一种高效核酸提取试剂盒及其使用方法与流程

技术特征：
1.一种高效核酸提取试剂盒，其特征是，包括：裂解液、磁珠分散液、洗涤液和洗脱液；以重量份计，所述裂解液的组分包括：变性剂50~100份、表面活性剂10~30份、甘油5份、三羟甲基氨基甲烷2~5份、异丙醇200份、无机盐8~10份、水75~100份；所述洗涤液的组分包括：表面活性剂10~30份、缓冲液10份、水100份、无水乙醇300~400份；所述洗脱液的组分包括：三羟甲基氨基甲烷250~500份、硫柳汞钠1~2份、水500000份。2.根据权利要求1所述的核酸提取试剂盒，其特征是，所述裂解液中的变性剂选自盐酸胍、异硫氰酸胍、尿素中的一种或多种；所述裂解液中的表面活性剂选自吐温20、曲拉通x-100、np-40、sds中的一种或多种。3.根据权利要求1或2所述的核酸提取试剂盒，其特征是，所述裂解液中的无机盐选自氯化钠、氯化钾、氯化锂中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的核酸提取试剂盒，其特征是，所述洗涤液中的表面活性剂选自吐温20、曲拉通、np-40中的一种或多种；所述洗涤液中的缓冲液选自醋酸钠-醋酸缓冲液、醋酸钾-醋酸缓冲液、醋酸钠-盐酸缓冲液或醋酸钾-盐酸缓冲液中的一种，缓冲液的ph为5.5-7.5。5.根据权利要求1所述的核酸提取试剂盒，其特征是，所述磁珠分散液中磁珠的浓度为2~5mg/ml。6.一种如权利要求1~5任一所述的核酸提取试剂盒的使用方法，其特征是，包括如下步骤：（1）加样：将待提取的样本加入裂解液中；（2）磁珠转移：给磁珠分散液外加磁场吸附，将磁珠转移至步骤（1）得到的混合液中；（3）裂解与结合：将步骤（2）得到的混合液混匀后裂解1~3分钟，然后外加磁场吸附磁珠，将磁珠转移至洗涤液；（4）洗涤：震荡洗涤后外加磁场吸附磁珠，将磁珠转移至洗脱液；（5）洗脱：震荡洗脱后外加磁场吸附磁珠，转移洗脱液，得到核酸提取液。7.根据权利要求6所述的使用方法，其特征是，加入的样本、裂解液、磁珠分散液、洗涤液、洗脱液的体积比为4~6:10:10:10~16:1~2。8.根据权利要求6或7所述的使用方法，其特征是，步骤（4）中的洗涤时间为25~35s。9.根据权利要求6或7所述的使用方法，其特征是，步骤（5）中洗脱温度75-100℃，洗脱时间50~70s。

技术总结
本发明涉及核酸提取领域，公开了一种高效核酸提取试剂盒及其使用方法，试剂盒包括：裂解液，以重量份计，裂解液的组分包括：变性剂50~100份、表面活性剂10~30份、甘油5份、三羟甲基氨基甲烷2~5份、异丙醇200份、无机盐8~10份、水75~100份；磁珠分散液；洗涤液，以重量份计，洗涤液的组分包括：表面活性剂10~30份、缓冲液10份、水100份、无水乙醇300~400份；洗脱液，以重量份计，洗脱液的组分包括：三羟甲基氨基甲烷250~500份、硫柳汞钠1~2份、水500000份。本发明通过对裂解液、洗涤液和洗脱液组分的优化，提高了核酸提取效率，并提高了对含杂质较多样本的抗干扰能力。的抗干扰能力。的抗干扰能力。


技术研发人员：王稀莹 李杨霞 汪亮
受保护的技术使用者：江苏默乐生物科技股份有限公司
技术研发日：2021.11.23
技术公布日：2022/6/14