一种功能化水产膨化颗粒饲料及其制备方法

1.本发明属于水产饲料加工技术领域，具体涉及一种功能化水产膨化颗粒饲料及其制备方法。


背景技术：

2.海水鱼如大黄鱼等因其肉质鲜美、营养丰富，深受广大消费者喜爱，是我国主要的经济鱼类之一。
3.随着海水鱼如大黄鱼等养殖网箱由小改大和人工成本上升，目前海水鱼的喂食方法逐步改为投喂水产膨化颗粒饲料，相较于投喂冰鲜杂鱼，投喂水产膨化颗粒饲料具有投喂方便、人工成本低且污染小的特点。因养殖规模扩大，近几年病害，例如：变形假单胞菌引发的内脏白点病，发生日趋严重。
4.现有的防控海水鱼群发病的方法一般包括将免疫制剂、抗生素、中草药等添加到投喂饲料中，以提高海水鱼的抗病能力。但是，目前将免疫制剂、抗生素、中草药等料液直接浸渍水产膨化颗粒饲料后，投喂至海水网箱内，免疫制剂、抗生素、中草药等有效充分易散失而不能有效被海水鱼吞食，大大影响疾病防控的效果，且对海水水质造成一定的污染。


技术实现要素：

5.有鉴于此，本发明提供了一种功能化水产膨化颗粒饲料及其制备方法。本发明提供的功能化水产膨化颗粒饲料中的功能制剂不易散失，能够有效提高水产动物的免疫力。
6.为了解决上述技术问题，本发明提供了一种功能化水产膨化颗粒饲料的制备方法，包括以下步骤：
7.将功能制剂稀释液浸渍水产膨化颗粒饲料，得到负载湿颗粒；
8.将所述负载湿颗粒第一干燥，得到负载干颗粒；
9.将包被液包被所述负载干颗粒，得到包被湿颗粒，所述包被液包括包被剂，所述包被剂包括水溶性粘合剂；
10.将所述包被湿颗粒第二干燥，得到所述功能化水产膨化颗粒饲料。
11.优选的，所述包被剂包括淀粉、糊精、聚乙烯醇、羧甲基纤维素中的一种或多种；
12.所述包被液中包被剂的质量百分含量为0.5～20％。
13.优选的，所述包被时包被液的温度为50～60℃，所述包被的保温时间为1～30s。
14.优选的，所述功能制剂稀释液中的功能制剂的体积和所述水产膨化颗粒饲料的质量之比为(0.04～4)ml:1g。
15.优选的，所述功能制剂稀释液中功能制剂的体积百分含量为20～80％。
16.优选的，所述浸渍的时间为60～600s。
17.优选的，所述第一干燥和第二干燥的温度独立地为35～40℃，所述第一干燥和第二干燥的保温时间独立地为24～72h。
18.优选的，所述功能制剂包括免疫制剂、微生态制剂和水产药物中的一种或多种。
19.优选的，所述功能制剂为变形假单胞菌全菌免疫刺激复合物疫苗时，所述功能化水产膨化颗粒饲料含免疫制剂的蛋白量为0.4～120g/kg。
20.本发明提供了上述技术方案所述制备方法制备的功能化水产膨化颗粒饲料，包括负载颗粒和包裹于所述负载颗粒表面的包被层，所述负载颗粒包括水产膨化颗粒饲料和功能制剂，所述包被层包括水溶性粘合剂。
21.本发明提供一种功能化水产膨化颗粒饲料的制备方法，包括以下步骤：将功能制剂稀释液浸渍水产膨化颗粒饲料，得到负载湿颗粒；将所述负载湿颗粒第一干燥，得到负载干颗粒；将包被液包被所述负载干颗粒，得到包被湿颗粒，所述包被液包括包被剂，所述包被剂包括水溶性粘合剂；将所述包被湿颗粒第二干燥，得到所述功能化水产膨化颗粒饲料。本发明提供的制备方法首先采用功能制剂稀释液浸渍水产膨化颗粒饲料，通过简单的方式实现功能制剂和水产膨化颗粒饲料的结合，然后将得到的负载颗粒采用包被液包被，其中，所述包被剂包括水溶性粘合剂；从而使得到的功能化水产膨化颗粒饲料能够实现较长时间防止功能制剂散失，有利于水产生物的有效吞食，提高水产生物的免疫保护力。在本发明的实施例中，本发明提供的功能化水产膨化颗粒饲料实现32分钟内功能制剂不散失，当功能制剂为免疫制剂时，包被出的功能化水产膨化颗粒饲料比未包被功能制剂的水产膨化颗粒饲料口服免疫大黄鱼诱导抵御病原攻毒的相对免疫保护力高达73.3％。
具体实施方式
22.本发明提供一种功能化水产膨化颗粒饲料的制备方法，包括以下步骤：
23.将功能制剂稀释液浸渍水产膨化颗粒饲料，得到负载湿颗粒；
24.将所述负载湿颗粒第一干燥，得到负载干颗粒；
25.将包被液包被所述负载干颗粒，得到包被湿颗粒，所述包被液包括包被剂，所述包被剂包括水溶性粘合剂；
