玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(pvp)。如果需要，可以添加崩解剂，例如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐例如海藻酸钠。可以配制口服剂型以确保根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物的立即释放或根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物的持续释放。
[0782]
固体剂型可以包括薄膜包衣。例如，本发明的剂型可以是所谓的薄膜片剂的形式。本发明的胶囊可以是两片硬明胶胶囊、两片羟丙基甲基纤维素胶囊、由植物或植物基纤维素制成的两片胶囊(two-piece capsule)或由多糖制成的两片胶囊。
[0783]
根据本发明的剂型可以配制用于局部应用。用于这种应用的合适的药物应用形式可以是局部鼻喷雾剂、舌下施用形式和控释和/或持续释放皮肤贴剂。对于经颊施用，组合物可以采用以常规方式配制的片剂或锭剂的形式。
[0784]
组合物可以方便地以单位剂型存在并且可以通过药学领域众所周知的任何方法制备。该方法可以包括使根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物与构成一种或多种辅助成分的载体结合的步骤。一般来说，通过将化合物-连接基构建体或缀合物与液体载体、精细分散的固体载体或两者均匀且紧密地结合，然后，如果需要，使产品成型来制备。液体剂量单位是小瓶或安瓿。固体剂量单位是片剂、胶囊剂和栓剂。
[0785]
对于人类患者，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物可以以作为有效量的每天约0.001mg至约5000mg，优选每天约0.01mg至约1000mg，更优选每天约0.05mg至约250mg的量施用于患者。短语“有效量”是指当向需要此类治疗的哺乳动物时施用时足以治疗或预防特定疾病或病症的化合物-连接基构建体或缀合物的量。
[0786]
可以使用本发明化合物的适应症。
[0787]
根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物适用于医学。特别地，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物适用于治疗选自以下的疾病：炎症性疾病、过敏性疾病、自
身免疫性疾病、感染性疾病、癌症和癌前综合征。此外，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物适用于免疫原性组合物和作为疫苗佐剂。
[0788]
在一个实施方案中，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物适用于治疗疾病/病症，包括但不限于癌症、疫苗佐剂、细菌性和病毒性传染病(例如hiv、hbv、hcv、hpv、丝状病毒(例如埃博拉病毒或马尔堡病毒)、虫媒病毒(例如黄热病病毒、登革热病毒或日本脑膜炎病毒)、痘病毒、沙粒病毒(例如拉沙热病毒、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lcmv)、mobala病毒、胡宁病毒)、副粘病毒(例如人类呼吸道合胞病毒、仙台病毒、腮腺炎、尼帕病毒)、正粘病毒(例如流感病毒)、冠状病毒(例如sars、sars-cov2)、弹状病毒(例如狂犬病病毒、水疱性口炎病毒)、布尼亚病毒(bunyaviruses)(如布尼奥罗病毒、汉坦(hantaan)病毒、克里米亚刚果(crimean congo)病毒、加利福尼亚脑炎病毒、裂谷热病毒或白蛉热病毒)。
[0789]
在一个实施方案中，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物或包含它们的药物组合物用于治疗选自癌症、癌前综合征和传染病的疾病；或用在免疫原性组合物中或作为疫苗佐剂。
[0790]
在另一个实施方案中，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物或包含它们的药物组合物用于治疗选自炎性疾病、过敏性疾病和自身免疫性疾病的疾病。
[0791]
在一个优选的实施方案中，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物或包含它们的药物组合物用于治疗选自癌症或癌前综合征的疾病。
[0792]
在另一个优选的实施方案中，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物或包含它们的药物组合物用于治疗选自传染病的疾病或用在免疫原性组合物中或作为疫苗佐剂。
[0793]
在另一个优选的实施方案中，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物或包含它们的药物组合物用于治疗炎性疾病、过敏性疾病、感染性疾病。
[0794]
与本发明特别相关的是癌症的治疗。优选地，所述癌症选自乳腺癌、炎性乳腺癌、导管癌、小叶癌、结肠癌、胰腺癌、胰岛素瘤、腺癌、导管腺癌、腺鳞癌、腺泡细胞癌、胰高血糖素瘤、皮肤癌、黑色素瘤、转移性黑色素瘤、肺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌、脑(神经胶质瘤)、胶质母细胞瘤、星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、bannayan-zonana综合征、考登病(cowden disease)、莱尔米特-杜克洛病(lhermitte-duclos disease)、肾母细胞瘤(wilm’s tumor)、尤因肉瘤(ewing’ssarcoma)、横纹肌肉瘤、室管膜瘤、髓母细胞瘤、头颈癌、肾癌、肝癌、黑色素瘤、卵巢癌、胰腺癌、腺癌、导管腺癌、腺鳞癌、腺泡细胞癌、胰高血糖素瘤、胰岛素瘤、前列腺癌、肉瘤、骨肉瘤、骨巨细胞瘤、甲状腺癌、淋巴细胞性t细胞白血病、慢性髓细胞性白血病、慢性淋巴细胞白血病、毛细胞白血病、急性成淋巴细胞性白血病、急性髓细胞白血病、慢性中性粒细胞白血病、急性成淋巴细胞性t细胞白血病、浆细胞瘤、免疫母细胞大细胞白血病、套细胞白血病、多发性骨髓瘤、巨核细胞白血病、多发性骨髓瘤、急性巨核细胞白血病、早幼粒细胞白血病、红白血病、恶性淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、成淋巴细胞性t细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、神经母细胞瘤、膀胱癌、尿路上皮癌、外阴癌、宫颈癌、子宫内膜癌、肾癌、间皮瘤、食道癌、唾液腺癌、肝细胞癌、胃癌、鼻咽癌、颊癌、口腔癌、gist(胃肠道间质瘤)、神经内分泌癌和睾丸癌。
[0795]
更优选地，所述癌症选自前列腺癌、肾癌、黑色素瘤、胰腺癌、宫颈癌、卵巢癌、结肠
癌、头颈癌、肺癌、纤维肉瘤和乳腺癌。
[0796]
优选地，所述自身免疫性疾病选自全身性红斑狼疮、艾迪生病(addison
′
s disease)、自身免疫性多腺体疾病(也称为自身免疫性多腺体综合征)、肾小球肾炎、类风湿性关节炎、硬皮病、慢性甲状腺炎、格雷夫斯病(graves
′
disease)、自身免疫性胃炎、糖尿病、自身免疫性溶血性贫血、肾小球肾炎、类风湿性关节炎自身免疫性中性粒细胞减少症、血小板减少症、特应性皮炎、慢性活动性肝炎、重症肌无力、多发性硬化症、炎症性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、银屑病、移植物抗宿主病、哮喘、支气管炎、急性胰腺炎、慢性胰腺炎及各类过敏症。
[0797]
应当理解，关于本发明的医学用途，可以优选将根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物与抗体、放射疗法、手术疗法、免疫疗法、化学疗法、毒素疗法、基因疗法或本领域普通技术人员已知的任何其他疗法用于治疗特定疾病的任何其他治疗组合施用。这与癌症的治疗特别相关。优选地，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物与抗体组合施用。优选的抗体包括抗pd-1、抗pd-l1、抗ctla-4、抗ido、抗kir、抗tim-3、抗vista、抗tigit、抗btla和抗lag3抗体。非限制性实例为bms-936559、mpdl3280a和medi4736或阿维鲁单抗(avelumab)(抗pd-l1抗体)、mk-3475、派姆单抗(pembrolizumab)或匹地利珠单抗(pidilizumab)(抗pd-1抗体)以及易普利姆玛(ipilimumab)(抗ctla-4抗体)。优选地，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物以包含以下中的一种或多种的药物组合物施用：佐剂、灭活或减毒细菌(例如，灭活或减毒的单核细胞增生李斯特菌)、先天免疫激活调节剂、优选toll样受体激动剂(tlr，优选tlr7或tlr9激动剂，例如sm360320、azd8848)、(nod)样受体(nlr，优选nod2激动剂)、视黄酸诱导基因(rig)-i样受体(rlr)、c型凝集素受体(clr)或病原体相关分子模式(“pamp”)、细胞因子(非限制性示例，例如il-2、il-12、il-6)、干扰素(包括但不限于ifnα、ifnβ、ifnγ、ifnλ)或化疗剂。医疗用途可能会进一步折衷施用至少一种hbv疫苗、核苷hbv抑制剂或其任何组合(例如recombivax hb、engerix-b、ge-nevac-b)。
[0798]
可以通过使用包含两种药剂的单一药物组合物或通过同时施用两种不同的组合物来实现组合治疗，其中一种组合物包含根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物，而另一种包含第二药剂。
[0799]
这两种疗法可以按任一顺序进行，并且可以在另一种疗法之前或之后，间隔从几分钟到几周不等。在单独应用其他药剂的实施方案中，通常会确保在每次递送时间之间相当长的一段时间不会失效，使得药剂将仍然能够对患者发挥有利的组合作用。在这种情况下，预期可以在彼此相距约12-24小时内并且更优选地在彼此相距约6-12小时内施用两种模式。在一些情况下，可能需要显著延长治疗时间，然而，其中单独的施用之间间隔数天(2、3、4、5、6或7天)至数周(1、2、3、4、5、6、7或8周)。在一些实施方案中，根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物在施用不同的癌症治疗之前施用。在其他实施方案中，在施用根据本发明的化合物-连接基构建体或缀合物之前施用不同的癌症治疗。
[0800]
本发明通过以下实施例进一步说明。
实施例
[0801]
本文使用以下缩写：
[0802]
[0803]
[0804]
[0805][0806]
式(i)化合物是根据以下方案和实施例的程序，使用合适的材料制备的，并通过以下具体实施例进一步举例说明。然后可以将式(i)化合物用作制备本发明的化合物-连接基构建体和缀合物的起始材料。
[0807]
除非另有说明，否则所有起始材料均获自商业供应商且无需进一步纯化即可使用。除非另有说明，所有温度均以℃表示，所有反应均在室温进行。
[0808]
方法和分析数据：
[0809]
概述：
[0810]
使用anton paar monowave450或biotage emrys initiator微波反应器进行微波加热(mw)。使用isco rf200d或interchim puriflash 450进行柱色谱。使用b
ü
chi旋转蒸发仪或genevac离心蒸发器进行溶剂去除。在酸性条件下使用waters i class sqd2、柱x bridge 1.7um 2,1x 50mm进行分析型lc-ms。制备型hplc使用waters自动纯化系统或shimadzu制备型hplc系统，在碱性流动相条件下使用柱19x 150mm xselect 5微米c18柱或在酸性条件下使用phenomenex gemini nx 21,2x 250mm c18柱。使用bruker300mhz或400mhz光谱仪记录nmr谱。化学位移(δ)以ppm相对于残留溶剂信号(测量范围-6.4khz)报告。1h nmr数据报告如下：化学位移(多重性、耦合常数和氢数)。多重性缩写如下：s(单峰)、d(双峰)、t(三峰)、q(四峰)、m(多重峰)、dd(双重双峰)、dt(三重双峰)、ddd(双重双重双峰)。esi-ms：去溶剂化气体流量993l/h；去溶剂温度500℃；锥形气体：50l/min；500-1000m/z；极性：正极性和/或负极性。
[0811]
用于纯化目标化合物的制备型hplc条件：
[0812]
色谱条件1：
[0813]
制备型hplc仪器：shimadzu或auto-purification synstem waters
[0814]
柱：gemini-nx 5μm c18 21.2*250mm
[0815]
检测器：spd-20a/20av uv-vis
[0816]
流速：20ml/min
[0817]
代表性流动相：
[0818]
(1)
[0819]
流动相：a：0.1％甲酸(fa)或三氟乙酸(tfa)于水中
[0820]
流动相：b：0.1％fa或tfa于mecn中
[0821]
(2)
[0822]
流动相：a：0.1％nh4oh于水中
[0823]
流动相：b：0.1％nh4oh于mecn中
[0824]
色谱条件2：
[0825]
制备型hplc仪器：shimadzu或auto-purification synstemwaters
[0826]
柱：chiralpak ad-h,5μm,20*250mm或if,5μm,20*200mm
[0827]
检测器：spd-20a/20av uv-vis
[0828]
流速：20ml/min
[0829]
代表性流动相：
[0830]
流动相：a：etoh
[0831]
流动相：b：己烷
[0832]
下述实施例中提供的uplc、hplc和ms数据注册于：
[0833]
在waters上的ms分析：
[0834]
方法名称：lc-ms1-2-ba
[0835]
设备：
[0836]-waters i class sqd2
[0837]-带dad检测器的uplc
[0838]-柱：waters acquity uplc x bridge c18,50mm x 2.1mm x 1.7μm
[0839]
洗脱液：
[0840]
(a)0.1％甲酸于水中
[0841]
(b)0.1％甲酸于mecn中
[0842]
分析方法：
[0843]-自动进样器：进样量：1μl
[0844]-泵：
[0845][0846]-柱温箱：柱温：40℃；分析时间：3min
[0847]-检测器：波长：254,214,280nm
[0848]
在bruker amazon sl上的lc-ms分析
[0849]
方法名称：lc-ms1-2-ba
[0850]
设备：
[0851]-ms bruker amazon sl
[0852]-lc dionex ultimate 3000
[0853]-带uv-vis或dad检测器的hplc
[0854]-柱：waters acquity uplc hss c18,50mm x 2.1mm x 1.8μm
[0855]
洗脱液：
[0856]
(a)0.1％甲酸于mecn中
[0857]
(b)0.1％甲酸于水中
[0858]
分析方法：
[0859]-自动进样器：进样量：1μl
[0860]-泵：
[0861][0862][0863]-柱温箱：柱温：25℃；分析时间：6min
[0864]-检测器：波长：254,230,270,280nm
[0865]
在bruker amazon sl上的lc-ms分析
[0866]
方法名称：bcm-30
[0867]
设备：
[0868]-ms bruker amazon sl
[0869]-lc dionex ultimate 3000
[0870]-带uv-vis或dad检测器的hplc
[0871]-柱：waters symmetry c18 3.9x150mm 5μm
[0872]
洗脱液：
[0873]
(a)0.1％甲酸于水中
[0874]
(b)0.1％甲酸于mecn中
[0875]
分析方法：
[0876]-自动进样器：进样量：3μl
[0877]-泵：
[0878]
流速：1.2ml/min
[0879]
时间[min][％]b0.02020.080
22.08022.59525.09525.32030.020
[0880]-柱温箱：柱温：25℃；分析时间：30min
[0881]-检测器：波长：254nm
[0882]
corona ultra上的lc-ms分析：
[0883]
方法名称：bcm-30
[0884]
设备：
[0885]-corona ultra
[0886]-lc dionex ultimate 3000
[0887]-柱：waters symmetry c18 3.9x150mm 5μm
[0888]
洗脱液：
[0889]
(a)0.1％甲酸于水中
[0890]
(b)0.1％甲酸于mecn中
[0891]
分析方法：
[0892]-自动进样器：进样量：3μl
[0893]-泵：
[0894]
流速：1.2ml/min
[0895]
时间[min][％]b0.02020.08022.08022.59525.09525.32030.020
[0896]
制备式(i)化合物的合成方法：
[0897]
以下化合物可商购获得和/或可以以有机合成领域技术人员熟知的多种方式制备。更具体地，公开的化合物可以使用本文所述的反应和技术来制备。在下文描述的合成方法的描述中，应理解除非另有说明，所有提出的反应条件，包括溶剂的选择、反应气氛、反应温度、实验持续时间和后处理程序，都可以选择为该反应的条件标准。有机合成领域的技术人员应当理解，分子的不同部分上存在的官能团应该与所提出的试剂和反应相容。与反应条件不相容的取代基对于本领域技术人员来说是显而易见的，因此指示替代方法。实施例的起始材料或者是可商购的，或者很容易通过标准方法从已知材料制备。
[0898]
实施例的制备
[0899]
式(i)化合物的制备
[0900]
实施例1.3-({[(3s)-1-(3-氨基苯基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨
基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[0901][0902][0903]
制备4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体1)
[0904]
在0℃向无水dmf(5.0ml)中滴加pocl3(3.10ml，6.0eq.)并将混合物在室温搅拌15分钟。然后滴加在无水dmf(3.0ml)中的1-(2-氨基苯基)乙-1-酮(0.75g，1.0eq.)，该反应在60℃加热3小时。之后，将反应冷却并用水淬灭。然后用nahco3水溶液中和混合物并用dcm萃取。有机层经无水mgso4干燥并真空除去溶剂得到粗品棕色固体(0.33g)。将0.15g粗品残余物悬浮在hcooh的54％水溶液(1.83ml)中并将反应在50℃搅拌2小时，随后在4℃保持过夜。形成沉淀，将其滤出，用水洗涤，并用乙醚研制，得到产物(0.135g,)，为橙色固体。esi-ms：
174.0[m h]
。
[0905]
制备1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛
[0906]
将4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体1)(0.50g，1.0eq.)悬浮在thf(13.0ml)中。加入dbu(1.1g，2.5eq.)，然后加入碘甲烷(4.1g，10.0eq.)，并将反应在40℃搅拌过夜。加入额外部分的dbu和碘甲烷并继续反应过夜。然后，用水淬灭反应并用dcm萃取。有机层经无水na2so4干燥并真空除去溶剂。将残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.350g，产率63％)，为黄色固体。esi-ms：188.1[m h]
。
[0907]
制备(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基]氨基}哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0908]
将(s)-1-叔丁氧羰基-3-氨基哌啶(4.17g，1.3eq.)、1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(3.0g，1.0eq.)、naoac(1.32g，1.0eq.)和ms(0.7g)在无水meoh(100.0ml)中的混合物在惰性气氛下于室温搅拌过夜。之后将混合物冷却至0℃，并在1小时内分批加入nabh4(0.67g，1.1eq.)。反应在室温持续3h。混合物通过硅藻土垫过滤，滤饼用甲醇洗涤，真空浓缩滤液。残余物用dcm稀释并用10％naoh水溶液、盐水洗涤，经无水mgso4干燥并真空浓缩。残余物通过fcc(aln；dcm：meoh)纯化，得到产物(5.60g，产率94％)，为黄色固体。esi-ms：372.2[m h]
。
[0909]
制备(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0910]
将(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基]氨基}哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.550g，1.0eq.)、2-甲基-4-吡啶甲醛(0.18g，1.0eq.)和ms在无水dce和dmf(20.0ml，1：1)的混合物中的混合物在室温搅拌过夜，然后冷却至0℃并分批加入nabh(oac)3(0.47g，1.5eq.)。混合物在45℃搅拌3小时，然后通过硅藻土垫过滤，用dcm洗涤并真空浓缩。残余物用dcm稀释并用10％naoh水溶液、盐水洗涤，经无水mgso4干燥并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.61g，产率86％)，为淡黄色固体。esi-ms：477.2[m h]
。
[0911]
制备1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体5)
[0912]
向(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.60g，1.0eq.)在1,4-二噁烷中的溶液中加入于1,4-二噁烷中的4m hcl(10ml)。所得混合物在室温搅拌过夜，随后倒入水中并用1m naoh水溶液碱化。混合物用dcm萃取，合并的有机层用盐水洗涤并用无水na2so4干燥。减压除去溶剂，得到产物(0.375g，产率79％)，为白色固体。esi-ms：377.5[m h]
。
[0913]
制备n-{3-[(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]苯基}氨基甲酸叔丁酯
[0914]
将1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体5)(0.150g，1.0eq.)、n-(3-溴苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.108g，1.0eq.)和naot-bu(0.077g，2.0eq.)悬浮于无水1,4-二噁烷中并向混合物中通入氩气。在惰性气氛下加入ruphos pd g3(0.033g，0.1eq.)。反应在100℃进行过夜。随后，将混合物冷却至环境温度并通过硅藻土垫过滤。滤饼用acoet洗涤，滤液减压浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：
meoh)纯化，得到产物(0.162g，产率72％)，为黄色油状物。esi-ms：568.7[m h]
。
[0915]
制备3-({[(3s)-1-(3-氨基苯基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0916]
向n-{3-[(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]苯基}氨基甲酸叔丁酯(0.162g，1.0eq.)在1,4-二噁烷中的溶液中加入于1,4-二噁烷中的4m hcl(3.0ml)。混合物在室温搅拌3天并随后真空浓缩。残余物用dcm稀释并用15％naoh水溶液洗涤。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥并真空浓缩。混合物通过制备型hplc(meoh：h2o；fa)分离。获得的固体在dcm和饱和nahco3水溶液之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并蒸发。残余物通过制备型hplc(meoh：h2o；nh3)再纯化。使用在et2o中的2m hcl(dcm)和作为溶剂的dcm(3.0ml)将化合物转化为hcl盐以提供产物(0.017g，产率15％)，为黄色固体。esi-ms：468.3[m h]
。1h nmr(400mhz,氧化氘)δ8.16(d,j＝6.2hz,1h),8.11(s,1h),8.05(dd,j＝8.3,1.5hz,1h),7.84(ddd,j＝8.7,7.1,1.6hz,1h),7.68(d,j＝8.7hz,1h),7.62(d,j＝6.3hz,1h),7.58(s,1h),7.52(t,j＝7.6hz,1h),7.35(t,j＝8.2hz,1h),7.07(dd,j＝8.5,1.8hz,2h),7.01
–
6.98(m,1h),6.93(dd,j＝7.9,2.0hz,1h),4.62
–
4.53(m,3h),4.31(d,j＝13.5hz,1h),3.88(s,3h),3.85
–
3.79(m,1h),3.71
–
3.65(m,1h),3.63
–
3.56(m,1h),3.39
–
3.26(m,2h),2.32(s,3h),2.25
–
2.10(m,3h),1.87(s,1h)。
[0917]
实施例2.3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0918][0919]
制备1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0920]
在反应容器中装入1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体5)(0.10g，1.0eq.)、5-溴-2-硝基吡啶(0.108g，2.0eq.)、naot-bu(0.051g，2.0eq.)和ruphos pd g3(0.022g，0.1eq.)。除去空气并用氩气
回填容器。加入无水1,4-二噁烷(5.0ml)并将混合物在100℃加热过夜。之后真空除去溶剂，残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)分离并通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得到产物(0.08g，产率60％)，为黄色固体。esi-ms：499.2[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.33
–
8.27(m,1h),8.25(d,j＝3.0hz,1h),8.19(dd,j＝8.1,1.6hz,1h),8.08(d,j＝9.2hz,1h),8.03(s,1h),7.71(ddd,j＝8.5,6.8,1.6hz,1h),7.62(d,j＝8.5hz,1h),7.44(dd,j＝9.4,3.1hz,1h),7.37(ddd,j＝8.0,6.8,1.1hz,1h),7.30
–
7.19(m,2h),4.37
–
4.19(m,1h),4.11
–
3.95(m,1h),3.86(s,3h),3.83
–
3.71(m,2h),3.71
–
3.56(m,2h),3.24
–
3.12(m,1h),3.05
–
2.90(m,1h),2.70
–
2.57(m,1h),2.38(s,3h),2.07
–
1.93(m,1h),1.90
–
1.61(m,2h),1.53
–
1.28(m,1h)。
[0921]
制备3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0922]
向1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.025g，0.050mmol，1.0eq.)在乙醇(5.0ml)中的溶液中加入pd/c(10wt.％,0.001g，0.1eq.)。将混合物在氢气气氛下搅拌过夜。过滤并溶剂蒸发后，残余物使用rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.014g，产率85％)，为黄色固体。esi-ms：469.3[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.33
–
8.24(m,1h),8.19(dd,j＝8.1,1.6hz,1h),7.99(s,1h),7.72(ddd,j＝8.6,6.8,1.6hz,1h),7.66
–
7.55(m,2h),7.37(ddd,j＝8.0,6.8,1.1hz,1h),7.28
–
7.18(m,2h),7.14(dd,j＝8.9,2.9hz,1h),6.37(d,j＝8.8hz,1h),5.37(s,2h),3.84(s,3h),3.78
–
3.54(m,4h),3.54
–
3.46(m,1h),3.28
–
3.17(m,1h),2.83
–
2.73(m,1h),2.63
–
2.54(m,1h),2.43(d,j＝12.6hz,1h),2.36(s,3h),2.05
–
1.90(m,1h),1.82
–
1.69(m,1h),1.58
–
1.32(m,2h)。
[0923]
实施例3.3-({[(3s)-1-[6-(氨基甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[0924][0925]
制备n-(5-溴吡啶-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯
[0926]
向5-溴吡啶-2-甲腈(1.0g，1.0eq.)在甲醇(10.0ml)中的溶液中加入nicl2*6h2o(0.13g，0.1eq.)和一缩二碳酸二叔丁酯(2.39g，2.0eq.)。将混合物冷却至0℃并加入nabh4(0.41g，2.0eq)。将所得反应混合物在室温搅拌24小时。随后，真空蒸发溶剂并将残余物用水稀释并用acoet萃取。有机层经无水na2so4干燥并真空蒸发溶剂。残余物通过fcc(sihp；hex：acoet)纯化并通过rp-fcc(c18hp；meoh：h2o)再纯化，得到产物(0.19g，产率12％)，为黄色油状物。esi-ms：287.1[m h]
[0927]
制备n-({5-[(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-基}甲基)氨基甲酸叔丁酯
[0928]
将1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体5)(0.16g，1.0eq.)、n-(5-溴吡啶-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.134g，1.1eq.)和cs2co3(0.28g，2.0eq.)悬浮于无水1,4-二噁烷并且将氩气鼓泡通过反应混合物5分钟。在惰性气氛下，加入pd2(dba)3(0.078g，0.2eq.)和xantphos(0.074g，0.3eq.)并将反应在115℃搅拌过夜。随后，将混合物冷却至环境温度，通过硅藻土垫过滤并减压浓缩。将残余物与以相同方式从1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体5)(0.05g,)、n-(5-溴吡啶-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.05g，1.3eq.)、cs2co3(0.087g，2.0eq.)、pd2(dba)3(0.024g，0.2eq.)和xantphos(0.023g，0.3eq.)开始的平行反应合并。合并的残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.158g，合并产率64％)，为黄色固体。esi-ms：583.8[m h]
。
[0929]
制备3-({[(3s)-1-[6-(氨基甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0930]
向n-({5-[(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-基}甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.158g，1.0eq.)在1,4-二噁烷中的溶液中加入于1,4-二噁烷中的4m hcl(4.2ml)。混合物在55℃搅拌1h并随后真空浓缩。残余物用dcm稀释并用naoh水溶液洗涤。有机层经na2so4干燥并真空浓缩。残余物通过制备型hplc(meoh：h2o；nh3)纯化。使用在et2o中的2m hcl(0.08ml，2.0eq.)和作为溶剂的dcm(5.0ml)将化合物转化为hcl盐以提供产物(0.046g，产率31％)，为黄色固体。esi-ms：483.2[m h]
。1h nmr(400mhz,d2o)δ8.27(d,j＝6.1hz,1h),8.25(d,j＝2.9hz,1h),8.12(s,1h),8.05(dd,j＝8.3,1.5hz,1h),7.86(ddd,j＝8.6,7.1,1.6hz,1h),7.80
–
7.74(m,2h),7.74
–
7.66(m,2h),7.57
–
7.50(m,2h),4.79
–
4.64(m,2h h2o),4.62(d,j＝13.7hz,1h),4.45(d,j＝13.8hz,1h),4.24(d,j＝3.2hz,2h),4.00(d,j＝12.8hz,1h),3.88(s,4h),3.61(dd,j＝12.8,8.4hz,1h),3.58
–
3.50(m,1h),3.29
–
3.18(m,1h),2.39(s,3h),2.35
–
2.27(m,1h),2.26
–
2.16(m,1h),2.14
–
2.05(m,1h),1.88
–
1.77(m,1h)。
[0931]
实施例4.3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-环丙基-6,7-二氟-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[0932][0933]
制备n-[(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[0934]
向5-溴-2-硝基吡啶(2.25ml，1.0eq.)在无水1,4-二噁烷(96.0ml)中的溶液中加入n-[(3s)-哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(4.62g，1.3eq.)和cs2co3(7.8g，1.35eq.)并向混合物中通入氩气5分钟。然后加入pd2(dba)3(0.81g，0.05eq.)和xantphos(0.62g，0.06eq.)并将所得混合物在惰性气氛下于115℃加热2天。随后，将混合物冷却至环境温度，通过硅藻土垫过滤并减压浓缩。将残余物重新溶解在dcm中，与mpa金属清除剂一起搅拌过夜并通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(3.6g，产率63％)，为淡黄色油状物。esi-ms：323.1[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.21(d,j＝3.0hz,1h),8.14(d,j＝9.3hz,1h),7.42(dd,j＝9.3,3.1hz,1h),7.03(d,j＝7.1hz,1h),3.99
–
3.76(m,2h),3.48
–
3.37(m,1h),3.21
–
2.97(m,2h),1.94
–
1.70(m,2h),1.56
–
1.46(m,2h),1.41(s,9h)。
[0935]
制备(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-胺
[0936]
向n-[(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(3.50g，1.0eq.)在1,4-二噁烷中的搅拌溶液中加入于1,4-二噁烷中的4m hcl(25.0ml)。将所得混合物在55℃搅拌45分钟并随后真空浓缩。残余物用dcm稀释，用10％naoh水溶液和盐水洗涤经无水na2so4干燥并过滤。减压除去溶剂以提供产物(2.40g，产率99％)，为黄色固体，其无需另外的纯化即可用于下一步骤。esi-ms：223.3[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.22(d,j＝3.1hz,1h),8.12(d,j＝9.3hz,1h),7.42(dd,j＝9.3,3.1hz,1h),4.00
–
3.80(m,2h),3.02(ddd,j＝13.7,11.0,3.1hz,1h),2.86
–
2.64(m,2h),1.95
–
1.82(m,1h),1.82
–
1.70(m,1h),
1.69
–
1.52(m,2h),1.52
–
1.40(m,1h),1.35
–
1.20(m,1h)。
[0937]
制备1-环丙基-6,7-二氟-1,2,3,4-四氢喹啉-4-酮
[0938]
在惰性气氛下向1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酸(9.0g，1.0eq.)在无水meoh(150.0ml)中的溶液中在30分钟内分批加入nabh4(5.4g，4.5eq.)。使混合物达到室温，加入对甲苯磺酸一水合物(0.61g，0.10eq.)并将反应混合物加热回流3.5小时。随后，使混合物达到室温并真空除去溶剂。将残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化以提供产物(5.73g，产率80％)，为黄色固体。esi-ms：224.1[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.60(dd,j＝10.8,9.3hz,1h),7.21(dd,j＝13.6,6.7hz,1h),3.52(dd,j＝7.5,6.4hz,2h),2.59(dd,j＝7.5,6.3hz,2h),2.45
–
2.38(m,1h),0.95
–
0.89(m,2h),0.71
–
0.66(m,2h)。
[0939]
制备1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)
[0940]
在惰性气氛下向naome(5.41g，3.9eq.)和甲酸乙酯(8.14ml，3.9eq.)在无水dcm(150.0ml)中的混合物中加入1-环丙基-6,7-二氟-1,2,3,4-四氢喹啉-4-酮(5.73g，1.0eq.)在无水dcm(5.0ml)中的溶液，混合物在室温搅拌过夜。随后，反应用冰冷的水淬灭。有机层用3m naoh水溶液洗涤。将合并的水相酸化至ph＝6并用dcm萃取。合并有机层，经无水mgso4干燥并减压浓缩。残余物用无水meoh(150.0ml)稀释并加入mno2(8.44g，5.0eq.)。在室温搅拌48小时后，混合物通过硅藻土垫过滤，滤饼用dcm和meoh(1：1)的混合物洗涤。滤液真空浓缩，残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化。蒸发溶剂并将残余物重新溶解在小体积的dcm中并加入己烷。将沉淀过滤并干燥以提供产物(3.95g，产率62％)，为白色固体。esi-ms：250.2[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.11(s,1h),8.41(s,1h),8.22(dd,j＝12.1,6.7hz,1h),8.14(dd,j＝10.5,8.8hz,1h),3.73
–
3.64(m,1h),1.32
–
1.24(m,2h),1.18
–
1.12(m,2h)。
[0941]
制备1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0942]
在惰性气氛下于50℃将1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(0.40g，1.0eq)、(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-胺(0.39g，1.1eq.)和naoac(0.145g，1.1eq.)在无水meoh(50.0ml)中的混合物搅拌30分钟。添加dcm(9.0ml)，将混合物超声处理直至澄清并在室温搅拌过夜。然后，将混合物冷却至0℃并分批加入硼氢化钠(0.067g，1.1eq.)。使混合物达到室温并搅拌1.5小时，然后在30℃搅拌1.5小时。随后，将混合物真空浓缩。残余物在dcm和2m naoh水溶液之间分配。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥并过滤。减压除去溶剂，残余物通过fcc(sihp,dcm：meoh)纯化以提供产物(0.62g，产率85％)，为黄色固体。esi-ms：456.2[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.23(d,j＝3.1hz,1h),8.09(d,j＝9.3hz,1h),8.05
–
7.99(m,3h),7.44(dd,j＝9.4,3.1hz,1h),3.99(dd,j＝13.3,3.5hz,1h),3.85
–
3.78(m,1h),3.70
–
3.59(m,2h),3.51(tt,j＝7.2,3.9hz,1h),3.23
–
3.14(m,1h),3.02(dd,j＝13.2,8.6hz,1h),2.63
–
2.56(m,1h),2.15(s,1h),1.93
–
1.85(m,1h),1.82
–
1.73(m,1h),1.54
–
1.35(m,2h),1.27
–
1.19(m,2h),1.06
–
0.96(m,2h)。
[0943]
制备1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0944]
将1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.62g，1.0eq.)和2-甲氧基吡啶-4-甲醛(0.16ml，1.0eq.)在无水
dce(20.0ml)中的混合物在惰性气氛下于室温搅拌过夜。然后，将混合物冷却至0℃并分批加入nabh(oac)3(0.433g，1.5eq.)。将反应在40℃搅拌3h。将另外部分的2-甲氧基吡啶-4-甲醛和nabh(oac)3添加到反应混合物中并继续在50℃搅拌直到观察不到进一步的反应进展。随后加入dcm和2m naoh水溶液。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥并真空浓缩。将残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化以提供标题化合物(0.545g，产率69％)，为黄色固体。esi-ms：577.5[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.23(d,j＝3.0hz,1h),8.08(d,j＝9.3hz,1h),8.04
–
7.95(m,3h),7.91(s,1h),7.44(dd,j＝9.3,3.1hz,1h),6.96(dd,j＝5.3,1.3hz,1h),6.78(s,1h),4.24
–
4.18(m,1h),4.06
–
3.99(m,1h),3.78(s,2h),3.76(s,3h),3.65(s,2h),3.51
–
3.45(m,1h),3.20
–
3.13(m,1h),3.01
–
2.92(m,1h),2.73
–
2.65(m,1h),2.00
–
1.93(m,1h),1.84
–
1.75(m,1h),1.74
–
1.65(m,1h),1.52
–
1.39(m,1h),1.26
–
1.18(m,2h),0.96
–
0.85(m,2h)。
[0945]
制备3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-环丙基-6,7-二氟-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[0946]
向1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.50g，1.0eq)在meoh(50.0ml)中的溶液中加入pd/c(10wt.％,0.04g，0.45eq.)并将混合物在氢气气氛下搅拌过夜。随后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤，并将滤液与mpa清除剂一起搅拌30分钟。过滤和溶剂蒸发后，使用fcc(sihp；dcm：meoh)纯化残余物并通过fcc(aln；dcm：meoh)、rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)和fcc(sihp；dcm：meoh)再纯化。使用在et2o中的2m hcl(0.064ml，1.0eq.)和作为溶剂的meoh(5.0ml)和h2o(1.0ml)的混合物将化合物转化为hcl盐以提供产物(0.078g，产率15％)，为黄色固体。esi-ms：547.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.06(dd,j＝10.9,8.8hz,1h),7.99(s,1h),7.95(dd,j＝12.1,6.7hz,1h),7.86(d,j＝5.3hz,1h),7.76(dd,j＝9.5,2.8hz,1h),7.38(d,j＝2.8hz,1h),6.90(dd,j＝5.4,1.4hz,1h),6.84(d,j＝9.4hz,1h),6.74(s,1h),3.86
–
3.71(m,7h),3.70
–
3.64(m,1h),3.51
–
3.44(m,1h),3.40
–
3.35(m,1h),3.02
–
2.92(m,1h),2.78
–
2.70(m,1h),2.63
–
2.54(m,1h),2.14
–
2.06(m,1h),1.96
–
1.89(m,1h),1.75
–
1.55(m,2h),1.33
–
1.26(m,2h),0.99
–
0.93(m,2h)。
[0947]
实施例5.3-({[(2-氨基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-环丙基-6,7-二氟-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[0948][0949]
制备n-[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[0950]
将氩气通过无水1,4-二噁烷(80.0ml)中的5-溴-2-甲基吡啶(3.0g，1.0eq.)、n-[(3s)-哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(4.54g，1.3eq.)和cs2co3(7.7g，1.4eq.)的混合物鼓泡5分钟。然后加入pd2(dba)3(0.80g，0.05eq.)和xantphos(0.60g，0.06eq.)并将所得混合物在惰性气氛下于115℃加热5天。随后，将混合物冷却至环境温度，通过硅藻土垫过滤并减压浓缩。残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(3.90g，产率77％)，为淡黄色油状物。esi-ms：292.1[m h]
。
[0951]
制备(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体6)
[0952]
向n-[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.53g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(3.0ml)中的搅拌溶液中添加于1,4-二噁烷中的4m hcl(2.73ml，30.0eq.)并将反应混合物在55℃搅拌1h。减压浓缩后，残余物用dcm稀释并用10％naoh水溶液洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤并减压除去溶剂以提供产物(0.34g，产率98％)，为黄色油状物，其无需额外纯化即可用于下一步。esi-ms：192.3[m h]
。
[0953]
制备1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0954]
将1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(0.20g，1.0eq.)、(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体6)(0.16g，1.05eq.)、naoac(0.066g，1.0eq.)和ms(0.3g)在无水meoh和dcm的混合物(1：1,7.0ml)中的混合物在惰性气氛下于室温搅拌过夜。然后，将混合物冷却至0℃，分批加入硼氢化钠(0.033g，1.1eq.)并将混合物在室温搅拌1h。随后，混合物通过硅藻土垫过滤，用甲醇洗涤并真空浓缩。将残余物在dcm和10％naoh水溶液之间分配。水层用dcm洗涤，合并的有机相用盐水洗涤，用无水na2so4干燥。减压除去溶剂以提供粗产物(0.315g，产率93％)，为黄色油状物，其无需另外的纯化即可用于下一步425.5[m h]
。
[0955]
制备3-({[(2-氨基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨
基}甲基)-1-环丙基-6,7-二氟-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0956]
在mgso4存在下，将1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.315g，1.0eq.)和n-(4-甲酰基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.215g，1.3eq.)在无水dce(7.0ml)中的混合物在室温搅拌过夜。然后加入nabh(oac)3(0.236g，1.5eq.)并将反应在55℃搅拌3h并随后真空浓缩。将残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，然后将产物溶解于1,4-二噁烷(3.0ml)并加入于1,4-二噁烷中的4m hcl(0.6ml)。混合物在55℃搅拌1h然后真空浓缩。残余物用dcm稀释并用5％naoh水溶液洗涤。有机相经无水na2so4干燥，过滤，真空浓缩并通过制备型hplc(h2o：mecn；nh3)纯化。使用在et2o中的2m hcl(0.04ml，2.0eq.)和作为溶剂的dcm(5.0ml)将化合物转化为hcl盐以提供产物(0.023g，产率5％)，为黄色固体。esi-ms：531.2[m h]
。1h nmr(400mhz,氧化氘)δ8.17(s,1h),8.09
–
8.01(m,2h),7.99
–
7.91(m,2h),7.56(d,j＝9.1hz,1h),7.44(d,j＝6.7hz,1h),6.87(s,1h),6.75(dd,j＝6.7,1.7hz,1h),4.46
–
4.26(m,4h),4.05
–
3.97(m,1h),3.70
–
3.62(m,1h),3.60
–
3.53(m,1h),3.53
–
3.46(m,1h),3.46
–
3.38(m,1h),3.12
–
3.03(m,1h),2.54(s,3h),2.31
–
2.22(m,1h),2.09
–
1.98(m,2h),1.82
–
1.71(m,1h),1.31
–
1.25(m,2h),0.99
–
0.92(m,2h)。
[0957]
实施例6.7-(4-氨基哌啶-1-基)-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[0958][0959]
制备7-溴-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0960]
将7-溴-4-喹啉醇(3.0g，1.0eq.)溶解于无水dmf(6.0ml)，加入k2co3(4.45g，2.0eq.)。混合物在室温搅拌0.5h，然后加入碘甲烷(1.25ml，1.5eq.)，混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用dcm稀释，用水、盐水洗涤并用无水na2so4干燥。随后减压除去溶剂，得到产物(2.57g，产率79％)，为黄色固体，其无需进一步纯化即可用于下一步。esi-ms：237.9[m
h]
。
[0961]
制备7-溴-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛
[0962]
将7-溴-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮(2.50g，1.0eq.)、hmt(2.94g，2.0eq.)和tfa(10.0ml)在微波中于120℃辐射0.5小时。之后将混合物以常规方式在120℃加热过夜。将混合物用水稀释并在室温搅拌10分钟，然后用饱和na2co3水溶液中和并用dcm萃取。有机相用盐水洗涤，经无水na2so4干燥并真空浓缩。将残余物与etoac一起研磨并干燥以得到为白色固体的产物(2.02g，产率72％)。esi-ms：265.9[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ10.15(s,1h),8.61(s,1h),8.22
–
8.15(m,1h),8.06
–
8.00(m,1h),7.75
–
7.68(m,1h),3.96(s,3h)。
[0963]
制备7-溴-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0964]
将(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体6)(0.44g，1.1eq.)、7-溴-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(0.56g，21.0eq.)、naoac(0.173g，1.0eq.)和ms在无水meoh和无水dcm的混合物(1：1；50.0ml)中的混合物在惰性气氛下于室温搅拌过夜。然后，将混合物冷却至0℃并分批加入硼氢化钠(0.088g，1.1eq.)。使混合物在1h内达到室温。随后，混合物通过硅藻土垫过滤，用meoh洗涤并真空除去溶剂。将残余物在dcm和10％naoh水溶液之间分配，水层用dcm萃取，合并的有机层经无水mgso4干燥。减压除去溶剂以提供产物(0.90g，产率97％)为黄色油状物，其无需额外纯化即可用于下一步。
[0965]
制备7-溴-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0966]
将7-溴-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.90g，1.0eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(0.32g，1.3eq.)和无水na2so4(3.0g)在无水dce(20.0ml)中的混合物在惰性气氛下于室温搅拌过夜。然后，将混合物冷却至0℃并分批加入nabh(oac)3(0.65g，1.5eq.)。将反应在室温搅拌3小时。混合物通过硅藻土垫过滤然后用dcm冲洗。滤液用水洗涤，有机层经无水mgso4干燥并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh；nh3)纯化，并通过两个rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化以得到标题化合物(0.450g，产率40％)，为黄色固体。esi-ms：546.3[m h]
。
[0967]
制备n-{1-[1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-4-基}氨基甲酸叔丁酯
[0968]
在反应容器中装入7-溴-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.20g，1.0eq.)、n-(哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(0.11g，1.5eq.)、cs2co3(0.24g，2.0eq.)、pd2(dba)3(0.034g，0.1eq.)和xantphos(0.042g，0.2eq.)。除去空气并用氩气回填容器。加入无水1,4-二噁烷(5.0ml)，并将混合物在90℃搅拌过夜。随后，将混合物冷却至环境温度，通过硅藻土垫过滤并减压浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，溶解在dcm中，与mpa清除剂一起搅拌，过滤并蒸发得到产物(0.16g，产率62％)，为黄色油状物。esi-ms：666.4[m h]
。
[0969]
制备7-(4-氨基哌啶-1-基)-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0970]
将n-{1-[1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-4-基}氨基甲酸叔丁酯(0.16g，
1.0eq.)在1,4-二噁烷(5.0ml)中的搅拌溶液用于1,4-二噁烷中的4mhcl(2.0ml，33.3eq.)处理。反应在50℃进行0.5h，然后将混合物真空浓缩，使用2m naoh水溶液碱化并通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)分离。分离的产物通过制备型hplc(h2o：mecn；nh3)再纯化。使用在et2o中的2m hcl(0.062ml，1.0eq.)和作为溶剂的dcm(5.0ml)将化合物转化为hcl盐以提供标题化合物(0.071g，产率43％)，为黄色固体。esi-ms：566.5[m h]
。1h nmr(300mhz,氧化氘)δ8.03
–
7.97(m,1h),7.93
–
7.82(m,2h),7.46(s,1h),7.37
–
7.28(m,1h),7.15
–
7.02(m,2h),6.93(d,j＝5.4hz,1h),6.82(s,1h),6.50(s,1h),4.00
–
3.86(m,2h),3.71
–
3.52(m,5h),3.50(s,3h),3.49
–
3.32(m,2h),3.03
–
2.81(m,3h),2.68
–
2.43(m,2h),2.35(s,3h),2.16
–
1.80(m,7h),1.78
–
1.38(m,4h)。
[0971]
实施例7.7-氨基-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0972][0973][0974]
制备7-氯-1-环丙基-6-氟-1,2,3,4-四氢喹啉-4-酮
[0975]
在1小时内向7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酸(10.0g，1.0eq.)在无水meoh(150.0ml)中的冷却溶液中分批加入nabh4(6.0g，4.5eq.)。使混合物达到室温并搅拌过夜。然后加入对甲苯磺酸一水合物(0.67g，0.10eq.)并将反应混合物加热回流3.5h。随后，使混合物达到室温并真空除去溶剂。残余物用水稀释并用dcm萃取。合并的有机层经无水mgso4干燥并减压浓缩。fcc(sihp；hex：etoac)提供产物(6.98g，产率82％)，为黄色固体。esi-ms：240[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.55(d,j＝9.3hz,1h),7.39(d,j＝6.2hz,1h),3.52(dd,j＝7.5,6.3hz,2h),2.61(dd,j＝7.5,6.3hz,2h),2.47
–
2.41(m,1h),0.96
–
0.86(m,2h),0.76
–
0.66(m,2h)。
[0976]
制备7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛
[0977]
向naome(5.67g，3.9eq.)和甲酸乙酯(8.53ml，3.9eq.)在无水dcm(140.0ml)中的
混合物中加入-氯-1-环丙基-6-氟-1,2,3,4-四氢喹啉-4-酮(6.45g，1.0eq.)的溶液并将混合物在惰性气氛下于室温搅拌过夜。随后，将反应混合物倒入冰冷的水中。有机层用3m naoh水溶液洗涤。合并的水相用浓hcl将相酸化至ph＝6并用dcm萃取。合并有机层，经无水mgso4干燥并减压浓缩。残余物用无水meoh(150.0ml)稀释并加入mno2(10.6g，5.0eq.)。在室温搅拌2天后，混合物通过硅藻土垫过滤，滤饼用dcm和meoh的混合物(1：1)洗涤。滤液真空浓缩，残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化。蒸发溶剂并将残余物重新溶解在小体积的dcm中并加入己烷。将沉淀过滤并干燥以提供为灰白色固体的产物(3.86g，产率54％)。esi-ms：266.8[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.11(s,1h),8.41(s,1h),8.36(d,j＝6.1hz,1h),8.09(d,j＝9.1hz,1h),3.78
–
3.70(m,1h),1.32
–
1.24(m,2h),1.22
–
1.12(m,2h)。
[0978]
制备(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)
[0979]
向(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体6)(2.73g，1.0eq.)在无水dce(25.0ml)中的混合物中加入naoac(2.34g，2.0eq.)和ms 2-甲基吡啶-4-甲醛(1.73,1.0eq.)。将混合物在室温搅拌过夜。之后将混合物冷却至0℃并分批加入硼氢化钠(1.09g，2.0eq.)。混合物在室温搅拌3h，然后真空浓缩。残余物用dcm稀释并用10％naoh水溶液、盐水洗涤，经无水mgso4干燥并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)分离。分离的产物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化以获得标题化合物(3.05g，产率34％)，为黄色油状物。esi-ms：297.1[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.34(dd,j＝5.1,0.7hz,1h),8.11(d,j＝2.9hz,1h),7.25
–
7.22(m,1h),7.20(dd,j＝8.5,3.1hz,1h),7.17(dd,j＝5.1,1.4hz,1h),7.04(d,j＝8.5hz,1h),3.78(s,2h),3.73
–
3.61(m,1h),3.52
–
3.44(m,1h),2.71
–
2.63(m,1h),2.61
–
2.52(m,2h),2.48
–
2.42(m,4h),2.36
–
2.32(m,3h),1.96
–
1.88(m,1h),1.78
–
1.68(m,1h),1.57
–
1.43(m,1h),1.28
–
1.14(m,1h)。
[0980]
制备7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)
[0981]
向(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)(2.22g，1.0eq.)在无水dce(20.0ml)中的溶液中加入7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(1.99g，1.0eq.)。混合物在室温搅拌12h，然后冷却至0℃。分批加入nabh(oac)3(2.22g，1.4eq.)并将该反应在室温搅拌过夜。将混合物用dcm稀释并用h2o、饱和nahco3水溶液、盐水洗涤，经无水na2so4干燥并真空浓缩。将残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化以获得产物(3.20g，产率75％)，为黄色固体。esi-ms：546.8[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.31
–
8.24(m,1h),8.16(d,j＝6.2hz,1h),8.13(d,j＝2.9hz,1h),7.97(d,j＝9.5hz,1h),7.91(s,1h),7.26
–
7.18(m,2h),7.17
–
7.13(m,1h),7.02(d,j＝8.5hz,1h),3.82
–
3.70(m,3h),3.66
–
3.50(m,4h),2.83
–
2.69(m,2h),2.65
–
2.54(m,1h),2.36(s,3h),2.33(s,3h),2.08
–
1.92(m,1h),1.80
–
1.72(m,1h),1.62
–
1.41(m,2h),1.27
–
1.18(m,2h),1.00
–
0.82(m,2h)。
[0982]
制备7-氨基-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0983]
向7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.05g，1.0eq.)、硫酸铵
(0.024g，2.0eq.)和naot-bu(0.04g，4.5eq.)在无水1,4-二噁烷(2.0ml)中的混合物加入pd[p(o-tol)3]2(0.003g，0.05eq.)和cypf-t-bu(0.003g，0.05eq.)在无水1,4-二噁烷(1.0ml)中的溶液。将反应在惰性气氛下于100℃搅拌过夜。接着用etoac稀释混合物，通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。通过fcc(sihp；dcm：meoh)进行分离，随后通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)进行再纯化以提供产物(0.031g，产率63％)，为白色固体。esi-ms：527.2[m h]
。1h nmr(400mhz,meod-d4)δ8.16(d,j＝5.1hz,1h),8.08(d,j＝2.9hz,1h),7.79(s,1h),7.75(d,j＝11.9hz,1h),7.35(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.26
–
7.19(m,3h),7.11(d,j＝8.6hz,1h),3.91
–
3.81(m,3h),3.77(s,2h),3.64
–
3.57(m,1h),3.40
–
3.26(m,与meoh重叠),3.02
–
2.93(m,1h),2.89
–
2.80(m,1h),2.75
–
2.63(m,1h),2.41(s,3h),2.34(s,3h),2.17
–
2.09(m,1h),1.97
–
1.88(m,1h),1.75
–
1.58(m,2h),1.28
–
1.21(m,2h),0.92
–
0.85(m,2h)。
[0984]
实施例8.7-[(2-氨基乙基)氨基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0985][0986][0987]
制备7-[(2-氨基乙基)氨基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0988]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.10g，1.0eq.)、乙二胺(0.017ml，1.4eq.)和naot-bu(0.025g,1.4eq.)溶解于无水1,4-二噁烷(3.0ml)中。除去空气，用氩气回填容器，加入pd(oac)2(0.004g，0.1eq.)和brettphos(0.02g，0.2eq.)并将反应混合物在惰性气氛下于110℃搅拌12h。接下来将混合物用etoac稀释，通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。通过fcc(sihp；dcm：meoh)分离得到产物(0.07g，产率66％)，为米色固体。esi-ms：570.5[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.29(d,j＝5.0hz,1h),8.13(d,j＝2.9hz,1h),7.71(s,1h),7.61(d,j＝12.3hz,1h),7.27
–
7.19(m,2h),7.19
–
7.16(m,1h),7.02(d,j＝8.5hz,1h),6.92(d,j＝7.5hz,1h),6.38
–
6.31(m,1h),3.83
–
3.70(m,3h),3.63
–
3.56(m,3h),3.45
–
3.40(m,1h),3.23
–
3.18(m,2h),2.83(t,j＝6.3hz,2h),2.80
–
2.70(m,2h),2.63
–
2.54(m,1h),2.39(s,3h),2.33(s,3h),2.01
–
1.93(m,1h),1.80
–
1.70(m,1h),1.57
–
1.42(m,2h),1.24
–
1.17(m,2h),0.95
