利用联用药物的糖尿病的治疗或预防方法与流程

1.本发明涉及糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物，其特征在于，将sglt1抑制剂与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂联用；以及糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防方法，其特征在于，给与sglt1抑制剂与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂。


背景技术：

2.sglt1作为sglt(na
-葡萄糖协同转运载体)的亚型之一，已知负责小肠中的葡萄糖和半乳糖的吸收的大部分，人sglt1的缺损患者中，报告了葡萄糖和半乳糖的吸收不良。进一步，糖尿病患者中，确认小肠sglt1的表达增加，糖尿病患者中的糖吸收的亢进被认为由其小肠sglt1的高表达引起。
3.根据这些见解，期待sglt1抑制剂通过抑制糖从小肠的吸收而使血糖值正常化，被认为对糖尿病和伴随高血糖引起的糖尿病性并发症有效果。此外，被认为通过抑制糖向体内的流入而对肥胖症也有效果(非专利文献1和2)。
4.惯用名伏格列波糖是基于日本药事法14条的规定而得到药品等的制造销售许可的药品(许可编号：21600amz00368等)。伏格列波糖通过抑制负责肠道粘膜中存在的二糖类分解为单糖类的二糖类水解酶(α-葡萄糖苷酶)，抑制或者延迟肠道中的糖质的消化和吸收，从而改善餐后高血糖。已知其药理效果是对抑制糖耐量异常中的2型糖尿病的发病有效。
5.根据这些见解，通过sglt1抑制剂抑制糖从小肠的吸收、改善餐后高血糖被认为对抑制糖耐量异常中的2型糖尿病的发病是有效的。
6.糖尿病是指因胰岛素的作用不足而引起的血糖值变高的疾病，持续的高血糖能引起糖尿病性并发症(例如作为微血管病已知的视网膜病变、肾病和神经障碍、以及作为大血管病已知的脑血管障碍、缺血性心脏病和下肢闭塞性动脉硬化症)。作为伴随血糖值变高的其他疾病，还可以举出肥胖症。
7.糖尿病存在1型和2型糖尿病，1型糖尿病被认为因分泌胰岛素的胰腺β细胞被破坏而导致胰岛素作用变得不充分而发病，2型糖尿病被认为除了包含胰岛素分泌降低、胰岛素抵抗性的多个遗传因子之外还有过度饮食、运动不足、肥胖、压力等环境因素和年龄增长而发病。糖尿病的诊断中，使用基于血糖值而分类的3种类型(正常型、边界型、糖尿病型)。确认到以下的(1)至(4)中任一者的情况下被判定为糖尿病型，存在糖尿病或糖尿病的可能(非专利文献3)：(1)早晨空腹时血糖值126mg/dl以上(2)75gogtt(口服葡萄糖耐量试验)下2小时值200mg/dl以上(3)随时血糖值200mg/dl以上(4)hba1cg6.5%以上。
8.上述(2)中使用的ogtt是诊断糖尿病的手段之一。一般而言，人禁食后服用包含
75g葡萄糖的溶液，如果从葡萄糖服用起一定时间后的血糖值为200mg/dl以上，则诊断为糖尿病(非专利文献3)。因此，ogtt是糖尿病诊断的指标，ogtt中能够使葡萄糖耐量受试体的血糖值降低的化合物被认为对糖尿病有效果。
9.sglt的亚型之一有sglt2，主要局部存在于肾脏的近端肾小管。sglt2具有在近端肾小管中将葡萄糖再摄取至细胞内的功能，sglt2抑制剂被认为通过抑制葡萄糖从尿的再摄取而增加糖的尿中排泄量，从而降低血糖值。
10.作为代表性sglt2抑制剂，达格列净(dapagliflozin)作为抗糖尿病药在临床中使用。报告了对糖尿病模型动物和糖尿病患者给与达格列净增加尿中葡萄糖排泄量，改善高血糖。
11.二肽基肽酶-4(dpp4)分解作为糖浓度依赖性胰岛素分泌刺激激素的胰高血糖素样肽-1(glp-1)和葡萄糖依赖性胰岛素分泌刺激多肽(gip)，将它们惰性化。据此，dpp4抑制剂被认为通过抑制glp-1和gip的分解而促进糖浓度依赖性胰岛素分泌，降低血糖值。
12.作为代表性dpp4抑制剂，西格列汀(sitagliptin)作为抗糖尿病药在临床中使用。报告了对糖尿病模型动物和糖尿病患者给与西格列汀增加血中glp-1和gip浓度，改善高血糖。
13.现有技术文献非专利文献非专利文献1：am j physiol gastrointest liver physiol.2002；282(2)：g241-8非专利文献2：nature.1991；350(6316)：354-6非专利文献3：糖尿病治疗指南2016-2017。


技术实现要素：

14.提供了糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物，其特征在于，将sglt1抑制剂与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂联用；以及糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防方法，其特征在于，给与sglt1抑制剂与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂。
附图说明
15.图1示出实施例1的化合物(以下也称为化合物1)与溶媒相比，显著降低ogtt中加载葡萄糖的sd大鼠的血糖值。图中的*表示相对于溶媒p《0.05。
16.图2示出在所给与的化合物中，仅化合物1与溶媒相比显著降低ogtt中加载葡萄糖的sd大鼠的血糖值。图中的**表示相对于溶媒p《0.05。
17.图3示出试验例5中的血糖值的推移。
18.图4示出试验例5中加载葡萄糖后30分钟的血糖值。图中的**表示相对于溶媒p《0.01，
‡
表示相对于化合物1 p《0.01，##表示相对于达格列净p《0.01。
19.图5表示试验例5中加载葡萄糖后60分钟的血糖值。图中的*表示相对于溶媒p《0.05，**表示相对于溶媒p《0.01，
‡
表示相对于化合物1p《0.01，##表示相对于达格列净p《0.01。
20.图6示出试验例6中的血糖值的推移。
21.图7示出试验例6中加载葡萄糖后30分钟的血糖值。图中的**表示相对于溶媒p《0.01，
‡
表示相对于化合物1，p《0.01，#表示相对于西格列汀p《0.05。
22.图8表示试验例6中的血浆中活性型glp-1浓度的推移。
23.图9表示试验例6中的血浆中活性型glp-1的浓度auc。图中的**表示相对于溶媒p《0.01，
‡
表示相对于化合物1，p《0.01，##表示相对于西格列汀p《0.01。
具体实施方式
24.以下，例示多个具体方式。
25.[项1]含有sglt1抑制剂的糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物，其特征在于，将sglt1抑制剂与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂联用。
[0026]
[项2]含有选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂的糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物，其特征在于，将sglt1抑制剂与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂联用。
[0027]
[项3]含有式[i]的化合物或其制药上可接受的盐的糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物，其特征在于，将式[i]的化合物或其制药上可接受的盐与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂联用：[化1][式中，r1为氢或卤素，r2为c
1-6
烷基或卤代c
1-6
烷基，r3为(1)c
1-6
烷基、(2)卤代c
1-6
烷基、(3)被r
3a
取代的吡啶基、或(4)任选被r
3b
取代的吡嗪基、嘧啶基或哒嗪基，r
3a
为氰基、卤素或卤代c
1-3
烷基，r3b
为卤素、羟基、c
1-3
烷基、卤代c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基或-n(r4)(r5)，r4和r5各自独立地为氢或c
1-3
烷基][项4]含有选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂的糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物，其特征在于，将式[i]的化合物或其制药上可接受的盐、与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂联用：[化2][式中，r1为氢或卤素，r2为c
1-6
烷基或卤代c
1-6
烷基，r3为(1)c
1-6
烷基、(2)卤代c
1-6
烷基、(3)被r
3a
取代的吡啶基、或(4)任选被r
3b
取代的吡嗪基、嘧啶基或哒嗪基，r
3a
为氰基、卤素或卤代c
1-3
烷基，r
3b
为卤素、羟基、c
1-3
烷基、卤代c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基或-n(r4)(r5)，r4和r5各自独立地为氢或c
1-3
烷基]。
[0028]
[项5]含有式[i]的化合物或其制药上可接受的盐的糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物，[化3]
[式中，r1为氢或卤素，r2为c
1-6
烷基或卤代c
1-6
烷基，r3为(1)c
1-6
烷基、(2)卤代c
1-6
烷基、(3)被r
3a
取代的吡啶基、或(4)任选被r
3b
取代的吡嗪基、嘧啶基或哒嗪基，r
3a
为氰基、卤素或卤代c
1-3
烷基，r
3b
为卤素、羟基、c
1-3
烷基、卤代c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基或-n(r4)(r5)，r4和r5各自独立地为氢或c
1-3
烷基]其特征在于，给与接受基于选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂的治疗的对象。
[0029]
[项6]含有选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂的糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物，其特征在于，给与接受基于式[i]的化合物或其制药上可接受的盐的治疗的对象：[化4][式中，r1为氢或卤素，r2为c
1-6
烷基或卤代c
1-6
烷基，r3为(1)c
1-6
烷基、(2)卤代c
1-6
烷基、(3)被r
3a
取代的吡啶基、或(4)任选被r
3b
取代的吡嗪基、嘧啶基或哒嗪基，r
3a
为氰基、卤素或卤代c
1-3
烷基，r
3b
为卤素、羟基、c
1-3
烷基、卤代c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基或-n(r4)(r5)，r4和r5各自独立地为氢或c
1-3
烷基]。
[0030]
[项7]
根据项1至6中任一项所述的药物，其中，sglt1抑制剂或式[i]的化合物或其制药上可接受的盐为式[ii]至[v]中任一化合物或其制药上可接受的盐：[化5][项8]根据项1至6中任一项所述的药物，其中，sglt1抑制剂或式[i]的化合物或其制药上可接受的盐为式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐：[化6]。
[0031]
[项9]根据项1至6中任一项所述的药物，其中，sglt2抑制剂为达格列净。
[0032]
[项10]根据项1至6中任一项所述的药物，其中，dpp4抑制剂为西格列汀。
[0033]
[项11]根据项1至6中任一项所述的药物，其中，糖尿病为2型糖尿病。
[0034]
[项12]根据项5或6所述的药物，其中，对象为人。
[0035]
[项13]
糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防方法，其特征在于，将治疗上有效量的sglt1抑制剂、与治疗上有效量的选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂给与对象。
[0036]
[项14]用于治疗或预防糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的sglt1抑制剂，其特征在于，与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂联用。
[0037]
[项15]用于治疗或预防糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂，其特征在于，与sglt1抑制剂联用。
[0038]
[项16]sglt1抑制剂在制造用于与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂联用的糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物中的用途。
[0039]
[项17]选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂在制造用于与sglt1抑制剂联用的糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物中的用途。
[0040]
[项18]糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物组合物，其含有sglt1抑制剂、与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂。
[0041]
[项19]糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物组合物，其含有式[i]的化合物或其制药上可接受的盐、与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂：[化7][式中，r1为氢或卤素，r2为c
1-6
烷基或卤代c
1-6
烷基，r3为(1)c
1-6
烷基、(2)卤代c
1-6
烷基、(3)被r
3a
取代的吡啶基、或(4)任选被r
3b
取代的吡嗪基、嘧啶基或哒嗪基，r3a
为氰基、卤素或卤代c
1-3
烷基，r
3b
为卤素、羟基、c
1-3
烷基、卤代c
1-3
烷基、c
1-3
烷氧基或-n(r4)(r5)，r4和r5各自独立地为氢或c
1-3
烷基]。
[0042]
[项20]根据项18或19所述的组合物，其中，sglt1抑制剂或式[i]的化合物或其制药上可接受的盐为式[ii]至[v]中任一化合物或其制药上可接受的盐：[化8][项21]根据项18或19所述的组合物，其中，sglt1抑制剂或式[i]的化合物或其制药上可接受的盐为式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐：[化9]。
[0043]
sglt1抑制剂只要是抑制sglt1的物质均可，可以是低分子化合物、核酸、多肽、蛋白质、抗体、疫苗等。某一方式中，sglt1抑制剂是具有通过抑制糖从小肠、心肌等脏器的吸收而能够使血糖值正常化的功能的物质。另一方式中，sglt1抑制剂是在ogtt中抑制紧接着加载葡萄糖后、例如0至30分钟后的血浆中葡萄糖浓度的急剧上升，能够将其后的血浆中葡萄糖浓度维持为与被抑制的浓度相同程度或其以下的物质。又另一方式中，sglt1抑制剂是能够增大ogtt中加载葡萄糖后的血浆中活性型glp-1浓度的物质。又另一方式中，sglt1抑
制剂是式[i]的化合物或其制药上可接受的盐。
[0044]
[化10][式中，各标记与前述为相同含义]又另一方式中，sglt1抑制剂是其代谢物不表现出诱变性的物质。在此，不表现出诱变性的物质是指基于例如后述试验例4的条件而不表现出回复突变诱发能力的物质。又另一方式中，sglt1抑制剂是人sglt1抑制剂。
[0045]
部分结构中以下的双重波浪线表示该结构的键合部位。
[0046]
[化11]“卤素”中，包括例如氟、氯、溴和碘。
[0047]“c
1-3
烷基”是指碳原子数1至3的直链状或支链状的饱和烃基。“c
1-3
烷基”中，包括甲基、乙基、正丙基和异丙基。
[0048]“c
1-6
烷基”是指碳原子数1至6的直链状或支链状的饱和烃基。“c
1-6
烷基”中，包括例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基和正己基。
[0049]“卤代c
1-3
烷基”是指被独立地选自上述“卤素”中的1至5个卤素取代的上述“c
1-3
烷基”。“卤代c
1-3
烷基”中，包括例如单氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、2-氟乙基、2-氯乙基、2-溴乙基、1,1-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、五氟乙基、3-氟丙基、3-氯丙基、1,1-二氟丙基和3,3,3-三氟丙基。
[0050]“氟c
1-3
烷基”是指被1个至5个氟取代的上述“c
1-3
烷基”。“氟c
1-3
烷基”中，包括例如单氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、2-氟乙基、1,1-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、五氟乙基、3-氟丙基、1,1-二氟丙基和3,3,3-三氟丙基。
[0051]“卤代c
1-6
烷基”是指被独立地选自上述“卤素”中的1至5个卤素取代的上述“c
1-6
烷基”。“卤代c
1-6
烷基”中，包括例如单氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、2-氟乙基、2-氯乙基、2-溴乙基、1,1-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、五氟乙基、3-氟丙基、3-氯丙基、1,1-二氟丙基、3,3,3-三氟丙基、4,4,4-三氟丁基、5,5,5-三氟戊基和6,6,6-三氟己基。
[0052]“氟c
1-6
烷基”是指被1个至5个氟取代的上述“c
1-6
烷基”。“氟c
1-6
烷基”中，包括例如
单氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、2-氟乙基、1,1-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、五氟乙基、3-氟丙基、1,1-二氟丙基、3,3,3-三氟丙基、4,4,4-三氟丁基、5,5,5-三氟戊基和6,6,6-三氟己基。
[0053]“c
1-3
烷氧基”是指上述“c
1-3
烷基”与氧原子键合的基团。“c
1-3
烷氧基”中，包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基和异丙氧基。
[0054]“吡啶基”是指下式中任一者。
[0055]
[化12]“吡嗪基”是指下式。
[0056]
[化13]“嘧啶基”是指下式中任一者。
[0057]
[化14]“哒嗪基”是指下式中任一者。
[0058]
[化15]“取代”包括化学上可接受的任意的取代。例如，“被r
3a
取代的吡啶基”是指下式中任一者。
[0059]
[化16]
式[i]的化合物的各取代基分别包括以下例示的具体的方式，此外将这些各取代基的具体方式组合得到的方式也包括在式[i]的化合物中。
[0060]
某一方式中，r1为卤素。另一方式中，r1为氟。
[0061]
某一方式中，r2为c
1-6
烷基或氟c
1-6
烷基。另一方式中，r2为c
1-6
烷基。又另一方式中，r2为氟c
1-3