26.将所述包被湿颗粒第二干燥，得到所述功能化水产膨化颗粒饲料。
27.在本发明中，如无特殊说明，所用原料均为本领域技术人员熟知的市售产品。
28.本发明将功能制剂稀释液浸渍水产膨化颗粒饲料，得到负载湿颗粒。
29.在本发明中，所述功能制剂稀释液中功能制剂的体积百分含量优选为20～80％，更优选为25～75％，最优选为30～70％。
30.在本发明中，所述功能制剂优选包括免疫制剂、微生态制剂和水产药物中的一种或多种。
31.在本发明的具体实施例中，所述功能制剂具体优选为免疫制剂。
32.在本发明中，所述免疫制剂优选包括变形假单胞菌疫苗。
33.在本发明的具体实施中，所述功能制剂具体优选为变形假单胞菌全菌免疫刺激复合物疫苗；所述变形假单胞菌全菌免疫刺激复合物疫苗中的菌体蛋白的含量优选为10～30mg/ml。
34.在本发明中，所述功能制剂优选为变形假单胞菌全菌免疫刺激复合物疫苗时，所述功能化水产膨化颗粒饲料含免疫制剂的蛋白量优选为0.4～120g/kg，更优选为2～20g/kg。
35.在本发明中，所述变形假单胞菌全菌免疫刺激复合物疫苗的制备方法优选包括以
下步骤：
36.将变形假单胞菌进行预扩增与扩大培养，得到培养后的变形假单胞菌菌液；
37.将培养后的变形假单胞菌菌液中的变形假单胞菌进行灭活处理，得灭后菌液；
38.将灭活的菌液进行无活菌检验后离心收集灭活的变形假单胞菌；
39.将收集定容的灭活的变形假单胞菌进行n-癸酰基-n-甲基葡糖胺(mega-10)裂解，得到mega-10裂解的菌体粗蛋白；
40.将mega-10裂解的菌体粗蛋白进行超声波破碎，得到超声裂解的菌体蛋白；
41.将超声裂解的菌体蛋白和磷酸盐缓冲液混合，得到裂解菌液；
42.将裂解菌液、皂苷、卵磷脂和胆固醇混合，得到免疫刺激复合物；
43.将所述免疫刺激复合物进行超声波破碎，得到所述变形假单胞菌全菌免疫刺激复合物疫苗。
44.本发明将变形假单胞菌进行预扩增与扩大培养，得到培养后的变形假单胞菌培养菌液。
45.在本发明中，所述变形假单胞菌进行预扩增与扩大培养的方法优选为：选择tsb培养基；将经常规检测合格的变形假单胞菌毒株接种到含有tsb的细菌培养物的100ml tsb的250ml三角瓶中，在18～28℃恒温、100～250转/分钟的条件下振荡培养14～18小时，将该培养液作为种子液；以0.5～5％预扩增的培养物接种于2000ml三角瓶的新鲜高压灭菌的1000ml tsb培养液中在18～28℃恒温、100～250转/分钟的条件下振荡培养18～24小时；即为变形假单胞菌培养菌液。
46.得到培养后的变形假单胞菌培养菌液后，本发明将培养后的变形假单胞菌培养菌液中的变形假单胞菌进行灭活处理，得灭后菌液；
47.在本发明中，所述灭活的方法优选为：将菌液收集于灭菌瓶中，添加终浓度v/v体积百分比为0.1～0.5％的福尔马林，瓶内室温过夜或经过48小时，可彻底灭活。
48.得灭后菌液；本发明将灭活的菌液进行无活菌检验后离心收集灭活的变形假单胞菌。
49.在本发明中，所述的无菌检验的方法优选为：充分摇匀细菌，灭菌枪头吸取0.2～1.0ml的灭活菌液，超净工作台上铺平板，放置18～28℃恒温培养箱培养48小时，灭菌完全的培养物应当没有菌落出现，试验设空白平板对照。
50.在本发明中，所述的离心收集优选为：在8000～12000转/分钟的转速下，离心20～30分钟，收集、浓缩细菌；培养细菌的生物量的湿重优选为10～30g/l；所述的离心收集的细菌用灭菌生理盐水重悬，每升菌苗的离心后定容至生物量400～600g/l。
51.收集灭活的变形假单胞菌后，本发明将收集的灭活变形假单胞菌进行mega-10裂解，得到mega-10裂解的菌体粗蛋白。
52.在本发明中，所述mega-10裂解程序优选为：将mega-10按0.5～5g/l加至已灭活、定容的浓缩菌液中置于35-40℃恒温裂解3～5小时。
53.得到mega10裂解的菌体粗蛋白后，本发明将得到裂解的菌体粗蛋白进行超声波破碎(以下称为第一超声波破碎)，得到超声裂解的菌体蛋白。