–
0.79(m,2h)。
[0989]
实施例9.1-环丙基-7-{[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0990][0991]
制备1-环丙基-7-{[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0992]
向7-[(2-氨基乙基)氨基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(实施例8)(0.048g，1.0eq.)在无水meoh(5.0ml)中的溶液中加入37％甲醛水溶液(0.01ml)。混合物在室温搅拌12小时，然后冷却至0℃。加入nabh(oac)3(0.021g，1.2eq.)并在室温继续反应过夜。之后减压浓缩混合物。然后加入饱和碳酸氢钠水溶液并将产物萃取至乙酸乙酯。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥并减压浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh：nh3)纯化，得到产物(0.015g，产率29％)，为淡黄色粉末。esi-ms：598.3[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.30(d,j＝5.1hz,1h),8.13(d,j＝3.0hz,1h),7.72(s,1h),7.62(d,j＝12.3hz,1h),7.23
–
7.19(m,2h),7.19
–
7.15(m,1h),7.04
–
7.00(m,1h),6.94(d,j＝7.4hz,1h),6.21
–
6.08(m,1h),3.82
–
3.71(m,3h),3.62
–
3.55(m,3h),3.46
–
3.41(m,1h),3.39
–
3.26(m,2h hdo),2.80
–
2.71(m,2h),2.64
–
2.57(m,1h),2.57
–
2.45(m,2h dmso),2.39(s,3h),2.33(s,3h),2.22(s,6h),2.02
–
1.93(m,1h),1.79
–
1.72(m,1h),1.58
–
1.44(m,2h),1.25
–
1.13(m,2h),0.92
–
0.82(m,2h)。
[0993]
实施例10.7-(2-氨基乙氧基)-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0994][0995]
制备n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)氨基甲酸叔丁
酯
[0996]
将氩气通过7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.15g，1.0eq.)、n-(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.044g，1.0eq.)和cs2co3(0.134g，1.5eq.)在无水甲苯(2.5ml)中的悬浮液鼓泡5分钟。之后加入pd(oac)2(0.019g，0.3eq.)和t-buxphos(0.07g，0.6eq.)并将反应在惰性气氛下在50℃搅拌过周末。随后将混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。残余物在水和dcm之间分配。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并蒸发溶剂。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.097g，产率53％)，为淡黄色固体。esi-ms：671.8[m h]
。
[0997]
制备7-(2-氨基乙氧基)-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[0998]
向n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.097g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(10.0ml)中的溶液中加入于1,4-二噁烷中的4m hcl(2.02ml，56.0eq.)并将混合物在50℃搅拌75分钟。随后将反应倒入水中并用2n naoh碱化并用dcm萃取。有机层经无水na2so4干燥，过滤并蒸发。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化。使用在et2o中的2m hcl(0.058ml，1.0eq.)和作为溶剂的meoh(5.0ml)和h2o(1.0ml)的混合物将化合物转化为hcl盐以提供产物(0.065g，产率76％)，为黄色固体。esi-ms：571.2[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.0hz,1h),8.20
–
8.11(m,3h),7.89
–
7.81(m,2h),7.52(d,j＝7.2hz,1h),7.27
–
7.20(m,2h),7.18
–
7.15(m,1h),7.04(d,j＝8.5hz,1h),4.45(t,j＝5.0hz,2h),3.84
–
3.70(m,3h),3.65
–
3.57(m,3h),3.56
–
3.48(m,1h),3.39
–
3.28(m,2h hdo),2.81
–
2.72(m,2h),2.65
–
2.55(m,1h),2.37(s,3h),2.33(s,3h),2.01
–
1.94(m,1h),1.82
–
1.74(m,1h),1.58
–
1.45(m,2h),1.29
–
1.22(m,2h),0.94
–
0.85(m,2h)。
[0999]
实施例11.1-环丙基-6-氟-7-[2-(甲基氨基)乙氧基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1000][1001]
制备n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)-n-甲基氨基甲酸叔丁酯
[1002]
将氩气通过7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.12g，1.0eq.),n-(2-羟基乙基)-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.039g，1.0eq.)和cs2co3(0.107g，1.5eq.)在无水甲苯(2.0ml)中的悬浮液鼓泡5分钟。之后加入tbuxphos(0.056g，0.6eq.)和pd(oac)2(0.015g，0.3eq.)并将反应混合物在50℃搅拌过夜。随后混合物通过硅藻土垫过滤。将滤液真空浓缩并在水和dcm之间分配。有机层用盐水洗涤并用无水na2so4干燥，过滤并蒸发。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化以提供产物(0.042g，产率28％)，为淡棕色固体。esi-ms：685.9[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.1hz,1h),8.12(d,j＝3.0hz,1h),7.85(s,1h),7.79(d,j＝11.6hz,1h),7.62
–
7.41(m,1h),7.30
–
7.07(m,3h),7.02(d,j＝8.5hz,1h),4.45
–
4.25(m,2h),3.91
–
3.71(m,3h),3.71
–
3.47(m,6h),2.99
–
2.83(m,3h),2.78
–
2.68(m,2h),2.66
–
2.54(m,2h),2.37(s,3h),2.32(s,3h),2.04
–
1.87(m,1h),1.85
–
1.68(m,1h),1.62
–
1.43(m,2h),1.43
–
1.18(m,10h),1.02
–
0.76(m,2h)。
[1003]
制备1-环丙基-6-氟-7-[2-(甲基氨基)乙氧基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1004]
将n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.042g，1.0eq.)溶解于dcm(4.0ml)中并逐滴添加在et2o中的2m hcl(1.07ml，35.0eq.)并将混合物在室温搅拌1小时。随后将反应倒入水中并用2n naoh碱化。将产物萃取至dcm。有机层用na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh：nh3)纯化。使用在et2o中的2m hcl(0.027ml，1.0eq.)和作为溶剂的meoh(5.0ml)和h2o(1.0ml)的混
合物将化合物转化为hcl盐以提供产物(0.031g，0.050mmol，产率84％)，为黄色固体。esi-ms：585.2[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(br m,3h),8.14(d,j＝2.9hz,1h),7.88
–
7.82(m,2h),7.52(d,j＝7.2hz,1h),7.25
–
7.20(m,2h),7.17(d,j＝5.3hz,1h),7.03(d,j＝8.5hz,1h),4.48(t,j＝5.0hz,2h),3.83
–
3.74(m,3h),3.65
–
3.57(m,3h),3.57
–
3.49(m,1h),3.38(t,j＝5.0hz,2h),2.81
–
2.72(m,2h),2.63(s,3h),2.61
–
2.55(m,1h),2.38(s,3h),2.33(s,3h),2.02
–
1.94(m,1h),1.81
–
1.73(m,1h),1.58
–
1.45(m,2h),1.30
–
1.20(m,2h),0.96
–
0.84(m,2h)。
[1005]
实施例12.7-[(3r)-3-氨基吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1006][1007][1008]
制备n-[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1009]
将氩气通过7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.10g，1.0eq.),n-[(3r)-吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.051g，1.5eq.)和cs2co3(0.119g，2.0eq.)在无水1,4-二噁烷(2.7ml)中的悬浮液鼓泡5分钟。之后加入pd2(dba)3*chcl3(0.038g，0.2eq.)和xantphos(0.032g，0.3eq.)并将反应混合物在115℃搅拌过夜。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，蒸发并通过fcc(用nh3：dcm去活化的sihp；dcm：meoh)纯化以提供产物(0.13g)，为黄色固体，其不经进一步纯化用于下一步。esi-ms：696.7[m h]
。
[1010]
制备7-[(3r)-3-氨基吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1011]
向n-[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.13g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(3.5ml)中的溶液中加入于1,4-二噁烷中的4m hcl(3.0ml)并将混合物在55℃搅拌30分钟。然后蒸发溶剂并将残余物在dcm和nahco3水溶液之
间分配。水层另外用dcm萃取。合并的有机层经无水mgso4干燥，过滤并蒸发。残余物通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)纯化。使用在et2o中的2m hcl(0.09ml，2.0eq.)和作为溶剂的dcm(5.0ml)将化合物转化为hcl盐以提供产物(0.06g，产率48％)，为淡黄色固体。esi-ms：596.3[m h]
。1h nmr(400mhz,氧化氘)δ8.50
–
8.41(m,1h),8.20
–
8.06(m,2h),7.97(dd,j＝9.1,3.0hz,1h),7.92
–
7.83(m,2h),7.70
–
7.54(m,2h),7.00(d,j＝7.5hz,1h),4.90
–
4.68(m,2h h2o),4.65
–
4.44(m,2h),4.23
–
4.11(m,1h),4.06
–
3.80(m,5h),3.79
–
3.70(m,1h),3.69
–
3.60(m,1h),3.60
–
3.46(m,2h),3.33
–
3.21(m,1h),2.57(s,3h),2.55(s,3h),2.54
–
2.45(m,1h),2.44
–
2.32(m,1h),2.32
–
2.19(m,2h),2.18
–
2.06(m,1h),1.96
–
1.79(m,1h),1.43
–
1.25(m,2h),1.12
–
0.88(m,2h)。
[1012]
实施例13.7-[(3s)-3-氨基吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1013][1014]
制备n-[(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1015]
将氩气通过7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.10g，1.0eq.),n-[(3s)-吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.051g，1.5eq.)和cs2co3(0.119g，2.0eq.)在无水1,4-二噁烷(2.7ml)中的悬浮液鼓泡5分钟。之后加入pd2(dba)3(0.034g，0.2eq.)和xantphos(0.032g，0.3eq.)并将反应混合物在115℃搅拌3天。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，蒸发并通过fcc(用nh3：dcm去活化的sihp；dcm：meoh)纯化以提供产物(0.10g，产率78％)，为黄色固体，其不经进一步纯化用于下一步。esi-ms：696.7[m h]
。
[1016]
制备7-[(3s)-3-氨基吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1017]
向n-[(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.10g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(2.7ml)中的溶液中加入于1,4-二噁烷中的4m hcl
(3.0ml)并将混合物在55℃搅拌1小时。然后蒸发溶剂并将残余物在dcm和naoh水溶液之间分配。合并的有机层经无水mgso4干燥，过滤并蒸发。残余物通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)纯化。使用在et2o中的2m hcl(0.04ml，2.0eq.)和作为溶剂的dcm(5.0ml)将化合物转化为hcl盐以提供产物(0.024g，产率25％)，为淡黄色固体。esi-ms：596.3[m h]
。1h nmr(400mhz,d2o)δ8.39
–
8.33(m,1h),8.05
–
8.00(m,2h),7.87(dd,j＝9.1,2.9hz,1h),7.81
–
7.77(m,2h),7.54(d,j＝14.2hz,1h),7.50(d,j＝9.1hz,1h),6.91(d,j＝7.5hz,1h),4.79
–
4.61(m,2h h2o),4.55
–
4.34(m,2h),4.12
–
4.04(m,1h),4.01
–
3.92(m,1h),3.92
–
3.73(m,4h),3.66
–
3.52(m,2h),3.50
–
3.36(m,2h),3.24
–
3.15(m,1h),2.48(s,3h),2.47(s,3h),2.45
–
2.37(m,1h),2.29
–
2.12(m,3h),2.10
–
1.96(m,1h),1.88
–
1.73(m,1h),1.29
–
1.21(m,2h),0.98
–
0.83(m,2h)。
[1018]
实施例14.1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1019][1020][1021]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1022]
将氩气通过7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.054g，1.0eq.)、(3r)-吡咯烷-3-醇(0.026g，3.0eq.)和cs2co3(0.068g，2.1eq.)在无水dmf(3.0ml)中的悬浮液鼓泡5分钟。之后加入pd2(dba)3*chcl3(0.020g，0.2eq.)和binap(0.018g，0.3eq.)并将反应混合物在115℃搅拌过夜。随后，将反应混合物与来自平行反应的混合物混合，该平行反应按照相同的方案并从0.030g 7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)开始并使用相应当量的剩余试剂进行。合并的混合物通过硅藻土垫过滤，用dcm洗涤垫。将滤液真空浓缩，残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，重新溶解在dcm中并与mpa清除剂一起搅拌10分钟。随后过滤混合物，真空浓缩并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)纯化。使用在et2o中的2m hcl(0.044ml，1.05eq.)和作为溶剂的meoh(5.0ml)和h2o(1.0ml)的混合物将化合物转化为hcl盐以提供产物(0.053g，产率56％)，为黄色固体。esi-ms：597.3[m h]
。1h nmr(400mhz,吡啶-d5)δ8.63
–
8.59(m,1h),8.57(d,j＝3.0hz,1h),8.42(d,j＝14.6hz,1h),7.94(s,1h),7.42
–
7.36(m,2h),7.33(dd,j＝8.5,3.0hz,1h),7.06(d,j＝8.5hz,1h),6.83(d,j＝7.7hz,1h),4.75
–
4.70(m,1h),4.20
–
4.12(m,1h),4.08(s,2h),3.94
–
3.75(m,5h),
3.57
–
3.46(m,2h),3.28
–
3.20(m,1h),3.19
–
3.11(m,1h),2.93
–
2.83(m,1h),2.59
–
2.47(m,7h),2.23
–
2.03(m,3h),1.73
–
1.64(m,1h),1.60
–
1.48(m,2h),1.13
–
1.03(m,2h),0.97
–
0.89(m,2h)。
[1023]
实施例15.7-[(3r)-3-(氨基甲基)吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1024][1025]
制备n-{[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]甲基}氨基甲酸叔丁酯
[1026]
将氩气通过7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.10g，1.0eq.)、n-{[(3s)-吡咯烷-3-基]甲基}氨基甲酸叔丁酯(0.055g，1.5eq.)和cs2co3(0.119g，2.0eq.)在无水1,4-二噁烷(2.7ml)中的悬浮液鼓泡5分钟。之后加入pd2(dba)3(0.034g，0.2eq.)和xantphos(0.032g，0.3eq.)并将反应混合物在115℃搅拌过夜。混合物通过硅藻土垫过滤并通过fcc纯化(用nh3：dcm去活化的sihp；dcm：meoh)，用et2o研磨并干燥以提供产物(0.08g，产率61％)，为淡黄色固体。esi-ms：710.4[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.1hz,1h),8.12(d,j＝3.0hz,1h),7.72(s,1h),7.62(d,j＝14.6hz,1h),7.25
–
7.17(m,2h),7.20
–
7.13(m,1h),7.08
–
6.98(m,2h),6.84(d,j＝7.7hz,1h),3.84
–
3.69(m,3h),3.62
–
3.45(m,6h),3.45
–
3.35(m,1h),3.29
–
3.20(m,1h),3.08
–
2.98(m,2h),2.79
–
2.68(m,2h),2.63
–
2.53(m,1h),2.38(s,4h),2.32(s,3h),2.10
–
1.90(m,2h),1.81
–
1.64(m,2h),1.58
–
1.43(m,2h),1.38(s,9h),1.21
–
1.15(m,2h),0.92
–
0.78(m,2h)。
[1027]
制备7-[(3r)-3-(氨基甲基)吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1028]
向n-{[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]
[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]甲基}氨基甲酸叔丁酯(0.057g,1.0eq.)在1,4-二噁烷(1.5ml)中的溶液中加入于1,4-二噁烷中的4m hcl(1.0ml)并将混合物在55℃搅拌1小时。然后加入于meoh中的7n nh3并蒸发溶剂。残余物通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)纯化。使用在et2o中的2m hcl(0.07ml，2.0eq.)和作为溶剂的dcm(5.0ml)将化合物转化为hcl盐以提供产物(0.045g，产率81％)，为淡黄色固体。esi-ms：610.3[m h]
。1h nmr(400mhz,氧化氘)δ8.41
–
8.37(m,1h),8.02
–
7.98(m,2h),7.85(dd,j＝9.1,2.9hz,1h),7.83
–
7.79(m,2h),7.48(dd,j＝11.6,2.6hz,2h),6.85
–
6.77(m,1h),4.83
–
4.62(m,43h),4.56
–
4.35(m,2h),3.91
–
3.77(m,3h),3.74
–
3.65(m,1h),3.65
–
3.56(m,2h),3.48
–
3.33(m,3h),3.31
–
3.19(m,1h),3.17
–
3.03(m,2h),2.71
–
2.57(m,1h),2.49(s,3h),2.47(s,3h),2.30
–
2.18(m,3h),2.09
–
1.97(m,1h),1.88
–
1.73(m,2h),1.28
–
1.20(m,2h),0.98
–
0.83(m,2h)。
[1029]
实施例16.7-[(3s)-3-氨基哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1030][1031]
制备n-[(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1032]
在反应容器中装入7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.050g，1.0eq.)、n-[(3s)-哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.037g，2.0eq.)、cs2co3(0.063g，2.1eq.)、pd2(dba)3*chcl3(0.019g，0.2eq.)和binap(0.017g，0.3eq.)。接着将容器盖上盖子，除去空气并用氩气填充容器。然后加入无水dmf(2.0ml)并将反应混合物在115℃搅拌过夜。混合物通过硅藻土垫过滤并通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)再纯化以提供产物(0.041g，产率59％)，为白色固体。esi-ms：710.6[m h]
。
[1033]
制备7-[(3s)-3-氨基哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1034]
向n-[(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.041g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(3.0ml)中的溶液中加入于1,4-二噁烷中的4m hcl(2.0ml)并将混合物在50℃搅拌1小时。然后蒸发溶剂。将残余物悬浮在水中，用2m naoh水溶液碱化，蒸发，通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)纯化并通过fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化以提供产物(0.010g，产率28％)，为淡黄色固体。esi-ms：610.3[m h]
。1h nmr(400mhz,meod-d4)δ8.17(d,j＝5.1hz,1h),8.10(d,j＝3.0hz,1h),7.93(s,1h),7.84(d,j＝13.4hz,1h),7.43(d,j＝7.4hz,1h),7.36(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.27
–
7.20(m,2h),7.13(d,j＝8.6hz,1h),3.92
–
3.84(m,3h),3.82
–
3.78(m,2h),3.65
–
3.55(m,2h),3.51
–
3.42(m,2h),3.21
–
3.11(m,1h),3.08
–
2.93(m,2h),2.93
–
2.81(m,2h),2.75
–
2.66(m,1h),2.42(s,3h),2.35(s,3h),2.20
–
2.10(m,1h),2.08
–
2.00(m,1h),2.00
–
1.87(m,2h),1.87
–
1.75(m,1h),1.75
–
1.59(m,2h),1.56
–
1.43(m,1h),1.35
–
1.25(m,2h),0.99
–
0.88(m,2h)。
[1035]
实施例17.7-[(3r)-3-氨基哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1036][1037]
制备n-[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1038]
在反应容器中装入7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.10g，1.0eq.)、n-[(3r)-哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.073g，2.0eq.)、cs2co3(0.125g，2.1eq.)、pd2(dba)3*chcl3(0.038g，0.2eq.)和binap(0.034g，0.3eq.)。接着将容器盖上盖子，除去空气并用氩气填充容器。然后加入无水dmf(3.0ml)并将反应混合物在115℃搅拌过夜。混合物通过硅藻土垫过滤并用dcm洗涤垫。蒸发滤液，残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)再纯化以提供产物(0.052g，产率38％)，为白色粉末。esi-ms：710.6[m h]
。
(0.112g，2.8eq.)和dmf(3.0ml)的混合物中添加2-(2-溴ethyl)-2,3-二氢-1h-异吲哚-1,3-二酮(0.205g，2.8eq.)和ki(0.134g，2.8eq.)。将反应混合物在90℃加热18小时。然后通过添加h2o和碳酸氢钠水溶液来淬灭反应，混合物用dcm萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.050g，产率17％)，为白色粉末。esi-ms：347.5[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.07(s,1h),8.54(s,1h),8.31(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.96(d,j＝8.5hz,1h),7.86
–
7.81(m,5h),7.54(ddd,j＝8.0,7.0,0.9hz,1h),4.74
–
4.67(m,2h),4.03
–
3.98(m,2h)。
[1045]
制备2-{2-[3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基]乙基}-2,3-二氢-1h-异吲哚-1,3-二酮
[1046]
在干反应器容器中装入1-[2-(1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-2-基)乙基]-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(0.045g，1.0eq.)、(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)(0.039g，1.0eq.)和无水dce(6.0ml)。反应在80℃进行2小时，然后冷却至0℃，然后加入nabh(oac)3(0.039g，1.4eq.)。反应在室温继续进行48小时。添加额外部分的nabh(oac)3(0.028g，1.0eq.)并将反应在室温搅拌6小时，然后在50℃搅拌12小时。随后通过添加h2o和碳酸氢钠水溶液来淬灭反应，混合物用dcm萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.035g，产率42％)，为黄色固体。esi-ms：627.7[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.25(d,j＝5.0hz,1h),8.20(dd,j＝8.1,1.6hz,1h),8.09(d,j＝2.9hz,1h),7.86(s,1h),7.81(d,j＝8.7hz,1h),7.75
–
7.67(m,5h),7.38
–
7.33(m,1h),7.15(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.11(s,1h),7.10
–
7.07(m,1h),7.00(d,j＝8.5hz,1h),4.66
–
4.51(m,2h),4.00
–
3.92(m,2h),3.76
–
3.65(m,1h),3.59
–
3.43(m,5h),2.63
–
2.53(m,2h),2.42(s,3h),2.32(s,3h),1.73
–
1.57(m,2h),1.38
–
1.25(m,3h)。
[1047]
制备1-(2-氨基乙基)-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1048]
向2-{2-[3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基]乙基}-2,3-二氢-1h-异吲哚-1,3-二酮(0.03g，1.0eq.)在无水etoh(5.0ml)中的溶液中加入一水合肼(0.005g，2.0eq.)，混合物在氩气气氛下回流搅拌12小时。将混合物真空浓缩，残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.018g，产率74％)，为黄色粉末。esi-ms：497.5[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.29(d,j＝5.0hz,1h),8.20(dd,j＝8.1,1.6hz,1h),8.14(d,j＝3.0hz,1h),8.05(s,1h),7.74(d,j＝8.6hz,1h),7.68(ddd,j＝8.6,6.8,1.7hz,1h),7.34(ddd,j＝7.9,6.8,1.0hz,1h),7.27
–
7.19(m,3h),7.01(d,j＝8.5hz,1h),4.29
–
4.18(m,2h),3.90
–
3.72(m,3h),3.66
–
3.56(m,3h),2.91
–
2.83(m,2h),2.81
–
2.71(m,2h),2.62
–
2.53(m,2h),2.39(s,3h),2.32(s,3h),2.04
–
1.97(m,1h),1.81
–
1.40(m,4h)。
[1049]
实施例19.1-环丙基-6-氟-7-[4-(甲基氨基)哌啶-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1056][1057]
制备n-{[(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]甲基}氨基甲酸叔丁酯
[1058]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.13g，1.0eq.),n-{[(3r)-吡咯烷-3-基]甲基}氨基甲酸叔丁酯盐酸盐(0.085g，1.5eq.)和cs2co3(0.248g，3.2eq.)悬浮于无水1,4-二噁烷(3.5ml)，混合物用氩气吹扫。在惰性气氛下，加入pd2(dba)3(0.044g，0.2eq.)和xantphos(0.041g，0.3eq.)并将反应混合物在115℃搅拌过夜。随后，将混合物冷却至环境温度并通过硅藻土垫过滤。将滤液真空浓缩，残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过rp-fcc(c18hp；mecn：h2o)再纯化，得到(0.1g，59％产率)，为白色固体。esi-ms：710.4[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.0hz,1h),8.12(d,j＝3.0hz,1h),7.72(s,1h),7.62(d,j＝14.6hz,1h),7.25
–
7.13(m,3h),7.07
–
6.97(m,2h),6.84(d,j＝7.8hz,1h),3.83
–
3.67(m,3h),3.63
–
3.44(m,6h),3.43
–
3.35(m,1h),3.28
–
3.21(m,1h),3.11
–
2.96(m,2h),2.81
–
2.68(m,2h),2.63
–
2.53(m,1h),2.44
–
2.35(m,4h),2.32(s,3h),2.06
–
1.91(m,2h),1.80
–
1.65(m,2h),1.58
–
1.42(m,2h),1.38(s,9h),1.21
–
1.13(m,2h),0.92
–
0.76(m,2h)。
[1059]
制备7-[(3s)-3-(氨基甲基)吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1060]
将于1,4-二噁烷中的4m hcl溶液(1.5ml)加入n-{[(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧
代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]甲基}氨基甲酸叔丁酯(0.078g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(2.0ml)中的溶液中。混合物在55℃搅拌1小时并随后真空浓缩。残余物在dcm和naoh水溶液之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(用nh3去活化的sihp；dcm：meoh)纯化。使用et2o溶液中的2m hcl和作为溶剂的dcm将获得的样品转化为hcl盐，但由于纯度不足，通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)对其进行再纯化，并使用et2o溶液中的2m hcl(0.02ml)和作为溶剂的dcm(5.0ml)再次转化为hcl盐以提供产物(0.013g，17％产率)，为淡黄色固体。esi-ms：610.3[m h]
。1h nmr(400mhz,氧化氘)δ8.14
–
7.98(m,2h),7.81(s,1h),7.75
–
7.63(m,1h),7.56(d,j＝14.4hz,1h),7.43
–
7.32(m,1h),7.31
–
7.24(m,1h),7.26
–
7.15(m,1h),6.86
–
6.77(m,1h),4.29
–
3.88(m,4h),3.88
–
3.76(m,2h),3.72
–
3.56(m,2h),3.56
–
3.46(m,1h),3.45
–
3.27(m,3h),3.26
–
3.09(m,3h),3.08
–
2.93(m,1h),2.79
–
2.61(m,1h),2.49(s,3h),2.38
–
2.14(m,5h),2.10
–
1.91(m,2h),1.90
–
1.80(m,1h),1.80
–
1.70(m,1h),1.33
–
1.21(m,2h),0.91
–
0.78(m,2h)。
[1061]
实施例21.3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(2-甲氧基乙基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1062]
[1063][1064]
制备n-[(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1065]
将5-溴-2-硝基吡啶(3.6g，1.0eq.),n-[(3s)-哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(4.62g，1.3eq.)、cs2co3(7.8g，1.35eq.)和1,4-二噁烷(96.0ml)用氩气吹扫5分钟。然后，加入xantphos(0.616g，0.06eq.)和pd2(dba)3(0.812g，0.05eq.)并将反应混合物在115℃搅拌3天。之后，将反应混合物冷却至环境温度，通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。将残余物溶解在dcm中并与清除剂quad-rapure mpa(3.0g)一起搅拌过夜。过滤混合物并真空浓缩。将残余物通过两个后续的fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(3.7g,65％产率)，为黄色固体。esi-ms：323.4[m h]
。
[1066]
制备(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体12)
[1067]
将1,4-二噁烷中的4m hcl溶液(23.0ml，8.0eq.)加入n-[(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(3.7g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(25.0ml)中的溶液中。将所得浆液在55℃搅拌1小时。然后，将反应混合物真空浓缩并将残余物在dcm和10％naoh水溶液之间分配。合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到产物(2.5g,62％产率)，为黄色固体，其直接在下一步中使用。esi-ms：223.2[m h]
。
[1068]
制备(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体11)
[1069]
将2-甲基吡啶-4-甲醛(0.24ml，1.0eq.)、(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-胺
酮盐酸盐
[1077][1078][1079]
制备n-{5-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-5-氮杂螺[2.4]庚-7-基}氨基甲酸叔丁酯
[1080]
将氩气通过7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.114g，1.0eq.),n-{5-氮杂螺[2.4]庚-7-基}氨基甲酸叔丁酯(0.088g，2.0eq.)和cs2co3(0.143g，2.1.0eq.)在dmf(3.0ml)中的悬浮液鼓泡5分钟。然后加入binap(0.039g，0.3eq.)和pd2(dba)3*chcl3(0.043g，0.2eq.)。将所得混合物在115℃搅拌过夜。之后混合物通过硅藻土垫过滤，然后用dcm冲洗。滤液真空浓缩，残余物通过fcc(sihp，dcm：meoh)纯化。将分离的样品溶解在dcm中并与清除剂quadrapure mpa一起搅拌20分钟。滤出清除剂，浓缩滤液，得到产物(0.105g，70％产率)，为黄色油状物。ap-ms：722.7[m h]
。
[1081]
制备7-{7-氨基-5-氮杂螺[2.4]庚-5-基}-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1082]
将于1,4-二噁烷中的4m hcl(1.1ml)加入n-{5-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-5-氮杂螺[2.4]庚-7-基}氨基甲酸叔丁酯(0.105g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(6.0ml)中的溶液并将混合物在室温搅拌1小时。然后，将反应混合物倒入水中。用2m naoh水溶液将所得混合物的ph调节至～11并用dcm洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩。使用在et2o中的2m hcl(0.062ml，2.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(2.4ml)将化合物转化为hcl盐以提供所需产物(0.039g，41％产率)，为白色固体。esi-ms：622.3[m h]
。1h nmr(400mhz,氧化氘)δ8.05
–
7.95(m,1h),7.93
–
7.83(m,1h),7.69
–
7.58(m,1h),7.58
–
7.47(m,1h),7.41
–
7.29(m,1h),7.14
–
7.03(m,1h),6.98
–
6.89(m,1h),6.89
–
6.80(m,1h),6.77
–
6.67(m,1h),4.10
–
3.95(m,1h),3.95
–
3.80(m,2h),3.79
–
3.53(m,4h),3.50
–
3.45(m,1h),3.44
–
3.33(m,1h),3.23
–
3.10(m,2h),3.06
–
2.84(m,1h),2.84
–
2.52(m,2h),2.31(s,3h),2.07
–
1.92(m,4h),1.91
–
1.80(m,1h),1.70
–
1.40(m,2h),1.25
–
1.05(m,3h),1.05
–
0.93(m,1h),
0.95
–
0.83(m,2h),0.83
–
0.72(m,1h),0.72
–
0.59(m,2h)。
[1083]
实施例23.7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1084][1085]
制备7-溴-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体13)
[1086]
将7-溴-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体8)(0.5g，1.0eq.)和(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)(0.56g，1.0eq.)悬浮于无水dce(15.0ml)并将反应混合物在室温搅拌过夜。然后，加入nabh(oac)3(0.56g，1.4eq.)并继续搅拌另外的24小时。之后，反应混合物用dcm稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液、水，盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp，dcm：meoh)纯化，得到产物(0.495g，46％产率)，为黄色固体。esi-ms：546.3,548.2[m h]
。
[1087]
制备7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1088]
在压力容器中装入在dmf(3.0ml)中的7-溴-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体13)(0.08g，1.0eq.)、(3r)-吡咯烷-3-醇(0.035ml，3.0eq.)、cs2co3(0.1g，2.1eq.)。混合物用氩气吹扫5分钟，然后加入binap(0.027g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.03g，0.2eq.)并将反应混合物在115℃搅拌6小时。随后，混合物通过硅藻土垫过滤，用dcm洗涤，真空浓缩滤液。残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.025g，22％产率)，为黄色固体。esi-ms：553.3[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.29(d,j＝5.0hz,1h),8.13(d,j＝3.0hz,1h),7.95(d,j＝8.9hz,1h),7.79(s,1h),7.29
–
7.17(m,3h),7.01(d,j＝8.5hz,1h),6.73
–
6.61(m,1h),6.27
–
6.13(m,1h),5.03(d,j＝3.7hz,1h),4.49
–
4.37(m,1h),3.89
–
3.65(m,6h),3.62
–
3.36(m,6h),3.26
–
3.18(m,1h),2.81
–
2.64(m,2h),2.63
–
2.54(m,1h),2.40(s,3h),2.32(s,3h),2.13
–
2.01(m,1h),2.00
–
1.89(m,2h),1.80
–
1.69(m,1h),1.56
–
1.37(m,2h)。
[1089]
实施例24.3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-6,7-二氟-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1090][1091][1092]
制备2,4,5-三氟苯甲酰氯
[1093]
将2,4,5-三氟苯甲酸(0.5g，1.0eq.)悬浮在socl2(1.15ml，5.6eq.)中并将所得混合物在80℃搅拌1.5小时。然后，反应混合物用dcm真空浓缩，分离的产物(0.55g，98.5％产率)不经进一步纯化直接用于下一步。
[1094]
制备3-(二甲基氨基)-2-(2,4,5-三氟苯甲酰基)丙-2-烯酸乙酯
[1095]
将2,4,5-三氟苯甲酰氯(0.55g，1.0eq.)在甲苯(5.0ml)中的溶液在5分钟内加入于室温搅拌的3-(二甲基氨基)丙-2-烯酸乙酯(0.41ml，1.0eq.)和dipea(1.0ml，2.1eq.)的混合物。将所得混合物在90℃搅拌3小时。然后，将混合物在dcm和水之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过fcc(sihp；etoac)纯化，得到产物(0.21g，24％产率)，为黄色油状物。esi-ms：302.1[m h]
。
[1096]
制备6,7-二氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲酸乙酯
[1097]
3-(二甲基氨基)-2-(2,4,5-三氟苯甲酰基)丙-2-烯酸乙酯(0.65g，1.0eq.)、异丙胺(0.22ml，1.3eq.)和甲苯(5.0ml)的混合物在110℃加热1.5小时。然后，将反应混合物真空浓缩，将dmf(5.0ml)加入到残余物中，随后加入k2co3(0.74g，2.5eq.)。将所得混合物在100℃加热过夜。然后，将混合物冷却至室温并在dcm和水之间分配。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(0.311g，47％产率)，为黄色固体。esi-ms：296.4[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.60(s,1h),8.21(dd,j＝13.1,6.6hz,1h),8.11(dd,j＝10.8,9.1hz,1h),5.01(hept,j＝6.4hz,1h),4.24(q,j＝7.1hz,2h),1.49(d,j＝6.5hz,6h),1.28(t,j＝7.1hz,3h)。
[1098]
制备6,7-二氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲酸
[1099]
6,7-二氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲酸乙酯(0.29g，1.0eq.)悬浮于1m hcl水溶液(6.0ml，6.1eq.)。将所得混合物在50℃搅拌1小时，再在95℃搅拌3小时。esi-ms：268.3[m h]
。随后，将反应混合物减压浓缩，得到产物(0.24g，87％产率)，为黄色固体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ14.89(br,1h),8.89(s,1h),8.47(dd,j＝13.0,6.7hz,1h),8.30(dd,j＝10.5,8.8hz,1h),5.19(hept,j＝6.6hz,1h),1.56(d,j＝6.5hz,6h)。
[1100]
制备6,7-二氟-1-(丙-2-基)-1,2,3,4-四氢喹啉-4-酮
[1101]
将6,7-二氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲酸(0.24g，1.0eq.)溶解在meoh(4.0ml)中并将混合物在冰浴中冷却。然后，分批加入nabh4(0.15g，4.5eq.)并将反应混合物在室温搅拌过夜。随后，加入ptsa一水合物(0.017g，0.1eq.)并继续搅拌3小时。然后，将反应混合物真空浓缩并将残余物在dcm和水之间分配。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(0.20g，96％产率)，为亮黄色固体。esi-ms：226.2[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ7.58(dd,j＝11.0,9.6hz,1h),7.13(dd,j＝14.6,6.6hz,1h),4.16(h,j＝6.6hz,1h),3.43
–
3.35(m,2h),2.62
–
2.50(m,2h),1.16(d,j＝6.6hz,6h)。
[1102]
制备6,7-二氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,2,3,4-四氢喹啉-3-甲醛
[1103]
在室温将6,7-二氟-1-(丙-2-基)-1,2,3,4-四氢喹啉-4-酮(0.1g，1.0eq.)在无水dcm(5.0ml)中的溶液加入meona(0.094g，3.9eq.)和甲酸乙酯(0.14ml，3.94eq.)的混合物中并将所得混合物搅拌过夜。随后，反应混合物用2m naoh水溶液洗涤。水层用1m hcl(水溶液)酸化并用dcm洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到产物(0.1g，64％产率)，为黄色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。esi-ms：254.1[m h]
。
[1104]
制备6,7-二氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲醛
[1105]
将6,7-二氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,2,3,4-四氢喹啉-3-甲醛(0.1g，1.0eq.)溶解于无水meoh(5.0ml)并加入mno2(0.17g，5.0eq.)。将所得混合物在室温搅拌过夜。然后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤，并用meoh小心洗涤该垫。滤液真空浓缩，得到产物(0.077g，74％产率)，为黄色固体。esi-ms：252.3[m h]
。
[1106]
制备6,7-二氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1107]
干燥在压力容器中装入6,7-二氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(0.077g，1.0eq.)、(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-胺
(中间体11)(0.1g，1.0eq.)和无水dce(3.0ml)。将所得混合物在70℃搅拌1小时。然后，将混合物冷却至室温并分批加入nabh(oac)3(0.182g，2.8eq.)。在65℃继续加热1小时，然后将混合物在室温搅拌整个周末。之后，将反应混合物在dcm和nahco3水溶液之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.1g，35％产率)，为黄色固体。esi-ms：563.8[m h]
。
[1108]
制备3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-6,7-二氟-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1109]
将6,7-二氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.1g，1.0eq.)、铁粉(0.03g，3eq.)、nh4cl(0.05g，5.0eq.)在etoh(6.0ml)和h2o(0.5ml)中的混合物回流搅拌1小时。然后，将反应混合物冷却至室温，用meoh稀释，通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp,h2o：mecn)纯化。使用于et2o中的2m hcl(0.014ml，1.0eq.至fb)和dcm(2.0ml)将获得的化合物转化为其hcl盐以提供产物(0.015g，14％产率)，为黄色固体。esi-ms：533.3[m h]
。1h nmr(300mhz,甲醇-d4)δ8.18
–
8.07(m,3h),7.88(dd,j＝12.9,6.6hz,1h),7.74(dd,j＝9.5,2.8hz,1h),7.37(d,j＝2.8hz,1h),7.27(s,1h),7.25
–
7.20(m,1h),6.82(d,j＝9.4hz,1h),4.98
–
4.90(m,1h),3.89
–
3.73(m,4h),3.70
–
3.63(m,1h),3.40
–
3.33(m,1h),3.01
–
2.91(m,1h),2.78
–
2.69(m,1h),2.61
–
2.52(m,1h),2.37(s,3h),2.14
–
2.06(m,1h),1.95
–
1.88(m,1h),1.70
–
1.56(m,2h),1.46(d,j＝6.5hz,6h)。
[1110]
实施例25.2-氨基-n-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]乙酰胺
[1111][1112]
制备7-氨基-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体14)
[1113]
pd2(dba)3(0.042g，0.1eq.)和me4tbutylxphos(0.022g，0.1eq.)加入7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.25g，1.0eq.)和在0.5m氨溶液中的nao-t-bu(0.062g，1.4eq.)在1,4-二噁烷(13.7ml)中的混合物中。将反应混合物在100℃搅拌16小时。随后，将混合物冷却至环境温度，通过硅藻土垫过滤并用naoh水溶液洗涤。有机层经无水na2so4干燥并真空蒸发溶剂。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.137g，56％产率)，为黄色粉末。esi-ms：527.8[m h]
。
[1114]
制备2-(1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-2-基)乙酸
[1115]
在反应容器中装入甘氨酸(0.30g，1.0eq.)、邻苯二甲酸酐(0.89g，1.5eq.)、三乙胺(0.607g，1.5eq.)、甲苯(5.0ml)和ms。将混合物加热至回流，搅拌10小时，然后真空浓缩。将得到的白色固体溶于水(50.0ml)中，并用浓hcl(3.0ml)酸化混合物。过滤收集产物，用水(2
×
30.0ml)洗涤并冷冻干燥以提供产物(0.65g，28％产率)，为白色粉末。esi-ms：
203.9[m-h]-.1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ13.28(s,1h),7.97
–
7.87(m,4h),4.32(s,2h)。
[1116]
制备2-(1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-2-基)乙酰氯
[1117]
在烘箱干燥的反应器中，引入2-(1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-2-基)乙酸(0.25g，1.0eq.)和无水dce(6.0ml)。然后加入亚硫酰氯(0.13ml，1.5eq.)，混合物在80℃回流12小时。随后，将混合物真空浓缩并在该后处理后立即使用产物作为下一步骤的反应物。
[1118]
制备n-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-2-(1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-2-基)乙酰胺
[1119]
将三乙胺(0.032ml，2.5eq.)和2-(1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-2-基)乙酰氯(0.26g，10.0eq.)依次加入7-氨基-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体14)(0.06g，1.0eq.)在chcl3(3.0ml)中的混合物中并将反应混合物在室温搅拌12小时。之后，反应用水淬灭，混合物用dcm洗涤。有机层经无水na2so4干燥并真空除去溶剂。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化以提供产物(0.037g，34％产率)，为米色粉末。esi-ms：714.6[m h]
。
[1120]
制备2-氨基-n-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]乙酰胺
[1121]
将一水合肼(0.004g，2.0eq.)加入n-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-2-(1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-2-基)乙酰胺(0.025g，1.0eq.)在etoh(5.0ml)中的溶液中。将混合物回流搅拌12小时并随后真空浓缩。残余物通过fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化以提供产物(0.009g，41％产率)，为黄色粉末。esi-ms：584.4[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.07(d,j＝6.7hz,1h),8.28(d,j＝5.1hz,1h),8.15
–
8.12(m,1h),7.89
–
7.84(m,2h),7.25
–
7.20(m,2h),7.18
–
7.15(m,1h),7.03(d,j＝8.5hz,1h),5.44
–
4.96(m,2h),3.84
–
3.74(m,3h),3.65
–
3.62(m,2h),3.62
–
3.57(m,1h),3.51
–
3.44(m,1h),3.39
–
3.39(m,2h),2.79
–
2.73(m,2h),2.64
–
2.57(m,1h),2.37(s,3h),2.33(s,3h),2.02
–
1.95(m,1h),1.81
–
1.74(m,1h),1.59
–
1.45(m,2h),1.26
–
1.15(m,2h),0.95
–
0.84(m,2h)。
[1122]
实施例26.7-(4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基)-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1123][1124]
制备7-(4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基)-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1125]
在压力容器中装入7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.29g，1.0eq.),n-(3,3-二氟哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(0.25g，2.0eq.)、cs2co3(0.36g，2.1eq.)和dmf(3.0ml)。混合物用氩气吹扫5分钟。然后，加入binap(0.099g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.055g，0.1eq.)，并将所得混合物在115℃搅拌过夜。之后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。残余物通过两个连续的rp-fcc(c18hp,h2o：mecn)纯化并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)再纯化，得到产物(0.026g，7％产率)，为白色固体。esi-ms：646.3[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d
6)
δ8.28(d,j＝5.0hz,1h),8.12(d,j＝3.0hz,1h),7.82(s,1h),7.72(d,j＝13.4hz,1h),7.37(d,j＝7.6hz,1h),7.25
–
7.18(m,2h),7.18
–
7.12(m,1h),7.01(d,j＝8.5hz,1h),3.87
–
3.67(m,4h),3.65
–
3.46(m,5h),3.39
–
3.26(m,1h,与水峰重叠),3.20
–
3.05(m,2h),2.82
–
2.63(m,2h),2.63
–
2.54(m,1h),2.37(s,3h),2.32(s,3h),2.02
–
1.89(m,2h),1.85
–
1.60(m,4h),1.59
–
1.39(m,2h),1.30
–
1.15(m,2h),0.97
–
0.81(m,2h)。
[1126]
实施例27.1-环丙基-6-氟-7-[3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1127][1128]
制备1-环丙基-6-氟-7-[3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1129]
在压力容器中装入7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.15g，1.0eq.)、(氮杂环丁烷-3-基)甲醇盐酸盐(0.068g，2.0eq.)、cs2co3(0.188g，2.1eq.)和dmf(5.0ml)，混合物用氩气吹扫5分钟。然后，加入binap(0.051g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.028g，0.1eq.)，并将所得混合物在115℃搅拌过夜。之后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。将残余物溶于dcm，加入清除剂quadrapure mpa，并将混合物在室温搅拌10分钟。随后，过滤，真空浓缩，残余物通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)纯化，得到产物(0.07g，42％产率)，为黄色固体。esi-ms：597.3[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.29(d,j＝5.1hz,1h),8.13(d,j＝2.9hz,1h),7.73(s,1h),7.62(d,j＝13.2hz,1h),7.24
–
7.15(m,3h),7.02(d,j＝8.5hz,1h),6.68(d,j＝7.9hz,1h),4.83(t,j＝5.3hz,1h),4.14
–
4.08(m,2h),3.87
–
3.82(m,2h),3.81
–
3.69(m,3h),3.64
–
3.56(m,5h),3.44
–
3.38(m,1h),2.89
–
2.81(m,1h),2.79
–
2.70(m,2h),2.62
–
2.55(m,1h),2.39(s,3h),2.33(s,3h),1.99
–
1.93(m,1h),1.79
–
1.72(m,1h),1.56
–
1.43(m,2h),1.21
–
1.16(m,2h),0.90
–
0.80(m,2h)。
[1130]
实施例28.1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡
啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1131][1132]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1133]
在压力容器中装入7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.15g，1.0eq.)、(3r)-哌啶-3-醇盐酸盐(0.056g，2.0eq.)、cs2co3(0.188g，2.1eq.)和dmf(5.0ml)，混合物用氩气吹扫。然后，加入binap(0.051g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.028g，0.1eq.)，并将反应混合物在115℃搅拌过夜。之后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。将残余物溶于dcm，加入清除剂quadrapure mpa，并将所得混合物在室温搅拌10分钟。随后过滤混合物，真空浓缩滤液。残余物通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)纯化。使用2m hcl在et2o中的溶液(0.033ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(2.0ml)，将分离的样品转化为hcl盐，得到产物(0.037g，20％产率)，为黄色固体。esi-ms：611.4[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.20(d,j＝5.4hz,1h),8.15(d,j＝3.0hz,1h),7.89(s,1h),7.81(d,j＝13.5hz,1h),7.78
–
7.71(m,1h),7.50
–
7.29(m,4h),4.09
–
3.77(m,6h),3.76
–
3.60(m,2h),3.53
–
3.40(m,2h),3.11
–
2.90(m,3h),2.90
–
2.74(m,2h),2.52(s,3h),2.37(s,3h),2.21
–
2.11(m,1h),2.10
–
2.02(m,1h),2.00
–
1.89(m,2h),1.81
–
1.60(m,3h),1.54
–
1.43(m,1h),1.35
–
1.24(m,2h),1.01
–
0.88(m,2h)。
[1134]
实施例29.3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-溴-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
酮
[1141][1142]
制备n-({1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-3-氟吡咯烷-3-基}甲基)氨基甲酸叔丁酯
