一种细胞活力检测试剂盒的制作方法

1.本发明涉及体外诊断试剂领域，特别涉及一种细胞活力检测试剂盒。


背景技术：

2.现有的一种细胞活力检测试剂盒在进行检测的时候，无法进行高效的检测，常常会遇到灵敏度差，检测成本高，且无法进行同时定量的检测细胞增殖及细胞死亡数，这就使得检测带来很多麻烦工作。


技术实现要素：

3.本发明的目的在于提供一种细胞活力检测试剂盒，以解决上述背景技术中提出的问题。
4.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种细胞活力检测试剂盒，所述试剂盒用于新型细胞分析及活力测定，所述试剂盒包含化合物ztt；
5.所述化合物ztt为：
[0006][0007]
所述试剂盒还包括nanoannex蛋白，所述nanoannex蛋白可与发生凋亡的细胞及细胞膜碎片反应。
[0008]
优选的，所述化合物ztt能够与琥珀酸脱氢酶反应，生成具有540nm波长吸收的水溶性小分子，能够实现均相、定量琥珀酸脱氢酶活检测，从而定量分析细胞活力。
[0009]
优选的，所述nanoannex蛋白结合在死亡细胞或细胞碎片表面，生成水溶性的可定量反应细胞凋亡个数的荧光肽段。
[0010]
本发明的技术效果和优点：本产品可同时定量检测细胞增殖及细胞死亡数，区分定量活力细胞检测时细胞增殖和细胞死亡量，目前国内及国际市场上无相关产品，本产品可实时、高度灵敏、特异性检测细胞培养基中活力3d 微组织、细菌培养和病毒感染的细胞中细胞活力或毒性的试剂盒，通过发光读数并与细胞凋亡等其他活力检测试剂叠加，以测
定细胞死亡的机制，灵敏度高。
附图说明
[0011]
图1为本发明技术示意图之一。
[0012]
图2为本发明技术示意图之二。
具体实施方式
[0013]
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0014]
本发明提供了如图1-2所示的一种细胞活力检测试剂盒，一种细胞活力检测试剂盒，所述试剂盒用于新型细胞分析及活力测定，所述试剂盒包含化合物ztt；
[0015]
所述化合物ztt为：
[0016][0017]
所述试剂盒还包括nanoannex蛋白，所述nanoannex蛋白可与发生凋亡的细胞及细胞膜碎片反应。
[0018]
本发明中，如图1所示：化合物ztt能够与琥珀酸脱氢酶反应，生成具有540nm波长吸收的水溶性小分子，能够实现均相、定量琥珀酸脱氢酶活检测，从而定量分析细胞活力。
[0019]
如图2所示，利用基因工程技术及多肽标记技术加入nanoannex蛋白，该蛋白可与发生凋亡的细胞及细胞膜碎片反应，结合在死亡细胞或细胞碎片表面，生成水溶性的可定量反应细胞凋亡个数的荧光肽段。利用上述两种技术，一方面通过检测琥珀酸脱氢酶的活性定量检测活力细胞个数，一方面通过荧光标记检测凋亡细胞或细胞碎片个数，从而定量分析待测样品的活力细胞数及死亡细胞数。
[0020]
所涉及的nanoannex蛋白为基因工程重组蛋白，经亲和层析、离子交换及分子筛三步纯化后纯度大于95％；经两次0.1μm过滤除菌及细胞培养实验验证，该蛋白可与发生凋亡的细胞及细胞膜碎片反应，结合在死亡细胞或细胞碎片表面，生成水溶性的可定量反应细胞凋亡个数的荧光肽段。
[0021]
最后应说明的是：以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。


技术特征：
1.一种细胞活力检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒用于新型细胞分析及活力测定，所述试剂盒包含化合物ztt；所述化合物ztt为：所述试剂盒还包括nanoannex蛋白，所述nanoannex蛋白可与发生凋亡的细胞及细胞膜碎片反应。2.根据权利要求1所述的一种细胞活力检测试剂盒，其特征在于，所述化合物ztt能够与琥珀酸脱氢酶反应，生成具有540nm波长吸收的水溶性小分子，能够实现均相、定量琥珀酸脱氢酶活检测，从而定量分析细胞活力。3.根据权利要求2所述的一种细胞活力检测试剂盒，其特征在于，所述nanoannex蛋白结合在死亡细胞或细胞碎片表面，生成水溶性的可定量反应细胞凋亡个数的荧光肽段。

技术总结
本发明公开了一种细胞活力检测试剂盒，包括试剂盒用于新型细胞分析及活力测定，试剂盒包含化合物ZTT，试剂盒还包括nanoAnnex蛋白，所述nanoAnnex蛋白可与发生凋亡的细胞及细胞膜碎片反应，化合物ZTT能够与琥珀酸脱氢酶反应，生成具有540nm波长吸收的水溶性小分子，能够实现均相、定量琥珀酸脱氢酶活检测，从而定量分析细胞活力。本发明可同时定量检测细胞增殖及细胞死亡数，区分定量活力细胞检测时细胞增殖和细胞死亡量，目前国内及国际市场上无相关产品，本产品可实时、高度灵敏、特异性检测细胞培养基中活力3D微组织、细菌培养和病毒感染的细胞中细胞活力或毒性的试剂盒，通过发光读数并与细胞凋亡等其他活力检测试剂叠加，以测定细胞死亡的机制，灵敏度高。灵敏度高。灵敏度高。


技术研发人员：王智慧
受保护的技术使用者：苏州威百腾生物科技有限公司
技术研发日：2022.04.01
技术公布日：2022/7/15