54.在本发明中，所述第一超声波破碎优选为：采用市售的jy98-3d超声波破碎仪，超声波的超声探头的直径为20mm，超声功率设为800瓦；将超声波破碎仪用70％酒精进行洁净
消毒；将灭活的200～400ml的浓缩菌液放入专用超声杯中，待浓缩菌液预冻或预溶至留有少量冰晶时进行低温超声破碎、控制超声破碎仓内温度不高于35℃。
55.在本发明中，所述第一超声波破碎的作用程序优选为：间隔时间10s，工作时间5s，如此循环反复作用总时间为6分钟/轮；共作用3轮，全程时间为18分钟，实际作用时间为6分钟；指针显示的输出起始功率在720瓦，最后阶段的功率设置值800瓦。
56.得到超声裂解的菌体蛋白后，本发明将超声裂解的菌体蛋白和磷酸盐缓冲液混合，得到裂解菌液。
57.在本发明中，所述裂解菌液中细菌蛋白浓度优选为10～30mg/ml。
58.得到裂解菌液后，本发明将裂解菌液、皂苷、卵磷脂和胆固醇混合，得到免疫刺激复合物。
59.在本发明中，所述混合时，每100ml裂解菌液中添加0.05～0.2g的0.05-0.2％w/v的皂苷和每1ml菌液中各添加终浓度100～150μg/ml的卵磷脂和胆固醇。
60.在本发明中，所述卵磷脂和胆固醇优选分别溶解于氯仿中配成100～150mg/ml储存液，现配现用或于-20℃冻存备用。
61.得到免疫刺激复合物后，本发明将所述免疫刺激复合物进行超声波破碎(以下称为第二超声波破碎)，得到所述变形假单胞菌全菌免疫刺激复合物疫苗。
62.在本发明中，所述第二超声波破碎之前，本发明优选将所述免疫刺激复合物预冻或预溶至留有少量冰晶时进行所述超声波破碎。
63.在本发明中，所述第二超声波破碎优选为低温超声破碎；所述第二超声波破碎的超声破碎仓内温度不高于35℃；所述第二超声波破碎的程序设置优选为：间隔时间10秒，超声作用5秒，全程时间为18分钟；温度不高于60℃。
64.在本发明中，所述第二超声波破碎优选进行2次。
65.在本发明中，所述功能制剂稀释液优选包括功能制剂稀释液。
66.在本发明中，所述功能制剂稀释液优选包括氯化钠水溶液或磷酸盐缓冲液。
67.在本发明中，所述氯化钠水溶液的质量百分含量优选为0.1～10％，更优选为0.5～2％。
68.在本发明中，所述磷酸盐缓冲液优选为pbs磷酸盐缓冲液。
69.本发明对所述水产膨化颗粒饲料没有特殊要求，采用市售产品即可。
70.在本发明中，所述功能制剂稀释液中的功能制剂的体积和所述水产膨化颗粒饲料的质量之比优选为(0.04～4)ml:1g，更优选为(0.08～2)ml:1g，最优选为(0.1～0.8)ml:1g。
71.在本发明中，所述浸渍的温度优选为室温。
72.在本发明中，所述浸渍的时间优选为60～600s，更优选为100～500s，最优选为150～400s。
73.得到负载湿颗粒后，本发明将所述负载湿颗粒第一干燥，得到负载干颗粒。
74.在本发明中，所述第一干燥的温度优选为35～40℃，更优选为37℃。
75.在本发明中，所述第一干燥的保温时间优选为24～72h，更优选为48～60h。
76.得到负载干颗粒后，本发明将包被液包被所述负载干颗粒，得到包被湿颗粒，所述包被液包括包被剂，所述包被剂包括水溶性粘合剂。
77.在本发明中，所述包被液优选包括包被剂和包被稀释液。
78.在本发明中，所述包被剂优选包括淀粉、糊精、聚乙烯醇、羧甲基纤维素中的一种或多种。
79.在本发明中，所述包被稀释液优选包括氯化钠水溶液或磷酸盐缓冲液。
80.在本发明中，所述氯化钠水溶液的质量百分含量优选为0.1～10％，更优选为0.5～2％。
81.在本发明中，所述磷酸盐缓冲液优选为pbs磷酸盐缓冲液。
82.在本发明中，所述包被液的质量百分含量优选为0.5～20％，更优选为1～10％。
83.在本发明中，所述包被液的配置方法优选为将所述包被剂和包被稀释液混合后加热至所述包被剂完全溶解。
84.在本发明中，所述加热的温度优选为100℃。
85.在本发明中，所述包被时包被液的温度优选为50～60℃，更优选为52～55℃。
86.在本发明中，所述包被的保温时间优选为1～30s，更优选为2～20s。
87.得到包被湿颗粒后，本发明将所述包被湿颗粒第二干燥，得到所述功能化水产膨化颗粒饲料。
