可控聚合物薄膜修饰电极、其制备方法及木犀草素的检测方法

1.本发明属于电化学分析方法技术领域，具体涉及一种可控聚合物薄膜修饰电极、其制备方法及木犀草素的检测方法。


背景技术：

2.木犀草素是一种重要的天然抗氧化剂,化学名为3＇,4＇,5,7-四羟基黄酮，分子式为c
15h10
o6，具有c
6-c
3-c6结构，含有(a,b)两个苯环，含氧的c环和c2-c3双键，具有弱酸性。木犀草素普遍存在于芹菜、香菜、青椒、菊花、胡萝卜和紫苏叶等植物中，具有多种生物活性和药理作用，如抗菌、抗炎、抗氧化、预防白内障以及心血管保护。近年来的研究还表明木犀草素可通过抑制细胞内某些激酶的活性和阻滞细胞周期对肿瘤细胞增殖起到抑制作用，此外木犀草素还能诱导肿瘤细胞发生凋亡。在中药中，富含木犀草素的植物被用来治疗高血压、炎症和癌症等疾病。
3.包括薄层色谱法(tlc)、高效液相色谱法(hplc)、紫外分光光度法(uv)、和毛细管电泳(ce)等多种技术应用在木犀草素的检测上。这些技术虽然具有灵敏度较高，准确性较好的优点，但是也存在耗时，操作复杂，成本昂贵等缺点。而电化学技术具有简便、快速、灵敏、仪器成本较低等特点获得科学界广泛关注。目前，多种用于检测木犀草素的电化学分析方法被提出，并被证明能够应用于木犀草素的痕量分析。例如，尚永辉等人利用n-丁基吡啶三氟甲磺酸盐离子液体制备了修饰碳糊电极，研究了木犀草素在n-丁基吡啶三氟甲磺酸盐([bpy]otf)修饰碳糊电极上的电化学行为。实验发现在ph＝3.0的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲体系中，木犀草素在0.6221v和0.4267v处产生一对明显的氧化还原峰，电流信号分别是裸电极的2.06倍，5.8倍，表明[bpy]otf对木犀草素具有一定的催化增敏效果，并在此基础上研究了木犀草素与牛血清蛋白之间的相互作用。温校勇等人用正己基吡啶六氟磷酸盐作为粘合剂制备了离子液体修饰碳糊电极(cile)，并将钯-石墨烯(pd-gr)复合材料修饰于cile表面制得修饰电极(pd-gr/cile)，然后利用循环伏安法和示差脉冲伏安法(dpv)对木犀草素在该修饰电极上的电化学行为进行研究。结果表明在ph 1.5的磷酸盐缓冲溶液中木犀草素在该电极上循环伏安扫描得一对峰形良好的氧化还原峰，说明木犀草素的电化学反应得以实现。在实验所测得的优化条件下，发现木犀草素的氧化峰电流与其浓度在1.0
×
10-9
～1.0
×
10-6
mol/l内存在线性关系，检测限为3.3
×
10-10
mol/l(3σ)。接着利用本方法测定独一味胶囊中木犀草素的含量，检测得到回收率在95.6％～104.8％范围内，相对标准偏差(rsd)低于3.43％。王善善等人将新型的c
60
吡咯烷衍生物(fpd)的异构体之一修饰于玻碳电极表面，然后通过循环伏安法研究了木犀草素在fpd/gce上的电化学行为，结果显示该电极对木犀草素的氧化还原过程具有良好的电催化活性。而在最优实验条件下，在2
×
10-8
mol/l～2
×
10-5
mol/l浓度区间范围内，氧化峰电流与木犀草素的浓度呈良好的线性关系，其线性方程为：i
pc
＝-0.0103c-3.5955(r2＝0.9901)，检测限为6.6
×
10-9
mol/l。结果表明所制备的修饰电极对木犀草素的测定具有较高的灵敏度和良好的选择性。
[0004]
尽管电化学法用于木犀草素检测的文献已有一些相关报道，但传感器的制备方法的优化、传感器选择性的改善和灵敏度的提高仍然是科研工作者致力于研究的热点。


技术实现要素：

[0005]
基于此，本发明提供一种可控聚合物薄膜修饰电极，以解决现有技术中存在的利用电化学分析方法检测木犀草素时，选择性较差，灵敏度较低的技术问题。
[0006]
本发明还提供一种可控聚合物薄膜修饰电极的制备方法，方法简单，可操作性强，重复性强，聚合物薄膜厚度受控。
[0007]
本发明还提供一种木犀草素的检测方法，基于上述可控聚合物薄膜修饰电极，检测方法具有良好的灵敏度，较好的选择性，且有较好的重现性。
