一种基于衍生化技术同时检测替格瑞洛合成中间体TKG中三种不同异构体的方法与流程

技术特征：
1.一种基于衍生化技术同时检测替格瑞洛合成中间体tkg中三种不同异构体的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)制备样品：系统适用性溶液：以tkg及其三种异构体对照品制备系统适用性溶液。供试品溶液：以待检测样品tkg制备供试品溶液；自身对照溶液：对应供试品溶液稀释1000倍。(2)制备衍生化样品溶液：以邻苯二甲醛、三乙胺、巯基乙醇、甲醇制备衍生化试剂，衍生样品，即配即检；(3)高效液相色谱条件：以十八烷基键合硅胶为固定相的色谱柱及以硅胶表面敷有纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)为固定相色谱柱串联作为分离中心，进行梯度洗脱，检测条件为：色谱柱：agilent sb c18或效能相当色谱柱；daicel od-rh或效能相当色谱柱；流动相a：0.2～0.3％三乙胺溶液(ph6～7)-乙腈(60:40～70:30,v/v)；流动相b：0.2～0.3％三乙胺溶液(ph6～7)-乙腈(10:90～30:70,v/v)；柱温：20～40℃检测波长：335nm～345nm流速：0.8～1.2ml/min进样体积：5～50μl洗脱梯度如下：时间a(％)b(％)01000251000280100300100351000401000(4)按自身对照法以峰面积计算，分别得到tkg中三种不同异构体含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，系统适用性溶液tkg浓度为2～10mg/ml，tkg三种异构体浓度均为2～10μg/ml；供试品溶液浓度为2～10mg/ml。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)、(2)中，所制备溶液的溶剂为纯化水。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，采用方法为柱前衍生化，衍生化试剂配制方法：精密称定邻苯二甲醛360～440mg，100ml量瓶中适量甲醇溶解，加入0.9～1.1ml三乙胺和0.36～0.44ml巯基乙醇，甲醇稀释到刻度，摇匀，即得。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，衍生化方法：1～2ml样品溶液置5ml量瓶中，加入1～2ml衍生化试剂，用水稀释至刻度，摇匀。

技术总结
本发明属于药物分析技术领域，特别涉及了一种基于衍生化技术同时检测替格瑞洛合成中间体TKG中三种不同异构体的方法。包括以下步骤：a、制备样品溶液；b、衍生化样品溶液；c、高效液相色谱检测：采用C18及手性柱串联分离系统；d、以自身对照法计算TKG中异构体含量。本发明提供了一种同时检测替格瑞洛合成中间体TKG中三种不同异构体的新的检测方法，本方法衍生化效果显著，各异构体杂质峰之间以及杂质峰和主峰间分离度均较高，各峰互相之间无干扰，实现了一种方法同时定量检测三种不同异构体(TKG对映异构体、TKG非对映异构体-1、TKG非对映异构体-2)。2)。


技术研发人员：黄秀蓉 李娟 杨吉宁 张艳
受保护的技术使用者：苏州康恒研新药物技术有限公司
技术研发日：2022.03.02
技术公布日：2022/6/28