烷基。
[0062]
某一方式中，r3为(1)卤代c
1-6
烷基、(2)被r
3a
取代的吡啶基、或(3)任选被r
3b
取代的吡嗪基或嘧啶基。
[0063]
另一方式中，r3选自卤代c
1-6
烷基和式[h1]至[h14]。
[0064]
又另一方式中，r3为卤代c
1-6
烷基、式[h2]或[h8]。
[0065]
[化17]
某一方式中，r
3a
为卤素或卤代c
1-3
烷基。另一方式中，r
3a
为氟或氟c
1-3
烷基。
[0066]
某一方式中，r
3b
为卤素或卤代c
1-3
烷基。另一方式中，r
3b
为氟c
1-3
烷基。
[0067]
某一方式中，r4和r5各自独立地为c
1-3
烷基。
[0068]
某一方式中，式[i]的化合物为式[ii]或[iii]的化合物：[化18]另一方式中，式[i]的化合物为式[ii]的化合物。又另一方式中，式[i]的化合物为式[iii]的化合物的一水合物、即式[vi]的化合物：[化19]本说明书中制药上可接受的盐只要是本技术领域中已知的不伴随过度毒性的盐，则可以是任意盐。具体而言，可以举出与无机酸的盐、与有机酸的盐、与无机碱的盐和与有
机碱的盐等。各种形态的制药上可接受的盐是本领域公知的，例如记载于以下的参考文献：(a) berge等人,j.pharm.sci.,66,p1-19(1977)、(b) stahl等人,“handbook of pharmaceutical salt：properties,selection,and use”(wiley-vch,weinheim,germany,2002)、(c) paulekuhn等人,j.med.chem.,50,p6665-6672(2007)。
[0069]
按照本身公知的方法，通过使式[i]的化合物与无机酸、有机酸、无机碱或与有机碱反应，能够分别得到其制药上可接受的盐。
[0070]
作为与无机酸的盐，可以例示出与氢氟酸、盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、磷酸或硫酸的盐。可以优选列举出与盐酸、硝酸、硫酸、磷酸或氢溴酸的盐。
[0071]
作为与有机酸的盐，可以例示出与乙酸、己二酸、藻酸、4-氨基水杨酸、脱氢亚甲基柠檬酸、苯甲酸、苯磺酸、依地酸钙、樟脑酸、樟脑-10-磺酸、碳酸、柠檬酸、依地酸、乙烷-1,2-二磺酸、十二烷基硫酸、乙磺酸、富马酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、葡糖醛酸、葡庚糖酸、羟乙酰基阿散酸(glycollylarsanilic acid)、己基间苯二酚酸(hexylresorcinol acid)、羟基-萘甲酸、2-羟基-1-乙磺酸、乳酸、乳糖酸、苹果酸、马来酸、扁桃酸、甲磺酸、甲基硫酸、甲基硝酸、亚甲基双(水杨酸)、半乳糖二酸、萘-2-磺酸、2-萘甲酸、1,5-萘二磺酸、油酸、草酸、帕莫酸、泛酸、果胶酸、苦味酸、丙酸、聚半乳糖醛酸、水杨酸、硬脂酸、丁二酸、鞣酸、酒石酸、茶氯酸、硫氰酸、三氟乙酸、对甲苯磺酸、十一烷酸、天冬氨酸或谷氨酸的盐。可以优选举出与草酸、马来酸、柠檬酸、富马酸、乳酸、苹果酸、丁二酸、酒石酸、乙酸、三氟乙酸、苯甲酸、葡糖醛酸、油酸、帕莫酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸或2-羟基-1-乙磺酸的盐。
[0072]
作为与无机碱的盐，可以例示出与锂、钠、钾、镁、钙、钡、铝、锌、铋或铵的盐。可以优选举出与钠、钾、钙、镁或锌的盐。
[0073]
作为与有机碱的盐，可以例示出与槟榔碱、甜菜碱、胆碱、克立咪唑、乙二胺、n-甲基葡糖胺、n-苯甲基苯乙基胺、三(羟基甲基)甲基胺、精氨酸或赖氨酸的盐。可以优选举出与三(羟基甲基)甲基胺、n-甲基葡糖胺或赖氨酸的盐。
[0074]
sglt1抑制剂(例如式[i]的化合物或其制药上可接受的盐)、sglt2抑制剂和dpp4抑制剂的有效成分有时以溶剂化物的形式存在。溶剂化物是指例如式[i]的化合物或其制药上可接受的盐上配位有溶剂的分子。溶剂化物只要是制药上可接受的溶剂化物即可，可以举出式[i]的化合物或其制药上可接受的盐的水合物、乙醇化物和二甲基亚砜化物等。具体而言，可以举出式[i]的化合物的半水合物、一水合物、二水合物或一乙醇化物、或式[i]的化合物的钠盐的一水合物或二盐酸盐的2/3乙醇化物等。这些溶剂化物可以按照公知的方法得到。例如，式[iii]的化合物可以如下述式[vi]那样，以一水合物形式存在。
[0075]
[化20]
式[i]的化合物可以被同位素(2h、3h、
14
c、
35
s等)标记。
[0076]
式[i]的化合物或其制药上可接受的盐优选为实质上精制的式[i]的化合物或其制药上可接受的盐。进一步优选为精制为80%以上的纯度的式[i]的化合物或其制药上可接受的盐。
[0077]
抑制sglt1是指抑制sglt1的功能从而使其活性消失或减弱，例如基于后述试验例1的条件，抑制sglt1的功能。优选抑制人sglt1。sglt1的功能的抑制或活性的消失或减弱优选在人的临床应用中进行。
[0078]
sglt2抑制剂只要是抑制sglt2的物质，即可为任意的物质，可以是低分子化合物、核酸、多肽、蛋白质、抗体、疫苗等。某一方式中，sglt2抑制剂是具有通过抑制葡萄糖从尿的再摄取而增加糖的尿中排泄量，从而能够降低血糖值的功能的物质。
[0079]
抑制sglt2是指抑制sglt2的功能从而使其活性消失或减弱。优选抑制人sglt2。sglt2的功能的抑制或活性的消失或减弱优选在人的临床应用中进行。
[0080]
本说明书中sglt2抑制剂中，包括例如配糖体化合物或其盐或它们的溶剂化物。在此，配糖体化合物是指糖或糖衍生物与苷元部分通过糖苷键(例如c-糖苷键或o-糖苷键)键合的化合物，糖或糖衍生物具有下述结构。
[0081]
[化21][式中，y为o或s，糖苷键与1位的碳原子形成]本说明书中sglt2抑制剂中，包括例如以下的物质。应予说明，为了方便，本说明书整体使用惯用名。
[0082]
dpp4抑制剂只要是抑制dpp4的物质，即可为任意的物质，可以是低分子化合物、核酸、多肽、蛋白质、抗体、疫苗等。某一方式中，dpp4抑制剂是具有通过抑制glp-1和gip的分解而促进糖浓度依赖性胰岛素分泌、能够降低血糖值的功能的物质。
[0083]
抑制dpp4是指抑制dpp4的功能从而使其活性消失或减弱。优选抑制人dpp4。dpp4的功能的抑制或活性的消失或减弱优选在人的临床应用中进行。
[0084]
本说明书中dpp4抑制剂中，包括例如具有至少1个酰胺基或磺酰胺基的格列汀类或其盐或它们的溶剂化物。
[0085]
本说明书中dpp4抑制剂中，包括例如以下的物质。应予说明，为了方便，本说明书整体使用惯用名。
[0086]
sglt1抑制剂(例如式[i]的化合物或其制药上可接受的盐)、sglt2抑制剂和dpp4抑制剂分别具有sglt1抑制活性、sglt2抑制活性和dpp4抑制活性，因此在通过调节它们的活性而期待改善的各种疾病或状态、或因体内的糖吸收而导致血糖值变高所可能引起的各
种疾病或状态、例如糖尿病(例如1型糖尿病和2型糖尿病)、肥胖症、和/或糖尿病性并发症(例如作为微血管病已知的视网膜病变、肾病和神经障碍、以及作为大血管病已知的脑血管障碍、缺血性心脏病和下肢闭塞性动脉硬化症)的治疗和/或预防中是有用的。某一方式中，各种疾病或状态为糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症。另一方式中，各种疾病或状态为糖尿病。又另一方式中，各种疾病或状态为1型糖尿病。又另一方式中，各种疾病或状态为2型糖尿病。
[0087]
本说明书中联用是指将sglt1抑制剂(例如式[i]的化合物或其制药上可接受的盐)、与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂以任意的顺序给与对象。各药剂分别具有不同的作用机制，因此通过这些药剂的联用，能够对各种疾病或状态的至少1种疾病发挥加合的或协同的治疗或预防效果。某一方式中，联用与各药剂的单独给与相比，显著抑制在ogtt中紧接加载葡萄糖之后、例如0至30分钟后的血浆中葡萄糖浓度的急剧的上升，能够将其后的血浆中葡萄糖浓度维持为与被抑制的浓度相同程度或其以下。另一方式中，联用是指使使在ogtt中紧接加载葡萄糖之后、例如0至30分钟后的血浆中活性型glp-1浓度显著上升，能够将其后的血浆中活性型glp-1浓度维持为与上升的浓度相同程度。又另一方式中，联用通过使用多种作用机制不同的药剂，与单独给与1种药剂的情况相比，可以减少各药剂的给与量，可以减轻各药剂固有的副作用。某一方式中，sglt1抑制剂、与各自选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的第一药剂和第二药剂和/或第三药剂可以对对象同时、连续、或隔一定间隔(例如30分钟以内、1小时以内、2小时以内、4小时以内)，一起、或分别以任意的顺序给与。在将第二药剂和/或第三药剂给与对象时，可以在最初给与的第一药剂中包含的有效成分在对象的体内以治疗上有效量存在的期间给与。另一方式中，sglt1抑制剂、与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂可以作为将这些药剂组合得到的单一的合剂给与对象。这些药剂的给与比和配合比可以根据给与对象、给与途径、对象疾病、症状、疾病的危重度、和它们的组合适当选择。例如，给与对象为人的情况下，相对于sglt1抑制剂1重量份，可以使用0.01重量份至1000重量份的选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂。
[0088]
某一方式中，sglt1抑制剂与sglt2抑制剂的联用中，包括式[i]的化合物与配糖体化合物或其盐或它们的溶剂化物的联用。
[0089]
另一方式中，sglt1抑制剂与sglt2抑制剂的联用中，包括式[ii]的化合物与配糖体化合物或其盐或它们的溶剂化物的联用。
[0090]
某一方式中，sglt1抑制剂与sglt2抑制剂的联用中，包括式[i]的化合物与达格列净、式[i]的化合物与依格列净、式[i]的化合物与托格列净、式[i]的化合物与恩格列净、式[i]的化合物与卡格列净、和式[i]的化合物与鲁格列净的联用。
[0091]
另一方式中，sglt1抑制剂与sglt2抑制剂的联用中，包括式[ii]的化合物与达格列净、
式[ii]的化合物与依格列净、式[ii]的化合物与托格列净、式[ii]的化合物与恩格列净、式[ii]的化合物与卡格列净、和式[ii]的化合物与鲁格列净的联用。
[0092]
某一方式中，sglt1抑制剂与dpp4抑制剂的联用中，包括式[i]的化合物与具有至少1个酰胺基或磺酰胺基的格列汀类或其盐或它们的溶剂化物的联用。
[0093]
另一方式中，sglt1抑制剂与dpp4抑制剂的联用中，包括式[ii]的化合物与具有至少1个酰胺基或磺酰胺基的格列汀类或其盐或它们的溶剂化物的联用。
[0094]
某一方式中，sglt1抑制剂与dpp4抑制剂的联用中，包括式[i]的化合物与西格列汀、式[i]的化合物与沙格列汀、式[i]的化合物与维格列汀、式[i]的化合物与利格列汀、式[i]的化合物与替格列汀、式[i]的化合物与阿格列汀、式[i]的化合物与阿拉格列汀、式[i]的化合物与曲格列汀、和式[i]的化合物与奥格列汀的联用。
[0095]
另一方式中，sglt1抑制剂与dpp4抑制剂的联用中，包括式[ii]的化合物与西格列汀、式[ii]的化合物与沙格列汀、式[ii]的化合物与维格列汀、式[ii]的化合物与利格列汀、式[ii]的化合物与替格列汀、式[ii]的化合物与阿格列汀、式[ii]的化合物与阿拉格列汀、式[ii]的化合物与曲格列汀、和式[ii]的化合物与奥格列汀的联用。
[0096]
某一方式中，提供含有式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐的糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物，其特征在于，将式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐、与选自达格列净和西格列汀中的至少1种药剂联用：[化22]
。
[0097]
另一方式中，提供含有选自达格列净和西格列汀中的至少1种药剂的糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物，其特征在于，将式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐、与选自达格列净和西格列汀中的至少1种药剂联用：[化23]。
[0098]
又另一方式中，提供含有式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐的糖尿病的治疗或预防用药物，其特征在于，将式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐、与选自达格列净和西格列汀中的至少1种药剂联用：[化24]。
[0099]
又另一方式中，提供含有选自达格列净和西格列汀中的至少1种药剂的糖尿病的治疗或预防用药物，其特征在于，将式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐、与选自达格列净和西格列汀中的至少1种药剂联用：[化25]
又另一方式中，提供含有式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐的2型糖尿病的治疗或预防用药物，其特征在于，将式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐、与选自达格列净和西格列汀中的至少1种药剂联用：[化26]。
[0100]
又另一方式中，提供含有选自达格列净和西格列汀中的至少1种药剂的2型糖尿病的治疗或预防用药物，其特征在于，将式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐、与选自达格列净和西格列汀中的至少1种药剂联用：[化27]。
[0101]
又另一方式中，提供含有式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐的2型糖尿病的治疗或预防用药物，其特征在于，将式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐与达格列净联用：[化28]
。
[0102]
又另一方式中，提供含有达格列净的2型糖尿病的治疗或预防用药物，其特征在于，将式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐与达格列净联用：[化29]。
[0103]
又另一方式中，提供含有式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐的2型糖尿病的治疗或预防用药物，其特征在于，将式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐与西格列汀联用：[化30]。
[0104]
又另一方式中，提供含有西格列汀的2型糖尿病的治疗或预防用药物，其特征在于，将式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐与西格列汀联用：[化31]
。
[0105]
又另一方式中，提供糖尿病、肥胖症或糖尿病性并发症的治疗或预防用药物组合物，其含有式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐、与选自达格列净和西格列汀中的至少1种药剂：[化32]。
[0106]
又另一方式中，提供糖尿病的治疗或预防用药物组合物，其含有式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐、与选自达格列净和西格列汀中的至少1种药剂：[化33]。
[0107]
又另一方式中，提供2型糖尿病的治疗或预防用药物组合物，其含有式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐、与选自达格列净和西格列汀中的至少1种药剂：[化34]
。
[0108]
又另一方式中，提供2型糖尿病的治疗或预防用药物组合物，其含有式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐与达格列净：[化35]。
[0109]
又另一方式中，提供2型糖尿病的治疗或预防用药物组合物，其含有式[ii]的化合物或其制药上可接受的盐与西格列汀：[化36]。
[0110]
本说明书中药剂是指选自sglt1抑制剂、sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中任一者的药剂。将某一药剂给与接受基于另一药剂的治疗的对象是指联用的一个方式，包括例如将某一药剂给与对象时，在先前给与的另一药剂中包含的有效成分在对象的体内以治疗上有效量存在的期间给与该某一药剂。
[0111]
本说明书中sglt1抑制剂的治疗上有效量可以根据给与对象、给与途径、对象疾病、症状、疾病的危重度和它们的组合而适当变更。对人(体重60kg)口服给与的情况下，作为治疗上有效量的下限值，可以举出例如每1日约0.01mg、约0.1mg、约0.5mg、约1mg、约
10mg、约20mg或约50mg，作为治疗上有效量的上限值，可以举出例如每1日约1mg、约5mg、约10mg、约20mg、约50mg、约100mg、约200mg、约500mg或约1000mg。
[0112]
本说明书中sglt2抑制剂(例如达格列净)的治疗上有效量可以根据给与对象、给与途径、对象疾病、症状、疾病的危重度和它们的组合而适当变更。对人(体重60kg)口服给与的情况下，作为治疗上有效量的下限值，可以举出例如每1日约0.01mg、约0.1mg、约0.5mg、约1mg、约10mg、约20mg或约50mg，作为治疗上有效量的上限值，可以举出例如每1日约1mg、约5mg、约10mg、约20mg、约50mg、约100mg、约200mg、约500mg或约1000mg。某一方式中，sglt2抑制剂(例如达格列净)的治疗上有效量是每1日约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约10mg、约12mg或约15mg。另一方式中，sglt2抑制剂(例如达格列净)的治疗上有效量是每1日约5mg或约10mg。
[0113]
本说明书中dpp4抑制剂(例如西格列汀)的治疗上有效量可以根据给与对象、给与途径、对象疾病、症状、疾病的危重度和它们的组合而适当变更。对人(体重60kg)口服给与的情况下，作为治疗上有效量的下限值，可以举出例如每1日约0.01mg、约0.1mg、约0.5mg、约1mg、约10mg、约20mg或约50mg，作为治疗上有效量的上限值，可以举出例如每1日约1mg、约5mg、约10mg、约20mg、约50mg、约100mg、约200mg、约500mg或约1000mg。某一方式中，dpp4抑制剂(例如西格列汀)的治疗上有效量是每1日约2.5mg、约5mg、约10mg、约12.5g、约25mg、约50mg、约75mg、约100mg、约125mg、约150mg、约175mg或约200mg。另一方式中，dpp4抑制剂(例如西格列汀)的治疗上有效量是每1日约12.5mg、约25mg、约50mg或约100mg。
[0114]
作为本说明书中各药剂、药物和药物组合物的给与次数，可以举出分别1日1次、2次、3次或其以上的次数。
[0115]
本说明书中治疗包括症状的改善、重症化的防止、缓解的维持、再现的防止和复发的防止。
[0116]
本说明书中预防包括抑制症状的发病。例如，糖尿病的预防包括抑制糖耐量异常中的2型糖尿病的发病。
[0117]
本说明书中的药物组合物可以按照药物制剂的技术领域中公知的方法，通过将各含有药剂的治疗上有效量与至少1种以上的制药上可接受的载体等适当混合等而制造。该药物组合物中的各药剂的含量根据剂型、给与量等而不同，例如为组合物整体的0.1至100重量%。
