抗新型冠状病毒S蛋白受体结合区的单域抗体及其编码基因和应用

技术特征：
1.抗新型冠状病毒s蛋白受体结合区的单域抗体，其特征在于，所述单域抗体选自单域抗体r4c11或单域抗体r4g10；其中，所述单域抗体r4c11的氨基酸序列包括3个互补决定区，所述3个互补决定区的氨基酸序列分别为seq id no.3、seq id no.4和seq id no.5所示；所述单域抗体r4g10的氨基酸序列包括3个互补决定区，所述3个互补决定区的氨基酸序列分别为seq id no.8、seq id no.9和seq id no.10所示。2.按照权利要求1所述的单域抗体，其特征在于，所述单域抗体r4c11的氨基酸序列选自(1)-(3)中的任何一种氨基酸序列：(1)seq id no.1所示的氨基酸序列；或，(2)将seq id no.1所示的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸进行缺失、取代、插入和/或添加所得到的蛋白突变体，该蛋白突变体与突变前的蛋白具有相同的功能；或，(3)与seq id no.1所示的氨基酸序列至少有80％以上同一性的氨基酸序列，优选的，与seq id no.1所示的氨基酸序列至少有90％以上同一性的氨基酸序列，更优选的，与seq id no.1所示的氨基酸序列至少有95％以上同一性的氨基酸序列；所述单域抗体r4g10的氨基酸序列选自(1)-(3)中的任何一种氨基酸序列：(1)seq id no.6所示的氨基酸序列；或，(2)将seq id no.6所示的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸进行缺失、取代、插入和/或添加所得到的蛋白突变体，该蛋白突变体与突变前的蛋白具有相同的功能；或，(3)与seq id no.6所示的氨基酸序列至少有80％以上同一性的氨基酸序列，优选的，与seq id no.6所示的氨基酸序列至少有90％以上同一性的氨基酸序列，更优选的，与seq id no.6所示的氨基酸序列至少有95％以上同一性的氨基酸序列。3.权利要求1或2所述单域抗体的编码基因，其特征在于，所述编码基因的核苷酸序列选自(1)-(3)中的任何一种：(1)seq id no.2所示的多核苷酸序列；或，(2)与seq id no.2所示的多核苷酸序列的互补序列在严谨杂交条件能够进行杂交的多核苷酸序列；或，(3)与seq id no.2所示的多核苷酸序列至少有75％以上同一性的多核苷酸序列；优选的，与seq id no.2所示的多核苷酸序列至少有80％以上同一性的多核苷酸序列；进一步优选的，与seq id no.2所示的多核苷酸序列至少有85％以上同一性的多核苷酸序列；更优选的，与seq id no.2所示的多核苷酸序列至少有95％以上同一性的多核苷酸序列；最优选的，与seq id no.2所示的多核苷酸序列有99％以上同一性的多核苷酸序列；所述编码基因的核苷酸序列选自(1)-(3)中的任何一种：(1)seq id no.7所示的多核苷酸序列；或，(2)与seq id no.7所示的多核苷酸序列的互补序列在严谨杂交条件能够进行杂交的多核苷酸序列；或，(3)与seq id no.7所示的多核苷酸序列至少有75％以上同一性的多核苷酸序列；优选的，与seq id no.7所示的多核苷酸序列至少有80％以上同一性的多核苷酸序列；进一步优选的，与seq id no.7所示的多核苷酸序列至少有85％以上同一性的多核苷酸序列；更优选的，与seq id no.7所示的多核苷酸序列至少有95％以上同一性的多核苷酸序列；最优选的，与seq id no.7所示的多核苷酸序列有99％以上同一性的多核苷酸序列。
4.由权利要求1或2的单域抗体与fc蛋白融合得到的融合蛋白，优选的，所述fc蛋白的编码基因序列是来源于igg，iga，igm的fc基因序列或来源于igg1，igg2，igg3或igg4。5.权利要求4所述融合蛋白的编码基因。6.一种缀合物，其特征在于，将权利要求1或2所述的单域抗体与酶相、放射性同位素、荧光化合物或化学发光化合物中的一种或多种相偶联得到缀合物。7.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包含权利要求3所述的编码基因或权利要求5所述的的编码基因。8.权利要求1或2所述的单域抗体在制备检测或诊断新型冠状病毒试剂或制备治疗由新型冠状病毒导致疾病的药物中的用途。9.权利要求3或5所述的编码基因、权利要求4所述的融合蛋白或者权利要求6所述的缀合物在制备检测或诊断新型冠状病毒试剂或制备治疗由新型冠状病毒导致疾病的药物中的用途。10.根据权利要求8或9所述的用途，其特征在于，所述的新型冠状病毒包括新型冠状病毒delta变异株。

技术总结
本发明公开了抗新型冠状病毒S蛋白受体结合区的单域抗体及其编码基因和应用。本发明通过免疫羊驼构建噬菌体展示库，富集筛选得到抗新型冠状病毒S蛋白受体结合区的单域抗体R4C11或R4G10，单域抗体R4C11的3个互补决定区的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示；单域抗体R4G10的3个互补决定区的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示。本发明提供的单域抗体活性高、具有强的中和或结合能力，能结合不同新冠病毒突变株的RBD，可应用于制备检测新型冠状病毒感染试剂或治疗新型冠状病毒所导致疾病的药物。所导致疾病的药物。所导致疾病的药物。


技术研发人员：张冕 李胜华 胡笳泠 廖兴华 张同存
受保护的技术使用者：武汉科技大学
技术研发日：2022.03.01
技术公布日：2022/7/5