88.在本发明中，所述第二干燥的温度优选为35～40℃，更优选为37℃。
89.在本发明中，所述第二干燥的保温时间优选为24～72h，更优选为48～60h。
90.本发明提供了上述技术方案所述制备方法制备的功能化水产膨化颗粒饲料。
91.本发明提供的功能化水产膨化颗粒饲料能够实现32分钟内防止功能制剂散失；当功能制剂为免疫制剂时，包被出的功能化水产膨化颗粒饲料比未包被功能制剂的水产膨化颗粒饲料口服免疫大黄鱼诱导抵御病原攻毒的相对免疫保护力高达73.3％。
92.为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
93.实施例1
94.选择tsb培养基；将经常规检测合格的变形假单胞菌毒株接种到含有tsb的细菌培养物的100ml tsb的250ml三角瓶中，在18～28℃恒温、100～250转/分钟的条件下振荡培养14～18小时，将该培养液作为种子液；以0.5～5％预扩增的培养物接种于2000ml三角瓶的新鲜高压灭菌的1000ml tsb培养液中在18～28℃恒温、100～250转/分钟的条件下振荡培养18～24小时；即为变形假单胞菌培养菌液。
95.对培养后的菌液中的变形假单胞菌进行灭活，将菌液收集于灭菌瓶中，添加终浓度为0.1～0.5％(v/v体积百分比)的福尔马林，瓶置于室温过夜或经过48小时，可彻底灭活。为了确保彻底灭活需对灭菌后灭菌瓶中的菌液(即灭活菌液)进行无菌检验，无菌检验的方法是：充分摇匀灭菌后的灭活菌液，灭菌枪头吸取0.2～1.0ml的灭活菌液，超净工作台上铺平板，放置18～28℃恒温培养箱培养48小时，灭菌完全的培养物应当没有菌落出现，试验设空白平板对照。
96.在8000～12000转/分钟的转速下，离心20～30分钟，收集、浓缩细菌；培养细菌的生物量(湿重)应为10～30g/l；所述的离心收集的细菌用灭菌生理盐水重悬，每升菌苗的离心后定容至生物量400～600g/l。
97.上述经过大量培养、灭活及离心浓缩、收集的灭活细菌即为菌苗的半成品。
98.将变形假单胞菌菌苗的半成品进行mega-10裂解，得到mega-10裂解的菌体粗蛋白。
99.采用市售的jy98-3d超声波破碎仪，超声波的超声探头(又称为变幅杆)的直径为20mm，超声功率设为800瓦；将超声波破碎仪用70％酒精进行洁净消毒；将灭活的200～400ml的浓缩菌液放入专用超声杯中，待浓缩菌液预冻或预溶至留有少量冰晶时进行低温超声破碎；破碎的作用程序为：间隔时间10秒，工作时间5秒，如此循环反复作用总时间为6分钟/轮。共作用3轮，全程时间为18分钟，实际作用时间为6分钟。指针显示的输出起始功率在720瓦左右，最后阶段的功率可接近设置值800瓦。
100.第一次超声波裂解后的用灭菌磷酸盐缓冲液(pbs)调整细菌蛋白浓度至10～30mg/ml。在超声裂解的菌体蛋白中、每100ml菌液中添加0.05～0.2g的0.05～0.2％(w/v)的皂苷(quila)(出处accurate chemical&scientific corporation)和每1ml菌液中各添加100～150μg/ml的卵磷脂和胆固醇，得到免疫刺激复合物，待预冻或预溶至留有少量冰晶时，置于超声波破碎仪内进行低温超声破碎、控制超声破碎仓内温度不高于35℃。程序设置为：间隔时间10秒，超声作用5秒，全程时间为1分钟。温度不高于60℃。在洁净条件下，将超声处理的免疫刺激复合物收集于500ml灭菌疫苗专用塑料瓶内混匀后，测定免疫刺激复合物蛋白浓度，用灭菌pbs调整免疫刺激复合物的蛋白浓度至10～30mg/ml。二次超声处理后得到制品即为变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗，将制得的免疫刺激复合物疫苗-20℃冻存备用。