[0008]
本发明解决上述技术问题的技术方案如下：
[0009]
一种可控聚合物薄膜修饰电极，包括：
[0010]
玻碳电极；以及
[0011]
修饰在所述玻碳电极上的聚合物薄膜，所述聚合物薄膜由β-环糊精和1-羟乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐的聚合物组成。
[0012]
一种可控聚合物薄膜修饰电极的制备方法，包括以下步骤：
[0013]
准备玻碳电极；
[0014]
配置β-cd-il溶液：将β-环糊精和il溶液混合，形成β-cd-il溶液；其中，所述il溶液由1-羟乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐和超纯水配置；
[0015]
制作可控聚合物薄膜修饰电极：将所述玻碳电极放入β-cd-il溶液中，在0～1.3v电位范围内用循环伏安法连续扫描，取出后用超纯水冲洗，室温干燥后即可获得所述可控聚合物薄膜修饰电极。
[0016]
优选地，所述il溶液中，1-羟乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐的体积浓度为1％～7.5％。
[0017]
优选地，所述il溶液中，1-羟乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐的体积浓度为5％。
[0018]
优选地，所述β-cd-il溶液中，β-环糊精的浓度为0.005mol/l～0.02mol/l。
[0019]
优选地，所述β-cd-il溶液中，β-环糊精的浓度为0.01mol/l。
[0020]
优选地，步骤“制作可控聚合物薄膜修饰电极”中，将所述玻碳电极放入β-cd-il溶液中，在0～1.3v电位范围内用循环伏安法连续扫描10～25圈。
[0021]
一种木犀草素的检测方法，包括以下步骤：
[0022]
构建电化学传感器，所述电化学传感器以如上所述的可控聚合物薄膜修饰电极作为工作电极；
[0023]
获取待检样品溶液；
[0024]
构建电解液体系，所述电解液体系由abs缓冲液和所述待检样品溶液；
[0025]
检测木犀草素的浓度。
[0026]
优选地，所述abs缓冲液的ph值为2～5。
[0027]
优选地，所述“检测木犀草素的浓度”包括以下步骤：在室温下，采用方波伏安法，在开路电位下富集30s～120s。
[0028]
与现有技术相比，本发明至少具有以下优点：
[0029]
以β-环糊精和功能化离子液体1-羟乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐为聚合液，通过循环伏安法连续扫描，在玻碳电极上修饰聚合物薄膜，制备可控聚合物薄膜修饰电极，制备方法简单，具有较好的可操作性和重复性。基于所制备的可控聚合物薄膜修饰电极，采用电化学分析方法，检测中药样品中的木犀草素含量，木犀草素的氧化峰电流与浓度在两个范围内存在线性关系，其线性范围分别为：0.001～0.1μm(线性方程为i(μa)＝49.4479c(μm) 1.7985(r2＝0.9934)和0.1～10μm(线性方程为i(μa)＝2.3152c(μm) 4.3166(r2＝0.9965))，检测限为0.5nm(s/n＝3)，具有较高的灵敏度和较宽的线性范围。而且，500倍的na

、k

、ca
2
、mg
2
以及200倍葡萄糖、尿酸、酪氨酸等对5μm木犀草素的峰电流影响较小(相对标准偏差小于
±
5％)，说明该方法具有较好的选择性。同时，实验还表明，基于所制备的可控聚合物薄膜修饰电极，采用电化学分析方法，检测中药样品中的木犀草素含量，重复性及稳定性能够得到保障。
附图说明
[0030]
图1为(a)gce；(b)il/gce；(c)β-cd-il/gce在5mm探针中的循环伏安图，扫速：50mv s-1
。
[0031]
图2为10μm木犀草素在(a)gce；(b)il/gce；(c)β-cd-il/gce的方波伏安图。
