一种醋酸西曲瑞克冻干制剂的制备方法与流程

1.本发明涉及药物制剂领域，特别涉及一种降低醋酸西曲瑞克冻干制剂中杂质脱酰胺西曲瑞克和乙酰化西曲瑞克的冻干工艺。


背景技术：

2.西曲瑞克是一种gnrh拮抗剂，可用于进行控制性卵巢刺激的患者，防止提前排卵，进而进行采卵和辅助生殖技术治疗，该药物在辅助生殖技术临床上具有很好的应用前景。
3.西曲瑞克是一种合成的十肽，该肽带有五个非天然d-氨基酸以增强活性和对蛋白水解酶的抵抗力，已上市产品为注射用醋酸西曲瑞克，是一种无菌冻干制剂。
4.目前关于醋酸西曲瑞克冻干制剂的制备方法有以下公开内容：cn1112019a中公开一种西曲瑞克冻干品及其制备方法，其工艺步骤为：计算量西曲瑞克溶解于30％(v/v)醋酸溶液中，并转移至总体积1/2的注射用水中，加入计算量甘露醇，用注射用水稀释至含醋酸3％的料液，采用0.2μm滤膜过滤并分装至适宜注射剂瓶中，把含有料液的半加塞注射剂瓶转移至冷冻干燥机中，于-40℃板温下冷冻，按板温-40℃升到40℃的干燥程序进行干燥；该技术中加入30％醋酸溶解原料药解决了原料在水中难溶解问题，避免了料液形成凝胶，同时解决了过滤困难和含量损失问题,但该冻干工艺中的干燥温度升到40℃，由于该高温容易导致制剂中杂质的产生，因此不能得到很稳定的样品。
5.us20050124546a1公开的冻干工艺为：首先在-40℃板温下冷冻，然后按板温-40℃升到20℃的干燥程序进行干燥；虽然该程序中采用了20℃的干燥温度能避免干燥过程中样品接触高温带来的不利影响，但也易造成样品中水分不易除去的问题，样品中水分的增加使得水分和西曲瑞克发生反应生成脱酰胺西曲瑞克杂质(d-21739)。
6.另外cn102423484a中也公开了通过改变降温程序，得到了稳定的西曲瑞克组合物冻干样品。然而本技术人经过重复试验发现该冻干工艺制备的产品在40℃/75％rh加速条件下均易产生杂质脱酰胺西曲瑞克杂质(d-21739)和乙酰化西曲瑞克(d-64308)，且其含量高。
7.因此本技术期望开发出一种更加稳定的醋酸西曲瑞克组合物冻干制剂的制备方法，克服现有技术存在的缺陷。


技术实现要素：

8.本发明的目的是提供一种醋酸西曲瑞克冻干制剂的制备方法，本发明的技术方案如下：
9.本发明提供了一种醋酸西曲瑞克冻干制剂，该冻干制剂由活性成分醋酸西曲瑞克、有机溶剂、赋形剂和水组成；其中，活性成分醋酸西曲瑞克，可以是西曲瑞克、含有一分子醋酸的西曲瑞克和含二分子醋酸的西曲瑞克；有机溶剂为30％醋酸溶液。
10.本发明提供的醋酸西曲瑞克制剂的制备方法如下：
11.精密称取醋酸西曲瑞克置烧杯中，加入30％醋酸溶液溶解，加入甘露醇溶解，并用
注射用水配制到处方量，摇匀，即得料液；立即在无菌条件下把料液用0.2液溶滤膜过滤分装至已清洗的无色2ml注射瓶中并塞上无菌冷冻干燥塞，装量为1.0ml(1.021g)。
12.将所分装药液进行冻干，冻干过程包括以下4个步骤：
13.1)冻结阶段；
14.2)退火阶段，以≤2.0℃/min将板层温度升温至-25℃～-10℃，保温≥20min；继续以≤2.0℃/min将板层温度降温至-40℃～-45℃，保温≥20min；
15.3)升华阶段；
16.4)干燥阶段；
17.上述冻结阶段可为一步冻结法或三步冻结法。
18.其中一步冻结法为将板温以≤3.5℃/min降温至-35℃～-45℃，并保温≥1h。
19.而三步冻结法为将板温以≤3.5℃/min降温至-10℃～5℃，保温5min～20min；然后以≤3.5℃/min将板层温度降至-30℃～-40℃，保温≥2h；最后以≤3.5℃/min将板层温度降至-40℃～-45℃，并保温《1h。
20.上述退火阶段过程为：以1.0～2.0℃/min将板层温度升温至-10℃～-20℃，保温0.5h～1h；继续以1.0～2.0℃/min将板层温度降温至-40℃～-45℃，保温0.5h～1h；优选的，以1.0℃/min将板层温度升温至-20℃，保温1h；以继续1℃/min将板层温度降温至-45℃，保温1h。