101.将变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗和氯化钠水溶液(质量百分含量为1％)混合，得到变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗稀释液(蛋白浓度至10～30mg/ml)，变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗稀释液中，变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗的体积百分含量为50％；
102.将水产膨化颗粒饲料浸渍于变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗稀释液中，其中变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗和水产膨化颗粒饲料的质量比为(0.04～4):1，浸渍时间为500s，得到浸渍颗粒；
103.将浸渍颗粒与37℃条件下干燥48～60h，得到负载颗粒；
104.将包被剂和氯化钠水溶液(质量百分含量为1％)混合后，加热至100℃将包被剂完全溶解，得到包被液；
105.将负载颗粒浸没于包被液中包被，包被时，包被液的温度为55℃，包被的保温时间为20s，固液分离后得到湿包被颗粒。
106.将湿包被颗粒于37℃干燥60h，得到功能化水产膨化颗粒饲料。
107.实施例2
108.变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗的制备方法与实施例1相同；
109.将变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗和氯化钠水溶液(质量百分含量为1％)混合，得到变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗稀释液(蛋白浓度至10～30mg/ml)，变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗稀释液中，变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗的体积百分含量为80％；
110.将水产膨化颗粒饲料浸渍于变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗稀释液中，其中变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗和水产膨化颗粒饲料的质量比为(0.04～4):1，浸渍时间
为300s，得到浸渍颗粒；
111.将浸渍颗粒与37℃条件下干燥48h，得到负载颗粒；
112.将包被剂和氯化钠水溶液(质量百分含量为1％)混合后，加热至100℃将包被剂完全溶解，得到包被液；
113.将负载颗粒浸没于包被液中包被，包被时，包被液的温度为55℃，包被的保温时间为15s，固液分离后得到湿包被颗粒。
114.将湿包被颗粒于37℃干燥48～60h，得到功能化水产膨化颗粒饲料。
115.实施例3
116.变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗的制备方法与实施例1相同；
117.将变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗和氯化钠水溶液(质量百分含量为1％)混合，得到变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗稀释液(蛋白浓度至10～30mg/ml)，变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗稀释液中，变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗的体积百分含量为20％；
118.将水产膨化颗粒饲料浸渍于变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗稀释液中，其中变形假单胞菌免疫刺激复合物疫苗和水产膨化颗粒饲料的质量比为(0.04～4):1，浸渍时间为200s，得到浸渍颗粒；