[0032]
图3为聚合液中il的浓度对10μm木犀草素氧化峰电流的影响。
[0033]
图4为聚合圈数对10μm木犀草素峰电流的影响。
[0034]
图5为10μm木犀草素在不同ph值的0.2m abs溶液中的方波伏安图(ph：a-f：2，3，4，5，6，7)。
[0035]
图6为ph值对10μm木犀草素峰电流和峰电位的影响。
[0036]
图7富集时间对10μm木犀草素氧化峰电流的影响。
[0037]
图8为不同浓度(高浓度)木犀草素的方波伏安图(浓度从下到上分别为:0.1，0.5，1，5，10μm木犀草素，其中，插图为木犀草素峰电流与浓度的线性关系图)。
[0038]
图9为不同浓度(低浓度)木犀草素的方波伏安图(浓度从下到上分别为:0.0005，0.001，0.005，0.01，0.05，0.1μm木犀草素，其中，插图为木犀草素峰电流与浓度的线性关系图)。
具体实施方式
[0039]
需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。以下将结合本发明实施例的附图，对本发明的技术方案做进一步描述，本发明不仅限于以下具体实施方式。
[0040]
需要理解的是，实施例的附图中相同或相似的标号对应相同或相似的部件。在本发明的描述中，需要理解的是，若有术语“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“顶”、“底”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的设备或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此附图中描述位置关系的用语仅用于示例性说明，不能理解为对本专利的限制，对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语的具体含义。
[0041]
一具体实施方式中，一种可控聚合物薄膜修饰电极，包括：玻碳电极；以及修饰在
所述玻碳电极上的聚合物薄膜，所述聚合物薄膜由β-环糊精和1-羟乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐的聚合物组成。
[0042]
又一具体实施方式中，一种可控聚合物薄膜修饰电极的制备方法，包括以下步骤：
[0043]
s10.准备玻碳电极。
[0044]
具体地，玻碳电极(gce)在使用之前首先依次用1.0μm、0.3μm、0.05μm的氧化铝(al2o3)粉末打磨抛光成镜面,接着用无水乙醇和超纯水超声清洗10min,室温晾干备用。
[0045]
s20.配置β-cd-il溶液：将β-环糊精和il溶液混合，形成β-cd-il溶液；其中，所述il溶液由1-羟乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐和超纯水配置。
[0046]
配置il溶液：准确量取指定体积的1-羟乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐于100ml容量瓶中，使用超纯水定容至100ml，摇匀，制备指定体积浓度的il溶液备用。作为优选，il溶液的体积浓度为1％～7.5％。例如，准确量取5ml的1-羟乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐于100ml容量瓶中，使用超纯水定容至100ml，摇匀，制备体积浓度为5％的il溶液，备用。
[0047]
配置β-cd-il溶液：准确量取预定质量的β-cd于10ml容量瓶中，用指定浓度的il溶液定容至10ml，摇匀，备用。作为优选，所述β-cd-il溶液中，β-环糊精的浓度为0.005mol/l～0.02mol/l。例如，准确量取0.1135g(0.0001mol)的β-cd于10ml容量瓶中，用5％il定容至10ml，摇匀，备用。
[0048]