21.上述升华阶段的压力为13.3～20pa，以0.5～1.0℃/min将板层温度升温至-20℃～-5℃，保温8h～15h；优选的，压力为15～20pa，以0.8～1.0℃/min将板层温度升温至-20℃～-10℃，保温10h～12h；最优选的，压力为20pa，以1.0℃/min将板层温度升温至-20℃，保温10h。
22.上述干燥阶段为：以1.0～2.0℃/min将板层温度升温至15℃～25℃，保温5h～10h；优选的，以1.0～1.5℃/min将板层温度升温至15℃～20℃，保温8h～10h；更优选的，以1.0℃/min将板层温度升温至20℃，保温8h。
23.优选的，一种醋酸西曲瑞克冻干制剂的制备方法，其冻干过程包括以下4个步骤：
24.1)冻结阶段，
25.板温以1.0～2.0℃/min降温至-5℃～5℃，保温10min～15min,继续以1.0～2.0℃/min将板层温度降至-35℃～-40℃，并保温2h～3h，继续以1.0～2.0℃/min将板层温度降至-40℃～-45℃，并保温0.5h～0.8h；
26.2)退火阶段，以1.0～2.0℃/min将板层温度升温至-20℃～-10℃，保温0.5h～1h；继续以1.0～2.0℃/min将板层温度降温至-40℃～-45℃，保温0.5h～1h；
27.3)升华阶段：压力为15～20pa，以0.8～1.0℃/min将板层温度升温至-20℃～-10℃，保温10h～12h；
28.4)干燥阶段：以1.0～1.5℃/min将板层温度升温至15℃～20℃，保温8h～10h；
29.上述冻干制剂包含甘露醇稳定剂、西曲瑞克和有机溶剂，其制备的药液过滤分装至注射剂瓶，装入冻干机冻干。
30.优选的，一种醋酸西曲瑞克冻干制剂的制备方法，其冻干过程包括以下4个步骤：
31.1)冻结阶段，板温以1.0～2.0℃/min降温至-40℃～-45℃，并保温2h～3h；
32.2)退火阶段，以1.0～2.0℃/min将板层温度升温至-20℃～-10℃，保温0.5h～1h；
继续以1.0～2.0℃/min将板层温度降温至-40℃～-45℃，保温0.5h～1h；
33.3)升华阶段：压力为15～20pa，以0.8～1.0℃/min将板层温度升温至-20℃～-10℃，保温10h～12h；
34.4)干燥阶段：以1.0～1.5℃/min将板层温度升温至15℃～20℃，保温8h～10h；
35.上述冻干制剂包含甘露醇稳定剂、西曲瑞克和有机溶剂，其制备的药液过滤分装至注射剂瓶，装入冻干机冻干。
36.更优选的，一种醋酸西曲瑞克冻干制剂的制备方法，其冻干过程包括以下4个步骤：
37.1)冻结阶段，
38.板温以1.0℃/min降温至0℃，保温15min,
39.以1.0℃/min将板层温度降至-40℃，并保温2h，
40.继续以1.0c/min将板层温度降至-45℃，并保温0.5h；
41.2)退火阶段，以1.0℃/min将板层温度升温至-20℃，保温1h；继续以1℃/min将板层温度降温至-45℃，保温1h；
42.3)升华阶段：压力为20pa，以1.0℃/min将板层温度升温至-20℃，保温10h；
43.4)干燥阶段：以1.0℃/min将板层温度升温至20℃，保温8h；
44.所述冻干制剂包含甘露醇稳定剂、西曲瑞克和有机溶剂，其制备的药液过滤分装至注射剂瓶，装入冻干机冻干。
45.申请人惊奇的发现，采用退火工艺获得的稳定药物组合物，退火温度、退火时间或退火保温时间均为关键控制点，退火能够使产品的结晶更加均一和多孔，有利于水分除去，缩短干燥时间，采用该工艺制备的产品质量佳，且已知杂质脱酰胺西曲瑞克d-21739和乙酰化西曲瑞克d-64308在加速6个月的稳定性测试中未明显增加，六个月的总杂较少，产品取得了较好的稳定性结果。
附图说明
46.图1为实施例1中醋酸西曲瑞克冻干制剂的电镜图
47.图2.实施例7中醋酸西曲瑞克冻干制剂的电镜图
48.图3现有上市品产品思则凯cetrotide的电镜图