[0118]
作为本说明书中各药剂、药物和药物组合物的剂型，可以举出片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、锭剂、糖浆剂、乳剂、混悬剂等口服剂、和外用剂、栓剂、注射剂、滴眼剂、经鼻剂、经肺剂等非口服剂。
[0119]
作为制药上可接受的载体，可以举出作为制剂原材料而通用的各种有机或无机载体物质，可以举出固体制剂中的赋形剂、崩解剂、粘结剂、流化剂、润滑剂等、和液状制剂中的溶剂、助溶剂、悬浮剂、等渗剂、缓冲剂、无痛化剂等和半固体制剂中的基质、乳化剂、湿润剂、稳定剂、稳定化剂、分散剂、增塑剂、ph调节剂、吸收促进剂、凝胶化剂、防腐剂、填充剂、溶解剂、助溶剂、悬浮剂等。进一步根据需要，可以追加保存剂、抗氧化剂、着色剂、甜味剂等添加物。
[0120]
作为赋形剂，可以举出乳糖、白糖、d-甘露醇、d-山梨糖醇、玉米淀粉、糊精、微晶纤维素、结晶纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、羧基甲基淀粉钠、低取代度羟基丙基纤
维素和阿拉伯胶等。
[0121]
作为崩解剂，可以举出羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠、羧基甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、低取代度羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素和结晶纤维素等。
[0122]
作为粘结剂，可以举出羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、聚维酮、结晶纤维素、白糖、糊精、淀粉、明胶、羧甲基纤维素钠和阿拉伯胶等。
[0123]
作为流化剂，可以举出轻质无水硅酸和硬脂酸镁等。
[0124]
作为润滑剂，可以举出硬脂酸镁、硬脂酸钙和滑石等。
[0125]
作为溶剂，可以举出精制水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇、芝麻油、玉米油和橄榄油等。
[0126]
作为助溶剂，可以举出丙二醇、d-甘露醇、苯甲酸苯甲酯、乙醇、三乙醇胺、碳酸钠和柠檬酸钠等。
[0127]
作为悬浮剂，可以举出苯扎氯铵、羧甲基纤维素、羟基丙基纤维素、丙二醇、聚维酮、甲基纤维素和单硬脂酸丙三醇酯等。
[0128]
作为等渗剂，可以举出葡萄糖、d-山梨糖醇、氯化钠和d-甘露醇等。
[0129]
作为缓冲剂，可以举出磷酸氢钠、乙酸钠、碳酸钠和柠檬酸钠等。
[0130]
作为无痛化剂，可以举出苯甲醇等。
[0131]
作为基质，可以举出水、动植物油(橄榄油、玉米油、花生油、芝麻油、蓖麻油等)、低级醇类(乙醇、丙醇、丙二醇、1,3-丁二醇、苯酚等)、高级脂肪酸和其酯、蜡类、高级醇、多元醇、烃类(白色凡士林、液体石蜡、石蜡等)、亲水凡士林、精制羊毛脂、吸水软膏、含水羊毛脂、亲水软膏、淀粉、普鲁兰多糖、阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、葡聚糖、纤维素衍生物(甲基纤维素、羧基甲基纤维素、羟基乙基纤维素、羟基丙基纤维素等)、合成高分子(羧基乙烯基聚合物、聚丙烯酸钠、聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮等)、丙二醇、聚乙二醇(聚乙二醇200~600等)、和它们中2种以上的组合。
[0132]
作为保存剂，可以举出对羟基苯甲酸乙酯、氯丁醇、苯甲醇、脱氢乙酸钠和山梨酸等。
[0133]
作为抗氧化剂，可以举出亚硫酸钠和抗坏血酸等。
[0134]
作为着色剂，可以举出食用色素(食用红色2号或3号、食用黄色4号或5号等)、和β-胡萝卜素等。
[0135]
作为甜味剂，可以举出糖精钠、甘草酸二钾和阿斯巴甜等。
[0136]
本说明书中各药剂、药物和药物组合物可以对人和除了人之外的哺乳动物(小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠、兔、猫、狗、猪、牛、马、羊、猴等)口服或非口服(局部、直肠、静脉给与、肌肉内、皮下等)给与。给与量根据给与对象、疾病、症状、剂型、给与途径等而不同，例如对成人患者(体重60kg)口服给与的情况的给与量针对各药剂的有效成分，为每1日通常约0.01mg至约1g的范围。可以将这些量分为1次至多次给与。某一方式中，各药剂可以被制剂化为单独的药物组合物，也可以通过不同的给与途径以任意的顺序对对象给与。另一方式中，各药剂的给与量可以通过联用，与单独给与各药剂的情况相比减少，对成人患者(体重60kg)口服给与的情况的给与量可以为每1日约0.01mg至约1000mg的范围。
[0137]
某一方式中，可以提供试剂盒(给与、治疗和/或预防试剂盒等)、包装(包装物等)和药剂组(和/或容器)的形态，其包含sglt1抑制剂(例如式[i]的化合物或其制药上可接受
的盐)、选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂、和记载了为治疗和/或预防可将这些药剂联用或应当联用的记载物。这样的试剂盒、包装和药剂组可以具有填充了sglt1抑制剂、选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂、和适当其他药剂或药物(或成分)的1个以上的容器。作为这样的试剂盒、包装和药剂组的例，可以举出适当面向对象疾病的治疗和/或预防的商业用试剂盒、商业用包装和商业用药剂组。作为这样的试剂盒、包装和药剂组中包含的记载物，可以举出根据管制药物或生物学产品的制造、使用或销售的政府机关所指示的形态的注意事项或随附文件，其为与对人的给与相关的产品的制造、使用或销售所涉及的表示该政府机关的许可的注意事项或随附文件。上述试剂盒、包装和药剂组中，可以包括经包装的产品，此外，也可以包括为了适当的给与步骤(步骤)而构成的结构物，也可以包括包含对象疾病的治疗和/或预防等的以能够实现更优选的医学上的治疗和/或预防的方式而构成的结构物。
[0138]
[一般制造方法]式[i]的化合物或其制药上可接受的盐的一般制造方法例示如下。然而，式[i]的化合物或其制药上可接受的盐的制造方法不限于一般制造方法。
[0139]
各步骤中得到的化合物根据需要可以通过蒸馏、重结晶、柱色谱等公知的方法分离和/或精制，根据情况，可以不经过分离和/或精制而进入下一步骤。
[0140]
本说明书中，室温是指未控制温度的状态的温度，作为一个方式，可以举出1℃至40℃。
[0141]
[一般制造方法a] 式[i-1]的化合物或其制药上可接受的盐r3为被r
3a
取代的吡啶基、或任选被r
3b
取代的吡嗪基、嘧啶基或哒嗪基的式[i]的化合物或其制药上可接受的盐可以例如通过以下所示的制造方法而得到。
[0142]
[化37]
甲基吡咯烷酮、1,3-二甲基-2-咪唑啉酮、n,n'-二甲基亚乙基脲等极性溶剂。优选的溶剂为1,3-二甲基-2-咪唑啉酮。
[0145]
作为碱，可以举出例如碳酸铯、氢化钠。优选的碱为氢化钠。
[0146]
反应温度例如为60℃至170℃、优选为100℃至140℃。
[0147]
式[1]的化合物与式[2]的化合物均可以是市售品或通过公知的方法制造。
[0148]
或者，r2为三氟甲基的情况下，式[3]的化合物可以是市售品。
[0149]
(步骤a2)式[5]的化合物可以通过使式[3]的化合物与式[4]的化合物进行mizoroki-heck反应而得到。例如，式[5]的化合物可以通过使式[3]的化合物与式[4]的化合物在溶剂中、在钯催化剂和碱的存在下反应而得到。
[0150]
作为溶剂，可以举出例如乙二醇等醇系溶剂；和n,n-二甲基甲酰胺等极性溶剂。优选的溶剂为乙二醇。
[0151]
作为钯催化剂，可以举出例如乙酸钯(ii)与1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁或1,3-双(二苯基膦基)丙烷的混合物。优选的钯催化剂为乙酸钯(ii)与1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁的混合物。
[0152]
作为碱，可以举出例如三乙基胺等有机碱。优选的碱为三乙基胺。
[0153]
反应温度例如为80℃至150℃、优选为100℃至140℃。
[0154]
式[4]的化合物可以是市售品或通过公知的方法制造。
[0155]
(步骤a3)式[6]的化合物可以通过将式[5]的化合物的-c(=ch2)oa4基转化为-c(=o)ch3基而得到。例如，式[6]的化合物可以通过使式[5]的化合物在溶剂中、在酸的存在下反应而得到。
[0156]
作为溶剂，可以举出例如丙酮等酮系溶剂；乙二醇等醇系溶剂；四氢呋喃、1,4-二氧杂环己烷等醚系溶剂；二氯甲烷等卤代烃系溶剂；n,n-二甲基甲酰胺等极性溶剂；水；和它们的混合溶剂。优选的溶剂是四氢呋喃与水的混合溶剂。
[0157]
作为酸，可以举出例如盐酸和三氟乙酸。优选的酸为盐酸。
[0158]
反应温度例如为20℃至50℃、优选为室温。
[0159]
(步骤a4)式[8]的化合物可以通过使式[6]的化合物与式[7]的化合物在溶剂中、在碱的存在下反应而得到。
[0160]
作为溶剂，可以举出例如四氢呋喃、二乙基醚、1,2-二甲氧基乙烷等醚系溶剂；甲醇、乙醇等醇系溶剂；甲苯等烃系溶剂；n,n-二甲基甲酰胺等极性溶剂；和它们的混合溶剂。优选的溶剂是四氢呋喃。
[0161]
作为碱，可以举出例如叔丁醇锂、叔丁醇钠、叔丁醇钾、甲醇钠、乙醇钠、二异丙基氨基锂、六甲基二硅氮烷锂和氢化钠。优选的碱为叔丁醇锂。
[0162]
反应温度例如为-78℃至110℃、优选为0℃至室温。
[0163]
式[7]的化合物可以是市售品或通过公知的方法制造。
[0164]
(步骤a5)式[10]的化合物可以通过使式[8]的化合物与式[9]的化合物在溶剂中、在酸的存
在下反应而得到。
[0165]
作为溶剂，可以举出例如四氢呋喃等醚系溶剂；甲醇、乙醇等醇系溶剂；甲苯等烃系溶剂。
[0166]
作为酸，可以举出例如盐酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸、对甲苯磺酸。优选的酸为乙酸。可以使用这些酸作为溶剂。
[0167]
反应温度例如为20℃至130℃、优选为80℃至110℃。
[0168]
式[9]的化合物可以是市售品或通过公知的方法制造，或者也可以通过后述的一般制造方法b得到。
[0169]
(步骤a6)式[11]的化合物可以通过去除式[10]的化合物的-a7基而得到。去除反应根据a7的种类在适当的条件下进行即可。例如，a7为乙基的情况下，式[11]的化合物可以通过使式[10]的化合物在溶剂中、在碱的存在下反应而得到。
[0170]
作为溶剂，可以举出例如甲醇、乙醇等醇系溶剂；四氢呋喃等醚系溶剂；水；和它们的混合溶剂。优选的溶剂是选自甲醇、四氢呋喃和水中的2种以上的混合溶剂。
[0171]
作为碱，可以举出例如氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾。优选的碱为氢氧化钠。
[0172]
反应温度例如为0℃至100℃、优选为室温至40℃。
[0173]
(步骤a7)式[13]的化合物可以通过使式[11]的化合物与式[12]的化合物进行curtius重排反应而得到。例如，式[13]的化合物可以通过在溶剂中使式[11]的化合物在碱的存在下与叠氮化剂反应，接着通过与式[12]的化合物反应而得到。
[0174]
作为溶剂，可以举出例如四氢呋喃、1,4-二氧杂环己烷等醚系溶剂；甲苯等烃系溶剂。或者，可以使用式[12]的化合物作为溶剂。优选的溶剂是甲苯或甲苯与式[12]的化合物的混合溶剂。
[0175]
作为叠氮化剂，可以举出例如叠氮磷酸二苯酯。
[0176]
作为碱，可以举出例如三乙基胺、n,n-二异丙基乙基胺等有机碱。优选的碱为三乙基胺。
[0177]
反应温度例如为65℃至130℃、优选为90℃至110℃。
[0178]
式[12]的化合物可以是市售品或通过公知的方法制造。
[0179]
(步骤a8)式[14]的化合物可以在溶剂中去除式[13]的化合物的-c(=o)oa
12
基而得到。去除反应根据a
12
的种类在适当的条件下进行即可。例如，a
12
为叔丁基的情况下，式[14]的化合物可以使式[13]的化合物在溶剂中、在酸的存在下反应而得到。
[0180]
作为溶剂，可以举出例如乙酸乙酯等酯系溶剂；甲醇、乙醇等醇系溶剂；四氢呋喃、1,4-二氧杂环己烷等醚系溶剂；二氯甲烷等卤代烃系溶剂；水；和它们的混合溶剂。优选的溶剂是1,4-二氧杂环己烷。
[0181]
作为酸，可以举出例如盐酸、硫酸、三氟乙酸。优选的酸为盐酸。可以使用这些酸作为溶剂。
[0182]
反应温度例如为0℃至60℃、优选为0℃至室温。
[0183]
(步骤a9)
式[i-1]的化合物可以使式[14]的化合物与式[15]的化合物在溶剂中进行缩合反应而得到。
[0184]
作为溶剂，可以举出例如氯仿等卤代烃系溶剂；四氢呋喃等醚系溶剂；吡啶、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺等极性溶剂；和它们的混合溶剂。优选的溶剂是吡啶。
[0185]
作为缩合剂，可以举出例如二环己基碳二亚胺(dcc)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(wsc
·
hcl)、二异丙基碳二亚胺、1,1'-羰基二咪唑(cdi)、o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸盐(hatu)、{{[(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代乙叉基)氨基]氧基}-4-吗啉代亚甲基}二甲基铵六氟磷酸盐(comu)、氯化4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓
·
n水合物(dmt-mm)、六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷鎓(pybop)、叠氮磷酸二苯酯和丙基膦酸酐。优选的缩合剂是1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(wsc
·
hcl)。
[0186]
反应温度例如为0℃至100℃、优选为室温。
[0187]
式[15]的化合物可以通过例如后述的一般制造方法e的方法而得到。
[0188]
[一般制造方法b]制造方法b1式[9]的化合物可以通过例如以下所示的制造方法而得到。
[0189]
[化38][式中，r
31
与前述中的定义为相同含义，x
16
为卤素]。
[0190]
式[9]的化合物可以通过使式[16]的化合物在溶剂中、与肼一水合物反应而得到。
[0191]
作为溶剂，可以举出例如四氢呋喃、1,4-二氧杂环己烷等醚系溶剂；乙醇、2-丙醇等醇系溶剂；二氯甲烷等卤代烃系溶剂；n,n-二甲基甲酰胺、吡啶等极性溶剂；水；和它们的混合溶剂。或者，可以使用肼一水合物作为溶剂。优选的溶剂是2-丙醇与肼一水合物的混合溶剂。
[0192]
反应温度例如为室温至140℃、优选为60℃至100℃。
[0193]
式[16]的化合物可以是市售品或通过公知的方法制造。
[0194]
制造方法b2式[9]的化合物此外，在r
31
为被r
3a
取代的吡啶基的情况下，也可以例如通过以下所示的制造方法而得到。
[0195]
[化39]
[式中，r
31
为被r
3a
取代的吡啶基，r
3a
与前述中的定义为相同含义]。
[0196]
式[9]的化合物可以通过使式[17]的化合物在溶剂中、在酸的存在下重氮化、还原而得到。
[0197]
作为溶剂，可以举出例如水。
[0198]
作为重氮化剂，可以举出例如亚硝酸钠。
[0199]
作为酸，可以举出例如盐酸、硫酸。优选的酸为盐酸。
[0200]
作为还原剂，可以举出例如氯化亚锡(ii)、亚硫酸钠。优选的还原剂为氯化亚锡(ii)。
[0201]
重氮化的反应温度例如为-20℃至5℃、优选为-5℃至0℃。
[0202]
还原的反应温度例如为-5℃至室温、优选为0℃至室温。
[0203]
式[17]的化合物可以是市售品或通过公知的方法制造。
[0204]
制造方法b3作为另外的方法，式[9]的化合物此外，r
31
为(1)被r
3a
取代的吡啶基或(2)任选被r
3b
取代的嘧啶基的情况下，也可以例如通过以下所示的制造方法而得到。
[0205]
[化40][式中，r
31
为(1)被r
3a
取代的吡啶基或(2)任选被r
3b
取代的嘧啶基，r
3a
、r
3b
和x
16
与前述中的定义为相同含义，a
19
为叔丁氧基羰基或苯甲基氧基羰基]。
[0206]
(步骤b3-1)式[18]的化合物可以通过使式[16]的化合物在溶剂中、与碱和硼酸酯反应而得到。
[0207]
作为溶剂，可以举出例如四氢呋喃等醚系溶剂；甲苯等烃系溶剂；和它们的混合溶剂。优选的溶剂是四氢呋喃。
[0208]
作为碱，可以举出例如正丁基锂、异丙基溴化镁。优选的碱为正丁基锂。
[0209]
作为硼酸酯，可以举出例如硼酸三异丙酯、硼酸三甲酯。优选的硼酸酯为硼酸三异丙酯。
[0210]
反应温度例如为-78℃至室温、优选为-78℃至0℃。
[0211]
式[16]的化合物可以是市售品或通过公知的方法制造。
[0212]
(步骤b3-2)式[20]的化合物可以通过使式[18]的化合物与式[19]的化合物在溶剂中、在铜催化剂的存在下反应而得到。
[0213]
作为溶剂，可以举出例如四氢呋喃等醚系溶剂；甲醇等醇系溶剂。优选的溶剂是甲
醇。
[0214]
作为铜催化剂，可以举出例如乙酸铜(ii)。
[0215]
反应温度例如为室温至100℃、优选为45℃至65℃。
[0216]
(步骤b3-3)式[9]的化合物可以通过在溶剂中去除式[20]的化合物的-a
19
基而得到。去除反应根据a
19
的种类在适当的条件下进行即可。例如，a
19
为叔丁氧基羰基的情况下，式[9]的化合物可以通过使式[20]的化合物在溶剂中、在酸的存在下反应而得到。
[0217]
作为溶剂，可以举出例如乙酸乙酯等酯系溶剂；甲醇、乙醇等醇系溶剂；四氢呋喃、1,4-二氧杂环己烷等醚系溶剂；二氯甲烷等卤代烃系溶剂；水；和它们的混合溶剂。优选的溶剂是1,4-二氧杂环己烷。
[0218]
作为酸，可以举出例如盐酸、硫酸、三氟乙酸。优选的酸为盐酸。
[0219]
反应温度例如为0℃至60℃、优选为0℃至室温。
[0220]
[一般制造方法c] 式[i-2]的化合物或其制药上可接受的盐r3为c
1-6
烷基或卤代c
1-6
烷基的式[i]的化合物或其制药上可接受的盐可以通过例如以下所示的任一制造方法而得到。
[0221]
制造方法c1[化41][式中，r1和r2与前述中的定义为相同含义，r
32
为c
1-6
烷基或卤代c
1-6
烷基]。
[0222]
(步骤c1-1)式[i-2]的化合物可以使式[21]的化合物或其盐与式[15]的化合物或其盐在溶剂中、在缩合剂和添加剂存在下反应而制造。
[0223]
作为缩合剂，可以例示出例如二环己基碳二亚胺(dcc)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(wsc
·
hcl)、二异丙基碳二亚胺、1,1'-羰基二咪唑(cdi)、o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸盐(hatu)、{{[(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代乙叉基)氨基]氧基}-4-吗啉代亚甲基}二甲基铵六氟磷酸盐(comu)、氯化4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓
·
n水合物(dmt-mm)、六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷鎓(pybop)、叠氮磷酸二苯酯和丙基膦酸酐。