s30.制作可控聚合物薄膜修饰电极：将所述玻碳电极放入β-cd-il溶液中，在0～1.3v电位范围内用循环伏安法连续扫描，取出后用超纯水冲洗，室温干燥后即可获得所述可控聚合物薄膜修饰电极。
[0049]
作为优选，将所述玻碳电极放入β-cd-il溶液中，在0～1.3v电位范围内用循环伏安法连续扫描10～25圈。例如，将所述玻碳电极放入β-cd-il溶液中，在0～1.3v电位范围内用循环伏安法连续扫描15圈。
[0050]
又一具体实施方式中，一种木犀草素的检测方法，包括以下步骤：
[0051]
t10.构建电化学传感器，所述电化学传感器以如上所述的可控聚合物薄膜修饰电极作为工作电极。
[0052]
例如，以上述过程所制备的可控聚合物薄膜修饰电极(直径＝3.0mm)作为工作电极,饱和甘汞电极(sce)作为参比电极,铂丝电极作为对电极，构建电化学传感器。
[0053]
t20.获取待检样品溶液。
[0054]
如待检测样品为液体，则直接作为待检测样品溶液，或经稀释若干倍数后，作为待检测样品溶液。
[0055]
如待检测样品为固体，则需要从待检测样品中浸提得到待检测样品溶液。例如，待检测样品为独一味胶囊样品，则取几粒独一味胶囊，将药粉取出置中，磨成粉末；准确称取于容量瓶中，并用无水乙醇定容，再超声清洗30min后静置5～10min，取上清液，制得待检测样品溶液，备用。
[0056]
t30.构建电解液体系，所述电解液体系由abs缓冲液和所述待检样品溶液。
[0057]
作为优选，选用ph值为2～5的abs缓冲液作为电解液体系的主要电解质，然后再向abs缓冲液中加入适量的含木犀草素的待检测样品，即得到所述电解液体系。
[0058]
t40.检测木犀草素的浓度。
[0059]
基于所述电化学传感器及所述电解液体系，在室温下，采用方波伏安法，在开路电
位富集30s～120s，获取木犀草素的0.1～0.7v的伏安曲线，根据氧化峰电流和木犀草素的浓度的线性关系，直接或间接获取木犀草素的浓度。
[0060]
以下通过具体实验过程，进一步说明本发明的技术方案以及技术效果。
[0061]
下述实验过程所用到的试剂的来源、规格及实验仪器的类型如下：木犀草素(》98％，上海阿拉丁生化科技股份有限公司)、β-环糊精(国药集团化学试剂有限公司)、独一味胶囊(康县独一味生物制药公司)、离子液体(1-羟乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐)(》99％，兰州中科凯特科工贸有限公司)、乙醇、氯化钠、氯化镁、氯化钙、葡萄糖、尿酸、酪氨酸、氯化钾、醋酸、醋酸钠，以上试剂均为分析纯，其中醋酸-醋酸钠缓冲液(abs)由ch3cooh和ch3coona制备，实验中所有用水均为超纯水。
[0062]
电化学工作站：上海辰华电化学工作站(chi660e)，其中化学修饰玻碳电极(直径＝3.0mm)作为工作电极,饱和甘汞电极(sce)作为参比电极,铂丝电极作为对电极。ika磁力搅拌器(kmo2)。
[0063]
10mm木犀草素(lu)的配置：准确称取0.00286g木犀草素于离心管中，并用无水乙醇定容至1ml，摇匀，备用，其他浓度的木犀草素溶液配置方法相同。
[0064]
5％1-羟乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子(il)液体的制备：准确量取5ml 1-羟乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐于100ml容量瓶中，使用超纯水定容至100ml，摇匀，备用，其他浓度的il溶液的配置方法相同。
[0065]
β-cd-5％il溶液制备：准确量取0.1135gβ-cd于10ml容量瓶中，用5％il定容至10ml，摇匀，备用，其他浓度的β-cd-il溶液的配置方法相同。
[0066]
一、可控聚合物薄膜修饰电极的制备及修饰
[0067]
玻碳电极(gce)的预处理：gce在使用之前首先依次用1.0μm、0.3μm、0.05μm的氧化铝(al2o3)粉末打磨抛光成镜面,接着用无水乙醇和超纯水超声清洗10min,室温晾干备用。