[1143]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.24g，1.0eq.),n-[(3-氟吡咯烷-3-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(0.144g，1.5eq.)、cs2co3(0.46g，3.2eq.)在无水1,4-二噁烷(6.4ml)中的混合物用氩气吹扫5分钟。然后，在惰性气氛下加入pd2(dba)3(0.08g，0.2eq.)和xantphos(0.076g，0.3eq.)。将所得混合物用氩气吹扫另外5分钟，然后在115℃加热过夜。随后，将混合物冷却至环境温度，通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化。将获得的样品溶解在dcm中，加入清除剂quadrapure mpa(0.35g)并将混合物在室温搅拌过夜。然后，过滤混合物并真空浓缩，得到产物(0.21g，66％产率)，为黄色固体。esi-ms：728.4[m h]
。
[1144]
制备7-[3-(氨基甲基)-3-氟吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1145]
于1,4-二噁烷中的4m hcl溶液(2.2ml，30.0eq.)加入n-({1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-3-氟吡咯烷-3-基}甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.209g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(5.6ml)中的溶液中。将所得混合物在55℃搅拌1小时并随后真空浓缩。将残余物在dcm和naoh水溶液之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)纯化，得到产物(0.13g，72％产率)，为白色固体。esi-ms：628.3[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.0hz,1h),8.12(d,j＝2.9hz,1h),7.74(s,1h),7.65(d,j＝14.6hz,1h),7.25
–
7.18(m,2h),7.18
–
7.14(m,1h),7.02(d,j＝8.5hz,1h),6.90(d,j
＝7.8hz,1h),3.89
–
3.53(m,10h),3.48
–
3.38(m,1h),3.03
–
2.85(m,2h),2.81
–
2.68(m,2h),2.62
–
2.52(m,1h),2.38(s,3h),2.32(s,3h),2.25
–
2.10(m,2h),2.05
–
1.92(m,1h),1.94
–
1.59(m,3h),1.60
–
1.38(m,2h),1.29
–
1.15(m,2h),0.92
–
0.75(m,2h)。
[1146]
实施例31.1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1147][1148]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1149]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.15g，1.0eq.)、(3s)-哌啶-3-醇盐酸盐(0.113g，3.0eq.)、cs2co3(0.2g，2.1eq.)和无水dmf(4.0ml)的混合物用氩气吹扫5分钟。然后，加入pd2(dba)3(0.05g，0.2eq.)和binap(0.051g，0.3eq.)。将所得混合物另外用氩气吹扫并在115℃搅拌过夜。随后，将其冷却至环境温度，通过硅藻土垫过滤，滤液真空浓缩。将残余物溶于dcm并加入清除剂quadrapure mpa。将所得混合物在室温搅拌过夜，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)再纯化。使用2m hcl在et2o中的溶液(0.024ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(5.0ml)将获得的样品转化为hcl盐，得到产物(0.029g，16％产率)，为淡黄色固体。esi-ms：611.4[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.20(d,j＝5.4hz,1h),8.15(d,j＝2.9hz,1h),7.88(s,1h),7.81(d,j＝13.5hz,1h),7.74
–
7.69(m,1h),7.43
–
7.34(m,3h),7.34
–
7.30(m,1h),4.07
–
3.76(m,6h),3.74
–
3.62(m,2h),3.53
–
3.41(m,2h),3.10
–
2.89(m,3h),2.88
–
2.76(m,2h),2.51(s,3h),2.36(s,3h),2.22
–
2.13(m,1h),2.11
–
2.01(m,1h),2.00
–
1.90(m,2h),1.82
–
1.63(m,3h),1.56
–
1.43(m,1h),1.33
–
1.25(m,2h),0.97
–
0.90(m,2h)。
[1150]
实施例32.1-环丙基-6-氟-7-(4-羟基哌啶-1-基)-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1151][1152]
制备1-环丙基-6-氟-7-(4-羟基哌啶-1-基)-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1153]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.15g，1.0eq.)、4-羟基哌啶(0.083g，3.0eq.)、cs2co3(0.18g，2.0eq.)和binap(0.051g，0.3eq.)的混合物在旋转蒸发仪上减压干燥15分钟。然后加入无水dmf(3.0ml)并将所得混合物在惰性气氛下在115℃搅拌16小时。之后，反应混合物用etoac稀释并通过硅藻土垫过滤。将滤液真空浓缩并在水和etoac之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp,dcm：meoh)纯化。将分离的样品溶解在dcm中并与清除剂quadrapure mpa一起搅拌15分钟。过滤出清除剂，真空浓缩滤液并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)另外纯化残余物。使用在et2o中的2mhcl(0.032ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(10.0ml)将化合物转化为hcl盐以提供产物(0.040g，93％产率)，为黄色粉末。esi-ms：611.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.23
–
8.20(m,1h),8.19
–
8.15(m,1h),7.92
–
7.88(m,1h),7.86
–
7.80(m,1h),7.78
–
7.73(m,1h),7.45
–
7.33(m,4h),4.08
–
3.78(m,6h),3.76
–
3.68(m,1h),3.66
–
3.57(m,2h),3.51
–
3.43(m,1h),3.12
–
2.99(m,4h),2.91
–
2.81(m,1h),2.57
–
2.50(m,3h),2.42
–
2.35(m,3h),2.23
–
2.15(m,1h),2.10
–
1.93(m,3h),1.82
–
1.64(m,4h),1.36
–
1.27(m,2h),0.99
–
0.92(m,2h)。
[1154]
实施例33.1-环丙基-6-氟-7-[3-(甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1155][1156]
制备n-{1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基}-n-甲基氨基甲酸叔丁酯
[1157]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.22g，1.0eq.)、n-甲基-n-(吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(0.12g，1.5eq.)、cs2co3(0.42g，3.2eq.)和无水1,4-二噁烷(5.9ml)用氩气吹扫5分钟。然后，加入pd2(dba)3(0.074g，0.2eq.)和xantphos(0.07g，0.3eq.)。将所得混合物再次用氩气吹扫几分钟，并在115℃搅拌过夜。随后，将混合物冷却至环境温度，通过硅藻土垫过滤,用dcm洗涤垫，真空浓缩滤液。将残余物溶于dcm，加入清除剂quadrapure mpa，并将混合物在室温搅拌过夜。然后，过滤混合物并真空浓缩。残余物通过fcc(用nh3去活化的sihp；dcm：meoh)纯化并通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得到产物(0.21g，73％产率)，为白色固体。esi-ms：710.3[m h]
。
[1158]
制备1-环丙基-6-氟-7-[3-(甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1159]
将在1,4-二噁烷中的4m hcl溶液(3.0ml，44.0eq.)加入n-{1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基}-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.194g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(5.2ml)中的溶液中并将所得混合物在55℃搅拌1小时。然后，将反应混合物真空浓缩并用7m nh3在meoh中的溶液将残余物碱化至ph～11，并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)纯化，得到产物(0.09g，54％产率)，为淡黄色固体。esi-ms：610.3[m h]
。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.15(d,j＝5.2hz,1h),8.08(d,j＝2.9hz,1h),7.81(s,1h),7.75(d,j＝14.8hz,1h),7.34(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.24(s,1h),7.23
–
7.17(m,1h),7.10(d,j＝8.6hz,1h),6.91(d,j＝7.6hz,1h),3.89
–
3.68(m,7h),3.64
–
3.54(m,2h),3.47
–
3.34(m,3h),3.00
–
2.89(m,1h),2.89
–
2.78(m,1h),2.71
–
2.62(m,1h),2.44(s,3h),2.40(s,3h),2.35(s,3h),2.30
–
2.20(m,1h),2.18
–
2.09(m,1h),1.98
–
1.85(m,2h),1.74
–
1.57(m,2h),1.30
–
1.20(m,2h),0.96
–
0.81(m,2h)。
[1160]
实施例34.3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶基-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1161][1162]
制备3-(二甲基氨基)-1-(2-硝基苯基)丙-2-烯-1-酮
[1163]
将1-(2-硝基苯基)乙-1-酮(0.81ml，1.0eq.)和(二甲氧基甲基)二甲基胺(0.77ml，0.95eq.)在dmf(5.0ml)中的溶液在100℃加热3小时。然后，将反应混合物减压浓缩，形成的固体用et2o洗涤，过滤收集，得到产物(1.14g，80％产率)，为黄色固体。esi-ms：221.3[m h]
。
[1164]
制备1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1165]
3-(二甲基氨基)-1-(2-硝基苯基)丙-2-烯-1-酮(0.8g，1.0eq.),k2co3(1.4g，3.0eq.)在dmf(6.0ml)中的混合物在100℃加热2小时，然后在相同温度继续加热3天。之后，将反应混合物冷却至室温并在etoac和水之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(0.43g，65％产率)，为黄色固体。esi-ms：188.1[m h]
。
[1166]
制备4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲醛
[1167]
将1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.43g，1.0eq.)、hmt(0.64g，2.0eq.)和tfa(6.0ml)的混合物在100℃加热过夜。然后，将反应混合物冷却至室温并加入冰水。将所得混合物搅拌10分钟，然后用饱和na2co3水溶液碱化并用dcm洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过
滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.28g，57％产率)，为白色固体。esi-ms：216.3[m h]
。
[1168]
制备3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1169]
在压力容器中装入的(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体11)(0.15g，1.0eq.)、4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(0.099g，1.0eq.)和dce(3.0ml)用nabh(oac)3(0.27g，2.8eq.)分批处理。将所得混合物在室温搅拌过夜，然后在水和dcm之间分配。有机层用nahco3、盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.18g，61％产率)，为黄色固体。esi-ms：527.7[m h]
。
[1170]
制备3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1171]
将3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.18g，1.0eq.)、铁粉(0.06g，3.0eq.)、nh4cl(0.09g，5.0eq.)、etoh(6.0ml)和h2o(0.5ml)的混合物回流搅拌1小时。然后，将反应混合物冷却至室温，用meoh稀释，通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化。使用et2o中的2m hcl(0.102ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(2.0ml)将获得的样品转化为hcl盐，得到产物(0.094g，51％产率)，为褐色固体。esi-ms：497.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.37(dd,j＝8.2,1.6hz,1h),8.24
–
8.15(m,1h),8.11(s,1h),7.91
–
7.82(m,2h),7.76(ddd,j＝8.7,6.9,1.7hz,1h),7.45(ddd,j＝8.0,6.9,0.9hz,1h),7.40
–
7.26(m,3h),6.90(d,j＝9.5hz,1h),5.09(hept,j＝6.6hz,1h),4.06
–
3.78(m,4h),3.78
–
3.67(m,1h),3.43
–
3.35(m,1h),3.11
–
2.93(m,1h),2.86
–
2.72(m,1h),2.70
–
2.52(m,1h),2.36(s,3h),2.18
–
2.06(m,1h),2.01
–
1.87(m,1h),1.77
–
1.56(m,2h),1.50(d,j＝6.6hz,6h)。
[1172]
实施例35.3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1173][1174]
制备1-(氧杂环丁烷-3-基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛
[1175]
将4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体1)(0.5g，1.0eq.)加入3-碘氧杂环丁烷(0.73g，1.4eq.)和k2co3(1.6g，4.0eq.)在dmf(13.3ml)中的混合物中。将所得混合物在120℃搅拌24小时，然后加入额外部分的3-碘氧杂环丁烷(0.5g，0.94eq.)并在120℃再继续加热27小时。之后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得到产物(0.139g，21％产率)，为米色固体。esi-ms：230.1[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.20(s,1h),8.47(s,1h),8.34(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.83(ddd,j＝8.7,7.1,1.7hz,1h),7.60
–
7.55(m,1h),7.51(d,j＝8.5hz,1h),5.82(quint,j＝6.9hz,1h),5.13
–
5.06(m,2h),5.00
–
4.94(m,2h)。
[1176]
制备3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1177]
将(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体11)(0.095g，1.0eq.)、1-(氧杂环丁烷-3-基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(0.073g，1.1eq.)和无水dce(3.0ml)的混合物在60℃搅拌1.5小时。然后，分批加入nabh(oac)3(0.154g，2.5eq.)并将所得混合物在60℃搅拌3小时。随后，将反应混合物在naoh水溶液和dcm之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.12g，76％产率)，为黄色固体。esi-ms：541.6[m h]
。
[1178]
制备3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1179]
将3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.12g，1.0eq.)在meoh(3.0ml)中的溶液真空脱气并用氩气吹扫(3次)。然后，添加一份pd/c(10wt.％，0.012g)并将所得混合物再次用氩气吹扫(两次)。然后，引入氢气并将混合物在氢气气氛下于室温搅拌2小时。然后，将
反应混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。残余物通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)纯化，得到产物(0.037g，33％产率)，为白色固体。esi-ms：511.4[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.40
–
8.35(m,1h),8.22(s,1h),8.21
–
8.18(m,1h),7.74(ddd,j＝8.7,7.0,1.6hz,1h),7.67
–
7.64(m,1h),7.46(ddd,j＝8.1,7.0,0.9hz,1h),7.40(d,j＝8.7hz,1h),7.35(dd,j＝8.9,2.9hz,1h),7.32
–
7.24(m,2h),6.58(dd,j＝8.9,0.7hz,1h),5.82
–
5.73(m,1h),5.25
–
5.17(m,2h),4.88
–
4.83(m,2h),3.92
–
3.86(m,4h),3.68
–
3.58(m,1h),3.32
–
3.26(m,1h),3.09
–
2.96(m,1h),2.76(t,j＝10.8hz,1h),2.63
–
2.53(m,1h),2.35(s,3h),2.22
–
2.11(m,1h),1.98
–
1.88(m,1h),1.78
–
1.54(m,2h)。
[1180]
实施例36.7-氨基-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮
[1181][1182]
制备7-氯-1-环丙基-6-氟-1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-4-酮
[1183]
在冰冷却浴中保持在惰性气氛下将nabh4(6.0g，4.5eq.)缓慢加入到7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢-1,8-萘啶-3-甲酸(10.0g，1.0eq.)在meoh(150.0ml)中的溶液中。使混合物升温至室温并搅拌16小时。然后，加入ptsa一水合物(0.67g，0.1eq.)并将所得混合物加热回流4小时。之后，使混合物冷却至室温并真空除去溶剂。残余物在水和dcm之间分配。合并的有机层经无水mgso4干燥并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(5.97g，70％产率)，为黄色固体。esi-ms：241.1[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.90(d,j＝7.9hz,1h),3.62
–
3.56(m,2h),2.68
–
2.61(m,3h),0.88
–
0.82(m,2h),0.72
–
0.67(m,2h)。
[1184]
制备7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢-1,8-萘啶-3-甲醛
[1185]
在0℃将7-氯-1-环丙基-6-氟-1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-4-酮(0.59g，1.0eq.)在thf(5.0ml)中的溶液加入在thf中的1m nahmds(0.54g，1.2eq.)在thf(5.0ml)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌5分钟，然后加入甲酸乙酯(0.26ml，1.3eq.)，继续搅拌1h。通过加入饱和nh4cl水溶液(至ph中性)淬灭反应。将产物萃取到etoac中。合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。此外，水层也真空浓缩，残余物用乙酸乙酯冲洗。将两份粗残余物合
并并溶解在无水meoh(20.0ml)中并加入mno2(1.073g，5.0eq.)。在室温搅拌该混合物18小时后，通过硅藻土过滤。滤饼用dcm-甲醇混合物(1：1)冲洗，真空浓缩滤液。将残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化并通过随后的两轮fcc(sihp；dcm：meoh)和(sihp：15μm；hex：etoac，带有2％的dcm)再纯化，得到产物(0.181g，28％产率)，为橙色固体。esi-ms：268.1[m h]
。
[1186]
制备7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮(中间体15)
[1187]
在干燥反应器容器中装入(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)(0.31g，1.0eq.)、7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢-1,8-萘啶-3-甲醛(0.28g，1.0eq.)和dce(15.0ml)，所得混合物在50℃加热4小时。然后，将混合物冷却至0℃并加入nabh(oac)3(0.45g，2.0eq.)。在室温继续反应16小时。之后，加入水和饱和nahco3水溶液并用dcm萃取混合物。合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.46g，75％产率)，为黄色固体。esi-ms：547.5[m h]
。
[1188]
制备7-氨基-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮
[1189]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮(中间体15)(0.1g，1.0eq.)和nan3(0.036g，3.0eq.)在dmf(5.0ml)中的溶液在65℃加热4小时。然后，使反应混合物冷却至室温并搅拌16小时。之后，将反应混合物倒入50.0ml冷水中，所得混合物用etoac洗涤。有机层经无水mgso4干燥，过滤，真空浓缩并干燥。将残余物溶解在etoh(10.0ml)中并加入10％pd/c(0.011g，0.05eq.)。将所得混合物在h2气氛下搅拌2小时。然后，混合物通过硅藻土垫过滤。用meoh洗涤垫，真空浓缩滤液。残余物通过fcc(sihp；dcm：带有nh3的meoh)纯化并通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得到产物(0.039g，40％产率)，为白色固体。esi-ms：528.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.17(d,j＝5.2hz,1h),8.08(d,j＝2.9hz,1h),7.87(d,j＝10.8hz,1h),7.79(s,1h),7.34(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.25(s,1h),7.24
–
7.18(m,1h),7.11(d,j＝8.6hz,1h),3.90
–
3.82(m,3h),3.76(s,2h),3.64
–
3.56(m,1h),3.53
–
3.45(m,1h),3.00
–
2.91(m,1h),2.90
–
2.80(m,1h),2.75
–
2.65(m,1h),2.41(s,3h),2.38(s,3h),2.16
–
2.09(m,1h),1.96
–
1.88(m,1h),1.75
–
1.58(m,2h),1.20
–
1.11(m,2h),0.86
–
0.79(m,2h)。
[1190]
实施例37.1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮盐酸盐
[1191][1192]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮盐酸盐
[1193]
在25℃将dipea(0.157ml，2.0eq.)加入7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮(中间体15)(0.247g，1.0eq.)和(3r)-吡咯烷-3-醇(0.047ml，1.3eq.)在mecn(5.0ml)中的混合物中。将所得混合物在50℃加热16小时，随后在水和dcm之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化。使用在et2o中的2m hcl(0.175ml，1.05eq.)和作为溶剂的meoh(21.0ml)和h2o(5.0ml)的混合物将化合物转化为hcl盐以提供产物(0.21g，99％产率)，为黄色固体。esi-ms：598.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.20(d,j＝5.2hz,1h),8.12(d,j＝2.9hz,1h),7.87(d,j＝13.2hz,1h),7.81(s,1h),7.56
–
7.48(m,1h),7.34
–
7.30(m,1h),7.29
–
7.22(m,2h),4.59
–
4.51(m,1h),4.02
–
3.75(m,9h),3.71
–
3.62(m,1h),3.53
–
3.44(m,1h),3.05
–
2.88(m,2h),2.84
–
2.70(m,1h),2.47(s,3h),2.41(s,3h),2.22
–
2.02(m,3h),2.02
–
1.88(m,1h),1.80
–
1.62(m,2h),1.24
–
1.15(m,2h),0.91
–
0.80(m,2h)。
[1194]
实施例38.3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1195][1196]
制备3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1197]
在干燥反应器容器中装入(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体11)(0.38g，1.0eq.)、4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体1)(0.2g，1.0eq.)和dce和dmf(19.0ml，v/v,15/4)的混合物。将反应混合物在60℃搅拌2小时。然后，将混合物冷却至0℃并加入nabh(oac)3(0.49g，2.0eq.)并在室温继续反应16小时。之后，加入水饱和nahco3水溶液，所得混合物用dcm洗涤。合并的有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)再纯化，得到产物(0.35g，60％产率)，为黄色固体。esi-ms：485.2[m h]
。1h nmr(300mhz,甲醇-d4)δ8.29
–
8.20(m,1h),8.18(d,j＝5.4hz,1h),8.14
–
8.06(m,2h),7.99(s,1h),7.65(ddd,j＝8.4,7.0,1.5hz,1h),7.52
–
7.46(m,1h),7.44
–
7.34(m,2h),7.27(d,j＝8.5hz,2h),4.31
–
4.19(m,1h),4.11
–
3.95(m,1h),3.91
–
3.74(m,4h),3.25
–
3.14(m,1h),3.11
–
2.96(m,1h),2.97
–
2.79(m,1h),2.37(s,3h),2.23
–
2.10(m,1h),1.99
–
1.73(m,2h),1.71
–
1.50(m,1h)。
[1198]
制备3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1199]
将10％pd/c(0.03g，0.1eq.)加入3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(6-硝基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.13g，1.0eq.)在etoh(10.0ml)中的溶液中。将所得混合物在h2气氛下搅拌4小时。然后，通过硅藻土垫过滤反应混合物。垫用meoh洗涤，真空浓缩滤液。残余物通过制备型hplc(h2o：mecn：tfa)纯化。样品用饱和nahco3水溶液碱化并通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得到产物(0.06g，48％产率)，为白色固体。esi-ms：455.7[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.26(ddd,j＝8.3,1.5,0.6hz,1h),8.19(dd,j＝5.1,0.8hz,1h),8.02(s,1h),7.69
–
7.63(m,2h),7.53
–
7.49(m,
1h),7.39(ddd,j＝8.1,6.9,1.1hz,1h),7.34(dd,j＝8.9,2.9hz,1h),7.29
–
7.25(m,2h),6.59
–
6.56(m,1h),3.88
–
3.78(m,4h),3.63
–
3.56(m,1h),3.29
–
3.26(m,1h),3.02
–
2.92(m,1h),2.77
–
2.69(m,1h),2.59
–
2.50(m,1h),2.39(s,3h),2.16
–
2.08(m,1h),1.94
–
1.86(m,1h),1.73
–
1.52(m,2h)。
[1200]
实施例39.1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1201][1202]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1203]
在压力容器中装入7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.3g，1.0eq.)、(3s)-吡咯烷-3-醇盐酸盐(0.136g，2.0eq.)、cs2co3(0.38g，2.1eq.)和dmf(3.0ml)。将所得混合物用氩气吹扫5分钟。随后，加入binap(0.034g，0.1eq.)和pd2(dba)3(0.028g，0.05eq.)，关闭容器并将所得混合物在115℃搅拌过夜。然后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。残余物通过两个连续的fcc(sihp；dcm：meoh)和(sihp，15μm；dcm：meoh)进行纯化，然后通过rp-fcc(h2o：mecn)并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)再纯化。用et2o研制后，滤出沉淀并真空干燥。使用et2o中的2m hcl(0.042ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的meoh(20.0ml)和h2o(5.0ml)的混合物将分离的样品转化为hcl盐，得到产物(0.053g，15％产率)，为黄色固体。esi-ms：597.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.31(d,j＝5.8hz,1h),8.26(d,j＝3.0hz,1h),8.07
–
8.02(m,1h),7.88(s,1h),7.75(d,j＝14.6hz,1h),7.70
–
7.59(m,3h),6.94(d,j＝7.7hz,1h),4.60
–
4.54(m,1h),4.24
–
4.12(m,3h),4.07
–
3.74(m,5h),3.69
–
3.61(m,1h),3.58
–
3.53(m,1h),3.48
–
3.40(m,1h),3.23
–
3.08(m,2h),2.98
–
2.88(m,1h),2.62(s,3h),2.50(s,3h),2.29
–
1.96(m,4h),1.89
–
1.66(m,2h),1.37
–
1.27(m,2h),1.02
–
0.94(m,2h)。
[1204]
实施例40.3-({[(3s)-1-[6-(羟基甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1205]
[1206][1207]
制备(5-溴吡啶-2-基)甲醇
[1208]
将nabh4(0.82g，2.5eq.)分批加入冷却到0℃的5-溴吡啶-2-甲酸甲酯(1.87g，1.0eq.)在无水meoh(20.0ml)中的溶液。将所得混合物在氩气气氛下在室温搅拌过夜。然后，将反应混合物真空浓缩并将残余物在naoh水溶液和dcm之间分配。合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到产物(1.6g，98％产率)，为无色油状物。esi-ms：188.0[m h]
。
[1209]
制备乙酸(5-溴吡啶-2-基)甲基酯
[1210]
将ac2o(2.0ml，2.5eq.)加入(5-溴吡啶-2-基)甲醇(1.6g，1.0eq.)和tea(4.74ml，4.0eq.)在无水dcm(20.0ml)中的溶液中。将所得混合物在氩气气氛下在室温搅拌26小时。然后，将反应混合物在naoh水溶液和dcm之间分配。合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过两个连续的fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(1.5g，77％产率)，为黄色固体。esi-ms：230.1[m h]
。
[1211]
制备乙酸{5-[(3s)-3-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-基}甲基酯
[1212]
将n-[(3s)-哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(1.12g，1.3eq.)、乙酸(5-溴吡啶-2-基)甲基酯(1.0g，1.0eq.)、cs2co3(2.8g，2eq.)和无水1,4-二噁烷(20.0ml)的混合物用氩气吹扫10分钟。然后，在惰性气氛下加入pd2(dba)3(0.197g，0.05eq.)和xantphos(0.149g，0.06eq.)并将所得混合物再次用氩气吹扫另外10分钟。然后，将混合物在120℃搅拌24小时。随后，将反应混合物冷却至环境温度，通过硅藻土垫过滤并减压浓缩。残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(0.98g，61％产率)，为深棕色油状物。esi-ms：350.3[m h]
。
[1213]
制备{5-[(3s)-3-氨基哌啶-1-基]吡啶-2-基}甲醇
[1214]
向乙酸{5-[(3s)-3-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-基}甲基酯(0.98g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(7.0ml)中的溶液中加入于1,4-二噁烷中的4mhcl溶液(3.3g，5.0eq.)。将所得混合物在60℃搅拌1小时。然后，将反应混合物真空浓缩。将残余物在naoh水溶液和chcl3和iproh(4/1)的混合物之间分配。合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到产物(0.46g，74％产率)，为深棕色油状物。esi-ms：208.1[m h]
。
[1215]
制备3-({[(3s)-1-[6-(羟基甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1216]
1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体7)(0.33g，1.0eq.)、naoac(0.14g，1.0eq.)和{5-[(3s)-3-氨基哌啶-1-基]吡啶-2-基}甲醇(0.46g，1.1eq.)在无水meoh(10.0ml)中的溶液在室温搅拌过夜。然后，加入nabh4(0.09g，1.3eq.)并将所得混合物在室温搅拌1小时。之后，将反应混合物真空浓缩并将残余物在naoh水溶液和dcm之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.34g，51％产率)，为白色固体。esi-ms：379.6[m h]
。
[1217]
制备3-({[(3s)-1-[6-(羟基甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1218]
将2-甲基吡啶-4-甲醛(0.07g，1.2eq.)和3-({[(3s)-1-[6-(羟基甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.2g，1.0eq.)在dce(5.0ml)中的混合物在60℃搅拌2小时。然后，加入nabh(oac)3(0.28g，2.5eq.)并在60℃再搅拌2小时。然后，加入nabh(oac)3(0.28g，2.5eq.)并将所得混合物在60℃再搅拌24小时。随后，将反应混合物在naoh水溶液和dcm之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.088g，34％产率)，为白色固体。esi-ms：484.9[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.31
–
8.27(m,1h),8.22
–
8.17(m,2h),8.04(s,1h),7.72(ddd,j＝8.6,6.9,1.7hz,1h),7.63(d,j＝8.4hz,1h),7.38(ddd,j＝8.0,6.9,1.0hz,1h),7.32(dd,j＝8.7,2.9hz,1h),7.27
–
7.20(m,3h),5.15(t,j＝5.8hz,1h),4.43(d,j＝5.8hz,2h),3.96
–
3.88(m,1h),3.86(s,3h),3.82
–
3.55(m,5h),2.83(t,j＝11.3hz,1h),2.78
–
2.58(m,2h),2.38(s,3h),2.07
–
1.95(m,1h),1.82
–
1.71(m,1h),1.63
–
1.39(m,2h)。
[1219]
实施例41.1-(2-羟基乙基)-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1220][1221]
制备1-(2-羟基乙基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛
[1222]
将4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体1)(0.5g，1.0eq.)悬浮于无水dmf(20.0ml)中并加入k2co3(1.12g，2.8eq.)。将所得混合物在室温搅拌10分钟，然后依次加入ki(1.3g，2.8eq.)和2-溴乙醇(0.57ml，2.8eq.)。将反应混合物在90℃搅拌24小时。随后将混合物通过漏斗过滤并将残余物用dcm洗涤。将滤液真空浓缩，残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，并通过fcc(sihp；dcm：etoac)再纯化得到产物(0.16g，25％产率)，为米色固体。esi-ms：218.2[m h]
。
[1223]
制备乙酸2-(3-甲酰基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基)乙基酯
[1224]
将醋酸酐(0.1ml，2.3eq.)加入置于冷却浴中的1-(2-羟基乙基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(0.1g，1.0eq.),dmap(0.003g，0.05eq.)和吡啶的混合物(2.0ml)中并将混合物在室温搅拌2.5小时。混合物用饱和nahco3水溶液稀释，产物用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(0.082g，69％产率)，为白色固体。esi-ms：260.3[m h]
。
[1225]
制备乙酸2-[3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基]乙基酯
[1226]
将2-(3-甲酰基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基)乙基乙酸酯(0.082g，1.0eq.)、(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)(0.11g，1.1eq.)和dce(5.0ml)的混合物在50℃加热1小时，然后在室温搅拌过夜。随后，加入nabh(oac)3(0.15g，2.2eq.)并将所得混合物在室温搅拌1.5小时。然后，混合物在水和dcm之间分配。有机层用水、盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过ffc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.103g，61％产率)，为黄色固体。esi-ms：540.1[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.29(d,j＝5.1hz,1h),8.20(dd,j＝8.1,1.6hz,1h),8.13(d,j＝2.9hz,1h),8.02(s,1h),7.77(d,j＝8.6hz,1h),7.70(ddd,j＝8.6,6.8,1.7hz,1h),7.36(ddd,j＝7.9,6.8,1.0hz,1h),7.30-7.23(m,2h),7.20(dd,j＝8.5,3.0hz,1h),7.01(d,j＝
8.5hz,1h),4.58(t,j＝5.2hz,2h),4.33(t,j＝5.2hz,2h),3.89-3.52(m,6h),2.81-2.69(m,2h),2.61-2.53(m,1h),2.39(s,3h),2.32(s,3h),2.04-1.94(m,1h),1.77(s,3h),1.76-1.71(m,1h),1.59-1.36(m,2h)。
[1227]
制备1-(2-羟基乙基)-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1228]
将乙酸2-[3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基]乙基酯(0.097g，1.0eq.)、lioh*h2o(0.038g，5.0eq.)、甲醇(5.0ml)和h2o(1.0ml)的混合物在室温搅拌过夜。然后，将混合物用水和饱和nahco3水溶液稀释并将产物萃取到dcm中。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)纯化，得到产物(0.047g，52％产率)，为淡黄色固体。esi-ms：498.5[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.29(d,j＝5.0hz,1h),8.20(dd,j＝8.1,1.6hz,1h),8.13(d,j＝3.0hz,1h),8.03(s,1h),7.73(d,j＝8.6hz,1h),7.67(ddd,j＝8.6,6.7,1.7hz,1h),7.34(ddd,j＝8.0,6.8,1.0hz,1h),7.27(s,1h),7.24(d,j＝5.0hz,1h),7.20(dd,j＝8.5,3.0hz,1h),7.00(d,j＝8.5hz,1h),4.99(t,j＝5.3hz,1h),4.43
–
4.26(m,2h),3.88
–
3.69(m,5h),3.66
–
3.54(m,3h),2.80
–
2.67(m,2h),2.62
–
2.53(m,1h),2.39(s,3h),2.31(s,3h),2.05
–
1.91(m,1h),1.81
–
1.67(m,1h),1.59
–
1.38(m,2h)。
[1229]
实施例42.6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮
[1230]
[1231][1232]
制备2-(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-羰基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酸乙酯
[1233]
将2,6-二氯-5-氟吡啶-3-甲酸(5.4g，1.0eq.)悬浮于socl2(9.4ml，5.0eq.)并将所得混合物在80℃搅拌2小时。在此期间溶液变得澄清。然后，将混合物用共溶剂dcm浓缩至干。将残余物溶解在甲苯(20.0ml)中，并在5分钟内于室温将所得溶液加入搅拌的3-(n,n-二甲基氨基)丙烯酸乙酯(3.7ml，1.0eq.)和dipea(9.45ml，2.1eq.)的混合物中。将反应混合物在室温搅拌15分钟，然后在90℃加热3.5小时。之后，混合物在dcm和水之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(2.8g，32％产率)，为橙色油状.esi-ms：335.0[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.04(d,j＝7.9hz,1h),7.95(s,1h),3.91(q,j＝7.1hz,2h),3.39(s,3h),2.93(s,3h),0.94(t,j＝7.1hz,3h)。
[1234]
制备2-(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-羰基)-3-[(丙-2-基)氨基]丙-2-烯酸乙酯
[1235]
将异丙胺(0.3ml，1.1eq.)加入2-(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-羰基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酸乙酯(1.05g，1.0eq.)在etoh：et2o混合物(8：3)(22.0ml)中的溶液中。将反应混
合物在室温搅拌15分钟。然后，真空蒸发溶剂，得到产物(1.18g，99％产率)，为橙色油状，其不经进一步纯化用于下一步。esi-ms：349.0[m h]
[1236]
制备7-氯-6-氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯
[1237]
将2-(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-羰基)-3-[(丙-2-基)氨基]丙-2-烯酸乙酯(0.85g，1.0eq.)在mecn(8.0ml)中的溶液用k2co3(0.53g，1.6eq.)处理并将所得混合物在80℃搅拌2小时。之后，通过加入水淬灭反应。然后，将反应混合物与其他三份使用不同溶剂(mecn、nmp和dmac)、使用相同条件但从较少量的2-(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-羰基)-3-[(丙-2-基)氨基]丙-2-烯酸乙酯(0.1g，0.3mmol)开始的试验反应设置的粗混合物混合。所得混合物用dcm洗涤，合并的有机层经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物溶解在5.0ml dcm中并加入庚烷。滤出沉淀并真空干燥，得到7-氯-6-氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯(0.81g，85％产率)，为灰白色固体。esi-ms：313.9[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.71(s,1h),8.48(d,j＝7.9hz,1h),5.53
–
5.43(m,1h),4.26(q,j＝7.1hz,2h),1.50(s,3h),1.49(s,3h),1.29(t,j＝7.1hz,3h)。
[1238]
制备7-氯-6-氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-3-甲酸
[1239]
将7-氯-6-氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-3-甲酸乙酯(0.81g，1.0eq.)、浓hcl(2.0ml),h2o(6.0ml)和1,4-二噁烷(12.0ml)的混合物在100℃搅拌4小时。随后，将反应混合物冷却至室温，滤出沉淀物并干燥，得到产物(0.67g，产率90％)，为灰白色固体，其不经进一步纯化用于下一步。esi-ms：285.0[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ14.40(s,1h),9.01(s,1h),8.73(d,j＝7.6hz,1h),5.61(hept,j＝6.4hz,1h),1.56(d,j＝6.7hz,6h)。
[1240]
制备7-氯-6-氟-1-(丙-2-基)-1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-4-酮
[1241]
将nabh4(0.40g，4.5eq.)缓慢加入到在惰性气氛下搅拌的7-氯-6-氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-3-甲酸(0.67g，1.0eq.)在无水meoh(10.0ml)中的溶液中。之后，使混合物升温至室温并加入ptsa一水合物(0.045g，0.1eq.)。在回流加热1.5小时后，使混合物冷却至室温并真空除去溶剂。残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(0.46g，81％产率)，为黄色固体。esi-ms：243.1[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.88(d,j＝8.0hz,1h),4.88(hept,j＝6.7hz,1h),3.52
–
3.44(m,2h),2.67
–
2.59(m,2h),1.17(d,j＝6.8hz,6h)。
[1242]
制备7-氯-6-氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-3-甲醛
[1243]
在0℃将溶解于thf(2.0ml)的7-氯-6-氟-1-(丙-2-基)-1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-4-酮(0.46g，1.0eq.)加入nahmds(2m于thf中，1.14ml，1.2eq.)在无水thf(2.0ml)中的溶液中。将反应混合物在相同温度搅拌30分钟，随后加入甲酸乙酯(0.2ml，1.3eq.)在thf(2.0ml)中溶液。将混合物搅拌1小时，然后通过加入饱和nh4cl水溶液淬灭反应，混合物用etoac洗涤。水层进一步用etoac(x 3)洗涤。合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤，浓缩并真空干燥。残余物溶解于无水1,4-二噁烷(10.0ml)并加入mno2(0.82g，4.2eq.)。将所得混合物在50℃加热16小时。然后，将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤并用dcm：meoh(v/v,7/3)的混合物洗涤垫。滤液真空浓缩，残余物通过fcc(sihp；dcm：etoac)纯化，得到产物(0.291g，57％产率)，为黄色固体。ap-ms：269.0[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.14(s,1h),8.68(s,1h),8.58(d,j＝7.7hz,1h),5.51(hept,j＝6.7hz,1h),1.52(d,j＝6.8hz,
6h)。
[1244]
制备7-氯-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮
[1245]
在干燥反应器容器中装入(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)(0.31g，1.02eq.)、7-氯-6-氟-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-3-甲醛(0.29g，1.0eq.)和dce(10.0ml)。将混合物在50℃加热4小时，然后冷却至0℃。然后，加入nabh(oac)3(0.43g，2.0eq.)并将所得混合物在室温搅拌16小时。随后，添加水饱和nahco3水溶液并用dcm洗涤混合物。合并的有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化。分离的材料通过fcc(sihp；dcm：meoh带有nh3)和rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得到产物(0.40g，70％产率)，为白色固体。esi-ms：549.4[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.42
–
8.34(m,1h),8.24
–
8.15(m,2h),8.06(d,j＝3.0hz,1h),7.34(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.30(s,1h),7.27
–
7.22(m,1h),7.11(d,j＝8.6hz,1h),5.75
–
5.59(m,1h),3.96
–
3.76(m,5h),3.64
–
3.53(m,1h),3.02
–
2.92(m,1h),2.90
–
2.82(m,1h),2.77
–
2.64(m,1h),2.48
–
2.35(m,6h),2.22
–
2.07(m,1h),2.00
–
1.85(m,1h),1.77
–
1.57(m,2h),1.53
–
1.36(m,6h)。
[1246]
制备6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮
[1247]
在25℃将7-氯-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢-1,8-萘啶-4-酮(0.15g，1.0eq.)和(3r)-吡咯烷-3-醇(0.028ml，1.3eq.)在mecn(5.0ml)中的混合物用dipea(0.093ml，2.0eq.)处理。将反应混合物在50℃加热18小时。然后，加入水并用dcm洗涤所得混合物。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.16g，95％产率)，为黄色固体。esi-ms：600.8[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.19(d,j＝5.3hz,1h),8.07(d,j＝2.9hz,1h),7.94(s,1h),7.89(d,j＝13.2hz,1h),7.37
–
7.28(m,2h),7.27
–
7.22(m,1h),7.10(d,j＝8.6hz,1h),5.72
–
5.57(m,1h),4.56
–
4.46(m,1h),3.99
–
3.73(m,9h),3.65
–
3.54(m,1h),3.01
–
2.89(m,1h),2.90
–
2.78(m,1h),2.73
–
2.62(m,1h),2.41(s,3h),2.40(s,3h),2.18
–
1.99(m,3h),1.96
–
1.85(m,1h),1.76
–
1.59(m,2h),1.43(d,j＝6.8hz,6h)。
[1248]
实施例43.3-({[(3s)-1-[6-(2-羟基乙基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1249]
[1250][1251]
制备2-(5-溴吡啶-2-基)乙-1-醇
[1252]
在配备温度计的双颈圆底烧瓶中装入无水thf(2.0ml)并冷却至-78℃。然后，在-78℃逐滴加入lda(2m于thf/庚烷/乙苯中，1.74ml，1.5eq.)。将所得混合物搅拌15分钟，然后在-78℃缓慢滴加5-溴-2-甲基吡啶(0.4g，1.0eq.)在无水thf(4.0ml)中的溶液并将反应混合物在-78℃搅拌1.5小时。然后，滴加dmf(1.8ml，10.0eq.)并在-78℃继续搅拌1小时。随后，使混合物升温至室温并加入meoh(4.5ml)，随后加入nabh4(0.089g，1.0eq.)。在添加nabh4期间观察到产生热量，温度升至30℃。反应在室温持续30分钟，然后用饱和nh4cl水溶液淬灭。所得混合物用etoac(3x)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过两个连续的fcc(sihp；dcm：meoh)和(sihp；己烷：etoac)纯化，得到产物(0.204g，35％产率)，为淡黄色油状物。esi-ms：202.0[m h]
。
[1253]
制备乙酸2-(5-溴吡啶-2-基)乙基酯
[1254]
将2-(5-溴吡啶-2-基)乙-1-醇(0.17g，1.0eq.)放入用氩气冲洗的烘干烧瓶中，依次加入无水dcm(4.0ml)和tea(0.19ml，2.0eq.)。将反应混合物在冰浴中冷却并搅拌15分钟，然后滴加乙酰氯(0.07ml，1.5eq.)。将反应混合物在室温搅拌过夜并用饱和nahco3溶液淬灭并用dcm(3x)萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，然后经无水na2so4干燥并真空浓缩。通过fcc(sihp，hex：etoac)纯化残余物，得到所需产物(0.19g，定量产率)，为黄色液体。esi-ms：244.1,245.8[m h]
。
[1255]
制备乙酸2-{5-[(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-基}乙基酯
[1256]
将1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体5)(0.12g，1.0eq.)、2-(5-溴吡啶-2-基)乙基乙酸酯(0.09g，1.1eq.)、cs2co3(0.14g，1.4eq.)和无水1,4-二噁烷(3.0ml)放入压力容器中。将所得混合物用氩气吹扫5分钟，然后加入pd2(dba)3(0.014g，0.05eq.)和xantphos(0.018g，0.1eq.)并将反应混合物在115℃搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp,dcm：meoh)纯化，得到产物(0.049g，28％产率)，为黄色固体。esi-ms：540.4[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.1hz,1h),8.23
–
8.15(m,2h),8.03(s,1h),7.76
–
7.67(m,1h),7.65
–
7.58(m,1h),7.41
–
7.33(m,1h),7.28
–
7.21(m,3h),7.07(d,j＝
8.6hz,1h),4.28(t,j＝6.9hz,2h),3.94
–
3.83(m,4h),3.82
–
3.71(m,2h),3.70
–
3.54(m,3h),2.88(t,j＝6.7hz,2h),2.83
–
2.55(m,3h),2.37(s,2h),2.05
–
1.91(m,4h),1.81
–
1.69(m,1h),1.64
–
1.38(m,2h),1.36
–
1.20(m,1h)。
[1257]
制备3-({[(3s)-1-[6-(2-羟基乙基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1258]
将乙酸2-{5-[(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-基}乙基酯(0.05g，1.0eq.)溶于meoh(2.5ml)，然后加入h2o(1.0ml)，然后加入lioh xh2o(0.018g，4.9eq.)。将反应混合物在室温搅拌3小时，然后浓缩至干并在h2o和dcm之间分配。水相用15m naoh碱化至ph≈12并用dcm(3x)萃取。合并的有机层经无水na2so4干燥并真空浓缩。残余物通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)纯化，得到产物(0.025g，57％产率)，为白色固体。esi-ms：498.5[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.0hz,1h),8.21
–
8.17(m,2h),8.02(s,1h),7.74
–
7.69(m,1h),7.62(d,j＝8.6hz,1h),7.40
–
7.34(m,1h),7.26
–
7.20(m,3h),7.04(d,j＝8.5hz,1h),4.57(t,j＝5.3hz,1h),3.90
–
3.83(m,4h),3.73(q,2h),3.68
–
3.55(m,5h),2.79(t,j＝11.1hz,1h),2.76
–
2.69(m,3h),2.64
–
2.55(m,1h),2.37(s,3h),2.03
–
1.96(m,1h),1.79
–
1.72(m,1h),1.59
–
1.39(m,2h)。
[1259]
实施例44.3-({[(3s)-1-[5-(羟基甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1260][1261]
制备乙酸(5-溴吡啶-3-基)甲基酯
[1262]
将5-溴-3-吡啶甲醇(0.50g，1.0eq.)悬浮于dcm(3.0ml)并加入三甲胺(0.74ml，2.0eq.)，然后加入乙酰氯(0.47g，1.5eq.)。将反应混合物在室温搅拌过夜。之后，将反应混合物用dcm稀释并用nahco3水溶液、盐水洗涤并用无水na2so4干燥。粗产物通过fcc(sihp，
hex：etoac)纯化，得到产物(0.56g，82％产率)，为无色液体。esi-ms：231.1[m 2]
.
[1263]
制备乙酸{5-[(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-3-基}甲基酯
[1264]
将1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体5)(0.15g，1.0eq.)、(5-溴吡啶-3-基)甲基乙酸酯(0.10g，1.1eq.)、碳酸铯(0.18g，1.4eq.)和1,4-二噁烷(3.0ml)被放置在压力容器中。将所得混合物用氩气吹扫5分钟，然后加入pd2(dba)3(0.018g，0.1eq.)和xantphos(0.023g，0.1eq.)。将反应混合物在115℃搅拌过夜，通过硅藻土垫过滤并减压浓缩。粗混合物通过fcc(sihp,dcm：meoh)纯化得到产物(0.133g，57％产率)，为黄色固体。esi-ms：526.5[m h]
。
[1265]
制备3-({[(3s)-1-[5-(羟基甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1266]
将{5-[(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-3-基}甲基乙酸酯(0.13g，1.0eq.)悬浮于(1.0ml)和甲醇(5.0ml)。然后加入氢氧化锂一水合物(0.03g，5.0eq.)，反应混合物在室温搅拌过夜。在减压下浓缩反应混合物并将残余物在dcm和15m naoh水溶液之间分配。分离的有机层经无水na2so4干燥并浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp,h2o：mecn)纯化并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)再纯化，得到产物(0.043g，40％产率)，为白色粉末。esi-ms：484.4[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)8.35(dd,j＝8.3,1.5hz,1h),8.19
–
8.15(m,2h),8.02(s,1h),7.93
–
7.90(m,1h),7.81
–
7.75(m,1h),7.67(d,j＝8.6hz,1h),7.50
–
7.44(m,1h),7.42
–
7.37(m,1h),7.29
–
7.24(m,2h),4.60(s,2h),4.07
–
3.97(m,1h),3.93
–
3.81(m,7h),3.77
–
3.71(m,1h),3.01
–
2.92(m,2h),2.82
–
2.74(m,1h),2.33(s,3h),2.22
–
2.15(m,1h),1.96
–
1.90(m,1h),1.69(d,j＝7.5hz,2h)。
[1267]
实施例45.1-环丙基-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1268]
[1269][1270]
制备(2z)-2-[(z)-4-溴-2-氟苯甲酰基]-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酸乙酯
[1271]
将(2e)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酸乙酯(0.60g，1.0eq.)和n,n-二异丙基乙胺(1.1g，2.1eq.)的混合物在室温搅拌，并在5分钟内加入4-溴-2-氟苯甲酰氯(1.0g，1.0eq.)在甲苯(5.0ml)中的溶液。形成的黄色溶液在90℃的油浴中加热。3小时后，混合物用dcm/水稀释。分离的有机层经无水na2so4干燥并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp，etoac)纯化，得到产物(1.24g，81％产率)，为黄色油状物。esi-ms：344.0[m h]
。
[1272]
制备7-溴-1-环丙基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酸乙酯
[1273]
将(2z)-2-[(z)-4-溴-2-氟苯甲酰基]-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酸乙酯(1.24g，1.0eq.)和环丙胺(0.27g，1.3eq.)在甲苯(10.0ml)中于110℃加热2小时。浓缩反应混合物并将残余物在dmf(8.0ml)中稀释。然后加入k2co3(1.25g，2.5eq.)并将反应混合物在100℃加热过夜。冷却后，将反应混合物用dcm稀释，用水、盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp，hex：etoac)纯化，得到产物(0.97g，88％产率)，为黄色固体。esi-ms：337.2[m 2]
.
