酶活提高的精氨酸脱亚胺酶突变体

技术特征：
1.精氨酸脱亚胺酶突变体，其特征在于，在奥氏嗜热盐丝菌(halothermothrix orenii)来源的精氨酸脱亚胺酶的基础上，进行了如下至少一种突变：(1)将第116位天冬氨酸突变为甘氨酸；(2)将第203位苏氨酸突变为甘氨酸；(3)将第103位丙氨酸突变为酪氨酸；(4)将第32位苏氨酸突变为酪氨酸；(5)将第345位甘氨酸突变为丙氨酸。2.编码权利要求1所述突变体的基因。3.携带权利要求2所述基因的重组质粒。4.表达权利要求1所述突变体的重组微生物细胞。5.根据权利要求4所述的重组微生物细胞，其特征在于，宿主细胞为细菌或真菌。6.一种重组大肠杆菌，其特征在于，以大肠杆菌bl21(de3)为宿主，以pet-28a为载体，表达权利要求1所述的精氨酸脱亚胺酶突变体。7.一种提高精氨酸脱亚胺酶酶活的方法，其特征在于，将奥氏嗜热盐丝菌来源的精氨酸脱亚胺酶第116位天冬氨酸突变为甘氨酸，或将第203位苏氨酸突变为甘氨酸，或将第103位丙氨酸突变为酪氨酸，或将第32位苏氨酸突变为酪氨酸，或将第345位甘氨酸突变为丙氨酸。8.一种生产精氨酸脱亚胺酶突变体的方法，其特征在于，将权利要求6所述的重组大肠杆菌在lb培养基中，于30～37℃培养至少12h。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，还对重组大肠杆菌进行诱导；所述诱导是将所述重组大肠杆菌培养至od
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在0.5～0.7范围内，加入0.5mmol/l的iptg在25～28℃诱导4～8h。10.权利要求1所述的精氨酸脱亚胺酶突变体或权利要求6所述的重组大肠杆菌在氨基酸生产或抗肿瘤药物的制备方面的应用。

技术总结
本发明公开了酶活提高的精氨酸脱亚胺酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明利用定点突变技术对野生型精氨酸脱亚胺酶arcA编码基因进行分子改造，得到了一系列突变体酶ADI


技术研发人员：张涛 王文玉 江波 高巍
受保护的技术使用者：江南大学
技术研发日：2022.03.30
技术公布日：2022/6/14