[0068]
可控聚合物薄膜修饰电极(β-cd-il/gce)的制备：将打磨好的电极放入5mlβ-cd-5％il中，在0～1.3v电位范围内用循环伏安法(cv)连续扫描15圈，取出后用超纯水冲洗去掉未聚合的β-cd，室温干燥后即可获得β-cd-il/gce。作为对比，采用同法在5％il中聚合15圈制得il/gce，室温干燥后备用。
[0069]
二、实验过程
[0070]
利用三电极系统在-0.2～0.6v的电位范围内记录gce、il/gce、β-cd-il/gce三种电极在5mm探针溶液中的循环伏安曲线。在0.1～0.7v的电位范围使用gce、il/gce、β-cd-il/gce三种电极分别对木犀草素进行方波伏安扫描，研究木犀草素在这三种电极上的电化学行为。
[0071]
三、修饰电极的电化学表征
[0072]
考察了三种不同电极(a)gce；(b)il/gce；(c)β-cd-il/gce在5mm探针溶液中的循环伏安曲线，结果如图1所示。从曲线a可知，在gce上可以观察到一对可逆的氧化还原峰，其氧化峰电流(i
pa
)和还原峰电流(i
pc
)分别为90.07μa和90.64μa，且峰电位差(
△ep
)约为147mv，这是具有电化学活性的探针溶液(fe[(cn)6]
3-/4-溶液)在电极上的电化学表现。在il/gce(曲线b)上同样出现了一对可逆的氧化还原峰，其氧化峰电流(i
pa
)和还原峰电流(i
pc
)分别增长为100.5μa和100.6μa，而峰电位差(
△ep
)减少了35mv。这一现象表明具有高导电性能的功能化离子液体il在电极表面的电聚合能够促进探针的电子转移速率，使其电
化学响应信号增强。但是在β-cd-il/gce(曲线c)上氧化峰电流(i
pa
)和还原峰电流(i
pc
)却减小了，分别为85.11μa和88.16μa。这说明导电性能较差的聚β-环糊精已经成功修饰到电极表面。
[0073]
四、木犀草素的电化学行为
[0074]
考察了在ph 4.0的abs溶液中10μm木犀草素在三种不同电极上的方波伏安曲线。由图2可知，在0.1～0.7v的电位范围内，木犀草素在gce(曲线a)上0.396v处出现了峰电流约为9.737μa的氧化峰；在il/gce(曲线b)上，木犀草素的峰电流显著增加，峰电流约为24.56μa；而在β-cd-il/gce(曲线c)上，木犀草素的峰电流进一步增加，其峰电流(34.67μa)约为gce上的3.7倍。这是由于β-cd的主客体相互作用，能够有效地改善修饰电极对木犀草素的吸附性能，使得木犀草素在修饰电极表面的吸附量增加。结果表明，制备的修饰电极对木犀草素具有较好的电催化活性。
[0075]
五、聚合液中离子液体浓度对氧化峰电流的影响
[0076]
分别用浓度为0.5％、1％、2％、5％、7.5％(v/v)il作为溶剂配制β-cd溶液，β-cd的浓度为0.01mol/l。用打磨好的gce浸入到以上聚合液中进行电聚合，制备相应的聚合物薄膜修饰电极，并考察10μm木犀草素在修饰电极上的电化学响应。如图3所示，随着聚合液中离子液体浓度的变化，木犀草素的氧化峰电流也在随之改变，当聚合液中离子液体浓度为5％时制备的聚合物薄膜电极对木犀草素具有较大的响应电流。
[0077]
六、聚合圈数的影响
[0078]
聚合物薄膜的厚度可以由聚合圈数来控制，本实验考察了聚合圈数对木犀草素峰电流的影响。由图4可得，当聚合圈数从5圈增加到15圈时，木犀草素的氧化峰电流随着扫描圈数的增加而增加，当聚合圈数为15圈时，氧化峰电流达到最大值。而当聚合圈数进一步增加时，峰电流反而减小。该现象可能是由以下原因引起：适当厚度的聚β-cd薄膜能够有效地增加修饰电极对木犀草素的吸附容量，从而改善电极对木犀草素的响应能力，然而聚合物薄膜过厚反而会阻碍电子的转移速率引起响应电流的减小。
[0079]
七、醋酸盐缓冲液ph值对氧化峰电流和峰电位的影响
[0080]