[1274]
制备7-溴-1-环丙基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酸
[1275]
将7-溴-1-环丙基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酸乙酯(0.95g，1.0eq.)悬浮在1m aq.hcl(8.0ml)中，将混合物在95℃搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩。然后，将残余物进一
步溶解在甲苯中，并以共沸混合物的形式除去痕量水分，得到产物(0.80g，92％产率)，为白色固体。esi-ms：309.9[m 2]
.
[1276]
制备7-溴-1-环丙基-1,2,3,4-四氢喹啉-4-酮
[1277]
将7-溴-1-环丙基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲酸(0.80g，1.0eq.)溶解于meoh(10.0ml)并将混合物在冰浴中冷却。然后分批加入硼氢化钠(0.51g，4.5eq.)，反应混合物在室温搅拌过夜。然后，加入ptsa一水合物(0.06g，0.1eq.)并回流继续搅拌3小时。将反应混合物真空浓缩，然后用dcm稀释，用水、盐水洗涤，经无水na2so4干燥并真空浓缩。粗产物混合物通过fcc(sihp，hex：etoac)纯化，得到产物(0.52g，66％产率)，为黄色固体。esi-ms：266.0[m h],267.9[m 2 h]
.
[1278]
制备7-溴-1-环丙基-4-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-3-甲醛
[1279]
将7-溴-1-环丙基-1,2,3,4-四氢喹啉-4-酮(0.40g，1.0eq.)在dcm(10.0ml)中的溶液滴加到甲酸乙酯(0.48ml，4.0eq.)和甲醇钠(0.32g，4.0eq.)的粘稠的混合物中。将反应混合物在室温搅拌3小时，随后用冰水淬灭。分离后，有机层用2m naoh洗涤。用浓盐酸将水层酸化至ph＝6。，然后用dcm洗涤。有机萃取物经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到产物(0.44g，91％产率)，为橙色固体。esi-ms：293.9[m h]
。
[1280]
制备7-溴-1-环丙基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体16)
[1281]
将7-溴-1-环丙基-4-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉-3-甲醛(0.44g，1.0eq.)和氧化锰(iv)(0.59g，5.0eq.)在meoh(10.0ml)中的混合物在室温搅拌2天。通过硅藻土垫过滤反应混合物。用dcm洗涤垫：meoh(4：1)，真空浓缩滤液。残余物通过fcc(sihp,dcm：meoh)纯化.纯化的产物用meoh研制，得到产物(0.17g，41％产率)，为黄色固体。esi-ms：293.2[m 2]
.
[1282]
制备7-溴-1-环丙基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1283]
将7-溴-1-环丙基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体16)(0.13g，1.0eq.)和(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)(0.14g，1.0eq.)悬浮于无水dce(5.0ml)。将所得混合物在室温搅拌30分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.26g，2.8eq.)并继续搅拌过夜。将反应混合物倒入冰冷的水中，然后加入nahco3。然后用dcm(3x)洗涤混合物。合并的有机层经无水na2so4干燥并真空浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp,h2o：mecn)纯化，得到产物(0.18g，68％产率)，为白色固体。esi-ms：574.1[m 2 h]
.
[1284]
制备1-环丙基-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1285]
将7-溴-1-环丙基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.1g，1.0eq.)、(r)-吡咯烷-3-醇盐酸盐(0.022g，1.5eq.)、碳酸铯(0.098g，1.8eq.)和1,4-二噁烷(2.0ml)的混合物放入压力容器中。将所得混合物用氩气吹扫5分钟，然后加入binap(0.021g，0.2eq.)和pd2(dba)3(0.015g，0.1eq.)并将反应混合物在95℃搅拌16小时。将反应冷却并通过硅藻土短垫过滤并真空浓缩。将残余物悬浮在dcm中，用水、盐水洗涤并用无水na2so4干燥。粗产物混合物通过fcc(sihp,meoh：dcm)纯化，然后通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)和rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化以提供产物(0.017g，17％产率)，为黄色固体。esi-ms：579.6[m h]
。1h nmr(400mhz,
甲醇-d4)δ8.17(d,j＝5.2hz,1h),8.13(d,j＝9.1hz,1h),8.10(d,j＝2.9hz,1h),7.81(s,1h),7.36(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.26(s,1h),7.24
–
7.22(m,1h),7.12(d,j＝8.6hz,1h),6.83(dd,j＝9.1,2.2hz,1h),6.77(d,j＝2.2hz,1h),4.63
–
4.56(m,1h),3.92
–
3.77(m,5h),3.66
–
3.57(m,3h),3.56
–
3.49(m,1h),3.41
–
3.35(m,2h),3.03
–
2.94(m,1h),2.86(t,j＝11.1hz,1h),2.76
–
2.64(m,1h),2.42(s,3h),2.35(s,3h),2.28
–
2.08(m,3h),1.99
–
1.86(m,1h),1.76
–
1.60(m,2h),1.34
–
1.21(m,3h),0.95
–
0.84(m,2h)。
[1286]
实施例46.1-[1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-4-甲酸
[1287]
制备n-[(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1288]
在压力容器中装入3-溴吡啶(3.0g，1.0eq.),n-[(3s)-哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(4.9g，1.3eq.)、cs2co3(8.35g，1.4eq.)和1,4-二噁烷(80.0ml)。所得混合物用氩气吹扫15分钟。然后，加入pd2(dba)3(0.87g，0.05eq.)和xantphos(0.66g，0.06eq.)，密封容器并将反应混合物在115℃搅拌4天。随后，混合物通过硅藻土垫过滤，用dcm洗涤垫，真空浓缩滤液。残余物通过fcc(sihp；dcm：etoac)纯化，得到产物(3.8g，69％产率)，为黄色油状物。esi-ms：278.4[m h]
。
[1289]
制备(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体17)
[1290]
将于1,4-二噁烷中的4m hcl(20.0ml)加入n-[(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(3.76g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(20.0ml)中的悬浮液中并将所得混合物在55℃搅拌1小时。然后，将反应混合物真空浓缩并将残余物在15％naoh水溶液和dcm之间分配。
有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩以得到粗产物(2.3g，产率92％)，为深黄色油状物，其不经进一步纯化用于下一步。esi-ms：178.1[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.26(d,j＝3.0hz,1h),7.92(dd,j＝4.5,1.4hz,1h),7.26(ddd,j＝8.5,3.0,1.4hz,1h),7.17(ddd,j＝8.5,4.5,0.7hz,1h),3.69
–
3.51(m,2h),2.80
–
2.58(m,2h),2.46
–
2.33(m,1h),1.92
–
1.33(m,5h),1.24
–
1.02(m,1h)。
[1291]
制备7-溴-1-甲基-3-({[(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1292]
将7-溴-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体8)(0.5g，1.0eq.)、(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体17)(0.33g，1.0eq.)、naoac(0.15g，1.0eq.)在meoh(4.0ml)中的混合物在氩气气氛下于室温搅拌过夜。然后，将反应混合物冷却至0℃，分批加入nabh4(0.073g，1.02eq.)并将混合物在室温搅拌过夜。随后，将混合物在dcm和nahco3饱和水溶液之间分配。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩以得到粗产物(0.63g，67％产率)，为黄色固体，其不经进一步纯化用于下一步。esi-ms：427.1[m h]
。
[1293]
制备7-溴-1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1294]
将7-溴-1-甲基-3-({[(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.47g，1.0eq.)和2-甲基吡啶-4-甲醛(0.13g，1.0eq.)在dce(8.0ml)中的悬浮液在室温搅拌过夜。然后，加入nabh(oac)3(0.33g，1.4eq.)并将所得混合物在室温搅拌过夜。随后，混合物在dcm和饱和nahco3水溶液之间分配。有机层用水、盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.38g，62％产率)，为黄色固体。esi-ms：532.1[m h]
。
[1295]
制备1-[1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-4-甲酸甲酯
[1296]
在压力容器中装入7-溴-1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.1g，1.0eq.),哌啶-4-甲酸甲酯(0.05ml，2.0eq.)、cs2co3(0.122g，2.0eq.)、xantphos(0.022g，0.2eq.)和pd2(dba)3(0.017g，0.1eq.)。然后，将容器盖上盖子，抽空空气并充满氩气。随后，通过注射器加入1,4-二噁烷(1.0ml)，并将所得混合物在80℃搅拌过夜。然后，将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤，用dcm和etoac洗涤垫。滤液真空浓缩，残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)再纯化，得到产物(0.026g，23％产率)，为白色粉末。esi-ms：595.5[m h]
。
[1297]
制备1-[1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-4-甲酸
[1298]
将lioh.h2o(0.004g，3.0eq.)加入1-[1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-4-甲酸酯(0.02g，1.0eq.)在thf(1.0ml)和h2o(1.0ml)的混合物中的溶液中并将所得混合物在室温搅拌2小时。然后，将反应混合物真空浓缩，将残余物用水稀释，用1m hcl水溶液酸化并真空浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化。将分离的样品冷冻干燥(x 2)，得到产物(0.014g，71％产率)，为黄色固体。esi-ms：581.4[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ14.
(br s,1h),8.38
–
8.19(m,2h),7.96(d,j＝9.1hz,1h),7.91(dd,j＝4.5,1.3hz,1h),7.85(s,1h),7.32
–
7.19(m,3h),7.14(dd,j＝8.5,4.5hz,1h),7.06(dd,j＝9.1,2.1hz,1h),6.67(d,j＝2.1hz,1h),4.01
–
3.83(m,3h),3.81
–
3.48(m,9h),3.01
–
2.90(m,2h),2.88
–
2.76(m,1h),2.71
–
2.56(m,2h),2.39(s,3h),2.04
–
1.84(m,3h),1.81
–
1.35(m,5h),.
[1299]
实施例47.1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1300][1301]
制备1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1302]
将nah(0.02g，1.5eq.)分两部分添加到7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.2g，1.0eq.)和乙二醇(3.0ml)的混合物中。将所得混合物在120℃加热4小时。然后加入meoh(2.0ml)，接着加入h2o(5.0ml)，混合物用dcm(x 4)洗涤。合并的有机层用水、盐水洗涤，经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)再纯化，得到产物(0.032g，16％产率)，为米色固体。esi-ms：572.6[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.30
–
8.24(m,1h),8.15
–
8.10(m,1h),7.84(s,1h),7.79(d,j＝11.7hz,1h),7.51(d,j＝7.3hz,1h),7.25
–
7.18(m,2h),7.18
–
7.13(m,1h),7.02(d,j＝8.5hz,1h),5.12
–
4.93(m,1h),4.30
–
4.18(m,2h),3.88
–
3.69(m,5h),3.65
–
3.55(m,3h),3.55
–
3.47(m,1h),2.81
–
2.69(m,2h),2.61
–
2.55(m,1h),2.37(s,3h),2.32(s,3h),2.01
–
1.88(m,1h),1.83
–
1.71(m,1h),1.64
–
1.39(m,2h),1.30
–
1.17(m,2h),0.97
–
0.77(m,2h)。
[1303]
实施例48.1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1304][1305]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1306]
将1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体28)(0.107g，1.0eq.)、3-溴-5-甲基-1,2,4-噁二唑(0.043g，1.3eq.)和cs2co3(0.10g，1.5eq.)在无水1,4-二噁烷(3.0ml)中的悬浮液用氩气吹扫10分钟。随后，加入xantphos(0.014g，0.12eq.)和pd2(dba)3(0.011g，0.06eq.)。在115℃搅拌15小时后，混合物通过硅藻土过滤，真空浓缩并通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化。将获得的产物溶解在dcm中并加入清除剂quadrapure mpa(0.2g)。搅拌1小时后，滤出清除剂并减压浓缩滤液并通过fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化。使用et2o中的2m hcl(0.028ml，1.0eq.)和作为溶剂的dcm(2.0ml)将产物转化为hcl盐以提供产物(0.035g，28％产率)，为橙色固体。esi-ms：588.7[m h]
。1h nmr(300mhz,甲醇-d4)δ8.68(d,j＝6.2hz,1h),8.37(s,1h),8.13(s,1h),8.10
–
7.93(m,1h),7.79(d,j＝14.4hz,1h),7.08(d,j＝7.6hz,1h),4.74
–
4.67(m,1h),4.62
–
4.54(m,1h),4.49(s,2h),4.36
–
4.10(m,1h),3.97
–
3.59(m,7h),3.56
–
3.44(m,2h),3.22
–
2.97(m,1h),2.76(s,3h),2.45(s,3h),2.39
–
2.28(m,1h),2.27
–
2.08(m,2h),2.03
–
1.91(m,1h),1.80
–
1.55(m,2h),1.50
–
1.39(m,2h),1.24
–
1.08(m,2h)。
[1307]
实施例49.7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(哒嗪-4-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1308]
[1309][1310]
制备(2z)-2-[(z)-4-溴-2-氟苯甲酰基]-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酸乙酯
[1311]
将反应分成两个相同的批次并且对每个反应器使用相同的程序。将3-(二甲基氨基)丙-2-烯酸乙酯(7.58ml，1.0eq.)和无水n,n-二异丙基乙胺(19.3ml，2.1eq.)的混合物搅拌10分钟，然后将4-溴-2-氟苯甲酰氯(12.5g，1.0eq.)在无水甲苯(100.0ml)中的溶液滴加到反应混合物中，然后在90℃加热4小时。形成无色沉淀。在烧结漏斗上滤出沉淀物并在减压下蒸发滤液的溶剂。然后将所得油状产物干沉积在硅胶上并通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到所需产物(26.5g，64％产率)，为深橙色油状物。esi-ms：345.9[m 2 h]
.
[1312]
制备7-溴-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲酸乙酯
[1313]
将(2z)-2-[(z)-4-溴-2-氟苯甲酰基]-3-(二甲基氨基)丙-2-烯酸乙酯(26.5g，1.0eq.)和丙-2-胺(6.0ml，1.1eq.)在无水甲苯(200.0ml)中的混合物在110℃加热5小时。蒸发溶剂并将所得粗物质溶解在dme(200.0ml)中并冷却至0℃，之后缓慢加入氢化钠(60％分散在矿物油中，5.4g，2.0eq.)。然后将所得反应混合物加热至80℃再加热6小时，然后将
其冷却至室温。混合物用etoac稀释，加入饱和氯化铵溶液，混合物用额外部分的乙酸乙酯洗涤。有机相用盐水洗涤，经na2so4干燥并减压除去溶剂。一些产物以固体残余物的形式保持并且一些溶解在水层中。滤出固体残余物并将水层中的所需产物萃取到dcm中。包含在乙酸乙酯中的级分通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化。将所有级分合并以产生产物(13.7g，56％产率)，其无需进一步纯化即可用于下一步。esi-ms：338.9[m 2]
.
[1314]
制备7-溴-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲酸
[1315]
将饱和盐酸(20.0ml)添加到在冰水浴中冷却的7-溴-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲酸乙酯(13.7g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(60.0ml)中的悬浮液中并加入水(50.0ml)，然后将所得混合物在90℃加热2天。将反应混合物冷却至室温并使用烧结漏斗滤出所得沉淀。用另外部分的水洗涤并干燥。将带有残留水的所得固体溶解在dcm中。将该溶液用盐水洗涤，用na2so4干燥，减压除去溶剂，得到产物(12.4g，产率98％)，然后将其用于下一步而无需进一步纯化。esi-ms：311.1[m h]
。
[1316]
制备7-溴-1-(丙-2-基)-1,2,3,4-四氢喹啉-4-酮
[1317]
保持在氩气下，在5分钟内将硼氢化钠(6.2g，4.5eq.)缓慢添加到在冰水浴冷却的7-溴-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲酸(12.4g，1.0eq.)在甲醇(400.0ml)中的溶液中。将混合物升温至室温并搅拌4小时。然后加入对甲苯磺酸(0.69g，0.1eq.)并将反应混合物在60℃加热6小时。向反应混合物中加入硅胶(40g)，减压除去溶剂。现在吸附在二氧化硅上的粗产物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(8.03g，81％产率)。esi-ms：269.0[m h]
。
[1318]
制备7-溴-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,2,3,4-四氢喹啉-3-甲醛
[1319]
在0℃将溶解于thf(20ml)的7-溴-1-(丙-2-基)-1,2,3,4-四氢喹啉-4-酮(8.0g，1.0eq.)加入到双(三甲基甲硅烷基)氨基钠溶液(17.7ml，1.2eq.)在thf(50ml)中的溶液中。将反应混合物在0℃搅拌30分钟，然后加入溶解在thf(10ml)中的甲酸乙酯(2.9ml，1.2eq.)。1小时后，通过加入饱和nh4cl淬灭反应，随后用乙酸乙酯(x 3)洗涤产物混合物。合并的有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥，减压除去溶剂。所得产物(9.02g，69％产率)不经进一步纯化直接用于下一步。esi-ms：296.0,297.9[m h]
。
[1320]
制备7-溴-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体19)
[1321]
将7-溴-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,2,3,4-四氢喹啉-3-甲醛(9.02g，1.0eq.)溶解于无水1,4-二噁烷(200.0ml)。mno2(8.87g，5.0eq.)加入mno2(8.87g，5.0eq.)并将反应在50℃加热2天。将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤。用dcm：meoh(7：3)的混合物洗涤硅藻土垫。减压浓缩滤液并将残余物重新溶解在200.0ml dcm中。沉淀的黄色固体在烧结漏斗上过滤并用额外部分的dcm洗涤，得到产物(3.95g，64％产率)。粗产物混合物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.375g，6％产率)。esi-ms：295.9[m 2 h]
.
[1322]
制备n-[(3s)-1-(哒嗪-4-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1323]
在密封管中，n-[(3s)-哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.22g，1.3eq.)、4-溴哒嗪氢溴酸盐(0.2g，1.0eq.)和碳酸铯(0.543g，2.0eq.)悬浮于干燥1,4-二噁烷中。将反应混合物用氩气吹扫10分钟并加入xantphos(0.029g，0.06eq.)和pd2(dba)3(0.038g，0.05eq.)。将反应混合物用氩气再吹扫一次5分钟，关闭管并将反应在100℃加热过夜。向混合物中加入二氯甲烷和水，将化合物在两层之间分配。有机层经无水mgso4干燥，过滤并浓缩。粗混合物通
过fcc(sihp，dcm：meoh)纯化，得到产物(0.125g，49％产率)。esi-ms：279.4[m h]
。
[1324]
制备(3s)-1-(哒嗪-4-基)哌啶-3-胺
[1325]
将在1,4-二噁烷中的4.0m hcl(0.66ml，5.0eq.)加入n-[(3s)-1-(哒嗪-4-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.152g，1.0eq.)在1,4-二噁烷中的溶液中。将反应混合物在60℃搅拌1小时。将粗混合物浓缩并在dcm和naoh水溶液之间分配。合并有机层，用na2so4干燥，过滤并减压浓缩。将水相冷冻干燥，因为在其中检测到一些产物，合并的残余物通过fcc(pf-nh2；dcm：meoh)纯化得到产物(0.065g，70％产率)。esi-ms：179.0[m h]
。
[1326]
制备(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(哒嗪-4-基)哌啶-3-胺
[1327]
将(3s)-1-(哒嗪-4-基)哌啶-3-胺(0.065g，1.0eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(0.039ml，1.0eq.)和乙酸钠(0.029g，1.0eq.)溶解于甲醇(3.0ml)，反应混合物在室温搅拌过夜。然后将混合物冷却至0℃并分批加入硼氢化钠(0.015g，1.1eq.)并将反应混合物在室温搅拌1小时。蒸发甲醇，产物通过fcc(sihp，dcm：meoh)纯化，得到产物(0.079g，73％产率)，为淡黄色油状物。esi-ms：284.1[m h]
。1h nmr(300mhz,甲醇-d4)δ8.84(dd,j＝3.4,0.8hz,1h),8.53(dd,j＝6.6,0.8hz,1h),8.33(d,j＝5.5hz,1h),7.32(d,j＝1.5hz,1h),7.26(d,j＝5.4hz,1h),6.98(dd,j＝6.7,3.4hz,1h),4.02(dd,j＝13.3,3.6hz,1h),3.90(s,1h),3.85(s,1h),3.23
–
3.12(m,1h),3.04(dd,j＝13.2,9.1hz,1h),2.72(td,j＝9.1,4.3hz,1h),2.52(s,3h),2.15
–
2.04(m,1h),1.97(s,2h),1.92
–
1.85(m,1h),1.64
–
1.49(m,2h)。
[1328]
制备7-溴-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(哒嗪-4-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1329]
将7-溴-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体19)(0.078g，1.0eq.)和(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(哒嗪-4-基)哌啶-3-胺(0.079g，1.0eq.)溶解于dce。所得混合物在室温搅拌过夜。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.15g，2.8eq.)并将混合物在室温再搅拌24小时。反应混合物用dcm稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液、水、盐水洗涤，经无水mgso4干燥并减压浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.066g，45％产率)，为一种灰白色泡沫。esi-ms：561.3,563.1[m h]
。
[1330]
制备7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(哒嗪-4-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1331]
将放入密封管中的7-溴-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(哒嗪-4-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.066g，1.0eq.)、(3r)-吡咯烷-3-醇(0.015g，1.5eq.)和碳酸铯(0.067g，1.8eq.)在无水dmf(1.5ml)中的溶液用氩气吹扫15分钟。然后加入binap(0.014g，0.2eq.)和pd2(dba)3(0.011g，0.1eq.)。将反应混合物用氩气再吹扫2分钟并将管密封。将所得混合物加热至110℃持续20小时，然后混合物通过硅藻土垫过滤。滤液用清除剂超声处理，在棉垫上过滤并浓缩。粗混合物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化得到产物(0.053g，80％产率)，为米色固体。esi-ms：568.5[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.95(d,j＝3.2hz,1h),8.54(d,j＝6.4hz,1h),8.30(d,j＝5.0hz,1h),7.99(d,j＝8.9hz,1h),7.80(s,1h),7.29(s,1h),7.21(d,j＝5.2hz,1h),6.93(dd,j＝6.5,3.3hz,1h),6.65(dd,j＝9.0,1.9hz,1h),6.41(d,j＝2.0hz,1h),5.01(d,j＝3.7hz,1h),4.96
–
4.89(m,1h),4.46
–
4.38(m,1h)j，4.18(d,j＝12.9hz,1h),3.98(d,j＝13.1hz,1h),
3.78(s,2h),3.63(s,2h),3.51(dd,j＝10.6,4.8hz,1h),3.48
–
3.39(m,2h),3.21(d,j＝10.2hz,1h),3.06(t,j＝11.8hz,1h),2.84(t,j＝12.6hz,1h),2.62(s,1h),2.40(s,3h),2.10
–
2.01(m,1h),1.95(s,2h),1.77(d,j＝13.7hz,1h),1.67(dd,j＝14.0,10.4hz,1h),1.38(t,j＝7.0hz,6h)。
[1332]
实施例50和实施例51.非对映异构体a和b：7-(4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基)-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮：实施例50.7-[(4r)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(a)；实施例51.7-[(4s)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(b)
[1333][1334]
制备n-{3,3-二氟-1-[1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-4-基}氨基甲酸叔丁酯
[1335]
将7-溴-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体13)(0.30g，1.0eq.)、n-(3,3-二氟哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(0.26g，2.0eq.)和碳酸铯(0.372g，2.1eq.)在无水1,4-二噁烷中的溶液放入密封管中，用氩气吹扫15分钟。然后加入binap(0.102g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.050g，0.1eq.)。将反应混合物用氩气再吹扫2分钟并将管密封。将所得混合物加热至95℃持续2天并在硅藻土垫上过滤。将清除剂quadrapure mpa添加到滤液中并对混合物进行
超声处理。然后滤出清除剂并浓缩溶剂。粗混合物通过fcc(sihp，dcm：meoh)纯化，得到产物(0.27g，67％产率)。esi-ms：702.6[m h]
。对该外消旋体进行手性分离(if；hex：etoh 35％等度洗脱)以提供boc保护的非对映异构体a(0.085g，32％产率)和b(0.114g，43％产率)。esi-ms：702.6[m h]
。立体化学被任意指定。
[1336]
制备7-[(4r)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮-非对映异构体a
[1337]
将4m氯化氢在1,4-二噁烷(0.143ml，5.0eq.)中的溶液加入boc保护的非对映异构体a(0.085g，1.0eq.)在1,4-二噁烷中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌过夜。然而，反应没有完成，另外加入了4m氯化氢在1,4-二噁烷(0.143ml，5.0eq.)中的溶液并将反应时间延长至2天。浓缩溶剂，用dcm和naoh水溶液萃取。合并有机层，经无水mgso4干燥、过滤和浓缩。粗品通过fcc(pf-二醇，dcm：meoh)纯化，得到产物(0.020g，29％产率)。esi-ms：602.5[m h]
。
[1338]
制备7-[(4s)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮-非对映异构体b
[1339]
将4m氯化氢在1,4-二噁烷(0.2ml，5.0eq.)中的溶液加入boc保护的非对映异构体b(0.114g，1.0eq.)在1,4-二噁烷中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌过夜，浓缩混合物并在dcm和naoh水溶液之间分配。合并有机层，用mgso4干燥，过滤并减压浓缩。粗混合物通过fcc(pf-二醇，dcm：meoh)纯化，得到产物(0.021g，22％产率)。esi-ms：602.4[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.16(s,1h),8.15(d,j＝3.4hz,1h),8.08(d,j＝2.9hz,1h),7.83(s,1h),7.34(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.25
–
7.21(m,2h),7.17(dd,j＝9.3,2.2hz,1h),7.10(d,j＝8.6hz,1h),6.76(d,j＝2.2hz,1h),4.25
–
4.16(m,1h),3.99(d,j＝13.7hz,1h),3.88(d,j＝10.9hz,1h),3.83(d,j＝4.0hz,2h),3.78(s,5h),3.60(d,j＝12.2hz,1h),3.22
–
3.12(m,2h),2.98
–
2.90(m,1h),2.84(t,j＝11.1hz,1h),2.68(t,j＝11.1hz,1h),2.40(s,3h),2.32(s,3h),2.15(s,1h),2.09
–
2.01(m,1h),1.94
–
1.88(m,1h),1.76(q,j＝11.7hz,1h),1.65(q,j＝8.8hz,2h)。
[1340]
实施例52.7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1341][1342]
制备7-溴-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体20)
[1343]
将(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)(0.57g，1.1eq.)和7-溴-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体19)(0.5g，1.0eq.)在无水dce(10.0ml)中的溶液在60℃搅拌2小时。然后加入nabh(oac)3(0.98g，2.8eq.)并将反应混合物在60℃再搅拌2小时。混合物用dcm稀释并用naoh水溶液洗涤，用无水na2so4干燥，真空浓缩并通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.64g，65％产率)，为黄色固体。esi-ms：576.1[m 2 h]
.
[1344]
制备7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1345]
在密封管中，将(3r)-吡咯烷-3-醇(0.066g，1.5eq.)、cs2co3(0.294g，1.8eq.)和7-溴-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体20)(0.3g，1.0eq.)悬浮于无水1,4-二噁烷(5.0ml)。将悬浮液用氩气吹扫5分钟，然后加入binap(0.062g，0.2eq.)和pd2(dba)3(0.046g，0.1eq.)。将反应混合物用氩气再吹扫一次，将管封闭并在120℃搅拌过夜。通过硅藻土过滤残余物，真空浓缩溶剂并通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过rp fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得到(0.178g，61％产率)，为白色固体。esi-ms：581.2[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)8.30(d,j＝5.0hz,1h),8.12(d,j＝2.9hz,1h),7.99(d,j＝9.0hz,1h),7.82(s,1h),7.27(s,1h),7.24
–
7.17(m,2h),7.00(d,j＝8.5hz,1h),6.65(dd,j＝8.9,2.0hz,1h),6.41(d,j＝2.0hz,1h),5.01(d,j＝3.6hz,1h),4.98
–
4.89(m,1h),4.43(s,1h),3.86
–
3.70(m,3h),3.63
–
3.55(m,3h),3.54
–
3.36(m,3h),3.26
–
3.16(m,1h),2.79
–
2.69(m,2h),2.52(s,1h),2.40(s,3h),2.32(s,3h),2.12
–
2.00(m,1h),1.99
–
1.88(m,2h),1.76(d,j＝10.7hz,1h),1.60
–
1.44(m,2h),1.43
–
1.32(m,6h)。
[1346]
实施例53.7-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌
啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1347][1348]
制备7-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1349]
将7-溴-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体20)(0.043g，1.0eq.),2-(哌嗪-1-基)乙-1-醇(0.019g，2.0eq.)和碳酸铯(0.043g，1.8eq.)溶解于无水1,4-二噁烷(2.0ml)。将溶液用氩气吹扫5分钟，然后加入binap(0.009g，0.2eq.)和pd2(dba)3(0.007g，0.1eq.)。将管封闭并在110℃搅拌过夜。将反应混合物通过硅藻土过滤，加入水并将混合物用dcm(x 3)洗涤。合并的有机层用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化。将得到的产物溶解在甲醇中并与清除剂quadrapure mpa(0.2g)一起搅拌1小时。滤出清除剂，浓缩滤液，得到产物(0.039g，85％产率)，为灰白色粉末。esi-ms：624.5[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.30(d,j＝5.0hz,1h),8.12(d,j＝2.9hz,1h),8.01(d,j＝9.0hz,1h),7.88(s,1h),7.30
–
7.16(m,3h),7.10
–
6.95(m,2h),6.89(s,1h),5.01(quint,j＝6.6hz,1h),4.45(t,j＝5.3hz,1h),3.84
–
3.69(m,3h)j),3.61(s,2h),3.54(q,j＝5.8hz,3h),2.83
–
2.66(m,3h),2.64
–
2.54(m,6h)j，2.44(t,j＝6.2hz,3h),2.39(s,3h),2.32(s,3h),1.95(s,1h),1.76(d,j＝10.3hz,1h),1.50(q,j＝11.9hz,2h),1.38(dd,j＝6.4,2.6hz,6h)。
[1350]
实施例54.7-[(3r,4s)-3,4-二羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1351]
[1352][1353]
制备(3ar,6ar)-6-(羟基甲基)-2,2-二甲基-四氢-2h-呋喃[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-醇
[1354]
将碘(0.01g，0.003eq.)添加到d-核糖(2.0g，1.0eq.)在丙酮(hplc级99.5 ％，10.0ml)中的溶液中，并将所得黄色溶液在室温搅拌过夜。将反应混合物浓缩至干。将残余物溶解在硫代硫酸钠饱和水溶液(50.0ml)中搅拌10分钟。并用etoac(200ml x 4)洗涤。合并的有机层经mgso4干燥，过滤并真空浓缩，得到产物(2.46g，97％产率)，为无色油状，其直接用于下一步。
[1355]
制备(4r,5s)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4,5-二甲醛
[1356]
在0℃，将(3ar,6ar)-6-(羟基甲基)-2,2-二甲基-四氢-2h-呋喃[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-醇(1.58g，1.0eq.)在水(15.0ml)中的溶液滴加到naio4(3.55g，2.0eq.)在水(lc-ms级,80.0ml)中的溶液中。将反应混合物在0℃搅拌30分钟，温热至室温并在该温度搅拌过夜。在通过tlc(石油醚/etoac＝1：2)检测到起始材料消失后，将反应混合物减压浓缩。残余物用etoac(100.0ml)稀释，然后通过硅藻土垫过滤。将滤液真空浓缩，得到产物(1.50g)，为无色油状物，其立即用于下一步。
[1357]
制备(3ar,6as)-5-苄基-2,2-二甲基-六氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-c]吡咯
[1358]
在0℃，将(4r,5s)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4,5-二甲醛(1.3g，1.0eq.)在无水meoh(10.0ml)中的溶液滴加到活化的分子筛、nabh3cn(1.12g，2.6eq.)和氯化锌(3.85ml，1.9m于2-methfm 1.0eq.中)在70.0ml无水meoh中的悬浮液中然后加入苄胺(reagentplus 99％,1.0ml，1.2eq.)。将反应混合物在0℃搅拌30分钟，达到室温并在该温度搅拌过夜。在通过tlc(石油醚/etoac＝2：1)检测到起始材料消失后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤，然后减压蒸发溶剂。将残余物用100.0ml水稀释，然后用etoac(50ml
×
4)洗涤。合并的有机层用盐水洗涤，经mgso4干燥并减压浓缩。通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化残余物，得到产物(1.34g，75％产率)，为无色油状物。esi-ms：234.4[m h]
；1h nmr(300mhz,
cdcl3)δ7.37
–
7.19(m,5h),4.70
–
4.60(m,2h),3.63(s,2h),3.04(d,j＝12.0hz,2h),2.28
–
2.05(m,2h),1.57(s,3h),1.32(s,3h)。
[1359]
制备(3ar,6as)-2,2-二甲基-六氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-c]吡咯
[1360]
在parr振动器容器中将(3ar,6as)-5-苄基-2,2-二甲基-六氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-c]吡咯(1.18g，1.0eq.)溶解于无水meoh(100.0ml)并且将该溶液用氩气吹扫10分钟。加入碳载氢氧化钯(0.48g，0.7eq.)，再用氩气鼓泡20分钟。将该容器置于40巴h2下的parr振动器装置中，反应进行过夜。溶液通过硅藻土垫过滤，用甲醇洗涤，真空浓缩滤液，得到产物(0.652g，95％产率)，为无色油状j j。
[1361]
制备7-[(3ar,6as)-2,2-二甲基-六氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-c]吡咯-5-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1362]
将(3ar,6as)-2,2-二甲基-六氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-c]吡咯(0.1g，2.3eq.)、cs2co3(0.207g，2.1eq.)、7-溴-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体20)(0.174g，1.0eq.)在无水dmf(5.0ml)中的悬浮液用氩气吹扫10分钟。然后加入binap(0.06g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.06g，0.2eq.)。将反应混合物超声处理并用氩气吹扫5分钟。然后将混合物在115℃搅拌过夜。将混合物冷却并通过硅藻土垫过滤。滤液真空浓缩，残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，重新溶解在dcm中并与清除剂quadrapure mpa一起搅拌过夜。随后，过滤混合物，真空浓缩，得到产物(0.17g，85％产率)，为棕色半固体。esi-ms：637.5[m h]
。
[1363]
制备7-[(3r,4s)-3,4-二羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1364]
将7-[(3ar,6as)-2,2-二甲基-六氢-[1,3]二氧杂环戊烯并[4,5-c]吡咯-5-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.148g，1.0eq.)溶解在水(lc-ms级)和thf(2.0ml，1/1v/v)的混合物中，然后加入三氟乙酸(0.05ml，3.0eq.)。所得反应混合物在室温搅拌过夜。使用2m naoh水溶液将反应混合物碱化至ph 12并用dcm(4x 50.0ml)洗涤。合并的有机层用水(10.0ml)洗涤，然后用盐水(20.0ml)洗涤。有机层经mgso4干燥，过滤并真空浓缩以得到棕色残余物。粗物质通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)纯化。将纯级分冻干并在高真空下干燥，得到产物(0.033g,23％产率)，为黄色固体。esi-ms：597.6[m h]
；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.35(s,2h),8.30(d,j＝5.1hz,1h),8.12(d,j＝3.0hz,1h),7.98(d,j＝9.0hz,1h),7.82(s,1h),7.27(s,1h),7.23
–
7.16(m,2h),7.00(d,j＝9.0hz,1h),6.62(dd,j＝9.0,1.9hz,1h),6.38(s,1h),4.94(quint,j＝6.5hz,1h),4.17(t,j＝4.3hz,2h),3.85
–
3.70(m,3h),3.63
–
3.46(m,5h),3.23(dd,j＝10.1,4.1hz,2h),2.80
–
2.68(m,2h),2.39(s,3h),2.32(s,3h),2.02
–
1.90(m,1h),1.83
–
1.70(m,1h),1.60
–
1.42(m,3h),1.38(dd,j＝6.5,4.2hz,6h)。
[1365]
实施例55.1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-(甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1366][1367][1368]
制备n-[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]-n-甲基氨基甲酸叔丁酯
[1369]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(1.0g，1.0eq.)、(r)-3-(n-boc-n-甲基氨基)吡咯烷(0.51g，1.5eq.)和碳酸铯(1.78g，3.2eq.)在1,4-二噁烷(30ml)中的混合物用氩气吹洗10分钟，然后加入pd2(dba)3(0.31g，0.2eq.)和xantphos(0.30g，0.3eq.)。混合物再次用氩气吹洗5分钟，然后将反应容器密封并在115℃加热过夜。使混合物通过硅藻土垫并用另外部分的etoac洗涤。然后将滤液减压浓缩并通过fcc(用dcm：nh3去活化的sihp；dcm：meoh)纯化，然后通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.75g，61％产率)，为米色固体。esi-ms：710.7[m h]
。
[1370]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-(甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1371]
将n-[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.728g，1.0eq.)溶解于无水dcm(20ml)并缓慢添加三氟乙酸(10ml)。将反应混合物在室温搅拌6小时，然后真空浓缩。将残余物溶于dcm，加入水并使用1m naoh水溶液将混合物碱化至ph 9，用dcm萃取。然后将有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥并浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，在加入清除剂quadrapure mpa(0.9g)后，将所得化合物溶解在dcm中并搅拌4小时。滤出清除剂并将滤液真空浓缩。使用在et2o中的2m hcl(0.34ml，1.0eq.)和作为溶剂的meoh(14.0ml)和水(4.0ml)将所得化合物转化为盐酸盐以提供产物((0.420g，74％产率)。esi-ms：610.6[m h]
。1h nmr(300mhz,甲醇-d4)δ8.17(d,j＝5.3hz,1h),8.13(d,j＝2.9hz,1h),7.88(s,1h),7.82(d,j＝14.5hz,1h),7.56(dd,j＝
8.7,3.0hz,1h),7.34
–
7.22(m,3h),7.07(d,j＝7.5hz,1h),4.06
–
3.88(m,6h),3.88
–
3.76(m,3h),3.72
–
3.56(m,2h),3.51
–
3.37(m,1h),3.09
–
2.87(m,2h),2.84(s,3h),2.81
–
2.70(m,1h),2.64
–
2.51(m,1h),2.48(s,3h),2.36(s,3h),2.34
–
2.21(m,1h),2.21
–
2.12(m,1h),2.00
–
1.88(m,1h),1.80
–
1.61(m,2h),1.39
–
1.25(m,2h),0.93(p,j＝4.3hz,2h)。
[1372]
实施例56.和实施例57.非对映异构体a和b：7-(4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基)-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮：
[1373]
实施例56.(7-[(4r)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐(a)和实施例57.7-[(4s)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮)盐酸盐(b)
[1374][1375][1376]
制备boc保护的非对映异构体n-[(4r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-3,3-二氟哌啶-4-基]氨基甲酸叔丁酯(a)和n-[(4s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-3,3-二氟哌啶-4-基]氨基甲酸叔丁酯)(b)
[1377]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(1.85g，1.0eq.)、n-(3,3-二氟哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(1.0g，1.3eq.)、cs2co3(2.2g，2.1eq.)在无水1,4-二噁烷(70.0ml)中的混合物用氩气吹扫30分钟。然后，加入binap(0.61g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.30g，0.1eq.)，并将所得混合物用氩气再吹扫15分钟。将管密封并将反应混合物在95℃加热2天。随后，混合物通过硅藻土垫过滤并用meoh洗涤垫。滤液真空浓缩，残余物在dcm和水之间分配。有机层用盐水洗涤，经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化。将分离的样品溶解在dcm中，加入清除剂quadrapure mpa(1.3g)并将所得悬浮液在室温搅拌过夜。然后，过滤出清除剂，真空浓缩滤液以得到boc保护的非对映异构体a和b的混合物(2.24g，86％产率)，为黄色固体。esi-ms：746.8[m h]
。通过手性hplc分离混合物(adh；hex：etoh 15％等度)得到boc保护的非对映异构体a(0.685g，t
r 43.6分钟)esi-ms：746.8[m h]
和boc保护的非对映异构体b(0.656g，t
r 61.2分钟)。esi-ms：746.8[m h]
，均为黄色泡沫。未确定非对映异构体的实际构型。
[1378]
制备(7-[(4r)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐-非对映异构体a
[1379]
将tfa(3.0ml，92.0eq.)添加到保持在0℃的boc保护的非对映异构体a(0.325g，1.0eq.)在dcm(6.5ml)中的溶液中。将所得混合物升温至室温并搅拌1小时。然后，将混合物真空浓缩，将残余物与dcm一起研磨并真空浓缩(3循环)。在水层使用1m naoh水溶液碱化后，将获得的固体在dcm和水之间分配。有机层经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化。使用在1,4-二噁烷中的2mhcl溶液(0.152ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(8.0ml)将分离的样品转化为hcl盐，得到产物(0.205g，70％产率)，为黄色固体。esi-ms：646.6[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.15(d,j＝5.2hz,1h),8.10(d,j＝2.9hz,1h),7.91(s,1h),7.87(d,j＝13.3hz,1h),7.49(dd,j＝8.7,3.0hz,1h),7.45(d,j＝7.4hz,1h),7.28
–
7.18(m,3h),4.14
–
4.01(m,1h),3.98
–
3.58(m,8h),3.48
–
3.33(m,2h),3.22
–
3.12(m,1h),3.06
–
2.85(m,2h),2.82
–
2.67(m,1h),2.44(s,3h),2.33(s,3h),2.29
–
2.17(m,1h),2.19
–
2.10(m,1h),2.11
–
1.98(m,1h),1.98
–
1.82(m,1h),1.76
–
1.57(m,2h),1.39
–
1.23(m,2h),1.00
–
0.85(m,2h)。
[1380]
制备7-[(4s)-4-氨基-3,3-二氟哌啶-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮)盐酸盐-非对映异构体b
[1381]
将tfa(3.0ml，93.0eq.)添加到保持在0℃的boc保护的非对映异构体b(0.338g，1.0eq.)的溶液中。将所得混合物在室温搅拌1小时。然后，将混合物真空浓缩，将残余物与dcm一起研磨并真空浓缩(3循环)。在水层使用1m naoh水溶液碱化后，将获得的固体在dcm和水之间分配。合并的有机层经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化。使用在1,4-二噁烷中的2m hcl溶液(0.153ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(8.0ml)将分离的样品转化为hcl盐，得到产物(0.208g，71％产率)，为黄色固体。esi-ms：646.7[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.15(d,j＝5.2hz,1h),8.10(d,j＝2.9hz,1h),7.90(s,1h),7.86(d,j＝13.4hz,1h),7.49
–
7.40(m,2h),7.28
–
7.14(m,3h),4.10
–
3.97
(m,1h),3.95
–
3.74(m,6h),3.69
–
3.55(m,2h),3.50
–
3.35(m,2h),3.24
–
3.08(m,1h),3.03
–
2.81(m,2h),2.80
–
2.67(m,1h),2.43(s,3h),2.32(s,3h),2.25
–
2.09(m,2h),2.08
–
1.86(m,2h),1.79
–
1.58(m,2h),1.41
–
1.20(m,2h),1.05
–
0.82(m,2h)。
[1382]
实施例58.1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-(甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1383][1384]
制备n-[(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]-n-甲基氨基甲酸叔丁酯
[1385]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(1.0g，1.0eq.)、(s)-3-(n-boc-n-甲基氨基)吡咯烷(0.51g，1.5eq.)和cs2co3(1.78g，3.2eq.)在无水1,4-二噁烷(20.0ml)中的混合物用氩气吹洗10分钟，然后加入pd2(dba)3(0.31g，0.2eq.)和xantphos(0.30g，0.3eq.)。混合物再次用氩气吹洗5分钟，然后将反应容器密封并在115℃加热过夜。使混合物通过硅藻土垫并用另外部分的etoac洗涤。然后在旋转蒸发器上浓缩滤液。粗物质通过fcc(sihp,dcm：meoh)纯化并通过rp-fcc(c18hp,h2o：mecn)再纯化，得到产物(0.799g，64％产率)，为米色固体。esi-ms：710.9[m h]
。
[1386]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-(甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1387]
将n-[(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.799g，1.0eq.)溶解于无水dcm(5.0ml)并置于冰浴中。然后，缓慢加入tfa(2.5ml，30.0eq.)，继续搅拌5分钟并移除冰浴。将反应混合物在室温搅拌3小时，然后减
压浓缩并用水稀释。将该水溶液用2m naoh碱化至ph值～10并用dcm洗涤。有机层经无水na2so4干燥并真空浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp，h2o：mecn)纯化。将产物重新溶解在dcm(10.0ml)中并与清除剂quadrapure mpa(0.9g)一起搅拌4小时。混合物通过布氏漏斗过滤并用dcm(x 2)洗涤。将滤液浓缩并使用fcc(pf-50diol，dcm：meoh)再纯化。使用在et2o中的2m hcl(0.22ml，1.1eq.)和作为溶剂的dcm(6.0ml)将化合物转化为hcl盐，得到产物(0.272g，2步产率39％产率)，为黄色固体。esi-ms：610.6[m h]
。1h nmr(300mhz,甲醇-d4)δ8.20
–
8.12(m,2h),7.86(s,1h),7.82(d,j＝14.5hz,1h),7.68(dd,j＝9.0,3.0hz,1h),7.39
–
7.31(m,2h),7.29(d,j＝5.6hz,1h),7.06(d,j＝7.6hz,1h),4.07
–
3.93(m,4h),3.92
–
3.76(m,5h),3.74
–
3.53(m,2h),3.47
–
3.38(m,1h),3.10
–
2.93(m,2h),2.88
–
2.74(m,4h),2.61
–
2.52(m,1h),2.50(s,3h),2.35(s,3h),2.34
–
2.21(m,1h),2.21
–
2.12(m,1h),2.01
–
1.88(m,1h),1.84
–
1.60(m,2h),1.35
–
1.25(m,2h),0.98
–
0.86(m,2h)。
[1388]
实施例59.7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(嘧啶-5-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1389]
制备n-[(3s)-1-(嘧啶-5-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1390]
在密封管中，将5-溴嘧啶(0.2g，1.0eq.)、n-[(3s)-哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.33g，1.3eq.)和碳酸铯(0.82g，2.0eq.)悬浮于无水1,4-二噁烷(5.0ml)中。将反应混合物用氩气吹扫10分钟，然后加入xantphos(0.044g，0.06eq.)和pd2(dba)3(0.058g，0.05eq.)。将反应混合物用氩气再吹扫一次5分钟，然后封闭反应管并将反应在100℃加热过夜。将反应混合物用水稀释并用dcm(x 3)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经mgso4干燥，
过滤并浓缩。将粗物质装载在柱上并通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.301g，82％产率)，为黄色固体。esi-ms：279.1[m h]
。
[1391]
制备(3s)-1-(嘧啶-5-基)哌啶-3-胺
[1392]
将n-[(3s)-1-(嘧啶-5-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.30g，1.0eq.)溶解于无水dcm(5.0ml)并加入三氟乙酸(0.79ml，10.0eq.)，反应混合物在室温搅拌过夜。蒸发溶剂，粗产物进一步用meoh稀释，共沸除去痕量水分(x 3)，得到产物，为三氟乙酸盐(0.3g，97％产率)，其是黄色油状物。esi-ms：179.1[m h]
。
[1393]
制备(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(嘧啶-5-基)哌啶-3-胺
[1394]
将(3s)-1-(嘧啶-5-基)哌啶-3-胺三氟乙酸盐(0.30g，1.0eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(0.11ml，1.0eq.)和乙酸钠(0.083g，1.0eq.)溶解于无水甲醇(8.0ml)，反应混合物在室温搅拌过夜。然后将混合物冷却至0℃，加入硼氢化钠(0.042g，1.1eq.)并将反应混合物在室温搅拌过夜。蒸发甲醇，将残余物溶解在dcm中，加入水并通过加入2m naoh水溶液将ph调节至11。产物混合物用dcm(x 3)洗涤。合并的有机层用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并真空浓缩。粗混合物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.160g，54％产率)，为黄色油状物。esi-ms：284.2[m h]
。
[1395]
制备7-溴-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(嘧啶-5-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1396]
将7-溴-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体19)(0.166g，0.55mmol，1.0eq.)和(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(嘧啶-5-基)哌啶-3-胺(0.160g，1.0eq.)溶解于无水dce(3.0ml)，混合物在室温搅拌过夜。然后将溶液冷却至0℃，加入nabh(oac)3(0.348g，3.0eq.)并将反应混合物在室温搅拌过夜。加入水，通过加入1m naoh水溶液将ph调节至11，产物用dcm(x 3)萃取。合并的有机层经mgso4干燥，过滤并真空浓缩。粗品通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.187g，60％产率)，为白色固体。esi-ms：561.3[m h],563.2[m 2 h]
.1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.52(s,1h),8.49(s,2h),8.28(d,j＝5.1hz,1h),8.14
–
8.10(m,2h),8.02(s,1h),7.50(dd,j＝8.6,1.6hz,1h),7.27(s,1h),7.23
–
7.17(m,1h),5.05(hept,j＝6.2hz,1h),4.06
–
3.98(m,1h),3.83
–
3.72(m,3h),3.72
–
3.63(m,2h),2.91(t,j＝11.6hz,1h),2.76
–
2.66(m,2h),2.38(s,3h),2.00(d,j＝11.8hz,1h),1.79(d,j＝13.3hz,1h),1.66
–
1.45(m,2h),1.39(t,j＝6.8hz,6h)。
[1397]
制备7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(嘧啶-5-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1398]
将7-溴-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(嘧啶-5-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.12g，1.0eq.)、(3r)-吡咯烷-3-醇(0.028g，1.5eq.)和碳酸铯(0.13g，1.8eq.)溶解于无水1,4-二噁烷(4.0ml)并将所得悬浮液用氩气吹扫10分钟，然后加入binap(0.027g，0.2eq.)和pd
2(
dba)3(0.02g，0.1eq.)。将容器封闭并在100℃搅拌过夜。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，加入水并将混合物用dcm萃取3次。合并的有机层用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并真空浓缩。通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.078g，63％产率)，为黄色固体。esi-ms：568.5[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.51(s,1h),8.48(s,2h),8.30(d,j＝5.0hz,1h),7.99(d,j＝8.9hz,1h),7.83(s,1h),7.30(s,1h),7.22(d,j＝4.8hz,1h),6.66(dd,j＝9.0,1.9hz,1h),6.42(d,j＝2.1hz,1h),5.02
1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)(0.90g，1.05eq.)和无水硫酸钠(0.41g，1.0eq.)在无水dce(14.0ml)中的悬浮液在室温搅拌过夜，然后分批缓慢加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.7g，2.8eq.)，并将所得反应混合物在室温搅拌过夜。然后使用dcm和1m naoh水溶液洗涤反应混合物。合并有机层，用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.88g，54％产率)，为米色固体。esi-ms：553.6[m h]
。
[1406]
制备1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-1h-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯
[1407]
将丙-2-炔酸乙酯(0.029ml，1.1eq.)、抗坏血酸钠(0.006g，0.1eq.)和硫酸铜(ii)五水合物(0.003g，0.05eq.)依次加入7-叠氮-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体21)(0.150g，1.0eq.)在甲醇(6.0ml)和水(2.0ml)中的溶液中并将反应混合物在40℃搅拌2小时。蒸发甲醇并将残余物用dcm和水稀释。分离有机相并用dcm洗涤水层。合并的有机层用mgso4干燥，过滤并浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.143g，79％产率)，为黄色固体。esi-ms：651.7[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.39(d,j＝1.7hz,1h),8.47(d,j＝6.1hz,1h),8.29(br s,1h),8.18
–
8.10(m,2h),8.01(s,1h),7.27
–
7.20(m,2h),7.18(d,j＝5.0hz,1h),7.04(d,j＝8.4hz,1h),4.40(q,j＝7.1hz,2h),3.85
–
3.76(m,3h),3.68(s,2h),3.65
–
3.55(m,2h),2.84
–
2.74(m,2h),2.61(t,j＝11.3hz,1h),2.38(s,3h),2.33(s,3h),2.00(d,j＝10.4hz,1h),1.79(d,j＝11.0hz,1h),1.61
–
1.45(m,2h),1.35(t,j＝7.1hz,3h),1.27
–
1.21(m,2h),1.00
–
0.89(m,2h)。
[1408]
制备1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-1h-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
[1409]
将1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-1h-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯(0.11g，1.0eq.)溶解于无水meoh(1.0ml)并加入于甲醇中的7n氨(0.23ml，10.0eq.)并将反应混合物在45℃搅拌过夜。然后蒸发溶剂并将残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.073g，73％产率)，为黄色固体。esi-ms：622.5[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.15(d,j＝1.8hz,1h),8.46(d,j＝6.1hz,1h),8.29(d,j＝5.0hz,1h),8.16
–
8.09(m,3h),8.01(s,1h),7.70(s,1h),7.26
–
7.21(m,2h),7.18(d,j＝5.1hz,1h),7.04(d,j＝8.5hz,1h),3.85
–
3.77(m,3h),3.68(s,2h),3.66
–
3.56(m,2h),2.85
–
2.72(m,2h),2.61(t,j＝11.5hz,1h),2.39(s,3h),2.33(s,3h),2.00(d,j＝10.3hz,1h),1.79(d,j＝11.1hz,1h),1.65
–
1.43(m,2h),1.24(d,j＝7.1hz,2h),1.02
–
0.88(m,2h)。
[1410]
实施例61.1-环丙基-6-氟-7-[4-(羟基甲基)-1h-1,2,3-三唑-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.113g，1.0eq.)和k2co3(0.04g，1.5eq.)在水(1.0ml)和1,4-二噁烷(4.0ml)的混合物中的悬浮液用氩气吹扫10分钟。然后，加入pd(dppf)cl2*dcm(0.006g，0.05eq.)并将所得混合物在80℃搅拌过夜。随后，将其冷却至室温，加入水并用dcm(3x)萃取所得混合物。合并的有机层用盐水洗涤，经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.02g，17％产率)，为米色固体。esi-ms：622.6[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.33(d,j＝2.5hz,1h),8.28(d,j＝5.1hz,1h),8.19(d,j＝6.4hz,1h),8.14(d,j＝2.9hz,1h),8.11
–
8.08(m,1h)，7.89(s,1h),7.85(d,j＝11.5hz,1h),7.25
–
7.20(m,2h),7.19
–
7.15(m,1h),7.03(d,j＝8.5hz,1h),4.96(t,j＝5.3hz,1h),4.24(t,j＝5.5hz,2h),3.86
–
3.74(m,5h),3.64(s,2h),3.63
–
3.56(m,2h),2.82
–
2.73(m,2h),2.64
–
2.56(m,1h),2.37(s,3h),2.33(s,3h),2.02
–
1.95(m,1h),1.81
–
1.74(m,1h),1.60
–
1.45(m,2h),1.33
–
1.25(m,2h),0.96
–
0.86(m,2h)。
[1418]
实施例63.8-(2-羟基乙氧基)-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1419][1420]
制备5-{[(2-溴苯基)氨基]亚甲基}-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮
[1421]
将2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(4.4g，1.5eq.)在三甲氧基甲烷(50.0ml，24.8eq.)中的溶液在氩气气氛下于115℃回流2小时。然后，将反应混合物冷却至室温。随后，加入2-溴苯胺(3.5g，1.0eq.)并将所得混合物在115℃再搅拌2小时。然后，将反应混合物真空浓缩，得到粗产物(4.16g，61％产率)，为白色晶体，其无需进一步纯化即可用于下一
步。esi-ms：324.0[m-h]-.