[0224]
作为添加剂，可以例示出例如1-羟基苯并三唑(hobt)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(hoat)、n-羟基丁二酰亚胺(hosu)、4-二甲基氨基吡啶和1-甲基咪唑。
[0225]
作为溶剂，可以例示出例如氯仿等卤代烃系溶剂；四氢呋喃等醚系溶剂；吡啶、乙
腈、n,n-二甲基甲酰胺等极性溶剂；和它们的混合溶剂。
[0226]
反应温度例如为0℃至100℃。
[0227]
使用式[21]的化合物的盐的情况下，在碱存在下实施本反应即可。作为碱，可以例示出例如三乙基胺等有机碱和碳酸钠等碱金属盐。
[0228]
式[i-2]的化合物此外也可以通过在溶剂中使用卤化剂将式[15]的化合物转化为羧酸酰卤后，在碱存在下与式[21]的化合物反应的方法而制造。
[0229]
作为反应中使用的卤化剂，可以例示出例如草酰氯和亚硫酰氯。优选的卤化剂为草酰氯。
[0230]
作为反应中使用的碱，可以例示出例如吡啶、三乙基胺、n,n-二异丙基乙基胺等有机碱；和碳酸氢钠、碳酸钠等碱金属盐。优选的碱为吡啶。
[0231]
作为溶剂，可以例示出例如氯仿等卤代烃系溶剂；环戊基甲基醚、四氢呋喃等醚系溶剂；甲苯等烃系溶剂；和它们与水的混合溶剂。优选的溶剂是氯仿。
[0232]
反应温度例如为0℃至80℃、优选为0℃至60℃。
[0233]
羧酸酰卤的制造中，可以添加n,n-二甲基甲酰胺作为添加剂。
[0234]
制造方法c2[化42][式中，r1、r2和r
32
与前述中的定义为相同含义，p
n1
为氨基的保护基；优选的p
n1
为2,4-二甲氧基苯甲基]。
[0235]
(步骤c2-1)式[23]的化合物可以按照制造方法c1步骤c1-1，由式[21]的化合物或其盐和式[22]的化合物或其盐制造。
[0236]
(步骤c2-2)式[i-2]的化合物或其盐可以通过利用脱保护反应去除式[23]的化合物的p
n1
从而
制造。脱保护反应根据p
n1
的种类在适当的条件下实施即可。
[0237]
例如，p
n1
为2,4-二甲氧基苯甲基的情况下，式[i-2]的化合物或其盐可以通过在溶剂中、在添加剂存在下与酸反应而制造。
[0238]
作为酸，可以例示出例如甲磺酸、对甲苯磺酸和三氟乙酸。优选的酸为三氟乙酸。
[0239]
作为添加剂，可以例示出例如苯甲醚和三乙基硅烷。优选的添加剂为苯甲醚。
[0240]
作为溶剂，可以例示出例如二氯甲烷等卤代烃系溶剂、甲苯等烃系溶剂、水和它们的混合溶剂。可以使用三氟乙酸等有机酸作为溶剂。
[0241]
反应温度例如为0℃至130℃，优选为25℃至80℃。
[0242]
本步骤中，使用酸的情况下，得到式[24]的化合物或其盐。
[0243]
[化43][式中，r1和r
32
与前述中的定义为相同含义]式[i-2]的化合物或其盐可以通过公知的方法，通过将式[24]的化合物或其盐的羟基转化为c
1-6
烷基-o或卤代c
1-6
烷基-o基而制造。
[0244]
例如，r1为氟、r2为 叔丁基，r
32
为三氟甲基的式[i-2]的化合物(即式[ii]的化合物)或其盐可以通过在高氯酸镁的存在下、使式[24]的化合物或其盐与二碳酸二叔丁酯反应而制造。
[0245]
作为溶剂，可以例示出例如氯仿等卤代烃系溶剂和四氢呋喃等醚系溶剂。优选的溶剂是氯仿。
[0246]
反应温度例如为0℃至100℃、优选为室温至70℃。
[0247]
[一般制造方法d]式[21]的化合物可以通过以下所示的制造方法制造。
[0248]
制造方法d1[化44]
[式中，r1、r2和r
32
与前述中的定义为相同含义，l1为脱离基团；优选的l1为氯、溴或碘；p
n2
各自独立地为胺的保护基；优选地，2个p
n2
与它们键合的氮一起形成2,5-二甲基吡咯]。
[0249]
(步骤d1-1)式[26]的化合物可以通过公知的方法，通过向式[25]的化合物或其盐的氨基导入p
n2
而制造。保护基的导入根据p
n2
的种类在适当的条件下实施即可。例如，2个p
n2
与它们键合的氮一起形成2,5-二甲基吡咯的情况下，式[26]的化合物可以通过使式[25]的化合物在溶剂中、在酸性条件下与2,5-己二酮反应而制造。
[0250]
作为反应中使用的酸，可以例示出例如浓盐酸、浓硫酸、氨基硫酸、对甲苯磺酸和乙酸。优选的酸为乙酸。
[0251]
作为溶剂，可以例示出例如乙醇等醇系溶剂、四氢呋喃等醚系溶剂、甲苯等烃系溶剂、n,n-二甲基甲酰胺等极性溶剂、二氯乙烷等卤代烃系溶剂和它们的混合溶剂。可以使用乙酸等有机酸作为溶剂。
[0252]
反应温度例如为室温至150℃、优选为80℃至140℃。
[0253]
(步骤d1-2)式[27]的化合物可以通过公知的方法，将式[26]的化合物烷基化或卤代烷基化而制造。例如，r
32
为三氟甲基的情况下，可以通过包括：在溶剂中在碱和催化剂的存在下使式[26]的化合物与二溴二氟甲烷反应的步骤(a)；和在溶剂中在四甲基氟化铵或四氟硼酸银(i)存在下氟化的步骤(b)的方法而制造。
[0254]
作为步骤(a)中使用的碱，可以例示出例如氢化钠和叔丁醇钾。优选的碱为氢化钠。
[0255]
作为步骤(a)中使用的催化剂，可以例示出例如四丁基溴化铵和锌。优选的催化剂为四丁基溴化铵。
[0256]
作为步骤(a)中使用的溶剂，可以例示出例如四氢呋喃等醚系溶剂、和n,n-二甲基甲酰胺等极性溶剂。优选的溶剂是n,n-二甲基甲酰胺。
[0257]
作为步骤(a)中的反应温度，例如为0℃至40℃、优选为0℃至室温。
[0258]
作为步骤(b)中使用的溶剂，使用四甲基氟化铵的情况下，可以例示出例如1,4-二
氧杂环己烷等醚系溶剂和环丁砜等极性溶剂。优选的溶剂是环丁砜。使用四氟硼酸银(i)的情况下，可以例示出例如二氯甲烷等卤代烃系溶剂。优选的溶剂是二氯甲烷。
[0259]
作为步骤(b)的反应温度，使用四甲基氟化铵的情况下，例如为80℃至180℃、优选为100℃至140℃。使用四氟硼酸银(i)的情况下，例如为-78℃至50℃、优选为-78℃至室温。
[0260]
(步骤d1-3)式[28]的化合物可以通过在溶剂中在碱存在下向式[27]的化合物导入l1而制造。例如，l1为碘的情况下，式[28]的化合物可以通过在溶剂中在碱存在下将式[27]的化合物碘化而制造。
[0261]
作为反应中使用的碱，可以例示出例如正丁基锂、二异丙基氨基锂、六甲基二硅氮烷锂和四甲基哌啶锂。优选的碱为正丁基锂。
[0262]
作为碘化剂，可以例示出例如碘、一氯化碘、n-碘代丁二酰亚胺和1-氯-2-碘乙烷。优选的碘化剂为碘。
[0263]
作为溶剂，可以例示出例如四氢呋喃等醚系溶剂、甲苯等烃系溶剂和它们的混合溶剂。优选的溶剂是四氢呋喃。
[0264]
反应温度例如为-100℃至40℃、优选为-78℃至20℃。
[0265]
(步骤d1-4)式[29]的化合物或其盐可以通过利用脱保护反应去除式[28]的化合物的p
n2
而制造。脱保护反应根据p
n2
的种类在适当的条件下实施即可。例如，2个p
n2
与它们键合的氮一起形成2,5-二甲基吡咯的情况下，式[29]的化合物或其盐也可以通过使式[28]的化合物在溶剂中与羟基胺反应而制造。
[0266]
作为溶剂，可以例示出例如乙醇等醇系溶剂、水和它们的混合溶剂。优选的溶剂是醇系溶剂与水的混合溶剂。
[0267]
反应温度例如为40℃至150℃、优选为80℃至130℃。
[0268]
也可以使用羟基胺盐酸盐替代羟基胺，在该情况下，在碱存在下实施本反应即可。作为碱，可以例示出例如三乙基胺等有机碱和碳酸钠等碱金属盐。优选的碱为三乙基胺。
[0269]
(步骤d1-5)式[21]的化合物或其盐可以通过使式[29]的化合物或其盐与式[30]的化合物进行铃木偶联反应而制造。例如，式[21]的化合物或其盐可以通过使式[29]的化合物或其盐与式[30]的化合物在溶剂中在碱和钯催化剂的存在下反应而制造。
[0270]
作为反应中使用的钯催化剂，可以例示出例如四(三苯基膦)钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(ii)-二氯甲烷加成体、[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯钯(ii)和乙酸钯(ii)与三环己基膦、2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基联苯或2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯的混合物。优选的钯催化剂为[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(ii)-二氯甲烷加成体。
[0271]
作为反应中使用的碱，可以例示出例如磷酸三钾、碳酸铯、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾和三乙基胺。优选的碱为磷酸三钾、碳酸铯或碳酸钠。
[0272]
作为溶剂，可以例示出例如1,4-二氧杂环己烷、四氢呋喃、二乙基醚和1,2-二甲氧基乙烷等醚系溶剂；甲醇、乙醇、1-丙醇和2-丙醇等醇系溶剂；甲苯、正己烷和二甲苯等烃系溶剂；n,n-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜和乙腈等极性溶剂；和它们与水的混合溶剂。优选的
溶剂是1,2-二甲氧基乙烷、甲苯、二甲基亚砜、或它们与水的混合溶剂。
[0273]
反应温度例如为20℃至150℃、优选为80℃至130℃。
[0274]
式[30]的化合物可以按照公知的方法制造。也可以使用对应的有机硼酸酯替代式[30]的化合物进行步骤d1-5的反应。例如，有机硼酸酯[33]可以通过以下所示的制造方法制造。
[0275]
制造方法d2[化45][式中，r1和r2与前述中的定义为相同含义，r6为氟或羟基；l2为脱离基团；优选的l2为氯、溴、碘、对甲苯磺酰氧基、甲磺酰氧基或三氟甲磺酰氧基；b(or7)2为有机硼酸酯；r7例如各自独立地为甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基，或者or7任选与它们键合的硼一起形成环状有机硼酸酯；优选的b(or7)2为有机硼酸频哪醇酯]。
[0276]
(步骤d2-1)式[32]的化合物可以通过将式[31]的化合物的r1转化为叔丁氧基而制造。本反应按照公知的方法实施即可。
[0277]
r1为氟的情况下，式[32]的化合物可以例如通过在溶剂中使式[31]的化合物与叔丁醇钠或叔丁醇钾反应而制造。作为溶剂，可以例示出例如四氢呋喃等醚系溶剂；和n,n-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜等极性溶剂。优选的溶剂是n,n-二甲基甲酰胺。反应温度例如为0℃至100℃、优选为室温至85℃。
[0278]
r1为羟基的情况下，式[32]的化合物可以按照例如制造方法c2步骤c2-2所述的方法制造。
[0279]
(步骤d2-2)式[33]的化合物可以通过使式[32]的化合物与硼化合物在溶剂中在钯催化剂、有机磷化合物和碱的存在下反应而制造。
[0280]
作为钯催化剂，可以例示出例如乙酸钯(ii)、氯化钯(ii)和三(二亚苄基丙酮)二钯(0)。
[0281]
作为有机磷化合物，可以例示出例如三苯基膦、三环己基膦、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁、2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基联苯、2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯和2-二环己基膦基-2'-(n,n-二甲基氨基)联苯。
[0282]
也可以使用四(三苯基膦)钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)-二氯甲烷加成体、或[1,1'-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)替代钯催化剂和有机磷化
合物。
[0283]
作为碱，可以例示出例如乙酸钾、碳酸钠、碳酸铯和碳酸钾。优选的碱为乙酸钾。
[0284]
作为硼化合物，可以例示出例如双(频哪醇合)二硼。
[0285]
作为溶剂，可以例示出例如1,4-二氧杂环己烷、四氢呋喃、1,2-二甲氧基乙烷等醚系溶剂；甲苯等烃系溶剂；和n,n-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜等极性溶剂。优选的溶剂是二甲基亚砜。
[0286]
反应温度例如为室温至150℃、优选为70℃至110℃。
[0287]
[一般制造方法e]式[15]的化合物或其盐和式[22]的化合物或其盐可以通过以下所示的制造方法制造。
[0288]
制造方法e1[化46][式中，p
n1
与前述中的定义为相同含义，p
e1
和p
e2
各自独立地是羧基的保护基；优选的p
e1
和p
e2
各自独立地是甲基、乙基、叔丁基或苯甲基；r8各自独立地是甲氧基或乙氧基；l3为脱离基团；优选的l3为溴或氯]。
[0289]
(步骤e1-1)式[36]的化合物可以通过在溶剂中在碱存在下使式[34]的化合物与式[35]的化合物反应而制造。
[0290]
作为反应中使用的碱，可以例示出例如叔丁醇钾、甲醇钠、乙醇钠、二异丙基氨基锂、六甲基二硅氮烷钾、碳酸钾、碳酸铯和氢化钠。优选的碱为叔丁醇钾。
[0291]
作为溶剂，可以例示出例如四氢呋喃等醚系溶剂；甲醇、乙醇等醇系溶剂；和n,n-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜等极性溶剂。优选的溶剂是四氢呋喃。
[0292]
反应温度例如为-78℃至100℃、优选为0℃至70℃。
[0293]
(步骤e1-2)
式[37]的化合物可以在溶剂中在碱存在下使式[36]的化合物与甲醛(优选为甲醛水溶液)反应而制造。
[0294]
作为反应中使用的碱，可以例示出例如叔丁醇钾、甲醇钠、乙醇钠、二异丙基氨基锂、六甲基二硅氮烷钾、碳酸钾、碳酸铯和氢化钠。优选的碱为碳酸钾。
[0295]
作为溶剂，可以例示出例如四氢呋喃等醚系溶剂；甲醇、乙醇等醇系溶剂；和n,n-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜等极性溶剂。优选的溶剂是四氢呋喃。
[0296]
反应温度例如为-78℃至100℃、优选为0℃至70℃。
[0297]
(步骤e1-3)式[39]的化合物可以通过在溶剂中使化合物[37]与化合物[38]反应而制造。
[0298]
作为溶剂，可以例示出例如甲苯等烃系溶剂；甲醇、乙醇等醇系溶剂；和它们的混合溶剂。优选的溶剂是甲苯。
[0299]
反应温度例如为20℃至150℃、优选为80℃至130℃。
[0300]
(步骤e1-4)化合物[40]或其盐可以通过利用脱保护反应去除化合物[39]的p
e1
而制造。脱保护反应根据p
e1
的种类在各自适当的条件下实施即可。例如，p
e1
为乙基的情况下，化合物[40]或其盐可以通过在溶剂中在碱存在下将化合物[39]水解而制造。
[0301]
作为反应中使用的碱，可以例示出例如氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾和乙醇钠。优选的碱为乙醇钠。
[0302]
作为溶剂，可以例示出例如乙醇等醇系溶剂、四氢呋喃等醚系溶剂、水和它们的混合溶剂。优选的溶剂是乙醇与水的混合溶剂。
[0303]
反应温度例如为0℃至100℃、优选为0℃至40℃。
[0304]
(步骤e1-5)式[22]的化合物或其盐可以通过从式[40]的化合物或其盐中分离而得到。式[22]的化合物或其盐的分离通过本领域中公知的方法，在适合于其分离的条件下实施即可。例如，式[22]的化合物或其盐可以作为与碱性光学拆分剂的非对映异构体盐而分离后，将该盐用酸分解而得到。
[0305]
作为碱性光学拆分剂，可以例示出例如(1r,2r)-(-)-2-氨基-1-(4-硝基苯基)-1,3-丙二醇。
[0306]
作为用于衍生为非对映异构体盐的溶剂，可以例示出例如2-丙醇等醇系溶剂、1,2-二甲氧基乙烷等醚系溶剂、乙腈等极性溶剂、和它们与水的混合溶剂。优选的溶剂是乙腈、1,2-二甲氧基乙烷或它们与水的混合溶剂。
[0307]
该非对映异构体盐可以通过重结晶而提高其光学纯度。作为重结晶中使用的溶剂，可以例示出例如1,2-二甲氧基乙烷等醚系溶剂、乙腈等极性溶剂、和它们与水的混合溶剂。优选的溶剂是乙腈与水的混合溶剂。
[0308]
作为非对映异构体盐的分解中使用的酸，可以例示出例如盐酸、硫酸和硫酸氢钾。优选的酸为盐酸。
[0309]
作为非对映异构体盐的分解中使用的溶剂，可以例示出例如乙酸乙酯等酯系溶剂、四氢呋喃等醚系溶剂、水、和它们的混合溶剂。优选的溶剂是乙酸乙酯与水的混合溶剂。
[0310]
(步骤e1-6)
式[15]的化合物或其盐可以通过利用脱保护反应去除式[22]的化合物或其盐的p
n1
而制造。脱保护反应根据p
n1
的种类在适当的条件下实施即可。例如，p
n1
为2,4-二甲氧基苯甲基的情况下，式[15]的化合物或其盐可以按照制造方法c2步骤c2-2而制造。
实施例
[0311]
在此，本说明书中使用的简称的含义示于以下。
[0312]
dmf：n,n-二甲基甲酰胺dmso：二甲基亚砜thf：四氢呋喃cpme：环戊基甲基醚wsc
·
hcl：1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐以下例示出制造例、实施例、参考例、试验例和制剂例进行说明。
[0313]1h-nmr谱在cdcl3或dmso-d6中以四甲基硅烷作为内部标准测定，全部δ值以ppm表示。应予说明，在没有特别描述的情况下，用400mhz的nmr装置测定。
[0314]1h-nmr谱中的标记是如下所述的含义。
[0315]
s：单峰(singlet)d：二重峰(doublet)t：三重峰(triplet)q：四重峰(quartet)dd：双二重峰(double doublet)ddd：双双二重峰(double double doublet)brs：宽单峰(broad singlet)m：多重峰(multiplet)j：耦合常数(coupling constant)。
[0316]
[制造例1]2-(3-(叔丁氧基)-5-氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷的制造[化47](步骤1)1-溴-3-(叔丁氧基)-5-氟苯的制造[化48]
在氩气气流下，向3-溴-5-氟苯酚(500mg)中在室温下依次添加二碳酸二叔丁酯(1.14g)、高氯酸镁(58mg)。将该反应混合物在50℃下进行1小时20分钟搅拌。向该反应混合液中在50℃下添加二碳酸二叔丁酯。将该反应混合液在50℃下进行1小时搅拌，进一步在65℃下进行1小时搅拌，冷却至室温。向该反应混合液中在室温下添加二碳酸二叔丁酯。将该反应混合液在65℃下进行3小时搅拌。将该反应混合液冷却至室温，添加正己烷/乙酸乙酯(1/1)混合液。将该反应混合液用3n盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水依次洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=1/0至20/1)精制，由此以收率68%得到标题化合物(437mg)。
[0317]
(步骤2)2-(3-(叔丁氧基)-5-氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷的制造[化49]向步骤1中得到的1-溴-3-(叔丁氧基)-5-氟苯(437mg)的dmso(5ml)溶液中，在氩气氛围下，在室温下依次添加乙酸钾(434mg)、双(频哪醇合)二硼(898mg)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)
·