在ph 2～7的范围内考察了不同ph的abs缓冲液对10μm木犀草素测定的影响，结果如图5和图6所示，当缓冲液的ph值变化时，氧化峰的峰电流及峰电位也随之改变。当ph为4.0时，氧化峰的峰电流达到最大值(图6)。当缓冲液ph增大时，木犀草素的氧化峰电位发生负移，表明有质子参与了电极的反应。氧化峰电位与ph值呈现良好的线性关系，线性方程为：e(v)＝-0.0514ph 0.6061(r2＝0.9916)。斜率51.4mvph-1
接近于理论值，表明木犀草素在修饰电极上发生了等电子等质子参与的电化学反应。
[0081]
八、富集电位及富集时间的影响
[0082]
先固定富集时间为60s，在-1.4～0.4v范围内改变富集电位，考察富集电位对木犀草素氧化峰电流的影响(结果未展示)。结果发现，在-1.1v的富集电位下出现最大峰电流，为29.16μa。同时，考察了开路电位富集下对木犀草素检测的影响。当富集时间为60s时，开路富集下木犀草素的峰电流约为32.08μa，稍大于富集电位下测得的峰电流。
[0083]
在开路电位下，在10～180s范围内改变富集时间(10s、30s、60s、90s、120s、150s、180s)，结果如图7所示，当富集时间为60s时，木犀草素的氧化峰电流最大。当富集时间大于60s时，随着富集时间的增加，反而引起氧化峰电流的降低。
[0084]
九、重现性、稳定性和干扰研究
[0085]
将β-cd-il/gce在10μm的木犀草素中用方波伏安法连续扫描6次，峰电流相对偏差为2.09％，由此表明β-cd-il/gce在ph 4.0的醋酸盐缓冲液中有较好的重现性。
[0086]
将β-cd-il/gce在室温下放置一个月后，测得其对木犀草素的响应电流值仅比初始电流下降3.8％，表明该传感器具有良好的稳定性。
[0087]
实验还考察了一些常见无机离子和有机物对木犀草素响应电流的影响。干扰研究表明，500倍的na

、k

、ca
2
、mg
2
以及200倍葡萄糖、尿酸、酪氨酸等对5μm木犀草素的峰电流影响较小(相对标准偏差小于
±
5％)，说明该方法具有较好的选择性。
[0088]
十、线性范围及检测限
[0089]
在最佳实验条件下，记录不同浓度的木犀草素在β-cd-il/gce上的方波伏安曲线，并绘制标准曲线，如图8所示。随着浓度的增加，木犀草素的氧化峰电流增加。由图可知，木犀草素的峰电流与浓度在两个范围内存在线性关系，其线性范围分别为：0.001～0.1μm(线性方程为i(μa)＝49.4479c(μm) 1.7985(r2＝0.9934)和0.1～10μm(线性方程为i(μa)＝2.3152c(μm) 4.3166(r2＝0.9965))，在信噪比为3的条件下，检测限为0.5nm。
[0090]
十一、实际样品检测
[0091]
为验证修饰电极的实际应用能力，本实验对独一味胶囊样品中的木犀草素进行测定。取6粒独一味胶囊，将药粉取出置中，磨成粉末；准确称得1.5g于100ml容量瓶中，并用无水乙醇定容至100ml，再超声清洗30min后静置5～10min，取上清液制得样品溶液，备用。结果如表1所示，测得样品溶液中木犀草素的平均含量为0.58μm，加标回收率为97.5％-99.5％，相对标准偏差小于4.17％。说明该方法能用于实际样品的检测。
[0092]
表1β-cd-il/gce测定样品中的木犀草素(n＝3a)
[0093][0094]
a测量三次的平均值
[0095]
由上述实验过程可知，本发明通过电化学聚合法制备了聚合物薄膜可控的β-cd-il/gce，并研究了木犀草素在该修饰电极上的电化学行为，通过聚合条件以及检测条件的优化建立了一种检测木犀草素的方法。聚β-cd能够有效地改善修饰电极对木犀草素的吸附能力，同时，高导电的离子液体能够促进木犀草素的电子转移，制备的电极对木犀草素具有很好的电催化活性，检测限达到了0.5nm。该传感器具有较好的灵敏度和选择性，可用于实际样品中木犀草素的检测。
[0096]
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范
围之内。