[1422]
制备8-溴-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1423]
将5-{[(2-溴苯基)氨基]亚甲基}-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(4.2g，1.0eq.)和a(40.0ml)的混合物在250℃加热2小时。然后，将反应混合物冷却至室温并加入己烷(100.0ml)。将混合物通过硅胶垫过滤并用己烷(3x 150.0ml)洗涤该垫。滤液通过fcc(sihp；hex：etoac：meoh)纯化，得到产物(2.18g，75％产率)，为棕色固体。esi-ms：225.1[m 2]
[1424]
制备8-溴-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1425]
在氩气氛下将8-溴-1,4-二氢喹啉-4-酮(1.01g，1.0eq.)溶解于无水dmf(4.0ml)。然后，随搅拌分批加入nah(60％分散在矿物油中；0.32g，2.0eq.)，并将反应混合物在室温搅拌20分钟。然后，逐滴加入ch3i(1.0ml，4.0eq.)并将混合物在相同温度在120℃加热过周末。然后，加入meoh(2.0ml)并将混合物真空浓缩。通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化残余物，得到产物(0.89g，82％产率)，为米色固体。esi-ms：239.1[m 2]
.
[1426]
制备8-溴-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛
[1427]
在微波反应瓶中装入8-溴-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.8g，1.0eq.)、hmt(0.84g，2.0eq.)和tfa(4.5ml，20.0eq.)的混合物。使用微波炉将所得混合物在120℃辐射15分钟。然后，添加额外的hmt(0.42g，1.0eq.)并在120℃继续微波辐射5分钟。随后，将反应混合物转移到烧瓶中，随后加入h2o(30.0ml)并将所得混合物在室温搅拌15分钟。随后，将混合物真空浓缩。将残余物悬浮在水中并用etoac(4
×
100.0ml)萃取。合并的有机层经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(0.48g，57％产率)，为白色固体。esi-ms：265.9[m h]
。1h nmr(300mhz,氯仿-d)δ10.38(s,1h),8.55(dd,j＝7.9,1.7hz,1h),8.24(s,1h),8.01(dd,j＝7.7,1.7hz,1h),7.32(t,j＝7.8hz,1h),4.34(s,3h)。
[1428]
制备8-溴-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1429]
将(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)(0.48g，1.05eq.)和8-溴-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(0.41g，1.0eq.)在无水dce(10.0ml)中的混合物在55℃搅拌1小时。然后，将反应混合物冷却至室温并加入nabh(oac)3(0.87g，2.8eq.)。将所得混合物在55℃搅拌过夜。之后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用dcm洗涤垫。滤液真空浓缩。将残余物悬浮在nahco3水溶液中，所得混合物用dcm洗涤。合并的有机层经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.52g，55％产率)，为黄色油状物。esi-ms：546.3[m h]
。
[1430]
制备8-(2-羟基乙氧基)-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1431]
将cucl2(0.004g，0.1eq.)加入8-溴-1-甲基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.2g，1.0eq.),k2co3(0.13g，3.0eq.)和乙二醇(5.0ml)的混合物中并将所得混合物在相同温度于120℃加热过夜。然后，加入水(5ml)，所得混合物用etoac(4
×
50.0ml)洗涤。合并的有机层用水(2.0ml)、盐水(5.0ml)，洗涤，经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)
纯化并通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得到产物(0.038g，23％产率)，为黄色固体。esi-ms：528.7[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.0hz,1h),8.14(d,j＝3.0hz,1h),7.85(s,1h),7.79(dd,j＝7.0,2.5hz,1h),7.30
–
7.17(m,5h),7.01(d,j＝8.5hz,1h),4.94(t,j＝5.4hz,1h),4.15
–
4.08(m,5h),3.87
–
3.68(m,5h),3.67
–
3.53(m,3h),2.82
–
2.69(m,2h),2.63
–
2.53(m,1h),2.38(s,3h),2.32(s,3h),2.02
–
1.94(m,1h),1.79
–
1.71(m,1h),1.59
–
1.41(m,2h)。
[1432]
实施例64.1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-1h-咪唑-4-甲酰胺
[1433][1434]
制备1-(1-环丙基-6-氟-3-甲酰基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基)-1h-咪唑-4-甲酸乙酯
[1435]
将1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(0.050g，1.0eq.)、1h-咪唑-5-甲酸乙酯(0.027g，1.0eq.)和碳酸钾(0.054g，2.0eq.)悬浮于无水mecn(3.0ml)并将反应混合物在80℃搅拌过夜。然后加入水并用dcm(x 3)萃取混合物。合并的有机层用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并浓缩。粗品通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化得到产物(0.064g，85％产率)，为白色固体。esi-ms：370.1[m h]
。
[1436]
制备1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-1h-咪唑-4-甲酸乙酯
[1437]
将1-(1-环丙基-6-氟-3-甲酰基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基)-1h-咪唑-4-甲酸乙酯(0.064g，1.0eq.)和(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)(0.053g，1.05eq.)在无水dce(2.0ml)中的溶液在室温搅拌过夜。然后将混合物冷却至0℃，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.099g，2.8eq.)并将反应混合物在室温搅拌过夜。反应用水淬灭，加入1mnaoh水溶液碱化至ph 11。混合物用dcm(x 3)洗涤。合并的有机层经mgso4干燥，过滤并浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.050g，40％产率)，为白色固体。esi-ms：650.5[m h]
。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.43(t,j＝1.5hz,1h),8.33
–
8.27(m,2h),8.25(d,j＝6.4hz,1h),8.14(d,j＝2.9hz,1h),8.07(d,j＝10.9hz,1h),
7.99(s,1h),7.26
–
7.21(m,2h),7.20
–
7.16(m,1h),7.04(d,j＝8.5hz,1h),4.30(q,j＝7.1hz,2h),3.86
–
3.75(m,3h),3.67(s,2h),3.63
–
3.55(m,2h),2.85
–
2.72(m,2h),2.65
–
2.55(m,1h),2.39(s,3h),2.33(s,3h),1.99(d,j＝10.2hz,1h),1.78(d,j＝11.2hz,1h),1.59
–
1.45(m,2h),1.31(t,j＝7.1hz,3h),1.29
–
1.22(m,2h),1.00
–
0.89(m,2h)。
[1438]
制备1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-1h-咪唑-4-甲酰胺
[1439]
将1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-1h-咪唑-4-甲酸乙酯(0.043g，1.0eq.)溶解于无水meoh(1.0ml)，然后加入在甲醇中的7n氨溶液(0.08ml，10.0eq.)并将反应混合物在50℃搅拌3天。蒸发溶剂并通过制备型hplc(h2o：meoh：nh3)纯化残余物以提供产物(0.014g，41％产率)，为白色固体。esi-ms：621.6[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.29(d,j＝5.1hz,1h),8.26
–
8.18(m,3h),8.13(d,j＝3.0hz,1h),8.06(d,j＝11.0hz,1h),7.98(s,1h),7.54(s,1h),7.31(s,1h),7.26
–
7.20(m,2h),7.20
–
7.16(m,1h),7.03(d,j＝8.5hz,1h),3.85
–
3.74(m,3h),3.66(s,2h),3.63
–
3.55(m,2h),2.83
–
2.71(m,2h),2.66
–
2.56(m,1h),2.39(s,3h),2.32(s,3h),1.98(d,j＝8.1hz,1h),1.78(d,j＝10.4hz,1h),1.62
–
1.43(m,2h),1.29
–
1.20(m,2h),1.00
–
0.89(m,2h)。
[1440]
实施例65.1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1441][1442]
制备(3s)-n-[(3-甲氧基苯基)甲基]-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体16)
[1443]
将(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体17)(6.07g，1.1eq.)、2-甲氧基吡啶-4-甲醛(4.27g，1.0eq.)、乙酸钠(3.83g，1.5eq.)和无水meoh(60.0ml)的混合物在氩气下于室温搅拌过夜。将混合物冷却至0℃并在15分钟内分批加入硼氢化钠(1.30g，1.1eq.)。混合物在室温搅拌3小时。蒸发溶剂并将残余物在dcm和naoh水溶液之间分配。合并合并的有机层，
经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。将粗物质在fcc(sihp(用nh3/dcm去活化)dcm：meoh)上纯化，得到产物(4.95g，99％产率)，为黄色油状物。esi-ms：299.4[m h]
。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.25(d,j＝2.9hz,1h),8.06(dd,j＝5.2,0.6hz,1h),7.92(dd,j＝4.5,1.4hz,1h),7.26(ddd,j＝8.5,3.0,1.4hz,1h),7.16(ddd,j＝8.5,4.5,0.7hz,1h),6.98(dd,j＝5.3,1.3hz,1h),6.81(t,j＝1.1hz,1h),3.82(s,3h),3.80
–
3.71(m,3h),3.57(dt,j＝12.9,4.1hz,1h),2.72(ddd,j＝12.3,11.1,3.0hz,1h),2.54(d,j＝3.8hz,2h),2.33(s,1h),1.98
–
1.82(m,1h),1.79
–
1.64(m,1h),1.58
–
1.38(m,1h),1.32
–
1.12(m,1h)。
[1444]
制备7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1445]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体9)(0.3g，1.0eq.)和(3s)-n-[(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基]-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-胺(0.115g，0.3eq.)悬浮于无水dce(8.0ml)。将所得混合物在室温搅拌30分钟。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.206g，0.9eq.)并继续搅拌过夜。将反应混合物倒入冰冷的水中并加入饱和nahco3水溶液。用dcm萃取产物。合并的有机层用无水na2so4干燥并浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp,h2o：mecn)纯化，得到产物(0.496g，71％产率)，为黄色固体。esi-ms：548.8[m h]
。
[1446]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1447]
在压力容器中装入7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.1g，1.0eq.)、(3r)-吡咯烷-3-醇(0.022g，1.5eq.)、碳酸铯(0.098g，1.8eq.)和1,4-二噁烷(2.0ml)。所得混合物用氩气吹扫5分钟，然后加入binap(0.021g，0.2eq.)和pd2(dba)3(0.015g，0.1eq.)。关闭容器并将反应混合物在115℃搅拌4小时。将反应真空浓缩。将残余物溶于dcm并用水和盐水洗涤。有机层经无水na2so4干燥并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp,dcm：meoh)纯化并通过制备型hplc(h2o：meoh：nh3)重新纯化，得到产物(0.252g，56％产率)。使用在et2o中的2m hcl(0.139ml，1.0eq至fb)、meoh(5.0ml)和水(20.0ml)将化合物转化为hcl盐以提供产物(0.038g，96％产率)，为黄色固体。esi-ms：599.6[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.35(d,j＝2.9hz,1h),8.02(d,j＝4.9hz,1h),7.92(d,j＝5.3hz,1h),7.88(s,1h),7.78
–
7.69(m,2h),7.52
–
7.46(m,1h),6.98
–
6.94(m,2h),6.81(s,1h),4.59
–
4.53(m,1h),4.27
–
4.00(m,5h),3.89
–
3.71(m,6h),3.70
–
3.60(m,1h),3.62
–
3.51(m,1h),3.48
–
3.42(m,1h),3.30
–
3.20(m,2h),3.03
–
2.91(m,1h),2.30
–
2.02(m,4h),2.01
–
1.87(m,1h),1.84
–
1.68(m,1h),1.35
–
1.28(m,2h),1.04
–
0.98(m,2h)。
[1448]
实施例66.1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-3-甲酸
[1449][1450]
制备1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-3-甲酸乙酯
[1451]
在压力容器中装入7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.20g，1.0eq.)、哌啶-3-甲酸乙酯(0.12g，2.0eq.)、cs2co3(0.25g，2.1eq.)和dmf(2.0ml)。混合物用氩气吹扫5分钟，然后加入binap(0.068g，0.3eq.)和pd2(dba)3*chcl3(0.038g，0.1eq.)并在115℃搅拌过夜。反应混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩并将残余物通过fcc(sihp,dcm：meoh)纯化，得到产物(0.10g，38％产率)，为黄色固体。esi-ms：667.7[m h]
。
[1452]
制备1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-3-甲酸
[1453]
将1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-3-甲酸乙酯溶解在thf和h2o(2：1,5.0ml)的混合物中。随后，加入氢氧化锂(0.013g，5.0eq.)并将反应混合物在室温搅拌过夜。浓缩反应混合物，用水稀释并使用2m hcl溶液中和。浓缩混合物并通过rp-fcc(c18hp,h2o：mecn)纯化残余物，得到产物(0.025g，95％产率)，为黄色固体。esi-ms：637.3[m-h]-.1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.29(d,j＝5.1hz,1h),8.13(d,j＝3.0hz，1h),7.82(s,1h),7.70(d,j＝13.4hz，1h),7.37(d,j＝7.5hz,1h),7.24
–
7.19(m,2h),7.17(d,j＝5.2hz,1h),7.02(d,j＝8.5hz,1h),3.83
–
3.75(m,1h),3.78
–
3.72(m,1h),3.73
–
3.55(m,4h),3.54
–
3.48(m,1h),3.46
–
3.40(m,1h),3.07
–
2.96(m,2h),2.97
–
2.86(m,1h),2.80
–
2.71(m,2h),2.65
–
2.56(m,2h),2.38(s,3h),2.35
–
2.30(m,3h),2.03
–
1.92(m,2h),1.88
–
1.73(m,2h),1.71
–
1.44(m,4h),1.22
–
1.18(m,2h),0.89(td,j＝9.9,3.3hz,2h)。
[1454]
实施例67.1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-4-甲酸
[1455][1456]
制备1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-4-甲酸甲酯
[1457]
在压力容器中装入7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.10g，1.0eq.)、哌啶-4-甲酸甲酯(0.052g，2.0eq.)、cs2co3(0.125g，2.1eq.)和dmf(5.0ml)。混合物用氩气吹扫5分钟，然后加入binap(0.034g，0.3eq.)和pd2(dba)3*chcl3(0.019g，0.1eq.)并在115℃搅拌过夜。通过硅藻土垫过滤反应混合物，真空浓缩滤液。残余物通过fcc(sihp，dcm：meoh)纯化，得到产物(0.082g，58％产率)，为黄色油状物。esi-ms：653.7[m h]
。
[1458]
制备1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-4-甲酸
[1459]
将1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-4-甲酸甲酯(0.025g，1.0eq.)溶解于thf和h2o的混合物(2：1)中。随后，加入氢氧化锂(0.008mg，5.0eq.)，反应混合物在室温搅拌过夜。浓缩反应混合物，用水稀释并使用2m hcl溶液中和。添加dcm并分层。浓缩有机层并通过rp-fcc(c18hp,h2o：mecn)纯化残余物，得到产物(0.012g，48％产率)，为黄色固体。esi-ms：639.3[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.1hz,1h),8.12(d,j＝3.0hz,1h),7.81(s,1h),7.69(d,j＝13.5hz,1h),7.33(d,j＝7.5hz,1h),7.23
–
7.19(m,2h),7.17(d,j＝5.1hz,1h),7.01(d,j＝8.5hz,1h),3.81
–
3.69(m,3h),3.61
–
3.56(m,3h),3.54
–
3.46(m,3h),2.93
–
2.84(m,2h),2.80
–
2.70(m,2h),2.62
–
2.54(m,1h),2.43
–
2.36(m,4h),2.32(s,3h),1.99
–
1.92(m,3h),1.80
–
1.68(m,3h),1.57
–
1.45(m,2h),1.24
–
1.17(m,2h),0.92
–
0.83(m,2h)。
[1460]
实施例68.1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-{八氢-1h-吡咯烷并[3,2-c]吡啶-5-基}-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1461][1462][1463]
制备5-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-八氢-1h-吡咯烷并[3,2-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯
[1464]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.10g，1.0eq)、八氢-1h-吡咯烷并[3,2-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.083g，2.0eq)和碳酸铯(0.125g，2.1eq)溶解于dmf(3.0ml)，向混合物中通入氩气5分钟。然后，加入binap(0.034g，0.3eq)和pd2(dba)3*chcl3(0.038g，0.2eq)，并将反应混合物在115℃搅拌过夜。将反应器冷却至室温并将反应混合物通过硅藻土垫过滤。用dcm洗涤垫，滤液真空浓缩，粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化。将产物重新溶解在dcm中并与清除剂quadrapure mpa一起搅拌20分钟。滤出清除剂，浓缩滤液并通过制备型hplc(h2o：meoh：nh3)再纯化，得到产物(0.063mg；44％产率)，为淡黄色固体。esi-ms：737.3[m h]
。
[1465]
制备1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-{八氢-1h-吡咯烷并[3,2-c]吡啶-5-基}-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1466]
将于1,4-二噁烷中的4m hcl(1.16ml，56.0eq)加入5-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-八氢-1h-吡咯烷并[3,2-c]吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.061g，1.0eq)在1,4-二噁烷(8.0ml)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌3小时，然后倒入水中并用15％naoh水溶液进一步碱化。产物混合物先用dcm洗涤，然后用chcl3：iproh(3：1)洗涤。合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤并浓缩。产物混合物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.04g；产率76％)，为淡黄色固体。使用在et2o中的2mhcl(0.3ml，1.0eq.至fb)和作
为溶剂的meoh和h2o(5：1)的混合物将化合物转化为hcl盐，得到产物(0.036g，90％产率)，为淡黄色固体。esi-ms：636.3[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.49(br s,1h),8.28(d,j＝5.0hz,1h),8.12(d,j＝3.0hz,1h),7.81(s,1h),7.71(d,j＝13.4hz,1h),7.33(d,j＝7.5hz,1h),7.23
–
7.19(m,2h),7.16(d,j＝5.2hz,1h),7.02(d,j＝8.5hz,1h),3.81
–
3.77(m,1h),3.74(d,j＝2.7hz,2h),3.71
–
3.64(m,1h),3.62
–
3.55(m,3h),3.51
–
3.46(m,1h),3.45
–
3.38(m,1h),3.28
–
3.24(m,2h),3.22
–
3.14(m,1h),3.12
–
3.04(m,1h),2.80
–
2.70(m,2h),2.62
–
2.54(m,1h),2.37(s,3h),2.32(s,3h),2.07
–
1.92(m,4h),1.91
–
1.83(m,1h),1.79
–
1.72(m,1h),1.58
–
1.43(m,2h),1.25
–
1.18(m,2h),0.93
–
0.84(m,2h)。
[1467]
实施例69.7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(1h-吡唑-4-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1468]
[1469][1470]
制备(3s)-3-({[7-溴-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-基]甲基}[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1471]
将7-溴-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体19)(1.20g，1.0eq.)和(3s)-3-{[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体18)(1.25g，1.0eq.)溶解于无水1,2-二氯乙烷(20.0ml)并在室温搅拌过夜。将溶液冷却至0℃，然后分批加入nabh(oac)3(2.52g，3.0eq.)。将反应混合物温热至室温并搅拌过夜。然后，将反应混合物用水淬灭，用1m naoh碱化至ph 11并用dcm(3x 150.0ml)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到标题化合物(1.74g，55％产率)。esi-ms：583.3[m h]
。
[1472]
制备(3s)-3-[({7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-基}甲基)[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1473]
将cs2co3(1.25g，1.8eq.)加入(3s)-3-({[7-溴-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹
啉-3-基]甲基}[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.70g，1.0eq.)和(r)-吡咯烷-3-醇(0.28g，1.5eq.)在无水1,4-二噁烷(40.0ml)中的溶液中。将溶液用氩气吹扫15分钟并加入binap(0.26g，0.2eq.)和pd2(dba)3(0.2g，0.1eq.)。将反应混合物在110℃搅拌过夜，然后冷却至室温后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤，用水稀释并用dcm(3x 100.0ml)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化提供标题化合物(1.30g，98％产率)，为黄色泡沫。esi-ms：590.7[m h]
。
[1474]
制备7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1475]
将于1,4-二噁烷中的4m hcl(5.0ml)加入(3s)-3-[({7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-4-氧代-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-3-基}甲基)[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.30g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(30.0ml)中的溶液中。在室温搅拌过夜后，将反应混合物冷却至0℃并用1m naoh水溶液碱化至ph 11。所得混合物用dcm(3x 100.0ml)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥并真空浓缩。粗产物通过fcc(nh
2-官能化的sihp；dcm：meoh)纯化，得到标题化合物(0.73g，63％产率)。esi-ms：490.5[m h]
。
[1476]
制备4-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1h-吡唑
[1477]
在0℃将nah(60％于矿物油中的悬浮液；0.037g，1.2eq.)分批加入到4-碘-1h-吡唑(0.15g，1.0eq.)在thf(6.0ml)中的溶液中。将得到的白色悬浮液在0℃搅拌30分钟，然后逐滴加入[2-(氯甲氧基)乙基]三甲基硅烷(0.164ml，1.2eq.)。将悬浮液升温至室温并搅拌2小时。反应混合物用水(1.0ml)稀释并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到标题化合物(0.157g，63％产率)，为无色液体。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ8.09(d,j＝0.7hz,1h),7.61(d,j＝0.6hz,1h),5.39(s,2h),3.63
–
3.41(m,2h),1.14
–
0.68(m,2h),-0.05(s,9h)。
[1478]
制备7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1h-吡唑-4-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1479]
将4-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1h-吡唑(0.026g，1.1eq.)和叔丁醇钠(0.01g，1.4eq)加入7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.04g，1.0eq.)在无水1,4-二噁烷(3.0ml)中的溶液中。在用氩气冲洗反应混合物10分钟后，加入tbuxphos pd g3(0.002g，0.035eq.)。在85℃搅拌18小时和在100℃搅拌3小时后，将混合物冷却至室温然后真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到标题化合物(0.01g，14％产率)，为黄色固体。esi-ms：686.6[m h]
。
[1480]
制备7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(1h-吡唑-4-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1481]
在0℃将三氟乙酸(2.0ml)加入7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1h-吡唑-4-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1-(丙-2-基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.017g，1.0eq.)在无水dcm(6.0ml)中的溶液中。将反应混合物温热至室温。搅拌2小时后，将混合物真空浓缩。将粗化合物溶解在
meoh(1.0ml)中并使用nh3水溶液(0.5ml)将其转化为游离碱。将混合物减压浓缩并通过制备型hplc(h2o：meoh：nh3)纯化，得到标题化合物(0.004g，34％产率)，为白色固体。esi-ms：556.6[m h]
。1h nmr(300mhz,甲醇-d4)δ8.30
–
8.10(m,2h),7.99(s,1h),7.34(s,2h),7.30(s,1h),7.26(d,j＝5.5hz,1h),6.82(dd,j＝9.3,1.9hz,1h),6.47(s,1h),4.97(quint,j＝6.8hz,1h),4.58(m,1h),3.85(s,2h),3.79(s,2h),3.69
–
3.46(m,4h),3.39
–
3.34(m,1h),3.29
–
3.24(m,1h),3.10
–
2.85(m,1h),2.65(t,j＝11.0hz,1h),2.54
–
2.42(m,1h),2.39(s,3h),2.26
–
2.04(m,3h),1.97
–
1.83(m,1h),1.80
–
1.53(m,2h),1.49(d,j＝6.5hz,6h)。
[1482]
实施例70.1-环丙基-6-氟-7-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1483][1484]
制备1-环丙基-6-氟-7-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1485]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.1g，1.0eq.)、2-(哌嗪-1-基)乙-1-醇(0.044g，2.0eq.)和cs2co3(0.1g，1.8eq.)在无水1,4-二噁烷(3.0ml)中的悬浮液用氩气吹扫15分钟。随后，添加binap(0.021g，0.2eq.)和pd2(dba)3(0.016g，0.1eq.)。在125℃搅拌10小时后，将混合物用dcm稀释并用h2o和盐水洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化。将获得的样品溶解在meoh中并加入清除剂quadrapure mpa(0.5g)。在室温搅拌1小时后，滤出清除剂，滤液真空浓缩，残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得到产物(0.01g，9％产率)，为白色固体。esi-ms：640.6[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.29(d,j＝5.0hz,1h),8.13(d,j＝3.0hz,1h),7.82(s,1h),7.71(d,j＝13.5hz,1h),7.34(d,j＝7.5hz,1h),7.24
–
7.19(m,2h),7.19
–
7.15(m,1h),7.02(d,j＝8.5hz,1h),4.45(t,j＝5.3hz,1h),3.89
–
3.69(m,3h),3.61(s,2h),3.58
–
3.46(m,4h),3.22
–
3.18(m,4h),2.82
–
2.71(m,2h),2.69
–
2.55(m,5h),2.47(t,j＝6.3hz,2h),2.38(s,3h),2.33(s,3h),2.03
–
1.91(m,1h),1.82
–
1.71(m,1h),1.61
–
1.35(m,2h),1.29
–
1.12(m,2h),0.95
–
0.80(m,2h)。
[1486]
实施例71.1-环丙基-6-氟-7-[2-(羟基甲基)吗啉-4-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1487][1488]
制备1-环丙基-6-氟-7-[2-(羟基甲基)吗啉-4-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1489]
将叔丁醇钠(0.06g，1.5eq.)加入7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.23g，1.0eq.)和(吗啉-2-基)甲醇(0.048g，1.0eq.)在无水1,4-二噁烷(4.0ml)中的溶液中。在用氮气吹扫15分钟后，将binap(0.077g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.038g，0.1eq.)添加到反应混合物中。在95℃搅拌20小时后，混合物用etoac稀释，用水和盐水洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化。将获得的产物溶解在meoh中并加入清除剂quadrapure mpa(0.2g)。搅拌2小时后，滤出清除剂，真空浓缩滤液提供标题化合物(0.094g，35％产率)，为米色固体。esi-ms：627.5[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.17(d,j＝5.2hz,1h),8.10(d,j＝2.9hz,1h),7.93(s,1h),7.86(d,j＝13.6hz,1h),7.41(d,j＝7.3hz,1h),7.36(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.27
–
7.20(m,2h),7.13(d,j＝8.6hz,1h),4.17
–
3.99(m,1h),3.94
–
3.76(m,7h),3.72
–
3.58(m,4h),3.57
–
3.43(m,2h),3.07
–
2.93(m,2h),2.94
–
2.51(m,3h),2.42(s,3h),2.35(s,3h),2.29
–
2.05(m,1h),1.99
–
1.85(m,1h),1.77
–
1.57(m,2h),1.42
–
1.25(m,2h),1.00
–
0.87(m,2h)。
[1490]
实施例72.和实施例73.非对映异构体a和b：1-环丙基-6-氟-7-[2-(羟基甲基)吗啉-4-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮：实施例72.1-环丙基-6-氟-7-[(2s)-2-(羟基甲基)吗啉-4-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(a)和实施例73.1-环丙基-6-氟-7-[(2r)-2-(羟基甲基)吗啉-4-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(b)
[1491][1492]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(2s)-2-(羟基甲基)吗啉-4-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(实施例72)和1-环丙基-6-氟-7-[(2r)-2-(羟基甲基)吗啉-4-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(实施例73)
[1493]
将1-环丙基-6-氟-7-[2-(羟基甲基)吗啉-4-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.082g，1.0eq.)通过手性hplc(if；hex：etoh 25％等度洗脱)分离，获得的级分通过fcc(sihp；dcm：meoh)再纯化，分别得到实施例72.(0.01g，12％产率)和实施例73.(0.009g，11％产率)，为白色固体。吗啉部分内碳的构型是随机指定的。实施例72.：esi-ms：627.5[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.19(d,j＝5.3hz,1h),8.13(d,j＝2.9hz,1h),7.92(s,1h),7.86(d,j＝13.6hz,1h),7.54(dd,j＝8.7,2.9hz,1h),7.41(d,j＝7.3hz,1h),7.30
–
7.21(m,3h),4.10
–
4.02(m,1h),3.98
–
3.75(m,7h),3.73
–
3.59(m,4h),3.56
–
3.42(m,2h),3.09
–
2.90(m,3h),2.87
–
2.69(m,2h),2.47(s,3h),2.36(s,3h),2.20
–
2.09(m,1h),2.03
–
1.91(m,1h),1.77
–
1.63(m,2h),1.35
–
1.29(m,2h),1.00
–
0.87(m,2h)。实施例73.：esi-ms：627.8[m h]
。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.17(d,j＝5.2hz,1h),8.10(d,j＝2.9hz,1h),7.93(s,1h),7.86(d,j＝13.6hz,1h),7.41(d,j＝7.4hz,1h),7.36(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.27
–
7.20(m,2h),7.13(d,j＝8.6hz,1h),4.14
–
4.01(m,1h),3.95
–
3.84(m,4h),3.84
–
3.75(m,3h),3.73
–
3.58(m,4h),3.57
–
3.42(m,2h),3.10
–
2.93(m,2h),2.86(t,j＝11.1hz,1h),2.84
–
2.74(m,1h),2.74
–
2.66(m,1h),2.42(s,3h),2.35(s,3h),2.19
–
2.05(m,1h),2.02
–
1.88(m,1h),1.79
–
1.59(m,2h),1.39
–
1.25(m,2h),1.02
–
0.89(m,2h)。
[1494]
实施例74.7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-[4-(羟基甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1495][1496]
制备3-氟吡啶-4-甲酸甲酯
[1497]
将3-氟吡啶-4-甲酸(1.0g，1.0eq.)和硫酸(4.2ml，11.0eq.)在甲醇(10.0ml)中的溶液在70℃搅拌过夜。将残余物冷却，用饱和na2co3水溶液碱化至ph 9并用etoac洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到产物(0.866g，76％产率)，为无色油状物。esi-ms：156.4[m h]
。
[1498]
制备3-[(3s)-3-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-4-甲酸甲酯
[1499]
将3-氟吡啶-4-甲酸甲酯(0.5g，1.0eq.)和(s)-3-boc-氨基哌啶(0.94g，1.5eq.)在无水甲苯(7.0ml)中的溶液在120℃加热24小时。真空蒸发溶剂。粗产物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(0.72g，66％产率)，为黄色油状物。esi-ms：336.4[m h]
。
[1500]
制备{3-[(3s)-3-{[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-4-基}甲醇
[1501]
将3-[(3s)-3-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-4-甲酸甲酯(0.58g，1.0eq.)在无水thf(10.0ml)中的溶液在冰浴中冷却至0℃并缓慢加入在thf中的1m lah(2.16ml，1.3eq.)。将反应混合物在室温搅拌3小时并通过加入meoh和h2o淬灭。然后加入于1,4-二噁烷中的4m hcl(4.2ml)并将反应混合物在60℃搅拌1小时。蒸发溶剂，将粗物质溶解在dcm中并加入tea。滤出沉淀的无机固体，真空除去溶剂并加入无水meoh(20.0ml)、naoac(0.272g，2.0eq.)和2-甲基吡啶-4-甲醛(0.24ml，1.3eq.)。将该反应搅拌过夜，然后加入nabh4(0.094g，1.5eq.)。将反应在室温搅拌1小时，然后蒸发meoh并将粗混合物在rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)上纯化，得到产物(0.186g，35％产率)，为无色油状物。esi-ms：313.4[m h]
。
[1502]
制备7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-[4-(羟基甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1503]
将{3-[(3s)-3-{[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-4-基}甲醇(0.186g，1.0eq.)和7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体9)(0.187g，1.1eq.)在无水dce(10.0ml)中的溶液在60℃搅拌7小时。然后将反应冷却至0℃，加入stab(0.35g，2.8eq.)并将反应混合物在室温搅拌过夜。粗混合物用dcm和naoh水溶液洗涤，有机层经无水na2so4干燥，过滤并浓缩。粗物质在rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)上纯化，得到产物(0.22g，65％产率)，为白色固体。esi-ms：562.7[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)8.29
–
8.22(m,3h),8.15(d,j＝6.2hz,1h),7.96(d,j＝9.4hz,1h),7.89(s,1h),7.43(d,j＝4.9hz,1h),7.18(s,1h),7.12(dd,j＝5.4,1.4hz,1h),5.30(t,j＝5.7hz,1h),4.55
–
4.41(m,2h),3.80
–
3.68(m,2h),3.68
–
3.56(m,2h),3.55
–
3.47(m,1h),3.29
–
3.18(m,1h),2.95(d,j＝11.4hz,1h),2.87
–
2.74(m,2h),2.73
–
2.62(m,1h),2.35(s,3h),2.07
–
1.94(m,1h),1.86
–
1.71(m,1h),1.62
–
1.43(m,2h),1.27
–
1.14(m,2h),0.97
–
0.79(m,2h)。
[1504]
实施例75.1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1505]
[1506][1507]
制备2-[(1-环丙基-6-氟-3-甲酰基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基)氧基]乙基乙酸酯(中间体22)
[1508]
将乙烷-1,2-二醇(0.082ml，1.3eq.)、1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(0.3g，1.0eq.)、nah(60％分散在矿物油中；0.059g，1.3eq.)和无水dmf(3.0ml)的混合物在室温搅拌1小时，然后在60℃搅拌2小时。随后，将反应混合物真空浓缩并将残余物悬浮在无水吡啶(10.0ml)中。将ac2o(0.21ml，2.0eq.)添加到上述悬浮液中，然后添加dmap(0.007g，0.05eq.)并将所得混合物在室温搅拌过夜。然后，将混合物真空浓缩，残余物在饱和nahco3溶液和dcm中分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过两个连续的fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.12g，27％产率)，为灰白色固体。esi-ms：334.3[m h]
。
[1509]
制备n-[(3s,5s)-5-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1510]
将n-[(3s,5s)-5-氟哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.99g，1.3eq.)、5-溴-2-甲基吡啶(0.6g，1.0eq.)和cs2co3(1.5g，1.4eq.)在无水1,4-二噁烷(20.0ml)中的悬浮液用氩气吹扫10分钟。然后，加入xantphos(0.12g，0.06eq.)和pd2(dba)3(0.16g，0.05eq.)并将所得混合物用氩气再吹扫10分钟。将容器密封并将反应混合物在120℃搅拌3天。随后，混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。将残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，合并含有产物的级分
并真空浓缩。向溶解在dcm中的残余物中加入清除剂quadrapure mpa(0.3g)，并将所得混合物在室温搅拌过夜。然后，过滤出清除剂，用dcm洗涤，真空浓缩滤液，得到产物(0.38g，33％产率)，为黄色固体。esi-ms：310.6[m h]
。
[1511]
制备(3s,5s)-5-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-胺
[1512]
将于1,4-二噁烷中的4m hcl溶液(1.42ml，5.0eq.)加入n-[(3s,5s)-5-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.38g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(7.0ml)中的溶液中并将所得混合物在60℃搅拌1小时。然后，将反应混合物真空浓缩并将残余物在naoh水溶液和dcm之间分配。合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到产物(0.23g，84％产率)，为棕色油状物，其不经进一步纯化用于下一步。esi-ms：210.3[m h]
。
[1513]
制备(3s,5s)-5-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺
[1514]
将(3s,5s)-5-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-胺(0.23g，1.0eq.),naoac(0.078g，1.0eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(0.12ml，1.1eq.)在无水meoh(7.0ml)中的混合物在室温搅拌过夜。然后，加入nabh4(0.047g，1.3eq.)并将所得混合物在室温搅拌1小时。随后，将反应混合物真空浓缩并将残余物在naoh水溶液和dcm之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.26g，85％产率)，为淡黄色油状物。esi-ms：315.4[m h]
。
[1515]
制备1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1516]
将(3s,5s)-5-氟-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(0.09g，1.0eq.),2-[(1-环丙基-6-氟-3-甲酰基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基)氧基]乙基乙酸酯(中间体22)(0.11g，1.0eq.)和dce(8.0ml)的混合物在60℃搅拌6小时。然后，将混合物冷却至0℃，加入nabh(oac)3(0.17g，2.8eq.)并将所得混合物在室温搅拌过周末。随后，将反应混合物在naoh水溶液和dcm之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物溶解在h2o和meoh的混合物(10.0ml，1：2)中，加入lioh*h2o(0.048g，4.0eq.)。将所得混合物在50℃搅拌1小时。然后，将反应混合物真空浓缩，残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)再纯化，得到产物(0.054g，32％产率)，为白色固体。esi-ms：590.5[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.29(d,j＝5.0hz,1h),8.14(d,j＝3.0hz,1h),7.85(s,1h),7.80(d,j＝11.7hz,1h),7.51(d,j＝7.3hz,1h),7.26
–
7.20(m,2h),7.20
–
7.14(m,1h),7.02(d,j＝8.5hz,1h),5.14
–
4.93(m,2h),4.28
–
4.18(m,2h),3.93
–
3.70(m,6h),3.70
–
3.56(m,2h),3.56
–
3.46(m,1h),3.16
–
3.02(m,1h),3.00
–
2.78(m,2h),2.38(s,3h),2.32(s,3h),2.29
–
2.13(m,1h),2.01
–
1.78(m,1h),1.36
–
1.15(m,2h),1.00
–
0.78(m,2h)。
[1517]
实施例76.1-环丙基-7-[(4r)-4-羟基吡咯烷-2-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1518][1519]
制备(4r)-2-(1-环丙基-3-甲酰基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
[1520]
将7-溴-1-环丙基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体16)(0.3g，1.0eq.)、反式n-(叔丁氧羰基)-4-羟基-l-脯氨酸(0.59g，2.5eq.)、粉状碳酸铯(0.67g，2.0eq.)和4,4'-二叔丁基-2,2
′‑
联吡啶(0.041g，0.15eq.)溶解于无水dmf(7.0ml)，将氯化镍(ii)乙二醇二甲基醚络合物(0.045g，0.2eq.)和[4,4
′‑
双(1,1-二甲基乙基)-2,2
′‑
联吡啶-n1,n1
′
]双[3,5-二氟-2-[5-(三氟甲基)-2-吡啶基-n]苯基-c]六氟磷酸铱(iii)(0.01g，0.01eq.)添加到所得悬浮液中并将绿色反应混合物放入具有以下参数的光反应器中-搅拌速度＝650rpm，led％＝70％-持续1小时。反应完成后，真空蒸发溶剂，残余物通过fcc(sihp hex：etoac：meoh)纯化，得到产物(0.287g，67％产率)，为白色固体。esi-ms：399.6[m h]
。
[1521]
制备(4r)-2-[1-环丙基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
[1522]
将(4r)-2-(1-环丙基-3-甲酰基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.25g，1.0eq.)和(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)(0.19g，1.0eq.)在无水dce(8.0ml)中的溶液在55℃搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温并加入stab(0.36g，2.8eq.)。将所得悬浮液在室温搅拌过夜。通过硅藻土垫过滤反应混合物，用dcm(50.0ml)和meoh(50.0ml)洗涤。滤液真空浓缩。使用fcc(sihp；dcm：meoh)纯化粗产物，得到产物(0.20g，48％产率)，为白色固体。esi-ms：679.8[m h]
。
[1523]
制备1-环丙基-7-[(4r)-4-羟基吡咯烷-2-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1524]
将(4r)-2-[1-环丙基-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.18g，1.0eq.)溶于dcm(5.0ml)并滴加三氟乙酸(0.40ml，21.0eq.)。将所得混合物在室温
搅拌过夜。真空蒸发溶剂。将残余物溶解在水中，并通过添加1n naoh水溶液将ph调节至8。水层用dcm(70.0ml x 4)萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，经无水mgso4干燥并真空浓缩。将残余物通过fcc(c18hp h2o：mecn)纯化，得到为非对映异构体(82：15)的混合物的产物。(0.082g，54％产率)，为白色固体。esi-ms：579.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.27(dd,j＝8.4,2.8hz,1h),8.20
–
8.13(m,1h)j，8.08(d,j＝2.9hz,1h),8.06
–
7.95(m,2h),7.45(dd,j＝8.4,1.6hz,1h),7.34(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.27
–
7.19(m,2h),7.10(d,j＝8.6hz,1h),4.61
–
4.48(m,2h),3.89(s,1h),3.85(s,2h),3.81(s,2h),3.60(d,j＝12.2hz,1h),3.53
–
3.44(m,1h),3.40(dd,j＝11.9,5.2hz,1h),3.01
–
2.92(m,2h),2.85(t,j＝11.1hz,1h),2.76
–
2.63(m,1h),2.40(s,3h),2.32(s,3h),2.30
–
2.22(m,1h),2.19
–
2.09(m,1h),2.01
–
1.87(m,2h),1.73
–
1.60(m,2h),1.36
–
1.24(m,2h),0.99
–
0.84(m,2h)。
[1525]
实施例77.2-[3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基]乙酰胺
[1526][1527]
制备2-(3-甲酰基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基)乙酸甲酯
[1528]
将4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体1)(0.2g，1.0eq.)、ptsa*h2o(0.37g，2.0eq.)和meoh(10.0ml)的混合物在80℃加热过夜。然后，将混合物真空浓缩。将残余物溶解在dmf(2.0ml)中并加入k2co3(0.27g，2.0eq.)。将所得混合物在室温搅拌5分钟，然后加入溴乙酸甲酯(0.14ml，1.5eq.)。将所得混合物在60℃加热1小时。然后，混合物在dcm和水之间分配，水层进一步用dcm洗涤。合并的有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。通过fcc(sihp，hex：etoac：dcm)纯化残余物，得到产物(0.10g，42％产率)，为黄色固体。esi-ms：246.1[m h]
。
[1529]
制备2-[3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基]乙酸甲酯
[1530]
将(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(中间体2)(0.115g，1.0eq.)、2-(3-甲酰基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基)乙酸甲酯(0.094g，
1.0eq.)在无水dce(5.0ml)中的混合物在60℃加热1小时，然后在40℃加热17小时。然后，将混合物冷却至室温并加入nabh(oac)3(0.20g，2.5eq.)，将所得混合物在40℃加热5小时。然后，将混合物在水和dcm之间分配。水层另外用dcm洗涤。合并的有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp-15μm,dcm：meoh)纯化，得到产物(0.107g，53％产率)，为黄色半固体。esi-ms：526.6[m h]
。
[1531]
制备2-[3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基]乙酸
[1532]
将2-[3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基]乙酸甲酯(0.107g，1.0eq.)、lioh*h2o(0.03g，3.6eq.)、甲醇(5.0ml)和h2o(1.0ml)的混合物在50℃搅拌2小时，然后在室温搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩。将1m hcl水溶液(0.7ml)添加到上述残余物中，并使用rp-fcc(c18hp,h2o：mecn)纯化样品，得到产物(0.105g，定量产率)，为黄色固体。esi-ms：512.4[m h]
。
[1533]
制备2-[3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基]乙酰胺
[1534]
将dipea(0.18ml，5.0eq.)加入2-[3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-1-基]乙酸(0.105g，1.0eq.)、edc盐酸盐(0.058g，1.5eq.)、hobt(0.047g，1.5eq.)和dmf(5.0ml)的混合物中，然后加入nh4cl(0.022g，2.0eq.)并将所得混合物在室温搅拌过夜。然后加入1,4-二噁烷中的0.5m nh3溶液(1.22ml，3.0eq.)，160分钟后，另外加入edc盐酸盐(0.058g，1.5eq.)和hobt(0.047g，1.5eq.)并将反应混合物在室温搅拌5天。然后，将混合物真空浓缩并将残余物在水和dcm之间分配。在水层中发现产物，然后将其真空浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp,h2o：mecn)、fcc(sihp,dcm：meoh)和最后制备型hplc(h h2o：mecn：nh3)纯化，得到产物(0.034g，33％产率)，为白色固体。esi-ms：511.4[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.0hz,1h),8.19(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),8.13(d,j＝3.0hz,1h),8.05(s,1h),7.82(s,1h),7.68(ddd,j＝8.7,7.0,1.7hz,1h),7.47
–
7.32(m,3h),7.27(s,1h),7.25
–
7.18(m,2h),7.01(d,j＝8.5hz,1h),4.96(s,2h),3.87
–
3.52(m,6h),2.80
–
2.65(m,2h),2.62
–
2.53(m,1h),2.39(s,3h),2.32(s,3h),2.05
–
1.94(m,1h),1.81
–
1.69(m,1h),1.59
–
1.37(m,2h)。
[1535]
实施例78.1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1536][1537]
制备(3s)-3-{[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体18)
[1538]
在用氩气冲洗的干燥反应容器中装入(3s)-3-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.8ml，1.1eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(1.0g，1.0eq.)和naoac(0.68g，1.0eq.)。然后，加入meoh(8.0ml)并将所得混合物在室温和氩气气氛下搅拌过夜。随后，将混合物冷却至0℃，分批加入nabh4(0.34g，1.1eq.)并将反应混合物在室温搅拌1.5小时。然后，将混合物真空浓缩并将残余物溶解在dcm中。然后，加入水并使用12m naoh水溶液将ph调节至12。所得混合物用dcm(3x)洗涤。合并的有机层用盐水洗涤，经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过两个连续的fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(2.3g，91％产率)，为橙色油状物。esi-ms：306.5[m h]
。
[1539]
制备(3s)-3-{[(7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1540]
将(3s)-3-{[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体18)(0.22g，1.1eq.)和7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体9)(0.2g，1.0eq.)和无水dce(4.0ml)的混合物在惰性气氛下于60℃加热2小时。然后，将混合物冷却至室温，加入nabh(oac)3(0.38g，3.0eq.)并将所得混合物在室温搅拌过夜。随后，将反应混合物用水稀释并在naoh水溶液dcm之间分配。有机层经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.19g，56％产率)，为白色固体。esi-ms：577.6[m na]
.