二氯甲烷加成体(144mg)。将该反应混合液在90℃下进行2.5小时搅拌。将该反应混合液冷却至室温。向该反应混合液中，依次添加正己烷/乙酸乙酯(1/1)混合液、水。将该反应混合液在室温下进行50分钟搅拌，静置过夜。向该反应混合液中依次添加正己烷/乙酸乙酯(1/1)混合液、水、硅胶和硅藻土。将该反应混合液进行搅拌后，滤去不溶物，将该不溶物用正己烷/乙酸乙酯(1/1)混合液洗涤。将该滤液用正己烷/乙酸乙酯(1/1)混合液萃取。将该有机层依次用水洗涤2次、用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。将该残渣用硅胶薄层色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=10/1)精制，由此以收率85%得到标题化合物(443mg)。
[0318]
[制造例2](3r,4r)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸的制造[化50](步骤1)2-甲基-3-亚甲基丁二酸 二乙基酯的制造[化51]在氮气气流下，向叔丁醇钾(180g)中在室温下添加thf(2.55l)。向该混合液中在冰冷下，用13分钟滴加磷酰基乙酸三乙酯(314g)。将所使用的滴液漏斗用thf(511ml)洗涤，将洗涤液添加至反应混合液中。将该反应混合液在冰冷下进行2小时9分钟搅拌。向该反应混合液中在冰冷下用20分钟滴加2-溴丙酸乙酯(247g)。将所使用的滴液漏斗用thf(79ml)洗涤，将洗涤液添加至反应混合液中。将该反应混合液在室温下进行22小时45分钟搅拌。向该反应混合液中在冰冷下，用1分钟添加碳酸钾(188g)。向该反应混合液中在冰冷下用10分钟滴加37重量%甲醛水溶液(152ml)。将该反应混合液在室温下进行19小时44分钟搅拌。向该反应混合液中在室温下用1分钟添加水(1.57l)。将该反应混合液在室温下进行1小时48分钟搅拌。将该反应混合液分层。将该水层用thf(200ml)进行2次萃取。合并所得有机层，浓缩。向该残渣中添加甲苯(471ml)和饱和食盐水(471ml)。将该反应混合液进行搅拌，分层。将该有机层用硫酸钠(63g)干燥。将该硫酸钠滤去。另外，使用磷酰基乙酸三乙酯(300g)同样进行反应，将所得滤液与上述得到的滤液合并，由此得到标题化合物(相当于2.66mol)的甲苯溶液(约921ml)。所得标题化合物的甲苯溶液记作收率100%，用于下一步骤。标题化合物的生成通过hplc分析确认。
[0319]
hplc的测定仪器和条件示于以下。
[0320]
测定仪器：hplc系统 岛津制作所 高效液相色谱 prominence测定条件：柱：kinetex c18：2.6μm,50mm
×
2.1mm(phenomenex)柱温度：40℃流速：0.4ml/min.分析时间：10min.检测波长：uv(220nm)流动相：(a液)水、(b液)乙腈
流动相的送液：a液和b液的混合比(a液/b液(体积%))从注入后0分钟至0.01分钟保持80/20，0.01分钟至7分钟从80/20至10/90直线变化，7分钟至8分钟保持10/90，8分钟至9分钟从10/90至80/20直线变化，9分钟至10分钟保持80/20。
[0321]
上述hplc测定条件中的标题化合物的保留时间是约3.7分钟。
[0322]
(步骤2)(顺式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸乙基酯和(反式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸乙基酯的混合物的制造[化52]向步骤1中得到的2-甲基-3-亚甲基丁二酸 二乙基酯(相当于2.66mol)的甲苯溶液(约921ml)中，在氮气气流下，在室温下用2分钟滴加2,4-二甲氧基苯甲基胺(468g)。将该反应混合液在120℃下进行5小时45分钟搅拌。将该反应混合液在室温下在周末静置。将该反应混合液冰冷，内温设为约15℃。向该反应混合液中滴加2n盐酸(1.33l)，搅拌。将该反应混合液分层。将该水层用甲苯(150ml)萃取。合并所得有机层，用饱和食盐水与水的混合液(600ml、饱和食盐水/水=1/1)洗涤，用硫酸钠(120g)干燥，浓缩，在室温下减压干燥过夜，由此得到标题化合物的粗产物(790g；顺式/反式=约1/1，包含5.5重量%的甲苯)。标题化合物的生成通过hplc分析确认。
[0323]
hplc的测定仪器和条件示于以下。
[0324]
测定仪器：hplc系统 岛津制作所 高效液相色谱 prominence测定条件：柱：atlantis t3：5μm,150mm
×
4.6mm(waters)柱温度：40℃流速：1.15ml/min.分析时间：18min.检测波长：uv(220nm)流动相：(a液)10mm 磷酸(钠)缓冲液(ph=2.6)、(b液)乙腈流动相的送液：a液和b液的混合比(a液/b液(体积%))从注入后0分钟至0.5分钟保持60/40，0.5分钟至8分钟从60/40至10/90直线变化，8分钟至12.5分钟保持10/90，12.5分钟至13.5分钟从10/90至60/40直线变化，13.5分钟至18分钟保持60/40。
[0325]
上述hplc测定条件中的(顺式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸 乙基酯的保留时间为约6.6分钟，(反式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸 乙基酯的保留时间为约6.9分钟。
[0326]
(步骤3)(反式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸的制造[化53]
向步骤2中得到的(顺式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸乙基酯和(反式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸乙基酯的混合物的粗产物(790g、包含5.5重量%的甲苯)中，在氮气气流下在室温下添加乙醇(1.15l)。向该反应混合液中在室温下用31分钟滴加乙醇钠(20重量%乙醇溶液、1.15l)。将该反应混合液在室温下进行2小时57分钟搅拌。将该反应混合液冰冷，用33分钟滴加水(1.84l)。向该反应混合液中在室温下添加cpme(1.8l)和甲苯(1.8l)，分层(有机层1)。向该水层中添加cpme(1.8l)，分层(有机层2)。从该水层中馏去溶剂1.8l。向该水层中在冰冷下，滴加6n盐酸(110ml)，添加乙酸乙酯(1.8l)。向该混合液中在冰冷下滴加6n盐酸(300ml)，进行约10分钟搅拌。向该混合液中在冰冷下依次添加水(2.2l)、6n盐酸(50ml)、水(1.0l)、10重量%硫酸氢钠水溶液(300ml)、乙醇(300ml)。将该混合液在室温下搅拌过夜。向该混合液中添加乙酸乙酯(600ml)，分层。将该水层用乙酸乙酯(600ml)进行2次萃取。合并所得有机层(其中，有机层1和有机层2除外)，用饱和食盐水与水的混合液(1l、饱和食盐水/水=1/1)洗涤。向该有机层中添加硫酸钠(120g)和活性炭(30g)，在室温下进行1小时搅拌。将该混合液通过硅藻土过滤，滤去不溶物。将该不溶物用乙酸乙酯(3l)洗涤。合并所得滤液，浓缩，在室温下减压干燥3小时，由此得到标题化合物的粗产物(561g)。
[0327]
另外，合并上述有机层1和有机层2，浓缩。向该残渣中添加甲苯(450ml)和水(450ml)，分层。将该水层用甲苯(450ml)洗涤2次。向该水层中添加乙酸乙酯(450ml)。向该混合液中在冰冷下滴加6n盐酸(70ml)。向该混合液中添加乙酸乙酯(300ml)，分层。将该水层用乙酸乙酯(150ml)萃取。合并所得乙酸乙酯的有机层，用饱和食盐水与水的混合液(225ml、饱和食盐水/水=1/1)洗涤。向该有机层中添加硫酸钠(30g)和活性炭(7.5g)，在室温下进行1小时搅拌。将该混合液过滤，滤去不溶物。将该不溶物用乙酸乙酯(750ml)洗涤。合并所得滤液，浓缩，在室温下减压干燥3小时，由此得到标题化合物的粗产物(87.3g)。
[0328]
向将该粗产物与上述中得到的标题化合物的粗产物合并的混合物中，在氮气气流下，添加cpme(3l)。将该混合液在120℃下搅拌。将该混合液进行17小时34分钟搅拌，缓慢冷却至室温。将该混合液冰冷，在内温约1℃下进行3小时搅拌。将该析出物滤取，用冷的cpme(900ml)洗涤。将该析出物在50℃下减压干燥过夜，由此以3步骤收率75%得到标题化合物(585g)。标题化合物的生成通过hplc分析和nmr确认。
[0329]
hplc的测定仪器和条件与步骤2相同。本hplc测定条件中的标题化合物的保留时间为约3.1分钟。
[0330]
(步骤4)(3r,4r)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸与(1r,2r)-(-)-2-氨基-1-(4-硝基苯基)-1,3-丙二醇的非对映异构体盐的制造[化54]向步骤3中得到的(反式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸(585g)中，在氮气气流下在室温下添加乙腈(2.9l)。将该混合液在85℃下搅拌。向该混合液中在85℃下，用14分钟添加(1r,2r)-(-)-2-氨基-1-(4-硝基苯基)-1,3-丙二醇(254g)。将该反应混合液在90℃下进行2小时48分钟搅拌。将该反应混合液搅拌过夜，冷却至室温。将该析出物滤取，用乙腈(2.4l)洗涤。将该析出物在室温、常压下干燥8.5小时，由此得到标题化合物的粗晶体(516g)。向该粗晶体中在氮气气流下在室温下添加乙腈(2.5l)和水(0.5l)。将该混合液在100℃下进行1小时14分钟搅拌。向该混合液中在100℃下用1小时7分钟滴加乙腈(1.5l)。将该混合液在100℃下进行10分钟搅拌。将该混合液进行21小时10分钟搅拌，冷却至室温。将该混合液在冰冷下进行3小时54分钟搅拌。将该析出物滤取，用乙腈(1.5l)洗涤。将该析出物在室温、常压下干燥4小时、，由此以收率45%得到标题化合物(448g、99.8�)。标题化合物的生成通过hplc分析确认。
[0331]
hplc的测定仪器和条件示于以下。
[0332]
测定仪器：hplc系统 岛津制作所 高效液相色谱 prominence测定条件：柱：chiral pak ad-3r：3μm,150mm
×
4.6mm(daicel)柱温度：40℃流速：0.50ml/min.分析时间：10min.检测波长：uv(220nm)流动相：(a液)10mm 磷酸(钠)缓冲液(ph=2.6)、(b液)乙腈流动相的送液：a液和b液的混合比(a液/b液(体积%))保持60/40。
[0333]
上述hplc测定条件中的(3r,4r)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸的保留时间为约5.6分钟，(3s,4s)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸的保留时间为约6.5分钟。
[0334]
标题化合物的立体结构通过从甲基异丁基酮中重结晶得到的单晶的x射线线晶体结构分析而确定。
[0335]
非对映异构体过量通过本测定结果中的hplc面积百分数确定((3r,4r)体/(3s,4s)体=99.886%/0.114%)。
[0336]
(步骤5)(3r,4r)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸的制造[化55]
向步骤4中得到的(3r,4r)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸与(1r,2r)-(-)-2-氨基-1-(4-硝基苯基)-1,3-丙二醇的非对映异构体盐(448g)中，在室温下添加乙酸乙酯(1.8l)和水(1.34l)。向该混合液中在室温下，用16分钟滴加6n盐酸(168ml)。将该混合液分层。将该水层用乙酸乙酯(450ml)进行3次萃取。合并所得有机层，用2n盐酸(224ml)、饱和食盐水(224ml)依次洗涤，用硫酸钠(90g)干燥，浓缩。向该残渣中添加甲苯(220ml)，浓缩。将该残渣在室温下减压干燥，由此以收率98%得到标题化合物(254g)。
[0337]
[制造例3](3r,4r)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸的制造[化56](步骤1)2-甲基-3-亚甲基丁二酸二乙基酯的制造[化57]在氮气气流下，向叔丁醇钾(180g)中在室温下添加thf(2.55l)。向该混合液中在冰冷下，用13分钟滴加磷酰基乙酸三乙酯(314g)。将所使用的滴液漏斗用thf(511ml)洗涤，将洗涤液添加至反应混合液中。将该反应混合液在冰冷下进行2小时9分钟搅拌。向该反应混合液中在冰冷下用20分钟滴加2-溴丙酸乙酯(247g)。将所使用的滴液漏斗用thf(79ml)洗涤，将洗涤液添加至反应混合液中。将该反应混合液在室温下进行22小时45分钟搅拌。向该反应混合液中在冰冷下用1分钟添加碳酸钾(188g)。向该反应混合液中在冰冷下用10分钟滴加37重量%甲醛水溶液(152ml)。将该反应混合液在室温下进行19小时44分钟搅拌。向该反应混合液中在室温下用1分钟添加水(1.57l)。将该反应混合液在室温下进行1小时48分钟搅拌。将该反应混合液分层。其水层用thf(200ml)进行2次萃取。合并所得有机层，浓缩。向该残渣中添加甲苯(471ml)和饱和食盐水(471ml)。将该反应混合液进行搅拌，分层。
将该有机层用硫酸钠(63g)干燥。将该硫酸钠滤去。另外，使用磷酰基乙酸三乙酯(300g)同样进行反应，将所得滤液与上述中得到的滤液合并，由此得到标题化合物(相当于2.66mol)的甲苯溶液(约921ml)。所得标题化合物的甲苯溶液记作收率100%，用于下一步骤。标题化合物的生成通过hplc分析确认。
[0338]
hplc的测定仪器和条件示于以下。
[0339]
测定仪器：hplc系统 岛津制作所 高效液相色谱 prominence测定条件：柱：kinetex c18：2.6μm,50mm
×
2.1mm(phenomenex)柱温度：40℃流速：0.4ml/min.分析时间：10min.检测波长：uv(220nm)流动相：(a液)水、(b液)乙腈流动相的送液：a液和b液的混合比(a液/b液(体积%))从注入后0分钟至0.01分钟保持80/20，0.01分钟至7分钟从80/20至10/90直线变化，7分钟至8分钟保持10/90，8分钟至9分钟从10/90至80/20直线变化，9分钟至10分钟保持80/20。
[0340]
上述hplc测定条件中的标题化合物的保留时间是约3.7分钟。
[0341]
(步骤2)(顺式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸乙基酯和(反式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸乙基酯的混合物的制造[化58]向步骤1中得到的2-甲基-3-亚甲基丁二酸二乙基酯(相当于2.66mol)的甲苯溶液(约921ml)中在氮气气流下在室温下用2分钟滴加2,4-二甲氧基苯甲基胺(468g)。将该反应混合液在120℃下进行5小时45分钟搅拌。将该反应混合液在室温下静置一个周末。将该反应混合液冰冷，内温设为约15℃。向该反应混合液中滴加2n盐酸(1.33l)，搅拌。将该反应混合液分层。将该水层用甲苯(150ml)萃取。合并所得有机层，用饱和食盐水与水的混合液(600ml、饱和食盐水/水=1/1)洗涤，用硫酸钠(120g)干燥，浓缩，在室温下减压干燥过夜，由此得到标题化合物的粗产物(790g；顺式/反式=约1/1，包含5.5重量%的甲苯)。标题化合物的生成通过hplc分析确认。
[0342]
hplc的测定仪器和条件示于以下。
[0343]
测定仪器：hplc系统 岛津制作所 高效液相色谱 prominence测定条件：柱：atlantis t3：5μm,150mm
×
4.6mm(waters)柱温度：40℃
流速：1.15ml/min.分析时间：18min.检测波长：uv(220nm)流动相：(a液)10mm 磷酸(钠)缓冲液(ph=2.6)、(b液)乙腈流动相的送液：a液和b液的混合比(a液/b液(体积%))从注入后0分钟至0.5分钟保持60/40，0.5分钟至8分钟从60/40至10/90直线变化，8分钟至12.5分钟保持10/90，12.5分钟至13.5分钟从10/90至60/40直线变化，13.5分钟至18分钟保持60/40。
[0344]
上述hplc测定条件中的(顺式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸乙基酯的保留时间为约6.6分钟，(反式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸乙基酯的保留时间为约6.9分钟。
[0345]
(步骤3)(反式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸的制造[化59]向步骤2中得到的(顺式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸乙基酯和(反式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸乙基酯的混合物的粗产物(790g、包含5.5重量%的甲苯)中，在氮气气流下，在室温下添加乙醇(1.15l)。向该反应混合液中在室温下用31分钟滴加乙醇钠(20重量%乙醇溶液、1.15l)。将该反应混合液在室温下进行2小时57分钟搅拌。将该反应混合液冰冷，用33分钟滴加水(1.84l)。向该反应混合液中在室温下添加cpme(1.8l)和甲苯(1.8l)，分层(有机层1)。向该水层中添加cpme(1.8l)，分层(有机层2)。从该水层中馏去溶剂1.8l。向该水层中在冰冷下，滴加6n盐酸(110ml)，添加乙酸乙酯(1.8l)。向该混合液中在冰冷下滴加6n盐酸(300ml)，进行约10分钟搅拌。向该混合液中在冰冷下依次添加水(2.2l)、6n盐酸(50ml)、水(1.0l)、10重量%硫酸氢钠水溶液(300ml)、乙醇(300ml)。将该混合液在室温下搅拌过夜。向该混合液中添加乙酸乙酯(600ml)，分层。将该水层用乙酸乙酯(600ml)进行2次萃取。合并所得有机层(其中，有机层1和有机层2除外)，用饱和食盐水与水的混合液(1l、饱和食盐水/水=1/1)洗涤。向该有机层中添加硫酸钠(120g)和活性炭(30g)，在室温下进行1小时搅拌。将该混合液通过硅藻土过滤，滤去不溶物。将该不溶物用乙酸乙酯(3l)洗涤。合并所得滤液，浓缩，在室温下减压干燥3小时，由此得到标题化合物的粗产物(561g)。
[0346]
另外，合并上述有机层1和有机层2，浓缩。向该残渣中添加甲苯(450ml)和水(450ml)，分层。将该水层用甲苯(450ml)进行2次洗涤。向该水层中添加乙酸乙酯(450ml)。向该混合液中在冰冷下滴加6n盐酸(70ml)。向该混合液中添加乙酸乙酯(300ml)，分层。将该水层用乙酸乙酯(150ml)萃取。合并所得乙酸乙酯的有机层，用饱和食盐水与水的混合液(225ml、饱和食盐水/水=1/1)洗涤。向该有机层中添加硫酸钠(30g)和活性炭(7.5g)，在室温下进行1小时搅拌。将该混合液过滤，滤去不溶物。将该不溶物用乙酸乙酯(750ml)洗涤。
合并所得滤液，浓缩，在室温下减压干燥3小时，由此得到标题化合物的粗产物(87.3g)。
[0347]
向将该粗产物与上述中得到的标题化合物的粗产物合并的混合物中，在氮气气流下，添加cpme(3l)。将该混合液在120℃下搅拌。将该混合液进行17小时34分钟搅拌，缓慢冷却至室温。将该混合液冰冷，在内温约1℃下进行3小时搅拌。将该析出物滤取，用冷的cpme(900ml)洗涤。将该析出物在50℃下减压干燥过夜，由此以3步骤收率75%得到标题化合物(585g)。标题化合物的生成通过hplc分析和nmr确认。