具体实施方式
49.以下结合具体实施例对本发明的上述内容做进一步的说明，但不应将此理解为对本发明保护范围的任何限制，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
50.实施例1
51.第一步：注射用醋酸西曲瑞克药液的制备
52.精密称取醋酸西曲瑞克28.1mg，置50ml烧杯中，加入30％醋酸溶液，溶解，转移至含有50ml注射用水的100ml烧杯中，加入甘露醇5.48g，溶解并用注射用水把此溶液配制到102g；立即在无菌条件下把料液用0.2μm滤膜过滤分装至已清洗的无色2ml注射瓶中并塞上无菌冷冻干燥塞，装量为1.0ml(1.021g)。
53.第二步：冻干工艺
54.具体步骤如下：
55.1)冻结阶段：以1.0℃/min板层温度降至0℃，保温15min，以1.0℃/min继续降温至-40℃，保温2h，然后以1.0℃/min的降温速度继续降温至-45℃，保温0.5h；
56.2)退火阶段：以1.0℃/min将板层温度升温至-20℃，保温时间1h；以1.0℃/min将板层温度降温至-45℃，保温时间1h；
57.3)升华阶段，压力为20pa，以1.0℃/min将板层温度升温至-20℃，保温时间10h；
58.4)干燥阶段：以1.0℃/min将板层温度升温至20℃，保温时间8h。
59.实施例2
60.注射用醋酸西曲瑞克药液的制备同实施例1第一步。
61.第二步：冻干工艺
62.1)冻结阶段：以1.0℃/min板层温度降温至-45℃，保温3h；
63.2)退火阶段：以2.0℃/min将板层温度升温至-10℃，保温时间0.5h；以2.0℃/min将板层温度降温至-40℃，保温时间1h；
64.3)升华阶段:压力为15pa，以0.8℃/min将板层温度升温至-10℃，保温时间12h；
65.4)干燥阶段：以1.5℃/min将板层温度升温至15℃，保温时间10h。
66.实施例3
67.注射用醋酸西曲瑞克药液制备方法同实施例1第一步。
68.第二步：冻干工艺
69.1)冻结阶段：以2.0℃/min板层温度降至-5℃，保温10min；继续以2.0℃/min的降温速度降温至-35℃，保温3h；然后继续以2.0℃/min降温至-40℃，保温0.8h。
70.2)退火阶段：以1.5℃/min将板层温度升温至-15℃，保温时间0.7h；以1.5℃/min将板层温度降温至-44℃，保温时间0.5h；
71.3)升华阶段:压力为18pa，以0.9℃/min将板层温度升温至-15℃，保温时间11h；
72.4)干燥阶段：以1.2℃/min将板层温度升温至18℃，保温时间9h。
73.实施例4
74.注射用醋酸西曲瑞克药液制备方法同实施例1第一步。
75.第二步：冻干工艺
76.1)冻结阶段：以3.5℃/min板层温度降至-10℃，保温20min，继续以3.5℃/min降温至-30℃，保温2h，然后继续以3.5℃/min降温至-45℃，保温0.8h；
77.2)退火阶段：以2.0℃/min将板层温度升温至-25℃，保温时间20min；以2.0℃/min将板层温度降温至-42℃，保温时间20min；
78.3)升华阶段:压力为13.3pa：以0.5℃/min将板层温度升温至-5℃，保温时间15h；
79.4)干燥阶段：以2.0℃/min将板层温度升温至25℃，保温时间5h。
80.实施例5
81.注射用醋酸西曲瑞克药液制备方法同实施例1第一步。
82.第二步：冻干工艺
83.1)冻结阶段：以3.5℃/min板层温度降温至-35℃，保温3h；
84.2)退火阶段：以1.8℃/min将板层温度升温至-20℃，保温时间0.5h；以1.8℃/min将板层温度降温至-45℃，保温时间20min；
85.3)升华阶段:压力20pa，以1.0℃/min将板层温度升温至-20℃，保温时间8h；
86.4)干燥阶段：以1.0℃/min将板层温度升温至20℃，保温时间10h。
87.实施例6.