[1541]
制备(3s)-3-[({1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基}甲基)[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯
[1542]
将(3s)-3-{[(7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.19g，1.0eq.)、(3r)-吡咯烷-3-醇(0.043g，1.5eq.)、cs2co3(0.2g，1.8eq.)和无水dmf(3.0ml)的混合物用氩气吹扫15分钟。然后，加入binap(0.041g，0.2eq.)和pd2(dba)3(0.03g，0.1eq.)并将所得混合物用氩气再吹扫5分钟。将容器密封并将混合物在110℃加热22小时。随后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.20g，96％产率)。esi-ms：606.5[m h]
。
[1543]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体28)
[1544]
将tfa(2.0ml，82eq.)加入(3s)-3-[({1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基}甲基)[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.2g，1.0eq.)在dcm(4.5ml)中的溶液中并将所得混合物在室温搅拌30分钟。然后，将混合物真空浓缩，与dcm一起研磨并再次真空浓缩(3个循环)。将残余物在水和dcm之间分配，然后用1m naoh水溶液碱化水层，并再次用dcm洗涤。合并的有机层经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩，得到产物(0.133g，71％产率)，为黄色油状物。esi-ms：506.4[m h]
。
[1545]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1546]
在装有隔膜的干燥反应烧瓶中装入1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.09g，1.0eq.)、3-溴吡啶(0.035g，1.5eq.)、naot-bu(0.029g，2.0eq.)和无水1,4-二噁烷(2.0ml)。将所得混合物用氩气吹扫10分钟并在氩气气氛下加入tbuxphos-pd-g3(0.012g，0.1eq.)。将容器盖上盖子并将反应混合物在115℃搅拌过夜。随后，混合物用etoac稀释并通过硅藻土过滤。滤液真空浓缩，残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)再纯化，得到产物(0.004g，5％产率)，为白色固体。esi-ms：583.5[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.30
–
8.19(m,1h),8.15(d,j＝5.5hz,1h),7.97
–
7.86(m,1h),7.82(s,1h),7.76(d,j＝14.8hz,1h),7.41(ddd,j＝8.6,3.0,1.3hz,1h),7.33
–
7.15(m,3h),6.91(d,j＝7.7hz,1h),4.56
–
4.50(m,1h),4.01
–
3.91(m,1h),3.90
–
3.65(m,7h),3.64
–
3.56(m,1h),3.54
–
3.46(m,1h),3.45
–
3.33(m,1h),3.01
–
2.83(m,2h),2.82
–
2.64(m,1h),2.34(s,3h),2.21
–
1.98(m,3h),1.98
–
1.85(m,1h),1.78
–
1.58(m,2h),1.41
–
1.17(m,2h),1.01
–
0.78(m,2h)。
[1547]
实施例79.1-环丙基-6-氟-7-[3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1548]
[1549][1550]
制备1-环丙基-6-氟-7-[3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1551]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.2g，1.0eq.)、(吡咯烷-3-基)甲醇(0.053g，1.5eq.)和cs2co3(0.21g，1.8eq.)在无水dmf(6.0ml)中的溶液用氩气吹扫15分钟。然后，加入binap(0.044g，0.2eq.)和pd2(dba)3(0.032g，0.1eq.)并将反应混合物在110℃搅拌过夜。通过硅藻土垫过滤反应混合物。滤液与清除剂quadrapure mpa进行超声处理，通过棉垫过滤并真空浓缩。粗物质通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过制备型hplc(h2o：mecn：fa)再纯化得到所需产物(0.069g，31％产率)，为黄色固体。esi-ms：611.5[m h]
。使用在et2o中的2m hcl(0.06ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(5.0ml)将化合物转化为hcl盐，得到产物(0.071g，95％产率)，为橙色固体。esi-ms：611.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.28(d,j＝5.7hz,1h),8.23(d,j＝3.0hz,1h),7.99(dd,j＝9.0,3.0hz,1h),7.86(s,1h),7.72(d,j＝14.7hz,1h),7.66
–
7.52(m,3h),6.92(d,j＝7.6hz,1h),4.22
–
4.07(m,3h),4.05
–
3.84(m,2h),3.82
–
3.75(m,1h),3.75
–
3.55(m,5h),3.46
–
3.37(m,2h),3.22
–
3.06(m,2h),2.95
–
2.85(m,1h),2.62
–
2.51(m,4h),2.46(s,3h),2.27
–
2.09(m,2h),2.05
–
1.94(m,1h),1.89
–
1.63(m,3h),1.38
–
1.24(m,2h),1.03
–
0.90(m,2h)。
[1552]
实施例80.7-(氨基甲基)-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1553]
[1554][1555]
制备2-({[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]甲基}氨基甲酰基)苯甲酸
[1556]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体3)(0.2g，1.0eq.)和[(1,3-二氧代-2,3-二氢-1h-异吲哚-2-基)甲基]三氟硼酸钾(0.11g，1.2eq.)在1,4-二噁烷和水(4.5ml，2：1v/v)的混合物中的悬浮液用cs2co3(0.27g，2.4eq.)处理。混合物用氩气吹扫15分钟。随后，加入sphos(0.017g，0.12eq.)和pd(oac)2(0.004g，0.052eq.)。在100℃搅拌19小时后，添加额外部分的sphos(0.017g，0.12eq.)、pd(oac)2(0.004g，0.052eq.)。在110℃继续搅拌过夜。将混合物真空浓缩，将残余物溶解在etoac中并用h2o和盐水洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化以提供产物(0.256g，17％产率)。esi-ms：689.5[m h]
。
[1557]
制备7-(氨基甲基)-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1558]
将1-丙醇(1.0ml)和乙烷-1,2-二胺(0.084ml，19.0eq.)加入2-({[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]甲基}氨基甲酰基)苯甲酸(0.256g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(1.0ml)中的溶液中。在微波辐射下在115℃搅拌3小时后，将混合物真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化然后通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.021g，61％产率)，为白色固体。esi-ms：541.5[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.18
–
8.11(m,2h),8.08(d,j＝2.9hz,1h),8.00(s,1h),7.89(d,j＝10.5hz,1h),7.35(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.28
–
7.23(m,1h),7.23
–
7.18(m,1h),7.11(d,j＝8.6hz,1h),4.07(s,2h),3.92
–
3.84(m,3h),3.81(s,2h),3.66
–
3.56(m,1h),3.56
–
3.46(m,1h),3.01
–
2.91(m,1h),2.85(t,j＝11.1hz,1h),2.78
–
2.59(m,1h),2.40(s,3h),2.34(s,3h),2.18
–
2.07(m,1h),2.02
–
1.86(m,1h),1.75
–
1.58(m,2h),1.51
–
1.26(m,2h),1.04
–
0.89(m,2h)。
[1559]
实施例81.1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(3s)-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1560][1561]
制备n-[(3s)-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1562]
将n-[(3s)-哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.60g，1.3eq.)、2-溴-5-甲基吡嗪(0.4g，1.0eq.)、cs2co3(1.0g，1.4eq.)在无水1,4-二噁烷(10.0ml)中的悬浮液用氮气吹扫10分钟。然后，加入xantphos(0.08g，0.06eq.)和pd2(dba)3(0.11g，0.05eq.)并将所得混合物再次用氮气吹扫10分钟。封闭容器并将反应混合物在100℃加热过夜。随后，混合物通过硅藻土垫过滤并用etoac洗涤垫。滤液真空浓缩，残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(0.71g，87％产率)，为棕色固体。esi-ms：293.3[m h]
。
[1563]
制备(3s)-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-胺盐酸盐
[1564]
将于1,4-二噁烷中的4m hcl溶液(2.5ml，5.0eq.)加入n-[(3s)-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.71g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(10.0ml)中的溶液中。将所得混合物在40℃加热过夜。随后，将反应混合物真空浓缩，残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.48g，97％产率)，为棕色油状物.esi-ms：193.1[m h]
。
[1565]
制备(3s)-1-(5-甲基吡嗪-2-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺
[1566]
将(3s)-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-胺盐酸盐(0.48g，1.0eq.)、naoac(0.16g，1.0eq.)和2-甲基吡啶-4-甲醛(0.24ml，1.1eq.)在无水meoh(10.0ml)中的混合物在室温搅拌过夜。然后，加入nabh4(0.10g，1.3eq.)并将所得混合物在室温搅拌1小时。随后，将反应混合物真空浓缩并将残余物在naoh水溶液和dcm之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化。分离的样品在naoh水溶液和dcm之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)再纯化，得到产物(0.14g，22％产率)，为棕色油状物.esi-ms：298.3[m h]
。
[1567]
制备7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲
基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1568]
将(3s)-1-(5-甲基吡嗪-2-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(0.13g，1.1eq.)、7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体9)(0.11g，1.0eq.)和无水dce(3.0ml)的混合物在50℃搅拌过夜。然后，分批缓慢加入nabh(oac)3(0.24g，2.8eq.)并将所得混合物在室温搅拌2小时。随后，将反应混合物在naoh水溶液和dcm之间分配。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.029g，11％产率)，为无色油状物。esi-ms：547.7[m h]
。
[1569]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(3s)-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1570]
将naot-bu(0.009g，2.1eq.)加入7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.03g，1.0eq.)和(3s)-哌啶-3-醇盐酸盐(0.012g，2.0eq.)在1,4-二噁烷(2.0ml)中的溶液中并将所得混合物用氩气吹扫15分钟。随后，加入inap(0.008g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.004g，0.1eq.)并将反应混合物在100℃搅拌过夜。然后，加入额外的(3s)-哌啶-3-醇盐酸盐(0.006g，1.0eq.)、pd2(dba)3(0.004g，0.1eq.)和binap(0.008g，0.3eq.)并继续搅拌2小时。之后，将反应混合物真空浓缩并通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化残余物。将获得的样品溶解在meoh中并加入清除剂quadrapure mpa(0.5g)。搅拌1小时后，滤出清除剂，真空浓缩滤液。将残余物另外通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.021g，77％产率)，为米色固体。esi-ms：612.6[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.18(d,j＝5.1hz,1h),8.09(d,j＝1.5hz,1h),7.97
–
7.91(m,2h),7.82(d,j＝13.6hz,1h),7.41(d,j＝7.4hz,1h),7.29
–
7.21(m,2h),4.57
–
4.48(m,1h),4.27
–
4.11(m,1h),3.94
–
3.74(m,5h),3.71
–
3.62(m,1h),3.54
–
3.41(m,2h),3.12
–
2.99(m,1h),2.97
–
2.69(m,4h),2.36(s,3h),2.35(s,3h),2.23
–
2.13(m,1h),2.12
–
2.01(m,1h),2.01
–
1.87(m,2h),1.87
–
1.68(m,2h),1.67
–
1.43(m,2h),1.36
–
1.21(m,2h),1.03
–
0.84(m,2h)。
[1571]
实施例82.1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1572]
[1573][1574]
制备n-[(3s,5s)-5-氟-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1575]
将n-[(3s,5s)-5-氟哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.37g，1.0eq.)、2-溴-5-甲基吡嗪(0.29g，1.0eq.)、cs2co3(0.74g，1.4eq.)和无水1,4-二噁烷(6.0ml)的悬浮液用氮气吹扫10分钟。然后，加入xantphos(0.06g，0.06eq.)和pd2(dba)3(0.08g，0.05eq.)并将所得混合物用氮气吹扫另外10分钟。封闭容器并将反应混合物在100℃加热过夜。随后，混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(0.37g，69％产率)，为棕色油状物。esi-ms：311.4[m h]
。
[1576]
制备(3s,5s)-5-氟-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-胺
[1577]
将于1,4-二噁烷中的4m hcl溶液(1.5ml，5.0eq.)加入n-[(3s,5s)-5-氟-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.37g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(5.0ml)中的溶液中并将所得混合物在40℃加热过夜。然后，使用naoh水溶液将ph调节至12，混合物在dcm和naoh水溶液之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到产物(0.22g，74％产率)，为棕色油状物，其不经进一步纯化用于下一步。esi-ms：211.2[m h]
。
[1578]
制备(3s,5s)-5-氟-1-(5-甲基吡嗪-2-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺
[1579]
将(3s,5s)-5-氟-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-胺(0.22g，1.0eq.)、naoac(0.06g，1.0eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(0.09ml，1.1eq.)和无水meoh(5.0ml)的混合物在室温搅拌过夜。然后，加入nabh4(0.04g，1.3eq.)并将所得混合物在室温搅拌1小时。随后，将混合物真空浓缩并将残余物在naoh水溶液和dcm之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化。分离未反应的起始胺并以相同方式再次进行反应。将纯化后分离的两份样品合并，得到产物(0.12g，47％产率)，为棕色油状物.esi-ms：316.3[m h]
。
[1580]
制备7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1581]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体9)(0.1g，
1.0eq.)、(3s,5s)-5-氟-1-(5-甲基吡嗪-2-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(0.131g，1.05eq.)和无水dce(3.0ml)的混合物在50℃搅拌过夜。然后，分批缓慢加入nabh(oac)3(0.22g，2.8eq.)并将所得混合物在室温搅拌2小时。随后，将反应混合物在2m naoh水溶液和dcm之间分配。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.09g，38％产率)，为黄色泡沫。esi-ms：565.8[m h]
。
[1582]
制备1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1583]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(5-甲基吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.09g，1.0eq.)、(3s)-哌啶-3-醇盐酸盐(0.038g，2.0eq.)、naot-bu(0.03g，2.1eq.)和binap(0.03g，0.3eq.)在无水1,4-二噁烷(3.0ml)中的悬浮液用氮气吹扫10分钟。然后，加入pd2(dba)3(0.013g，0.1eq.)并将所得混合物在95℃搅拌过夜。随后，将反应混合物用水稀释并用dcm(3x)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得到产物(0.043g，49％产率)，为白色固体。esi-ms：630.5[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.18(d,j＝5.2hz,1h),8.12(s,1h),7.94(d,j＝10.4hz,2h),7.83(d,j＝13.5hz,1h),7.41(d,j＝7.4hz,1h),7.28
–
7.20(m,2h),5.07(d,j＝47.1hz,1h),4.70(d,j＝12.5hz,1h),4.49(t,j＝13.2hz,1h),3.92
–
3.75(m,5h),3.71
–
3.62(m,1h),3.53
–
3.42(m,2h),3.27
–
3.16(m,2h),3.13
–
3.02(m,2h),2.99
–
2.88(m,1h),2.80(dd,j＝11.5,8.8hz,1h),2.48
–
2.39(m,1h),2.38
–
2.33(m,6h),2.15
–
1.90(m,3h),1.83
–
1.69(m,1h),1.56
–
1.43(m,1h),1.35
–
1.26(m,2h),1.00
–
0.91(m,2h)。
[1584]
实施例83.1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(5-氟-6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1585][1586]
制备n-[(3s)-1-(5-氟-6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1587]
将n-[(3s)-哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.27g，1.3eq.),5-溴-3-氟-2-甲基吡啶
(0.2g，1.0eq.)和cs2co3(0.69g，2.0eq.)在无水1,4-二噁烷(4.0ml)中的悬浮液用氩气吹扫10分钟。然后，加入xantphos(0.04g，0.06eq.)和pd2(dba)3(0.05g，0.05eq.)并将所得混合物另外用氩气吹扫5分钟。封闭容器并将混合物在100℃加热过夜。随后，将反应混合物在水和dcm之间分配。有机层经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.30g，89％产率)，为米色固体。esi-ms：310.3[m h]
。
[1588]
制备(3s)-1-(5-氟-6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-胺
[1589]
将tfa(2.0ml，28.0eq.)加入n-[(3s)-1-(5-氟-6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.30g，1.0eq.)在dcm(6.0ml)中的溶液中并将所得混合物在室温搅拌1小时。然后，将反应混合物真空浓缩，与meoh一起研磨并再次真空浓缩(3个循环)。残余物在水和dcm之间分配。水层用1mnaoh水溶液碱化并用dcm洗涤。有机层经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩，得到产物(0.17g，84％产率)，为淡黄色油状物，其不经进一步纯化用于下一步。esi-ms：210.1[m h]
。
[1590]
制备(3s)-1-(5-氟-6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺
[1591]
将2-甲基吡啶-4-甲醛(0.092ml，1.1eq.)、(3s)-1-(5-氟-6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-胺(0.176g，1.0eq.)、naoac(0.065g，1.0eq.)和meoh(5.0ml)的混合物在室温搅拌过夜。然后，将反应混合物冷却至0℃，分批加入nabh4(0.033g，1.1eq.)并将所得混合物在室温搅拌过夜。随后，将反应混合物真空浓缩并将残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.18g，71％产率)，为淡黄色油状物。esi-ms：315.2[m h]
[1592]
制备1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(5-氟-6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1593]
将(3s)-1-(5-氟-6-甲基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(0.11g，1.0eq.),2-[(1-环丙基-6-氟-3-甲酰基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基)氧基]乙基乙酸酯(中间体22)(0.15g，1.1eq.)和无水dce(12.0ml)的混合物在60℃搅拌8小时。然后，将反应混合物冷却至0℃，加入nabh(oac)3(0.20g，2.8eq.)并将所得混合物在室温搅拌过周末。之后，混合物在nahco3水溶液和dcm之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物溶解在h2o和meoh(10.0ml，7：3v/v)的混合物中并加入lioh*h2o(0.06g，4.0eq.)。将所得混合物在50℃搅拌2小时。然后，将混合物真空浓缩，残余物通过两个连续的rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化并通过制备型hplc(h2o：mecn：nh3)再纯化，得到产物(0.04g，19％产率)，为灰白色固体。hr-ms：590.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.15(d,j＝5.2hz,1h),7.97
–
7.91(m,2h),7.89(d,j＝11.6hz,1h),7.55(d,j＝7.1hz,1h),7.25(s,1h),7.23
–
7.18(m,1h),7.15(dd,j＝12.6,2.5hz,1h),4.35
–
4.26(m,2h),4.02
–
3.96(m,2h),3.95
–
3.74(m,5h),3.69
–
3.60(m,1h),3.53
–
3.43(m,1h),2.98
–
2.85(m,2h),2.81
–
2.69(m,1h),2.41
–
2.23(m,6h),2.18
–
2.07(m,1h),1.96
–
1.83(m,1h),1.76
–
1.57(m,2h),1.37
–
1.23(m,2h),0.99
–
0.87(m,2h)。
[1594]
实施例84.1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1595][1596]
制备(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体23)
[1597]
将(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体17)(3.38g，1.0eq.)、乙酸钠(1.45g，1.0eq.)和2-甲基吡啶-4-甲醛(2.2ml，1.1eq.)在无水甲醇(100.0ml)中的溶液在室温搅拌过夜。然后加入nabh4(0.87g，1.3eq.)并将反应混合物在室温搅拌1小时。将粗品浓缩并将残余物在dcm和naoh水溶液之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(3.94g，87％产率)，为黄色油状物。esi-ms：283.4[m h]
。
[1598]
制备1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体24)
[1599]
将(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体23)(1.0g，1.0eq.)和1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(0.9g，1.0eq.)在无水dce(13.0ml)中的混合物在55℃搅拌3小时。然后，将混合物在冰浴中冷却并分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.1g，2.8eq.)并在55℃继续搅拌过夜。随后，蒸发溶剂并将残余物用dcm稀释。然后将有机层用水、盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.75g，40％产率)，为黄色固体。esi-ms：516.5[m h]
。
[1600]
制备1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1601]
将1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体24)(0.1g，1.0eq.)溶于乙二醇(1.9ml)并将混合物冷却至0℃。然后分批加入氢化钠(60％分散在矿物油中，0.04g，5.0eq.)。将所
ms：279.1[m h]
。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.21(s,1h),8.13(dd,j＝2.5,1.4hz,1h),7.83(d,j＝2.7hz,1h),4.69(s,1h),3.96(d,j＝12.8hz,1h),3.76(s,2h),3.53
–
3.30(m,2h),2.03
–
1.93(m,1h),1.84(ddq,j＝13.3,6.7,3.5hz,1h),1.75
–
1.57(m,2h),1.47(s,9h)。
[1607]
制备(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-胺
[1608]
将三氟乙酸(1.9ml，10.0eq.)加入n-[(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.7g，1.0eq.)在dcm(12.0ml)中的溶液中并将反应混合物在室温搅拌3小时。然后，将混合物真空浓缩并与meoh共沸除去痕量水分，得到产物(0.73g，99％产率)，为三氟乙酸盐。产物不经进一步纯化用于下一步。esi-ms：179.0[m h]
。
[1609]
制备(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-胺(中间体25)
[1610]
将(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-胺三氟乙酸盐(0.73g，1.0eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(0.27ml，1.0eq.)和乙酸钠(0.20g，1.0eq.)溶解于无水meoh(8.0ml)并将混合物在室温搅拌过夜。此后，将混合物冷却至0℃并加入硼氢化钠(0.19g，2.0eq.)，将反应混合物在室温搅拌过夜。在那之后，将反应真空浓缩并用dcm和naoh水溶液(ph调节至11)萃取残余物。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.59g，83％产率)，为淡黄色油状物。esi-ms：284.3[m h]
。
[1611]
制备1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1612]
将1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(0.47g，1.0eq.)和(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-胺(中间体25)(0.57g，1.1eq.)在无水dce(18.0ml)中的混合物在60℃搅拌5小时。然后将混合物冷却至室温并加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.9g，5.0eq.)。将所得混合物在60℃搅拌过夜。然后将混合物用dcm稀释并用0.1m naoh洗涤。用dcm萃取水层。合并的有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥，过滤并浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化以得到所需产物(0.82g，79％产率)，为黄色泡沫。esi-ms：517.5[m h]
。
[1613]
制备1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1614]
在0℃将氢化钠(60％分散在矿物油中，0.29g，5.0eq.)分批加入到1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.82g，1.0eq.)在乙烷-1,2-二醇(14.0ml)中的溶液中。混合物在0℃搅拌1小时，升温至室温，然后将混合物在60℃搅拌过夜。通过加入水淬灭反应混合物。混合物用水稀释并用dcm洗涤。有机层经na2so4干燥，过滤并减压浓缩。粗物质通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过rp fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化并再次使用fcc(sicn柱；dcm：meoh)再纯化，得到产物(0.49g，60％产率)为淡黄色泡沫。使用在et2o中的2m hcl和作为溶剂的dcm将化合物转化为hcl盐。将混合物真空浓缩并将化合物冷冻干燥得到产物(0.5g，96％产率)，为黄色固体。esi-ms：559.5[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.53(d,j＝6.0hz,1h),8.33(d,j＝1.4hz,1h),8.27(s,1h),8.16(dd,j＝2.7,1.5hz,1h),8.01(s,1h),7.97
–
7.93(m,1h),7.90(d,j＝11.3hz,1h),7.81(d,j＝2.7hz,1h),7.68(d,j＝7.1hz,1h),4.85(d,j＝12.5hz,1h),4.54(s,2h),4.40
–
4.32(m,2h),4.32
–
4.21(m,3h),4.07
–
3.98(m,2h),3.63(tt,j＝7.1,3.9hz,1h),3.44
–
3.35(m,1h),3.32
–
3.25(m,1h),3.10(td,j＝13.3,2.6hz,
1h),2.65(s,3h),2.40
–
2.30(m,1h),2.12
–
1.95(m,2h),1.74
–
1.59(m,1h),1.44
–
1.32(m,2h),1.20
–
1.07(m,2h)。
[1615]
实施例86.1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1616][1617]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1618]
将(3s)-哌啶-3-醇盐酸盐(0.14g，2.5eq.)和1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体24)(0.21g，1.0eq.)溶解于1-甲基-2-吡咯烷酮(2.0ml)然后加入tea(0.28ml，5.0eq.)。将反应混合物在100℃加热5天。然后将反应混合物用水稀释并用etoac洗涤。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过rp-fcc(c18hp,mecn：h2o)再纯化，得到产物(0.17g，71％产率)，为米色固体。esi-ms：597.5[m h]
。使用在et2o中的2m hcl和作为溶剂的dcm将化合物转化为hcl盐。将混合物真空浓缩，将化合物冷冻干燥，得到产物(0.14g，100％产率)，为橙色固体。hr-ms：597.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)：8.47(d,j＝2.9hz,1h),8.36(d,j＝6.0hz,1h),8.15
–
8.10(m,1h),8.06(d,j＝5.3hz,1h),8.00(s,1h),7.84
–
7.74(m,4h),7.42(d,j＝7.4hz,1h),4.29(d,j＝12.0hz,1h),4.19(s,2h),4.04
–
3.82(m,4h),3.69
–
3.62(m,1h),3.54
–
3.44(m,2h),3.24
–
3.06(m,2h),3.02
–
2.92(m,2h),2.88
–
2.81(m,1h),2.55(s,3h),2.28
–
2.19(m,1h),2.10
–
1.91(m,3h),1.86
–
1.64(m,3h),1.56
–
1.45(m,1h),1.36
–
1.28(m,2h),1.04
–
0.98(m,2h)。
[1619]
实施例87.1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1620][1621]
制备7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体26)
[1622]
将(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-胺(中间体23)(1.0g，1.0eq.)和7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体9)(1.0g，1.1eq.)在无水dce(30.0ml)中的混合物在60℃搅拌3小时。然后，将混合物在冰浴中冷却至0℃并分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.1g，2.8eq.)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后加热至40℃持续1小时。添加acoh(0.2ml，1.0eq.)并将反应在室温搅拌1小时。然后，将混合物在冰浴中冷却至0℃，分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.1g，2.8eq.)并在60℃搅拌1小时。蒸发溶剂，残余物用dcm稀释并用饱和nahco3水溶液洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.81g，43％产率)，为黄色固体。esi-ms：532.5[m h]
。
[1623]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1624]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体26)(0.05g，1.0eq.)和(3s)-吡咯烷-3-基]甲醇(0.016g，1.8eq.)在无水1,4-二噁烷(1.0ml)中的溶液用氩气吹扫15分钟。然后，加入叔丁醇钠(0.018g，2.1eq.)、binap(0.016g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.008g，0.1eq.)。将所得混合物在95℃加热过夜。从0.05g和0.28g中间体26开始重复相同的反应两次。合并两批的产物混合物并通过硅藻土垫过滤并用meoh进一步洗涤。真空浓缩滤液。产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化。将残余物溶解在meoh中并加入清除剂quad-rapure mpa(4.0eq.)。将混合物在室温搅拌过夜。然后过滤混合物。将滤液真空浓缩，残余物通过fcc(sihp；dcm：
meoh)再纯化，得到产物(0.29g，73％产率)。esi-ms：597.5[m h]
。使用在et2o中的2m hcl(0.2ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(3.0ml)将化合物转化为hcl盐，得到产物(0.26g，82％产率)，为黄色固体。esi-ms：597.3[m h]
。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.46(d,j＝2.9hz,1h),8.32(d,j＝5.8hz,1h),8.07(d,j＝5.0hz,1h),8.02(dd,j＝8.6,2.5hz,1h),7.91(s,1h),7.78
–
7.68(m,3h),7.65(d,j＝6.0hz,1h),6.94(d,j＝7.7hz,1h),4.33
–
4.15(m,3h),4.05(d,j＝12.9hz,1h),3.98
–
3.83(m,2h),3.78
–
3.56(m,5h),3.49
–
3.39(m,2h),3.27
–
3.12(m,2h),2.98(td,j＝12.6,2.7hz,1h),2.62
–
2.53(m,1h),2.50(s,3h),2.32
–
2.23(m,1h),2.23
–
2.12(m,1h),2.06
–
1.98(m,1h),1.93
–
1.80(m,2h),1.80
–
1.67(m,1h),1.37
–
1.27(m,2h),1.05
–
0.94(m,2h)。
[1625]
实施例88.1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1626][1627]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1628]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体26)(0.39g，1.0eq.)和[(3r)-吡咯烷-3-基]甲醇(0.12g，1.8eq.)在无水1,4-二噁烷(7.0ml)中的溶液用氩气吹扫15分钟。然后加入叔丁醇钠(0.14g，2.1eq.)、binap(0.13g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.062g，0.1eq.)。将所得混合物在95℃加热过夜。反应混合物通过硅藻土垫过滤，减压浓缩滤液。将残余物溶于dcm(100.0ml)并添加清除剂quadrasil mp(1.0g)。将混合物在室温搅拌过夜，滤出清除剂珠，用dcm洗涤并真空浓缩。粗产物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化以得到所需产物(0.31g，75％产率)，为黄色固体。esi-ms：597.5[m h]
。使用在et2o中的2m hcl(0.25ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(15.0ml)将化合物转化为hcl盐，得到产物(0.32g，98％产率)，为黄色固体。esi-ms：597.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)：8.45
–
8.41(m,1h),8.30(d,j＝5.8hz,1h),8.04(d,j＝5.2hz,1h),8.00
–
7.95(m,1h),7.89(s,1h),7.75
–
7.65(m,3h),7.64
–
7.58(m,1h),6.92(d,j＝7.6hz,1h),4.28
–
4.15(m,3h),4.08
–
3.99(m,1h),3.95
–
3.82(m,2h),3.75
–
3.57(m,5h),3.47
–
3.39(m,2h),3.24
–
3.12(m,2h),3.01
–
2.91(m,1h),2.59
–
2.51(m,1h),2.48(s,3h),2.30
–
2.21(m,1h),2.20
–
2.11(m,1h),2.05
–
1.97(m,1h),1.90
–
1.65(m,3h),1.34
–
1.26(m,2h),1.02
–
0.94(m,2h)。
[1629]
实施例89.1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1630][1631]
制备n-[(3s,5s)-5-氟-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1632]
将3-溴吡啶(1.8g，1.0eq.)、n-[(3s,5s)-5-氟哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(3.2g，1.3eq.)和碳酸铯(5.0g，1.4eq.)在无水1,4-二噁烷(35.0ml)中的悬浮液用氩气鼓泡20分钟，然后加入pd2(dba)3(0.52g，0.05eq.)和xantphos(0.4g，0.06eq.)。封闭反应管并将反应混合物在140℃搅拌2天。将反应混合物冷却至室温并用氩气吹洗。然后加pd2(dba)3(0.52g，0.05eq.)和xantphos(0.4g，0.06eq.)并将反应在140℃搅拌过夜。通过硅藻土垫过滤粗混合物。真空浓缩滤液。残余物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化以得到所需产物。将产物溶解在dcm(50.0ml)中并加入清除剂quadrasil mp(0.3g)。将混合物搅拌过夜，滤出清除剂珠，用dcm洗涤。浓缩溶剂，得到产物(1.05g，29％产率)，为黄色固体。esi-ms：296.1[m h]
。
[1633]
制备(3s,5s)-5-氟-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-胺三氟乙酸盐
[1634]
将n-[(3s,5s)-5-氟-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(1.05g，1.0eq.)溶于dcm(17.0ml)并向该溶液滴加三氟乙酸(2.5ml，10.0eq.)。反应混合物在室温搅拌过夜。蒸发溶剂并将残余物溶解在meoh中并浓缩(三个循环)以共沸除去痕量水分。获得所需产物(1.6g，定量)，为棕色固体。esi-ms：196.2[m h]
。
[1635]
制备(3s,5s)-5-氟-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-胺
[1636]
将2-甲基吡啶-4-甲醛(0.37ml，1.0eq.)、(3s,5s)-5-氟-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-胺三氟乙酸盐(1.19g，1.0eq.)和乙酸钠(0.27g，1.0eq.)溶解于无水甲醇(11.0ml)并将混合物在室温搅拌过夜。此后，将混合物冷却至0℃并加入硼氢化钠(0.25g，2.0eq.)。将反应在室温搅拌过夜。然后将反应混合物真空浓缩并将残余物在dcm和naoh水溶液之间分配(ph调节至11)。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.55g，55％产率)，为米色固体。esi-ms：301.2[m h]
。
[1637]
制备1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1638]
将1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(0.61g，1.3eq.)和(3s,5s)-5-氟-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-胺(0.55g，1.0eq.)在无水dce(18.0ml)中的混合物在60℃加热4小时。然后将混合物冷却至0℃并分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.55g，4.0eq.)。将所得混合物在室温搅拌3天。然后加入1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(0.23g，0.5eq.)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.78g，2.0eq.)并将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用水稀释并用dcm洗涤。有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并真空浓缩。粗产物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化以得到所需产物(0.545g，51％产率)，为淡黄色固体。esi-ms：534.3[m h]
。
[1639]
制备1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1640]
将1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.545g，1.0eq.)溶解在乙二醇(9.3ml)并将混合物冷却至0℃。然后分批加入氢化钠(60％分散在矿物油中，0.19g，5.0eq.)。将所得混合物在60℃搅拌过夜。将反应混合物用水稀释并萃取至dcm。有机层经无水na2so4干燥并真空浓缩。粗物质通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到纯产物(0.51g，92％产率)，为米色固体。esi-ms：576.4[m h]
。使用在et2o中的2m hcl(0.41ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(25.0ml)将化合物转化为hcl盐，得到产物(0.50g，97％产率)，为黄色固体。esi-ms：576.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)：8.45
–
8.38(m,1h),8.34(d,j＝5.9hz,1h),8.03
–
7.98(m,2h),7.96
–
7.87(m,2h),7.76(s,1h),7.70(d,j＝5.9hz,1h),7.65
–
7.57(m,2h),5.13(d,j＝46.9hz,1h),4.31(t,j＝4.6hz,2h),4.28
–
4.14(m,2h),4.07(s,2h),4.01
–
3.97(m,2h),3.92
–
3.86(m,1h),3.79
–
3.70(m,1h),3.56
–
3.50(m,1h),3.39
–
3.32(m,1h),3.28
–
3.13(m,2h),2.55(s,3h),2.52
–
2.41(m,1h),2.14
–
1.93(m,1h),1.36
–
1.29(m,2h),1.04
–
0.94(m,2h)。
[1641]
实施例90.1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(5-氟吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1642][1643]
制备n-[(3s)-1-(5-氟吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1644]
将3-溴-5-氟吡啶(1.0g，1.0eq.)、(s)-3-boc-氨基哌啶(1.5g，1.3eq.)和碳酸铯(2.5g，1.4eq.)在无水1,4-二噁烷(20.0ml)中的悬浮液用氩气吹洗20分钟，然后加入pd2(dba)3(0.26g，0.05eq.)和xantphos(0.33g，0.1eq.)并将反应混合物在140℃搅拌48小时。粗混合物通过硅藻土垫过滤，用甲醇洗脱。真空浓缩滤液。粗产物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化并将所得残余物溶解在etoac中并加入清除剂quadrasil mp(1.0g)。将混合物在室温搅拌4小时。滤出清除剂并用etoac洗涤。蒸发溶剂，得到产物(1.7g，99％产率)，为黄色固体。esi-ms：296.4[m h]
。
[1645]
制备(3s)-1-(5-氟吡啶-3-基)哌啶-3-胺三氟乙酸盐
[1646]
将三氟乙酸(4.3ml，10.0eq.)加入n-[(3s)-1-(5-氟吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(1.7g，1.0eq.)在dcm(35.0ml)中的溶液中并将混合物在室温搅拌过夜。此后，将混合物真空浓缩并通过与meoh共沸蒸馏从该残余物中除去痕量水分，得到产物(1.8g，99％产率)，为黄色油状物。esi-ms：196.1[m h]
。产物不经进一步纯化用于下一步。
[1647]
制备(3s)-1-(5-氟吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺
[1648]
将(3s)-1-(5-氟吡啶-3-基)哌啶-3-胺三氟乙酸盐(1.8g，1.0eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(0.62ml，1.0eq.)和乙酸钠(0.46g，1.0eq.)溶解于无水甲醇(20.0ml)并将混合物在室温搅拌过夜。此后，将混合物冷却至0℃并加入硼氢化钠(0.42g，2.0eq.)。将反应混合物在室温搅拌3天。此后，将反应真空浓缩并将残余物在dcm和naoh水溶液(ph调节至11)之间
分配。有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.95g，54％产率)，为淡棕色油状物。esi-ms：301.2[m h]
。
[1649]
制备1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(3s)-1-(5-氟吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1650]
将1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(0.62g，1.0eq.)和(3s)-1-(5-氟吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(0.92g，1.2eq.)在无水1,2-二氯乙烷(25.0ml)中的混合物在60℃搅拌5小时。然后将混合物冷却至室温并加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.6g，5.0eq.)。将所得混合物在60℃搅拌过夜。在那之后，混合物用dcm稀释并用0.1m naoh水溶液洗涤。用dcm进一步洗涤水层。合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗品通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.80g，59％产率)，为黄色油状物。esi-ms：534.5[m h]
。
[1651]
制备1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(5-氟吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1652]
在0℃将氢化钠(60％分散在矿物油中，0.29g，5.0eq.)分批加入到1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(3s)-1-(5-氟吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.80g，1.0eq.)在乙二醇(15.0ml)中的溶液中。混合物在0℃搅拌1小时并升温至室温。然后将混合物在60℃搅拌过夜。此后，将反应混合物用水稀释并用dcm萃取。有机层经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗品通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化两次，得到产物(0.77g，94％产率)，为黄色泡沫。esi-ms：576.4[m h]
。使用在et2o中的2m hcl(0.67ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(13.0ml)将化合物转化为hcl盐，得到产物(0.76g，100％产率)，为黄色固体。esi-ms：576.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.40(d,j＝6.0hz,1h),8.24
–
8.19(m,1h),8.11(s,1h),7.93
–
7.84(m,3h),7.80(d,j＝5.9hz,1h),7.62(d,j＝7.1hz,1h),7.47(dt,j＝12.2,2.3hz,1h),4.37
–
4.33(m,2h),4.32
–
4.23(m,2h),4.22
–
4.14(m,1h),4.10
–
3.93(m,4h),3.81(d,j＝12.5hz,1h),3.61
–
3.54(m,1h),3.24
–
3.11(m,2h),2.94(td,j＝12.5,2.6hz,1h),2.58(s,3h),2.31
–
2.21(m,1h),2.05
–
1.95(m,1h),1.91
–
1.79(m,1h),1.73(ddt,j＝15.8,12.0,5.7hz,1h),1.42
–
1.31(m,2h),1.11
–
1.01(m,2h)。
[1653]
实施例91.1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1654]
[1655][1656]
制备7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体27)
[1657]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体9)(0.51g，1.0eq.)和(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-胺(中间体25)(0.5g，1.0eq.)在无水dce(8.0ml)中的混合物在60℃搅拌3小时。然后将混合物冷却至0℃并加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.05g，2.8eq.)。将所得混合物在60℃搅拌过夜。在那之后，混合物用dcm稀释并用水洗涤。水层再次用dcm洗涤。合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.695g，72％产率)，为黄色固体。esi-ms：533.7[m h]
。
[1658]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1659]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体27)(0.20g，1.0eq.)和[(3r)-吡咯烷-3-基]甲醇(0.07g，1.8eq.)在无水1,4-二噁烷(4.0ml)中的溶液用氩气吹扫15分钟。然后加入叔丁醇钠(0.07g，2.1eq.)、binap(0.07g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.03g，0.1eq.)。将所得混合物在95℃加热过夜。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并减压浓缩。将残余物溶于dcm并加入清除剂quadrasil mp。将混合物在室温搅拌过夜。滤出清除剂并真空浓缩滤液。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化然后通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得到产物(0.086g，39％产率)，为黄色泡沫。esi-ms：598.7[m h]
。使用在et2o中的2m hcl(0.7ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(5.0ml)将化合物转化为hcl盐，得到产物(0.09g，98％产率)，为黄色固体。hr-ms：598.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.36(d,j＝5.8hz,1h),8.26(d,j＝1.5hz,1h),8.09(dd,j＝2.7,1.5hz,1h),7.95(s,1h),7.77(d,j＝2.7hz,1h),7.75
–
7.61(m,3h),6.95(d,j＝7.6hz,1h),4.77(d,j＝12.4hz,1h),4.38
–
4.01(m,5h),3.77
–
3.56(m,5h),3.50
–
3.40(m,2h),3.29
–
3.12(m,2h),3.03(t,j＝12.6hz,1h),2.60
–
2.48(m,4h),2.26(d,j＝11.5hz,1h),2.21
–
2.11(m,1h),2.04
–
1.79(m,3h),1.65(q,j＝12.8hz,1h),1.37
–
1.27(m,2h),1.07
–
0.97(m,2h)。
[1660]
实施例92.1-环丙基-3-({[(3s)-1-[6-(二甲基氨基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1661][1662]
制备n-[(3s)-1-[6-(二甲基氨基)吡啶-3-基]哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1663]
将(s)-3-boc-氨基哌啶(0.55g，1.1eq.)、5-溴-n,n-二甲基吡啶-2-胺(0.50g，1.0eq.)和叔丁醇钠(0.30g，1.3eq.)在1,4-二噁烷中的溶液用氩气吹扫10分钟。随后，加入ruphos pd g3(0.21g，0.1eq.)并将反应混合物在100℃搅拌24小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并减压浓缩至干。残余物用dcm和水稀释。分离的有机层经无水na2so4干燥，过滤并浓缩。粗物质通过fcc(sihp，dcm：etoac)纯化，得到产物(0.17g，21％产率)，为黄色油状物。esi-ms：321.4[m h]
。
[1664]
制备5-[(3s)-3-氨基哌啶-1-基]-n,n-二甲基吡啶-2-胺三氟乙酸盐
[1665]
将三氟乙酸(0.4ml，10.0eq.)加入n-[(3s)-1-[6-(二甲基氨基)吡啶-3-基]哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.17g，1.0eq.)在dcm(10.0ml)中的溶液中并将混合物在室温搅拌3小时。此后，将混合物真空浓缩并与meoh共沸除去痕量水分，得到产物(0.17g，94％产率)，为黄色油状物。esi-ms：221.2[m h]
。产物不经进一步纯化用于下一步。
[1666]
制备n,n-二甲基-5-[(3s)-3-{[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-胺
[1667]
将2-甲基吡啶-4-甲醛(0.054ml，1.0eq.),5-[(3s)-3-氨基哌啶-1-基]-n,n-二甲基吡啶-2-胺三氟乙酸盐(0.17g，0.1.0eq.)和乙酸钠(0.04g，1.0eq.)溶解在无水甲醇(5.0ml)中并将混合物在室温搅拌过夜。此后，将混合物冷却至0℃并加入硼氢化钠
(0.037g，2.0eq.)。将反应在室温搅拌3小时。然后将反应混合物真空浓缩并将残余物在dcm和naoh水溶液(ph调节至11)之间分配。有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。产物混合物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.16g，82％产率)，为黄色油状物。esi-ms：326.3[m h]
。
[1668]
制备1-环丙基-3-({[(3s)-1-[6-(二甲基氨基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-6,7-二氟-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1669]
将n,n-二甲基-5-[(3s)-3-{[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-胺(0.13g，1.0eq.)和1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(0.10g，1.1eq.)在无水dce(5.0ml)中的溶液在60℃搅拌3小时，然后将反应冷却至0℃，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.42g，5.0eq.)，并将反应混合物在60℃搅拌过夜。此后浓缩反应混合物，粗物质用dcm稀释并用水和盐水洗涤。合并有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗品在fcc(sihp；dcm：meoh)上纯化，得到产物(0.16g，41％产率)，为黄色油状物。esi-ms：559.5[m h]
。
[1670]
制备1-环丙基-3-({[(3s)-1-[6-(二甲基氨基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1671]
将氢化钠(60％分散在矿物油中，0.034g，5.0eq.)分批加入到1-环丙基-3-({[(3s)-1-[6-(二甲基氨基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-6,7-二氟-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.16g，1.0eq.)在乙二醇(2.0ml)中的溶液中。将反应混合物在60℃搅拌过夜。将反应混合物用冰冷的水淬灭并用dcm(3x)萃取。合并的有机层用水、盐水洗涤并用无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.11g，63％产率)，为黄色固体。esi-ms：601.6[m h]
。使用在et2o中的2m hcl(0.09ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(5.0ml)将化合物转化为hcl盐，得到产物(0.12g，99％产率)，为黄绿色固体。hr-ms：601.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.21(d,j＝5.4hz,1h),7.95(s,1h),7.87(dd,j＝15.9,10.3hz,2h),7.58(d,j＝7.1hz,1h),7.44
–
7.31(m,3h),7.05(d,j＝9.7hz,1h),4.37
–
4.25(m,2h),4.09
–
3.66(m,7h),3.54
–
3.45(m,1h),3.44
–
3.36(m,1h),3.19(s,6h),3.15
–
2.98(m,1h),2.86(s,1h),2.69(s,1h),2.39(s,3h),2.15(d,j＝6.9hz,1h),2.04
–
1.92(m,1h),1.80
–
1.67(m,2h),1.36
–
1.30(m,2h),1.01
–
0.93(m,2h)。
[1672]
实施例93.1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1673]
[1674][1675]
制备n-[(3s)-1-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1676]
将3-溴-5-(三氟甲基)吡啶(1.5g，1.0eq.)、(s)-3-boc-氨基哌啶(1.7g，1.3eq.)和cs2co3(2.9g，1.4eq.)在无水1,4-二噁烷(20.0ml)中的悬浮液用氩气吹洗20分钟，然后加入pd2(dba)3(0.30g，0.05eq.)和xantphos(0.38g，0.1eq.)。封闭反应管并将反应在140℃搅拌2天。混合物通过硅藻土垫过滤并真空浓缩。产物在fcc(sihp；hex：etoac)上纯化，溶解在etoac中并加入清除剂quadrasil mp(2.7g)。将混合物在室温搅拌过夜。滤出清除剂并用etoac洗涤。浓缩溶剂，得到产物(1.9g，82％产率)，为黄色固体。esi-ms：346.1[m h]
。
[1677]
制备(3s)-1-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-胺三氟乙酸盐
[1678]
在室温将三氟乙酸(4.1ml，10.0eq.)加入n-[(3s)-1-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(1.9g，1.0eq.)在dcm(35.0ml)中的溶液中并将混合物在室温搅拌3天。此后，将混合物真空浓缩并通过与meoh共沸蒸馏除去痕量水分，得到产物(1.7g，99％产率)，为橙色固体。产物不经进一步纯化用于下一步。esi-ms：246.2[m h]
。
[1679]
制备(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-胺
[1680]
将(3s)-1-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-胺三氟乙酸盐(1.7g，1.0eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(0.60ml，1.0eq.)和乙酸钠(0.44g，1.0eq.)溶解于无水甲醇(20.0ml)并将混合物在室温搅拌过夜。此后，将混合物冷却至0℃并加入硼氢化钠(0.41g，2.0eq.)。将反应在室温搅拌过夜。此后，将反应真空浓缩并用dcm和naoh水溶液(ph调节至11)萃取残余物。有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并减压浓缩。
[1681]
产物混合物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(1.63g，79％产率)，为淡黄色固体。esi-ms：351.3[m h]
。
[1682]
制备1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1683]
将1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(0.65g，1.0eq.)和(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-胺(0.98g，1.0eq.)在无水dce(25.0ml)中的混合物在50℃搅拌5小时。然后将混合物冷却至室温并加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.7g，5.0eq.)。将所得混合物在60℃搅拌过夜。在那之后，混合物用dcm稀释并用0.1mnaoh水溶液洗涤。水层用dcm洗涤。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥，过滤并浓缩。产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(1.05g，58％产率)，为白色泡沫。esi-ms：584.4[m h]
。
[1684]
制备1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1685]
在0℃将氢化钠(60％分散在矿物油中，0.3g，5.0eq.)分批加入到1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-[5-(三氟甲基)吡啶-3-基]哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(1.05g，1.0eq.)在乙二醇(15.0ml)中的溶液中。混合物在0℃搅拌1小时并升温至室温。然后将混合物在60℃搅拌过夜。在那之后，反应通过加水淬灭。混合物用水稀释并用dcm洗涤。有机层经na2so4干燥。产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过fcc(sihp；dcm：meoh)使用hplc级溶剂再纯化，得到产物(0.68g，72％产率)，为白色泡沫。使用在et2o中的2m hcl(0.5ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(12.0ml)将化合物转化为hcl盐，得到产物(0.63g，89％产率)，为淡黄色固体。hr-ms：626.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.53(d,j＝2.8hz,1h),8.37(d,j＝6.0hz,1h),8.22(s,1h),8.07(s,1h),7.90(d,j＝11.4hz,1h),7.82(s,1h),7.76(d,j＝5.5hz,1h),7.65
–
7.58(m,2h),4.37
–
4.30(m,2h),4.30
–
4.11(m,3h),4.11
–
3.88(m,4h),3.86
–
3.78(m,1h),3.60
–
3.52(m,1h),3.25
–
3.06(m,2h),2.92(td,j＝12.3,2.3hz,1h),2.57(s,3h),2.31
–
2.19(m,1h),2.06
–
1.95(m,1h),1.91
–
1.66(m,2h),1.43
–
1.32(m,2h),1.11
–
0.97(m,2h)。
[1686]
实施例94.1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1687][1688]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1689]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体27)(0.80g，1.0eq.)和(s)-吡咯烷-3-基甲醇(0.27g，1.8eq.)在无水1,4-二噁烷(15.0ml)中的溶液用氩气吹扫15分钟。然后加入叔
丁醇钠(0.2 9g，2.1eq.)、binap(0.27g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.13g，0.1eq.)。将所得混合物在95℃加热过夜。通过硅藻土垫过滤反应混合物并减压浓缩。将残余物溶于dcm并加入清除剂quadrasil mp(4.0eq.)。将混合物在室温搅拌过夜。滤出清除剂，真空浓缩滤液。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化然后通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得到产物(0.43g，48％产率)，为黄色泡沫。esi-ms：598.5[m h]
。使用在et2o中的2m hcl(0.35ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(32.0ml)将化合物转化为hcl盐，得到产物(0.43g，94％产率)，为黄色固体。hrms：598.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.37(d,j＝6.0hz,1h),8.28(d,j＝1.5hz,1h),8.10(dd,j＝2.7,1.5hz,1h),7.97(s,1h),7.79(d,j＝2.7hz,1h),7.77
–
7.70(m,2h),7.70
–
7.64(m,1h),6.96(d,j＝7.6hz,1h),4.79(d,j＝12.3hz,1h),4.33(s,2h),4.30
–
4.21(m,1h),4.13(s,2h),3.79
–
3.57(m,5h),3.52
–
3.42(m,2h),3.31
–
3.12(m,2h),3.11
–
3.00(m,1h),2.62
–
2.54(m,1h),2.53(s,3h),2.32
–
2.24(m,1h),2.24
–
2.12(m,1h),2.05
–
1.92(m,2h),1.87(s,1h),1.73
–
1.60(m,1h),1.34(dd,j＝6.9,1.7hz,2h),1.03(dq,j＝7.5,3.8hz,2h)。
[1690]
实施例95.1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1691][1692]
制备(3s,5s)-5-氟-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-胺
[1693]
在惰性气氛下将2-氯吡嗪(0.9g，1.0eq.)添加到khco3(1.6g，2.0eq.)、n-[(3s,5s)-5-氟哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(1.9g，1.1eq.)在dmso(10.0ml)中的混合物中。将反应混合物在100℃搅拌16小时。将反应冷却至室温并加入水(50.0ml)。用乙醚(3x20.0ml)洗涤反应混合物。合并的有机层用na2so4干燥，过滤，蒸发挥发物，得到橙色油状物(2.2g)。esi-ms：297.4[m h]
。然后将橙色油状物溶解在1,4-二噁烷(20.0ml)中。将混合物的ph调节至ph＝0.5-1.0之间。然后将溶液在65℃加热1.5小时。将反应冷却至室温并蒸发挥发物。然后将粗混合物溶解在水(20.0ml)中并使用naoh(固体)碱化直到ph》12。使用etoac(3x20.0ml)萃取有机物，有机层经na2so4干燥，过滤，蒸发挥发物，得到产物(0.78g，51％产率)，为黄色油状物。esi-ms：197.1[m h]
。
[1694]
制备(3s,5s)-5-氟-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-胺
[1695]
将(3s,5s)-5-氟-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-胺(0.78g，1.0eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(0.45ml，1.1eq.)、乙酸钠(0.33g，1.0ml)和无水甲醇(20.0ml)的混合物在n2下在室温搅拌过夜。在10分钟内将硼氢化钠(0.20g，1.3eq.)分批加入混合物中。然后将混合物在室温搅拌1小时。然后蒸发meoh并将粗物质溶解在dcm(50.0ml)中并用水(2
×
20.0ml)洗涤。合并有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化以得到所需产物(0.66g，55％产率)，为淡黄色油状物。esi-ms：302.4[m h]
。
[1696]
制备1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1697]
将1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(0.72g，1.3eq.)和(3s,5s)-5-氟-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-胺(0.66g，1.0eq.)在无水dce(22.0ml)中的混合物在60℃加热4小时。然后将混合物冷却至0℃并分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.8g，4.0eq.)。将所得混合物在室温搅拌2天。加入1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(0.36g，0.65eq.)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.92g，2.0eq.)并将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用水淬灭并用dcm洗涤。有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp,dcm：meoh)纯化，通过fcc(sihp,etoac：meoh)再纯化，得到产物(0.85g，71％产率)，为白色固体。esi-ms：535.4[m h]
。
[1698]
制备1-环丙基-6-氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1699]
将1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(3s,5s)-5-氟-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.85g，1.0eq.)溶于乙二醇(15.0ml)并将混合物冷却至0℃。然后分批加入氢化钠(60％分散在矿物油中，0.31g，5.0eq.)。将所得混合物在60℃搅拌过夜。将反应混合物用水稀释并萃取至dcm。有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过fcc(sihp；dcm：meoh)使用hplc级溶剂再纯化，得到产物(0.89g，81％产率)。esi-ms：577.4[m h]
。使用在et2o中的2m hcl(0.6ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(10.0ml)将化合物(0.7g)转化为hcl盐，得到产物(0.69g，90％产率)，为黄色固体。hr-ms：577.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.45(d,j＝6.1hz,1h),8.26(d,j＝1.3hz,1h),8.09(s,1h),8.06(dd,j＝2.7,1.5hz,1h),7.97(s,1h),7.93
–
7.86(m,2h),7.75(d,j＝2.7hz,1h),7.62(d,j＝7.1hz,1h),5.09(d,j＝48.4hz,1h),4.81(d,j＝12.6hz,1h),4.59(t,j＝13.6hz,1h),4.36
–
4.30(m,2h),4.18(s,2h),
4.04
–
3.98(m,2h),3.91
–
3.80(m,2h),3.56(tt,j＝7.2,4.0hz,1h),3.31
–
3.08(m,3h),2.67(s,3h),2.52
–
2.40(m,1h),2.18
–
1.99(m,1h),1.40
–
1.30(m,2h),1.10
–
0.93(m,2h)。
[1700]
实施例96.1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(哒嗪-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1701][1702][1703]
制备n-[(3s)-1-(哒嗪-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1704]
将3-溴哒嗪(1.0g，1.0eq.)和(s)-3-boc-氨基哌啶(5.0g，4.0eq.)在etoh(63.0ml)中的溶液在90℃加热过夜。蒸发溶剂并将残余物溶解在dmc中并用水和盐水洗涤。分离的有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(1.2g，66％产率)，为橙色油状.esi-ms：279.2[m h]
。
[1705]
制备(3s)-1-(哒嗪-3-基)哌啶-3-胺盐酸盐
[1706]
将n-[(3s)-1-(哒嗪-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(1.33g，1.0eq.)溶于dcm(8.0ml)并加入在1,4-二噁烷中的4m氯化氢(5.9ml，5.0eq.)。将反应混合物在室温搅拌过夜。蒸发溶剂。将残余物与dcm共浓缩数次，得到产物(1.1g，定量产率)，为橙色固体。esi-ms：179.1[m h]
。
[1707]
制备(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(哒嗪-3-基)哌啶-3-胺
[1708]
将(3s)-1-(哒嗪-3-基)哌啶-3-胺盐酸盐(1.1g，1.0eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(0.70ml，1.3eq.)和乙酸钠(0.61g，1.5eq.)在无水甲醇(16.0ml)中的溶液在室温搅拌3天。此后，将混合物冷却至0℃并加入硼氢化钠(0.37g，2.0eq.)。将反应在室温搅拌1.5小时。蒸发溶剂。将残余物溶解在dmc中并用1m naoh洗涤，随后用盐水洗涤。分离的有机层经无水
na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.97g，69％产率)，为黄色油状物。esi-ms：284.1[m h]
。
[1709]
制备1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(哒嗪-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1710]
将1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(1.12g，1.3eq.)和(3s)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]-1-(哒嗪-3-基)哌啶-3-胺(0.97g，1.0eq.)在无水dce(34.0ml)中的混合物在50℃加热过夜。然后将混合物冷却至0℃并加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.9g，4.0eq.)。将所得混合物在室温搅拌1.5小时。将反应混合物用水淬灭并用dcm洗涤。分离的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp,dcm：meoh)纯化，得到产物(0.72g，40％产率)，为黄色固体。esi-ms：517.3[m h]
。
[1711]
制备1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(哒嗪-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1712]
将1-环丙基-6,7-二氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(哒嗪-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.72g，1.0eq.)溶于乙二醇(14.0ml)并将混合物冷却至0℃。然后分批加入氢化钠(60％分散在矿物油中，0.27g，5.0eq.)。将所得混合物在60℃搅拌过夜。将反应混合物用水稀释并萃取至dcm。有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并真空浓缩。粗产物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化并通过fcc(sihp；dcm：meoh)再纯化两次，得到产物(0.13g，15％产率)，为白色固体。esi-ms：559.5[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.43(dd,j＝4.4,1.2hz,1h),8.17(d,j＝5.2hz,1h),7.98(s,1h),7.91(d,j＝11.6hz,1h),7.57(d,j＝7.2hz,1h),7.39
–
7.35(m,1h),7.31
–
7.28(m,1h),7.28
–
7.26(m,1h),7.25
–
7.21(m,1h),4.74
–
4.68(m,1h),4.33
–
4.26(m,3h),4.02
–
3.98(m,2h),3.90
–
3.86(m,2h),3.84
–
3.78(m,2h),3.53
–
3.47(m,1h),3.14
–
3.06(m,1h),2.99
–
2.91(m,1h),2.90
–
2.82(m,1h),2.36(s,3h),2.22
–
2.14(m,1h),1.96
–
1.89(m,1h),1.87
–
1.76(m,1h),1.66
–
1.54(m,1h),1.36
–
1.29(m,2h),0.99
–
0.93(m,2h)。
[1713]
实施例97.3-({[(3s)-1-(6-氯吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1714]
制备n-[(3s)-1-(6-氯吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1715]
将(s)-3-boc-氨基哌啶(1.04g，1.0eq.)、5-溴-2-氯吡啶(1.0g，1.0eq.)和cs2co3(3.4g，2.0eq.)在1,4-二噁烷(20.0ml)中的溶液用氩气吹扫10分钟。然后加入xantphos(0.3g，0.10eq.)和pd2(dba)3(0.24g，0.05eq.)并将反应混合物在120℃搅拌过夜。还同时进行了从0.1g的5-溴-2-氯吡啶开始的两个相同反应。合并所有这些批次的粗反应混合物，用dcm稀释并用水洗涤。水层用dcm洗涤，有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。获得的混合物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化。将产物溶解在etoac中并加入4.0eq清除剂quadrasil mp。将混合物在室温搅拌过夜。之后过滤混合物。真空浓缩滤液，得到产物(1.09g，56％产率)，为黄色固体。esi-ms：312.1[m h]
。
[1716]
制备(3s)-1-(6-氯吡啶-3-基)哌啶-3-胺三氟乙酸盐
[1717]
将三氟乙酸(2.6ml，10.0eq.)添加到n-[(3s)-1-(6-氯吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(1.09g，1.0eq.)在dcm(15.0ml)中的溶液中。将混合物在室温搅拌过夜。在那之后，混合物在用dcm稀释后真空浓缩。产物(1.1g，89％产率)不经进一步纯化用于下一步。esi-ms：212.1[m h]
。
[1718]
制备(3s)-1-(6-氯吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺
[1719]
将(3s)-1-(6-氯吡啶-3-基)哌啶-3-胺三氟乙酸盐(1.1g，1.0eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(0.47ml，1.4eq.)和乙酸钠(0.25g，1.0eq.)溶解于无水meoh(15.0ml)并将混合物在室温搅拌过夜。此后，将混合物冷却至0℃并加入硼氢化钠(0.23g，2.0eq.)。将反应在室温搅拌2小时。此后，将反应真空浓缩并将残余物在dcm和水之间分配。有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥，过滤并浓缩。产物混合物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.82g，81％产率)，为黄色油状物。esi-ms：317.9[m 2]
.