[0348]
hplc的测定仪器和条件与步骤2相同。本hplc测定条件中的标题化合物的保留时间为约3.1分钟。
[0349]
(步骤4)(3r,4r)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸与(1r,2r)-(-)-2-氨基-1-(4-硝基苯基)-1,3-丙二醇的非对映异构体盐的制造[化60]向步骤3中得到的(反式)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸(585g)中，在氮气气流下，在室温下添加乙腈(2.9l)。将该混合液在85℃下搅拌。向该混合液中在85℃下，用14分钟添加(1r,2r)-(-)-2-氨基-1-(4-硝基苯基)-1,3-丙二醇(254g)。将该反应混合液在90℃下进行2小时48分钟搅拌。将该反应混合液搅拌过夜，冷却至室温。将该析出物滤取，用乙腈(2.4l)洗涤。将该析出物在室温、常压下干燥8.5小时，由此得到标题化合物的粗晶体(516g)。向该粗晶体中在氮气气流下在室温下添加乙腈(2.5l)和水(0.5l)。将该混合液在100℃下进行1小时14分钟搅拌。向该混合液中在100℃下用1小时7分钟滴加乙腈(1.5l)。将该混合液在100℃下进行10分钟搅拌。将该混合液进行21小时10分钟搅拌，冷却至室温。将该混合液在冰冷下进行3小时54分钟搅拌。将该析出物滤取，用乙腈(1.5l)洗涤。将该析出物在室温、常压下干燥4小时，由此以收率45%得到标题化合物(448g、99.8�)。标题化合物的生成通过hplc分析确认。
[0350]
hplc的测定仪器和条件示于以下。
[0351]
测定仪器：hplc系统 岛津制作所 高效液相色谱 prominence测定条件：柱：chiral pak ad-3r：3μm,150mm
×
4.6mm(daicel)柱温度：40℃流速：0.50ml/min.分析时间：10min.检测波长：uv(220nm)
流动相：(a液)10mm 磷酸(钠)缓冲液(ph=2.6)、(b液)乙腈流动相的送液：a液和b液的混合比(a液/b液(体积%))保持60/40。
[0352]
上述hplc测定条件中的(3r,4r)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸的保留时间为约5.6分钟，(3s,4s)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸的保留时间为约6.5分钟。
[0353]
标题化合物的立体结构通过从甲基异丁基酮中重结晶得到的单晶的x射线晶体结构分析而确定。
[0354]
非对映异构体过量通过本测定结果中的hplc面积百分数确定((3r,4r)体/(3s,4s)体=99.886%/0.114%)。
[0355]
(步骤5)(3r,4r)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸的制造[化61]向步骤4中得到的(3r,4r)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸与(1r,2r)-(-)-2-氨基-1-(4-硝基苯基)-1,3-丙二醇的非对映异构体盐(448g)中，在室温下添加乙酸乙酯(1.8l)和水(1.34l)。向该混合液中在室温下用16分钟滴加6n盐酸(168ml)。将该混合液分层。将该水层用乙酸乙酯(450ml)进行3次萃取。合并所得有机层，用2n盐酸(224ml)、饱和食盐水(224ml)依次洗涤，用硫酸钠(90g)干燥，浓缩。向该残渣中添加甲苯(220ml)，浓缩。将其残渣在室温下减压干燥，由此以收率98%得到标题化合物(254g)。甲苯(220ml)，浓缩。将其残渣在室温下减压干燥，由此以收率98%得到标题化合物(254g)。
[0356]
(步骤6)(3r,4r)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸的制造[化62]向步骤5中得到的(3r,4r)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸(254g)和以与步骤5相同的方式得到的该化合物(33g)的混合物中，在氮气气流下，在
室温下添加苯甲醚(160ml)的三氟乙酸(1.44l)溶液。将该反应混合液在80℃下进行4小时4分钟搅拌。将该反应混合液在水冷下冷却至室温。将该反应混合液浓缩。向该残渣中添加甲苯(287ml)，浓缩。将该残渣在室温下静置过夜。向该残渣中添加甲苯(287ml)，浓缩。向该残渣中在室温下添加甲苯(80ml)。向该混合液中在水冷下添加二异丙基醚(2.9l)。将该混合液在水冷下搅拌。滤取从该混合液中析出的固体，用二异丙基醚(431ml)洗涤。将该固体在室温、常压下干燥，由此以收率98%得到标题化合物(137g)。
[0357]
[制造例4]3-肼基-5-(三氟甲基)吡啶的制造[化63](步骤1)3-氟-5-肼基吡啶的制造[化64]向5-氟吡啶-3-胺(1.5g)的6n盐酸(15ml)溶液中，在0℃下用2分钟滴加亚硝酸钠(0.923g)的水(7.5ml)溶液。将该反应混合液在0℃下进行1小时7分钟搅拌。向该反应混合液中在0℃下用3分钟滴加氯化亚锡(ii)(6.34g)的6n盐酸(15ml)悬浮液。将该反应混合液在0℃下进行30分钟搅拌、在室温下进行23小时搅拌。向该反应混合液中在0℃下滴加8n氢氧化钠水溶液(约34ml)。将该混合液在0℃下搅拌。将该混合液用乙酸乙酯进行8次萃取。合并所得有机层，用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。向所得残渣中在室温下添加甲基叔丁基醚(6ml)/正己烷(36ml)混合液。将该悬浮液在室温下搅拌。从该悬浮液中滤取固体，用正己烷洗涤。将该固体在60℃下减压干燥，由此以57%的收率得到标题化合物(965.8mg)。
[0358]
[制造例5]3-肼基-5-(三氟甲基)吡啶的制造[化65]
丙醇(1ml)。使用防爆屏障，将该反应混合液在95℃下进行22小时搅拌。将该反应混合液冷却至室温。向该反应混合液中添加水和饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯进行5次萃取。合并所得有机层，用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。向该残渣中在室温下添加正己烷/乙酸乙酯(3/1)混合液。将该悬浮液在室温下搅拌。从该悬浮液中滤取固体，用正己烷/乙酸乙酯(3/1)混合液洗涤。将其固体在室温下减压干燥，由此以41%的收率得到标题化合物(647mg)。
[0361]
[实施例1](3r,4r)-n-(5-(3-(叔丁氧基)-5-氟苯基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺的合成[化69](步骤1) 3-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1h-吡唑的制造[化70]向1h-吡唑-3-胺(100g)中在室温下添加乙酸(1l)，进行5分钟搅拌。向该混合液中在室温下添加2,5-己二酮(148ml)，进行5分钟搅拌。将该反应混合液在120℃下进行2.5小时搅拌，冷却至室温。向该反应混合液中在室温下添加水(1l)。将该反应混合液在室温下进行50分钟搅拌。滤取析出的固体，用水(1l)洗涤。将所得湿固体在室温、常压下干燥过夜后，在65℃下进行3天和8.5小时减压干燥，由此以收率89%得到标题化合物(172.47g)。
[0362]
(步骤2) 1-(溴二氟甲基)-3-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1h-吡唑和1-(溴二氟甲基)-5-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1h-吡唑的混合物的制造[化71]
在氩气气流下，在冰冷下将dmf(100ml)添加至氢化钠(14.9g)中。向该混合液中在冰冷下用20分钟滴加步骤1中得到的3-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1h-吡唑(40g)的dmf(150ml)悬浮液。将所使用的滴液漏斗用dmf(50ml)洗涤，将洗涤液添加至反应混合液中。将该反应混合液在水冷下进行1.5小时搅拌。向该反应混合液中在冰冷下添加四丁基溴化铵(0.80g)。将该反应混合液在冰冷下进行15分钟搅拌。向该反应混合液中在冰冷下用15分钟滴加二溴二氟甲烷(45ml)的dmf(50ml)溶液。将该反应混合液在水冷下进行2小时10分钟搅拌。向该反应混合液中在氩气氛围下在水冷下滴加二溴二氟甲烷(20ml)。将该反应混合液在水冷下进行40分钟搅拌后，静置过夜。向该反应混合液中在冰冷下添加饱和氯化铵水溶液(200ml)。向该反应混合液中添加乙酸乙酯和水。将该反应混合液通过硅藻土过滤，分层。将该水层用乙酸乙酯萃取。合并所得有机层，向其中添加饱和食盐水。将该混合液通过硅藻土过滤，分层。将该水层用乙酸乙酯萃取。合并所得有机层，用硫酸钠干燥，浓缩。向该残渣中添加甲苯(250ml)，浓缩。再次进行该作业。向该残渣中添加乙酸乙酯(约150ml)，滤去不溶物。将该不溶物用乙酸乙酯洗涤。合并所得滤液，浓缩。将该残渣一边搅拌一边在室温下减压干燥10分钟。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=30/1至20/1)精制，由此以收率54%得到标题化合物(40.6g、包含3.7重量%的己烷的1-(溴二氟甲基)-3-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1h-吡唑：1-(溴二氟甲基)-5-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1h-吡唑=约3：1)。
[0363]
(步骤3) 3-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑和5-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑的混合物的制造[化72]向步骤2中得到的1-(溴二氟甲基)-3-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1h-吡唑和1-(溴二氟甲基)-5-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1h-吡唑的混合物(40.6g、包含3.7重量%的己烷)的环丁砜(400ml)溶液中，在氩气气流下在室温下添加四甲基氟化铵(13.0g)。将该反应混合液在100℃下进行1小时搅拌。向该反应混合液中在100℃下追加四甲基氟化铵(9.4g)。将该反应混合液在100℃下进行1小时15分钟搅拌。向该反应混合液中在100℃下追加四甲基氟化铵(10g)。将该反应混合液在100℃下进行40分钟搅拌。进一步，向该反应混合液中在100℃下追加四甲基氟化铵(5g)。将该反应混合液在100℃下进行2小时5分钟搅拌，
冷却至室温。向该反应混合液中在冰冷下依次缓慢添加水(400ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(200ml)。向该反应混合液中添加正己烷/乙酸乙酯(2/3)混合液(400ml)。将该反应混合液通过硅藻土过滤，分层。将该有机层用饱和食盐水洗涤。合并所得水层，用正己烷/乙酸乙酯(2/3)混合液(300ml)萃取。将该有机层用饱和食盐水洗涤。合并所得有机层，用硫酸钠干燥，浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=30/1至25/1)精制，由此以收率51%得到标题化合物(21.85g、包含24.4重量%的正己烷的3-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑：5-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑=约6：1)。
[0364]
(步骤4) 3-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-5-碘-1-(三氟甲基)-1h-吡唑的制造[化73]向步骤3中得到的3-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑和5-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑的混合物(21.85g、包含24.4重量%的正己烷)的thf(180ml)溶液中，在氩气氛围下在-70℃下用5分钟滴加正丁基锂的正己烷溶液(1.55m、51.1ml)。将该反应混合液在-70℃下进行25分钟搅拌。向该反应混合液中在-70℃下用5分钟滴加碘(18.3g)的thf(50ml)溶液。将所使用的滴液漏斗用thf(10ml)洗涤，将洗涤液添加至反应混合液中。将该反应混合液在-70℃下进行30分钟搅拌。向该反应混合液中在-70℃下追加碘(0.90g)。将该反应混合液在-70℃下进行0.5小时搅拌。向该反应混合液中在-70℃下依次添加水(250ml)、乙酸乙酯(250ml)。将该反应混合液在室温下进行搅拌，分层。将该有机层用10重量%的亚硫酸氢钠水溶液(250ml)、饱和食盐水(150ml)依次洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=50/1至30/1)精制。收集含有标题化合物的级分，浓缩。向该残渣中添加正己烷。浓缩至残渣的重量为27.5g。向该残渣中添加正己烷(20ml)。将该悬浮液在室温下进行10分钟搅拌。滤取该析出物，用正己烷(30ml)洗涤，减压干燥，由此以收率67%得到标题化合物(17.14g)。进一步，将该滤液浓缩。将该残渣从正己烷中结晶，以收率6.4%得到标题化合物(1.63g)。
[0365]
(步骤5)5-碘-1-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-胺的制造[化74]
向步骤4中得到的3-(2,5-二甲基-1h-吡咯-1-基)-5-碘-1-(三氟甲基)-1h-吡唑(18.77g)中，在室温下依次添加乙醇与水的混合液(乙醇/水=2/1、480ml)、羟基胺
·
盐酸盐(73.5g)、三乙基胺(14.7ml)。将该反应混合液在100℃下进行38小时20分钟搅拌。将该反应混合液冷却至室温，馏去乙醇。向该反应混合液中在冰冷下缓慢添加氢氧化钠(42.3g)的水(130ml)溶液，接着添加乙酸乙酯(200ml)。将该反应混合液进行搅拌后，分层。将该水层用乙酸乙酯(200ml)萃取。合并所得有机层，用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。向该残渣中添加乙酸乙酯(30ml)和正己烷(30ml)，滤去不溶物。将该滤液浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=4/1至3/1)精制，由此以收率96%得到标题化合物(16.27g、包含14重量%的乙酸乙酯)。
[0366]
(步骤6) 5-(3-(叔丁氧基)-5-氟苯基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-胺的制造[化75]向步骤5中得到的5-碘-1-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-胺(80mg、包含14重量%的乙酸乙酯)的甲苯(3ml)溶液中，在氩气氛围下在室温下依次添加制造例1步骤2中得到的2-(3-(叔丁氧基)-5-氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(127mg)、乙酸钯(ii)(6.5mg)、2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基联苯(20mg)。将该反应混合液在室温下进行4分钟搅拌。向该反应混合液中在室温下添加2m磷酸三钾水溶液(1.5ml)。将该反应混合液在90℃下进行47分钟搅拌。将该反应混合液冷却至室温。向该反应混合液中添加乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液。将该反应混合液通过棉塞过滤，用乙酸乙酯萃取。将该有机层用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水依次洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。合并该残渣与另外使用步骤5中得到的5-碘-1-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-胺(70mg、包含14重量%的乙酸乙酯)以与本步骤相同的方式得到的标题化合物中的一部分(15mg)，将它们用硅胶薄层色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=3/1)精制，由此得到标题化合物(108mg)。
[0367]
(步骤7)(3r,4r)-n-(5-(3-(叔丁氧基)-5-氟苯基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-基)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺的制造[化76]在氩气氛围下，向以与制造例2步骤5相同的方式得到的(3r,4r)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸(55mg)的氯仿(0.55ml)溶液中，在冰冷下依次添加dmf(1μl)和草酰氯(33μl)。将该反应混合液在冰冷下进行50分钟搅拌。将该反应混合液浓缩，进行减压干燥。向该残渣中在氩气氛围下在冰冷下依次添加氯仿(0.4ml)、步骤6中得到的5-(3-(叔丁氧基)-5-氟苯基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-胺(40mg)。向该反应混合液中在冰冷下添加吡啶(50μl)。将该反应混合液在冰冷下进行5分钟搅拌、在室温下进行35分钟搅拌。向该反应混合液中在室温下添加饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。将该有机层用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。将该残渣用硅胶薄层色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=1/1)精制，由此以收率80%得到标题化合物(60mg)。标题化合物的生成通过薄层色谱确认(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=2/1、rf值：0.19)。
[0368]
(步骤8)(3r,4r)-n-(5-(3-氟-5-羟基苯基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺的制造[化77]向步骤7中得到的(3r,4r)-n-(5-(3-(叔丁氧基)-5-氟苯基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-基)-1-(2,4-二甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺(60mg)中，在室温下添加苯甲醚(58μl)和三氟乙酸(2ml)。将该反应混合液在80℃下进行1小时20分钟搅拌。将该反应混合液浓缩。向该残渣中添加饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。将该有机层用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。将该残渣用硅胶薄层色谱(洗脱溶剂：氯仿/乙酸乙酯=1/1)精制，由此以收率76%得到标题化合物(29.9mg)。