88.注射用醋酸西曲瑞克药液制备方法同实施例1第一步。
89.第二步：冻干工艺
90.1)冻结阶段：以1℃/min板层温度降至0℃，保温0.25h，然后继续降温至-45℃，保温3h；
91.2)升华阶段：压力20pa：以1.0℃/min将板层温度升温至-20℃，保温时间10h；
92.3)干燥阶段：以1.0℃/min将板层温度升温至20℃，保温时间10h。
93.实施例7
94.注射用醋酸西曲瑞克药液制备方法同实施例1第一步。
95.第二步：冻干工艺
96.1)冻结阶段：以1.0℃/min板层温度降至-37℃，保温1.5h；继续以1.0℃/min降温至-40℃以下，保温2h；
97.2)升华阶段：压力20pa：以1.0℃/min将板层温度升温至-25℃，保温时间15小时；
98.3)干燥阶段：以1.0℃/min将板层温度升温至20℃，保温时间10小时。
99.试验例1
100.将实施例1-7的产品进行包装后和上市产品思则凯cetrotide一块放入40℃、75％rh的恒温恒湿箱中进行考察，分别在0、1、3和6个月时取样，采用高效液相色谱法(中国药典2015年版第四部通则0512)测定，具体测定方法为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以50mmol/l磷酸二氢钾溶液(称取6.8g磷酸二氢钾，加入1000ml水使溶解，加入5ml三乙胺，混匀，用磷酸调节ph值至2.5；)为流动相a，乙腈为流动相b，流速1.0ml/min，检测波长为226nm；按下表进行线性梯度洗脱：
[0101][0102]
上述样品溶液的色谱图中如有杂质峰，按外标法以峰面积计算(未知杂质以西曲瑞克为对照品计算)，结果见表1。
[0103]
表1.稳定性40℃/75％加速试验数据
[0104][0105]
[0106][0107]
实施例1-7和现有上市品思则凯cetrotide经40℃/75％加速试验后，实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、实施例5采用本技术冻干工艺，其有关物质d-21739和d-64308含量变化较小，而采用实施例6和实施例7中常规的冻干技术，有关物质d-21739和d-64308含量变化较大，其最大单杂和总杂在储存6个月时含量变化较大；实施例1为本技术最优的冻干工艺，经高温高湿储存6个月后，其d-21739和d-64308的含量分别为0.15％和0.09％，最大单杂含量为0.21％，总杂含量为0.73％，其外观、ph、溶解时间和浊度也都符合药品标准，
产品获得了较好的稳定性。
[0108]
试验例2
[0109]
电镜试验取实施例1、实施例7和现有上市产品思则凯cetrotide适量，用双面导电胶固定在电镜样品台上，在镀膜仪(韩国coxem公司spt20离子溅射仪)中真空喷金镀膜后，通过扫描电镜(德国zeiss公司zeisssigma300型扫描电子显微镜)对样品形态进行观察。
[0110]
由电镜图可知，采用退火工艺制备的自制品，形态上与现有上市品较为接近，而未采用退火步骤的实施例7制备的产品粒径较大。