[1720]
制备1-环丙基-6-氟-7-[2-(氧杂环己烷-2-基氧基)乙氧基]-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛
[1721]
在氮气气氛下将7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体9)(1.0g，1.0eq.)、碳酸二钾(1.02g，2.0eq.)、tbubrettphos(0.045g，0.025eq.)和pd(dba)2(0.027g，0.013eq.)溶解于2-甲基四氢呋喃(10.0ml)。后，加入2-(四氢-2h-吡喃-2-基氧基)乙醇(0.60ml，1.2eq.)。将反应混合物在95℃搅拌16小时。反应完成后，向反应混合物中加入10ml水。将其搅拌15分钟并加入10ml 2-methf。然后，将双相混合物倒入分液漏斗中并收集有机相。水相用2-methf(3x10ml)洗涤。合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至其体积的一半。添加20ml的正庚烷并在减压下蒸发2-methf。在蒸发过程中，沉淀出黄色固体。过滤固体并真空干燥，得到产物(0.49g，33％产率)。esi-ms：376.5[m h]
。
[1722]
制备3-({[(3s)-1-(6-氯吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-环丙基-6-氟-7-[2-(氧杂环己烷-2-基氧基)乙氧基]-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1723]
将1-环丙基-6-氟-7-[2-(氧杂环己烷-2-基氧基)乙氧基]-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(0.09g，1.0eq.)和(3s)-1-(6-氯吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(0.097g，1.4eq.)在无水dce(2.0ml)中的混合物在室温搅拌1小时。然后加入stab(0.221g，5.0eq.)并将混合物在室温搅拌过周末。在那之后，混合物用dcm稀释并用水洗涤。用dcm萃取水层。有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥,过滤并蒸发。产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.124g，70％产率)。esi-ms：676.7[m h]
。
[1724]
制备3-({[(3s)-1-(6-氯吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1725]
将三氟乙酸(0.055ml，5.0eq.)加入3-({[(3s)-1-(6-氯吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-环丙基-6-氟-7-[2-(氧杂环己烷-2-基氧基)乙氧基]-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.124g，1.0eq.)在dcm(1.5ml)中的溶液中并将混合物在室温搅拌过夜。之后将混合物真空浓缩。将残余物溶解在水中，用饱和nahco3碱化，并用dcm萃取。有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。产物混合物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并将残余物溶解在meoh中，加入清除剂quadrasip mp并将混合物在室温搅拌48小时。此后滤出混合物并将滤液真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)再纯化，得到产物(0.065g，产率72％)，为无色油状物。esi-ms：592.6[m h]
。使用在et2o中的2m hcl(0.05ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(1.0ml)将化合物转化为hcl盐，得到产物(0.056g，85％产率)，为白色固体。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.39(d,j＝6.0hz,1h),8.08(s,1h),8.03(d,j＝3.1hz,1h),7.90(d,j＝11.4hz,1h),7.81(br s,1h),7.76(br d,1h),7.63(d,j＝7.1hz,1h),7.46(dd,j＝8.9,3.2hz,1h),7.25(d,j＝8.9hz,1h),4.37
–
4.30(m,2h),
4.30
–
4.19(m,2h),4.12
–
3.91(m,5h),3.69
–
3.62(m,1h),3.60
–
3.52(m,1h),3.27
–
3.17(m,1h),3.14
–
3.03(m,1h),2.91
–
2.81(m,1h),2.57(s,3h),2.26
–
2.19(m,1h),2.04
–
1.95(m,1h),1.88
–
1.66(m,2h),1.41
–
1.33(m,2h),1.11
–
1.00(m,2h)。
[1726]
实施例98.1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1727][1728][1729]
制备1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐
[1730]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡嗪-2-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体27)(0.8g，1.0eq.)、(3s)-哌啶-3-醇,hcl(0.36g，1.8eq.)和叔丁醇钠(0.29g，2.1eq.)溶解于无水1,4-二噁烷(15.0ml)并用氩气吹扫15分钟。然后加入binap(0.27g，0.3eq.)和pd2(dba)3(0.13g，0.1eq.)并将反应在95℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土垫过滤。将滤液浓缩，然后将残余物溶解在dcm中并用水洗涤。收集有机层，用无水na2so4干燥，过滤并蒸发。产物通过fcc(ship，dcm：meoh)纯化。残余物溶解于无水dcm并加入4.0eq的清除剂quadrasip mp。将混合物在室温搅拌过夜。之后过滤掉混合物。滤液减压浓缩，产物通过fcc(ship，dcm：meoh)再纯化，得到产物(0.58g，66％产率)，为米色固体。esi-ms：598.5[m h]
。使用在et2o中的2mhcl(0.5ml，1.0eq.至fb)和作为溶剂的dcm(43.0ml)将化合物转化为hcl盐，得到产物(0.59g，产率97％)，为黄色固体。hr-ms：598.3[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.40(d,j＝5.9hz,1h),8.26(d,j＝1.5hz,1h),8.11
–
8.07(m,1h),8.05(s,1h),7.86
–
7.69(m,4h),7.45(d,j＝7.4hz,1h),4.76(d,j＝12.4hz,1h),4.38
–
4.20(m,3h),4.15
–
3.96(m,2h),3.93
–
3.82(m,1h),3.68(dd,j＝11.7,3.9hz,1h),3.59
–
3.44(m,2h),3.29
–
3.06(m,2h),3.06
–
2.94(m,2h),2.86(dd,j＝11.7,8.6hz,1h),2.56(s,3h),2.31
–
2.19(m,1h),2.13
–
2.02(m,1h),2.02
–
1.86(m,3h),1.83
–
1.69(m,1h),1.69
–
1.58(m,1h),1.58
–
1.46(m,1h),1.43
–
1.27(m,2h),1.11
–
0.98(m,2h)。
[1731]
实施例99.n-{5-[(3s)-3-{[(1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-基}乙酰胺
[1732][1733]
制备n-{5-[(3s)-3-{[(1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-基}乙酰胺
[1734]
将tea(0.21ml，6.0eq.)添加到3-({[(3s)-1-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲氧基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-环丙基-6,7-二氟-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐(实施例4)(0.15g，1.0eq.)在dmf(1.0ml)中的混合物中，置于冰浴中，然后滴加ac2o(0.029ml，1.2eq.)。将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩，然后在用正庚烷稀释后再次浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.12g，76％产率)。esi-ms：589.4[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ10.19(s,1h),8.04
–
7.94(m,4h),7.92(s,1h),7.88(d,j＝9.0hz,1h),7.35(dd,j＝9.1,3.1hz,1h),6.95(dd,j＝5.2,1.3hz,1h),6.77(s,1h),3.84
–
3.69(m,6h),3.69
–
3.57(m,2h),3.59
–
3.52(m,1h),3.53
–
3.44(m,1h),2.81
–
2.69(m,2h),2.57(td,j＝12.6,3.3hz,1h),2.03(s,3h),1.98
–
1.88(m,1h),1.84
–
1.69(m,1h),1.59
–
1.42(m,2h),1.29
–
1.14(m,2h),0.97
–
0.81(m,2h)。
[1735]
实施例100.1-环丙基-3-({[(3s)-1-(6-环丙基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1736]
[1737][1738]
制备n-[(3s)-1-(6-环丙基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯
[1739]
将(s)-3-boc-氨基哌啶(0.46g，1.5eq.)添加到5-溴-2-环丙基吡啶(0.3g，1.0eq.)和碳酸铯(0.67g，1.4eq.)在无水1,4-二噁烷(15.0ml)中的混合物中。混合物用氩气吹扫10分钟。随后，加入xantphos(0.053g，0.06eq.)和pd2(dba)3(0.07g，0.05eq.)，封闭容器并将反应混合物在110℃搅拌过周末。此后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并减压浓缩。残余物用dcm稀释并用水、盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。产物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(0.14g，29％产率)，为清澈的油状物。esi-ms：318.5[m h]
。
[1740]
制备(3s)-1-(6-环丙基吡啶-3-基)哌啶-3-胺
[1741]
将三氟乙酸(0.33ml，10.0eq.)加入n-[(3s)-1-(6-环丙基吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯(0.14g，1.0eq.)在dcm(5.0ml)中的溶液中并将反应在室温搅拌3小时。此后，将混合物真空浓缩。残余物用dcm稀释并用5m naoh、盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。粗产物(0.093g，97％产率)不经任何纯化用于下一步。esi-ms：218.0[m h]
。
[1742]
制备(3s)-1-(6-环丙基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺
[1743]
将(3s)-1-(6-环丙基吡啶-3-基)哌啶-3-胺(0.16g，1.0eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(0.08ml，1.0eq.)和乙酸钠(0.06g，1.0eq.)溶解于无水甲醇(3.0ml)并将混合物在室温搅拌过夜。此后，将混合物冷却至0℃并加入硼氢化钠(0.054g，2.0eq.)。将反应在室温搅拌过夜。然后将反应混合物真空浓缩并用dcm和naoh水溶液(ph调节至11)萃取残余物。有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并蒸发。产物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.17g，72％产率)，为黄色油状物。esi-ms：323.4[m h]
。
[1744]
制备1-环丙基-3-({[(3s)-1-(6-环丙基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-6,7-二氟-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1745]
将1-环丙基-6,7-二氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体4)(0.13g，1.0eq.)
和(3s)-1-(6-环丙基吡啶-3-基)-n-[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]哌啶-3-胺(0.16g，1.0eq.)在无水dce(6.0ml)中的溶液在60℃搅拌1小时。然后将溶液冷却至室温并加入stab(0.54g，5.0eq.)。继续在60℃加热过夜。将反应混合物用dcm稀释，用水、盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.13g，44％产率)，为清澈的油状物。esi-ms：556.5[m h]
。
[1746]
制备1-环丙基-3-({[(3s)-1-(6-环丙基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1747]
将1-环丙基-3-({[(3s)-1-(6-环丙基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-6,7-二氟-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.13g，1.0eq.)、氢化钠(60％分散在矿物油中，0.027g，5.0eq.)和乙二醇(2.0ml)的混合物在60℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用水稀释，使用5m naoh碱化并萃取至dcm。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.08g，59％产率)，为白色固体。esi-ms：598.6[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.0hz,1h),8.09(d,j＝2.8hz,1h),7.84(s,1h),7.79(d,j＝11.7hz,1h),7.51(d,j＝7.2hz,1h),7.23
–
7.14(m,3h),7.05(d,j＝8.5hz,1h),5.03(t,j＝5.4hz,1h),4.24(t,j＝4.8hz,2h),3.85
–
3.69(m,5h),3.65
–
3.47(m,4h),2.79
–
2.69(m,2h),2.62
–
2.54(m,1h),2.37(s,3h),2.00
–
1.90(m,2h),1.79
–
1.71(m,1h),1.58
–
1.41(m,2h),1.28
–
1.18(m,2h),0.94
–
0.71(m,6h)。
[1748]
实施例101.3-({[(3s)-1-[6-(2-羟基乙氧基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1749][1750]
制备2-[(5-溴吡啶-2-基)氧基]乙烷-1-醇
[1751]
将2,5-二溴吡啶(1.0g，1.0eq.)、乙烷-1,2-二醇(1.2ml，5.0eq.)和nah(60％分散在矿物油中，0.20g，1.2eq.)的悬浮液在室温在无水dmf(12.0ml)中搅拌1小时，然后将反应混合物在60℃搅拌过夜。然后真空蒸发溶剂，粗产物通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化得到产物(0.68g，74％产率)，为无色油状物。esi-ms：219.9[m 2]
.
[1752]
制备乙酸(5-溴吡啶-2-基)甲基酯
[1753]
将ac2o(0.35ml，1.2eq.)加入2-[(5-溴吡啶-2-基)氧基]乙-1-醇(0.68g，1.0eq.)和tea(1.7ml，4.0eq.)在无水dcm(15.0ml)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌3小时，然后将粗混合物真空浓缩并通过fcc(sihp；hex：etoac)纯化，得到产物(0.65g，76％产率)，为无色油状物。esi-ms：262.1[m 2h]
.
[1754]
制备乙酸2-({5-[(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-基}氧基)乙基酯
[1755]
将2-[(5-溴吡啶-2-基)氧基]乙基乙酸酯(0.2g，1.0eq.),1-甲基-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(中间体5)(0.29g，1.1eq.)和cs2co3(0.48g，2.0eq.)在1,4-二噁烷(5.0ml)中的悬浮液用氩气吹扫10分钟。然后加入pd2(dba)3(0.033g，0.05eq.)和xantphos(0.018g，0.06eq.)并将反应混合物用氩气吹扫几分钟。将反应混合物在120℃搅拌24小时，然后通过硅藻土垫过滤，用dcm洗涤并真空浓缩。将残余物与在dcm中的清除剂quadrapure mpa一起搅拌4小时，过滤，真空蒸发并通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.138g，33％产率)，为黄色固体。esi-ms：556.7[m h]
。
[1756]
制备3-({[(3s)-1-[6-(2-羟基乙氧基)吡啶-3-基]哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1-甲基-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1757]
2-({5-[(3s)-3-{[(1-甲基-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-基}氧基)乙基乙酸酯(0.138g，1.0eq.)悬浮于水(1.0ml)和甲醇(5.0ml)中。然后加入氢氧化锂一水合物(0.031g，3.0eq.)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。将粗混合物真空浓缩。将残余物在fcc(c18hp；h2o：mecn)上纯化，得到产物(0.096g，76％产率)，为白色固体。esi-ms：514.4[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)8.28(d,j＝5.0,1h),8.19(dd,j＝8.1,1.6hz,1h),8.01(s,1h),7.76(d,j＝3.0hz,1h),7.75
–
7.68(m,1h),7.62(d,j＝8.4hz,1h),7.42(dd,j＝9.0,3.1hz,1h),7.40
–
7.34(m,1h),7.27
–
7.20(m,2h),6.67(d,j＝9.0hz,1h),4.78(s,1h),4.21
–
4.11(m,2h),3.85(s,3h),3.80
–
3.54(m,7h),3.43(d,j＝11.5hz,1h),2.81
–
2.61(m,2h),2.37(s,3h),2.03
–
1.91(m,1h),1.83
–
1.70(m,1h),1.57
–
1.37(m,2h)。
[1758]
实施例102.5-[(3s)-3-{[(7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-甲酸
[1759]
[1760][1761]
制备5-[(3s)-3-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-甲酸甲酯
[1762]
将(s)-3-boc-氨基哌啶(0.48g，1.3eq.)、5-溴吡啶-2-甲酸甲酯(0.03g，1.0eq.)和碳酸铯(1.2g，2.0eq.)悬浮于无水1,4-二噁烷(5.0ml)。混合物用氩气吹扫10分钟。然后加入pd2(dba)3(0.085g，0.05eq.)和xantphos(0.064g，0.06eq.)。将反应混合物用氩气再吹扫一次10分钟并将反应在115℃加热过夜。混合物通过硅藻土垫过滤，真空浓缩滤液。添加dcm并用水和盐水洗涤。有机层经无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩。粗品通过fcc(sihp,dcm：meoh)纯化，得到产物(0.206g，39％产率)。esi-ms：336.5[m h]
。
[1763]
制备5-[(3s)-3-氨基哌啶-1-基]吡啶-2-甲酸甲酯
[1764]
将于1,4-二噁烷中的4.0m hcl(0.81ml，8.0eq.)添加到5-[(3s)-3-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-甲酸甲酯(0.157g，1.0eq.)在1,4-二噁烷(4.0ml)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌过周末。减压蒸发溶剂。随后，粗物质在naoh水溶液和dcm之间分配。有机层经无水na2so4干燥，过滤并浓缩至干，得到产物(0.085g，85％产率)。esi-ms：236.2[m h]
。
[1765]
制备5-[(3s)-3-{[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-甲酸甲酯
[1766]
将5-[(3s)-3-氨基哌啶-1-基]吡啶-2-甲酸甲酯(0.080g，1.0eq.)、2-甲基吡啶-4-甲醛(0.038ml，1.1eq.)和乙酸钠(0.027g，1.0eq.)溶解于无水甲醇(5.0ml)并将反应混合物在室温搅拌过夜。然后将混合物冷却至0℃并分批加入硼氢化钠(0.014g，1.1eq.)并将反应混合物在室温搅拌1小时。蒸发甲醇。产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.046g，38％产率)。esi-ms：341.3[m h]
。
[1767]
制备5-[(3s)-3-{[(7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-甲酸甲酯
[1768]
将7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-甲醛(中间体9)(0.044g，1.1eq.)和5-[(3s)-3-{[(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-甲酸甲酯
(0.046g，1.0eq.)溶解于无水dce(3.0ml)。所得混合物在室温搅拌过夜。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.074g，2.8eq.)并将混合物在室温再搅拌24小时。反应混合物用dcm稀释，随后用饱和碳酸氢钠水溶液、水、盐水洗涤，经无水mgso4干燥并真空浓缩。残余物通过fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到产物(0.026g，36％产率)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.34(d,j＝3.0hz,1h),8.27(d,j＝5.0hz,1h),8.15(d,j＝6.2hz,1h),7.97(d,j＝9.5hz,1h),7.91(s,1h),7.79(d,j＝8.9hz,1h),7.29(dd,j＝9.0,3.0hz,1h),7.21(s,1h),7.16(d,j＝5.4hz,1h),4.10(d,j＝12.8hz,1h),3.91(d,j＝13.1hz,1h),3.79(s,2h),3.77(d,j＝2.8hz,2h),3.65(s,2h),3.56-3.50(m,1h),3.03(d,j＝12.0hz,1h),2.86(t,j＝12.4hz,1h),2.36(s,3h),1.98(d,j＝12.3hz,1h),1.78(d,j＝13.3hz,1h),1.67(q,j＝11.3hz,2h),1.45(d,j＝13.1hz,2h),1.25
–
1.19(m,2h),0.95-0.85(qm,j 2h)。
[1769]
制备5-[(3s)-3-{[(7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-甲酸
[1770]
将一水氢氧化锂(0.003g，4.5eq.)加入5-[(3s)-3-{[(7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-甲酸甲酯(0.018g，1.0eq.)在thf(3.0ml)和水(1.0ml)中的溶液中。所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用dcm稀释并用浓hcl水溶液洗涤。粗品通过fcc(c18hp,h2o：mecn)纯化，得到产物(0.005g，31％产率)。esi-ms：576.6[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.27(s,1h),8.16(t,j＝6.3hz,2h),8.01(d,j＝9.5hz,1h),7.97(s,1h),7.94(d,j＝8.9hz,1h),7.44(dd,j＝8.7,2.4hz,1h),7.26(s,1h),7.22(d,j＝5.3hz,1h),4.16(d,j＝11.9hz,1h),3.92(s,1h),3.86(s,2h),3.79(s,2h),3.48(quint,j＝7.3,3.4hz,1h),3.10(t,j＝12,1hz,1h),2.97
–
2.87(m,2h),2.35(s,3h),2.15(d,j＝11.8hz,1h),1.93(d,j＝12.8hz,1h),1.82
–
1.71(m,1h),1.70
–
1.61(m,1h),1.33
–
1.27(m,2h),0.94(dt,j＝6.2,3.4hz,2h)。
[1771]
实施例103.5-[(3s)-3-{[(7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-甲酰胺
[1772][1773]
制备5-[(3s)-3-{[(7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-甲酰胺
[1774]
将5-[(3s)-3-{[(7-氯-1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢喹啉-3-基)甲基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}哌啶-1-基]吡啶-2-甲酸甲酯(0.029g，1.0eq.)在meoh中的7.0n氨溶液(5.0ml)中的混合物在室温搅拌过夜。然后将混合物加热至50℃持续1.5小时。蒸发溶剂，粗物质通过fcc(c18hp，h2o：mecn)纯化，得到产物(0.021g，84％产率)。esi-ms：575.7[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.26(d,j＝2.9hz,1h),8.17(dd,j＝8.8,5.7hz,
6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)氨基甲酸酯
[1781][1782]
制备{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)氨基甲酸酯
[1783]
将7-(2-氨基乙氧基)-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(实施例10)(0.018g，1.2eq.)、碳酸{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基
·
4-硝基苯基酯(0.02g，1.0eq.)和tea(0.007ml，1.9eq.)在dcm(1.0ml)中的混合物在60℃搅拌过夜。随后将混合物真空浓缩并将残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并冷冻干燥，得到产物(0.018g，54％产率)，为灰白色固体。esi-ms：1205.9[m h]
。hr-ms：1205.6[m h]
。
[1784]
实施例11a.2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]-n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)-n-甲基乙酰胺
[1785][1786]
制备n-[2-(2-{[(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)(甲基)氨基甲酰基]甲氧基}乙氧基)乙基]氨基甲酸叔丁酯
[1787]
将hatu(0.11g，1.3eq.)、dipea(0.11ml，3.0eq.)、1-环丙基-6-氟-7-[2-(甲基氨基)乙氧基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(实施例11)(0.13g，1.0eq.)、2-[2-(2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}乙氧基)乙氧基]乙酸(0.062g，1.1eq.)在无水dmf(3.0ml)中的混合物在室温搅拌过夜。然后真空蒸发反应混合物。将残余物重新溶解在dcm中并用水洗涤。有机层用1m naoh、盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过fcc(nh2柱,dcm：meoh)再纯化，得到产物(0.11g，57％产率)，为白色固体。esi-ms：830.8[m h]
。
[1788]
制备2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]-n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)-n-甲基乙酰胺
[1789]
将n-[2-(2-{[(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)(甲基)氨基甲酰基]甲氧基}乙氧基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(0.078g，1.0eq.)溶于二氯甲烷(1.0ml)并加入在1,4-二噁烷中的4m氯化氢(0.32ml，15.0eq.)。将反应混合物在室温搅拌过夜。蒸发反应混合物。将残余物重新溶解在水中并用2m naoh碱化。在用dcm洗涤该水层
后，有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并真空浓缩。粗产物通过快速fcc(nh2柱，dcm：meoh)纯化，得到产物(0.026g，39％产率)，为白色固体。esi-ms：730.7[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.0hz,1h),8.13(d,j＝2.9hz,1h),7.87
–
7.84(m,1h),7.81(dd,j＝11.5,5.5hz,1h),7.51(dd,j＝12.7,7.1hz,1h),7.25
–
7.20(m,2h),7.17(d,j＝5.1hz,1h),7.03(d,j＝8.5hz,1h),4.39(t,j＝5.0hz,1h),4.35(t,j＝5.7hz,1h),4.31(s,1h),4.18(s,1h),3.83
–
3.71(m,5h),3.62(s,2h),3.60
–
3.48(m,6h),3.38
–
3.35(m,2h),3.06(s,2h),2.92(s,1h),2.80
–
2.72(m,2h),2.65
–
2.60(m,2h),2.60
–
2.55(m,1h),2.54
–
2.52(m,1h),2.38(s,3h),2.33(s,3h),2.01
–
1.94(m,1h),1.81
–
1.72(m,1h),1.59
–
1.43(m,3h),1.28
–
1.22(m,2h),0.95
–
0.83(m,2h)。
[1790]
实施例11b.3-{2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基}-n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)-n-甲基丙酰胺
[1791][1792][1793]
制备n-{2-[2-(2-{2-[(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)(甲基)氨基甲酰基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙基}氨基甲酸叔丁酯
[1794]
将hatu(0.08g，1.3eq.)、dipea(0.09ml，3.0eq.)、1-环丙基-6-氟-7-[2-(甲基氨基)乙氧基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(实施例11)(0.10g，1.0eq.)、3-{2-[2-(2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酸(0.06g，1.1eq.)在无水dmf(3.0ml))中的混合物在
室温搅拌过夜。然后真空蒸发反应混合物。将残余物重新溶解在dcm中，并用水萃取。有机层用1m naoh、盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。粗混合物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过fcc(nh2柱，dcm：meoh)再纯化，得到产物(0.10g，67％产率)，为白色固体。esi-ms：888.9[m h]
。
[1795]
制备3-{2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基}-n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)-n-甲基丙酰胺
[1796]
将n-{2-[2-(2-{2-[(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)(甲基)氨基甲酰基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]乙基}氨基甲酸叔丁酯(0.10g，1.0eq.)溶于dcm(1.5ml)并加入在1,4-二噁烷中的4m氯化氢(0.41ml，15.0eq.)。将反应混合物在室温搅拌过夜。首先浓缩反应混合物，然后在用dcm稀释后再次浓缩(3个循环)。将粗品溶解在水中并用2m naoh碱化。用dcm洗涤，然后有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并真空浓缩，得到产物(0.05g，59％产率)，为白色固体。esi-ms：788.7[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.1hz,1h),8.13(d,j＝2.8hz,1h),7.87
–
7.84(m,1h),7.81(dd,j＝11.5,3.1hz,1h),7.52(dd,j＝11.8,7.3hz,1h),7.24
–
7.20(m,2h),7.17(d,j＝5.1hz,1h),7.03(d,j＝8.6hz,1h),4.38(t,j＝5.0hz,1h),4.32(t,j＝5.6hz,1h),3.86
–
3.71(m,5h),3.67
–
3.56(m,5h),3.52
–
3.45(m,9h),3.38
–
3.36(m,2h),3.12(s,2h),2.92(s,1h),2.80
–
2.70(m,3h),2.69
–
2.64(m,2h),2.62
–
2.55(m,2h),2.55
–
2.52(m,1h),2.38(s,3h),2.33(s,3h),2.00
–
1.93(m,1h),1.80
–
1.72(m,1h),1.59
–
1.44(m,2h),1.30
–
1.19(m,3h),0.93
–
0.83(m,2h)。
[1797]
实施例11c.7-[(1-氨基-15-甲基-3,6,9,12-四氧杂-15-氮杂十七烷-17-基)氧基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1798]
[1799][1800]
制备n-(17-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}-15-甲基-3,6,9,12-四氧杂-15-氮杂十七烷-1-基)氨基甲酸叔丁酯
[1801]
将dipea(0.04ml，2.0eq.)、1-环丙基-6-氟-7-[2-(甲基氨基)乙氧基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(实施例11)(0.07g，1.0eq.)、n-(14-溴-3,6,9,12-四氧杂十四烷-1-基)氨基甲酸叔丁酯(0.05g，1.1eq.)在无水dmf(1.0ml)中的混合物在室温搅拌过夜，然后在90℃加热2小时。真空浓缩反应混合物。将残余物重新溶解在dcm和水中并将产物萃取到dcm中。有机层用1m naoh、盐水洗涤，经na2so4干燥并蒸发。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化并通过fcc(nh2柱，dcm：meoh)再纯化，得到产物(0.035g，33％产率)，为无色油状物。esi-ms：904.8[m h]
。
[1802]
制备7-[(1-氨基-15-甲基-3,6,9,12-四氧杂-15-氮杂十七烷-17-基)氧基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮
[1803]
将n-(17-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}-15-甲基-3,6,9,12-四氧杂-15-氮杂十七烷-1-基)氨基甲酸叔丁酯(0.03g，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2.0ml)并加入在1,4-二噁烷中的4m氯化氢(0.12ml，15.0eq.)。将反应混合物在室温搅拌2小时。蒸发反应混合物。将粗品溶解在水中并用2m naoh碱化。该水层用dcm洗涤，然后有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并真空蒸发，得到产物(0.03g，93％产率)，为无色油状物。esi-ms：804.7[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.28(d,j＝5.0hz,1h),8.13(d,j＝3.0hz,1h),7.85(s,1h),7.79(d,j＝11.6hz,1h),7.51(d,j＝7.4hz,1h),7.24
–
7.20(m,2h),7.19
–
7.15(m,1h),
7.02(d,j＝8.5hz,1h),4.30(t,j＝5.7hz,2h),3.82
–
3.66(m,5h),3.63
–
3.56(m,4h),3.55
–
3.46(m,16h),3.40(t,j＝5.6hz,3h),2.87(t,j＝5.7hz,2h),2.80
–
2.70(m,4h),2.65
–
2.55(m,4h),2.54
–
2.52(m,2h),2.38(s,3h),2.35
–
2.30(m,7h),2.00
–
1.94(m,1h),1.80
–
1.73(m,1h),1.57
–
1.46(m,2h),1.27
–
1.21(m,3h),0.94
–
0.85(m,2h)。
[1804]
实施例11d.1-氨基-n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)-n-甲基-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十四烷-24-酰胺
[1805][1806]
制备n-{23-[(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)(甲基)氨基甲酰基]-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十三烷-1-基}氨基甲酸叔丁酯
[1807]
将hatu(0.057g，1.3eq.)、dipea(0.061ml，3.0eq.)、1-环丙基-6-氟-7-[2-(甲基氨基)乙氧基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.07g，1.0eq.)和1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十四烷-24-酸(0.064g，1.1eq.)在无水dmf(2.0ml)中混合。将反应混合物在室温搅拌过夜。减压浓缩溶剂。将残余物溶于dcm并用水、1m naoh、盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗品通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，再纯化fcc(nh2柱，dcm：meoh)纯化，得到产物(0.075g，60％产率)，为白色固体。esi-ms：1064.8[m h]
。
[1808]
制备1-氨基-n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)-n-甲基-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十四烷-24-酰胺
[1809]
将n-{23-[(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)(甲基)氨
基甲酰基]-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十三烷-1-基}氨基甲酸叔丁酯(0.075g，1.0eq.)溶于dcm(1.0ml)。加入于1,4-二噁烷中的4m hcl(0.26ml，15.0eq.)并将反应混合物在室温搅拌过夜。真空蒸发挥发物。将残余物溶解在水中并用2m naoh碱化。有机物用dcm洗涤，有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过fcc(nh2柱，dcm：meoh)纯化两次，得到产物(0.032g，47％产率)，为黄色油状物。esi-ms：964.6[m h]
。1h nmr(400mhz,乙腈-d3)δ8.30(d,j＝5.1hz,1h),8.16(d,j＝3.0hz,1h),7.89(dd,j＝11.7,3.2hz,1h),7.86
–
7.85(m,1h),7.50(dd,j＝19.9,7.2hz,1h),7.25
–
7.23(m,1h),7.22
–
7.16(m,2h),7.02(d,j＝8.5hz,1h),4.38
–
4.32(m,2h),3.88
–
3.80(m,3h),3.80
–
3.78(m,2h),3.76
–
3.70(m,2h),3.70
–
3.67(m,2h),3.61
–
3.50(m,25h),3.44
–
3.37(m,3h),3.16(s,2h),2.99(s,1h),2.86
–
2.79(m,2h),2.78
–
2.75(m,1h),2.75
–
2.71(m,2h),2.67
–
2.59(m,3h),2.42(s,3h),2.38(s,3h),2.10
–
2.04(m,2h),1.87
–
1.80(m,1h),1.63
–
1.55(m,2h),1.32
–
1.25(m,2h),0.96
–
0.88(m,2h)。
[1810]
实施例11e.1-[(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)(甲基)氨基甲酰基]-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十四烷-24-酸
[1811][1812]
制备1-[(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)(甲基)氨基甲酰基]-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十四烷-24-酸
[1813]
将hatu(0.057g，1.3eq.)、dipea(0.061ml，3.0eq.)、1-环丙基-6-氟-7-[2-(甲基氨基)乙氧基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(0.07g，1.0eq.)和4,7,10,13,16,19,22-七氧杂二十五烷二酸(0.05g，1.0eq.)在无水dmf(2.0ml)中混合物。将反应混合物在室温搅拌过夜。减压浓缩溶剂。将残余物溶于dcm并用水、1m naoh、盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过制备型hplc(h2o：mecn：fa)纯化，得到产物，为甲酸盐。将获得的样品溶解在水中，用1m naoh碱化并萃取至dcm。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到
产物(0.05g，41％产率)，为黄色油状物。esi-ms：993.7[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.18(t,j＝4.7hz,1h),8.08(t,j＝3.0hz,1h),7.96
–
7.88(m,2h),7.58
–
7.49(m,1h),7.34
–
7.29(m,1h),7.26
–
7.23(m,1h),7.22
–
7.18(m,1h),7.10(dd,j＝8.5,4.5hz,1h),4.46
–
4.37(m,2h),4.00
–
3.94(m,1h),3.92
–
3.71(m,10h),3.67
–
3.54(m,19h),3.52
–
3.46(m,1h),3.36
–
3.33(m,4h),3.28
–
3.24(m,2h),3.09
–
3.04(m,1h),3.02
–
2.92(m,2h),2.90
–
2.81(m,2h),2.75
–
2.66(m,2h),2.61
–
2.46(m,2h),2.43
–
2.39(m,3h),2.39
–
2.35(m,3h),2.17
–
2.09(m,1h),1.96
–
1.89(m,1h),1.73
–
1.61(m,2h),1.37
–
1.29(m,3h),0.98
–
0.91(m,2h)。
[1814]
实施例11f.[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)-n-甲基氨基甲酸酯
[1815][1816]
制备[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)-n-甲基氨基甲酸酯
[1817]
将1-环丙基-6-氟-7-[2-(甲基氨基)乙氧基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(实施例11)(0.03g，1.0eq.)、碳酸4-硝基苯基
·
[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基酯(中间体29)(0.03g，1.0eq.)和tea(0.014ml，2.0eq.)溶解于无水dcm(1.0ml)并将反应在60℃搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩。将残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化两次以获得产物(0.024g，46％产率)，为米色固体。esi-ms：1020.9[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.17(d,j＝5.2hz,1h),8.10(d,j＝2.9hz,1h),7.97
–
7.88(m,2h),7.59
–
7.53(m,1h),7.51
–
7.40(m,2h),7.38
–
7.30(m,2h),7.26(s,1h),7.25
–
7.21(m,2h),7.13(d,j＝8.6hz,1h),5.12
–
5.01(m,2h),4.43
–
4.34(m,2h),4.17(d,j＝2.4hz,2h),3.92
–
3.77(m,9h),3.66
–
3.59(m,10h),3.58
–
3.54(m,5h),3.52
–
3.35(m,2h),3.16
–
3.08(m,3h),3.01
–
2.94(m,1h),2.90
–
2.86(m,1h),2.85(t,j＝2.4hz,1h),2.75
–
2.67(m,1h),2.65
–
2.57(m,2h),2.42(s,
3h),2.37(s,3h),2.18
–
2.12(m,1h),1.97
–
1.91(m,1h),1.73
–
1.63(m,2h),1.36
–
1.30(m,2h),1.29
–
1.23(m,1h),0.96
–
0.86(m,2h)。
[1818]
实施例11g.3-[2-(2-{2-[(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)(甲基)氨基甲酰基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]丙酸甲酸盐
[1819][1820]
制备3-[2-(2-{2-[(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)(甲基)氨基甲酰基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]丙酸甲酸盐
[1821]
将hatu(0.057g，1.3eq.)、dipea(0.061ml，3.0eq.)、1-环丙基-6-氟-7-[2-(甲基氨基)乙氧基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(实施例11)(0.07g，1.0eq.)和3-{2-[2-(2-羧基乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酸(0.03g，1.0eq.)在无水dmf(1.5ml)中混合。将反应混合物在室温搅拌过夜。减压浓缩溶剂。将残余物溶于dcm并用水、盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过制备型hplc(h2o：mecn：fa)纯化，得到为甲酸盐的产物(0.045g，45％产率)，为黄色油状物。esi-ms：817.6[m h]
。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.71(s,1h),8.30
–
8.25(m,1h),8.14(s,1h),8.14
–
8.11(m,1h),7.86
–
7.76(m,2h),7.55
–
7.46(m,1h),7.25
–
7.18(m,2h),7.19
–
7.14(m,1h),7.05
–
6.99(m,1h),4.40
–
4.34(m,1h),4.34
–
4.28(m,1h),3.86
–
3.70(m,5h),3.66
–
3.55(m,6h),3.52
–
3.42(m,6h),3.13
–
3.08(m,2h),2.92
–
2.89(m,1h),2.80
–
2.66(m,4h),2.63
–
2.52(m,6h),2.45
–
2.41(m,1h),2.39
–
2.35(m,3h),2.35
–
2.30(m,3h),2.01
–
1.93(m,1h),1.80
–
1.71(m,1h),1.58
–
1.43(m,2h),1.28
–
1.21(m,2h),0.94
–
0.82(m,2h)。
[1822]
实施例11h.{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙
酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)-n-甲基氨基甲酸酯
[1823][1824][1825]
制备{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基n-(2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基)-n-甲基氨基甲酸酯
[1826]
将1-环丙基-6-氟-7-[2-(甲基氨基)乙氧基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(实施例11)(0.019g，1.2eq.)、碳酸{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基
·
4-硝基苯基酯(0.02g，1.0eq.)、三乙胺(0.01ml，2.8eq.)和dcm(1.0ml)的混合物在60℃搅拌过夜，然后在室温搅拌两天。随后，将混合物真空浓缩并通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化残余物，得到产物(0.017g，54％产率)，为白色固体。esi-ms：1220.3[m h]
。
[1827]
实施例12a.{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基n-[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]氨基甲酸酯
[1828][1829]
制备{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基n-[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]氨基甲酸酯
[1830]
将碳酸{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基
·
4-硝基苯基酯(0.02g，1.0eq.)和7-[(3r)-3-氨基吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(实施例12)(0.019g，1.2eq.)悬浮于dcm(1.0ml)。随后，加入tea(0.007ml，1.9eq.)并将反应混合物在60℃搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩并将残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化两次，得到产物(0.016g，46％产率)，为黄色固体。esi-ms：1230.9[m h]
。hr-ms：1230.7[m h]
。
[1831]
实施例15a.1-氨基-n-{[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]甲基}-3,6,9,12-四氧杂十五烷-15-酰胺
[1832][1833]
制备n-[14-({[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]甲基}氨基甲酰基)-3,6,9,12-四氧杂十四烷-1-基]氨基甲酸叔丁酯
[1834]
将1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,6,9,12-四氧杂十五烷-15-酸(0.207g，1.5eq)和hatu(0.172g，1.2eq.)溶解于干燥dmf(5.0ml)，然后加入7-[(3r)-3-(氨基甲基)吡咯烷-1-基]-1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮(实施例15)(0.230g，1.0eq.)和tea(0.160ml，3.0eq.)，将反应在室温搅拌24小时。将粗品蒸发并萃取(dcm/naoh aq)。合并有机层，经na2so4干燥,过滤并蒸发。产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化。得到标题化合物(0.30g，产率84％)，为棕色油状物.esi-ms：957.9[m h]
[1835]
制备1-氨基-n-{[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]甲基}-3,6,9,12-四氧杂十五烷-15-酰胺
[1836]
将n-[14-({[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]甲基}氨基甲酰基)-3,6,9,12-四氧杂十四烷-1-基]氨基甲酸叔丁酯(0.300g，1.0eq.)溶于1,4-二噁烷(8.0ml)并加入在1,4-二噁烷中的4n hcl(1.18ml，15.0eq.)。将反应混合物在60℃搅拌1小时，反应完成后蒸发溶剂并萃取粗品(dcm/naoh(aq))。合并有机层，用mgso4干燥并蒸发。残余物通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)纯化，得到标题化合物(0.190g，产率71％)，为米色固体，esi-ms：858.6[m h]
。1h nmr(400mhz,吡啶-d5)δ8.83(t,j＝5.9hz,1h),8.59(dd,j＝10.4,3.9hz,2h),8.41(d,j＝14.6hz,1h),7.87(s,1h),7.35(d,j＝5.6hz,2h),7.29(dd,j＝8.5,3.1hz,1h),7.05(d,j＝8.5hz,1h),6.80(d,j＝7.6hz,1h),4.07(d,j＝21.2hz,3h),3.92(q,j＝8.3,7.2hz,2h),3.85(d,j＝4.2hz,2h),3.76
–
3.34(m,21h),3.24
(td,j＝6.8,3.6hz,1h),3.19
–
3.03(m,1h),2.99(t,j＝5.4hz,2h),2.86(t,j＝11.2hz,1h),2.72(t,j＝6.2hz,2h),2.67
–
2.58(m,1h),2.57(s,3h),2.51(s,4h),2.16
–
1.91(m,2h),1.80
–
1.62(m,2h),1.52(q,j＝11.9hz,2h),1.09(q,j＝6.3,5.6hz,2h),0.90(p,j＝4.8hz,2h)。
[1837]
实施例19a.{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基n-{1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-4-基}-n-甲基氨基甲酸酯
[1838][1839][1840]
制备{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基n-{1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-4-基}-n-甲基氨基甲酸酯
[1841]
将碳酸{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基
·
4-硝基苯基酯(0.02g，1.0eq.)和1-环丙基-6-氟-7-[4-(甲基氨基)哌啶-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐(实施例19)(0.016g，1.0eq.)悬浮于dcm(1.0ml)。随后，加入tea(0.007ml，2.0eq.)并将反应混合物
基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-3-基n-{[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基}氨基甲酸酯
[1847][1848]
制备4-(氨基甲基)苯胺盐酸盐
[1849]
将1-(4-硝基苯基)甲胺盐酸盐(1.5g，1.0eq.)在etoh(30.0ml)中的溶液用氩气吹扫并加入pd/c(0.17g，0.2eq.)。反应在氢气气氛下在室温进行过夜。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并将滤液浓缩，得到产物(1.15g，82％产率)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.22(s,2h),7.12(d,j＝8.4hz,2h),6.56(d,j＝8.5hz,2h),5.33(s,2h),3.78(s,2h)。
[1850]
制备n-[4-(氨基甲基)苯基]氨基甲酸叔丁酯
[1851]
将一缩二碳酸二叔丁酯(1.5g，1.1eq.)在1,4-二噁烷(55.0ml)中的溶液加入4-(氨基甲基)苯胺盐酸盐(1.15g，1.0eq.)在10％乙酸水溶液(55.0ml)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌过夜。加入水并用et2o洗涤混合物。水相用2n naoh碱化至ph 14并用et2o萃取。有机层用水洗涤，经na2so4干燥并真空浓缩。粗产物通过fcc(nh2，dcm：meoh)纯化，得到产物(0.48g，33％产率)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.37(d,j＝8.4hz,2h),7.25(d,j＝8.5hz,2h),3.73(s,2h),3.37(s,1h),1.53(s,9h)。
[1852]
制备(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-3-基n-[(4-{[(叔丁
氧基)羰基]氨基}苯基)甲基]氨基甲酸酯
[1853]
将cdi(0.027g，1.1eq.)、1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-羟基哌啶-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐(实施例31)(0.1g，1.0eq.)在dmf(2.0ml)中的溶液在70℃搅拌1小时。然后加入n-[4-(氨基甲基)苯基]氨基甲酸叔丁酯(0.035g，1.0eq.)并在室温搅拌过夜。减压蒸发溶剂。随后，残余物在dcm和水之间分配。有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化两次，得到产物(0.041g，26％产率)。esi-ms：859.5[m h]
。
[1854]
制备(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-3-基n-[(4-氨基苯基)甲基]氨基甲酸酯盐酸盐
[1855]
将(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-3-基n-[(4-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}苯基)甲基]氨基甲酸酯(0.04g，1.0eq.)溶于dcm(1.0ml)并加入在1,4-二噁烷中的4m氯化氢(0.29ml，30.0eq.)。将反应混合物在室温搅拌2小时。减压蒸发溶剂。残余物用dcm稀释并真空浓缩(3个循环)，得到产物(0.035g，定量)。esi-ms：759.6[m h]
。
[1856]
制备(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-3-基n-{[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基}氨基甲酸酯
[1857]
将hatu(0.018g，1.3eq.)、dipea(0.019ml，3.0eq.),4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酸(0.011g，1.0eq.)、(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]哌啶-3-基n-[(4-氨基苯基)甲基]氨基甲酸酯盐酸盐(0.031g，1.0eq.)在无水dmf(1.0ml)中的混合物在室温搅拌过夜。蒸发溶剂。随后，残余物在dcm和水之间分配。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.02g，51％产率)，为白色固体。esi-ms：1045.9[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.17(d,j＝5.1hz,1h),8.10
–
8.07(m,1h),7.92
–
7.88(m,1h),7.82(d,j＝13.7hz,1h),7.55
–
7.49(m,2h),7.46
–
7.39(m,1h),7.36(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.28
–
7.20(m,4h),7.12(d,j＝8.6hz,1h),4.27
–
4.23(m,1h),4.17(d,j＝2.4hz,2h),3.92
–
3.76(m,8h),3.68
–
3.53(m,20h),3.48
–
3.41(m,2h),3.31
–
3.21(m,2h),3.02
–
2.92(m,1h),2.90
–
2.83(m,2h),2.76
–
2.66(m,1h),2.66
–
2.55(m,2h),2.42(s,3h),2.35(s,3h),2.18
–
2.10(m,1h),2.10
–
1.90(m,3h),1.82
–
1.59(m,4h),1.36
–
1.24(m,3h),0.96
–
0.84(m,2h)。
[1858]
实施例47a.2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酸酯
[1859]
[1860][1861]
制备2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酸酯
[1862]
将dmap(0.002g，0.13eq.)、dcc(0.03g，1.1eq.)和4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酸(0.04g，1.0eq.)在无水dcm(2.0ml)中的溶液在室温搅拌。然后，加入在dmf(1.0ml)中的1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐(实施例47)(0.088g，1.1eq.)并将反应混合物在室温搅拌过夜并在50℃搅拌4小时。此后，将混合物真空浓缩。将残余物重新溶解在水中，用dcm充分洗涤的。有机层经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化两次，得到产物(0.02g，17％产率)，为黄色油状物。esi-ms：858.7[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.19(d,j＝5.2hz,1h),8.10(d,j＝2.9hz,1h),7.97(s,1h),7.93(d,j＝11.5hz,1h),7.57(d,j＝7.1hz,1h),7.37(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.28(s,1h),7.26
–
7.23(m,1h),7.14(d,j＝8.6hz,1h),4.59
–
4.55(m,2h),4.50
–
4.46(m,2h),4.21
–
4.17(m,2h),3.92
–
3.86(m,3h),3.82
–
3.75(m,4h),3.69
–
3.58(m,17h),3.54
–
3.48(m,1h),3.01
–
2.93(m,1h),2.90
–
2.86(m,1h),2.86
–
2.83(m,1h),2.75
–
2.68(m,1h),2.66(t,j＝6.1hz,2h),2.42(s,3h),2.38(s,3h),2.18
–
2.12(m,1h),1.97
–
1.91(m,1h),1.73
–
1.64(m,2h),1.36
–
1.31(m,2h),0.98
–
0.93(m,2h)。
[1863]
实施例47b.2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基n-{[4-(3-{2-[2-(2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)苯基]甲基}氨基甲酸酯
[1864][1865]
制备n-[(4-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}苯基)甲基]氨基甲酸苄基酯
[1866]
将tea(0.35ml，1.1eq.)添加到保持在0℃的n-[4-(氨基甲基)苯基]氨基甲酸叔丁酯(0.5g，1.0eq.)在dcm(7.0ml)中的溶液中。然后，滴加氯碳酸苄酯(0.32ml，1.0eq.)并将反应混合物在室温搅拌2小时。用水稀释反应混合物并用dcm洗涤。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过fcc(sihp；hex：acoet)纯化，得到产物(0.79g，93％产率)，为白色固体。esi-ms：379.1[m na]
.