[0369]
(步骤9)(3r,4r)-n-(5-(3-(叔丁氧基)-5-氟苯基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺的制造[化78]向步骤8中得到的(3r,4r)-n-(5-(3-氟-5-羟基苯基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺(30mg)中，在室温下依次添加二碳酸二叔丁酯、氯仿(1ml)、高氯酸镁。将该反应混合物在55℃下进行0.5小时搅拌。向该反应混合液中在55℃下添加高氯酸镁。将该反应混合液在55℃下进行1小时10分钟搅拌。向该反应混合液中在55℃下进一步添加高氯酸镁。将该反应混合液在55℃下进行20分钟搅拌。将该反应混合液冷却至室温，添加乙酸乙酯。将该反应混合液用1n盐酸、饱和食盐水依次洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。将该残渣用硅胶薄层色谱(洗脱溶剂：氯仿/甲醇=15/1)精制，由此以收率56%得到标题化合物(19.2mg)。
[0370]
(步骤10)(3r,4r)-n-(5-(3-(叔丁氧基)-5-氟苯基)-1-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺的晶体的制造将标题化合物(100mg)在乙醇(0.4ml)中在65℃下进行8分钟搅拌，由此溶解。向该混合溶液中在65℃下用2分钟滴加水(0.4ml)。将该混合液在65℃下进行10分钟搅拌。将该混合液用2小时搅拌至达到25℃。进一步，将该混合液在室温下进行2小时搅拌。滤取从该混合液中析出的固体。将所得固体用乙醇/水(=1/1)洗涤，在60℃下减压干燥，由此以88%的收率得到标题化合物的晶体(87.8mg)。
[0371]
[实施例2](3r,4r)-n-(5-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)-1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)-1h-吡唑-3-基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺的合成[化79]
(步骤1)1-溴-3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯的制造[化80]向1-溴-3,5-二氟苯(5.97ml)的1,3-二甲基-2-咪唑啉酮(10ml)溶液中，在氮气气流下在室温下添加氢化钠(4.14g)。向该混合液中在水冷下滴加1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-醇(8ml)。向该反应混合液中在室温下添加1,3-二甲基-2-咪唑啉酮(2ml)。向该反应混合液中在室温下滴加1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-醇(3.16ml)。这些全部醇的滴加用45分钟。将该反应混合液在室温下进行20分钟搅拌、在80℃下进行20分钟搅拌、在100℃下进行20分钟搅拌、在130℃下进行20小时40分钟搅拌。向该反应混合液中在冰冷下添加水。将该混合液用正己烷进行3次萃取。合并所得有机层，用水进行3次洗涤，用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，在140mmhg的减压下、35℃下浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=100/0至0/100)精制，由此以47%的收率得到标题化合物(8.31g；包含12重量%的正己烷)。
[0372]
(步骤2)1-(1-丁氧基乙烯基)-3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯的制造[化81]向步骤1中得到的1-溴-3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯(2.86g；包含12重量%的正己烷)和以与步骤1相同的方式得到的该化合物(10.2g；包含12重量%的正己烷)的混合物的乙二醇(69ml)溶液中，在室温下添加丁基乙烯基醚(19.77ml)、三
乙基胺(10.65ml)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁(1.271g)和乙酸钯(ii)(0.257g)。将该反应混合液在氩气氛围下在110℃下进行19小时搅拌。将该反应混合液冷却至室温。向该反应混合液中添加水和正己烷。将该混合液通过硅藻土过滤。将该滤液用正己烷进行2次萃取。合并所得有机层，用水进行2次洗涤，用饱和食盐水洗涤，用硫酸镁干燥，在140mmhg的减压下在35℃下浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=100/0至95/5)精制，由此以44%的收率得到标题化合物(6.39g；包含15重量%的正己烷)。
[0373]
(步骤3)1-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)乙烷-1-酮的制造[化82]向步骤2中得到的1-(1-丁氧基乙烯基)-3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯(6.39g；包含15重量%的正己烷)的thf(25ml)溶液中，在0℃下添加2n盐酸(12.71ml)。将该反应混合液在室温下进行1小时10分钟搅拌。向该反应混合液中在冰冷下添加2n氢氧化钠水溶液，使ph为12。将该混合液用正己烷进行2次萃取。合并所得有机层，用饱和食盐水进行2次洗涤，用硫酸钠干燥，在120mmhg的减压下、35℃下浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=98/2至85/15)精制，由此以86%的收率得到标题化合物(4.09g；包含6重量%的正己烷)。
[0374]
(步骤4)4-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)-2,4-二氧代丁酸乙酯的制造[化83]向步骤3中得到的1-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)乙烷-1-酮(4.09g；包含6重量%的正己烷)的thf(38.4ml)溶液中，在氩气氛围下添加草酸二乙酯
(2.171ml)。向该混合液中在0℃下添加叔丁醇锂(1.396g)。将该反应混合液在0℃下进行3小时10分钟搅拌。向该反应混合液中在冰冷下添加1n盐酸，使ph为1。向该混合液中添加水，用乙酸乙酯进行2次萃取。所得有机层用饱和食盐水进行2次洗涤，用硫酸钠干燥。将该有机层浓缩，由此以94%的收率得到标题化合物(5.53g；包含4重量%的草酸二乙酯和6重量%的乙酸乙酯)。
[0375]
(步骤5)5-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)-1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)-1h-吡唑-3-甲酸乙酯的制造[化84]向步骤4中得到的4-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)-2,4-二氧代丁酸乙酯(500mg；含有4重量%的草酸二乙酯和6重量%的乙酸乙酯)的乙酸(2.25ml)溶液中，在氩气氛围下在室温下添加制造例6步骤1中得到的5-肼基-2-(三氟甲基)嘧啶(242mg)。将该反应混合液在100℃下进行21小时30分钟搅拌。将该反应混合液在室温下用周末静置。将该反应混合液浓缩。将乙酸用甲苯进行3次共沸去除。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=75/25至0/100)精制，由此得到标题化合物的粗精制物。向该粗精制物中在室温下添加正己烷/乙酸乙酯(20/1)混合液。将该悬浮液在室温下搅拌。从该悬浮液中滤取固体，用正己烷/乙酸乙酯(20/1)混合液洗涤。将所得固体在室温下减压干燥，由此以86%的收率得到标题化合物(541mg)。
[0376]
(步骤6)5-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)-1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)-1h-吡唑-3-甲酸的制造[化85]
向步骤5中得到的5-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)-1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)-1h-吡唑-3-甲酸乙酯(541mg)的thf(1.623ml)/甲醇(3.246ml)溶液中，在室温下添加2n氢氧化钠水溶液(1.068ml)。向该反应混合液中在室温下添加甲醇(4ml)。将该反应混合液在室温下进行25小时30分钟搅拌。向该反应混合液中在冰冷下添加1n盐酸，使ph为1。向该混合液中添加水，用乙酸乙酯进行2次萃取。合并所得有机层，用饱和食盐水进行2次洗涤，用硫酸钠干燥。将该有机层浓缩，由此以99%的收率得到标题化合物(504mg)。
[0377]
(步骤7)(5-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)-1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)-1h-吡唑-3-基)氨基甲酸叔丁酯的制造[化86]向步骤6中得到的5-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)-1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)-1h-吡唑-3-甲酸(495mg)的甲苯(4.95ml)混合液中，在氩气氛围下在室温下添加三乙基胺(0.346ml)和叠氮磷酸二苯酯(0.267ml)。将该反应混合液在室温下进行1小时搅拌。向该反应混合液中在室温下添加叔丁醇(4.26ml)。将该反应混合液在100℃下进行27小时15分钟搅拌。将该反应混合液浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=99/1至50/50)精制，由此以55%的收率得到标题化合物(315mg)。
[0378]
(步骤8)5-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)-1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)-1h-吡唑-3-胺的制造[化87]向步骤7中得到的(5-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)-1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)-1h-吡唑-3-基)氨基甲酸叔丁酯(315mg)中，在氩气氛围下在0℃下添加4n盐酸/1,4-二氧杂环己烷溶液(1.575ml)。将该反应混合液在0℃下进行10分钟搅拌，在室温下进行27小时40分钟搅拌。将该反应混合液浓缩。向该残渣中添加饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯进行2次萃取。合并所得有机层，用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=90/10至50/50)精制，由此得到固体。向该固体中在室温下添加正己烷/乙酸乙酯(10/1)混合液。将该悬浮液在室温下搅拌。从该悬浮液中滤取固体，用正己烷/乙酸乙酯(10/1)混合液洗涤。将所得固体在室温下减压干燥，由此以87%的收率得到标题化合物(224mg)。
[0379]
(步骤9)(3r,4r)-n-(5-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)-1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)-1h-吡唑-3-基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺的制造[化88]向步骤8中得到的5-(3-氟-5-((1,1,1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)氧基)苯基)-1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)-1h-吡唑-3-胺(60mg)和以与制造例3步骤6相同的方式得到的(3r,4r)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸(21.0mg)的吡啶(1ml)溶液中，在氩气氛围下在室温下添加wsc
·
hcl(28.2mg)。将该反应混合液在室温下进行29小时搅拌。将该反应混合液浓缩。向该残渣中添加水，用乙酸乙酯萃取。将所得有机层依次用1n盐酸进行2次、用水、饱
和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。将该残渣用硅胶薄层色谱(洗脱溶剂：乙酸乙酯/甲醇=50/1)精制，由此以86%的收率得到标题化合物(69mg；包含4重量%的乙酸乙酯和1重量%的正己烷)。乙酸乙酯和1重量%的正己烷)。
[0380]
[实施例3](3r,4r)-n-(5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺的合成[化89](步骤1)4-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-2,4-二氧代丁酸苯甲酯的制造[化90]在氩气氛围下，向1-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)乙烷-1-酮(5g)和草酸二苯甲酯(6.69g)的thf(50ml)溶液中，在冰冷下添加叔丁醇锂(1.982g)。将该反应混合液在冰冷下进行1小时搅拌。向该反应混合液中在冰冷下添加2n盐酸(12.5ml)、乙酸乙酯和水。将该混合液分层。将所得有机层用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥。将该有机层浓缩，由此得到标题化合物的粗精制物(11.7g)。
[0381]
(步骤2)5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-甲酸苯甲酯的制造[化91]
向步骤1中得到的4-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-2,4-二氧代丁酸苯甲酯的粗精制物(800mg)的乙酸(6ml)溶液中，在氩气氛围下在室温下添加制造例4步骤1中得到的3-氟-5-肼基吡啶(218mg)。将该反应混合液在100℃下进行19小时42分钟搅拌。将该反应混合液冷却至室温，浓缩。向该残渣中添加甲苯，浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=90/10至69/31)精制，由此以2步骤79%的收率得到标题化合物(589.5mg)。
[0382]
(步骤3)5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-甲酸的制造[化92]向步骤2中得到的5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-甲酸苯甲酯(589.5mg)的乙酸乙酯(5.90ml)溶液中，在氩气氛围下在室温下添加5重量%钯碳(88mg)。将该反应混合液在1大气压氢气氛围下在室温下进行2小时搅拌。设为氮气氛围下后，将该反应液中的钯碳通过硅藻土滤去。将所使用的硅藻土用乙酸乙酯/甲醇(9/1)混合液洗涤。合并所得滤液，浓缩。向该残渣中添加甲苯，浓缩。将该残渣在室温下减压干燥，由此以89%的收率得到标题化合物(425.9mg)。
[0383]
(步骤4)(5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-基)氨基甲酸叔丁酯的制造[化93]
向步骤3中得到的5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-甲酸(425.9mg)和三乙基胺(0.370ml)的叔丁醇(4.26ml)/甲苯(8.52ml)溶液中，在氩气氛围下在室温下添加叠氮磷酸二苯酯(0.286ml)。将该反应混合液在110℃下进行14小时50分钟搅拌。将该反应混合液冷却至室温，浓缩。向该残渣中添加水，用乙酸乙酯萃取。将所得有机层用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。向该残渣中在室温下添加正己烷/乙酸乙酯(1/1)混合液。将该悬浮液在室温下搅拌。滤取不溶物，用正己烷/乙酸乙酯(1/1)混合液洗涤。合并所得滤液，浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=90/10至69/31)精制，由此以41%的收率得到标题化合物(207.4mg)。
[0384]
(步骤5)5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-胺的制造[化94]向步骤4中得到的(5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-基)氨基甲酸叔丁酯(207.4mg)中，在氩气氛围下在室温下添加三氟乙酸(2.07ml)。将该反应混合液在室温下进行22小时40分钟搅拌。向该反应混合液中在0℃下添加水。向该混合液中在0℃下滴加8n氢氧化钠水溶液(约3.36ml)。向该混合液中在0℃下添加饱和碳酸氢钠水溶液。将该混合液用乙酸乙酯萃取。将所得有机层用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=64/36至43/57)精制，由此得到固体。向该固体中在室温下添加正己烷。将该悬浮液在室温下搅拌。从该悬浮液中滤取固体，用正己烷洗涤。将所得固体在60℃下减压干燥，由此以62%的收率得到标题化合物
(100.0mg；包含0.21重量%的乙酸乙酯)。
[0385]
(步骤6)((3r,4r)-n-(5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺的制造[化95]向步骤5中得到的5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-胺(38mg；包含0.21重量%的乙酸乙酯)和以与制造例3步骤6相同的方式得到的(3r,4r)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸(18.3mg)的吡啶(0.380ml)溶液中，在氩气氛围下在室温下添加wsc
·