119.将浸渍颗粒与37℃条件下干燥24h，得到负载颗粒；
120.将包被剂和氯化钠水溶液(质量百分含量为1％)混合后，加热至100℃将包被剂完全溶解，得到包被液；
121.将负载颗粒浸没于包被液中包被，包被时，包被液的温度为55℃，包被的保温时间为10s，固液分离后得到湿包被颗粒。
122.将湿包被颗粒于37℃干燥30h，得到功能化水产膨化颗粒饲料。
123.测试例1：
124.实施例1制备的功能化水产膨化颗粒饲料在海水中的释放试验
125.取6个100ml透明玻璃烧杯，分别装入海水50ml；分设三个试验组，试验1组为水产膨化颗粒饲料，试验2组为未包被的负载颗粒饲料，试验3组为功能化水产膨化颗粒饲料，每组两个平行；各取5g试验饲料颗粒，分别同时投入装有海水的玻璃烧杯中(模拟大黄鱼投料)；用计时器计时，于1分钟、2分钟、4分钟、8分钟、16分钟、32分钟分别观察并取样1ml；通过间接elisa方法分别测定待测样品elisa-od
492
值(待测样品原液包被4℃过夜，37℃封闭2小时；一抗pse鼠抗血清1：200，37℃孵育2小时；二抗hrp羊抗鼠1：10000，37℃孵育2小时；opd显色30分钟、2mol/l硫酸终止；酶标仪读数od
492
值)。
126.试验结果如表1所示。
127.表1功能化水产膨化颗粒饲料海水释放试验elisa-od
492
值
[0128][0129]
由表1可以得出，本发明制作的功能化水产膨化颗粒饲料泡水32分钟仍不溃散，说明包被效果好；本发明的包被方法可防止免疫制剂散失，避免浪费甚至污染水质。
[0130]
测试例2
[0131]
功能化水产膨化颗粒饲料在海水网箱养殖大黄鱼中的应用
[0132]
本试验于2020年5月至6月在福建省宁德市蕉城区大湾海水网箱大黄鱼养殖场进行。每个网箱面积长2米
×
宽2米＝4平方米，网箱深2米；每个海水网箱放养大黄鱼300尾，大黄鱼平均规格50克/尾；设一个对照组，一个实验组，每组三个平行，即每组三个网箱；对照组饲喂普通大黄鱼颗粒饲料即未包被功能制剂的水产膨化颗粒饲料，试验组投喂功能化水产膨化颗粒饲料；口服免疫大黄鱼接种程序为：连续投喂7天、停7天、再连续投喂7天。试验投喂结束后均饲喂普通大黄鱼颗粒饲料，第7天、14天、21天分别随机采样至0.1立方米海水(增氧)塑料圆桶内进行免疫保护力测定；大黄鱼免疫保护力实验设对照组和实验组，每组两个平行，即每组两个塑料圆桶；每个0.1立方米塑料圆桶内2/3海水增氧养殖大黄鱼30尾(规格约为50克/尾)；菌毒浓度为1
×
105cfu/ml，每尾0.2ml腹腔注射攻毒，观察7d，剖检试验鱼并记录试验结果，测定相对免疫保护率。
[0133]
试验结果如表2所示。
[0134]
表2功能化水产膨化颗粒饲料口服免疫大黄鱼的相对免疫保护率
[0135][0136]
由表2可以得出，在口服免疫大黄鱼的应用试验中发现，功能化水产膨化颗粒饲料饲喂海水网箱大黄鱼时8分钟内吃完，免疫制剂不散失至海水中，而饲喂至大黄鱼消化道后又可缓慢释放从而达到口服免疫效果；与对照相比，功能化水产膨化颗粒饲料投喂大黄鱼21天后可抵御病原攻毒的相对保护率达73.3％，成活率显著高于对照组；综合评估，使用本发明的功能化水产膨化颗粒饲料饲喂大黄鱼，可以增强大黄鱼抗病力、提高成活率和生长速度，有效降低化学药物的使用量。
[0137]
由上述实施例可知，本发明提供的功能化水产膨化颗粒饲料能够有效防止功能制剂(免疫制剂)散失，于海水中32分钟不溃散；本发明提供的功能化水产膨化颗粒饲料口服免疫大黄鱼能诱导受免鱼产生免疫应答，21天相对免疫保护率达73.3％。
[0138]
以上所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例；本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明选定的实施例；基于本发明中的实施例，本领域的普通技术人员来说，在没有作出创造性劳动的前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明的保护范围。