[1867]
制备苄基n-[(4-氨基苯基)甲基]氨基甲酸酯盐酸盐
[1868]
将n-[(4-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}苯基)甲基]氨基甲酸苄酯(0.79g，1.0eq.)溶于dcm(8.0ml)并加入于1,4-二噁烷中的4m hcl(7.8ml，15.0eq.)。将反应混合物在室温搅拌4小时。将混合物真空浓缩。残余物用dcm稀释并浓缩(3个循环)，得到产物(0.7g，定量收率)，为黄色固体。esi-ms：257.0[m h]
。
[1869]
制备n-{[4-(3-{2-[2-(2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)苯基]甲基}氨基甲酸苄基酯
[1870]
将hatu(0.323g，1.3eq.)、dipea(0.34ml，3.0eq.)、n-[(4-氨基苯基)甲基]氨基甲酸苄酯盐酸盐(0.21g，1.0eq.)和3-{2-[2-(2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酸(0.19ml，1.0eq.)在无水dmf(4.0ml)中的混合物在室温搅拌过夜。之后将反应混合物真空浓缩。将残余物重新溶解在dcm中并用水充分洗涤。合并的有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化，得到产物(0.36g，97％产率)，为橙色油状.esi-ms：558.3[m-h]-.
[1871]
制备n-(2-{2-[2-(2-{[4-(氨基甲基)苯基]氨基甲酰基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙基)氨基甲酸叔丁酯
[1872]
将n-{[4-(3-{2-[2-(2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)苯基]甲基}氨基甲酸苄酯(0.36g，1.0eq.)溶于etoh(20.0ml)。将氩气通过溶液鼓泡几分钟，然后加入钯碳(0.047g，0.7eq.)。反应在氢气氛下在室温进行4小时。通过硅藻土垫过滤反应混合物，浓缩滤液，得到产物(0.265g，95％产率)，为黄色油状物。esi-ms：426.3[m h]
。
[1873]
制备2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基n-{[4-(3-{2-[2-(2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)苯基]甲基}氨基甲酸酯
[1874]
将1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐(实施例47)(0.06g，1.0eq.)和cdi(0.018g，1.1eq.)在dmf(1.0ml)和thf(1.0ml)中的溶液在室温搅拌1小时。然后，加入n-(2-{2-[2-(2-{[4-(氨基甲基)苯基]氨基甲酰基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.044g，1.0eq.)并将反应混合物在室温搅拌过夜。然后，将其在60℃加热3小时，然后在70℃再加热过夜。减压蒸发溶剂。添加dcm并用水洗涤。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化两次，得到产物(0.016g，15％产率)。esi-ms：1023.8[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.17(d,j＝5.5hz,1h),8.09(d,j＝2.8hz,1h),7.95(s,1h),7.91(d,j＝11.5hz,1h),7.55(d,j＝6.9hz,1h),7.51(d,j＝8.4hz,2h),7.36(dd,j＝8.5,2.9hz,1h),7.29
–
7.19(m,4h),7.13(d,j＝8.6hz,1h),4.56
–
4.49(m,2h),4.49
–
4.37(m,2h),4.29
–
4.16(m,2h),3.93
–
3.71(m,7h),3.67
–
3.56(m,7h),3.55
–
3.49(m,2h),3.49
–
3.41(m,3h),3.22
–
3.14(m,2h),3.01
–
2.93(m,1h),2.91
–
2.83(m,1h),2.75
–
2.67(m,1h),2.65
–
2.49(m,2h),2.42(s,3h),2.36(s,3h),2.18
–
2.10(m,1h),1.98
–
1.91(m,1h),1.76
–
1.58(m,2h),1.43(s,9h),1.37
–
1.25(m,4h),0.98
–
0.89(m,2h)。
[1875]
实施例55a.[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基n-[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]-n-甲基氨基甲酸酯
[1876]
[1877][1878]
制备n-[4-(羟基甲基)苯基]-4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺
[1879]
将4-氨基苄基醇(0.15g，1.0eq.)、4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酸(0.37g，1.0eq.)和hatu(0.70g，1.5eq.)的混合物在无水dmf(9.0ml)中搅拌10分钟。然后加入dipea(0.85ml，4.0eq.)并将混合物在室温搅拌过夜。在那之后，混合物用水稀释并用etoac洗涤。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。产物通过fcc(sihp,dcm：meoh)纯化，得到产物(0.24g，48％产率)，为橙色油状.esi-ms：410.2[m h]
。
[1880]
制备碳酸4-硝基苯基
·
[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基酯(中间体29)
[1881]
将tea(0.16ml，2.0eq.)加入保持在0℃的n-[4-(羟基甲基)苯基]-4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺(0.24g，1.0eq.)在无水dcm(4.0ml)中的溶液中。然后，滴加氯甲酸4-硝基苯酯(0.08ml，1.0eq.)并将反应混合物在室温搅拌1小时。用水稀释反应混合物并用dcm洗涤。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩。产物通过fcc(sihp，dcm：meoh)纯化，得到产物(0.15g，44％产率)，为米色油状物。esi-ms：575.3[m h]
。
[1882]
制备[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基n-[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]-n-甲基氨基甲酸酯
[1883]
将1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-(甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐(实施例55)(0.04g，1.0eq.)、碳酸4-硝基苯基
·
[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰
基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]-5,8,11,14-四氧杂-2-氮杂十六烷-16-基}氨基甲酸叔丁酯
[1888]
将1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-(甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐(实施例55)(0.05g，1.0eq.)、n-(14-溴-3,6,9,12-四氧杂十四烷-1-基)氨基甲酸叔丁酯(0.06g，2.0eq.)和k2co3(0.03g，3.0eq.)溶于mecn和dmf(1.5ml；2：1)的混合物中。将反应混合物在75℃搅拌过夜。用水稀释反应混合物并用etoac洗涤。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化两次，得到产物(0.013g，19％产率)，为米色固体。esi-ms：929.8[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.18(d,j＝5.2hz,1h),8.10(d,j＝3.0hz,1h),7.85(s,1h),7.79(d,j＝14.7hz,1h),7.36(dd,j＝8.6,3.0hz,1h),7.26(s,1h),7.23(d,j＝5.3hz,1h),7.13(d,j＝8.6hz,1h),6.94(d,j＝7.6hz,1h),3.92
–
3.76(m,7h),3.73
–
3.58(m,17h),3.57
–
3.52(m,1h),3.50(t,j＝5.6hz,2h),3.45
–
3.41(m,1h),3.22(t,j＝5.6hz,2h),2.99
–
2.91(m,1h),2.87(d,j＝11.2hz,1h),2.84
–
2.77(m,2h),2.74
–
2.65(m,1h),2.46
–
2.39(m,6h),2.37(s,3h),2.34
–
2.27(m,1h),2.18
–
2.11(m,1h),2.02
–
1.90(m,2h),1.72
–
1.62(m,2h),1.44(s,9h),1.33
–
1.27(m,3h),0.93
–
0.87(m,2h)。
[1889]
实施例55c.n-(2-{2-[2-(2-{[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基](甲基)氨基甲酰基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙基)氨基甲酸叔丁酯
[1890][1891]
制备n-(2-{2-[2-(2-{[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基](甲基)氨基甲酰基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙基)氨基甲酸叔丁酯
[1892]
将hatu(0.044g，1.5eq.)、1-环丙基-6-氟-7-[(3r)-3-(甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐(实施例55)(0.05g，1.0eq.)和3-{2-[2-(2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酸(0.03g，1.2eq.)在无水dmf(1.0ml)中搅拌10分钟。然后加入dipea(0.054ml，4.0eq.)。将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用水稀释并萃取至etoac。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化两次并通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得到产物(0.037g，49％产率)，为灰白色固体。esi-ms：913.9[m h]
。
[1893]
实施例55d.3-{2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基}-n-[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]-n-甲基丙酰胺甲酸盐
[1894][1895]
制备3-{2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基}-n-[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]-n-甲基丙酰胺甲酸盐
[1896]
将n-(2-{2-[2-(2-{[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基](甲基)氨基甲酰基}乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙基)氨基甲酸叔丁酯(实施例55c)(0.037g，1.0eq.)溶于dcm(2.0ml)。加入于1,4-二噁烷中的4m hcl(0.14ml，15.0eq.)并将反应混合物在室温搅拌1小时。真空蒸发挥发物。残留物在饱和nahco3和dcm之间分配。真空浓缩有机层。粗产物通过制备型hplc(h2o：mecn：fa)纯化，得到为甲酸盐的产物(0.005g，14％产率)，为淡橙色固体。esi-ms：813.2[m h]
。
[1897]
实施例58a.[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基n-[(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]-n-甲基氨基甲酸酯
[1898][1899]
制备[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基n-[(3s)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]-n-甲基氨基甲酸酯
[1900]
将1-环丙基-6-氟-7-[(3s)-3-(甲基氨基)吡咯烷-1-基]-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐(实施例58)(0.03g，1.0eq.)、碳酸4-硝基苯基
·
[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基酯(中间体29)(0.03g，1.0eq.)和tea(0.013ml，2.0eq.)溶解于无水dcm(1.5ml)并将反应在60℃搅拌过夜。用dcm稀释反应混合物。有机物用水和盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化两次以获得产物(0.02g，40％产率)，为米色固体。hr-ms：1045.5[m h]
。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.17(d,j＝5.2hz,1h),8.10(d,j＝3.0hz,1h),7.85(s,1h),7.78(d,j＝14.7hz,1h),7.63
–
7.56(m,2h),7.40
–
7.33(m,3h),7.25(s,1h),7.22(d,j＝5.4hz,1h),7.13(d,j＝8.6hz,1h),6.99
–
6.89(m,1h),5.14(s,2h),4.17(d,j＝2.4hz,2h),3.92
–
3.75(m,8h),3.75
–
3.68(m,1h),3.67
–
3.59(m,13h),3.59
–
3.56(m,6h),3.43
–
3.36(m,1h),3.00
–
2.93(m,4h),2.89
–
2.82(m,2h),2.74
–
2.66(m,1h),2.63(t,j＝6.0hz,2h),2.42(s,3h),2.36(s,3h),2.29
–
2.20(m,2h),2.17
–
2.11(m,1h),1.97
–
1.90(m,1h),1.74
–
1.61(m,2h),1.35
–
1.24(m,3h),0.94
–
0.88(m,2h)。
[1901]
实施例68a.{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基5-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧
代-1,4-二氢喹啉-7-基]-八氢-1h-吡咯烷并[3,2-c]吡啶-1-甲酸酯
[1902][1903][1904]
制备{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基5-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]-八氢-1h-吡咯烷并[3,2-c]吡啶-1-甲酸酯
[1905]
将碳酸{4-[(2s)-2-[(2s)-2-(3-{2-[2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基]-5-(氨基甲酰基氨基)戊酰胺基]苯基}甲基
·
4-硝基苯基酯(0.02g，1.0eq.)和1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-7-{八氢-1h-吡咯烷并[3,2-c]吡啶-5-基}-1,4-二氢喹啉-4-酮(实施例68)(0.019g，1.2eq.)悬浮于dcm(1.0ml)。随后，加入tea(0.018ml，5.0eq.)并将反应混合物在60℃搅拌过夜。真空浓缩溶剂，残余物通过制备型hplc(h2o：mecn)纯化，得到产物(0.022g，66％产率)，为黄色固体。esi-ms：1270.9[m h]
。hr-ms：1270.7[m h]
。
[1906]
实施例84a.2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基n-{[4-(4,7,10,13,
16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基}氨基甲酸酯
[1907][1908]
制备n-{[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基}氨基甲酸叔丁酯
[1909]
将n-[(4-氨基苯基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(0.15g，1.0eq.)、4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酸(0.2g，1.0eq.)和hatu(0.38g，1.5eq.)在dmf(6.5ml)中搅拌10分钟。然后加入dipea(0.46ml，4.0eq.)并将混合物在室温搅拌过夜。此后，将混合物用水稀释并用etoac萃取。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩。产物混合物通过fcc(sihp；dcm：meoh)纯化以获得产物(0.223g，63％产率)，为橙色油状物。esi-ms：509.3[m h]
。
[1910]
制备n-[4-(氨基甲基)苯基]-4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺
[1911]
将n-{[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基}氨基甲酸叔丁酯(0.22g，1.0eq.)溶于dcm(2.0ml)并滴加三氟乙酸(0.32ml，10.0eq.)。将反应混合物在室温搅拌过夜。减压蒸发溶剂。将残余物用meoh(x 2)稀释以共沸去除痕量水分。将残余物溶于dcm并用盐水洗涤。有机层经无水na2so4干燥并减压浓缩，得到产物(0.175g，99％产率)，为米黄色油状物。将其不经进一步纯化用于下一步。esi-ms：409.4[m h]
。
[1912]
制备2-{[1-环丙基-6-氟-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]氧基}乙基n-{[4-(4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺)苯基]甲基}氨基甲酸酯
[1913]
将1-环丙基-6-氟-7-(2-羟基乙氧基)-3-({[(2-甲基吡啶-4-基)甲基][(3s)-1-(吡啶-3-基)哌啶-3-基]氨基}甲基)-1,4-二氢喹啉-4-酮盐酸盐(实施例84)(0.08g，1.0eq.)和cdi(0.024g，1.1eq.)在dmf(1.0ml)和thf(1.0ml)的混合物中的溶液在室温搅拌1.5小时。然后，加入n-[4-(氨基甲基)苯基]-4,7,10,13,16-五氧杂十九-18-炔酰胺(0.056g，1.0eq.)。将反应混合物在70℃搅拌过夜。反应混合物用水稀释并用dcm萃取。有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩。
[1914]
粗产物通过fcc(sihp,dcm：meoh)纯化，通过rp-fcc(c18hp；h2o：mecn)再纯化，得
到产物(0.016g，12％产率)，为米色固体。esi-ms：992.7[m h]
。hr-ms：992.5[m h]
。
[1915]
进一步衍生连接基官能团柄的一般过程
[1916]
实施例15b.n-{[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]甲基}-1-[3-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)丙酰胺基]-3,6,9,12-四氧杂十五烷-15-酰胺
[1917][1918]
制备n-{[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]甲基}-1-[3-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)丙酰胺基]-3,6,9,12-四氧杂十五烷-15-酰胺
[1919]
向1-氨基-n-{[(3r)-1-[1-环丙基-6-氟-3-({[(3s)-1-(6-甲基吡啶-3-基)哌啶-3-基][(2-甲基吡啶-4-基)甲基]氨基}甲基)-4-氧代-1,4-二氢喹啉-7-基]吡咯烷-3-基]甲基}-3,6,9,12-四氧杂十五烷-15-酰胺(0.10g，1.0eq.)在dcm(10.0ml)中的溶液中加入dipea(0.10ml，5.0eq)然后加入2,5-二氧代-1-吡咯烷基-3-(2,5-二氧代-1h-吡咯-1-基)丙酸酯(0.047g，1.5eq.)。将所得溶液在室温搅拌过夜。蒸发溶剂，残余物通过rp-fcc纯化，得到标题化合物(0.065g，产率54％),esi-ms：1009.2[m h]
。
[1920]
制备adc的一般过程
[1921][1922]
抗体或抗体片段可以根据br.j.cancer(1994),70,35-41和br.j.cancer(1994),70,1126-1130描述的过程缀合至化合物-连接基构建体(例如根据实施例15b的化合物-连接基构建体)，如下所述：抗体中存在的半胱氨酸残基中的硫醇基团可用作缀合位点，在其他情况下此类硫醇基团可通过在用含有2m edta的合适碱性溶液(如0.1m碳酸氢钠缓冲液，ph 8.0)处理抗体(或fab)的赖氨酸残基上产生。向该溶液中加入适当浓度(例如1mm)的2-亚氨基硫杂环戊烷盐酸盐并反应30分钟。未反应的试剂将使用合适的凝胶过滤柱(例如sephadex g-25)脱盐。此过程将产生mab-(sh)n。可以从该溶液中取出等分试样并立即用4,4'二硫代吡啶(dtdp)滴定以确定生成的硫醇数量。将根据实施例15b的化合物-连接基构建体以10m过量添加至mab-sh并反应合适的时间(例如1h)。过量的化合物-连接基构建体15b可以在0.1m碳酸氢钠缓冲液(ph 8.0)中脱盐，得到15b的相应的adc。
[1923]
生物测定和数据：
[1924]
如上所述，式(i)化合物本身以及本发明的化合物-连接基构建体和缀合物的形式是sting调节剂并且可用于通过sting活性调节来治疗疾病。本发明的化合物、构建体和缀合物的生物活性可以通过任何合适的测试来确定，以确定化合物作为sting调节剂的活性，以及细胞系和体内模型。
[1925]
荧光热位移测定
[1926]
在荧光热位移测定中测试了本发明的化合物、构建体和缀合物与人sting的结合。sting与化合物在50mm hepes、150mm nacl、ph 7.5中以15或16μl体积预孵育20分钟，然后加入4μl syproorange染料稀释液(thermofisher，目录号s-6651)。最终sting浓度为0.1mg/ml。热性去折叠(thermal unfolding)在实时pcr quantstudio 6 flex系统(applied biosystems)中进行，温度范围为25至99℃，具有连续升温模式和升温速率0.033℃/s。使用蛋白质热转移软件(protein thermal shilf software)(protein thermal shift software,thermofisher)分析数据。
[1927]
使用上述荧光热位移测定，实施例1-35、37、45-47、49、55-58、66-68、75、78、82、85、86、95、98、99表现出的δtm[℃]值在以下范围内： ＝δtm≤10℃； ＝10《δtm《20℃； ＝δtm≥20℃。对于以下实施例，fts测定的δtm[℃]为：
[1928]
[1929]
[1930][1931]
thp-1双报告子测定
[1932]
使用thp-1双细胞(invi-vogen，目录号thpd-nfis)测试本发明化合物的活性，从而允许同时研究nf-κb途径和干扰素调节因子(irf)途径。thp-1双细胞含有受与5个干扰素刺激反应元件结合的isg54(干扰素刺激基因)最小启动子控制的荧光素酶报告子基因，和受融合到五个拷贝的nf-κb共有转录反应元件和三个拷贝的c-rel结合位点的ifn(干扰
素)-β最小启动子控制的分泌型胚胎碱性磷酸酶报告子基因。在用sting激动剂刺激18小时后，收集培养基并转移到新鲜的细胞培养板上。为了验证irf通路的活性，在将10μl培养基加入40或50μl发光试剂(invivogen，目录号rep-qlc2)后，立即用标准实验室读板器测量发光活性。为了验证nf-κb通路的活性，将10或20μl培养基与80μl检测培养基(invivogen，目录号rep-qb2)混合，并在37℃在含有5％co2湿气氛中孵育1或2小时。接下来，使用标准实验室读板器记录630或655nm处的吸光度。
[1933]
如上例示的本公开的化合物显示以下范围内的ec50值： ＝ec
50
≥10μm； ＝1μm《ec
50
《10μm； ＝ec
50
≤1μm。
[1934]
[1935]
[1936]
[1937]
[1938]
[1939]
[1940]
[1941]
[1942]
[1943]
[1944]
[1945]
[1946]
[1947]
[1948]
[1949]
[1950]
[1951]
[1952][1953]
体内抗肿瘤功效
[1954]
实施例4、实施例31和实施例57的功效在雌性balb/c小鼠中建立的ct26鼠结肠癌同种异体移植物中进行了评估。将化合物在含有10％captisol于pbs中的5％乙醇中配制并静脉内施用，每五天一次，共3次。该溶液在每次施用前新鲜制备。ct26肿瘤对实施例4、实施例31和实施例57的治疗有显著反应。对于实施例4，7和10mg/kg两种剂量水平均有效，并且分别与对照组或随机化的天量相比导致肿瘤生长延迟或肿瘤大小显著减小(图1a-图1c)。到研究结束时，在以10mg/kg实施例4治疗的动物中出现了一个完全反应。与对照组相比，以7mg/kg治疗时，实施例31治疗导致轻微的肿瘤生长延迟(图2a-图2c)。对于实施例31，15mg/kg和30mg/kg的均显著有效，并且在第43天研究结束时，较高剂量的治疗导致两个完全反应。ct26肿瘤对实施例57治疗的反应呈剂量依赖性，中等有效剂量为10mg/kg且完全有效剂量为20mg/kg(图3a-图3c)。在以5mg/kg治疗的组中，与对照组相比，仅观察到最小的肿瘤生长延迟。到研究结束时，在第43天，在以20mg/kg实施例57治疗的组中记录了一个完全反应。
[1955]
具体而言，本发明涉及以下项目：
[1956]
1.化合物-连接基构建体，其包含
[1957]
(i)式(i)化合物；和
[1958]
(ii)连接基l1[1959]
其中所述式(i)化合物是下式的化合物
[1960][1961]
或其盐、立体异构体、互变异构体或n-氧化物，
[1962]
其中
[1963]
x1为ch或n；
[1964]
x2为cr3或n；
[1965]
r1、r2和r3独立地为h、oh、nrcrd、cn、卤素、c
1-c
4-烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、c
1-c
4-烷氧基、芳氧基、苄氧基、c(＝o)re、nrfc(＝o)re、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-c(＝o)re、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或4至6元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基、杂环氧基或杂环基-c
1-c
2-烷基，或8至10元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳双环基或杂双环基，其中前述杂环或杂双环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[1966]
r4为5或6元芳族碳环或杂环，或9或10元芳族碳双环或杂双环，其中所述杂环或杂双环包含至少一个氮原子和任选地一个或多个相同或不同的选自o、n或s的另外的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[1967]
r5为5元或6元饱和杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代；
[1968]
并且其中
[1969]rn
为h、c
1-c
4-烷基、ho(c＝o)-c
1-c
4-烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
4-烷基，或3或4元饱和碳环基或杂环基，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[1970]
rc和rd独立为h，或c
1-c
2-烷基；或
[1971]
rc和rd与它们所结合的氮原子一起形成5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中所述杂环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[1972]
re为h、c
1-c
2-烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、苯基、苄基、org或nrhri；或5元或6元饱和、部分或完全不饱和的杂环基，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基rf取代；
[1973]
rf为h、c
1-c
2-烷基、c
3-c
6-环烷基、苯基、苄基或c(＝o)nrhri；
[1974]
rg为h、c
1-c
2-烷基，或5或6元芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基或杂环基-c
1-c
2-烷基，其中上述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化；
[1975]
rh和ri独立地为h、c
1-c
2-烷基，或5或6元芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基或杂环基-c
1-c
2-烷基，其中前述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化；或
[1976]
rh和ri与它们所结合的氮原子一起形成5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中所述杂环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[1977]rx
为oh、nrcrd、卤素、cn、no2、c
1-c
2-烷基、c
1-c
2-卤代烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、rco-c
1-c
4-烷基、c
1-c
2-烷氧基、c(＝o)re，或两个r
x
形成＝o，或两个r
x
与它们所结合的碳原子一起形成3至5元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环；
[1978]ry
为卤素、cn、oh、c
1-c
2-烷基、ho-c
1-c
2-烷基、c
3-c
6-环烷基、c
1-c
2-烷氧基、nrcrd、s(＝o)2nrcrd、c(＝o)re，或5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基和杂环基-c
1-c
2-烷基，其中上述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；或两个ry形成＝o；或与相同或相邻碳原子相连的两个ry可形成3元碳环；
[1979]
附带条件是
[1980]
或者
[1981]
r1、r2或r3中的任何一个为nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或8至10元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳双环基或杂双环基，其中上述杂双环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[1982]
或者
[1983]
r1、r2或r3中的任何一个为nrfc(＝o)re，其中re为nrcr
d-c
1-c
4-烷基；
[1984]
或者
[1985]rn
为nrcr
d-c
1-c
4-烷基或c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
4-烷基；
[1986]
或者
[1987]
取代基r1、r2、r3、r4、r5、rn中的任何一个带有取代基r
x
，其中
[1988]rx
为oh、nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基或rco-c
1-c
4-烷基。
[1989]
2.根据项1所述的化合物-连接基构建体，其中式(i)化合物和连接基l1之间的共
价键通过式(i)化合物的官能团与连接基l1的官能团柄的反应建立；并且其中优选地，式(i)化合物的官能团连接至取代基r2、r4、r5或rn或取代基r2、r4、r5或rn的一部分，使得连接基l1根据以下结构之一共价结合至式(i)化合物：
[1990][1991]
3.根据项1或2所述的化合物-连接基构建体，其中所述连接基l1包含
[1992]
(i)具有2至100个选自碳、氮、氧和硫原子的原子的链lc，其可以被5至10元芳基和杂芳基和/或3至8元饱和碳环基或杂环基中断，其中上述杂芳基和杂环基包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中链中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[1993]
并且优选地
[1994]
选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的链lc单元，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[1995]
(ii)官能团柄h
1a
，其与式(i)化合物共价结合；
[1996]
(iii)官能团柄h
1b
，其适合与靶向部分t形成共价键。
[1997]
4.根据项1至3中任一项所述的化合物-连接基构建体，其中所述连接基l1具有结构h
1a-l
c-h
1b
并且选自：
[1998][1999]
其中
[2000]
lc选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的链lc单元，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；和
[2001]
§
标记与式(i)化合物的连接；和
[2002]
x表示离去基团，其选自
[2003][2004]
并且其中优选lc选自：
[2005]
[2006][2007]
5.根据项1至4中任一项所述的化合物-连接基构建体，其中所述连接基l1选自：
[2008]
[2009][2010]
其中
[2011]
§
标记与式(i)化合物的连接。
[2012]
6.缀合物，其包含
[2013]
(i)式(i)化合物；
[2014]
(ii)连接基l2；和
[2015]
(iii)靶向部分t
[2016]
其中所述式(i)化合物是下式的化合物
[2017][2018]
或其盐、立体异构体、互变异构体或n-氧化物，
[2019]
其中
[2020]
x1为ch或n；
[2021]
x2为cr3或n；
[2022]
r1、r2和r3独立地为h、oh、nrcrd、cn、卤素、c
1-c
4-烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、c
1-c
4-烷氧基、芳氧基、苄氧基、c(＝o)re、nrfc(＝o)re、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-c(＝o)re、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或4至6元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基、杂环氧基或杂环基-c
1-c
2-烷基，或8至10元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳双环基或杂双环基，其中前述杂环或杂双环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[2023]
r4为5或6元芳族碳环或杂环，或9或10元芳族碳双环或杂双环，其中所述杂环或杂双环包含至少一个氮原子和任选地一个或多个相同或不同的选自o、n或s的另外的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[2024]
r5为5元或6元饱和杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代；
[2025]
并且其中
[2026]rn
为h、c
1-c
4-烷基、ho(c＝o)-c
1-c
4-烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
4-烷基，或3或4元饱和碳环基或杂环基，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[2027]
rc和rd独立为h，或c
1-c
2-烷基；或
[2028]
rc和rd与它们所结合的氮原子一起形成5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中所述杂环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[2029]
re为h、c
1-c
2-烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、苯基、苄基、org或nrhri；或5元或6元饱和、部分或完全不饱和的杂环基，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基rf取代；
[2030]
rf为h、c
1-c
2-烷基、c
3-c
6-环烷基、苯基、苄基或c(＝o)nrhri；
[2031]
rg为h、c
1-c
2-烷基，或5或6元芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基或杂环基-c
1-c
2-烷基，其中上述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化；
[2032]
rh和ri独立地为h、c
1-c
2-烷基，或5或6元芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基或杂环基-c
1-c
2-烷基，其中前述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-原子独立地被氧化或未被氧化；或
[2033]
rh和ri与它们所结合的氮原子一起形成5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族杂环，其中所述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中所述杂环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[2034]rx
为oh、nrcrd、卤素、cn、no2、c
1-c
2-烷基、c
1-c
2-卤代烷基、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、rco-c
1-c
4-烷基、c
1-c
2-烷氧基、c(＝o)re，或两个r
x
形成＝o，或两个r
x
与它们所结合的碳原子一起形成3至5元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环；
[2035]ry
为卤素、cn、oh、c
1-c
2-烷基、ho-c
1-c
2-烷基、c
3-c
6-环烷基、c
1-c
2-烷氧基、nrcrd、s(＝o)2nrcrd、c(＝o)re，或5或6元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳环基、碳环基-c
1-c
2-烷基、杂环基和杂环基-c
1-c
2-烷基，其中上述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；或两个ry形成＝o；或与相同或相邻碳原子相连的两个ry可形成3元碳环；
[2036]
附带条件是
[2037]
或者
[2038]
r1、r2或r3中的任何一个为nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或8至10元饱和、部分或完全不饱和或芳族碳双环基或杂双环基，其中上述杂双环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[2039]
或者
[2040]
r1、r2或r3中的任何一个为nrfc(＝o)re，其中re为nrcr
d-c
1-c
4-烷基；
[2041]
或者
[2042]rn
为nrcr
d-c
1-c
4-烷基或c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
4-烷基；
[2043]
或者
[2044]
取代基r1、r2、r3、r4、r5、rn中的任何一个带有取代基r
x
，其中
[2045]rx
为oh、nrcrd、nrcr
d-c
1-c
4-烷基或rco-c
1-c
4-烷基。
[2046]
7.项6的缀合物，其中式(i)化合物和连接基l2之间的共价键通过式(i)化合物的官能团与连接基l2的官能团柄的反应建立，并且其中靶向部分t和连接基l2之间的共价键通过靶向部分t的官能团与连接基l2的官能团柄的反应建立；并且其中优选地，式(i)化合物的官能团连接至取代基r2、r4、r5或rn或连接至取代基r2、r4、r5或rn的一部分，使得与靶向部分在一端共价结合的连接基l2在另一端根据以下任一结构与式(i)化合物共价结合：
[2047]
[2048][2049]
8.项6或7所述的缀合物，其中所述连接基l2包含
[2050]
(i)具有2至100个选自碳、氮、氧和硫原子的原子的链lc，其可以被5至10元芳基和杂芳基和/或3至8元饱和碳环基或杂环基中断，其中上述杂芳基和杂环基包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中链中每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[2051]
并且优选地
[2052]
选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的链lc单元，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[2053]
(ii)官能团柄h
1a
，其与式(i)化合物共价结合；
[2054]
(iii)官能团柄h
2b
，其与靶向部分t共价结合。
[2055]
9.项6至8中任一项所述的缀合物，其中所述连接基l2具有结构h
1a-l
c-h
2b
并且选自：
[2056][2057]
其中
[2058]
lc选自直链或支链聚乙二醇链、氨基酸序列和直链或支链c
1-c
10-烷基链的链lc单元，其中上述单元的每个可取代的碳或杂原子可以未被取代或被一个或多个相同或不同的选自以下的取代基取代：卤素、oh、＝o、c
1-c
6-烷基、c
1-c
6-卤代烷基、c
3-c
6-环烷基、c
3-c
6-卤代环烷基、c
1-c
6-烷氧基和c
1-c
6-卤代烷氧基；
[2059]
§
标记与式(i)化合物的连接；和
[2060]
$标记与靶向部分t的连接。
[2061]
并且其中优选lc选自：
[2062][2063]
10.项6至9中任一项所述的缀合物，其中靶向部分t包含抗体、抗体片段、基于核酸的分子、碳水化合物、肽或修饰肽，特别是抗体或抗原结合片段，其旨在靶向人表皮生长因子受体(egfr)、纤溶酶原激活剂、细胞毒性t淋巴细胞相关抗原(ctla)、血管内皮生长因子(vegf)、神经营养因子、神经生长因子、血小板衍生的生长因子(pdgf)、转化生长因子(tgf)、epcam、flt3、psma、psca、steap、cea、叶酸受体、cd
33
/cd
30
/cd
79
/cd
22
受体、slc
34
a2基因产物、间皮素蛋白、epha2酪氨酸激酶、muc1/muc
16
细胞表面抗原、alk、afp、brc-abl、半胱氨酸蛋白酶-8、cd
20
、cd
40
、cd
123
、cdk4、c-kit、cmet、erbb2/her2、erbb3/her3、erbb4/her4、her2、ox
40
、p
53
、pap、pax3、pax5、ras和rho。
[2064]
11.项1至5中任一项的化合物-连接基构建体，或项6至10中任一项的缀合物，其中连接至取代基r2、r4、r5或rn，或连接至取代基r2、r4、r5或rn的一部分，并与连接基l1或l2的官能团柄h
1a
形成共价键的式(i)化合物的官能团选自以下选项：
[2065]
或者
[2066]
r2为nhrd、nhr
d-c
1-c
4-烷基、nh-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nhrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nhrd，或8至10元饱和杂双环基，其中前述杂双环包含至少一个氮原子和任选地一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被
氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[2067]
或者
[2068]
r2为nrfc(＝o)re，其中re为nhr
d-c
1-c
4-烷基；
[2069]
或者
[2070]rn
为nhr
d-c
1-c
4-烷基；
[2071]
或者
[2072]
取代基r2、r4、r5、rn中的任一个带有取代基r
x
，其中
[2073]rx
为oh、nhrd、nhr
d-c
1-c
4-烷基或ho-c
1-c
4-烷基；
[2074]
并且优选地
[2075]
或者
[2076]
r2为nh2、nh
2-c
1-c
2-烷基、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-n(ch3)2、o-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2或o-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3；
[2077]
或者
[2078]
r2为nhc(＝o)re，其中re为nh
2-c
1-c
4-烷基；
[2079]
或者
[2080]rn
为nh
2-c
1-c
3-烷基；
[2081]
或者
[2082]
取代基r2、r4或r5中的任一个带有取代基r
x
，其中
[2083]rx
为oh、nh2、nhch3、nh
2-c
1-c
2-烷基或ho-c
1-c
2-烷基。
[2084]
12.项1至5或11中任一项的化合物-连接基构建体，或项6至10或11中任一项的缀合物，其中在式(i)化合物中
[2085]
x1为ch；
[2086]
x2为cr3，其中r3为h；
[2087]
r1为h或f；
[2088]
r2为h、oh、nrcrd、cn、卤素、nrcr
d-c
1-c
4-烷基、nrfc(＝o)re、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-c(＝o)re、nr
f-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd、o-(c
1-c
4-亚烷基)-nrcrd，或4至6元饱和杂环基，或8至10元饱和杂双环基，其中上述杂环或杂双环包含氮原子和任选的一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[2089]
r4为吡啶基，其中环中每个可取代的碳原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[2090]
r5为哌啶，其中哌啶环中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基ry取代；和
[2091]rn
为h、c
1-c
4-烷基、ho(c＝o)-c
1-c
3-烷基、nhr
d-c
1-c
3-烷基、c
1-c
2-烷氧基-c
1-c
3-烷基或环丙基；
[2092]
其中优选地
[2093]
rc为h或c
1-c
2-烷基；
[2094]
rd为h或c
1-c
2-烷基；
[2095]
re为nh
2-c
1-c
4-烷基；
[2096]
rf为h；
[2097]rx
为卤素、oh、nh2、nhch3、c
1-c
2-烷基、c
1-c
2-烷氧基、nh
2-c
1-c
2-烷基、ho-c
1-c
2-烷基，或两个r
x
与它们所结合的碳原子一起形成3元饱和碳环；
[2098]ry
为卤素、oh、nh2，或5元或6元芳族杂环基，其中前述杂环包含一个或多个相同或不同的选自o、n或s的杂原子，其中所述n-和/或s-原子独立地被氧化或未被氧化，并且其中上述基团中的每个可取代的碳或杂原子独立地未被取代或被一个或多个相同或不同的取代基r
x
取代；
[2099]
附带条件是
[2100]
或者
[2101]
r2为nh2、nh
2-c
1-c
2-烷基、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3、nh-(c
1-c
3-亚烷基)-n(ch3)2、o-(c
1-c
3-亚烷基)-nh2或o-(c
1-c
3-亚烷基)-nhch3；
[2102]
或者
[2103]
r2为nhc(＝o)re，其中re为nh
2-c
1-c
4-烷基；
[2104]
或者
[2105]rn
为nh
2-c
1-c
3-烷基；
[2106]
或者
[2107]
取代基r2、r4或r5中的任一个带有取代基r
x
，其中
[2108]rx
为oh、nh2、nhch3、nh
2-c
1-c
2-烷基或ho-c
1-c
2-烷基。
[2109]
13.药物组合物，其包含药学有效量的项1至5、11或12中任一项的化合物-连接基构建体，或项6至10、11或12中任一项的缀合物和任选的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
[2110]
14.项1至5、11或12中任一项的化合物-连接基构建体，或项6至10、11或12中任一项的缀合物，或根据项13的药物组合物，其用于医学。
[2111]
15.项1至5、11或12中任一项的化合物-连接基构建体，或项6至10、11或12中任一项的缀合物，或根据项13的药物组合物，其用于治疗选自以下的疾病：癌症、癌前综合征和传染病；或用于免疫原性组合物或作为疫苗佐剂。
[2112]
16.项1至5、11或12中任一项的化合物-连接基构建体，或项6至10、11或12中任一项的缀合物，或根据项13的药物组合物，其用于治疗选自以下的疾病：炎性疾病、过敏性疾病和自身免疫性疾病。
再多了解一些
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