hcl(24.5mg)。将该反应混合液在室温下进行2小时54分钟搅拌。向该反应混合液中在室温下添加以与制造例3步骤6相同的方式得到的(3r,4r)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸(18mg)和wsc
·
hcl(25mg)。将该反应混合液在室温下搅拌过夜。向该反应混合液中在室温下添加10重量%的柠檬酸水溶液，用乙酸乙酯萃取。将所得有机层用水和饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。将该残渣用硅胶薄层色谱(洗脱溶剂：乙酸乙酯/甲醇=97/3)精制，由此得到标题化合物。向该标题化合物中在室温下添加正己烷/乙酸乙酯的混合液。将该悬浮液在室温下搅拌。从该悬浮液中滤取固体，用正己烷洗涤。将所得固体在70℃下减压干燥，由此以87%的收率得到标题化合物(46.6mg；包含3.5重量%的正己烷)。
[0386]
[实施例4]((3r,4r)-n-(5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺的一水合物的制造[化96]向((3r,4r)-n-(5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-氟吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺(200mg)中添加乙醇(0.6ml)，在60℃下加热，制成溶液。将该溶液冷却至室温。向该溶液中，在室温下滴加水(1.2ml)，进行4小时搅拌。滤取析出的固体，用乙醇/水(=1/2)混合液洗涤。将所得固体在40℃下减压干燥，由此以92%的收率得到标题化合物(192mg)。
[0387]
元素分析计算值：c 50.51wt%, h 3.63wt%, n 14.02wt%实测值：c 50.61wt%, h 3.46wt%, n 13.95wt%。
[0388]
[实施例5]((3r,4r)-n-(5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺的合成[化97](步骤1)5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-甲酸苯甲酯的制造[化98]向实施例3步骤1中得到的4-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-2,4-二氧代丁酸苯甲酯的粗精制物(800mg)的乙酸(6ml)溶液中，在氩气氛围下在室温下添加制造例5步骤1中得到的3-肼基-5-(三氟甲基)吡啶(304mg)。将该反应混合液在100℃下进行22小时30分钟搅拌。将该反应混合液冷却至室温，浓缩。向该残渣中添加甲苯，浓缩。再次进行该操作。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=97/3至70/30)精制，由此以2步骤78%的收率得到标题化合物(640mg)。
[0389]
(步骤2)5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-甲酸的制造[化99]
向步骤1中得到的5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-甲酸苯甲酯(640mg)的乙酸乙酯(6.4ml)溶液中，在室温下添加5重量%钯碳(32mg)。将该反应混合液在1大气压氢气氛围下进行2小时搅拌。制成氮气氛围下后，向该反应混合液中添加thf。将该反应液中的钯碳通过硅藻土滤去。将所使用的硅藻土用thf洗涤。合并所得滤液，浓缩。向该残渣中添加正己烷，浓缩。再次进行该作业。将该残渣在室温下减压干燥，由此得到标题化合物(525mg)的粗精制物。
[0390]
(步骤3)(5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-基)氨基甲酸叔丁酯的制造[化100]向步骤2中得到的5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-甲酸的粗精制物(525mg)和三乙基胺(0.403ml)的叔丁醇(5ml)/甲苯(10ml)溶液中，在氩气氛围下在室温下添加叠氮磷酸二苯酯(0.311ml)。将该反应混合液在100℃下进行16小时搅拌。将该反应混合液冷却至室温，浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=97/3至70/30)精制，由此以2步骤68%的收率得到标题化合物(420mg)。标题化合物的生成通过薄层色谱确认(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=4/1、rf值：0.46)。
[0391]
(步骤4)5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-胺的制造[化101]
向步骤3中得到的(5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-基)氨基甲酸叔丁酯(420mg)中，在室温下添加三氟乙酸(3ml)。将该反应混合液在室温下进行1小时30分钟搅拌。将该反应混合液浓缩。向该残渣中添加甲苯，浓缩。再次进行该作业。向该残渣中添加乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液。将该混合液分层。将所得有机层用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。将该残渣用硅胶柱色谱(洗脱溶剂：正己烷/乙酸乙酯=92/8至20/80)精制，由此以93%的收率得到标题化合物(313mg)。
[0392]
(步骤5)((3r,4r)-n-(5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-基)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酰胺的制造[化102]向步骤4中得到的5-(3-氟-5-(三氟甲氧基)苯基)-1-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1h-吡唑-3-胺(60mg)和以与制造例3步骤6相同的方式得到的(3r,4r)-4-甲基-5-氧代吡咯烷-3-甲酸(23.3mg)的吡啶(1ml)溶液中，在室温下添加wsc
·
hcl(31.1mg)。将该反应混合液在室温下进行15小时30分钟搅拌。向该反应混合液中在室温下添加水和乙酸乙酯。将该混合液分层。将所得有机层用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩。向该残渣中添加甲苯，浓缩。再次进行该作业。将该残渣用硅胶薄层色谱(洗脱溶剂：乙酸乙酯)精制，由此以96%的收率得到标题化合物(75mg)。
[0393]
通过与上述一般制造方法、制造例和实施例相同的方法，此外根据需要使用其他的公知的方法，由此得到其他的实施例的化合物。实施例1至40的化合物的结构式和物性数据示于以下的表。
[0394]
[参考例]下表所示的化合物a至h基于国际公开第2013/031922号公报的记载而得到。
[0395]
下表所示的代谢物1、3和5(实施例1、3和5的化合物的代谢物)和代谢物c至h(化合物c至h的代谢物)分别基于上述实施例和国际公开第2013/031922号公报的记载而得到。
[0396]
[试验例1]sglt1抑制活性的评价受试化合物的sglt1抑制活性(ic
50
值)以通过sglt1输运的α-甲基-d-吡喃葡萄糖苷的标记体(
14
c-amg)的细胞内摄取量为基础而算出。
[0397]
1)人sglt1表达质粒的构建以pcmv6-hsglt1(origene公司)为模板，在源自载体的kozac共有序列前附加nhei识别剪切序列，在紧接人sglt1的蛋白质翻译区域之后附加终止密码子tag和sali识别剪切序列，将包含人sglt1的dna片段通过pcr(聚合酶链式反应)扩增。将精制的dna片段用限制酶nhei和sali消化后，与用nhei和xhoi消化的pcdna3.1( )连结，构建人sglt1表达质粒pcdna-hsglt1。向载体中插入的人sglt1的碱基序列与genbank登记的人sglt1序列(accession number nm_000343)的蛋白质翻译区域完全一致，此外，与载体连接的部分的序列也符合预期。
[0398]
2)人sglt1稳定表达细胞株的确立将人sglt表达质粒pcdna-hsglt1分别使用lipofectamine2000(invitrogen公司)转染至cho-k1细胞中，在g418(nacalai tesque)存在下挑选耐药性细胞株。从所得耐药性细胞株中，挑选每个细胞的
14
c-amg摄取量与添加作为sglt抑制剂的根皮苷时的
14
c-amg摄
取量的比(s/b比)最高的细胞株作为人sglt1稳定表达细胞株。
[0399]
3)sglt1抑制活性的评价将人sglt1稳定表达细胞株在biocoat
tm 聚-d-赖氨酸带盖96孔板(becton,dickinson and company公司)中以5
×
104个细胞/孔接种，在37℃、5%co2下培养过夜。将培养基交换为100μl/孔的na(-)缓冲液(140mm胆碱氯化物、2mm kcl、1mm mgcl2、1mm cacl2、10mm hepes、5mm tris、ph7.4)，在37℃、5%co2下静置20分钟。去除na(-)缓冲液后，以40μl/孔添加使用包含bsa的na( )缓冲液(140mm nacl、2mm kcl、1mm mgcl2、1mm cacl2、10mm hepes、5mm tris、ph7.4)制备的受试化合物溶液。进一步，以40μl/孔添加并混合包含8kbq的
14
c-amg和2mm amg的na( )缓冲液。向空白中以40μl/孔添加包含bsa的na(-)缓冲液，进一步以40μl/孔添加并混合包含8kbq的
14
c-amg和2mm amg的na(-)缓冲液。在37℃、5%co2下静置1小时后，用100μl/孔的冰冷的洗涤缓冲液(100mm amg、140mm胆碱氯化物、2mm kcl、1mm mgcl2、1mm cacl2、10mm hepes、5mm tris、ph7.4)将细胞洗涤2次，停止反应。添加50μl/孔的0.2n naoh水溶液，制备细胞裂解液。
14
c-amg的摄取能力评价中，向以100μl/孔分注microscint-40(perkin-elmer公司)的optiplate96(perkin-elmer公司)中转移细胞裂解液全量，用topcount nxt(perkin-elmer公司)测定
14
c的cpm。
[0400]
从进行了各处置的孔的cpm的平均值减去空白孔的cpm的平均值的值作为数据。受试化合物的各浓度的抑制率由以下的式算出：[(a-b)/a]
×
100(式中，a表示溶剂对照的数据，b表示用受试化合物处置了的数据)受试化合物的ic
50
值(50%抑制浓度)由夹着抑制率50%的2点浓度与其抑制率算出。通过本试验，确认化合物1具有sglt1抑制活性。针对其他实施例化合物也进行本试验。结果示于以下的表。
[0401]
[试验例2]ogtt(口服葡萄糖耐量试验)对禁食约4小时的雄性sd大鼠(8周龄、日本charles river 株式会社)(各组6例)，以5ml/kg口服给与溶媒(0.5%甲基纤维素液)或悬浮在0.5%甲基纤维素液中的化合物1(1、3或10mg/kg)。16小时后，以5ml/kg口服给与0.4g/ml的葡萄糖溶液，由此加载葡萄糖。即将加载葡萄糖之前、加载后30分钟、加载后60分钟和加载后120分钟，从尾静脉采血，使用生物化学自动分析装置(hitachi、型号7180)，测定血糖值。
[0402]
结果示于图1。数据表示相对于溶媒组的化合物给与组的至加载葡萄糖后120分钟的血糖值的曲线下面积(δauc)的比例(% of vehicle)的平均值
±
标准偏差。统计分析进行steel的多重检验。显著水平设为两侧5%。其结果是，化合物1与溶媒相比，显著降低了加载葡萄糖后的血糖值。
[0403]
[试验例3]ogtt(口服葡萄糖耐量试验)对禁食约4小时的雄性sd大鼠(8周龄、日本charles river 株式会社)(各组5例)，以5ml/kg口服给与溶媒(0.5%甲基纤维素液)、或悬浮在0.5%甲基纤维素液中的化合物1、化合物a或化合物b(各3mg/kg)。16小时后，以5ml/kg口服给与0.4g/ml的葡萄糖溶液，由此加载葡萄糖。即将加载葡萄糖之前、加载后30分钟、加载后60分钟和加载后120分钟，从尾静脉采血，使用生物化学自动分析装置(hitachi、型号7180)测定血糖值。
[0404]
结果示于图2。数据表示相对于溶媒组的化合物给与组的至加载葡萄糖后120分钟的血糖值的曲线下面积(δauc)的比例(% of vehicle)的平均值
±
标准偏差。统计分析进行dunnett的多重组检验。显著水平设为两侧5%。其结果是，化合物1与溶媒相比，显著降低了加载葡萄糖后的血糖值。
[0405]
[试验例4]ames试验(回复突变试验)代谢物1、3和5和代谢物c至h如下所述试验。本试验的目的在于，针对各代谢物，评价在鼠伤寒沙门菌(ta98、ta1537、ta100和ta1535)和大肠杆菌(wp2uvra)的标准菌株中存在或不存在大鼠肝代谢活化系统(s9 mix)的回复突变诱发能力的有无。
[0406]
本试验中，使用二甲基亚砜(dmso,100μl/板)作为溶剂。
[0407]
在s9 mix的存在下或不存在下，使用预温育法进行试验。在不存在s9 mix的试验中，添加磷酸钠缓冲液(ph7.4)。
[0408]
将s9 mix 0.5ml或0.1mol/l磷酸钠缓冲液(ph7.4)0.5ml和菌培养液0.1ml添加至包含阴性对照物质(仅dmso)0.1ml、代谢物或阳性对照物质的试验管中。将该混合物在37℃下进行20分钟振荡的同时进行预温育。预温育后，添加上层琼脂2ml，将混合物用涡旋混合机混合，接种至板上。各处理使用2个板。将各板在37
±
1℃下温育48小时以上，对回复突变菌落计数。接着，算出各处理板的回复突变菌落的平均数。用肉眼或实体显微镜观察基于受试化合物的抗菌作用的生长抑制和受试化合物的析出的有无。平均回复突变菌落数为1以上的用量下示出大于阴性对照的2倍的用量依赖性增加的情况下，结果判断为阳性。不使用统计比较，基于平均值评价。
[0409]
本试验的结果示于以下的表。作为结果，代谢物1、3和5在任一试验菌株中均未示出回复突变诱发能力，与此相对地，代谢物c至h在存在和/或不存在s9 mix的情况下，至少一个试验菌株示出回复突变诱发能力。具体而言，说明如下。
[0410]
代谢物c在存在s9 mix的ta98和在存在s9 mix的ta100的试验菌株中，示出回复突变诱发能力。
[0411]
代谢物d在存在s9 mix的ta98和ta1537的试验菌株中示出回复突变诱发能力。
[0412]
代谢物e在存在s9 mix的ta98、ta1537、ta100和ta1535的试验菌株、以及在不存在s9 mix的ta1537的试验菌株中示出回复突变诱发能力。
[0413]
代谢物f在存在s9 mix的ta98、ta1537和ta100的试验菌株、以及在不存在s9 mix下的wp2uvra的试验菌株中，示出回复突变诱发能力。
[0414]
代谢物g在存在s9 mix的ta100的试验菌株、以及在不存在s9 mix的ta1535的试验菌株中，示出回复突变诱发能力。
[0415]
代谢物h在存在s9 mix的ta98、ta1537和ta100的试验菌株中，示出回复突变诱发能力。
[0416]
[试验例5]ogtt(口服葡萄糖耐量试验)中的与sglt2抑制药的联用效果使用禁食一夜的雄性zucker fatty大鼠(7周龄,日本charles river 株式会社)，以血糖值和体重为指标进行分组(各组8例)。分组后，以5ml/kg口服给与溶媒(0.5%甲基纤维素液)、仅化合物1(1mg/kg)、仅达格列净(3mg/kg)或化合物1和达格列净的组合。4小时
后，以5ml/kg口服给与0.4g/ml的葡萄糖溶液，由此加载葡萄糖。即将加载葡萄糖之前、加载后30分钟、加载后60分钟、加载后120分钟和加载后240分钟，从尾静脉采血。使用生物化学自动分析装置(hitachi,型式7180)测定血糖值。
[0417]
结果用血糖值的推移、加载葡萄糖后30分钟值和加载葡萄糖后60分钟值表示。统计分析进行tukey-kramer的多组检验。显著水平设为两侧5%。其结果是，化合物1与达格列净的联用与各单剂相比，显著降低血糖值。结果示于图3至5。
[0418]
[试验例6]ogtt(口服葡萄糖耐量试验)中的与dpp4抑制药的联用效果使用禁食一夜的雄性zucker fatty大鼠(8周龄,日本charles river 株式会社)，以血糖值和体重为指标进行分组(各组8例)。分组后，以5ml/kg口服给与溶媒(0.5%甲基纤维素液)、仅化合物1(1mg/kg,加载葡萄糖4小时前)、仅西格列汀(3mg/kg,加载葡萄糖30分钟前)或化合物1和西格列汀的组合。其后，以5ml/kg口服给与0.4g/ml的葡萄糖溶液，由此加载葡萄糖。即将加载葡萄糖之前、加载后30分钟、加载后60分钟和加载后120分钟，从尾静脉采血。使用生物化学自动分析装置(hitachi,型式7180)，测定血糖值。使用glp-1 assay kit(ibl,#27700)，测定活性型glp-1。
[0419]
结果关于血糖值，用推移和加载葡萄糖后30分钟值表示。关于活性型glp-1，用推移和浓度auc表示。统计分析关于血糖值的加载葡萄糖后30分钟值和活性型glp-1的浓度auc，进行steel dwass的多组检验。显著水平设为两侧5%。其结果是，化合物1与西格列汀的联用与各单剂相比，显著降低血糖值(图6和7)。此外，化合物1与西格列汀的联用使血浆中活性型glp-1浓度大幅增加(图8和9)。
[0420]
[制剂例]作为式[i]的化合物的制剂例，可以举出例如下述的制剂配方，但不因此受到限定。
[0421]
制剂例1(胶囊的制造)(1)化合物1
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30mg(2)微晶纤维素
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10mg(3)乳糖
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19mg(4)硬脂酸镁
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1mg将成分(1)、(2)、(3)和(4)混合，填充在明胶胶囊中。
[0422]
制剂例2(片剂的制造)(1)化合物1
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10g(2)乳糖
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50g(3)玉米淀粉
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15g(4)羧甲基纤维素钙
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44g(5)硬脂酸镁
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
1g将成分(1)、(2)、(3)的全量和30g的成分(4)用水炼合，真空干燥后，进行整粒。向该整粒末中混合14g的成分(4)和1g的成分(5)，通过压片机压片。以这样的方式，得到平均1片含有10mg化合物1的片剂1000片。
[0423]
工业实用性
sglt1抑制剂与选自sglt2抑制剂和dpp4抑制剂中的至少1种药剂的联用期待在通过调节这些活性而期待改善的各种疾病或状态、或因体内的糖吸收而导致血糖值变高所能引起的各种疾病或状态的治疗和/或预防中是有用的。