一种野外非离体诱导林木四倍体的方法

技术特征：
1.一种野外非离体诱导林木四倍体的方法，其特征是，包括在非离体状态下对林木授粉后的果序进行热激处理。2.如权利要求1所述的方法，其特征是，所述林木选择为桉树、相思树或柚木，优选为桉树。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征是，所述热激处理为对授粉后的果序着生花枝进行加热处理。4.如权利要求1或2所述的方法，其特征是，所述热激处理的温度为40-48℃；热激处理时间为3-6h。5.如权利要求1或2所述的方法，其特征是，林木授粉后在果序上花丝和花柱脱落阶段或果序开始膨大阶段，进行所述的热激处理。6.一种野外非离体诱导林木四倍体的方法，其特征是，包括如下顺序进行的步骤：1)对林木花枝上花蕾的蒴盖由绿色变为黄色或白色，且花蕾蒴盖沿脱落环处出现松动时进行授粉；2)对授粉后花枝上的果序进行观察，对处于果序上的花丝和花柱脱落阶段、果序开始膨大阶段的林木花枝进行加热，即对授粉后的处于花丝和花柱脱落阶段、果序开始膨大阶段的果序进行热激诱变处理；3)收集热激诱变处理后成熟种子，并进行播种，育苗；4)首先采用流式细胞仪对幼苗倍性水平进行初步鉴定；接着对经流式细胞仪初步鉴定出的四倍体植株，通过体细胞染色体计数进行二次鉴定，确定植株的倍性水平，获得四倍体植株。7.如权利要求6所述的方法，其特征是，步骤2)中对授粉后的处于花丝和花柱脱落阶段的果序进行热激诱变处理。8.如权利要求6或7所述的方法，其特征是，所述热激诱变处理的温度为40-48℃；热激诱变处理时间为3-6h。9.如权利要求6或7所述的方法，其特征是，在热激诱变处理之后，还包括：对花枝进行后处理，即对花枝上的叶片及果序喷洒预冷至4-20℃的清水或磷酸二氢钾水溶液，直至叶面温度降到10℃以下。10.如权利要求6或7所述的方法，其特征是，步骤2中所述热激诱变处理为采用专利号为zl200610113448.x的“树木非离体枝芽加热处理装置”对林木花枝进行加热。

技术总结
本发明提供一种野外非离体诱导林木四倍体的方法，包括在非离体条件下对林木授粉后的果序进行热激处理。本发明方法对处于合适发育状态的果序在非离体条件下，诱导合子染色体加倍获得四倍体植株，本发明方法染色体加倍，获得四倍体植株的效率高。本发明提供的四倍体诱导方法适宜野外操作，破除了试验条件的制约，为不可离体培养的长坐果期林木诱导合子染色体加倍产生四倍体开辟了新途径。本发明方法具有操作简单，成本低，可经一次处理获得多个四倍体新种质，避免嵌合体和混倍体产生等优点，对于推动南方林木种质创新发展具有良好前景和重大意义。和重大意义。


技术研发人员：杨珺 刘钊 康向阳 邱炳发 王建忠 李晨赫
受保护的技术使用者：北京林业大学
技术研发日：2022.03.25
技术公布日：2022/7/15